生物化学实验考试试题(完整版)

生物化学实验

二、填空题：

1. 测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法)，(紫外吸收法)，( Folin-酚试剂法（或Lowry法）)和（考马斯亮蓝G-250染色法）。

2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以（以一定时间内分解的H2O2量）来表示，当CA T 与H2O2反应结束，再用（碘量法）测定未分解的H2O2。

3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以（聚丙烯酰胺凝胶）作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由（Acr）和交联剂（Bis）在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备（分离）胶，其自由基的引发剂是（Ap），催化剂是（TEMED）；光聚合法适于制备大孔径的（浓缩）胶，催化剂是（核黄素）。

4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：（吸附层析），（分配层析），（离子交换层析），（凝胶层析）和（亲和层析）。

5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管（等重）且对称放入离心机。

6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S的亲合力愈（大），Km愈大，表示E对S 的亲合力愈（小）。

7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必须__（打开）____（打开、合上）样品池翻盖。

8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的（抗逆性）密切相关。

9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流动相。

10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成的，在具有自由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：（化学法）和（光聚合法）。

11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：（柱层析），（纸层析），（薄层层析）和（薄膜层析）。

参考答案：

生物化学实验

一、名词解释：

1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。

2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。

3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。

4、酶活性：酶催化化学反应的能力，往往以酶促反应的初速度表示。

5、分光光度法：基于溶液对光吸收的大小来确定被测组份的含量的分析方法称为分光光度法或吸光光度法。

6、层析技术：是利用被分离的混合物中各组分的理化性质（分子的形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分配系数等）的不同，使各组分以不同程度在流动相和固定相中进行分配，最终达到分离目的。

7、比活力：即每毫克酶蛋白所含酶的活力单位数。比活力高，表示酶纯度高。

二、填空题：

9. 丙烯酰胺单体（Acr），N，N’-甲叉双丙烯酰胺（Bis）

1、简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。

答：(1)考马斯亮蓝G-250染色法：

考马斯亮蓝G-250结合蛋白质后，形成蓝色CBG-蛋白质结合物，最大光吸收在595nm。在一定的蛋白质浓度范围内（10-1000ug/ml），CBG-蛋白质结合物的O.D595nm值与蛋白质含量成正比，故可用分光光度法进行蛋白质的定量测定。

（2）双缩脲法：

蛋白质含有两个以上的肽键（-CO-NH-）因此，有双缩脲反应，在碱性溶液中蛋白质与Cu2+形成紫色络合物，其颜色深浅与蛋白质含量成正比，而与蛋白质的相对分子质量及aa成分无关，故可以用来测定蛋白质含量；

（3）Folin-酚试剂法（Lowry法）：

是双缩脲法的发展，第一步涉及到碱性溶液中铜蛋白质复合物的形成，然后这个复合物还原磷钼酸－磷钨酸试剂，产生深蓝色（钼蓝和钨蓝混合物）比双缩脲法灵敏，但费时；

（4）紫外吸收法：

蛋白质中一些氨基酸残基中的苯环含有共轭双键，所以蛋白质具有吸收紫外光的性质，最大吸收峰在280nm处，在一定范围内，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质含量成正比，可用作定量测定，简单、灵敏、快速、不耗样品，低浓度的盐类不干扰。

