第五节 中和试验
第十一章血清学试验
第五节中和试验
根据抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫学试验，称中和试验(Neutralization test）。中和试验极为特异和敏感，既能定性又能定量，主要用于病毒感染的血清学诊断、病毒分离株的鉴定、病毒抗原性的分析、疫苗免疫原性的评价、血清抗体效价的检测等。中和试验可在体内进行也可在体外进行。
体内中和试验也称保护试验，试验时先对实验动物接种疫苗或抗血清，间隔一定时间后，再用一定量病毒攻击，最后根据动物是否得到保护来判定结果。常用于疫苗免疫原性的评价和抗血清的质量评价。
体外中和试验是将抗血清与病毒混合，在适当条件下作用一定时间后，接种于敏感细胞、鸡胚或动物，以检测混合液中病毒的感染力。根据保护效果的差异，判断该病毒是否已被中和，并可计算中和指数，即中和抗体的效价。根据测定方法不同，中和试验有终点法中和试验和空斑减数法中和试验等方法。
毒素和抗毒素也可进行中和试验。其方法与病毒的中和试验基本相同。
一、终点法中和试验
终点法中和试验（Endpoint neutralization test）是滴定使病毒感染力减少至50%时，血清的中和效价或中和指数。有固定病毒稀释血清和固定血清稀释病毒两种方法。
(一)固定病毒稀释血清法将已知的病毒量固定，血清作倍比稀释，常用于测定抗血清的中和效价。
1.病毒毒价单位病毒毒价(毒力)的单位过去多用最小致死量(MLD)，但由于剂量的递增与死亡率递增的关系不是一条直线，而是呈S形曲线，在越接近100％死亡时，对剂量的递增越不敏感。而死亡率愈接近50%时，剂量与死亡率呈
直线关系，所以现基本上采用半数致死量(LD
50)作为毒价单位，而且LD
50
的计算应
用了统计学方法，减少了个体差异的影响，因此比较准确。以感染发病作为指标
的，可用半数感染量(ID
50)。用鸡胚测定时，可用鸡胚半数致死量(ELD
50
)或鸡胚
半数感染量(EID
50)；用细胞培养测定时，可用组织细胞半数感染量(TCID
50
)。在
测定疫苗的免疫性能时，则用半数免疫量(IMD
50)或半数保护量(PD
50
)。
2.病毒毒价测定将病毒原液作10倍递进稀释即10-1、10-2、10-3……，选择4～6个稀释倍数接种一定体重的试验动物(或鸡胚、细胞)，每组3～6只(个、孔)。接种后，观察一定时间内的死亡(或出现细胞病变)数和生存数。根据累计死亡数和生存数计算致死百分率。然后按Reed-Muench法、内插法或Karber法计算半数剂量。
以TCID
50
测定为例说明如下：
按Karber法计算，其公式为lgTCID
50
=L+d(S-0.5)，L为病毒最低稀释度的对数；d为组距，即稀释系数，10倍递进稀释时d为-1；S为死亡比值之和（计算固定病毒稀释血清法中和试验效价时，S应为保护比值之和），即各组死亡（感染）数/试验数相加。
若以测定某种病毒的TCID
50
为例，病毒作10-4～10-7稀释，记录其出现细胞病变（CPE）的情况（表11-1）。则L=-4，d=-1，S=6/6+5/6+2/6+0/6=2.16
lgTCID
50=(-4)+(-1)×(2.16-0.5)=-5.66。TCID
50
=10-5.66，0.1ml。
TCID
50
为毒价的单位，表示该病毒经稀释至10-5.66（1/105.66）时，每孔细胞接种0.1ml，可使50%的细胞孔出现CPE。而病毒的毒价通常以每ml或每mg含多少
TCID
50或（LD
50
等）表示。如上述病毒的毒价为105.66TCID
50
/0.1ml，即106.66TCID
50
/ml。
表11-1 病毒毒价滴定(接种剂量0.1ml)
病毒稀释
CPE
阳性数阴性数% 10-4
10-5
10-6
10-7
6
5
2
1
4
6
100
83
33
3.正式试验将病毒原液稀释成每一单位剂量含200LD
50(或EID
50
、TCID
50
)，
与等量递进稀释的待检血清混合，置37℃感作1h。每一稀释度接种3～6只（个、
管）试验动物(或鸡胚、细胞)，记录每组动物的存活数和死亡数，同样按
Reed-Muench法或Karber法计算其半数保护量（PD
50
），即该血清的中和价。
(二)固定血清稀释病毒法将病毒原液作10倍递进稀释，分装两列无菌试管，第一列加等量正常血清(对照组)，第二列加等量待检血清(中和组)；混合后置37℃感作1h，每一稀释度接种3～6只试验动物(或鸡胚、组织细胞)，记录每
组动物死亡数、累积死亡数和累积存活数（表11-2），按Karber法计算LD
50
，
然后计算中和指数。中和指数=中和组LD
50/对照组LD
50
。按表11-3的结果：中和
指数=10-2.2/10-5.5=103.3，查3.3的反对数为1995，即103.3=1995，也就是说该待检血清中和病毒的能力比正常血清大1994倍。通常待检血清的中和指数大于50者即可判为阳性，10～40为可疑，小于10为阴性。
表11-2 固定血清稀释病毒法中和指数测定举例
病毒稀释10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
10-7
LD50中和指数
正常血清组待检血清组
4/4 3/4 1/4
0/4
4/4 2/4 1/4 0/4 0/4 0/4
0/4
10-5.5
10-2.2
103.3=1995 二、空斑减数试验（Plague reduction test）
空斑或蚀斑是指把病毒接种于单层细胞，经过一段时间培养，进行染色，原先感染病毒的细胞及病毒扩散的周围细胞会形成一个近似圆形的斑点，类似固体培养基上的菌落形态。空斑减数试验是应用空斑技术，使空斑数减少50%的血清稀释度为该血清的中和效价。试验时，将已知空斑形成单位（PFU）的病毒稀释
成每一接种剂量含100PFU，加等量递进稀释的血清，37℃感作1h。每一稀释度至少接种3个已形成单层细胞的培养瓶，每瓶0.2～0.5ml，37℃感作1h，使病毒与血清充分作用，然后加入在44℃水浴预温的营养琼脂（在0.5%水解乳蛋白或Eagles液中，加2%犊牛血清、1.5%琼脂及0.1%中性红3.3ml）10ml，平放凝
