弧菌病

2010年华南地区的对虾养殖遭受了严重病害，尤其是对虾“偷死”情况严重。虽然种质退化、天气恶劣、养殖密度高、养殖水质恶化等难辞其咎，但从整个疫情上来看，对虾养殖中弧菌贯彻始终，可谓“魅影重重”。

2010年我国的对虾养殖业特别是华南地区的对虾养殖遭受到严重的病害肆虐，其危害程度严重的，发病率和排塘率均在50%以上，个别达到90%。总体去年的对虾病情表现出南北有较大差异的特点。从病情上看，南方病情重于北方，其中海南、粤东、粤西地区受灾最重；从病程上看，南方地区呈现发病范围广、发病速度快、传染性强、发病季节不明显等特点，头造虾减产严重；而以江浙、京津唐为中心的北方养殖区虽也有发病现象，但整体发病率不高、造成的损失不大；从症状上看，南方地区多表现为空肠空胃、偷死等症状，而北方对虾养殖区虽也曾出现了“偷死”现象，但该病整体发病率不高，对虾仍以传统的白斑病、桃拉综合症等为主。关于对虾病害的原因，虽然种质退化、天气恶劣、养殖密度高等难辞其咎，但总的来看，对虾养殖中处处体现出弧菌的身影，可谓“魅影重重”。本文就对虾养殖中的病原弧菌、弧菌病症状和防治等作简要综述，以期为今后对虾的健康养殖提供参考。

1 弧菌及弧菌病

弧菌(vibrio)是海洋环境中常见的细菌类群之一，该类细菌具很强的适应性和抗逆性，因此成为海水环境的优势种群，尤以溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌等占优势。目前，第九版《伯杰氏细菌学手册》收录了35种弧菌属细菌，在这些弧菌当中，部分种已被认为是鱼类的重要致病菌。据有关报道，鳗弧菌(V．anguillarum)、溶藻弧菌(V．alginolyticus)、哈维氏弧菌(V．harveyi)、灿烂弧菌(V．splendidus)、副溶血弧菌(V．parahaemolyticus)、创伤弧菌(V．vulnificus)、杀鲑弧菌(V．salmonicida)、海利斯顿氏菌(V．pelagius)、美人鱼弧菌(V．damsela)、奥氏弧菌(V．ordalii)、费氏弧菌(V．fischeri)、鲨鱼弧菌( V．carchariae)以及最小弧菌(V．mimicus)等10多种弧菌可以引起鱼类病害。随着人工养殖迅速发展，养殖水域生态变化，弧菌病已经成为海水养殖动物主要的细菌性病害之一。

由弧菌属（Vibrio）细菌引起的弧菌病(Vibriosis)是在世界各地养殖鱼、虾、蟹及贝类等水产动物中普遍流行且危害最大的细菌性疾病，给水产养殖业造成了严重的经济损失。据报道，弧菌属中的鳗弧菌、副溶血弧菌等在弧菌种群中占优势，广泛存在于自然海水中，导致弧菌病在全世界发生，且具有流行广、发病率高、危害大、死亡率高等特点，给鱼、虾、蟹及贝类等海水动物的养殖造成了巨大的影响。

由鳗弧菌、海弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌引起的疾病统称弧菌病。对虾常见的细菌性疾病有对虾幼体菌血病、烂鳃病、红腿病、烂眼病等，其主要的病原菌为弧菌、假单胞菌、气单胞菌等，其中弧菌科的许多种细菌，是引起对虾类细菌性疾病的重要病原（表1），并且作为海水中的常在菌群，弧菌也存在于健康的甲壳类个体的体内，Gomez等报道了万氏对虾的肝胰脏内可能存在着多种弧菌。当水中弧菌的数量为103-104cfu/mL（cfu/mL：每毫升样品中含有的细菌群落总数）时，对虾的红腿病症状明显加重。通过对比看出，对虾的发病程度和死亡情况与虾池水中弧菌的数量有一定的关系。有研究认为，当水中的弧菌数量达到104cfu/mL时，对虾就

可能被感染发病。

鳗孤菌是研究最早的病原弧菌。鳗孤菌分成5个生物型，即鳗孤菌生物A、B、C、D、E型。鳗孤菌能引起世界范围内的50多种淡海水养殖鱼类及其它养殖动物发生弧菌病。很多研究表明，鳗弧菌是多种养殖对虾感染发病的一种重要弧菌之一。Lightner和Lewis曾报道鳗弧菌是白对虾和褐对虾的病原菌。Delves Broughton等从实验室饲养的患病的中国对虾中也分离到鳗弧菌。

创伤弧菌有2个生物型。创伤弧菌生物I型及生物Ⅱ型。创伤孤菌生物Ⅱ型是海水养殖经济动物的致病菌，主要对鳗鲡致病，而且对虾也深受其害。创伤弧菌生物Ⅱ型是否引起疾病与水温及盐度的关系很大。盐度在0. 5-1.5、温度在25-30℃之间是该菌引发疾病的最佳条件之一。

溶藻弧菌也是海水养殖动物的常见致病菌。溶藻弧苗是中国对虾黑鳃、褐斑综合症的病原菌，也曾是台湾地区养殖的日本对虾的病原菌。

副溶血弧菌是一种嗜盐菌，主要存在于近海岸的海水、海底沉积物以及鱼类、贝类等海产品中。其流行广，危害较大，发病率、死亡率也高。副溶血弧菌作为最早发现的对虾病原菌，通常被认为是条件致病菌，广泛存在于海水中，但夏季海水中的含量比冬季要高。副溶血弧菌是中国对虾的病原菌。

杀对虾弧苗是1995年才首次报道的新病原弧菌。因为是在患病日本对虾中分离到该菌，所以Isbimaru等将其作为新种命名为杀对虾弧菌。该菌一般在夏、秋季引起疾病的暴发。

2 对虾弧菌病临床症状

弧菌病是对虾养殖中最为常见的、危害较大的一类疾病，其主要症状一般为：红腿、黄鳃、断须、额剑和尾部溃烂；对外界反应迟钝。部分虾体发黑和肌肉白浊；自患病对虾体内抽取的血淋巴凝固缓慢，颜色也由正常的淡蓝色变为微红色。解剖发现肝胰腺肿大、变红；中肠内无食物残留。虽然有研究表明，近年来所发生的对虾“偷死病”是由弧菌属的副溶血性弧菌引起，但其所引起的弧菌病在临床上有其自身特点：对虾少量进食或不进食，肠胃空无食物，肝胰脏明显萎缩，虾体不红（变得更透明）。染病对虾很少在水面游动，常常趴在池边，活力较弱，在土池中有扒沙泥现象，而且死亡一般发生在池底。

3 对虾弧菌病诊断

对于对虾弧菌病的病原菌检测，传统的方法是根据生理生化反应以及病理分析进行鉴定。利用生理生化方法鉴定必须进行多项理化指标的测定才能完成，对一般的实验室来说，要通过这种方法将细菌鉴定到种不是一件易事。从20世纪70年代起国外开始试行成套的标准化鉴定系统和与之相结合的计算机辅助鉴定系统，使细菌鉴定日益朝着简便化、标准化和自动化的方向发展。现代血清学、免疫学方法以及分子生物学方法的出现与发展为快速、准确、灵敏地检测病原菌提供了十分有效的方法，可以准确地将病原鉴定到种、甚至亚种的水平。目前已有血清学技术、单克隆抗体技术、荧光抗体技术、免疫酶技术、PCR技术以及核酸杂交等技术用于鳗

弧菌检测。

4 对虾弧菌病防治技术

由于弧菌是海洋环境中最常见的细菌类群之一，广布于河口海区以及海洋生物体中，同时弧菌是一类条件致病菌，当水体环境变化，弧菌尤其是致病性弧菌繁殖迅速，如数量超过阈值则容易引发对虾弧菌病。因此，对虾弧菌病的防治应采取“预防为主、重点监测、防治结合”的综合措施。

