水产动物药敏实验操作流程

药敏实验操作流程

1.器材准备

解剖盘、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、接种环、乳胶手套、培养皿、烧杯、量筒、锥形瓶、电子天平、超净工作台、高压灭菌锅、恒温箱、显微镜2.实验步骤

2.1 培养基制备

（1）用量筒量取300ml纯净水，倒入锥形瓶中。

（2）用电子天平称取脑心浸液（BHI）肉汤培养基、技术琼脂粉，倒入锥形瓶中摇匀后放入高压灭菌锅灭菌处理。

（3）取出灭菌后的液体培养基，在超净工作台开始倒平板，准备好的20个培养皿，每个倒15ml。

（4）待冷却凝固后放入4℃冰箱保存备用。

2.2 细菌分离

（1）取出制备好的培养基，标注好信息：鱼体来源、实验时间，将平板划分为4个区域，一般肝脏、脾脏、肾脏、腹水。

（2）取出待解剖的新鲜死鱼或濒死鱼，用酒精棉擦拭鱼体表，防治外部细菌影响，解剖之前剪刀、镊子用酒精擦拭消毒后再用酒精灯灼烧，在肛门前端开始解剖，防治剪破肠道细菌感染。

（3）接种前接种环用酒精灯灼烧发红，不可用手接触组织，接种环垂直插入组织取出组织液。

（4）将取出的组织液在平板标记位置开始划S线，划线时需在酒精灯前操作，防治空气中杂菌污染。

（5）将涂好的平板放入28℃恒温箱细菌培养，一般分离出细菌在12h后在划线位置可形成细菌菌落。

2.3 药敏实验

（1）取出备用的培养基，标注好信息。

（2）用接种环将分离出的不同组织的细菌挑取接种到平板上，横、竖、30°多方位划线，划满整个平板。（液体涂布法：1.5ml EP管装0.5ml生理盐水或液体培养基，勾取细菌放入EP管搅匀，用移液枪吸200ul，将菌液打在空白平板上，用消毒、灼烧、冷却后的涂布棒均匀涂抹。）

（3）用镊子在酒精灯灼烧后，取出药敏片，将有字一面朝下，均匀放在平板上，用镊子轻轻按压，每取一个药敏片，都要用酒精擦拭、消毒，一般一个平板帖5片药敏片，贴好后背面标注要药敏片信息。

（4）贴好后放入恒温箱培养12h，平板上形成直径不同的抑菌圈，根据抑菌圈大小判断药物敏感程度，选择合适的药物进行治疗。

2.4 细菌纯化

（1）取出分离出细菌的平板，标注好信息，接种环高温灼烧。

（2）挑取单菌落在新的平板上划线，按Z行划线，划4次，后一次接在前一次的尾部划线，每划一次接种换都要灼烧冷却，防治杂菌污染。

（3）将纯化后的平板放入恒温箱过夜培养。

2.5 革兰氏染色鉴定

（1）用注射器或移液枪吸取少量纯净水滴在载玻片上，让菌容易散开。

（2）用接种环挑取菌落在水滴上稀释涂开。

（3）将破片放在酒精灯火焰慢慢烤干。

（4）用染色剂染色：结晶紫→碘→脱色液→复染液

（5）在显微镜下用油镜镜检，显红色表明阴性，显紫色表明阳性。

药敏实验流程

药敏实验流程 （一）普通肉汤培养基的制作： 1.NaCL5g, 牛肉膏3g，蛋白胨10g，蒸馏水1000ml，PH7.2~7.6, 2% 琼脂粉20 g。 2.先称取NaCL,牛肉膏，蛋白胨易于潮解最后称取，放于烧杯中溶 解，玻璃棒搅拌。 3.用PH试纸或PH校正仪调PH值，偏酸加1mol/L的NaOH,偏碱 加1mol/L的HCL。 4.用量筒再量一次加入2%的琼脂粉玻璃棒搅拌溶解。 5.盖上硅胶塞，用8层纱布橡皮筋扎好，再用4层报纸包好，令用 两层报纸包扎相应数量的平板，121°灭菌20分钟。 6.把已灭菌了的平板放于烘箱内使其干燥或拆开报纸倒放于无菌工 作台内使上面的水珠蒸发。 7.做好无菌室的准备工作，待培养基的温度合适时开始倒平板，每 个倒25~30ml，一般下午用时上午倒平板，第二天上午用时前一天下午倒平板，若用不完的培养基倒置于4°冰箱保存一周内用完。（二）接种培养： 1..用酒精棉球檫试要解剖的鱼的体表部位，解剖后用酒精棉球檫试 要取的发病组织（肝脾肠）。 2.点燃酒精灯，用灭菌了的镊子取发病组织剖面涂抹于培养基一角， 用着烧过的接种环在培养基内做三四划线或“之”子划线，做上标记，倒置于37°恒温培养箱内培养18~24h。

（三）贴药敏纸片： 在无菌工作台内用接种环挑取优势菌落在培养基内做“米”字划线，用已灭菌了的有齿镊子贴药敏纸片于已经做“米”字划线的培养基，做上标记，10min后放于37°培养箱内培养18~24h. （四）观察结果： 记录抑菌圈的大小并排序，填实验结果报告单。 药敏纸片制备流程 一、实验所需仪器及试剂 打孔器、小瓶、容量瓶、培养皿、10ml移液管、眼科镊、小烧 杯等。 0.1M NaOH、0.85%生理盐水、200ml无菌水、恩诺沙星、盐酸 土霉素、氟苯尼考。 二、制备流程 1、取新华1号定性滤纸，用普通的打孔器打成直径为6mm的 圆形小纸片，取出8只小瓶装入50片圆纸片（小瓶干燥洁 净）用单层牛皮纸包扎好。 2、包扎好之后，121℃高压灭菌20min，同时把本次试验所需 的0.1M NaOH、0.85%生理盐水、容量瓶、培养皿、10ml 移液管、小烧杯等把它们分别包好放在高压灭菌锅中一起 灭菌。 3、取出灭菌好的圆形纸片在无菌工作台上把纸片用眼科镊放 入已灭菌了的平皿内摊开至于烘箱，使之完全干燥。 4、根据实验所需分别称取恩诺沙星取0.2g、盐酸土霉素0.3g、

