真菌的组织病理学特殊染色

真菌的组织病理学特殊染色

马天;宋月星;邹先彪

【摘要】Histological evaluation is quick and easy for pathogen identification and diagnosis in fungal infections. Some common special stains and application will be discussed in this paper.%组织学检查是一种识别真菌快速、简便的方法.本文介绍真菌病的病理学诊断中最常见的特殊染色方法及应用范围.

【期刊名称】《中国真菌学杂志》

【年(卷),期】2011(006)006

【总页数】3页(P367-369)

【关键词】特殊染色;真菌病;组织病理学

【作者】马天;宋月星;邹先彪

【作者单位】解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048;解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048;解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048【正文语种】中文

【中图分类】R446.83

组织学检查是识别真菌的一种快速、简便的方法。炎性肉芽肿和风湿性肉芽肿的组织学评价必须包含特殊染色以确定或排除真菌和抗酸细菌的存在。在病理学日常实践和工作中，Gomori六胺银染色 (Gomori＇s methenamine silver stain，

GMS)和糖原染色(Periodic acid-Schiff stain，PAS)是两种较常见的寻找组织和细胞样本中真菌的染色方法。真菌在组织切片中的存在是侵袭性感染的有力证据。在细胞学标本中，真菌可以通过它的大小和特殊的形态得到鉴定。但由于其多样性，仅仅使用一些常规的染色很难在组织切片中发现或鉴别真菌。

1 广谱真菌染色

苏木精-伊红染色 (Hematoxylin-eosin stain，HE)是一种多用途的染色方法 (见图1)。但诊断真菌病仅仅使用HE染色常常是不够的，即使在高倍镜下，也很难从组织中区分出被染色的病原菌。当HE染色切片中的真菌稀少时，很容易被忽略。有些真菌的形态特征可能不显明，有时甚至会误诊。如组织胞浆菌、皮炎芽生菌以及巴西副球孢子菌在切片中可能含有胞质，使形态鉴定变得很困难。一些真菌变种可能有不同的大小，像大形状的变种(非洲)组织胞浆菌和小形状的芽生菌。一些双相型的真菌可以在组织中形成假菌丝。有时真菌形态可以在治疗后发生改变。因此，对于无法解释的炎症过程的组织病理学检查，特殊染色是十分必要的［1-2］。用常见的特殊染色方法可以轻而易举地显示出绝大多数真菌，因此，GMS、Gridley＇s真菌(Gridley＇s fungus，GF)染色和 PAS 染色也被作为“广谱”真菌染色剂。GF染色原理与PAS染色原理基本相同，都是因真菌细胞壁由糖类构成而成阳性反应，只是以铬酸而非过碘酸氧化。GMS比较适合用来初筛，因为即使是对变性的、无法用另外两种染色法识别的真菌，它都能提供更好的对照(见图2)。

GMS和GF染色的缺点是他们掩盖了被染色真菌的天然色素，无法确定他们是无

色透明的还是暗色真菌(色素)，从而无法对真菌病如暗色丝孢霉病做出确定的组织学诊断［3］。除 PAS反应，GMS和GF染色都无法显示真菌侵袭的炎症反应。

为了解决这个问题，GMS同时可进行HE复染来确定真菌及宿主反应。岑玉兰等［4］对25例肺隐球菌病患者的观察中，GMS显示菌体荚膜呈黑色，其检出率为100%。GMS也可以染藻类 (原壁菌属和小球藻属)、肺囊虫的包囊 (见图3)、致病

性阿米巴、大多数微孢子虫的孢壁、胞浆内颗粒、以色列放线菌和相关的菌属、诺卡氏菌、大多数结核分枝杆菌属、具有多糖荚膜的非线状菌如肺炎克雷伯菌和肺炎链球菌。而确定变性的真菌成分 (如肉芽肿内酵母组织胞浆菌)的存在需要延时硝酸银染色。

在真菌的筛选中，PAS染色与GMS同样有效。实际上它对真菌形态的显示比银染好。而PAS染色可以染色变性的真菌成分在HE染色中则可能无法显色。

干酪性肉芽肿中的钙化组织可通过PAS染色被发现，但它可能被误认为是酵母样真菌的出芽酵母、荚膜或者增厚的细胞壁。GMS和GF染色是避免误诊最好的染色方法，因为铬酸作为氧化剂可以在染色过程中溶解钙，留下未染色的钙化体。相反，GMS和 GF染色中可见的微小真菌在 PAS染色中不会出现，因此，GMS和PAS染色的联合使用可以降低假阳性率。

2 窄谱真菌染色

真菌的鉴别诊断，可能需要额外的特殊染色，使某些真菌结构染色而其他的成分不染色，这些方法被称为“窄谱”真菌染色［5-6］。如粘蛋白染色包括阿辛蓝(alcian blue)、Mayer＇s胭脂红染色或Southgate胭脂红染色 (Southgate＇s mucicarmine stain)等可以轻易鉴别新生隐球菌黏液囊 (见图4～5)。

这种染色方法可以将隐球菌与其他形态类似的真菌区别开，如粗球孢子菌、念珠菌和组织胞浆。这些粘蛋白染色并非新生隐球菌的特异性染色，如皮炎芽生菌和西伯鼻孢子菌的细胞壁往往可被粘蛋白染剂不同程度地染色。然而，这两种真菌都无包膜，且形态各异，因此通常不会被误认为是隐球菌。在某些情况下，组织切片中无囊体的隐球菌可能不会被粘蛋白胭脂红完全染色，但新生隐球菌的细胞壁含有可能是黑色素前体的还原银的物质，它可以被黑素颗粒染剂的银染色［7-8］。这种染剂尤其对具有以下两个特征的隐球菌有效，即以无包囊侵袭性的酵母菌型存在的，也就是所谓的干性变种。这种隐球菌可能与具有相似形态的无囊体酵母菌混淆。在