培养箱中。同时用稀释的病毒加固后，将细胞面朝上放入无灯光照射的37℃ CO
2
等量Hanks液同样处理作为病毒对照。数天后分别计算空斑数，用Reed-muench 法或Karber法计算血清的中和滴度。
酸碱中和滴定实验操作方法--学案
酸碱中和滴定实验操作方法 一.所用仪器：酸式滴定管、碱式滴定管和锥形瓶 （1）酸式滴定管和碱式滴定管的构造，对比不同点及其原因； （2）对比滴定管和量筒刻度的不同。 二.实验操作： （1）查：检查是否漏水和堵塞。 （2）洗：洗净后用指定的酸和碱液润洗。（锥形瓶只用蒸馏水洗净即可） （3）盛、调：用烧杯沿漏斗注入滴定管中，放出液体，赶气泡、调起点。 （4）取：将一定体积未知浓度的酸溶液放入锥形瓶中，滴入几滴酚酞。 （5）滴定：操作要点及滴定终点的观察。 左手控制滴定管的活塞或挤压玻璃小球，右手摇动锥形瓶，眼睛注视锥 形瓶内溶液颜色的变化。（指示剂变色，半分钟内不褪色） （6）记和算：数据的记录和处理求出酸的浓度。计算时可用公式： c（H+）= c［（OH-）×V（碱）÷V（酸）求。 ［原理：c（H+）×V（酸）= c［（OH-）×V（碱）］ 三、练习： 用0.1mol／L的氢氧化钠溶液测定某浓度的浓硫酸，其实验步骤如下： 1．配制稀硫酸溶液100mL，操作方法是：在____里盛适量蒸馏水，用____滴定管取1mL 浓硫酸，使其缓缓沿烧杯内壁注入盛有适量蒸馏水的____中，并用____搅拌，以达____的目的。将____后的溶液沿____注入____中，用蒸馏水洗涤____和____2～3次，洗液都注入____中，振荡摇匀后，将水注入____，直至液面接近刻度线____处，改用____加水至____。盖好瓶塞，振荡摇匀后，转移至贴有标签的试剂瓶中。 2．滴定：用酸式滴定管取10mL稀硫酸，注入____中，滴入3至5滴酚酞并摇匀后，用0.1mol／L的氢氧化钠溶液滴定，直到加入最后一滴氢氧化钠，刚好使溶液____，即达滴定终点。 3．记录和计算：求：稀释前后硫酸物质的量的浓度。 4．讨论： ①碱式滴定管在盛氢氧化钠溶液前要先用____洗净再用____润洗，盛待测硫酸溶液的容器是____，容器在盛稀硫酸前，要用____洗。 ②碱式滴定管未用标准碱溶液洗，只用水洗，立即注入氢氧化钠溶液，将会使测定的稀硫酸浓度____（偏高、偏低、不受影响，下同）。 ③滴定前，盛稀硫酸的容器水洗后，用稀硫酸润洗，再盛稀硫酸10mL，再用标准氢氧化钠溶液滴定，将会使测定硫酸溶液的浓度结果____。 ④滴定前碱式滴定管内无气泡，后因操作不当进了气泡，测定结果，使稀硫酸的浓度_。 ⑤盛稀硫酸的容器内盛10mL稀硫酸后，再加入10mL水后滴定，则测定结果，硫酸溶液浓度将____。 ⑥滴定前平视读数，滴定终点时，仰视读数，并记录读数，测得的硫酸溶液浓度将____。
中和试验方法操作规程
中和试验方法操作规程 1.目的：建立中合实验法，统一操作标准，确保产品质量。 2.适用范围：公司生物制品效价测定的中合实验。 3.责任：质检人员有按此程序进行操作的责任，质量管理部经理有检查监督的责任。 4.程序： 4.1：实验前准备 ①、9-10日龄的SPF鸡胚、病毒。 ②、样品稀释管、病毒稀释管、打孔器、镊子、5ml吸头、1ml、200ul吸头各一盒、废弃物缸、烧杯，以上物品均需灭菌处理 ③、照蛋器、电炉、旋涡混合器、5ml微量移液器、1ml微量移液器、200ul微量移液器、记号笔、酒精棉球、碘棉、打火机、蜡、玻璃棒、无菌手套 ④、实验开始前记得要使房间温度达到30摄氏度左右，房间要紫外照射30min，生物安全柜紫外照射30min准备要用的检测用品同步放在生物安全柜里紫外照射。 4.2：稀释 ①、将样品用生理盐水2倍系列稀释，使之成1:2;1:4;1:8;1:1;,1:32;1:64;1:128;1:256；1:512；1:1024......。 ②、病毒的稀释：将病毒稀释成每单位剂量含200ELD50.。例如：病毒ELD50=10-8.375/0.1ml,将病毒稀释成每单位剂量含200ELD50的稀释倍数=108.375/200=1.2*106。即将病毒稀释 1.2*106倍即为200ELD50/0.1ml。 ③、准备七根试管（或EP管），编号1-7，在1号管中加入 0.2ml灭菌生理盐水，2-7号管中各加入9ml 灭菌生理盐水.再将ELD50=108.375/0.1ml 的病毒取1ml加入1号管中震荡混匀，再从1号管中取1ml加入2号管中震荡混匀,依次10倍系列稀释至第7管。(依据最后接种量和接种鸡胚数计算出中和抗体用病毒的量,7号管可以多稀释几支备用。) 4.3：中和:将稀释成每单位剂量含200 ELD50的病毒与等量的2倍系列稀释的待检样品混合,37度中和1小时,准备接种鸡胚。
测试技术试验指导书
《机械工程测试技术》实验指导书 编者：郑华文刘畅 昆明理工大学机电学院实验中心 2014年5月
说明和评分 1学生按照实验预约表进行实验；在实验前，需对理论教学中相关内容做做复习并对实验指导书进行预习，熟悉实验内容和要求后才能进入实验室进行实验。在实验中，不允许大声喧哗和进行与实验不相关的事情。 2进入实验室后，应遵守实验室守则，学生自己应发挥主动性和独立性，按小组进行实验，在操作时应对实验仪器和设备的使用方法有所了解，避免盲目操作引起设备损坏，在动手操作时，应注意观察和记录。 3根据内容和要求进行试验，应掌握开关及的顺序和步骤：1）不允许带负荷开机。输出设备不允许有短路，输入设备量程处于最大，输出设备衰减应处于较小。2）在实验系统上电以后，实验模块和实验箱，接入或拔出元件，不允许带电操作，在插拔前要确认不带电，插接完成后，才对实验模块和试验箱上电。3）试验箱上元件的插拔所用连线，在插拔式用手拿住插头插拔，不允许直接拉线插拔。4）实验中，按组进行试验，实验元件也需按组取用，不允许几组混用元件和设备。 4在实验过程中，在计算机上，按组建立相关实验文件，实验中的过程、数据、图表和实验结果，按组记录后，各位同学拷贝实验相关数据文件等，在实验报告中应有反应。对实验中的现象和数据进行观察和记录。 实验评分标准： 1）实验成绩评分按实验实作和实验报告综合评分：实验实作以学生在实验室中完成实验表现和实验结果记录文件评定，评定为合格和不合格；实验报告成绩：按照学生完成实验报告的要求，对实验现象的观察、思考和实验结果的分析等情况评定成绩。初评百分制评定。 2）综合实验成绩评定按百分制。