兽用药敏片的制作及药敏试验

兽用简易药敏片的制作及药敏试验 李瑶瑶 随着夏季高温高湿天气的到来，很多细菌容易生长繁殖，尤其是饲养管理不到位，使细菌性疾病的流行及发病率迅速上升；由于抗菌药物的不断推陈出新和广泛应用，导致耐药性菌株逐年增多，使用抗菌素药物预防和治疗的效果越来越不理想，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了巨大的经济损失。为了减少药物的滥用和耐药性的产生，在临床治疗前进行药敏试验筛选出有效的抗菌药物是治疗和预防禽病的重要措施之一。由于市场上成品药的药敏片不易购买，复方药的厂家也不告诉客户配方，所以急需自制简易药敏片。本文对药敏片的制作及药敏试验的全过程进行总结，供广大养殖户参考。 1简易药敏片的制作 直接选用各药厂的（瓶装、袋装、筒装等）成品药来做。其它设备和器皿需要恒温箱、平皿（直径90mm或更大一点的都行）、烧杯、蒸馏水、滤纸、打孔器，具体的操作步骤如下：1.1 将滤纸用打孔器打好适量直径为6mm的小圆纸片。 1.2 将所需培养皿或玻璃小瓶、玻璃棒、微量吸管、镊子、滤纸、滤纸片等进行高压灭菌，一般121℃，0.15帕斯卡，15～20min。 1.3 在烘干箱或恒温箱内37～60℃，放置12～24小时直至烘干。 1.4 将要选的药用蒸馏水按药品使用治疗量的比例配制成药液，按5ml药液30～40个小圆纸片浸泡。 1.5 将浸泡好的药敏片用镊子夹出，放到另一干燥平皿中，注意药敏做的多时，放湿药敏片不要完全重叠地放。这样会使有的药敏片在干燥过程中所沾的药量不一，影响您对药的评价。因为有的药不溶，药厂会加一些助溶剂，干燥过程中有的药会析出。这时药敏片叠放位置会影响所沾的药量的。 1.6 将盛湿药敏片的平皿放到恒温箱中，温度37℃，放置12～24小时，不同的药干的时间也可能不一样，所以自己需要视情况而定。在这个过程中要注意勤翻一下药敏片，尽量不要让它们沾在一起。 1.7 药敏片的储藏：将烘干的药敏片分装，标上药名和日期，储存要注意防潮。短期可4℃冷藏保存3～6个月，长期要-20℃冷冻保存。 2 药敏试验 由于各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异，这就需要利用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。 2.1培养基的制备兽医临床上一般用营养琼脂培养基或LB培养基。将成品营养琼脂培养基粉按说明取适量，加蒸馏水溶解，放入高压灭菌锅，121℃灭菌15～20min，冷却到50℃左右，倾注到已灭过菌的培养皿中，厚度约5～6mm，冷却凝固后使用或放入4℃冰箱中备用。 2.2 接种细菌 在对病死畜禽解剖时，切取一小块肝、脾等器官，使用新鲜创面在培养基上涂满，操作时就避免感染其他杂菌。 2.3 粘贴药敏纸片 将镊子于酒精灯火焰上灭菌后略停，取药敏片贴到培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻轻按压几下药敏纸片。每个培养皿所用药敏纸片的数量和分布可根据培养皿的大小确定，一般采用中央贴一片，周围等距离贴5至6片。 2.4 培养细菌 将贴上药敏纸片的培养基置于37℃恒温培养箱中培养12～18h，观察抑菌圈大小。

病原菌的采集观察及药敏实验操作规范

病原菌的采集、观察及药敏实验操作规范 病原菌的采集 细菌分离培养是临床上检验病原菌的主要方法，检验对象为新鲜的、濒临死亡的或死后不久的水产动物，以有典型症状的活体为主要病原采集对象。 1 肉眼观察 观察送检鱼体的外部情况，包括眼、鳃、体表、鳍条等，尽可能详细的记录鱼体的情况，尤其特殊的发病部位和病变的情况，并照好相关照片。 2 病原菌的分离 （1）解剖工具的消毒 先将双手用75%的酒精消毒，再用75%的酒精棉球将解剖刀、剪刀、镊子、止血钳等解剖工具进行擦拭后在酒精灯上灼烧直至无残留的酒精，然后放到一侧待用。 （2）病原菌的采集 首先将待分离对象放入干净的解剖盘内，用75%的酒精棉球擦拭其表面。用剪刀在下颌处剪断，然后从下颌处由腹部向肛门处剪开，如病鱼患有腹水症状，则取腹水进行细菌分离。接种后继续解剖，剪刀剪至肛门时避开肛门向上剪至侧线，然后沿着侧线向鳃盖剪去，再沿鳃盖向下颌处剪断，将剪下的肌肉取下，可呈现完整的内部结构，首先进行细菌分离的部位为肝脏，用75%的酒精棉球将其表面擦拭干

净，将接种环在酒精灯上灼烧后，直接插入肝脏内，将接种环搅动数下后取出，在酒精灯下于培养基上划线培养。（如果肝脏韧性较好接种环不能插入时，可先用消毒的解剖到将肝脏表面划破，然后再用接种环取样。）肝脏接种过后，将内脏团剥离鱼体，分离出脾脏，对脾脏进行接种。最后将背膜剪破，对肾脏进行接种。（鳗鱼等肾脏不在背部的鱼类除外） 内部实质器官接种后，可对体表等有明显病变的部位进行细菌分离，分离时应注意：a. 眼睛取样：先用75%的酒精棉球擦拭，再用解剖刀划破，然后取样；b. 鳃丝取样：将鳃丝剪下后在75%的酒精中轻轻沾几下后，在生理盐水中沾几下，然后再取样。c. 体表取样：将患处用75%的酒精棉球擦拭几下，用解剖刀将表面溃烂皮肤剥离，露出下层新鲜组织后再取样。 （3）病原菌的培养 将分离好的培养基放入恒温培养箱内进行培养，一般27℃，18-24h即可观察有无细菌生长。 细菌的采集尽量保证无菌操作，采样的顺序：腹水→肝脏→脾脏→肾脏→心脏→其它病变部位。采集病原菌的同时，记录好各实质器官的变化并保存相关照片。 病例记录表格