4.1预防

对虾弧菌病可以采取水体消毒、水质和底质改良、内服药物和添加免疫增强剂或者运用疫苗等措施进行预防。水体消毒可选用聚维酮碘、溴氯海因、双阳离子季胺盐络合碘等消毒剂。而对于高密度集约化养虾池，尤其在高温季节和养殖中后期，因大量投饵和水生生物代谢物的大量积累，池底富含有机物，引起水质恶化，水色发黑、发红，弧菌大量繁殖，应用生石灰、沸石粉或者光合细菌、芽孢杆菌等定期进行水质和底质改良，彻底改善底质，降解池底氨氮、硫化氢、亚硝酸盐等有害物质，有效分解底层有毒物质，营造有利于对虾生长的环境。平时在饲料中添加Vc、强力素、大蒜泥、卵磷脂、免疫多肽糖、核苷素等刺激对虾免疫系统，激化提高其免疫力，以达到提高抗病力的效果。

在疫苗研制方面，日本、美国和欧洲各国已有商品化的鳗弧菌疫苗用于预防香鱼、鲑科鱼类等鱼类的弧菌病。国内对鳗弧菌疫苗研究较多的还是灭活疫苗，亚单位疫苗以及一些特殊蛋白质的免疫原性。国内对副溶血弧菌疫苗研究的不多。陶保华等制成副溶血弧菌的福尔马林灭活疫苗，免疫接种后，对虾的成活率和抗感染能力有所提高，初步证实了对虾弧菌灭活疫苗的有效性。

4.2治疗

相比较而言，抗生素由于使用方便、见效快和疗效好等优点，仍是控制水产动物疾病的主要手段。但在目前尚未有各种弧菌特效药物的情况下，则主要采取治疗革兰氏阴性菌群的广谱性药物，如喹诺酮类药剂，依病情、鱼种大小，采取浸浴或药饵投饲。毛芝娟等分离到的4株弧菌对硫酸庆太霉素等抗菌素表现出强敏感性，对诺氟沙星、磺胺甲异恶唑等中度敏感。王晓洁等研究认为抑杀副溶血弧菌氟哌酸为首选，其次为土霉素和氟苯尼考。另外有研究认为氧氟沙星、培氟沙星、氟甲喹、复方新诺明等对致病弧菌有较强的抑制作用。

中草药是天然药物，具有无抗药性、无残留、无副作用、无环境污染、不引发药源性疾病，且抑菌杀菌效果明显，同时还能改善机体自身免疫力，提高抗病能力，备受人们关注。王玉娥等研究发现，溶藻弧菌、哈氏弧菌、副溶血弧菌、河流弧菌和麦氏弧菌对乌梅、黄连、木瓜和五倍子等具有较高的敏感性，并认为五倍子和黄连可以作为防治水产养殖动物弧菌病的首选中草药药物。毛芝娟等研究发现五倍子煎煮液对溶藻弧菌和副溶血弧菌均有很强的抑菌活性。梁利国等研究表明，苏木、五倍子、地锦草和石榴皮4种中药对鳗孤菌、副溶血弧茵、河口弧菌及霍乱弧茵等4种病原弧菌具有较好的抑菌和杀菌作用。这些表明，可以选择合适的中草药来

防治对虾弧菌类疾病。

另外，微生态制剂对于水体病原弧菌及水质控制方面有着独特的优势。杨淑专等人利用近岸海水中分离的噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus，Bd)对对虾病原菌及其它细菌的寄生作用进行研究表明，海洋蛭弧菌的寄生范围很广，对各种弧菌、气单胞菌、邻单胞菌有裂解作用。李戈强等研究了不同条件下蛭弧菌裂解河弧菌的研究，结果表明蛭弧菌对河弧菌具有明显的清除作用。黄亮等研究表明蛭弧菌可以有效地清除牡蛎养殖环境和体内的副溶血弧菌。

另外，光合细菌、芽孢杆菌、乳酸菌、硝化细菌等在改变水和沉积物微生物种群结构、消灭或减少病原微生物的数量、改善水质等方面对养殖生物产生有益影响。D.J.W.Moriarty在对虾养殖池中加入经选择的芽孢杆菌控制养虾池中发光弧菌取得良好效果。

还有一些植物提取物例如茶多酚、大蒜液等对弧菌也存在较强的杀灭作用。茶多酚是一种理想的天然抑菌剂。有研究表明大蒜液对副溶血弧菌的杀灭作用。王翔军研究认为，醋大蒜液对悬液中副溶血性弧菌作用30min，杀灭率可达100％。

海洋创伤弧菌

海洋创伤弧菌 两个螃蟹下肚，却让45岁的阿峰丢了命。医生说，夺去阿峰生命的是夏季比较高发的海洋创伤弧菌。记者今天从温医大附一院获悉，近期该院接连收治了四例感染该致命病菌的患者，其中两人经抢救无效死亡。 阿峰是温州泰顺人，平时喜欢喝酒，患有酒精性肝病。6月11日那天，阿峰吃了两个螃蟹，第二天就发现小腿有红肿，以为是撞到哪里了，他并没在意。但到了第三天早上，红肿从小腿蔓延到了大腿，小便急剧减少，还出现了休克。家人赶紧将阿峰送到温医大附一院急诊科，被确诊为感染了海洋创伤弧菌。医生介绍，阿峰在之前就患有酒精肝，还吃过螃蟹，可能就是因此感染上该病。遗憾的是，虽经医生极力抢救，阿峰还是在当天中午死亡。 温医大附一院副院长、急诊中心主任卢中秋介绍，创伤弧菌被称为“海洋中的无声杀手”，是一种栖息于海洋中的细菌，生吃海鲜或皮肤被海产品刺伤等都有可能感染。一旦感染，发病急、病情发展快，发病24至48小时内会出现下肢肿痛、溃烂、休克等，还可能导致多脏器功能不全，如不及时正确抢救，70%以上的患者会因多脏器功能衰竭死亡。“从5月底开始，已经接连收治了四例感染创伤弧菌的患者，其中两人死亡，另外一人目前还在救治中。但是病人能否被救过来，还难说。” 医生告诉你 有肝病爱喝酒是高危人群 温医大附一院副院长、急诊中心主任卢中秋 创伤弧菌感染称为“海洋中的无声杀手”，是一种栖息于海洋中的细菌，多发生在5~10月份，尤以夏季为高发。每年夏季，该院都会接诊3~5例。此病十分凶险，一旦感染，发病急、病情发展很快，发病24~48小时内就会出现下肢肿痛、溃烂，可引起感染性休克和多脏器功能不全。如不及时准确抢救，70%以上

小丑鱼常见细菌疾病解析

小丑鱼常见细菌疾病解析 小丑鱼 相信各位鱼友一定对小丑鱼这个品种不会陌生，在饲养过程中，小丑鱼会比较容易出现细菌性疾病，如何才能判断并作出正确的治疗呢？小编为你整理了六种小丑鱼常见的细菌性疾病。 一、结核病 这种病菌非常常见，在体外发病的，在皮肤上会出现一些块状淡色云斑。而体内发病的，在内脏中有黄色损伤。这种病多为慢性病，初期失去食欲，体表有裂痕，皮肤上生肿瘤以及鳃部裂开；最后眼睛突出，鱼儿肝、脾、心脏等器官严重受损害而死亡。如果遇到急性结核病则1～2天内水族箱内鱼类全部死亡。 治疗方式：对病鱼尽早治疗，进行隔离。用四环素溶液进行药浴，并对水族箱水体用UV杀菌器进行消毒。 二、弧菌病 这类病也是很常见的，发病时，皮肤出现淡色斑点，食欲不振，行动滞缓，鳍和体部都有出血的现象发生。 治疗方式：用磺胺类药，每18升水放入1粒氯霉素，使鱼在治疗水箱中生活一周，每天换一半药水，同时使水温保持一定，直到痊愈。 三、柱状病 又称作竖鳞病。发病的状态为鱼鳞竖立，身体浮肿。这种病是柱状细菌引起的，细菌从受伤的部位进入鱼体而发病。

治疗方式：和弧菌病一样。 四、细菌性鳃病 发病的病毒是粘液菌，属于格兰式阳式细菌。发病表现为大部分皮层组织溃疡、鳃充血、鳃烂。此病在水温高于28℃时、水中pH过低，有机物含量过高时易发生。 治疗方式：把病鱼隔离，用50毫克/升氯霉素比例调配治疗的药浴，进行7天时间可以痊愈。 五、溃疡病 此病是一种革兰氏阴性菌引起，症状为烂尾、烂鳍。原因大多由投入的食物或水中的不洁净物而引起的。 治疗方式：新霉素、氯霉素药浴，50毫克/升，为期7天。 六、败血症 表现的症状为皮肤溃烂、出血、眼球浑浊、脱肛，死亡率高达80%以上。通常大多在夏天高温时或饲养密度过大，含氧量下降时发生，目前还无特效药。 治疗方式：一旦发现，及时隔离，对病鱼可在饲料中加喂“呋喃唑酮”，或用含抗生素的药物浸泡。