组织切片中，Fontana-Masson法和Lillie＇s硫酸铁染色也可以用来定位和加强

组织中细胞壁含黑色素和黑色素样染色不良的皮肤暗色丝孢霉［9］。同时，PAS

也可以当作窄谱染剂使用，例如，在对出芽的小酵母菌型不同的鉴别诊断中，一个弱PAS和一个强CMS染色支持组织胞浆菌的诊断，因为用PAS染色时，念珠菌、芽生菌的微缩型、马拉色菌的酵母型(见图6)的后壁会被染色。

另一种窄谱真菌染色是Ziehl-Neelson染色。一项研究表明，使用ZN染色，60%的皮炎芽生菌和47%的组织胞浆菌生物(见图7)呈酵母菌样细胞的胞质阳性染色。染色阴性主要出现在隐球菌或念珠菌，抗酸染色法很难用在内生芽孢［10］染色。自体荧光某些真菌或在HE染色组织切片时，萤光真菌成分在紫外线光源下［11］可见自体荧光。念珠菌属、粗球孢子菌属和曲霉菌属能表现出亮绿色到黄绿色荧光［12］。当这些真菌组织切片被PAS染色 (见图8)时可以在深橘红色背景中观察

到明亮的黄色荧光［10］。自体荧光可以帮助诊断少量的或在HE染色中染色不佳部分真菌，但这一表现不稳定，不应作为最终诊断。大多数在冷冻或石蜡包埋组织切片中的真菌被Calcofluor white(一种在紫外灯下发棉白色荧光的染色剂)非特异性染色［13］。这种快速和简单的荧光染色经常用于新鲜冰冻组织的真菌检查中。免疫组化染色可用于鉴别涂片标本和福尔马林固定标本，石蜡包埋组织中的某些真菌。但是，这种技术只能局限性地应用于诊断中［14］。

3 直接免疫荧光

直接免疫荧光 (immunofluoresence，IF)可提高［15］常规病理组织诊断在真菌

疾病诊断中的作用。直接免疫荧光可以用于涂片标本和福尔马林固定石蜡包埋组织切片的定性诊断，尤其是当新鲜组织无法进行真菌培养或发现非特异性图像时。亚特兰大(美国)真菌性疾病机构、疾病控制中心和其他有组织都拥有很多对常见致病真菌的诊断兼具敏感性和特异性的试剂。

免疫荧光方法有几个优点，待鉴别的真菌在HE染色和GMS染色切片后，初步鉴

定可能在数小时内完成。免疫荧光可以省时省力，在处理潜在感染材料时，在荧光染色前微生物在福尔马林中被灭活，可以减少微生物的感染风险，避免污染。福尔马林固定的组织，无论是湿组织或石蜡包埋，长期储存不会影响真菌抗原性。石蜡包埋组织抗原性稳定，这可以保证在回顾性研究中或将标本远途运送至认证实验室后，其鉴定依然准确。大部分临床实验室不经常使用免疫荧光法，因为特殊的着色剂对日常病理诊断已经非常可靠了。

图1 曲霉的HE染色［16］图2 曲霉的GMS染色［16］图3 肺囊虫的GSM染色［16］图4 隐球菌的阿辛蓝染色［16］图5 隐球菌的PAS染色(×1 000)［17］图6 PAS染色下的马拉色菌属［16］图7 ZN染色下的组织胞浆菌属［16］图8 PAS染色下的组织胞浆菌属(×400)［17］Fig.1 Hematoxylin and Eosin staining of Aspergillus Fig.2 GMS staining of Aspergillus Fig.3 GMS staining of Pneumocystis jirovici Fig.4 Alcian Blue staining of Cryptococcus Fig.5 PAS staining of Cryptococcus Fig.6 PAS staining of Malassezia Fig.7 ZN staining of Histoplasma Fig.8 PAS staining of Histoplasma

参考文献

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病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

结缔组织染色法 1.1 Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞 图表A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则

1.2. Masson三色染色法 绿色：胶原纤维 红色：肌纤维 橘红色：红细胞 图吕纤维肉瘤 Masson法：胶丿京纤维呈绿色，肌纤维呈红色，红细胞呈黄色。3. 3X 10 图表B 1.2 Mssson三色法 图表C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌

1.3.显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法 红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞 图14 子宫组织 Weigert间苯二酚法*胶原纤维呈红色，血管壁弹力纤维呈蓝黑色，肌肉呈黄色° 3, 3X10 图表D 4.Weigert间苯二酚法

、胶原纤维染色法 2.2. Van Gieson (V.G)苦味酸-酸性品红法 鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核 图5 卵巢组织 Van Gieson苏木嘉法^胶原纤维呈红色円血簣壁肌层呈黄色，细胞核是照色。3. 3X 1CI 图表E 2?胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞myocardial infarction :心肌梗塞后2个月，van Gieson染色,坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法（参照上图） 红色：胶原纤维 绿色：细胞核 黄色：其他天狼星红苦味酸染色法：（偏光显微镜）I型：强双折光性，呈黄色或红色纤维n型：弱双折光，呈多种色彩疏网状分布川型：弱双折光，呈绿色的细纤维w型：弱双折光的基膜，呈淡黄色