安徽养殖鱼类病原细菌药敏试验和耐药性检测技术规范

DB34 安徽养殖鱼类病原细菌药敏试验和耐药性 检测技术规范 Standard for Drug sensitivity test and drug resistance test of pathogenic bacteria from cultured fishes in Anhui Province (征求意见稿) 2018-××-××发布2018-××-××实施

前言 本标准规范按照GB/T1.1-2009编写。 本标准由安徽农业大学动物科技学院提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽农业大学动物科技学院、安徽省水产技术推广总站、安徽海辉水产养殖有限公司 本标准主要起草人：彭开松，吴敏，唐庆权，樊慧敏，许晓牧，魏泽能，蒋军，朱若琳，姜守松，王黎明，贾俊威，檀基良，曹学志

安徽养殖鱼类病原细菌药敏试验和耐药性检测技术规范 1 范围 本标准适用于安徽省境内增养殖淡水鱼类病原细菌的药敏试验和耐药性检测。主要包括以下技术内容：（1）样品采集；（2）病菌的分离和鉴定；（3）抑菌圈直径测定；（4）最小抑菌浓度测定；（5）耐药性检测。 本标准适用于水生动物疾病的诊疗、教学、科研、服务单位及有关管理部门从事相关工作参考。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款，通过本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分。鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。 GBT 27623.1-2011 渔用抗菌药物药效试验技术规范第1部分：常量肉汤稀释法药物敏感性试验WS/T 125-1999 中华人民共和国卫生行业标准纸片法抗菌药物敏感试验标准 中华人民共和国兽药典（一部） 中华人民共和国兽药典兽药使用指南（化学药品卷） EUCAST 欧盟药敏试验标准（李玉庆等编译，中国标准出版社，2016年3月） GB 4789.2-2016 食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定 3 定义 下述定义适用于本标准 3.1 活鱼：具有典型症状和大体病变的活鱼或濒死鱼。

水产动物药敏实验操作流程

药敏实验操作流程 1.器材准备 解剖盘、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、接种环、乳胶手套、培养皿、烧杯、量筒、锥形瓶、电子天平、超净工作台、高压灭菌锅、恒温箱、显微镜2.实验步骤 2.1 培养基制备 （1）用量筒量取300ml纯净水，倒入锥形瓶中。 （2）用电子天平称取脑心浸液（BHI）肉汤培养基、技术琼脂粉，倒入锥形瓶中摇匀后放入高压灭菌锅灭菌处理。 （3）取出灭菌后的液体培养基，在超净工作台开始倒平板，准备好的20个培养皿，每个倒15ml。 （4）待冷却凝固后放入4℃冰箱保存备用。 2.2 细菌分离 （1）取出制备好的培养基，标注好信息：鱼体来源、实验时间，将平板划分为4个区域，一般肝脏、脾脏、肾脏、腹水。 （2）取出待解剖的新鲜死鱼或濒死鱼，用酒精棉擦拭鱼体表，防治外部细菌影响，解剖之前剪刀、镊子用酒精擦拭消毒后再用酒精灯灼烧，在肛门前端开始解剖，防治剪破肠道细菌感染。 （3）接种前接种环用酒精灯灼烧发红，不可用手接触组织，接种环垂直插入组织取出组织液。 （4）将取出的组织液在平板标记位置开始划S线，划线时需在酒精灯前操作，防治空气中杂菌污染。

（5）将涂好的平板放入28℃恒温箱细菌培养，一般分离出细菌在12h后在划线位置可形成细菌菌落。 2.3 药敏实验 （1）取出备用的培养基，标注好信息。 （2）用接种环将分离出的不同组织的细菌挑取接种到平板上，横、竖、30°多方位划线，划满整个平板。（液体涂布法：1.5ml EP管装0.5ml生理盐水或液体培养基，勾取细菌放入EP管搅匀，用移液枪吸200ul，将菌液打在空白平板上，用消毒、灼烧、冷却后的涂布棒均匀涂抹。） （3）用镊子在酒精灯灼烧后，取出药敏片，将有字一面朝下，均匀放在平板上，用镊子轻轻按压，每取一个药敏片，都要用酒精擦拭、消毒，一般一个平板帖5片药敏片，贴好后背面标注要药敏片信息。 （4）贴好后放入恒温箱培养12h，平板上形成直径不同的抑菌圈，根据抑菌圈大小判断药物敏感程度，选择合适的药物进行治疗。 2.4 细菌纯化 （1）取出分离出细菌的平板，标注好信息，接种环高温灼烧。 （2）挑取单菌落在新的平板上划线，按Z行划线，划4次，后一次接在前一次的尾部划线，每划一次接种换都要灼烧冷却，防治杂菌污染。 （3）将纯化后的平板放入恒温箱过夜培养。 2.5 革兰氏染色鉴定 （1）用注射器或移液枪吸取少量纯净水滴在载玻片上，让菌容易散开。 （2）用接种环挑取菌落在水滴上稀释涂开。 （3）将破片放在酒精灯火焰慢慢烤干。

动物实验室疾病诊断工作流程

生物实验室疾病诊断工作流程 流程： 业务接收流程：客户——内勤——研发部——生物实验室 业务反馈流程：生物实验室——内勤——客户实施细则: 一、样品采集与运输 1.病料的采集要求： (1)新鲜，代表性。病料存放时间夏天少于6h，冬天12-24h. (2)减少污染。第一时间采取病料，减少病料因暴露于空气中而造成的污染。 ( 3)病料采集后，应先存放于冰箱中1-2 小时后，再做微生物 检验 2.病料的采集方法 ( 1 )组织和实质器官的采集采集病料心、肝、脾脏、胰腺、肺等，剪切小块组织，放入灭菌试管(青霉素瓶) ，密封。 ( 2)液体病料的采集 血液、胆汁、脓肿液、渗出物等液体病料，使用注射器(或灭菌吸管)吸取病变组织的液体，将病料注入灭菌试管(青霉素瓶)，塞好棉塞送检。 （3）全血的采集方法 用注射器自鸡的心脏或翅静脉采血2-5 毫升，注入灭菌试管（青霉素瓶）中。