弧菌病

2010年华南地区的对虾养殖遭受了严重病害，尤其是对虾“偷死”情况严重。虽然种质退化、天气恶劣、养殖密度高、养殖水质恶化等难辞其咎，但从整个疫情上来看，对虾养殖中弧菌贯彻始终，可谓“魅影重重”。 2010年我国的对虾养殖业特别是华南地区的对虾养殖遭受到严重的病害肆虐，其危害程度严重的，发病率和排塘率均在50%以上，个别达到90%。总体去年的对虾病情表现出南北有较大差异的特点。从病情上看，南方病情重于北方，其中海南、粤东、粤西地区受灾最重；从病程上看，南方地区呈现发病范围广、发病速度快、传染性强、发病季节不明显等特点，头造虾减产严重；而以江浙、京津唐为中心的北方养殖区虽也有发病现象，但整体发病率不高、造成的损失不大；从症状上看，南方地区多表现为空肠空胃、偷死等症状，而北方对虾养殖区虽也曾出现了“偷死”现象，但该病整体发病率不高，对虾仍以传统的白斑病、桃拉综合症等为主。关于对虾病害的原因，虽然种质退化、天气恶劣、养殖密度高等难辞其咎，但总的来看，对虾养殖中处处体现出弧菌的身影，可谓“魅影重重”。本文就对虾养殖中的病原弧菌、弧菌病症状和防治等作简要综述，以期为今后对虾的健康养殖提供参考。 1 弧菌及弧菌病 弧菌(vibrio)是海洋环境中常见的细菌类群之一，该类细菌具很强的适应性和抗逆性，因此成为海水环境的优势种群，尤以溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌等占优势。目前，第九版《伯杰氏细菌学手册》收录了35种弧菌属细菌，在这些弧菌当中，部分种已被认为是鱼类的重要致病菌。据有关报道，鳗弧菌(V．anguillarum)、溶藻弧菌(V．alginolyticus)、哈维氏弧菌(V．harveyi)、灿烂弧菌(V．splendidus)、副溶血弧菌(V．parahaemolyticus)、创伤弧菌(V．vulnificus)、杀鲑弧菌(V．salmonicida)、海利斯顿氏菌(V．pelagius)、美人鱼弧菌(V．damsela)、奥氏弧菌(V．ordalii)、费氏弧菌(V．fischeri)、鲨鱼弧菌( V．carchariae)以及最小弧菌(V．mimicus)等10多种弧菌可以引起鱼类病害。随着人工养殖迅速发展，养殖水域生态变化，弧菌病已经成为海水养殖动物主要的细菌性病害之一。 由弧菌属（Vibrio）细菌引起的弧菌病(Vibriosis)是在世界各地养殖鱼、虾、蟹及贝类等水产动物中普遍流行且危害最大的细菌性疾病，给水产养殖业造成了严重的经济损失。据报道，弧菌属中的鳗弧菌、副溶血弧菌等在弧菌种群中占优势，广泛存在于自然海水中，导致弧菌病在全世界发生，且具有流行广、发病率高、危害大、死亡率高等特点，给鱼、虾、蟹及贝类等海水动物的养殖造成了巨大的影响。 由鳗弧菌、海弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌引起的疾病统称弧菌病。对虾常见的细菌性疾病有对虾幼体菌血病、烂鳃病、红腿病、烂眼病等，其主要的病原菌为弧菌、假单胞菌、气单胞菌等，其中弧菌科的许多种细菌，是引起对虾类细菌性疾病的重要病原（表1），并且作为海水中的常在菌群，弧菌也存在于健康的甲壳类个体的体内，Gomez等报道了万氏对虾的肝胰脏内可能存在着多种弧菌。当水中弧菌的数量为103-104cfu/mL（cfu/mL：每毫升样品中含有的细菌群落总数）时，对虾的红腿病症状明显加重。通过对比看出，对虾的发病程度和死亡情况与虾池水中弧菌的数量有一定的关系。有研究认为，当水中的弧菌数量达到104cfu/mL时，对虾就

几种常见的鱼类致病菌及其培养鉴定方法

爱德华氏菌属1. 迟缓爱德华氏菌 特征：迟缓爱德华氏菌为革兰氏阴性病原菌，短杆菌，大小多在（0.5 ～1）μｍ×（1-3）μｍ，无荚膜，亦不形成芽孢，为周毛菌，能运动。生长温度范围为15-42℃，最适为37℃，适宜pH值范围为5.5-9.0。但以pH 7.2较好，耐食盐浓度为0-4%， 培养：该菌在普通营养琼脂培养基上25℃培养24，能形成圆形隆起灰白色湿润并带有光泽呈半透明状的菌落直径约为0.5-1mm，在含5%-10%血液的普通营养琼脂培养基平板 。 2.鲇鱼爱德华氏菌 特征：鲇鱼爱德华氏菌属于爱德华氏菌属，在该属细菌中最难培养。菌体大小约1um×（2-3）um，为小直杆菌，革兰氏染色阴性，无荚膜，不形成芽孢，兼性厌氧，25℃时有动力，在37℃时无动力。菌落大小为0.5mm 左右，圆形光滑、边缘整齐、稍隆起。由鲇鱼爱德华氏菌所引起的鱼类爱德华氏菌病主要是鲇鱼肠道败血症。该病有季节性，常发生于春季和秋季，鳙等可被感染发病，病鱼在咽部及口腔附近出现皮肤出血或淤血、鳃色变淡、突眼症状，解剖可见肾脏和脾脏肿胀，肝脏出血且有坏死灶，腹膜内有血性腹水。

培养：鲇鱼爱德华氏菌除为该属细菌中难养的。在培养基平板上生长较缓慢常需培养约48h才能形成直径1-2mm圆形光滑边缘整齐稍隆起的无色小菌落；二是尽管爱德华氏菌的生化特性都是以37℃培养为明显，但鲇鱼爱德华氏菌则更喜欢较低的温度其最适一般为25-30℃，在37℃时生长缓慢或完全不能生长，尤其是运动力只有在约28℃时才能表现出来且是微弱的。 弧菌属 特征：河流弧菌属于弧菌属，菌体大小为（0.5-0.8）μｍ×（1.8-2.5 ）μｍ，为革 。 24h) 1. 嗜水气单胞菌 嗜水气单胞菌属于气单胞菌属，革兰氏染色阴性；兼性厌氧，具有呼吸和发酵代谢类型；能利用葡萄糖和其它糖类产酸，常产气无芽孢，不产生荚膜，散在或成双排列，端生单鞭毛（有运动性）的短杆菌，两端钝圆，大小多在（0.6-0.7）μｍ×1.4μｍ。菌落特征为圆形光滑、边缘整齐、较隆起、不透明的浅灰黄白色。 嗜水气单胞菌寄主广泛，可引起大宗淡水鱼等发生相应的细菌性败血症，危害鱼的种类最多、地区最广、损失最大。

小龙虾弧菌病防治技术

小龙虾弧菌病防治技术 弧菌（Vibrio）菌体只有一个弯曲，呈弧状或逗点状。革兰染色阴性，长0.8~3μm、宽0.5~1.5μm，无芽胞和荚膜，有菌毛和一根单鞭毛，运动非常活泼。悬滴观察，可见其呈穿梭或流星样运动。。 一、生长条件 弧菌适应温度10-35℃，最适温度25℃左右，适应pH为6-10，于pH8.0-9.0的碱性环境中生长更佳。 解释：从生长条件来看，弧菌全年都存在，温度25℃、pH8-9生长最快，这就是为什么5月、6月是小龙虾弧菌病的发病高峰期，而5月以前和7月开始以后发病几率就大大降低。 二、常见致病种类 目前弧菌有91种，引起水生动物发病的主要有：霍乱弧菌、哈维弧菌、溶藻弧菌、鳗弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌等。 三、弧菌的致病物质 1、鞭毛、菌毛： 弧菌鞭毛运动有助于细菌穿过肠粘膜表面的粘液层，借菌毛粘附于肠粘膜，刺激养殖动物，使养殖动物食欲下降，肠壁变薄，甚至出血（小龙虾的血氧化后呈蓝色，也就是蓝血。并造成养殖动物持续应激，体力和抗病力显著降低。 2、胃肠毒素： 刺激细胞内的腺苷酸环化酶活化，使ATP（三磷酸腺苷）转化为cAMP （环磷酸腺苷），致细胞内cAMP（环磷酸腺苷）浓度升高，导致内皮细胞钠离子和氯离子的吸收被抑制，并大量分泌氯离子和碳酸氢根离子，由于大量电解质分泌至胃腔，使胃腔内渗透压升高，大量水分由细胞进入胃腔，进而使小龙虾胃部出现大量积液（弧菌感染严重时打开头胸甲会有积液）。 四、池塘中弧菌的分布情况