MTT方法测定脾淋巴细胞转化(20070727)
MTT方法测定脾淋巴细胞转化实验 1.实验步骤： 1.1.调整淋巴细胞浓度： a)小鼠断颈椎处死后，放入75%酒精液浸泡5min； b)用无菌镊子取出小鼠，手术剪剪开腹腔，取脾脏，以1ml无菌注射器将 脾在研钵中磨碎，用3.5ml预冷的Hank’s液悬浮，过筛入无菌平皿，研 钵中再次加入3.5ml Hank’s液，过筛入平皿，将7ml细胞悬液移入塑料 离心管； c)离心1500rpm, 5min； d)用Hank’s液洗2次； e)以2ml完全培养液悬浮细胞，转0.1ml细胞入3.9ml 1.5%冰醋酸，混匀 后计数；其余细胞均放于4℃冰箱预冷，防止细胞死亡； f)根据细胞计数，调整细胞浓度到1*107/ml。（假定4个大方格内总数为N，则 该细胞悬液的浓度为n=105*N） 1.2.刺激物的配备用细胞培养液将各种培养刺激物按2*终浓度稀释，混匀。以 100μl/孔加入96孔细胞培养板中。（PHA和ConA主要刺激T淋巴细胞增殖，LPS主要刺激B细胞增殖。）ConA 的常用浓度为0.1-15μg/ml，LPS的常用浓度为0.1-10μg/ml , 具体情况要根据细胞浓度和反应时间而定。不同品种的动物也有一定的不同。 1.3.加样在以上各孔中加入工作浓度的淋巴细胞悬液100μl/孔（边加边摇匀，防 止滴加过程中淋巴细胞发生沉淀。细胞培养板具体设计根据具体试验而定，设培养液对照孔。 1.4.培养将96孔细胞培养板放入细胞培养箱，培养72小时。每过24小时需取 出细胞培养板，在倒置显微镜中查看培养孔中是否出现细菌污染。 1.5.MTT培养结束前4小时，以50ul/孔添加MTT稀释液，继续培养至72小时。 1.6.处理停止细胞培养，离心（1500rpm，10min）使淋巴细胞沉淀，轻轻倾去 细胞培养液，纸巾吸干。加入DMSO，150ul/孔。充分振荡后，避光放置10-15min（直至蓝色颗粒充分溶解） 1.7.检测充分振荡后，570nm单波长酶标仪检测。
测试技术实验(综合)
实验1 电感式传感器——差动变压器性能测试 实验目的 了解差动变压器的基本构造及原理，通过实验验证差动变压器的基本特性。 实验器件 音频振荡器、测微头、示波器、主副电源、差动变压器。 旋钮初始位置 音频振荡器的振荡频率为4kHz～8kHz，双线示波器每格读数为示波器上“>”后面所对应的数字，触发选择“第一通道”，主、副电源关闭。 实验原理 电感传感器是一种基于互感的原理，将位置量的变化(即位移)转变为电感量变化的传感器。如图1所示，它由初级线圈L、次级线圈L1、L2与铁心P构成，本质上，它是一个变压器，且因其两个次级线圈按反极性串联组成差动式，故电感式传感器又称差动变压器式传感器。当初级线圈L加入交流电压时，若u1=u2，则输出电压u0= u1–u2=0，当铁心向上运动时，因u1 > u2，故u0 > 0，当铁心向下运动时，因u1 < u2，故u0 < 0，且铁心偏离中心位置越大，u0越大。其输出特性曲线如图所示。
=u 1-u 2L v (a) 电路 (b) 输出特性 图1 差动变压器式传感器的工作原理 实验步骤 1、根据图2接线，将差动变压器、音频振荡器（注意：输出为L V ）、双线示波器连接起来，组成一个测量线路。开启主、副电源，将示波器探头分别接至差动变压器的输入端和输出端，观察差动变压器初级线圈音频振荡器激励信号峰峰值为2V 。
图2 器件连接图 (两线圈两上极联在一起，示波器两通道均不能接地) 2、转动测微头，使其与振动平台吸合，然后将其向上转动5mm，使振动平台向上移动。 3、向下旋动测微头，使振动平台产生位移。每位移0.2mm，用示波器读出差动变压器输出端的峰值电压，并填入表，根据所得数据计算灵敏度S(S＝Δu/Δx，其中，Δu为电压变化，Δx为对应振动平台的位移变化)，并作出u- x关系曲线。 思考题 1、根据实验结果，指出线性范围。 2、当差动变压器中磁棒的位置由上到下变化时，双线示波器观察到的波形相位会发生怎样的变化？ 3、用测微头调节振动平台位置，使示波器上观察到的差动变压器的输出端信号为最小，这个最小电压称作什么？由于什么原因造成？
实验 中和反应热的测定
实验 中和反应热的测定 【实验目的】 1、理解中和热的概念。 2、学习中和热的测定方法。 3、通过实验，进一步领会做定量实验的方法。 【知识点回顾】 中和热概念：酸与碱发生中和反应生成1molH 2O 时所释放的热量 【实验原理】 1、0.50mol ·L －1盐酸和0.55 mol ·L －1NaOH 溶液的密度都是1g ·cm －3，所以50mL 0.50mol ·L －1盐酸的质量m 1=50g ，50mL 0.55mol ·L －1 NaOH 溶液的质量m 2=50g 。 2、中和后生成的溶液的比热容c=4.18J ·(g ·℃)－1，由此可以计算出0.50mol ·L －1盐酸与 0.55mol ·L －1NaOH 溶液发生中和反应时放出的热量为 （m 1+m 2）·c ·(t 2-t 1)=0.418(t 2-t 1)kJ 又因50mL 0.50mol ·L －1盐酸中含有0.025molHCl ，0.025molHCl 与0.025molNaOH 发生中和 反应，生成0.025molH 2O ，放出的热量是0.418（t 2-t 1）kJ ，所以生成1 molH 2O 时放出的热 量即中和热 为 △H=-025.0) (418.012t t kJ ·mol -1 【实验用品】 大烧杯（500mL ）、小烧杯（100mL ）、温度计、量筒(50mL)两个、泡沫塑料或纸条、泡 沫塑料或硬纸板（中心有两个小孔），环形玻璃搅拌棒。 0.50mol ·L －1盐酸、0.55mol ·L －1 NaOH 溶液。 注：为了保证0.50mol ·L －1盐酸完全被NaOH 中和，采用0.55mol ·L －1NaOH 溶液，使碱稍微 过量。 【实验过程】 一、测定前的准备工作 1、 温度计的使用。 ⑴选择精密温度计（精确到0.1℃），并进行校对（本实验温度要求精确到0.1℃）。 ⑵使用温度计要轻拿轻放。温度计用后要及时 放回 。刚刚测量高温的 温度计不可立即用水冲洗，以免 。