（4）血清的采集方法 用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血 2 毫升，注入灭菌试管中（青霉素瓶）摆成斜面，待血液凝固血清析出后，将血清吸出注入另一个灭菌试管中，备用。 采样的比例：按每个舍0.5%的比例采集，但每舍不得少于15 份，一般常规采样15-30 份即可。 二、检测项目 项目一、药敏试验 一、试验步骤 1.试验材料：培养基、药敏试纸、细菌、接种 环、酒精灯、打孔器、移液器、滴头。 2.试验准备： 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药使用治疗量的比例配制药液；如商品药“百病消”按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10 毫克加入10 毫升的水中混匀。此稀释液即为用于做药敏试验的药液。 3.试验操作方法： 3.1药敏片法 3.1.1在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2 。找到第二点划线至平皿的1/2 ，依

熟悉使用这套操作流程,你也可以成为鱼医

熟悉使用这套操作流程，你也可以成为鱼医 养鱼先养水，而另外一句经典名言叫，看病先因，水产养殖跟禽畜类养殖有根本性原因就在于它的病害全部来自于水体，病从品入，就是这和来的，所以要想把鱼病把懂，把病治好，就要有中国传统中医望闻问切等方面的能力，做到面面俱到才可以正确的判断出鱼病实，践出真知。 一、鱼病的诊断程序：（一）现场调查问1：养殖的品种结构、苗种来源、规格大小、健康状况和放养密度等。问2：池塘清塘消毒以及日常防病措施、使用的药物和使用方法等。问3：投喂饲料的种类、来源、投饵方法、投饵量等。测4：水源、水质、水温、底质等情况。望5：发病和未发病养殖池中鱼的活动情况，如游动、摄食等。问6：发病过程以及采取过的措施，包括发病时间、患病种类、病症与病情、死亡情况、采取的措施与效果等等。问7、发病池塘的面积、底质、水深、水色、透明度等。

（二）病原鉴别 1、肉眼检查肉眼观察患病鱼体及器官（包括鳃）的颜色有无变化，有无炎症、充血、出血、贫血、肿胀、溃疡、黏液、腹水等，有无异物附着；观察患病鱼体有无真菌或寄生虫寄生等。 2、显微镜观检用镊子刮取皮肤、鳍、鳃等外部器官的黏液，或用眼科剪取其一部分患病组织如鳃丝、鳍条等，于载玻片上制成水浸压片，于显微镜下检查有无真菌或寄生虫寄生，必要时拍照记录观察结果。 3、解剖检查肉眼检查解剖新鲜患病鱼，肉眼观察内脏器官组织的颜色和形状有无变化，如炎症、充血、出血、肿胀、溃疡、萎缩退化、肥大增生、体腔积水等病理变化，有无寄生虫及其包囊等。

4、药敏试验检测对可能由细菌引起的疾病，可通过病原分离、培养、鉴定、人工感染等试验后，再进行相应的药敏试验检测。目前，有一种快速药物敏感试验方法可以指导水产用药，即直接从患病鱼腹水或内脏器官采样，涂布培养平板，进行药物敏感试验，其结果是对混合菌群的总体抑制效果。（三）药物选择的原则1、有效性；在药物施用后，一般以给药后死亡率的降低作为确定疗效的主要依据。2、安全性；在选择药物时，既要注意其疗效，又要注意安全，尤其禁止使用的药物。3、方便性；全池泼洒法与投喂药饵法，注意计算水体大小、鱼重量、施用药物的量等。4、经济性；药物本身价值不能太高，比较容易获得，并且在施用过程，不能耗费大量人力物力，降低治疗成本。（四）给药途径选择1、内服法口服法用药量少，操作方便，对水环境影响小，是鱼类疾病防治中一种重要的给药方法。此法常用于提高鱼体代谢能力和抗病力、防治体内病原生物感染等，如细菌性肠炎病、病毒性出血病等。口服药物法的治疗效果易受养殖动物病情和摄食能力的影响，对病重和

药敏试验

药敏试验 用药敏实验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。但由于药敏试验要求比较严格，条件比较高，仅仅在大中专院校或科研单位有条件的可以操作，一些养殖厂或一些门诊难有条件进行药敏试验的操作。针对这个问题，农业部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心经过几年的总结和实践，逐渐总结出几套适合基层进行药敏试验的操作方法。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗生素浓度梯度法（E-test法），和自动化仪器等。 目录

药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用 抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以 一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参考，并提高疗效。农业 部动物检疫所青岛易邦生物工程有限公司动物疫病诊疗中心总结出几套适 合基层进行药敏试验的操作方法，现简单介绍如下。 编辑本段药敏试验分类 一、纸片扩散法 该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度 呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度 范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的 周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中 扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感 程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。 二、稀释法 稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性，分 为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC），一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释 性折点（敏感、中介和耐药）的浓度，同时也应该包含质控参考菌株的MIC. 2.1 琼脂稀释法首先制备含抗菌药物的琼脂稀释平板。再接种待测菌株，然后是结果判读。 2.2 肉汤稀释法 三、抗生素浓度梯度法 四、自动化仪器法 编辑本段实验步骤 一、实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验 可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦 糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。