百分之九十以上的池塘，底泥中弧菌数量远超水体中弧菌数量，有时水体无法检测出弧菌，底泥中却依旧含有相当多的弧菌。主要原因是弧菌是异养生物，通常都依附在有机质和腐殖质上，有机质和腐殖质属于大分子物质，大部分会沉到水底。 五、弧菌病的发病特征 该菌常年均可发生，高峰期在5-6月，潜伏期5-72小时，平均24小时，对于小龙虾最基本的发病症状就是肠炎和胃积水，该病恢复较快，但病后免疫力不强，可重复感染。 六、诊断： 龙虾断须断爪（断须处发白），四处游走且爬坡上草，活力很差，受到惊吓也不逃跑，解刨后有肠炎（空肠、肠道有气泡、蓝色肠道等），严重者胃部有积液，一般发病的中虾大虾居多。 七、降低龙虾感染弧菌的方法 1、控制水体中的弧菌： 小龙虾的肠道菌相和水体菌相相同，水体中微生物的组成将直接影响到小龙虾肠道的菌相组成。如果水环境中的弧菌数量或者占比很少，就可以预防龙虾肠道弧菌感染，这也是定期进行水体消毒杀菌的意义，建议碘制剂和噬菌蛭弧菌制剂交替使用。 2、控制龙虾肠道内弧菌占的比例： 控制使用有定殖能力的乳酸菌，使乳酸菌在肠道内形成优势种群，黏附在肠道内壁上形成生物屏障，使弧菌沾不到肠壁上，免受感染，并且排出体外，同时乳酸菌产生的乳酸也可以抑制弧菌的生长（调节pH）。 3、抗菌类药物的使用: 恩诺沙星、氟苯尼考、三黄散等抗菌药物的使用，当然也可以内服噬菌蛭弧菌,不过不建议大家长期使用抗菌类产品。

乳酸菌在水产养殖中的应用

乳酸菌在水产养殖中的研究进展 乳酸菌是一群能从可发酵性碳水化合物中产生大量乳酸的革兰氏阳性细菌的通称。乳酸杆菌有44个种，连同亚种共51个种，是革兰氏阳性、无芽孢、细长、有弯曲的杆菌。有9个属：其中5个属呈球状，如乳酸球菌(1actococcus)、链球菌(streptococcus)等；4个属呈杆状，如乳酸杆菌(1actobacillus)、双歧杆菌(bifidobactrium)等。 乳酸菌是被人类作为食品微生物利用的一大类菌，尤其在增强牛奶保健功能、提高青贮品质、提高畜禽生产性能、降低畜产品贮藏对肉品风味的影响等方面已取得较好效果，广泛应用于食品、医药、轻工业和畜牧业等领域。目前在水产上对乳酸菌的报道主要集中于乳酸菌在水产动物肠胃和其他内脏器官中的栖息情况。乳酸菌在水产上的应用较多，主要是拌入饲料一起投喂给养殖动物，或做为EM菌的主导菌在水体泼洒。 1、生理功能及代谢产物 1.1 乳酸菌的生理功能 乳酸菌在动物体内能发挥许多生理功能。大量研究资料表明，乳酸菌能调节动物胃肠道正常菌群、维持微生态平衡，从而改善胃肠道功能；提高食物消化率和生物效价；降低血清胆固醇，控制内毒素；抑制肠道内腐败菌生长；提高机体免疫力等。乳酸菌通过发酵产生的有机酸、特殊酶系、细菌表面成分等物质具有一定生理功能，可刺激组织发育，对机体的营养状态、生理功能、细胞感染、药物效应、毒性反应、免疫反应、肿瘤发生、衰老过程和应激反应等产生作用。 1.2 乳酸菌的代谢产物 乳酸菌最终代谢产物除乳酸、乙酸外，还能代谢产生其他形式的有机酸、细菌素、过氧化氢、乙醇和罗伊氏素等多种抑菌物质。这些代谢产物不仅能抑制致病菌的生长，对其近缘相关的种或菌株也有生长抑制作用。乳酸菌产生的乳酸现已证明无论是在体内还是在体外都可以对大肠杆菌等革兰氏阴性菌产生抑制作用。尽管乳酸抑制革兰氏阴性菌的作用机理目前尚无明确结论，但其中的一个原因是乳酸菌发酵的代谢终产物之一是乳酸，乳酸的积累导致周围环境pH值下降，降低氧化还原点位，可对许多革兰氏阳性或阴性细菌产生广泛的抑制作用。有研究证明，双歧杆菌在发酵过程中产生的未解离的乳酸是对潜在肠道致病菌和腐败菌拮抗作用的主要成分。乳酸菌产生的细菌素是一大类具有抑菌活性的多肽或蛋白类物质，除对近缘相关的菌株具有抑制效果外，某些细菌素如Nisin具有广谱性的抑菌能力。1933年Whitehead H R等从乳酸菌分离出一类细菌素，在1947年将其命名为尼生素(Nisin)。1953年，尼生素首先在英国上市，随后在48个国家开始利用尼生素，1988年尼生素通过美国FDA批准作为食品添加剂。乳酸菌产生的过氧化氢能够激活牛乳中的过氧化氢酶—硫氰酸系统，抑制和杀灭革兰氏阴性菌、过氧化氢酶阳性细菌如假单孢菌属、大肠杆

海水养殖鱼类的病害及其防治.

海水养殖鱼类的病害及其防治 1 虹彩病毒病 病原：虹彩病毒(Iridovirus。流行：发病水温为20～25℃，易感染鱼类是卵型鲳鲹、牙鲆、美国红鱼、真鲷等。症状：病鱼体色变黑，无力地游在水面，个别眼球突出、出血，体表和鳍出血，鳃褪色，有的鳃上发现黑褐色或黑色颗粒；解剖观察内脏诸器官褪色，脾脏肿大；脾脏组织切片可看到许多异常肥大的细胞。防治：尚无有效方法，以防为主。(1将水温提高到25℃以上；(2避免过密饲养，保持良好水质，投喂多糖类、维生素等以提高鱼体的免疫力；(3用50 mg／L聚维酮碘处理受精卵20 min；(4必要时投喂板蓝根、大青叶、三黄粉等中草药制剂，同时配合投喂VC；(5注射虹彩病毒细胞灭活疫苗，可有效防治此病。 2 淋巴囊肿病 病原：淋巴囊肿病毒(Lymphocystic virus。流行：多发生在高水温期，主要感染鲈形目、鲽形目。鳃、损伤的皮肤、鳍是病毒入侵的地方。症状：病鱼的头、皮肤、鳍、尾部及鳃上出现小水泡状肿胀物，使皮肤呈砂纸状；肿胀物大部分分布在血管附近，成熟的肿胀物可轻微出血；肝脏颜色发白。军曹鱼体上的淋巴囊肿细胞呈集聚性出现，随着病情的发展，可形成一个大的囊肿物。防治：(1发现病鱼及时清除，避免与发病鱼池的鱼接触；(2发病初期用10％的聚维酮碘溶液涂抹患处，同时配合投喂聚维酮碘溶液和三黄散等抗病毒中药。 3 病毒性出血败血症 病原：艾特韦病毒(Egtved virus。流行：发病季节为6～l1月，流行季节为9～11月；当年鱼和2龄鱼均可感染。易感染鱼类是花鲈、大菱鲆等。症状：病鱼体表两侧、上下额、吻部、胸鳍、背鳍基部等均有不同程度的出血、充血，严重时患病鱼部分鳞片脱落，有的溃疡；解剖可见肝脏失血，肠管充血。防治：(1杜绝从亲鱼或苗种带入病毒；(2放养前苗种用20 mg／L聚维酮碘淡水溶液浸泡5 min；经