（5）微量凯式定氮法：

根据蛋白质的平均含氮量为16%，因此，测得1g蛋白氮，相当于6.25g蛋白质。

2、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中的三个不连续及三种物理效应。

答：三个不连续：（1）凝胶由上下两层凝胶组成，两层凝胶的孔径不同；

（2）缓冲液离子组成及各层凝胶的pH不同；

（3）在电场中形成不连续的电位梯度。

三种物理效应：（1）电荷效应：酶蛋白按其所带电荷的种类及数量，在电场作用下向一定的电极以一定的速度泳动。

（2）分子筛效应：分子量、形状不同的分子在经过凝胶孔径过程中，受到的阻力不同，因此移动速率不等。

（3）浓缩效应：使待分离样品中的各组分在浓缩胶中被压缩成层，使原来很稀的样品得到高度的浓缩。

3、试分析影响电泳的主要因素有哪些？

答：（1）带电颗粒的大小和形状：颗粒越大，电泳速度越慢，反之越快；

（2）颗粒的电荷数：电荷越少，电泳速度越慢，反之越快；

（3）电场强度：电场强度越小，电泳速度越慢，反之越快；

（4）溶液的pH值：影响被分离物质的解离度，离等电点越近，电泳速度越慢，反之越快；

（5）溶液的粘度：粘度越大，电泳速度越慢，反之越快；

（6）离子强度：离子强度越大，电泳速度越慢，反之越快；

（7）电渗现象：电场中，液体相对于固体支持物的相对移动；

（8）支持物筛孔大小，孔径越小，电泳速度越慢，反之越快。

生物化学 实验考试

生物化学实验考试 1.实验操作:离心管的配平。 2.分段盐析，主要是原理。 3.用一限制性核酸内切酶切DNA，产生什么末端？用相同的酶切不同的DNA，能否将两者链。接起来？如果是环状的DNA呢，结果是怎样呢？ 4.pcr原理是？名称是？ 5.分光光度计为什么要用标准溶液？空白溶液的作用？ 6.pcr扩增得到的DNA如何确定是你想要的？ 7.设计实验:温度，显色试剂是？0-37-100各温度下反应颜色的变化过程？琥珀酸，怎样判断酶的活性？ 8.醋酸纤薄膜应该如何放置！理论加操作！ 9.什么是同工酶？有什么意义？ 10.淀粉的最终产物？如何判断？11.cDNA 是？ 12. 层析原理中包含哪些理化性质？ 13. 凝胶层析可以分离哪些物质 14. 吸光分度计为什么不同试验用不同波长光？ 15. PCR扩增需要哪些东西

16. 就是比色皿的操作， 17. 利用双缩脲测血清总蛋白的原理。 18. 琼脂糖凝胶电泳能用于哪些实验？ 19.pcr 的应用，超级具体的一种喔！请说出pcr技术的一种用途 20. 试管混匀 21. 离心操作. 22.分段盐析为什么可以分离不同蛋白质？23．分光光度计装液注意事项 24．溴乙啶为什么会和DNA结合 25. cDNA怎么来的 26. 琥珀酸脱氢酶的抑制剂实验中，酶活性大小的测定。 27. 印象最深刻的实验，失败的实验，为什么？ 28. 电泳的外界影响因素 29.怎样纯化γ-球蛋白 30.怎样纯化α-球蛋白 31.如何判断唾液淀粉酶活性 32.PCR的三个步骤和对应温度以及如果引物不同哪一个步骤的温度不一样 33.PCR产物纯度鉴定的方法 34.γ-球蛋白流动相和固定相分别是什么 35.分光光度计注意事项 36.0 100 A T 表示什么？

生物化学实验习题及参考答案

生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的？（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、?-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用? D、沉淀作用? 10、有关变性的错误描述为（） A、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变 B、蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性改变 C、 加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易沉淀 11、双链DNA热变性后（） A、黏度下降 B、沉降系数下降 C、浮力密度下降 D、紫外吸收下降 12、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（） A、天冬氨酸 B、脯氨酸 C、赖氨酸 D、丝氨酸 13、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？（） A、His的咪唑基 B、Arg的胍基 C、Cys的巯基 D、Trp的吲哚基