特殊染色

字号：大中小第一节结缔组织和肌纤维染色 Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法) 用途：VG法用于区分胶原纤维和肌纤维。 原理：酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力，结果胶原纤维被酸性复红染成红色，肌肉被苦味酸染成黄色。此方法是一种优良的传统方法。 固定：10%福尔马林 切片：4-6微米 试剂： Weigert铁苏木精液： A液：苏木精1g，无水酒精100 ml。一般配制后需要数周或数月自然氧化，成熟后使用。B液：29%三氯化铁水溶液4 ml，蒸馏水95 ml，盐酸1 ml。 两液分别配制，临用时A、B液等量混合，过滤后使用。24h后失去染色能力。 Van Gieson液： 1%酸性复红水溶液10 ml 苦味酸饱和水溶液90 ml 临用时1:9混合过虑后使用。 Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)步骤： 1．石蜡切片脱蜡至水。

2．Weigert苏木精液5-10 min。 3．充分水洗。 4．Van Gieson液1-5 min。 5．95%酒精迅速分化数秒。 6．无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。 结果：胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色。体会与说明：由于酸性复红退色较快，染色结果不能长期保存，一般只能保存3～6个月。 二Masson三色法 试剂： Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。 将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。 Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。 0.2%冰醋酸水溶液：冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。 1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。 苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。 1%光绿水溶液：光绿1g，蒸馏水100 ml。 Masson三色法步骤 1．石蜡切片脱蜡至水。 2．铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。

真菌的组织病理学特殊染色

真菌的组织病理学特殊染色 马天;宋月星;邹先彪 【摘要】Histological evaluation is quick and easy for pathogen identification and diagnosis in fungal infections. Some common special stains and application will be discussed in this paper.%组织学检查是一种识别真菌快速、简便的方法.本文介绍真菌病的病理学诊断中最常见的特殊染色方法及应用范围. 【期刊名称】《中国真菌学杂志》 【年(卷),期】2011(006)006 【总页数】3页(P367-369) 【关键词】特殊染色;真菌病;组织病理学 【作者】马天;宋月星;邹先彪 【作者单位】解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048;解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048;解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048【正文语种】中文 【中图分类】R446.83 组织学检查是识别真菌的一种快速、简便的方法。炎性肉芽肿和风湿性肉芽肿的组织学评价必须包含特殊染色以确定或排除真菌和抗酸细菌的存在。在病理学日常实践和工作中，Gomori六胺银染色 (Gomori＇s methenamine silver stain，

GMS)和糖原染色(Periodic acid-Schiff stain，PAS)是两种较常见的寻找组织和细胞样本中真菌的染色方法。真菌在组织切片中的存在是侵袭性感染的有力证据。在细胞学标本中，真菌可以通过它的大小和特殊的形态得到鉴定。但由于其多样性，仅仅使用一些常规的染色很难在组织切片中发现或鉴别真菌。 1 广谱真菌染色 苏木精-伊红染色 (Hematoxylin-eosin stain，HE)是一种多用途的染色方法 (见图1)。但诊断真菌病仅仅使用HE染色常常是不够的，即使在高倍镜下，也很难从组织中区分出被染色的病原菌。当HE染色切片中的真菌稀少时，很容易被忽略。有些真菌的形态特征可能不显明，有时甚至会误诊。如组织胞浆菌、皮炎芽生菌以及巴西副球孢子菌在切片中可能含有胞质，使形态鉴定变得很困难。一些真菌变种可能有不同的大小，像大形状的变种(非洲)组织胞浆菌和小形状的芽生菌。一些双相型的真菌可以在组织中形成假菌丝。有时真菌形态可以在治疗后发生改变。因此，对于无法解释的炎症过程的组织病理学检查，特殊染色是十分必要的［1-2］。用常见的特殊染色方法可以轻而易举地显示出绝大多数真菌，因此，GMS、Gridley＇s真菌(Gridley＇s fungus，GF)染色和 PAS 染色也被作为“广谱”真菌染色剂。GF染色原理与PAS染色原理基本相同，都是因真菌细胞壁由糖类构成而成阳性反应，只是以铬酸而非过碘酸氧化。GMS比较适合用来初筛，因为即使是对变性的、无法用另外两种染色法识别的真菌，它都能提供更好的对照(见图2)。 GMS和GF染色的缺点是他们掩盖了被染色真菌的天然色素，无法确定他们是无 色透明的还是暗色真菌(色素)，从而无法对真菌病如暗色丝孢霉病做出确定的组织学诊断［3］。除 PAS反应，GMS和GF染色都无法显示真菌侵袭的炎症反应。 为了解决这个问题，GMS同时可进行HE复染来确定真菌及宿主反应。岑玉兰等［4］对25例肺隐球菌病患者的观察中，GMS显示菌体荚膜呈黑色，其检出率为100%。GMS也可以染藻类 (原壁菌属和小球藻属)、肺囊虫的包囊 (见图3)、致病

病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)

结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维 淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质 红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒 橘红色：髓鞘、红细胞 图表A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则

1.2. Masson三色染色法 绿色：胶原纤维 红色：肌纤维 橘红色：红细胞 图表B 1.2 Mssson三色法 图表C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌

1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞 图表D 4.Weigert间苯二酚法

二、胶原纤维染色法 2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法 鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核 图表E 2.胶原纤维，Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。

2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图)红色：胶原纤维 绿色：细胞核 黄色：其他

3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维 红色：胞核（核固红复染） 黄棕色：胶原纤维 淡红色：细胞质（红液复染） 图表F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法 3.2 Gomori氏银氨液配制法 图表G Gomori氏银氨液配制法