酸碱中和滴定实验操作方法
酸碱中和滴定实验报告 班级姓名学号合作者日期 一、实验目的：用已知浓度溶液（标准溶液）【本实验NaOH为标准溶液】测定未知溶液（待测溶液）浓度【本实验盐酸为待测溶液】 二、实验用品： 1.所用仪器：酸式滴定管、碱式滴定管、锥形瓶、滴管、烧杯 2.所用试剂：0.1000mol/LNaOH溶液、待测盐酸、酚酞 三、实验原理：c（标）×V（标）= c（待）×V（待）【假设反应计量数之比为1：1】 【本实验具体为：c（H+）×V（酸）= c（OH-）×V（碱）】 四、实验操作： （1）查：检查是否漏水和堵塞。 （2）洗：洗净后用指定的酸和碱液润洗。（锥形瓶只用蒸馏水洗净即可） （3）盛、调：用烧杯沿漏斗注入滴定管中，放出液体，赶气泡、调起点。 （4）取：左手控制酸式滴定管的活塞，将一定体积未知浓度的酸溶液放入锥形瓶中，滴入几滴酚酞。 （5）滴定：操作要点及滴定终点的观察。 左手挤压碱式滴定管玻璃小球，右手摇动锥形瓶，眼睛注视锥形瓶内溶液颜色的变化。 （指示剂变色，半分钟内不褪色）（6）记和算：数据记录和处理，求出酸的浓度 C（盐酸）= 五.常见误差分析：［根据：c（H+）×V（酸）= c［（OH-）×V（碱）分析］
六、练习 1. 刻度“0”在上方的用于测量液体体积的仪器是( ) A. 滴定管 B. 量筒 C. 移液管 D. 量杯 2. 要准确量取25.00 mL稀盐酸，可用的仪器是( ) A. 25 mL碱式滴定管 B. 25 mL量筒 C. 25 mL酸式滴定管 3. 中和滴定时，用于量取待测液体积的仪器是( ) A. 胶头滴管 B. 量筒 C. 滴定管 D. 移液管 4. 进行中和滴定时，事先不应该用所盛溶液洗涤的仪器是( ) A. 酸式滴定管 B. 碱式滴定管 C. 锥形瓶 D. 移液管 5. 在25mL的碱式滴定管中盛有溶液，液面恰好在20mL刻度处，现将滴定管内溶液全部放出，流入量筒内，所得溶液的体积为（） A. 5mL B. 20mL C. 大于5mL D. 小于5mL 6. 准确量取25.00mL KMnO4溶液可以选用的仪器是（） A. 50mL量筒 B. 10mL量筒 C. 50mL酸式滴定管 D. 50mL碱式滴定管 7. 用标准浓度的氢氧化钠溶液来滴定未知浓度的盐酸，在滴定操作时，盐酸（） A. 只能盛在锥形瓶中 B. 只能盛在酸式滴定管中 C. 也可用碱式滴定管取放 D. 既可盛在锥形瓶中，也可盛在酸式滴定管中 8. 用标准浓度的盐酸来滴定未知浓度的氢氧化钠，若用甲基红为指示剂，滴定终点时的颜色变化应该是 A. 由黄色变成红色 B. 由黄色变为橙色 C. 由橙色变成红色 D. 由红色变为橙色 9. 用标准浓度的氢氧化钠溶液来滴定未知浓度的盐酸，使用酚酞做为指示剂，下列叙述中说明恰好达到滴定终点的是（） A. 由红色变为深红色 B. 由无色变为深红色 C. 由浅红色变成深红色 D. 由无色变为浅红色 10. 用标准NaOH溶液滴定待测盐酸，若用甲基橙代替酚酞作指示剂，此时盐酸浓度的测定值与酚酞作指示剂的测定值相比较是（） A. 偏大 B. 偏小 C. 无影响 D. 无法判断
中和试验
第十三章 中和试验（neutralization test） 学习要点： 毒价滴定； 终点法中和试验； 空斑减少试验。 病毒或毒素与相应的抗体结合，抗体中和了病毒或毒素，失去了对易感动物的致病力，这种试验称为中和试验。 一、简单定性中和试验——毒价滴定 主要用于鉴定病料中病毒及病毒的类型，亦可用于毒素的鉴定。试验方法：根据病毒的易感性选定试验动物（鸡胚或细胞）及接种途径。将动物分为对照组与实验组。试验组：取待检病料磨碎，加生理盐水稀释，加双抗，在冰箱中作用1h或经过滤器过滤，与已知的抗血清等量混合，置于37℃中作用1h后接种动物。对照组则用正常血清加入稀释病料，作用后，接种另一种动物。对照组动物发病死亡，而试验组动物不死，即证实病料中含有与已知抗血清相应的病毒。
二、终点法中和试验 1、固定血清稀释病毒法 将病毒用2倍递增稀释，分置二列试管：第一列加入正常血清（对照组）；第二列加入待检血清（试验组）。二列试管分别振荡均匀，置370C中作用1h，将各管混合液分别接种试管动物，每管用3-5只动物。接种后观察数目，并记录死亡数。观察结束后，计算起LD50及中和指数。
2、固定病毒稀释血清法 本法用以测定抗病毒的血清中和效价。将待检血清稀释，加等量已知毒价的病毒液，在试管内中和湖接种动物，观察动物发病及死亡情况，计算其只能中和效价。
三、空斑减少试验 在细胞培养时作中和试验可采用空斑减少法。一种能使细胞致病变的病毒，在细胞培养上生长后，因其致病变作用使细胞单层脱落，pH与无病变地方也不一样，该处与周围明显不同的、一个局限性的变性细胞区称为空斑。一个空斑可以当作一个病毒生长的集落，一个单位内空斑数多，病毒就多，故可测出病毒空斑形成单位。这样，加抗血清与不加抗血清的病毒空斑形成单位之差，就称为空斑减少试验。使空斑减少50%的血清西式度，就是该血清的中和价。
(完整版)细胞集落形成实验
细胞集落形成实验方法介绍 非整倍体无限细胞系和癌细胞株中，仍然存在不同细胞亚群，它们的功能和生长特点有些差异，其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力，细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞，细胞遗传性状、生物学特性相似，利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系，细胞集落率很低。细胞集落化培养之前，应先测定细胞集落形成率，以了解细胞在极低密度条件下的生长能力。 集落抑制率=（1-（实验组集落形成率/对照组集落形成率））×100% （一）原理 细胞集落形成率单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞，大小在0.3-1.0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。