大学生生物化学试验技能大赛初赛试题及答案

大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 一、选择题 1、以下实验仪器中,常用来取用块状固体药品的仪器是〔〕. A.药匙 B.试管夹 C.镊子 D. 土甘埚钳 2、托盘天平调零后,在左盘衬纸上置氧化铜粉末,右盘衬纸上置1个5g祛码,游码标尺示数如下,此时天平平衡.那么被称量的氧化铜质量为〔〕. A. 8.3 g B. 7.7 g C. 3.3 g D. 2.7 g 3、用减量法从称量瓶中准确称取0.4000g分析纯的NaOH固体,溶解后稀释至打00.0 mL,所得NaOH溶液的浓度为〔〕. A.小于0.1000 mol/L B.等于0.1000 mol/L C.大于0.1000 mol/L D.三种情况都有可能 4、邻苯二甲酸氢钾〔KHC8H4O4〕的摩尔质量为204.2 g/mol,用作为基准物质标定0.1 mol/LNaOH溶液时,如果要消^aOH溶液为25 mL左右,每份应称取邻苯二甲酸氢钾〔〕g左右. A. 0.1 B. 0.2 C. 0.25 D. 0.5 5、NaHCO3纯度的技术指标为＞99.0%以下测定结果哪个不符合标准要求？〔〕. A. 99.05% B. 99.01% C. 98.94% D. 98.95% 6、精密称取马来酸氯苯那敏对照品12 mg,应选取〔〕的天平. A.千分之一B.万分之一C.十万分之一D.百万分之一 7、实验室标定KMnO4溶液,常用的基准物质是〔〕. A. Na2cO3 B. Na2S2O3 C. Na2C2O4 D. K2Cr2O7 8、标定氢氧化钠常用的基准物质是〔〕. A. EDTA B. K2Cr2O7 C.草酸 D.邻苯二甲酸氢钾 9、以下物质可以作为基准物质的是〔〕.

17181食品生物化学实验考试试题库 1

17181食品生物化学实验考试试题库 1本学期做过的实验中涉及物质含量测定的有几个，幷说出实验名称及其测定原理。答：有蛋白质含量、样品中的含糖量这两个；涉及蛋白质含量的试验有双缩脲法测定蛋白质浓度、紫外线吸收法和微量凯氏定氮法；样品中含糖量涉及的试验是总糖和还原糖的测定； 双缩脲法测蛋白原理：具有两个或两个以上的肽键化合物特有双缩脲反应，在碱性溶液中与铜离子形成紫色配合物，在540mm处有最大吸收，在一定浓度范围内蛋白质浓度与双缩脲反应所呈的颜色深浅成正比，可用比色法定量测定。 紫外吸收法原理：由于蛋白质中的酪氨酸，色氨酸，苯丙氨酸含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，吸收峰在280nm左右。 微量凯氏定氮法测定原理：凯氏定氮也称克氏定氮，样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氨(消化)，氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。 总糖和还原糖的测定试验原理：还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3，5—二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3—氨基—5—硝基水杨酸，再过量的氢氧化钠碱性溶液中此化合物呈橘红色在540mm处，一定浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系利用比色法可测定样品中的含糖量。 2、测定蛋白质含量的实验有哪些？幷说明测定原理。 答：紫外吸收法测蛋白质含量原理：蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸残基，使蛋白质在280nm处有最大吸收峰。在一定浓度范围内，蛋白质溶液280nm吸光度与蛋白质浓度成正比，可以用这一性质用作蛋白质定量测定 凯氏定氮法测蛋白质含量原理：有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵.硫酸铵与强碱反应,放出氨.将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定.根据测得的氨量,计算样品的总氮量. 双缩脲：双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2)在碱性溶液中可与铜离子产生紫红色的络合物，这一反应称为双缩脲反应 3、紫外吸收法测蛋白质含量与双缩脲法测蛋白质含量都使用了分光光度计，二者在使用方法上有何不同？幷指出这两种方法的优缺点？ 答：紫外吸收法测得是260nm和280nm的吸光度，本方法对测定微量蛋白质的测定即快又方便，它还适用于硫酸铵或其他盐类混杂的情况下，这时用其他方法测定则比较困难。此方法有时会产生误差。 双缩脲法测蛋白质测得是540nm处吸光度，此方法最常用于需要快速但不要求十分精确得测定。硫酸铵不干扰此反应，铜离子容易被还原，有时会出现红色沉淀。 4、使用分光光度计测物质含量时为什么要有空白管？对空白管所装物质有何要求？ 使用分光光度计测物质之外含有一样的组分,以此来做标准,然后被测定样品吸收的单色光与之进行对比得到的测量数据。