真菌染色

最近在看关于真菌的染色方面的资料，现在总结一下发出来，大家共同学习一下。 一、背景介绍 真菌属于真核生物，没有质体，营养方式为吸收，无吞噬作用。细胞壁含有甲壳质和β-葡聚糖。可引起人类，动物的疾病，称为真菌病，还可引起植物的疾病、人类过敏性疾病和真菌毒素中毒症。真菌侵犯人体常继发于其他疾患，如恶性肿瘤、糖尿病等慢性消耗性疾病；大剤量X线照射；免疫抑制剂等导致免疫功能和抵抗力低下；大量应用肾上腺皮质激素的病人，其炎症反应多受抑制，也容易感染真菌；另外器官移植、导管插管、放疗等应用引起局部组织损伤，为真菌的入侵提供了条件．近年来由于免疫缺陷病毒感染者的不断出现，使原来不致病的真菌转为致病真菌。因此，真菌感染已经成为一个日益严峻的问题。 真菌分为浅部真菌和深部真菌。浅部真菌：主要侵犯机体皮肤，寄生和腐生于表皮，毛发和甲板的角质组织中，引起浅部真菌病，简称癣病。临床最多见的浅部真菌病有：体癣、股癣、手癣和足癣。 深部真菌：指侵犯表皮以外组织和器官的病原菌和条件致病真菌.；按生物学性状的不同又分为：酵母型、酵母样型、丝状菌型、双相型。深部真菌常见的有：念珠菌，隐球菌，组织胞浆菌,马尔尼菲青霉菌，曲霉，毛霉菌,孢子菌丝等。 真菌的形态分单细胞和多细胞两种类型，单细胞真菌呈圆形或卵圆性，常见于酵母菌和酵母样菌；多细胞真菌多呈丝状，分枝交织成团，也称为丝状菌，即一般通称为霉菌。由菌丝和孢子构成。孢子是真菌的生殖结构，分为有性孢子和无性孢子。在适宜条件下，菌丝是由孢子生出芽管，逐渐延长呈丝状，生物学上把真菌的每一根细丝叫做菌丝。 二、常用检查方法

1、直接镜检：直接镜检的方法方便经济，可采用不染色的湿片如KOH涂片或乳酸酚棉蓝涂片。对浅表和皮下真菌感染最有帮助，一般在有菌部位发现大量真菌菌丝即可作出诊断，可在几分钟内完成，并且观察到的真菌形态可以提供有价值的临床信息。但是缺点在于阳性率较低，隐形结果也不能排除诊断。 2、真菌的染色方法： ①革兰染色：所有真菌真菌、放线菌均为革兰染色阳性，被染成蓝黑色。适用于酵母菌、孢子丝菌、组织胞浆菌及诺卡菌放线菌的感染。 ②吉姆萨染色可用于骨髓涂片和其他标本中荚膜组织胞浆菌和马内菲青霉的检测。用吉姆萨染色必须要有指控涂片。 ③PAS法：用高碘酸氧化真菌菌壁的多糖游离出醛基，后者与无色品红结合生成新的品红色复合物而被显色。 操作方法： (1) 切片脱蜡至水。 (2) 0.5%高碘酸氧化5-8分钟。 (3) 流水冲洗2分钟，再用蒸馏水洗。 (4) 入无色品红液于暗处并加盖作用10-20分钟。 (5) 0.5%偏重亚硫酸钠液滴洗2次，每次约1分钟。 (6) 流水冲洗5分钟。 (7) 0.2%亮绿水溶液复染。

病理学技术——特殊染色最全总结

结缔组织染色法 1.Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维 淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质 红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒 橘红色：髓鞘、红细胞 2.Masson三色染色法 绿色：胶原纤维 红色：肌纤维 橘红色：红细胞 3.显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法 红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞 胶原纤维染色法1.Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核 2.天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法 红色：胶原纤维 绿色：细胞核 黄色：其他 网状纤维染色Gordon-Sweets银氨染色法 黑色：网状纤维 红色：胞核（核固红复染） 黄棕色：胶原纤维 淡红色：细胞质（红液复染）

弹性纤维染色 Gomori醛复红染色法 *甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳 显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维 红色：胶原纤维 黄色：背景 肌肉组织染色 △横纹肌组织染色 Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH） 蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌 黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨 微紫色：粗弹性纤维（有时） 紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌 △早期心肌病变组织染色 1.Nagar-Olsen染色法（1974年） 红色：缺氧心肌、红细胞 黄色或黄棕色：正常心肌 蓝色：细胞核 2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年） 红色：缺氧心肌 紫色：胞核 绿色：其他组织 糖类染色 过碘酸-Schiff（PAS）染色法 红色：糖原及其他PAS反应阳性物质 蓝色：细胞核 黏液物质（黏多糖）染色 1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）

病理学技能技术总结—特殊染色最最全总结(均配图)

精心整理结缔组织染色法 1.1Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维 淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质 红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒 橘红色：髓鞘、红细胞 图表错误！未指定顺序。 图表错误！未指定顺序。 1.3.显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法 红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞 图表错误！未指定顺序。4.Weigert间苯二酚法 二、胶原纤维染色法

2.2.VanGieson （V.G ）苦味酸-酸性品红法 鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核 图表错误！未指定顺序。2.胶原纤维，VanGieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞myocardialinfarction ：心肌梗塞后2个月，vanGieson 染色,坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。 2.1天狼星红（Siriusred ）苦味酸染色法(参照上图) 红色：胶原纤维 ：细胞核 黄色：其他 三、网状纤维染色 3.1Gordon-Sweets 银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝） 黑色：网状纤维 ：胞核（核固红复染） 红色：胶原纤维 黄色：背景 图表错误！未指定顺序。4.Weigert 间苯二酚法 六、肌肉组织染色 △ 横纹肌组织染色 Mallory 磷钨酸苏木精染色法（PTAH ） 天狼星红苦味酸染色法：（偏光显微镜） Ⅰ型：强双折光性，呈黄色或红色纤维 Ⅱ型：弱双折光，呈多种色彩疏网状分布 Ⅲ型：弱双折光，呈绿色的细纤维 Ⅳ型：弱双折光的基膜，呈淡黄色

蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨 微紫色：粗弹性纤维（有时） 紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌 图表错误！未指定顺序。6.1.磷钨酸苏木素法 图表错误！未指定顺序。6.1.磷钨酸苏木素染色液 △早期心肌病变组织染色 1.Nagar-Olsen染色法（1974年） 红色：缺氧心肌、红细胞

病理制片技术――常用特殊染色

病理制片技术――常用特殊染色 1．第一步准备工作：配制六胺银染液，将10％硝酸银2．5ml倒入干净的染色缸内，加入2％硼砂5ml，液体呈乳白色，再加入3％乌洛托品40ml，染液逐渐呈透明状。 2．第二步染色过程：事先把温箱调至60℃备用，切片经脱蜡至水，用1％过碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h，染真菌时间要相对 短一些，一般情况下肉眼看到染液变色，切片呈棕色时从温箱取出染色缸，倒掉染液，自来水冲洗1min，用0．25％氯化金调色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸钠染5 min,水洗，用苏木精染液浅染，水洗、分化、冲水返蓝，伊红染10 s，最后经脱水、透明、封固。 3．图示结果：基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色，核呈蓝色。 4．注葸事项 (1)掌握染色温度和时间，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。 (2)真菌类染色时间相对要短，染色时间过长，切片染色过深，可用分色剂处理。 二、黏液卡红染色 1．第一步准备工作：配制黏卡染液，将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内， 加入50％L醇100 rnl混合摇匀，再加入氯化铝0．5g，水浴加温逐渐煮沸并搅动液体，使其充分溶解(注意染液容易外溅)，数分钟后，染液由红色变成透明深紫红色，冷却后将液体倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，过滤，放人冰箱备用。

2．第二步染色方法：染液使用时原液与蒸馏水比例为1：4稀释.切片厚5 um，脱蜡至水，经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上，染液可以重复使用多次，但要适当延长染色时间．切片水洗后，脱水、透明、封固。 3．图示结果：黏液为红色，胞核为蓝色． 4．注意事项 (1)染液使用时比例为1份黏卡原液，4份蒸馏水。 (2)用酶消化对照染色特异性很大，消化时间为20 min。 (3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。 三、石碳酸品红染色 1．第一步准备工作 (1)配制盐基性品红饱和液：盐基性品红溶于乙醇内。 (2)配制石碳酸水溶液：将石碳酸结晶放入热水浴溶解后取5 ml与事先预热的蒸馏水95ml匀备用．(以上二种液体可单独保存)。 (3)石碳酸品红染液：取盐基性品红溶液10 ml与5％石碳酸水溶液90 ml混合，使用前过滤。

病理学技术特殊染色总结(微缩版)

病理学技术特殊染色总结 一、结缔组织染色法 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Mallory三色染色法 蓝色：胶原和网状纤维 淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质 红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞Masson三色染色法 绿色：胶原纤维 红色：肌纤维 蓝褐色：胞核 三联染色法 红色：胶原纤维 黑色：网状纤维 绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞 二、胶原纤维染色法 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞 蓝褐色：胞核天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法红色：胶原纤维 绿色：细胞核 黄色：其他 三、网状纤维染色 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）----------------------------------------------------------- 黑色：网状纤维 红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维 淡红色：细胞质（伊红复染）四、弹性纤维染色 Gomori醛复红染色法 *甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳 紫红色：弹性纤维 橘黄色：背景 五、弹性、胶原纤维的双重组合染色法 蓝绿色：弹性纤维 红色：胶原纤维 淡黄色：背景 六、肌肉组织染色 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------- △横纹肌组织染色 Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH） 蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌 黄色或玫红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨 微紫色：粗弹性纤维（有时） 紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌△早期心肌病变组织染色Nagar-Olsen染 色法（HBFP） 红色：缺氧心肌、红细胞 黄色或黄棕色：正常心肌 蓝色：细胞核 Poley显示缺氧心肌染色法 红色：缺氧心肌 紫色：胞核 绿色：其他组织 七、糖类染色 过碘酸-Schiff（PAS）染色法 红色：糖原及其他PAS反应阳性物质 蓝色：细胞核 八、黏液物质（黏多糖）染色 ----------------------------------------------------------------------------------------------------- Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（AB-PAS）染色法红色：中性黏液物质 蓝色：酸性黏液物质 紫红色：混合性黏液物质阿尔辛蓝（爱先蓝，PH 2.5）法 蓝色：含硫酸黏液物质 不着色或淡然：强硫酸化黏液物质 红色：胞核 阿尔辛蓝（爱先蓝，PH 1.0）法 蓝色：含硫酸黏液物质 不着色：非硫酸化酸性黏液物质 红色：胞核（如复染） 九、黑色素染色 ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Masson-Fontana黑色素银浸染色法 黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒 红色：胶原纤维 浅黄色：背景Lillie硫酸亚铁染色法 暗绿色：黑色素 浅绿或不着色：背景 黄色：肌纤维和背景 十、含铁血黄素染色 亚铁氰化钾法（Perls blue普鲁 士蓝显示三价铁） 蓝色：含铁血黄素 浅红色：其他组织 十一、胆色素染色 三氯醋酸染色法 绿色：胆色素 红色和黄色：其他（复染） 十二、脂褐素染色 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 三氯化铁-铁氰化钾法（非特异性） 暗蓝色：脂褐素 醛品红法（现配现用） 深紫色：脂褐素浅黄色：背景十三、脱色素染色 通常用来鉴定是否有黑色素存 在，3张连续石蜡切片，1张 HE，1黑色素染色，1张氧化漂 白脱色素 十四、纤维蛋白染色 Lendrum等MSB染色法 *本法的MSB指马休黄猩红蓝法 红色：纤维蛋白 紫色：陈旧性纤维蛋白 蓝色：细胞核 黄色：红细胞 Gram甲紫染色法 蓝黑色：纤维蛋白 红色：背景 十五、淀粉样物质染色 ----------------------------------------------------------------------------------------------------------- 刚果红染色法 红色：淀粉样物质 蓝色：细胞核 Jurgens甲紫染色法 红色或紫红色：淀粉样物质蓝色：细胞核十六、真菌染色 Grocott六胺银染色法 *真菌均被着色 黑褐色：菌丝和孢子 红色：细胞核 淡绿色：背景 高碘酸复红染色法 紫红色：真菌 浅黄色：红细胞 1