鳗弧菌卵黄抗体的制备[设计+开题+综述]

开题报告 生物技术 鳗弧菌卵黄抗体的制备 一、选题的背景与意义 鳗弧菌是一种对水产鱼类具有严重危害性的细菌病原。目前，鳗弧菌引起的水产养殖动物疾病在世界范围内广泛流行，可感染鱼、虾、鳖类，并常给水产养殖业造成巨大的经济损失。鳗弧菌在危及水产鱼类的同时，也会通过食物链危害人类健康。因此，研究由鳗弧菌等弧菌引起的细菌性疾病的相关治疗方法具有重要的意义。 目前在动物细菌性疾病防治上使用抗生素过多，造成药物残留。破坏环境的同时极大的打击了消费者的信心。而近些年来卵黄抗体的发展为弧菌病的治疗提供了良好建议。卵黄抗体，是指从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体。当用某种抗原免疫产蛋母鸡时，母鸡经免疫应答后，可从其不断产出的鸡卵黄中得到大量均一高效的卵黄抗体IgY。它能预防和治疗多种细菌性和病毒性疾病,无任何毒副作用,在很大程度上可替代抗生素和化学合成药物,同时还具有促生长的作用。卵黄抗体已成为特异性抗体最方便、最廉价的来源，在动物疾病防治上取得了喜人成绩。 本实验的目的是借鉴陆生人、畜、禽相关研究的成功经验，以纯培养的鳗弧菌作为抗原，探讨鳗弧菌卵黄抗体的制备技术,并研究其对人工感染的保护作用，以期对水产鱼类的细菌性疾病提供良好的治疗建议，并为水产鱼类的养殖生产提供指导意义。 二、研究的基本内容与拟解决的主要问题： 基本内容： 1、培养鳗弧菌，制作灭活疫苗。 2、用鳗弧菌疫苗对蛋鸡多点注射，经初免和加强免疫后，收集鸡蛋。 3、由收集的鸡蛋纯化卵黄抗体 4、检测纯化的卵黄抗体效价； 拟解决的问题：

借鉴陆生畜禽病原相关研究的成功经验，经多次免疫制备出抗鳗弧菌的高免鸡蛋，建立简易、高效的由鸡蛋纯化鳗弧菌卵黄抗体的技术，建立ELISA鳗弧菌卵黄抗体的技术。 三、研究的方法与技术路线： 1、取实验室已分离、鉴定后保存的鳗弧菌菌种,经活化后扩大培养，离心沉淀、 用PBS清洗后悬浮、计数； 2、用甲醛对鳗弧菌进行灭活，经涂板检测确定灭活即为抗原鳗弧菌卵黄抗体的 制备； 3、选择健康蛋鸡，用上述抗原多点注射免疫，免疫3-4次； 4、收集高免鸡蛋，用水稀释法和硫酸铵沉淀法纯化卵黄抗体； 5、用ELISA进行卵黄抗体的效价检测。 技术路线： 四、研究的总体安排与进度： 2010.10-2010.12 查阅资料，撰写开题报告和综述。 2011.01-2011.02 抗原的制备、蛋鸡免疫。 2011.03-2011.04 抗鳗弧菌卵黄抗体的纯化和效价检测。 2011.04-2011.05 实验数据的整理、分析，撰写论文，结题、答辩。 五、主要参考文献： [1]杨菲菲．卵黄抗体研究进展及应用［J］．现代农业科技，2008，（20）：231－232．

小龙虾弧菌病

小龙虾弧菌病防控技术 弧菌病是由弧菌属细菌引起的在世界各地海水养殖鱼、虾、贝类等动物中普遍流行，危害最大的细菌性疾病。 弧菌不单单可以引起海水养殖水生动物的疾病，也可以感染淡水养殖的水生动物，致使其发病。 据报道，弧菌属中的鳗弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌等在弧菌种群中占优势，广泛存在于自然界的海、淡水中。导致弧菌病在全世界水产养殖范围发生。且具有流行性广、发病率高、死亡率高、危害大等特点。 感染弧菌的小龙虾活力减弱、爬边、反应迟钝，触须容易断折，头胸甲外壳处有积水，黑膜发灰同时伴随有部分肠炎。 感染初期，小龙虾会出现断须，红爪，烂尾，甲壳溃疡；随着感染的加重，会出现空肠空胃、肝胰脏发白的现状；感染后期，小龙虾会出现肝胰脏坏死，头胸甲积水，引起大量死亡。弧菌真正意义上来说，属于一种条件致病菌。弧菌病本身的爆发多数由于养殖池塘底质变坏、水体菌相失衡，导致有害病菌的大量滋生；外界各种环境因素突然变化，导致小龙虾应激反应；以及营养不良，小龙虾体质下降等多方面作用的结果。 小龙虾弧菌病的爆发，会给养殖户带来很严重的损失，我们养殖过程中主要是从源头上进行预防. 1.改底解毒 小龙虾属于底栖动物，养殖池底又是最容易积蓄残饵粪便等有机物质的位置，只有加强养殖池塘底部管理，给小龙虾创造一个良好的生存环境，为其成功养殖奠定基础。 2.消毒杀菌

随着养殖的进行，有机物质的增多，为微生物的生长创造了条件，为了防止弧菌等有害微生物的大量繁殖，定期对养殖水体进行消毒杀菌处理是预防疾病爆发行之有效的措施。 1）每日对水体进行消毒处理，可以杀灭部分弧菌，防止疾病爆发。 2）蛭弧菌对弧菌具有很强的裂解能力，利用弧菌的营养物质进行生长繁殖。每7天使用2次蛭弧菌产品外泼水体，可以有限减少水体中弧菌的数量，同时可以拌饲投喂，减少弧菌病的发病频率。 3.调水 养殖水体是一个小型的生态系统，有害微生物和有益微生物共同生活在其中，具有相互抑制的关系，有益菌的数目多了，有害菌自然就无法繁殖。 4.增强体质 维生素是维持生命的必要元素，人类每天需要补充大量的维生素，水产动物亦是如此，但小龙虾、螃蟹和南美白对虾等动物肠道较短、吸收能力较差，因此维生素的颗粒越小越容易吸收。 养殖过程中，要拌饲投喂复合丁酸梭菌和多维应激宁，可以改善虾体的肠道菌群，提高虾体的免疫力，促进饲料的消化吸收，降低饵料系数。

创伤弧菌检测方法

申报近海水域创伤弧菌检出率调查的检测方法确定 1.概述 创伤弧菌是一种可能致命的病原菌，深入了解水体、海产品等各种环境中创伤弧菌的生态学，将有助于降低消费者感染创伤弧菌的风险。目前创伤弧菌检测方法主要有传统分离鉴定方法、免疫学及基因检测方法[1]，介于当前本中心的实验条件，适宜采用传统分离鉴定方法。以下对该方法进行表述。 2.传统分离鉴定方法 2.1仪器与试剂 2.1.1创伤弧菌标准菌株 创伤弧菌属于危害程度第三类病原微生物[2]，本实验室已配备生物安全柜，具有BSL-2实验室水平，满足第三类病原微生物的操作要求。在准备阶段，需购买创伤弧菌标准菌株（ATCC 27562）进行方法确认。 2.1.2选择性培养基 选择性原理：①以纤维二糖为碳源，创伤弧菌利用纤维二糖后产生黄色菌落，便于与其他菌落区分。②添加了抗生素，所添加的抗生素对创伤弧菌的抑制作用较小，而对其他大多数细菌的生长具有较强的抑制作用。③培养温度高，在较高温度条件下，创伤弧菌能正常生长，而其他大多数细菌在这个温度下生长受到抑制或根本就不能存活。在