大学生物化学实验试题

大学生物化学实验试题 一、选择题（每题4分，共80分） 1. 下列化合物中，哪一个是β-葡萄糖苷的结构？ A. 淀粉 B. 蔗糖 C. 葡萄糖 D. 纤维素 2. 某种蛋白质的三级结构中包括α螺旋和β折叠，属于下列结构层次的是： A. 一级结构 B. 二级结构 C. 三级结构 D. 四级结构 3. 某生物体内含有DNA，其核苷酸组成中，磷酸基的含量比氮碱基高，是因为： A. DNA的磷酸基数量比氮碱基多 B. DNA严格按照碱基配对原则生长 C. DNA的酶在合成时必须利用磷酸基

D. 氮碱基的合成需要消耗磷酸基 4. 下图所示的实验曲线是某种酶反应的活性曲线，其中酶浓度为0.2mol/L，底物浓度为0.1mol/L。在此条件下，酶活性最高的温度是： [实验曲线图] A. 5℃ B. 25℃ C. 37℃ D. 50℃ 5. 某种酶反应需要辅因子NAD+参与，NAD+是以下哪种生物分子的氧化态？ A. 葡萄糖 B. 乳酸 C. 葡萄糖酸 D. 乙醛 二、简答题（每题10分，共40分） 1. 请简述蛋白质的四级结构是如何形成的，并举例说明。 蛋白质的四级结构是指蛋白质的超级结构。它是由蛋白质链的不同部分通过非共价键的相互作用所形成的。四级结构的形成可以通过以下两种方式实现：

（1）同一个多肽链的不同部分之间形成相互作用，如氢键、范德 华力等。例如，血红蛋白中的α链和β链通过氢键和离子键相互作用，形成稳定的四级结构，使血红蛋白具有氧气输送和释放的功能。 （2）不同多肽链之间相互作用形成四级结构。例如，抗体由两条 重链和两条轻链组成，它们通过氢键和二硫键相互作用，形成特定的 空间结构，从而实现抗体的特异性识别和结合。 2. 根据以下数据，计算酶的米氏常数（Km）和最大反应速率（Vmax）。 测量NADH在酶反应中的生成速率，NADH浓度与时间的关系如下： 时间（s）浓度（mol/L） 0 0 10 0.002 20 0.004 30 0.006 40 0.008 50 0.01 酶反应的初始底物浓度为0.02mol/L。

生物化学实验中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年

生物化学实验中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年 1.离心机转子高速旋转时，如果悬浮颗粒密度低于周围介质的密度时，则颗粒 离开轴心方向移动，发生沉降。（） 参考答案: 错误 2.离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开，或将乳浊液中两种密度 不同，又互不相溶的液体分开。（） 参考答案: 正确 3.常用的离心机有多种类型：低速离心机的最高转速不超过6000 rpm，高速 离心机在25000 rpm以下，超速离心机的最高速度达30000 rpm以上。（） 参考答案: 正确 4.G为离心力，一般以重力加速度（g）的倍数来表示。（） 参考答案: 正确 5.缓冲溶液是指具有能够维持pH值相对稳定性能的溶液。 参考答案: 正确

6.使用移液管时，右手拿洗耳球，将食指或拇指放在洗耳球的上方，左手拇指 和食指夹住移液管茎标线以上的地方。 参考答案: 错误 7.马斯亮蓝G-250的英文是Coomassie brilliant blue G-250。 参考答案: 正确 8.移液管常常分为单刻度移液管和多刻度吸量管。 参考答案: 正确 9.考马斯亮蓝染料有G-250和R-250两种。 参考答案: 正确 10.使用移液管准确移取一定体积的液体时，要对管内壁进行润洗。 参考答案: 正确 11.如果移液管上标有“吹”字，说明放液以后需要把尖端的溶液吹出。 参考答案: 正确