规范化特殊染色技术对肺真菌感染性疾病病理诊断的意义分析

规范化特殊染色技术对肺真菌感染性疾病病理诊断的意义分 析 摘要】目的：对规范化特殊染色技术对肺真菌感染性疾病病理诊断的意义进行 分析和探讨。方法：选取我院在近两年收治的最终确诊为肺真菌感染性疾病患者60例,进行HE染色、传统手工PAS染色法、传统手工六胺银染色法和全自动特殊 染色法染PAS和六胺银。将两种特殊方法进行规范化比较，分析观察镜下结果。 将最终病理诊断结果与临床初诊进行比较。结果：从肺真菌感染性疾病确诊率和 真菌分型率上来看，临床初步诊断准确率最低，其次是HE染色法，再次是HE染 色联合传统手工特殊染色法染PAS和六胺银，最高的是HE染色联合全自动特殊 染色法染PAS和六胺银，差异对比具有统计学意义，P<0.05。并且全自动特殊染 色法染PAS和六胺银操作简单、流程规范、受人工环境影响小、耗时短、准确率高。结论：HE染色联合全自动特殊染色法染PAS和六胺银更加规范，对于肺真 菌感染性疾病病理诊断具有重要的意义。 【关键词】规范化特殊染色技术；肺真菌；感染性疾病病理诊断 【中图分类号】R519 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）12-0211-01 近些年来,因条件导致的致病性真菌所引发的系统性真菌感染不断增多,各种 器官移植、导管技术的发展，各种抗肿瘤药物的应用都是其重要的因素。而肺真 菌感染性疾病是其中主要的类型。肺真菌感染性疾病临床症状缺乏明显特征，较 难鉴别，极其容易误诊，从而影响治疗。鉴于此，如何准确快速的诊断出真菌类型，是治疗的关键。 1.一般临床资料 1.1 一般资料 选取我院在近两年收治的最终确诊为肺真菌感染性疾病患者60例,其中男性 患者34例，女性患者26例，年龄范围从20岁到84岁不等，平均年龄 （52.2±7.3）岁。这60例患者，有15例患者支气管黏膜活检，有8例患者肺穿 刺活检，有37例患者外科手术肺活检。60例患者中，有基础病的患者有48例，占比80%，其中高血压、糖尿病患者有30例，恶性肿瘤有10例，肺结核有5例，余下有气管炎、哮喘等基础病。经治疗后，有2例患者完全康复，有54例患者 完全康复，有4例患者死亡。 1.2 试剂与方法 本实验采用4中方法进行分析：（1）常规HE染色法。（2）传统手工PAS 染色法：将切片进行脱蜡，放入水中，用0.5%浓度的高碘酸液氧化10分钟，2 分钟流水冲洗，蒸馏水洗2次，15分钟左右的雪夫试剂染，然后进行分化、返蓝、水洗、脱水、二甲苯透明、中性树胶封固等。（3）传统手工六胺银染色法：其 试剂包括六胺银贮备液和六胺银蹦沙染色液。将切片进行脱蜡处理，放入水中， 采用5%铬酸水溶液氧化1小时，5分钟流水冲洗；浸泡1%亚硫酸钠水溶液1分钟，使用自来水冲洗5分钟，蒸馏水洗涤，去除铬酸；放入六胺银硼砂染色液内60℃温箱1 小时，待镜下观察切片呈黄褐色、真菌呈黑褐色为止，蒸馏水洗3次；进行5分钟的O.2％氯化金水溶液调色，自来水冲洗；随后利用乙醇进行脱水， 二甲苯透明，中性树胶封固；（4）全自动特殊染色法染PAS和六胺银:使用全自 动特殊染色仪，PAS时长39分钟，六胺银时长120分钟，两种染色可同时进行，时长120分钟。