环境分离中分离创伤弧菌时，最好是先用CC琼脂培养基、VVM培养基或VVMc培养基进行培养，在获得创伤弧菌菌株后，再用CPC 琼脂培养基或mCPC琼脂培养基进行纯化，这样可以再较短的时间内获得创伤弧菌纯化菌株[3]。此外在海产品检测中，用TCBS进行分离也是一种有效的常规方法。 2.2检测方法 2.2.1样品采集 拟与宁海县海洋渔业局合作，对近海水产品和海水按区域进行样品采集，其中近海水产品主要为贝壳类养殖水产品。海水采集按季节（气候条件）分区域按《海洋环境监测规范》操作；海产品根据海水采集点分别就近采集，以获取其关联性信息。计划采集样品200份。2.2.2分离鉴定 2.2.2.1 海水样品 水样处理：采集的海水样品摇匀后量取100mL，加入无菌Tween 80至终浓度为5×10-6g/mL，振荡20~30min成悬浮液，用无菌生理盐水按10倍浓度梯度系列振荡稀释[4]。 分离鉴定：采用选择性培养基进行平板涂布，选择3个连续的适宜稀释度，每个稀释度涂布2个平板，于36℃进行培养2-5d。对平板上生长的可疑菌落进行生化鉴定。 2.2.2.2 海产品 海产品处理：称取5g可食部分样品加入200mL碱性蛋白胨进行无菌均质，置于30℃培养18~24小时。取培养物进行10倍梯度稀释，选

食品中致病性弧菌的检测和计数NMKL No 156

食品中致病性弧菌的检测和计数 该NMKL法尚未经协同研究证实 1.适用范围 本法可用于检测和计数食品中的副溶血性弧菌，霍乱弧菌，刨伤弧菌和溶藻弧菌。 这些对人类有致病性的弧菌可能由粪便污染或水源受到污染而在食品中出现。在食品，尤其是贝类、蜊蛄和鱼的微生物学控制和与疾病爆发有关的微生物学调查中可能需要对该菌进行检测。 2.定义 弧菌是兼性厌氧，有动力，革兰氏阴性，常呈逗号形的杆菌。钠离子是大多数菌株（霍乱弧菌除外)所必需的一种生长因子。大多数菌种为氧化酶阳性，过氧化氢酶阳性，发酵葡萄糖不产气。它们一般出现于盐浓度范围较宽的水域环境及海洋动物的表面和肠道中。一些菌株也可在淡水中发现(霍乱弧菌)。 副溶血性弧菌呈现下列的生物化学反应模式：氧化酶阳性，在42℃生长，精氨酸脱氢酶阴性，赖氨酸脱羧酶阳性，不发酵蔗糖但可将硝酸盐还原为亚硝酸盐。可发酵糖类但不产气。在盐(氯化钠)浓度为6％时不能生长。 霍乱弧菌有如下的生物化学反应特性：氧化酶阳性，在42℃生长，缺少精氨酸脱氢酶，发酵蔗糖，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐。在无钠离子时可以生长。在盐浓度为3％时可以生长，而盐浓度为8％时不能生长。 创伤弧菌呈现如下的生物化学反应模式：氧化酶阳性，在42℃生长，缺少精氨酸双水解酶，赖氨酸脱羧酶阳性，不能发酵蔗糖但可将硝酸盐还原为亚硝酸盐。在无盐或盐浓度为8％的培养基中不能生长。

溶藻弧菌见表1。 所有弧菌在不同程度上都会受到0／129弧菌抑制剂(0／129 Vibrostaticum)的抑制。 3.参考文献 NMKL Method No.91，2nd ed.1988：Pretreatment of foods for microbiological examination. NMKL Report No.5，2nd edition，1994：Quality Assurance Guidelines for Microbiological Laboratories. 4.原理 将欲检测该菌的已知量的食品接种于一种液体选择性培养基中，培养后涂布样品于一种固体选择性培养基上。 可疑菌落经进一步生物化学检验。 此外，可将已知量的可疑食品直接接种于一种选择性固体培养基上进行定量测定。 5. 培养基和试剂 5.1稀释剂 将8.5g氯化钠和1.0 g蛋白胨溶于1000mL蒸馏水中并煮沸，调节PH使之灭菌后25℃为7.0±0.2。分装稀释剂于试管或广口瓶中以使12l℃高压灭菌20min 后分别含9.0±0.2ml和90±2ml。 5.2液体选择性培养基 5.2.1含2％盐的碱性蛋白胨水 酵母浸膏3g

第8章 弧菌科

第八章弧菌科 一、选择题 （一）、A1型题（标准型） 1.弧菌科细菌区别于肠杆菌科细菌的特征为 A.氧化酶阳性 B.有动力 C.发酵葡萄糖 D.有鞭毛 E.吲哚试验阳性 2.弧菌科细菌区别于非发酵菌的特征为 A.氧化酶阳性 B.发酵葡萄糖 C.有动力 D.有鞭毛 E.无芽孢 3.霍乱肠毒素通过激活何种物质使机体陷于脱水和电解质、酸碱平衡紊乱状态 A.ATP B.cGMP C.cAMP D.ADP E.Ca2+ 4.下列哪种微生物可导致患者粪便呈“米泔水”样 A.大肠杆菌 B.志贺氏菌 C.伤寒沙门氏菌 D.霍乱弧菌 E.金黄色葡萄球菌 5.霍乱弧菌根据下列哪种抗原进行分群和分型 A.H抗原 B.Vi抗原 C.O抗原 D.K抗原 E.M抗原 6.霍乱弧菌在TCBS平板上的菌落颜色为 A.绿色 B.黄色 C.深蓝色 D.黑色 E.灰褐色 7.我国沿海地区及海岛食物中毒最常见的病原菌为 A.霍乱弧菌 B.副溶血性弧菌 C.金黄色葡萄球菌 D.拟态弧菌 E.伤寒沙门氏菌 8.副溶血弧菌的致病因子为 A.TSST-1 B.CT C.TDH D.ST E.LT 9.副溶血性弧菌生长所需NaCl的最适浓度为 A.3.5% B.6% C.8% D.9% E.10% 10.副溶血性弧菌在TCBS琼脂平板上形成的菌落颜色为 A.黄色 B.红色 C.黑色 D.蓝绿色

E.灰褐色 11.具有神奈川现象的细菌是 A.大肠埃希菌 B.霍乱弧菌 C.副溶血性弧菌 D.小肠结肠炎耶尔森菌 E.幽门螺杆菌 12.在致病性弧菌中,引起疾病最为严重的是 A.拟态弧菌 B.创伤弧菌 C.溶藻弧菌 D.河弧菌 E.霍乱弧菌 13.弧菌属中最耐盐的致病菌是 A.拟态弧菌 B.创伤弧菌 C.霍乱弧菌 D.河弧菌 E.溶藻弧菌 14.既能分解色氨酸又能还原硝酸盐的试验是 A.霍乱红试验 B.甲基红试验 C.ONPG试验 D.七叶苷试验 E.苯丙氨酸脱氨酶试验 15.霍乱红试验 A.可鉴别古典生物型和Eltor生物型 B.可鉴别霍乱弧菌和副溶血性弧菌 C.为霍乱弧菌特异试验 D.无特异性 E.结果观察无需加入酸性试剂 16.气单胞菌属和邻单胞菌属的鉴别试验常用 A.脲酶试验 B.O/129敏感试验 C.吲哚试验 D.氧化酶试验 E.触酶试验 17.可用于鉴别弧菌属和邻单胞菌属的是 A.氧化酶试验 B.发酵葡萄糖 C.O/129敏感试验 D.TCBS生长试验 E.有动力 （二）、A1型题（否定型） 1.弧菌科的细菌不包括下列哪一菌属 A.弧菌属 B.气单胞菌属 C.邻单胞菌属 D.发光杆菌属 E.弯曲菌属 2.弧菌属细菌的特点下列哪一项除外 A.氧化酶阴性 B.发酵葡萄糖 C.TCBS生长 D.需要Na+ E.分解甘露醇 3.下列哪一项不符合霍乱弧菌的特点 A.NA上可生长 B.耐碱性 C.发酵蔗糖 D.在含9%NaCl培养基上可生长 E.氧化酶阳性 4.下列哪项生化试验不能用于鉴别霍乱弧菌古典生物型和Eltor生物型 A.V-P试验 B.鸡红细胞凝集试验