12.当考马斯亮蓝G-250与蛋白质通过范德华力结合后，其颜色由红色转变成 深蓝色，最大吸收峰变为490 nm。 参考答案: 错误 13.分光光度法也称吸光光度法，是通过测定物质在的吸收度，从而对该物质 进行定性和定量分析。 参考答案: 在特定波长处或一定波长范围内光 14.调整液体至刻度时要将移液管垂直，接液的容器倾斜45℃，右眼与刻度线 平行。 参考答案: 正确 15.反应体系中存在大量去污剂会对考马斯亮蓝法测定蛋白质含量有影响。 参考答案: 正确 16.考马斯亮蓝法的灵敏度不高，不适用于样品中微量蛋白质的测定。 参考答案: 错误

生物化学实验_北京师范大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年

生物化学实验_北京师范大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年 1.纯化蛋白时不一定是越多的纯化步骤效果就越好。 参考答案: 正确 2.如果有一个蛋白A，其分子量为40 KD。它在Native PAGE上产生两条条 带，下面哪种说法有可能具有合理性 参考答案: 两条条带分别为单体和某个降解产物_两条条带分别为单体和二聚体_两条条带分别为二聚体和四聚体_两条条带分别为单体和四聚体 3.在超声破碎时，可以连续超声5分钟，这样可以快速完成细胞破碎。 参考答案: 错误 4.设计纯化实验时，尽量不要利用相似原理的纯化步骤进行多步纯化。 参考答案: 正确 5.如果蛋白可以利用亲和层析分离纯化，那么通常会首先考虑亲和层析。 参考答案: 正确

6.纯化流出曲线上，上样过程中出现的流出峰又称为 参考答案: 穿过峰 7.蛋白哪种性质可以用来设计层析实验对其进行纯化 参考答案: 分子大小_与特定抗体结合_等电点 8.蛋白的哪种特性可以用来粗纯化 参考答案: 等电点_热稳定性 9.在pH 7.0的缓冲条件下，下面哪种等电点的蛋白可以用阴离子交换树脂分 离纯化 参考答案: 4.0_ 5.0 10.下面哪种方法是常用浓缩蛋白的方法 参考答案: 蒸发浓缩_超滤_盐析_真空冷冻干燥 11.离子交换层析介质常常按如下方式进行保存 参考答案: 20%乙醇中4℃保存

12.小规模纯化过程中上样量是A mg。如果计划在大规模纯化过程中上样量扩 大n倍，那么，层析柱的内径、高度以及层析流速该做如何调整？ 参考答案: 高度不变_内径扩大n倍_流速扩大n倍 13.纯化过程中，收集流出样品的方式有哪些种？ 参考答案: 按固定体积进行收集_按流出峰斜率变化进行收集_按流出峰紫外吸收值变化进行收集_按流出峰参数变化进行收集 14.待纯化样品无需过滤，离心后可以直接上样。 参考答案: 错误 15.一般来说，离子交换层析适合粗纯化阶段，适合大体积上样。 参考答案: 正确 16.在蛋白质纯化过程中，速度越快，分辨率越高。 参考答案: 错误 17.离子交换层析结束后，可以用0.5 mol/L 的NaOH进行层析介质再生。