常用方法有平板集落形成试验、软琼脂集落形成试验。 （二）实验用品 1.材料：Hela细胞。 2.器材：（直径60mm ）培养皿、细胞记数板、烧杯、吸管、离心机、离心管、废液瓶、倒置显微镜、二氧化碳培养箱、超净工作台、水浴锅。 3.试剂：Giemsa染液、0.25%胰蛋白酶消化液、血清细胞培养液、安尔碘、琼脂。 （三）方法 1.平板克隆形成试验 本法适用于贴壁生长的细胞，包括培养的正常细胞和肿瘤细胞。 (1)对指数生长期细胞，采用常规消化传代方法，制成细胞悬液。 (2)细胞悬液反复吹打，使细胞充分分散，单个细胞百分率应在95%以上。细胞记数，并用培养基调节细胞浓度，待用。 (3)根据细胞增殖能力，将细胞悬液倍比稀释。一般按照每皿含50、100、200个细胞的浓度分别接种5ml细胞悬液到培养皿（直径60mm ）中，以十字方向轻轻晃动培养皿，使细胞分散均匀。 (4)培养皿置37℃、5%CO2中培养2~3周，中间根据培养液pH变化适时更换新鲜培养液。 (5)当培养皿中出现肉眼可见克隆时，终止培养，弃去培养液，PBS液小心浸洗2次，空气干燥。甲醇固定15分钟，弃甲醇后空气干燥。用Giemsa染液染色10分钟，流水缓慢洗去染液，空气干燥。 2.软琼脂集落形成试验
酸碱中和滴定考题(含答案)
第四节 酸碱中和滴定 年级__________ 班级_________ 学号_________ 姓名__________ 分数____ 一、填空题(共10题，题分合计29分) 1.测定钢铁中的含硫量，通常采用以下方法：将样品在高温下灼烧，使燃烧产物全部溶于水，再用标准0.100 mol/L I 2水滴定。这一方法中，选用的指示剂为____，到达滴定终点的现象是：颜色由_______色变为_______色，滴入碘水时发生反应的化学方程式为：___________________________ 。其准确称取10.00 g 钢样，氧气流中充分燃烧，将燃烧产物溶于水制成200 mL 溶液，从中取出20.0 mL ，用0.100 mol/LI 2水滴定，到滴定终点时，用去碘水12.5 mL ，则此种钢样含硫量为__________。
2.体积和pH都相同的Na2CO3、Na2S溶液，用相同浓度的稀盐酸分别与它们反应，当反应完全时，消耗稀盐酸的量是否相同？其理由是__________。 3.用标准NaOH溶液(浓度为0.120 mol/L)滴定20.00 mL待测盐酸，应选用的指示剂是________，当指示剂由______色变为______色时，且在_____分钟内颜色不再变化，耗用NaOH溶液21.02 mL。重复滴定操作，第二次耗用相同标准液体积为21.10 mL，则待测HCl的浓度为___________mol/L。 4.为测定某种工业烧碱的纯度，准确称取m g样品，溶于水制成V1mL溶液，从中取出1/10放出锥形瓶中，用浓度为C mol/L的盐酸滴定，在到终点时，消耗盐酸V2mL，则此工业烧碱的纯度为_____________。 5.完全中和某一定量的一元强酸，需用去一定量NaOH，若改用与NaOH质量相同的KOH，则反应后溶液呈 ______性；若改用与NaOH物质的理相同的Ba(OH)2，则反应后的溶液呈_____性。 6.m g的纯碳酸钠恰好与20 mL盐酸完全反应，此盐酸的物质的量浓度是____________。 7.用一定质量的氢氧化钠恰好中和某强酸溶液．若改用与氢氧化钠质量相同的氢氧化钡来中和，反应后溶液显____________性；若改用与氢氧化钠的物质的量相同的氢氧化钡来中和，反应后溶液显____________性。 8.中和20mL0.1mol/L NaOH需要0.05mol/L H2SO4____________mL。 9.为了中和0.5mol OH-，已加入50mL 5mol/L盐酸，还需加入____________mL 2.5mol/L盐酸。 10.以甲基橙为指示剂，用标准HCl溶液滴定NaOH溶液的准确浓度，到达终点时，指示剂颜色的突变（从什么颜色变为什么颜色）是___________。滴定过程中，应该用________手来控制滴定管的旋塞，用已知准确浓度的NaOH溶液滴定HCl溶液时，常以酚酞为指示剂，则滴定终点的正确判定是_________________，滴定前，若所用碱式滴定管的下端有气泡，可将其橡皮管向上弯曲，并稍稍用力捏挤______所在处，利用从尖嘴喷出的溶液排出气泡。 二、单选题(共15题，题分合计45分)
病毒中和试验测定法
病毒中和试验测定法 1.固定病毒稀释血清法(α法) 本法用于抗血清的中和价。试验需先滴定病毒 毒价，试验时将其稀释成每一单位剂量含200个TCID 50 ，再将待检血清倍比稀释 加等量200个TCID 50 /ml的病毒液，混匀后37℃1h，每一稀释度接种24孔细胞 培养板4孔，每孔。5%C0 2 培养箱培养一定时间后，记录出现CPE孔数，以不出现CPE数和接种数的比为中和比值。按Karber法计算中和价。其公式如下： Log TCID 50 =L+d（） （TCID50用对数计算，L为病毒最低稀释度的对数。d为组距，即稀释系数，在10倍系列稀释则为-1，S为各组CPE与接种数比值之和） 50%中和试验举例 每一接种剂量含病毒 100TCID50或 100LD50或100EID50或100ID50 L=-1，d=，S=4/4+4/4+4/4+4/4+2/4= 代入Karber公式：LogND 50= -1－* 该抗血清ND 50 (半数中和单位)为，即1/160， 则其中和价为160 ND 50 /ml，可以简写成160。 2.固定血清稀释病毒法(β法) 本法用于测定抗血清的中和指数。将病毒原液10倍系列稀释，分列于2排无菌管，第一排加等量正常血清（对照组）；第二排加待检血清（中和组），混匀后，置37℃1h，分别接种细胞板孔（或鸡胚、实验 动物）进行培养，记录CPE（鸡胚、动物死亡数），计算TCID 50（或LD 50 ），按下 式计算中和指数。 中和组TCID 50（或LD 50 ） 中和指数= ———————————— 对照组TCID 50（或LD 50 ） 查反对数，即得该待检血清的中和指数。通常中和指数>50者判为阳性，