水产动物疾病学 水产动物病理学《病理学》实验方案

罗非鱼链球菌病研究的实验方案 一、实验流程 采集病鱼→观察记录临床症状→分离纯化病原体→病原体的扩大培养→病原体的药敏试验 ↓ 动物回归实验 ↓ 观察记录临床症状 ↓ 病理组织分析 二、具体操作步骤 1.病鱼录临床症状的观察和记录 记录病鱼的活动特征、外观临床症状，解剖后观察内部器官病变特征，拍照。 2. 病原体的分离纯化 对具典型细菌性症状的病鱼进行现场分离，取其脑（B）、肝（L）、脾（S）、肾（K），采用平板划线法接种于BHI固体培养基中，于27-28℃培养箱中培养24-72h，拍照。将首次分离培养基上数量呈优势的疑似病原菌落进行进一步的分离纯化培养，对其进行革兰氏染色和镜检初步确定其是否为病原菌，拍照。 3. 病原体的扩大培养 取上述纯化的菌株单菌落接种于BHI液体培养基中，进行扩大纯培养。 4. 病原体的药敏试验 配置固体培养基→取0.2ml菌液均匀涂布于表面→干燥5mins后每板贴5片药敏试纸，试纸之间距离不小于24mm→反转平板，4℃放30min→37℃中反转培养24h→观察抑菌圈→拍照 5. 动物回归实验 将扩大培养病原体的病原体经腹腔注射入罗非鱼，6天后开始每天观察发病情况，记录病鱼的活动特征、外观临床症状，解剖后观察内部器官病变特征，拍照。跟最初的病鱼进行比较，看是否症状一致，如果一致，说明分离到的菌株是致病的病原体，如症状不一致，则病原体分离错误。

6. 病鱼病理组织分析（可选做） 取病鱼的病变组织（如皮肤、脑、肝、肾脏、脾脏等）进行病理切片分析，与正常组织对比，拍照，分析病变原因。 三、作业 将上述实验流程和实验结果整理，写成一篇课程作业，图文并茂。 附件：石蜡切片的制作方法 一、取材 用丁香粉麻醉鱼，取病变组织（如皮肤、脑、肝、肾脏、脾脏等），在Bouin 氏液固定8-24小时。取材时应注意以下事项： 1.所取材料不宜太大以0.5×0.5×0.2厘米或1.0×1.0×0.2厘米较合适。 2.切取的组织应能代表整个器官的结构，即器官的各部分结构都能看到。 3.取材时刀要锋利，要注意不要挤压器官以免损伤内部组织。宜轻轻用镊子夹 住，再用剪刀或刀片切下，被镊过的部分不要，切取的材料可稍大些，尤其是柔软的组织经固定数小时后，待其稍为硬化再修切成小薄片，继续固定。 4.修正组织块时要注意切面平整，作横切面或纵切面要先考虑好，各种组织多 取数块，留有余地，以备必要时应用。 5.固定剂的用量一般为材料体积的10-15倍或稍多，含水分多的材料，固定液 即使增至材料的50倍，也不算多，因其含水分多可冲淡固定液的浓度致影响固定效果。同一标本管内，材料不能放得太多以免与容器粘贴造成固定不良。 6.如固定超过12小时，或固定液混浊不清就须更换新液继续固定。 7.不同的纽织应分别装入小瓶，其中事先装好固定液，用墨汁或铅笔写好标签 放入固定液内。 8.固定时间：一般12-24小时，须视组织块的大小性质及固定液的性质而定。 二、洗涤 1.Bouin氏液固定的组织：倒去固定液入70%酒精更换数次即可脱水。如欲除 去苦味酸的黄色可在70%酒精中加入少量氨水（数滴），且能中和苦味酸，

药敏试验操作方法

药敏试验操作方法 药物敏感性试验是一种常见的实验方法，用于评估药物对细菌或其他微生物的敏感性。下面我将详细介绍药敏试验的操作方法。 一、实验仪器和试剂准备 1. 培养基：根据要测试的细菌种类选择相应的培养基，并按照说明书配制。 2. 抗生素：根据实验需求选择合适的抗生素。可以是已知的抗生素，也可以是待测的新药物。 3. 细菌悬浮液：从培养物中挑取单一菌落，转接到培养基中培养一夜，然后取一定量的细菌悬浮液用生理盐水调制。 二、药敏试验步骤 1. 稀释菌悬液：将细菌悬液稀释至适宜浓度，通常为0.5 McFarland 标准浓度，以确保实验准确性。 2. 制备琼脂平板：将培养基煎化至液态，待温度降至45-50时加入相应抗生素浓度，快速混合后倒入培养皿中。 3. 扩展细菌：将含有药物的琼脂平板倒扣在灭菌台上，用细菌悬液均匀涂抹在琼脂平板表面上。 4. 培养和观察：将培养皿放入恒温培养箱中，在适宜的温度下培养一段时间，通常为18-24小时。培养结束后，观察菌落生长情况，并记录结果。 5. 结果解读：根据菌落的生长情况和直径大小，判断细菌对药物的敏感性。通常，抗生素有效抑制菌落生长的区域称为抑制圈，其直径大小与药物对细菌的抑

菌效果相关。 - 抗生素敏感（S）：抑制圈直径大于抗生素的最低抑菌浓度（MIC）； - 中度敏感（I）：抑制圈直径仅略大于MIC； - 抗生素耐药（R）：抑制圈直径小于MIC。 6. 结果记录和分析：将对应的药敏结果记录下来，并进行案例分析和数据统计。 7. 实验验证：如果需要，可以对少数样本进行二次验证以确保结果的准确性。 三、注意事项和常见问题 1. 实验操作要严格遵守无菌技术，以防止外界细菌的污染。 2. 实验室工作人员应佩戴适当的个人防护装备，如实验手套、口罩等。 3. 实验仪器和试剂要经过严格的消毒和无菌处理。 4. 抗生素的选择要与实验目的和细菌种类相匹配，避免选择不当的抗生素。 5. 实验结束后，应正确处置培养皿和含有抗生素的废弃物，以避免对环境造成污染。 6. 实验结果的准确性可以通过多次重复实验来验证，以消除偶然误差和可能的异常结果。 总结： 药敏试验是一种常用的实验方法，用于评估药物对细菌或其他微生物的敏感性。操作方法包括准备实验仪器和试剂、稀释菌悬液、制备琼脂平板、扩展细菌、培养和观察、结果解读、结果记录和分析等步骤。在进行实验时，需要注意无菌操