组织病理隐球菌PAS染色

组织病理隐球菌PAS染色 摘要：目的：探讨影响隐球菌糖原染色的因素，改善染色效果。方法：选取隐球菌染色阳性的肺组织标本，比较高碘酸水溶液浓度氧化不同时长、雪夫氏（Schiff）染色时间对PAS染色质量的影响。结果：浓度为l％高碘酸溶液，氧化30分钟，雪夫氏（Schiff）染色15分钟，可取得较好的染色效果。结论：进行隐球菌糖原染色时，氧化程度是成功的关键。 关键词：糖原染色法；组织病理；隐球菌 前言：PC，即肺隐球菌病，其属于一种新型隐球菌或是格特隐球菌在感染的条件下形成的急性、亚急性、慢性内脏真菌病，临床之中的表现形式为新型隐球菌的感染，而主要发生在免疫力低下的人群之中，不管是否具有基础疾病的人群都可能会发生此病，但此病的发病率并不高。现代化条件下，伴随临床诊断技术的不断创新以及医务人员对疾病的了解更为深入全面，不断提高隐球菌感染的检出率，从而逐渐出现在人们的视野之中，成为了继念珠菌和曲霉菌之后的第三大类肺真菌疾病，并且在临床之中得到高度重视。而糖原染色作为组织病理真菌检查常用的特殊染色，其染色过程受到多种因素的影响[1]，本文将从高碘酸浓度与氧化时间，雪夫氏（Schiff）试剂作用时间三方面探讨影响糖原染色的因素。 1实验材料与方法 1.1实验材料 组织标本选择本科室隐球菌染色阳性的蜡块。 1.2实验试剂与步骤 实验试剂：

l％高碘酸溶液：lg高碘酸粉末加至蒸馏水到100mL溶解；0.5%高碘酸溶液：1g高碘酸粉末加至蒸馏水到200mL溶解，其余试剂成分购自BASO公司。试剂贮 存在4℃的冰箱中，在染色时将其取出恢复到正常室内温度。 实验步骤： ①石蜡切片厚度为3um；②石蜡切片脱蜡至水；③自来水冲洗2min，然后蒸 馏水洗2min；④用高碘酸溶液氧化10-30min；⑤蒸馏水冲洗；⑥雪夫氏 （Schiff）染液染色15-35min；⑦自来水流水冲洗；⑧苏木素复染细胞核1min； ⑨流动水冲洗5min；⑩晾干，中性树胶封片，显微镜下观察真菌染色效果。 1.3实验方法： 1.3.1比较高碘酸氧化时间与雪夫氏（Schiff）染色时间的影响 选择肺组织隐球菌染色阳性的蜡块，连续切片，按照上诉PAS实验步骤染色，不同的是步骤的氧化时间为30min，雪夫氏（Schiff）染液染色时长为35min， 比较染色效果。 1.3.2比较高碘酸浓度的影响 选择肺组织隐球菌染色阳性的蜡块，连续切片2张，按照上述PAS实验步骤 染色，其中高碘酸氧化时间30min，雪夫氏（Schiff）染液染色时间15min，将 高碘酸溶液的浓度由0.5%变成1%，比较2组染色效果。 2结果 高碘酸氧化时间与雪夫氏（Schiff）染色时间的比较见图1。

一种新型隐球菌组织病理学染色方法

一种新型隐球菌组织病理学染色方法 隐球菌是一种常见的真菌，可以引起多种疾病，如肺部感染、脑膜炎、皮肤感染等。在组织病理学检查中，准确地检测到隐球菌的存在对疾病的诊断和治疗具有重要意义。然而，传统的隐球菌染色方法存在着一些问题，如染色效果不稳定、染色时间长等。近年来，一种新型隐球菌组织病理学染色方法被开发出来，其具有快速、准确、稳定等特点，受到广泛关注和应用。 这种新型隐球菌组织病理学染色方法是基于荧光原位杂交（FISH）技术开发的。FISH技术是一种利用荧光标记的探针特异性地结合到 目标DNA序列上的技术。在隐球菌组织病理学染色中，利用荧光标记的隐球菌探针与隐球菌DNA序列特异性结合，从而实现对隐球菌的检测和定位。 具体来说，该方法的操作步骤如下： 1. 取待检组织标本，进行石蜡包埋和切片处理； 2. 制备荧光标记的隐球菌探针； 3. 将切片进行脱蜡和脱水处理； 4. 将荧光标记的隐球菌探针与切片进行杂交反应，使其与隐球 菌DNA序列特异性结合； 5. 进行显微镜观察和荧光成像，检测隐球菌的存在和定位。 该方法的优点主要有以下几点： 1. 快速：相比传统的隐球菌染色方法，该方法操作简便，染色 时间短，可以在较短时间内得到准确的结果；

2. 准确：该方法利用荧光标记的隐球菌探针与隐球菌DNA序列特异性结合，具有高度的特异性和灵敏性，可以准确地检测到隐球菌的存在和定位； 3. 稳定：该方法的染色效果稳定，不受组织类型、染色剂或染色时间等因素的影响，可以得到一致的结果。 该方法已经在临床实践中得到了广泛应用。在肺部感染、脑膜炎、皮肤感染等多种疾病的诊断中，该方法可以提供准确的诊断依据，为临床治疗提供指导。 总之，隐球菌组织病理学染色方法的不断创新和发展，可以提高对隐球菌的检测和定位的准确性和速度，为临床疾病的诊断和治疗提供更加可靠的依据。

病原微生物染色法

在组织切片上，显示细菌最常用的染色法是Gram氏染色法，依据染色性状不同，把细菌分为两大类，Gram氏阳性细菌和Gram氏阴性细菌。 分枝杆菌有脂性被膜，用Gram氏染色法染色一般不易着色。为了显示这类杆菌，齐一尼氏石碳酸复红是最常用的经典染色方法。杆菌着色后，具有抗盐酸酒精的脱色作用，故又称抗酸性杆菌，这类细菌在病理学检验中最多见的是结核杆菌和麻疯杆菌。 结核杆菌呈单个或平行聚合排列。 麻疯杆菌与结核杆菌相似，但较短粗。 螺旋体染色目前仍使用经典的Levaditi氏组织块银染法染色。石蜡切片染色则采用Wartrin Starry氏法。 大部分霉菌虽可在HE染色切片中显示出来，但有些则需特殊染色法。如用P.A.S显示白色念球菌，新型隐球菌用Crocott-Gomori氏六胺银法。 一、Gram氏染色法 操纵方法： （1）切片常规脱蜡至水。 （2）结晶紫液中染45秒。 （3）自来水洗。 （4）Gram氏碘1分钟。 （5）在碘丙酮中分化(直到切片无色为止)。 （6）水冲洗。 （7）1%中性红染核1分钟。 （8）自来水速洗。 常规脱水、透明、封固。 结果：Gram氏阳性菌呈蓝玄色，Gram氏阴性菌呈红色。 Gram氏试剂配制。 1．结晶紫染液(Lillie氏)