电气测试技术-实验指导书
电气测试技术 实 验 指 导 书 河北科技师范学院 机械电子系电气工程教研室 二00六年十月
实验台组成及技术指标 CSY2000系列传感器与检测技术实验台由主控台、三源板（温度源、转动源、振动源）、15个（基本型）传感器和相应的实验模板、数据采集卡及处理软件、实验台桌六部分组成。 1、主控台部分：提供高稳定的±15V、+5V、±2V～±1OV可调、+2V～+24V可调四种直流稳压电源；主控台面板上还装有电压、频率、转速的3位半数显表。音频信号源（音频振荡器）0.4KHz～10KHz可调）；低频信号源（低频振荡器）1Hz～3OHz（可调）；气压源0～15kpa可调；高精度温度控制仪表（控制精度±0.5℃）；RS232计算机串行接口；流量计。 2、三源板：装有振动台1Hz～3OHz（可调）；旋转源0～2400转/分（可调）；加热源＜200℃（可调）。 3、传感器：基本型传感器包括：电阻应变式传感器、扩散硅压力传感器、差动变压器、电容式传感器、霍尔式位移传感器、霍尔式转速传感器、磁电转速传感器、压电式传感器、电涡流位移传感器、光纤位移传感器、光电转速传感器、集成温度传感器、K型热电偶、E型热电偶、Pt10O 铂电阻，共十五个。 4、实验模块部分：普通型有应变式、压力、差动变压器、电容式、霍尔式、压电式、电涡流、光纤位移、温度、移相/相敏检波/滤波十个模块。 5、数据采集卡及处理软件：数据采集卡采用12位A/D转换、采样速度1500点／秒，采样速度可以选择，既可单采样亦能连续采样。标准RS－232接口，与计算机串行工作。提供的处理软件有良好的计算机显示界面，可以进行实验项目选择与编辑，数据采集，特性曲线的分析、比较、文件存取、打印等。 6、实验台桌尺寸为160O×8OO×280（mm），实验台桌上预留计算机及示波器安放位置。 注意事项: 1、迭插式接线应尽量避免拉扯，以防折断。 2、注意不要将从各电源、信号发生器引出的线对地（⊥）短路。 3、梁的振幅不要过大，以免引起损坏。 4、各处理电路虽有短路保护，但避免长时间短路。 5、最好为本仪器配备一台超低频双线示波器，最高频率≥1MHz，灵敏度不低于 2mV／cm。 6、 0.4～10KHZ信号发生器接低阻负载（小于100Ω），必须从L V接口引出。
淋巴细胞转化试验(MTT)
一、淋巴细胞转化试验（MTT） （一）原理： 四甲基偶氯唑盐（MTT）可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时，线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢，将结晶的甲臢溶解释放后，可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性，从而推知待测样品的水平。 （二）材料： MTT、电子天平、PBS液、二甲基亚砜、无菌针头过滤器、细胞计数板、台盼兰、无菌操作台，CO2培养箱，酶标仪，－20℃冰箱。用称取50mg的MTT，溶于10ml后，终浓度为5mg/ml，过滤除菌，无菌EP管分装，－20℃避光保存。丝裂原：PHA、ConA、PWM或其他丝裂原 （三）方法： 1、脾细胞制备： （1）小鼠颈椎脱臼处死，75%乙醇浸泡3分钟，取出小鼠置于无菌纸上，左腹侧朝上； （2）在小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏； （3）在脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露脾脏，用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面的结缔组织，取出脾脏。放入盛有5ml Hanks液的培养皿中； （4）制备脾细胞悬液 ①钢网研磨法：无菌取脾，将脾脏放置不锈钢网（100或200目）上，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，用注射器针芯轻轻研压脾脏，制成单细胞悬液；经200目筛网过滤，用Hanks液洗3次，每次离心1000r/min 5-10min， (或1500rpm，4-7min)。取出100ul，稀释后在细胞计数板上进行细胞计数，并用台盼兰染色(0.1ml0.6%台盼兰+0.1ml1.7%Nacl液+0.2ml细胞悬液，混匀)，计算细胞存活率(应在95％以上)。调整细胞浓度为 5 105/ml。 ②梳刮法：脾脏可用镊子轻轻梳刮，避免将脾脏弄成碎片，将细胞悬液吸入
测试技术实验室建设方案.doc
测试技术实验室建设方案 电气信息工程系 2006年4月6日 测试技术实验室建设方案 一、必要性 为了适应电气信息工程学院学科专业建设和发展的需要，贯彻我院的教育宗旨—注重学生的专业综合素质及动手能力的培养，根据对我院的现有实验条件的分析和学科专业建设的需要，我们认为应在现有实验设备基础上新建测试技术实验室，组建一个既能面向学生实验，又能有助于教师进行科研的具有先进水平的测试技术实验室。 由于微电子技术、计算机技术、软件技术、网络技术的高速发展，以及它们在各种测量技术与仪器仪表上的应用，使新的测试理论、测试方法、测试领域以及仪器结构不断涌现并发展成熟，在许多方面已经突破了传统测试技术的概念。基于虚拟仪器的现代测试技术逐步形成了一种发展趋势。虚拟仪器是一种功能意义上的仪器，它是由计算机技术、测量技术和微电子技术不断取得突破而孕育出来的一项新兴技术。虚拟仪器通常是指以计算机为核心的，由强大的测试应用软件支持的，具有虚拟仪器面板，足够的仪器硬件及通信功能的信息处理系统。例如，计算机加上A/D转换器及其他少量辅助电路，编制各种软件就可实现数据采集、波形显示、电压测量、时间测量、频率测量及频谱分析等各种功能，取代传统的示波器、电压表、频率计、频谱分析仪等仪器，配上相应的传感器，就可实现对非电量的测量。可见，虚拟仪器可借助通用数据采集装置，通过编制不同的软件测试方案，可构造任意功能的仪器，即定义仪器的功能。与传统的仪器相比较，虚拟仪器具有模块化及开放性和互换性的特点和资源复用性，同时可方便、经济地组建或重构自动测试系统。因此，与传统的仪器相比，虚拟仪器具有4大优势：性能高、扩展性强、开发时间少，以及出色的集成功能。 将虚拟仪器引入测试系统，就可以建立便于更新、机动灵活、资源共享、功能强大、成本低廉、自主版权的测试系统。这种测试系统能够按工程测试的要求，自由增减系统模块，通过重新配置系统资源，充分运用已有的标准化系统资源，以透明的方式提高工程测试技术综合应用的效率。 现代测试技术知识是测控技术与仪器、电子信息工程、机电一体化等专业的学生所必须