药敏试验操作方法

药敏试验操作方法 药敏试验根据美国临床标准委员会（NCCLS）推荐的K-B琼脂法进行，药敏纸片选择中国生物制品鉴定所药敏纸片，试验所选择药物必须包括下列抗生素：氨苄西林（AMP），阿莫西林/克拉维酸（AMC），头孢噻吩（CFT），头孢噻肟（CTX），庆大霉素（GEN），萘啶酸（NAL），诺氟沙星（NOR），四环素（TBT），利福平（RFA），复方新喏明（SMZ）。 1 操作方法： (1)将待检菌接种于普通营养琼脂平板，37℃培养16～18小时，然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落，悬于3ml生理盐水中，混匀后与菌液比浊管比浊。以有黑字的白纸为背景，调整浊度与比浊管（0.5麦氏单位）相同。 (2)用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余菌液。用棉拭子涂布整个M-H培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀。 (3)待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面，纸片一贴就不可再拿起。每个平板贴5张纸片，每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。在菌接种后15分钟内贴完纸片。 (4)将平板反转，孵育18～24小时后取出，用游标卡尺测量抑菌圈直径，从平板背面测量最接近的整数毫米数并记录（附表5）。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。有的菌株可出现蔓延生长，进入抑菌环，磺胺药在抑菌环内出现轻微生长，这些都不作为抑菌环的边缘。结果判断依据鉴定所药敏纸片判定标准。 2 注意事项： (1)制备MH琼脂平板应用直径90mm平皿，在水平的实验台上倾注。琼脂厚为4±0.5mm（约25-30ml培养基），琼脂凝固后塑料包装放4℃保存，在5日内用完，使用前应在37℃培养箱烤干平皿表面水滴。倾注平皿前应用pH计测pH值是否正确(pH应为7.3)。pH过低会导致氨基糖苷类，大环内酯类失效，而青霉素活力增强。 (2) 药敏纸片长期储存应于－20℃，日常使用的小量纸片可放在4℃，但应至于含干燥剂的密封容器内。使用时从低温取出后,放置平衡到室温后才可打开，用完后应立即将纸片放回冰箱内的密封容器内。过期纸片不能使用, 应弃去。 (3) 不稳定药物如亚胺培南, 头孢克洛, 克拉维酸复合药等, 应冷冻保存, 最好在-40 ℃以下。 (4) 保证质控菌株不变异的简便方法，将新得到的冻干菌株接种含血的M-H平板复活。然后每株细菌接种10支高层琼脂管，放置冰箱保存。每月取出一支，传出细菌供常规用。待用剩至最后一支，可传种在M-H平板上，再接种一批高层琼脂管备用。如此可保证原始菌种永不接触抗菌素。

一株半滑舌鳎致病性假交替单胞菌的分离鉴定与药敏特性分析

一株半滑舌鳎致病性假交替单胞菌的分离鉴定与药敏特 性分析 1. 引言 1.1 背景介绍 半滑舌鳎是一种常见的淡水鱼类，广泛分布于我国的江河湖泊中。近年来半滑舌鳎的养殖却受到了一种新型病原菌的威胁，即致病性假 交替单胞菌。这种病原菌具有较高的致病性和传染性，会导致半滑舌 鳎的大规模死亡，给养殖业带来了严重的经济损失。 针对半滑舌鳎致病性假交替单胞菌的分离鉴定及药敏特性研究具 有重要意义。通过深入了解这种病原菌的特性，可以为防控疫病提供 科学依据，有效减少养殖业损失。对于这一领域的研究具有重要的理 论和实践价值。本研究旨在对半滑舌鳎致病性假交替单胞菌进行深入 的分离鉴定与药敏特性分析，为进一步研究该病原菌的病因学和免疫 学提供参考。 1.2 研究目的 本研究旨在对一株半滑舌鳎致病性假交替单胞菌进行深入分离鉴 定和药敏特性分析，以揭示其病原特性和药敏特性，为相关疾病的防 控和治疗提供科学依据。具体研究目的包括：1. 确定该菌株的分类地 位和致病性；2. 分析该菌株的药敏特性，评估其对常用抗生素的敏感 性和耐药性；3. 探究该菌株的病原特性，包括毒力因子及致病机制等

方面的研究；4. 分析该菌株在环境中的分布情况和可能的传播途径， 为预防控制提供科学依据。通过本研究的开展，有望深入了解该病原 菌种的特性和药敏情况，为相关疾病的预防和治疗提供重要的参考。 1.3 研究意义 半滑舌鳎是一种重要的淡水经济鱼类，在养殖过程中常常会受到 各种细菌感染的威胁，其中假交替单胞菌是一种常见的病原菌。对于 半滑舌鳎假交替单胞菌的分离鉴定和药敏特性分析，具有重要的理论 和实践意义。 通过对半滑舌鳎致病性假交替单胞菌的分离和鉴定，可以为进一 步研究其致病机制以及防控措施提供基础数据。了解菌株的形态特征、生化试验和分子生物学鉴定结果，有助于揭示其生物学特性和致病机制，为针对性的防病措施提供科学依据。 药敏试验的方法和结果分析可以为半滑舌鳎假交替单胞菌的治疗 提供参考和指导。了解菌株对不同抗生素的敏感性和耐药性，可以为 临床诊断和治疗提供重要依据，减少药物滥用和治疗失败的情况。 研究半滑舌鳎致病性假交替单胞菌的分离鉴定和药敏特性分析， 不仅可以深化对该病原菌的认识，提升养殖水产品质和产量，还可以 为相关疾病的防治提供科学依据，具有重要的理论和实践价值。 2. 正文 2.1 半滑舌鳎致病性假交替单胞菌的分离方法

药物敏感实验方法及步骤

药物敏感实验方法及步骤 一、实验背景 药物敏感实验是一种常见的药物筛选方法，通过测试不同剂量的药物对细胞或动物的生长和发育的影响，从而评估药物的疗效和毒性。该实验可以为新药开发提供重要参考依据，也可以用于评估已上市药物的疗效和安全性。 二、实验材料 1. 细胞培养基：如DMEM、RPMI-1640等； 2. 药物：待测药物和对照药物； 3. 细胞：如人类肺癌细胞A549等； 4. 96孔板：用于培养细胞； 5. 静脉注射器：用于给小鼠注射药物。 三、实验步骤 1. 细胞培养 将细胞按照常规方法培养至对数生长期，然后将细胞用PBS洗涤2次