华南地区海水养殖鱼类弧菌病

华南地区海水养殖鱼类弧菌病 及其免疫学研究 吴灶和叶剑敏李凌 湛江海洋大学湛江524088 摘要我国自二十世纪八十年代初期开展海水鱼类网箱养殖以来，由于高密度集约化养殖所带来的多种负因子影响，其病害种类、发病频率及其危害性亦逐年增加，其中弧菌病是海水鱼类养殖过程中主要病害之一，严重时死亡率可高达70—80％，甚至全部死亡，造成巨大的经济损失。本文仪介绍华南地区海水养殖鱼类中几种主要的孤葱病和免疫学与防治研究的结果。 关键词海水养殖鱼弧菌病免疫防治 一、南海养殖鱼类的主要弧菌病及其流行情况 石斑鱼、笛鲷溃疡症由溶藻弧菌感染所引起，主要发生在养殖的赤点石斑鱼和红鳍笛绸，在鱼种阶段和养成阶段均有流行，但以10—15公分的鱼种最为敏感。主要症状是外表皮肤出现大小不等的溃疡面，严重感染个体；溃疡可深达肌肉，内脏可见脾脏肿大，肝脏色泽偏淡，不论从体表溃疡部位或肝、脾、肾均能分离到病原菌。该病在华南地区常年均有流行，死亡率在50％左右，最高可达90％。 宝石斑鱼烂鳍烂尾病由创伤弧菌引起，主要发生在青石斑鱼，主要症状是鳍条出现溃烂，特别是尾鳍，鳍条基部出血，突眼，眼睛水晶体混浊，内脏可见脾脏肿大。该病在华南地区主要流行于5—10月，死亡率在50％左右。 真鲷溃疡症由最小弧菌感染引起。发病初期的真鲷游动缓慢，游泳无力，经常游出水面，摄食量降低或不摄食；随着病程的加重，体表鳞片脱落，表皮溃疡严重时溃疡面深达肌肉。内脏点状出血。肝脏明显缺血，有的地方出现瘀血，呈花斑状。该病主要危害真鲷鱼种阶段，50－100克鱼最易感染，死亡率在50％以上。 尖吻鲈弧菌病由河流弧菌生物I型所引起。该病主要流行于低温季节，由于尖吻鲈为热带性鱼类，低温季节引起体表冻伤，继发细菌感染而致病。症状是，体表出现溃疡，鳍条末端溃烂，游动迟钝。该病一旦暴发，死亡率超过50%。 二、赤点石斑鱼溶藻弧菌脂多糖（LPS）研究 分析结果表明：溶藻弧菌粗制脂多糖粗蛋白质占20.56％。磷占0.94％、糖类占4.8％。脂肪酸占3.6％；其中单糖组分中戊糖占1.15％。己糖占2.85％、葡萄糖0.72%、半乳糖、庚精和KDO小于0.1%；脂肪酸成分测得有十二碳烧酸、十四碳烷酸、十四碳烯酸、3－OH 十四碳烷酸、十六碳烷酸和十八碳烷酸，其中十二碳烷酸含量最多为2.80％。溶藻弧菌脂多糖与其它病原菌比较结果表明，溶藻弧菌脂多糖的蛋白质含量明显高于其它菌，而糖类，尤其是单糖中的己糖却明显低于其它菌。 溶藻弧菌粗制脂多糖的毒性研究发现，利用酚水法提取的粗制脂多精对石斑鱼的毒性不大，浓度为1.6mg/ml的粗制脂多精对石斑鱼的致死性为20％，浓度为3.2mg/ml 的粗制脂多糖对石斑鱼的致死性只有40％。同时溶藻弧菌粗制脂多糖经去毒处理后免疫石斑鱼，发现不同浓度的脂多精对实验鱼具有不同的保护性，在2—8mg/ml浓度范围内，浓度越高的脂多糖其免疫保护性越强，当病原菌感染浓度为1.2X109时，其对石斑鱼的免疫保护率最高可达80%，最低的免疫保护率也有40%；而当病原菌感染浓度为2X107时，8mg/ml 浓度的脂多糖对石斑鱼的免疫保护率可高达100％。其中浓度为16mg/ml的脂多糖免疫保护率与8mg/ml浓度一样，表明并非脂多糖浓度越高，其免疫保护性就越强。 研究石斑鱼免疫溶藻弧菌粗制脂多精后所产生的免疫学活性，发现粗制脂多糖可促进石

弧菌

弧菌病：南美白对虾养殖难以回避的话题 ?https://www.docsj.com/doc/2b1187577.html, 2011年04月14日14:37 水产前沿 ?发表评论共有条评论 2010年华南地区的对虾养殖遭受了严重病害，尤其是对虾“偷死”情况严重。虽然种质退化、天气恶劣、养殖密度高、养殖水质恶化等难辞其咎，但从整个疫情上来看，对虾养殖中弧菌贯彻始终，可谓“魅影重重”。 文/江西农业大学动物科学技术学院阮记明黄建珍 上海海洋大学国家水生动物病原库章海鑫王祎 江西福仁德生物科技有限公司金中平 2010年我国的对虾养殖业特别是华南地区的对虾养殖遭受到严重的病害肆虐，其危害程度严重的，发病率和排塘率均在50%以上，个别达到90%。总体去年的对虾病情表现出南北有较大差异的特点。从病情上看，南方病情重于北方，其中海南、粤东、粤西地区受灾最重；从病程上看，南方地区呈现发病范围广、发病速度快、传染性强、发病季节不明显等特点，头造虾减产严重；而以江浙、京津唐为中心的北方养殖区虽也有发病现象，但整体发病率不高、造成的损失不大；从症状上看，南方地区多表现为空肠空胃、偷死等症状，而北方对虾养殖区虽也曾出现了“偷死”现象，但该病整体发病率不高，对虾仍以传统的白斑病、桃拉综合症等为主。关于对虾病害的原因，虽然种质退化、天气恶劣、养殖密度高等难辞其咎，但总的来看，对虾养殖中处处体现出弧菌的身影，可谓“魅影重重”。本文就对虾养殖中的病原弧菌、弧菌病症状和防治等作简要综述，以期为今后对虾的健康养殖提供参考。 1 弧菌及弧菌病 弧菌(vibrio)是海洋环境中常见的细菌类群之一，该类细菌具很强的适应性和抗逆性，因此成为海水环境的优势种群，尤以溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌等占优势。目前，第九版《伯杰氏细菌学手册》收录了35种弧菌属细菌，在这些弧菌当中，部分种已被认为是鱼类的重要致病菌。据有关报道，鳗弧菌(V．anguillarum)、溶藻弧菌(V．alginolyticus)、哈维氏弧菌(V．harveyi)、灿烂弧菌(V．splendidus)、副溶血弧菌(V．parahaemolyticus)、创伤弧菌(V．vulnificus)、杀鲑弧菌(V．salmonicida)、海利斯顿氏菌(V．pelagius)、美人鱼弧菌(V．damsela)、奥氏弧菌(V．ordalii)、费氏弧菌(V．fischeri)、鲨鱼弧菌( V．carchariae)以及最小弧菌(V．mimicus)等10多种弧菌可以引起鱼类病害。随着人工养殖迅速发展，养殖水域生态变化，弧菌病已经成为海水养殖动物主要的细菌性病害之一。 由弧菌属（Vibrio）细菌引起的弧菌病(Vibriosis)是在世界各地养殖鱼、虾、蟹及贝类等水产动物中普遍流行且危害最大的细菌性疾病，给水产养殖业造成了严重的经济损失。据报道，弧菌属中的鳗弧菌、副溶血弧菌等在弧菌种群中占优势，广泛存在于自然海水中，导致弧菌病在全世界发生，且具有流行广、发病率高、危害大、死亡率高等特点，给鱼、虾、蟹及贝类等海水动物的养殖造成了巨大的影响。 由鳗弧菌、海弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌引起的疾病统称弧菌病。对虾常见的细菌性疾病有对虾幼体菌血病、烂鳃病、红腿病、烂眼病等，其主要的病原菌为弧菌、假单胞菌、气单胞菌等，其中弧菌科的许多种细菌，是引起对虾类细菌性疾病的重要病原（表1），并且作为海水中的常在菌群，弧菌也存在于健康的甲壳类个体的体内，Gomez等报道了万氏对虾的肝胰脏内可能存在着多种弧菌。当水中弧菌的数量为103-104cfu/mL（cfu/mL：每毫升样品中含有的细菌群落总数）时，对虾的红腿病症状明显加重。通过对比看出，对虾的发病程度和死亡情况与虾池水中弧菌的数量有一定的关系。有研究认为，当水中的弧菌数量达到104cfu/mL时，对虾就可能被感染发病。

鱼类常见病害(定稿)