第五节 中和试验
第十一章血清学试验 第五节中和试验 根据抗体能否中和病毒的感染性而建立的免疫学试验，称中和试验(Neutralization test）。中和试验极为特异和敏感，既能定性又能定量，主要用于病毒感染的血清学诊断、病毒分离株的鉴定、病毒抗原性的分析、疫苗免疫原性的评价、血清抗体效价的检测等。中和试验可在体内进行也可在体外进行。 体内中和试验也称保护试验，试验时先对实验动物接种疫苗或抗血清，间隔一定时间后，再用一定量病毒攻击，最后根据动物是否得到保护来判定结果。常用于疫苗免疫原性的评价和抗血清的质量评价。 体外中和试验是将抗血清与病毒混合，在适当条件下作用一定时间后，接种于敏感细胞、鸡胚或动物，以检测混合液中病毒的感染力。根据保护效果的差异，判断该病毒是否已被中和，并可计算中和指数，即中和抗体的效价。根据测定方法不同，中和试验有终点法中和试验和空斑减数法中和试验等方法。 毒素和抗毒素也可进行中和试验。其方法与病毒的中和试验基本相同。 一、终点法中和试验 终点法中和试验（Endpoint neutralization test）是滴定使病毒感染力减少至50%时，血清的中和效价或中和指数。有固定病毒稀释血清和固定血清稀释病毒两种方法。 (一)固定病毒稀释血清法将已知的病毒量固定，血清作倍比稀释，常用于测定抗血清的中和效价。 1.病毒毒价单位病毒毒价(毒力)的单位过去多用最小致死量(MLD)，但由于剂量的递增与死亡率递增的关系不是一条直线，而是呈S形曲线，在越接近100％死亡时，对剂量的递增越不敏感。而死亡率愈接近50%时，剂量与死亡率呈 直线关系，所以现基本上采用半数致死量(LD 50)作为毒价单位，而且LD 50 的计算应 用了统计学方法，减少了个体差异的影响，因此比较准确。以感染发病作为指标 的，可用半数感染量(ID 50)。用鸡胚测定时，可用鸡胚半数致死量(ELD 50 )或鸡胚 半数感染量(EID 50)；用细胞培养测定时，可用组织细胞半数感染量(TCID 50 )。在 测定疫苗的免疫性能时，则用半数免疫量(IMD 50)或半数保护量(PD 50 )。 2.病毒毒价测定将病毒原液作10倍递进稀释即10-1、10-2、10-3……，选择4～6个稀释倍数接种一定体重的试验动物(或鸡胚、细胞)，每组3～6只(个、孔)。接种后，观察一定时间内的死亡(或出现细胞病变)数和生存数。根据累计死亡数和生存数计算致死百分率。然后按Reed-Muench法、内插法或Karber法计算半数剂量。 以TCID 50 测定为例说明如下： 按Karber法计算，其公式为lgTCID 50 =L+d(S-0.5)，L为病毒最低稀释度的对数；d为组距，即稀释系数，10倍递进稀释时d为-1；S为死亡比值之和（计算固定病毒稀释血清法中和试验效价时，S应为保护比值之和），即各组死亡（感染）数/试验数相加。
测试技术实验报告
测试技术实验报告 班级： 姓名： 学号： 河南科技大学机电工程学院测控教研室 二O一一年五月
实验一 测量电桥静态特性测试报告 同组人： 时间： 一、实验目的 1. 熟悉静态电阻应变仪的工作原理和使用方法 2. 熟悉测量电桥的三种接法，验证公式04n y e e δε= 3. 分析应变片组桥与梁受力变形的关系，加深对等强度梁概念的理解 4. 验证温度对测量的影响并了解消除方法 二、实验设备 静态电阻应变仪、等强度梁、砝码、应变片 三、实验原理 等强度梁受外力变形时，贴在其上的应变片的电阻也随之发生相应的变化。应变片连接在应变仪测量桥的桥臂上，则应变片电阻的变化就转换为测量电桥输出电压的变化，应变仪采用“零位法”进行测量。它采用双桥电路，一个是测量桥，另一个为读数桥。当测量桥有电压输出时，调整读数桥的刻度盘，使仪表指针为零。则此时读数桥读数与桥臂系数之比即为试件的实验应变值。 四、实验数据整理 在等强度梁上逐级加载、卸载，并把三种电桥接法的测量结果填入表1。 表1 三种电桥接法的测量结果处理 注：理论应变2 = E bh ε理，其中10b =；h=6mm ；E=2×1011N/m 2 五、问答题 1、 试分析实验中同一载荷下，半桥接法相对于单臂和全桥接法的仪器输出有什么不同？ 半桥接法时，仪器输出是单臂接法仪器输出的2倍，是全桥接法仪器输出的1/2，单臂
接法时01R U =U 4R ?± ，半桥时01R U =U 2R ?±，全桥时0R U =U R ?±。同时，由上图数据可以看出，每对应一个负荷时，半桥接法时的仪器输出是单臂时的2倍，全桥的1/2。 2、 单臂测量时若试件温度升高，仪器输出(指针)如何变化？说明变化的原因。 仪器输出将变大。当试件受力且试件温度升高时，输出电压F T 0R R 1U = +4R R ???? ??? ， R 为试件电阻，而本实验输出的是应变片的应变ε，F T 1R R 1=+S R R ε???? ??? ，若试件温度升高时，则没有温度影响 T R R ?，F 2R =SR ε?，显然，温度升高的变化1ε大于温度没有升高时的变化2ε，故试件温度升高时，仪器输出将变大。 3、 某等强度梁受力及布片如图所示，试问该如何组桥能测出力F ？若将该梁换成等截面梁， 又该如何布片？如何组桥？方能测出力F ？
中和滴定实验