并离心收集，最后加入适量的培养基中制备单细胞悬液。 2. 药物处理 将待测药物按照预定浓度稀释至不同浓度，并加入到96孔板中。同时，在另一个96孔板中加入对照药物，如阿霉素、氟尿嘧啶等。 3. 细胞处理 将细胞悬液加入到96孔板中，每孔约1万个细胞。然后将板放入培养箱中，恒温恒湿培养24小时。 4. 细胞增殖检测 使用MTT法或CCK-8法等方法检测细胞的增殖情况。具体步骤如下： （1）MTT法：将MTT溶液加入到96孔板中，培养4小时后加入DMSO，并在洗板器上震荡混匀。最后使用酶标仪检测吸光度值。 （2）CCK-8法：将CCK-8溶液加入到96孔板中，培养2小时后使 用酶标仪检测吸光度值。 5. 数据处理

根据实验结果，计算药物的IC50值和治疗指数（TI）。其中，IC50值表示药物抑制细胞增殖50%所需的最小浓度；TI表示药物的治疗效果与毒性之比。 6. 动物实验 如果需要评估药物在体内的疗效和毒性，可以进行小鼠模型实验。具体步骤如下： （1）小鼠注射：将小鼠按照体重分组，然后使用静脉注射器将药物溶液注射到小鼠体内。 （2）观察动态：观察小鼠的生长发育情况、行为活动和食欲等指标，并记录相关数据。 （3）取样检测：在实验结束后，取样检测小鼠的血液、肝脏、肾脏等组织，评估药物的毒性和疗效。 四、实验注意事项 1. 实验过程中要注意无菌操作，避免细胞污染或交叉感染。 2. 药物处理要严格按照预定浓度进行稀释，避免误差。

纸片法药敏试验失败的原因分析及解决措施

纸片法药敏试验失败的原因分析及解决措施 作者：王林果康娟 来源：《兽医导刊》 2015年第4期 王林果康娟/ 普莱柯生物工程股份有限公司 兽医临床常用的药敏试验方法主要有两种，即扩散法和稀释法。扩散法属手工测试方法， 通过测试药物纸片或者牛津杯在固体培养基上的抑菌圈的大小，判断细菌对该种药物是否敏感。稀释法包括试管稀释法和微量稀释法，通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况， 判断其最低抑菌浓度（MIC）。由于扩散法操作简单，成本低，已经被大多数兽医临床实验室和基层单位所采用。扩散法又包括纸片法、牛津杯法和打孔法，目前兽医临床应用较多的方法是 纸片法，以下针对该法进行分析。 一、问题的提出 按照标准操作程序进行操作，测量出抑菌圈大小，根据药敏实验标准进行判读，获得比较 敏感的药物，现场使用常常出现敏感药物得不到良好的治疗效果，或者药敏实验不敏感的药物 在现场使用却能获得较好的治疗效果，这是很多从事兽医实验室工作的兽医想不明白的，是不 是药敏试验做错了？还是药物是假药？又或者是药敏试验本身就不靠谱？一堆的问号让兽医工 作者无所适从，那么究竟为何会有这样的结果，有了这样的结果如何改善？ 二、问题分析 1. 药敏实验步骤（纸片法）。（1）无菌采集合适的病料组织，无菌接种培养皿或者肉汤 进行再置于37℃温箱中培养16 ～ 24 h 增菌。（2）在超净工作台中或酒精灯旁，用无菌棉签或经酒精灯火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将菌液均匀涂布到平皿中的固 体培养基表面。（3）用无菌镊子将纸片（提前制备好）放于固体培养基表面并轻压，使纸片与培养基表面完全接触。为了能准确观察结果，要求药敏纸片均匀分布于培养基上，位置安排适中，防止出现抑制圈重叠。一般各纸片中心相距应大于24 mm，可在平皿中央贴一片，外周等 距离贴5 ～ 6片。（4）标记每种药敏纸片的名称。（5）贴完纸片的平皿15 min 后再置于37℃温箱中培养16 ～ 24 h，观察记录结果。（6）结果判读：以药敏纸片周围没有肉眼可见生长 物区域为抑菌圈，根据抑菌圈直径大小判断细菌对抗菌药的敏感性。 2. 影响药敏试验结果的因素。 （1）实验本身因素。 培养基：①培养基的成分的不同，不仅影响敏感菌株的生长繁殖并可影响到抑制圈的直径。一般细菌，如大肠杆菌及葡萄球菌可使用普通营养琼脂；做磺胺类药物敏感试验时应选用无蛋 白胨平板；链球菌和巴氏杆菌可用绵羊血琼脂平板。②倾注平板时，厚度应合适（约5 ～ 6 mm），不可太薄，一般90 mm 直径的培养皿，倾注培养基18 ～ 20 ml 为宜。③培养基内应 尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷 和对氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺药和TMP 的活性。④市场提供的药敏试验的培养基缺乏严格 质控，质量难以保证，建议采购质量过硬的产品或者自制培养基。 细菌接种量：细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗 菌活性。

药敏试验操作方法

药敏试验操作方法 药敏试验是一种常用的实验方法，用于确定某种药物对细菌的敏感性或抗性。下面是药敏试验的一般操作方法： 1. 菌株的培养与准备： 首先，选择要测试的细菌株。常用的菌株包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。将菌株从冻存状态中转移到琼脂平板上进行培养，然后选取单个菌落进行继续培养。 2. 制备药物浓度梯度： 为了测试细菌对不同浓度药物的敏感性，需要制备一系列药物浓度梯度。可以选择常用的抗生素，如青霉素、利福平等。根据药物的最小抑菌浓度（MIC）确定所需药物的最高浓度。 3. 制备洗涤液： 制备1倍洗涤液，一般使用生理盐水或缓冲液。如要进行中药药敏试验，可根据实验需求选择适当的提取液。 4. 制备菌悬液： 从培养得到的菌落中选择单个菌落，接种到含有洗涤液的试管或培养皿中。使用比例约为1:100（菌悬液：洗涤液），均匀混合。 5. 药物与细菌接触：