鱼类常见病害 草鱼出血病 【病原】草鱼呼肠孤病毒（GCRV） 【症状】病鱼体色发黑，离群独游水面，主要症状是病鱼各器官组织有不同程度的充血、出血。根据病鱼所表现的症状及病理变化，大致可分为如下三种类型： （1）“红肌肉”型病鱼外表无明显的出血症状，或仅表现轻微出血，但肌肉明显充血，严重时全身肌肉均呈红色，鳃瓣则严重失血，出现“白鳃”。这种类型一般在较小的草鱼种(体长7——10cm)较常见。 （2）“红鳍红鳃盖”型病鱼的鳃盖、鳍基、头顶、口腔和眼眶等明显充血，有时鳞片下也有充血现象，但肌肉充血不明显。这种类型一般见于在较大的（体长13cm以上）草鱼种。（3）“肠炎”型病鱼体表及肌肉的充血现象均不明显，但肠道严重充血。肠道充血时，仍具韧性，肠内虽无食物，但很少充有气泡或粘液，可区别于细菌性肠炎。这种类型在各种规格的草鱼种中都可见到。 【流行情况】本病是我国草鱼鱼种培养阶段为害最大的病害之一，主要危害2.5——15cm 的草鱼和1足龄的青鱼。每年6——9月是此病的主要流行季节，水温27℃以上最为流行，水温降至25℃以下，病情逐渐消失。 【防治方法】疾病一旦发生，彻底治疗通常比较困难，故强调预防。 （1）严格执行检疫制度，不从疫区引进鱼种。 （2）清除池底过多淤泥，并用生石灰，或漂白粉（含有效氯30﹪），或漂白精（含有效氯60﹪）消毒，以改善池塘养殖环境。 （3）注射疫苗，进行人工免疫。 （4）养殖期内，每半个月全池泼洒二氯异氰尿酸钠（优氯净）或三氯异氰尿酸（强氯精），浓度为0.3㎎/㎏；或泼洒漂白粉精，浓度为0.1——0.2㎎/㎏。 （5）口服大黄粉，按每年100㎏鱼体重用0.5——1.0㎏计算，拌入饲料内或制成颗粒饲料投喂，每天1次连用3——5天。 （6）每万尾鱼种用水花生4㎏，捣烂后拌入250㎏大蒜、少量食盐和豆粉制成药饵，每天投喂2次，连续3天。 （7）50﹪大黄、30﹪黄柏、20﹪黄芩制成三黄粉，每50㎏鱼用三黄粉250g、麸皮4.5㎏、菜饼1.5㎏和食盐250g制成药饵投喂，连用7天为一个疗程。 （8）口服植物血球凝集素（PHA）,每千克鱼用量4㎎，隔天喂1次，连续2次，或用浓度为5——6㎎/㎏的PHA溶液浸洗鱼种30min。此外，还可用注射法，每千克鱼注 射PHA4——8㎎。 （9）加强饲养管理，进行生态防病。 细菌性烂鳃病 【病原】柱状屈桡杆菌 【症状及病理变化】病鱼体色发黑，反应迟钝，或离群独游水面。鳃盖内表皮往往充血发炎，严重者鳃盖中部的内表皮溃烂，形成一个透明小区“开天窗”。鳃丝分泌粘液增多，肿胀，呈花鳃状，局部因缺血色或淡红色，或淤血成紫红色或有出血点。鳃小片愈合。严重者鳃丝溃烂，鳃上皮细胞坏死脱落，鳃丝软骨外露，坏死处往往有细菌和污物粘附。

《食品安全国家标准 食品微生物学检验+创伤弧菌检验(征求意见稿)》

中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品微生物学检验创伤弧菌检验 (征求意见稿) xxxx-xx-xx发布xxxx-xx-xx实施

食品安全国家标准 食品微生物学检验创伤弧菌检验 1范围 本标准规定了水产品中创伤弧菌（Vibrio vulnificus）的检验方法。 本标准适用于鱼、虾、蟹、贝类等水产品中创伤弧菌的检验。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 2.1 恒温培养箱：36℃±1℃。 2.2 冰箱：2℃～5℃、7℃～10℃。 2.3 恒温水浴锅。 2.4 均质器或无菌研钵。 2.5 天平：感量0.1 g 2.6 PCR仪。 2.7 电泳仪或毛细管电泳仪。 2.8 凝胶电泳成像系统或紫外检测仪。 2.9 生物安全柜。 2.10 高速离心机（最大转速至少15 000 r/min）。 2.11 涡旋振荡器。 2.12 微量可调移液器（量程2.5 μL、10 μL、100 μL、1000 μL）及配套吸头。 2.13 pH试纸或pH计。 2.14 无菌试管：规格18 mm×180 mm和15 mm×100 mm。 2.15 无菌吸管：规格1 mL（具0.01 mL刻度）和10 mL（具0.1 mL刻度）。 2.16 无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL和1000 mL。 2.17 无菌培养皿：直径90 mm。 2.18 无菌手术剪、镊子、钳子等。 2.19 PCR 反应管。 3 培养基和试剂 3.1 蛋白胨-氯化钠-纤维二糖-多粘菌素E（PNCC）增菌液：见附录A中A.1。 3.2 纤维二糖-多粘菌素E（CC）琼脂：见附录A中A.2。 3.3 改良纤维二糖-多粘菌素-多粘菌素E（mCPC）琼脂：见附录A中A.3。 3.4 3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂：见附录A中A.4。 3.5 磷酸盐缓冲液（PBS）：见附录A中A.5。 3.6 3%氯化钠三糖铁琼脂：见附录A中A.6。 3.7 嗜盐性试验培养基：见附录A中A.7。 3.8 3%氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基：见附录A中A.8。 3.9 3%氯化钠MR-VP培养基：见附录A中A.9。 3.10 3%氯化钠溶液：见附录A中A.10。 1

弧菌

弧菌 一、弧菌是菌体短小，弯曲成弧形，尾部带一鞭毛的革兰 氏阴性菌 主要对虾致菌为：溶藻弧菌、鳗弧菌、副溶血弧菌、 哈维氏弧菌、鳗弧菌、霍乱弧菌等 弧菌适应温度10-35度，最适25度左右，弧菌在半咸 水和海水中很多，但淡水中少。这也是淡水养殖对虾，弧 菌病发病率低，养殖成功率较高的原因。 弧菌的繁殖速度随着盐度的增加和温度的增加而加快。 二、在对虾养殖中，我们经常使用弧菌培养皿来测试弧菌 的种类和数量。这就有我们常说的黄弧菌、绿弧菌。 绿弧菌：副溶血弧菌、河流弧菌 黄弧菌：溶藻弧菌、霍乱弧菌、哈维氏弧菌、鳗弧菌三、各种弧菌有什么危害呢？ 大名鼎鼎的EMS，很多研究表明，副溶血弧菌是凶手。 溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌会引起红腿红尾等初 期症状，继而出现肠炎和肝发红、肿大或萎缩，严重的引 起菌血症“红体病“。 感染哈维氏弧菌：频死或死亡的幼体会发荧光。成体 发病先是头胸部、腹部的腹面发荧光，严重时全身发光。 霍乱弧菌会引起瞎眼。 四、弧菌的感染途径主要是经口传播，其次是通过体表创 伤和腮进入体内。 五、水中弧菌防控，主要靠三点。

1、消毒，比如说我们的“弧菌杀“泼水可以安全有效杀灭弧菌。消毒作用快，是处理弧菌超标时使用的一种好方法。 2、蛭弧菌，以菌吃菌，预防用。 3、以菌制菌，研究表明，当环境中的弧菌数量超过理论阀值，但水体中总异养菌的数量达到弧菌数量的30倍以上，对虾仍是安全的。定期泼”金牌芽孢“、”护肠活水多效菌“等有益菌，有益菌从数量上抑制弧菌发病。 六对虾体内弧菌的控制。有3种方法。 1、控制水环的弧菌。对虾的消化道与水体相同， 水体的微生物组成直接影响对虾消化道的菌相 组成。所以水环境中弧菌数量少，就可以有效 预防消化道弧菌感染。这就是水体泼“弧菌杀 “的主要意义。 2、常伴乳酸菌或”护肠活水多效菌“，使其在肠 道形成优势种群，粘附在肠道表皮形成生物屏 障，使弧菌不易粘到肠壁上，避免感染。 3、抗生素和中草药。