中和滴定实验 1. 实验原理 中学化学只要求掌握与强碱的中和滴定，因此计算依据是：H+ +OH-=H2O，即强酸电离出来的n（H+）与强碱电离出来的n（OH-）应相等。 中和滴定的终点可借助于酸碱指示剂的颜色变化来确定。 2. 实验步骤（用已知浓度的碱溶液滴定未知浓度的酸溶液） ①用移液管准确吸取一定量未知浓度的酸溶液放入锥形瓶中，滴入2～3滴酚酞指示剂。 ②记录碱式滴定管内溶液的初读数后进行滴定。滴定时左手挤压玻璃球处的橡皮管，右手拿锥形瓶，边 滴边振荡（绕一个方向），滴至溶液由无色变成浅红色，并在半分钟内浅红色不褪即到终点。记下末读数。 消耗碱的体积 = 末读数–初读数 ③再重复滴定一次，将有关数据记录下表。取两次测定数值的平均值，根据中和原理计算出未知酸的物 质的量浓度。 3. ①滴定管中装入溶液后，注意检查滴定管下端尖嘴部位有否气泡，如有应赶掉它，然后再记录初读数。 ②强碱滴定强酸时，一般选用酚酞作指示剂；强酸滴定强碱时，常用甲基橙作指示剂。 ③在滴定过程中，如碱液滴在靠瓶口处的内壁上，可用蒸馏水把它冲入瓶内。 ④如标准液滴在锥形瓶外或有其他损失时，都应该重做。 ⑤为便于观察颜色的变化，减少滴定误差，有时在锥形瓶下垫一张白纸。 4. 误差分析 以标准浓度的HCl滴定未知浓度的NaOH溶液的误差分析为例。滴定装置如图所示。 原理：V(HCl) c (HCl) = V(NaOH) c (NaOH) c (NaOH)= c (HCl)V(HCl) V(NaOH)。
1. 指示剂的选择 指示剂的变色范围要与酸碱中和后的溶液的pH越接近越好，且变色要明显，一般来说，酸碱用甲基橙；碱，若酸碱有一方是弱的，则应根据中和所得盐的pH来确定选用上 述哪种指示剂，一般来说，强酸与弱碱用甲基橙，强碱与弱酸用酚酞，石蕊不能作中和滴定的指示剂。 ⑶关键：①准确测定参加反应的两种溶液的体积；②准确判断中和反应是否恰好完全反应。 2. 中和滴定的仪器及试剂 （1 ）仪器酸式滴定管（不能盛放碱液、水解呈碱性的盐溶液、氢氟酸）碱式滴定管（不能盛放酸性溶液和强氧化性溶液） 锥形瓶、铁架台、滴定管夹、烧杯等 （2）试剂 标准溶液、待测溶液 指示剂 作用：通过指示剂颜色的变化确定终点 选择：变色要灵敏、明显（终点与变色范围一致） 3. 中和滴定操作（以标准盐酸滴定NaOH为例） ⑴准备： ①滴定管： a.检验酸式滴定管是否漏水； b. 洗涤滴定管后要用标准液洗涤2～3次，并排除管尖嘴处的气泡； c. 用漏斗注入标准液至“0”刻度上方2～3 cm处； d. 将液面调节到“0”刻度（或“0”刻度以下某一刻度）记下刻度。 ②锥形瓶：只用蒸馏水洗涤，不能用待测液润洗。 ③移液管：转移少量溶液用，其洗涤方法与滴定管相同。 ⑵滴定： ①用移液管（或碱式滴定管）取一定体积待测液与锥形瓶中，滴入2～3滴指示剂。 ②用左手握活塞旋转开关，右手不断旋转振荡锥形瓶，眼睛注视锥形瓶中溶液的颜色变化至橙色或粉 红色出现，记下刻度。 ⑶计算：每个样品作2～3次，取平均值求出结果。
酸碱中和滴定 实验报告
实验名称：酸碱中和滴定 时间实验（分组）桌号合作者指导老师 一：实验目的：用已知浓度溶液（标准溶液）【本实验盐酸为标准溶液】测定未知溶液（待测 溶液）浓度【本实验氢氧化钠为待测溶液】 二：实验仪器：酸式滴定管、碱式滴定管、锥形瓶、铁架台（含滴定管夹）。 实验药品： 0.1000mol/L盐酸（标准溶液）、未知浓度的NaOH溶液（待测溶液）、酸碱指 示剂：酚酞（变色范围8~10）或者甲基橙（3.1~4.4） 三：实验原理： c（标）×V（标）= c（待）×V（待）【假设反应计量数之比为1：1】 【本实验具体为：c（H+）×V（酸）= c（OH-）×V（碱）】 四：实验过程： （一）滴定前的准备阶段 1、检漏：检查滴定管是否漏水（具体方法：酸式滴定管，将滴定管加水，关闭活塞。静止放置5 ｍin，看看是否有水漏出。有漏必须在活塞上涂抹凡士林，注意不要涂太多，以免堵住活塞口。碱式滴定管检漏方法是将滴定管加水，关闭活塞。静止放置5ｍin，看看是否有水漏出。如果有漏，必须更换橡皮管。） 2、洗涤：先用蒸馏水洗涤滴定管，再用待装液润洗2~3次。 锥形瓶用蒸馏水洗净即可，不得润洗，也不需烘干。 3、量取：用碱式滴定管量出一定体积（如20.00ml）的未知浓度的NaOH溶液（注意，调整起始刻度 在0或者0刻度以下）注入锥形瓶中。 用酸式滴定管量取标准液盐酸，赶尽气泡，调整液面，使液面恰好在0刻度或0刻度以下某准确刻度，记录读数 V1，读至小数点后第二位。 （二）滴定阶段 1、把锥形瓶放在酸式滴定管的下面，向其中滴加1—2滴酚酞（如颜色不明显，可将锥形瓶放在白瓷板上或者白纸上）。将滴定管中溶液逐滴滴入锥形瓶中，滴定时，右手不断旋摇锥形瓶，左手控制滴定
中和试验
中和试验 中和试验是病毒或毒素与相应的抗体结合后，失去对易感动物的致病力的试验方法。 所属分类：免疫学 概述 动物受到病毒感染后，体内产生特异性中和抗体，并与相应的病毒粒子呈现特异性结合，因而阻止病毒对敏感细胞的吸附，或抑制其侵入，使病毒失去感染能力。Y3r3X。 中和试验(Neutralization Test)是以测定病毒的感染力为基础，以比较病毒受免疫血清中和后的残存感染力为依据，来判定免疫血清中和病毒的能力。GMlpm。 两种试验方法介绍 中和试验常用的有两种方法：一种是固定病毒量与等量系列倍比稀释的血清混合，另一种是固定血清用量与等量系列对数稀释(即十倍递次稀释)的病毒混合。XNI6d。 (一) 定血清－稀释病毒法(病毒中和试验) 1.病毒毒价的测定毒价单位：衡量病毒毒价(毒力)的单位过去多用最小致死量(MLD)，即经规定的途 径，以不同的剂量接种试验动物，在一定时间内能致全组试验动物死亡的最小剂量。但由于剂量的递增与死亡率递增不呈线性关系，在越接近100%死亡时，对剂量的递增越不敏感。而一般在死亡率越接近50%时，对剂量的变化越敏感，故现多改用半数致死量(LD50)作为毒价测定单位，即经规定的途径，以不同的剂量接种试验动物，在一定时间内能致半数试验动物死亡的剂量。用鸡胚测定时，毒价单位为鸡胚半数致死量(ELD50)或鸡胚半数感染量(EID50)。用细胞培养测定时，用组织细胞半数感染量(TCID50)。在测定疫苗的免疫性能时，则用半数免疫量(IMD50)或半数保护量(PD50)。shW6H。 (1) LD50的测定(以流行性乙型脑炎病毒为例)。 测定方法：将接种病毒，并已发病濒死的小鼠，无菌法取脑组织，称重、加稀释液充分研磨，配制成10-1悬液，3 000r/min离心20分钟，取上清液，以10倍递次稀释成10、10、10……10，每个稀释度分别接种5只小鼠，每只脑内注射0.03ml，逐日观察记录各组的死亡数。9ntgQ。