将制备好的菌悬液均匀涂布在琼脂平板上，然后使用定量器将一定量的药物滴在琼脂平板上。确定滴药量时应根据具体药物的MIC进行调整。 6. 培养与观察结果： 将涂有菌悬液和药物的琼脂平板进行孵育，时间和温度可以根据具体的实验目的和菌株要求进行调整。观察培养后的平板上是否出现菌落生长，以及菌落的数量和形态特征。 7. 结果解读与分析： 根据观察到的结果，分析不同浓度药物对细菌的抑菌效果，评估细菌对药物的敏感性。可以根据菌落的出现与否、数量的多少和生长的形态特征来判断细菌是否对药物敏感。 总结： 药敏试验是一种重要的实验方法，可以评估细菌对药物的敏感性或抗性。操作时需要注意菌株的选择和培养方法、药物浓度的制备、菌悬液的制备和药物与细菌的接触方法，以及培养和观察结果等。通过药敏试验的结果，可以帮助医生选择适当的药物治疗感染病情

药敏实验的操作规程

药敏实验的操作规程 药敏实验是一种常用的实验方法，用于测试不同药物对细菌的敏感性。其操作规程如下： 1. 准备工作 a. 选择适当的培养基：根据实验目的和细菌的需求，选择适合的培养基。常用的培养基有Muller-Hinton (MH) 培养基和血琼脂基质（Blood Agar）。 b. 准备药物：根据研究的需求，选择要测试的药物，先进行浓度调节并制备药物试液。 c. 选择试验细菌：选择需要测试的细菌菌株，可选择多种细菌进行测试。 2. 制备药物试液 a. 根据药物的浓度和用途，按照配制方法将药物试液制备好。 b. 对于不同药物，可根据需要设定不同的浓度梯度。通常使用两倍稀释法制备浓度梯度。 3. 制备细菌悬浮液 a. 从培养基中取出所需菌株，并用无菌生理盐水进行洗涤，以去除残余培养基或其他杂质。 b. 将菌株悬浮于无菌生理盐水中，通过眼镜划线计数法或光密度测定法调整细菌悬浮液的浓度至合适的范围。 4. 进行测定

a. 在MH培养基或血琼脂基质上均匀涂布细菌悬浮液，使其形成薄膜。 b. 将培养基上涂有菌株的培养皿分成数个区域，每个区域均加入一种药物试液。 c. 用无菌的扩菌针分别在每个区域上刺入药物试液，使药物试液与菌株接触。 d. 将培养皿孵育于适当的环境条件下，一般为37℃，孵育时间根据实验目的而定，通常为24小时。 5. 结果判读 a. 在观察期间，观察每个区域的菌落生长情况。 b. 比较不同药物试液对细菌生长的影响，评定其敏感性。 c. 根据实验目的和相应参考标准，判断细菌对药物的敏感性、中等敏感性或耐药性。 6. 数据处理和分析 a. 统计每个药物试液对细菌的抑菌效果，记录菌落生长情况。 b. 根据实验结果，绘制抑菌效果图或者计算药物的最小抑菌浓度（MIC）。 7. 实验注意事项 a. 所有操作必须在无菌条件下进行，避免细菌的污染。 b. 实验人员必须戴上手套，避免药物对皮肤造成刺激。

开展药物敏感试验工作 推进水产养殖用药减量行动

开展药物敏感试验工作推进水产养殖用 药减量行动 作者：施录禄 来源：《黑龙江水产》 2018年第3期 所谓药物敏感试验（简称药敏试验）是指通过对病原微生物对各种抗菌药物的敏感程度的 测定，以指导临床合理选用抗菌药物的微生物学试验。其大致方法是：用接种环从患病的水生 动物感染部位取含致病菌的样品，接种在适当的培养基上，在一定条件下培养；同时将分别含 有一定量各种抗菌药物的纸片贴在培养基表面，培养一定时间后观察结果。由于致病菌对各种 抗菌药物的敏感程度不同，在药物纸片周围便出现不同大小的抑制病菌生长而形成的“空圈”，称为抑菌圈。抑菌圈大小与致病菌对各种抗菌药物的敏感程度成正比关系。从而可以根据试验 结果有针对性地选用抗菌药物。 一、开展水生生物致病菌药敏试验的重要意义 1. 有助于正确选用抗菌药物 为了防治水生动物的细菌性疾病，在养殖生产中经常使用各种抗生素和一些化学合成抗菌 药物进行治疗。由于多次重复使用同类抗菌药物容易引起病原菌产生耐药性从而导致防治无效；加之对抗生素药物的不正确使用，不仅会导致水生动物体内药物残留，还可能引起病原菌产生 耐药性和机体内正常微生物菌群失调进而破坏微生态平衡。因此从患病水生动物体内进行致病 菌的分离，进行抗菌药物的药敏试验评价，是科学合理、安全正确选择和使用抗生素药物的关键。 2. 有助于精准使用抗菌药物 从目前看，在水产养殖上对抗菌药物的使用量主要是参考渔药说明书的推荐量进行使用， 并且普遍存在超量添加的现象。通过药敏试验，我们可检测出某种病原菌对多少剂量（浓度） 的抗菌药物呈现敏感反应，即通过对MIC（最少抑菌浓度）的测定而计算出需要投喂的实际抗 菌药物的量，从而达到精准使用抗菌药物的目的。 3. 有助于判别抗菌药物真伪 市场中抗菌药物种类众多，质量参差不齐。如何进行科学选择是摆在水产养殖户面前的难题。通过药敏试验，针对不同抗菌药物出现的抑菌圈大小，我们可以选择出适合的抗菌药物， 判别出不适合的抗菌药物，从而有助于我们判别渔药的真伪。 4. 可减轻养殖生产者的负担 做药敏试验表面上看增加了费用支出，而实际上通过药敏试验我们可在鱼病发生的第一时 间选择出疗效好又经济的药物，不用在第一次用药无效的情况下进行第二次用药，可减轻养殖 业者的经济负担，坚定养殖生产者对于鱼病治疗的信心。 5. 可推进水产养殖用药减量行动 当前农业部在全国开展“农业质量年”活动，旨在达到产品质量高、产业效益高、生产效 率高、经营者素质高和产品竞争力高的目的。通过深入开展水产养殖主要病原微生物耐药性普查，我们可做到精准用药，减少不必要和盲目用药，推进水产养殖用药减量和渔业的绿色发展。