95%酒精 20ml 结晶紫 2g 草酸铵 1g 蒸馏水 80ml 2．Gram氏碘液 碘结晶 1g 碘化钾 2g 蒸馏水 300ml 3．碘丙酮溶液 Lugot氏碘 2ml 丙酮 98ml Gram氏切片染色(改良法) 操纵方法： （1）石蜡切片脱蜡常规至水。 （2）HE水溶液染色，伊红较正常深。 （3）1%结晶紫滴于切片染5-10分钟。 （4）倾往染液加Lugol氏碘液5-10分钟。 （5）倾往碘液，滤纸稍印干。 （6）苯胺二甲苯(1:1)分化至无色。 （7）二甲苯洗2次。 （8）二甲苯透明、树胶封固。 结果：Gram阳性细菌及纤维素亮蓝色，核兰色，背景淡红色。试剂配制： 1．1%龙胆紫或甲紫、结晶紫水溶液。 2．Lugol氏碘液。

特殊染色法

特殊染色法 一，抗酸杆菌染色 1，试剂配制： （1）碱性品红乙醇液：碱性品红5g，无水乙醇100ml （2）5%苯酚水溶液：苯酚（稍加温使共溶解）5ml，蒸馏水95ml （3）苯酚碱性品红液：碱性品红乙醇液1ml，5%苯酚水溶液9ml （4）20%硫酸水溶液：浓硫酸20ml，蒸馏水80ml （5）汽油松节油液：航空汽油（也可为普通汽油）1份，松节油1份 2，染色程序： （1）切片用汽油松节油脱蜡2次，每次5-10min。 （2）不经乙醇洗，只用纱布将切片周围余液擦干。 （3）流水稍洗。 （4）滴入苯酚碱性品红液，于室温下染15—30min。 （5）流水去多余液体。 （6）用20%硫酸水溶液分化至适当为止（一般需1—5min） （7）流水充分冲洗。 （8）用Mayer苏木精液浅染细胞核。 （9）洗流水冲洗10—15min。 （10）用风扇把切片吹干，随即二甲苯透明，中性树胶封固。 3，结果：抗酸杆菌（包括麻风杆菌和结核杆菌）呈鲜红色，胞核呈蓝色。 二，奥新兰过碘酸雪夫代染色简称（AB—PAS染色） （溶液配制） 1，0.3%的奥辛兰醋酸液：奥新兰0.3g，蒸馏水97ml，冰醋酸3ml 2，1%过碘酸水溶液，schitf代试剂及亚硫酸冲洗液配发同。 （染色方法） 1，切片按常规脱蜡水洗，再入蒸馏水洗。 2，染于0.3%或1%奥新兰醋酸液中10—30分钟。 3，用蒸馏水充分洗，至少洗4次。 4，1%过碘酸水溶液氧化5—10分钟。 5，用蒸馏水从分洗，至少3—4次。 6，Schiff代试剂染10—30分钟。 7，直接用亚硫酸冲洗3次，每次2分钟。（有固定的作用，把多余的schiff试液洗净）8，流动自来水洗5分钟后蒸馏水洗。 9，苏木素染核。必要时盐酸究竟稍分化后充分用自来水洗。 10，95%酒精，无水酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。 （结果）酸性粘多糖呈靛兰色，中性粘旦白呈鲜紫红色或品红色，中性及酸性粘蛋白混合物呈紫兰色。软骨紫蓝核呈蓝色。 三，改良Hale胶状铁染色液的配制和应用 （溶液配制）29%氯化铁4.4ml，蒸馏水250ml将蒸馏水置于烧杯内煮沸，然后滴加氯化铁

病理学技术—特殊染色最最全总结

结缔组织染色法 Mallory 三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞 图表A 染色，显示胶原纤维，A 组排列规则 . Masson 三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表B Mssson 三色法 图表C 三色染色胃癌组织中血管平滑肌 . 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维 淡黄色：肌肉、红细胞 图表D 间苯二酚法

、胶原纤维染色法 . Van Gieson （）苦味酸- 酸性品红法 鲜红色：胶原纤维 黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核 图表E 2. 胶原纤维，Van Gieson.）苦味酸-酸性品红法 图心肌梗塞myocardial infarction ：心肌梗塞后2 个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。 天狼星红（Sirius red ）苦味酸染色法（参照上图） 红色：胶原纤维 绿色：细胞核 黄色：其他天狼星红苦味酸染色法：（偏光显微镜）I型：强双折光性，呈黄色或红色纤维n型：弱双折光，呈多种色彩疏网状分布川型：弱双折光，呈绿色的细纤维w型：弱双折光的基膜，呈淡黄色

三、网状纤维染色 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维 红色：胞核（核固红复染）

黄棕色：胶原纤维 淡红色：细胞质（红液复染） 图表F 3.Gordon-Sweets 氢氧化银氨液浸染法 Gomori氏银氨液配制法 图表G Gomori 氏银氨液配制法 四、弹性纤维染色 Gomori 醛复红染色法 *甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 醛复红染色法 五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景 图表I间苯二酚法