生物化学实验考核试题库

生物化学实验考核试题库 要求：参加考核的每位学生须从1－6号题中随机抽1题，从7－12号题中随机抽1题，从13－37号题中随机抽1题，从38－46号题中随机抽1题，共计4道考核题进行考核，总分为60分。 一、理论考核题 1盐析和盐溶（3分）2电泳（3分）3层析（色谱）（3分）4酶的活力单位（3分）5比活力（3分）6分子筛效应（3分）7电泳的原理（4分） 8离子交换层析的原理（4分）9亲和层析的原理（4分） 10凝胶过滤层析的原理（4分） 11吸附层析的原理（4分） 12透析技术的基本原理及其应用（4分） 13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途（6分） 14按层析过程的机理，层析法分哪四类？按操作形式不同又分哪三类？（7分） 15普通离心机的使用注意事项？（6分） 16可见分光光度计的使用注意事项？（6分） 17蛋白质含量测定的常用方法有那些？（6分） 18粗脂肪的提取和含量测定的基本原理（6分） 19索氏提取器是由哪几部分组成的？（6分） 20粗脂肪的提取和含量测定的简要操作步骤（6分） 21粗脂肪的提取实验中如何减少误差？（6分） 22凯氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分） 23凯氏定氮实验中用到的主要器材有哪些？（6分） 24核酸的含量测定常用的方法有哪些？（6分） 25双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分） 26双倒数法测定米氏常数的实验中，决定实验成败的因素有哪些？关键因素是什么？（7分） 27生物细胞的破碎的常用方法有哪些？（6分） 28酶的制备及提取过程中常注意哪些事项？（6分） 29蛋白质的分离常用的方法有哪些？（6分） 30甲醛滴定法测定氨基酸的基本原理（6分） 31为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？（6分）32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同？（6分） 33聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点？（6分） 34琼脂糖凝胶电泳的优点？（6分） 35提取某种植物组织中的总DNA时，使用的细胞提取液中的主要试剂成分是什么？各有什么作用？（7分） 36如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA？（6分） 37聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时，使用的电泳缓冲液PH＝8.3，那么样品应点在哪端？为什么？（6分） 二、技能或实验操作考核题 38说明纸层析和离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质? 列出纸层析和柱层析的一般操作步骤。（10分） 39凝胶电泳的一般操作步骤（11分） 40普通离心机的使用操作（示范）（10分）

生物化学实验试题与答案

生物化学实验考核试题库 一、理论考核题 1盐析和盐溶（3分）2电泳（3分）3层析（色谱）（3分）4酶的活力单位（3分）5比活力（3分）6分子筛效应（3分）7电泳的原理（4分） 8离子交换层析的原理（4分）9亲和层析的原理（4分） 10凝胶过滤层析的原理（4分） 11吸附层析的原理（4分） 12透析技术的基本原理及其应用（4分） 13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途（6分） 14按层析过程的机理，层析法分哪四类按操作形式不同又分哪三类（7分） 15普通离心机的使用注意事项（6分） 16可见分光光度计的使用注意事项（6分） 17蛋白质含量测定的常用方法有那些（6分） 18粗脂肪的提取和含量测定的基本原理（6分） 19索氏提取器是由哪几部分组成的（6分） 20粗脂肪的提取和含量测定的简要操作步骤（6分） 21粗脂肪的提取实验中如何减少误差（6分） 22凯氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分） 23凯氏定氮实验中用到的主要器材有哪些（6分） 24核酸的含量测定常用的方法有哪些（6分） 25双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分） 26双倒数法测定米氏常数的实验中，决定实验成败的因素有哪些关键因素是什么（7分）27生物细胞的破碎的常用方法有哪些（6分） 28酶的制备及提取过程中常注意哪些事项（6分） 29蛋白质的分离常用的方法有哪些（6分） 30甲醛滴定法测定氨基酸的基本原理（6分） 31为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量（6分） 32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同（6分） 33聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点（6分） 34琼脂糖凝胶电泳的优点（6分） 35提取某种植物组织中的总DNA时，使用的细胞提取液中的主要试剂成分是什么各有什么作用（7分） 36如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA（6分） 37聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时，使用的电泳缓冲液PH＝，那么样品应点在哪端为什么（6分） 二、技能或实验操作考核题 38说明纸层析和离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质列出纸层析和柱层析的一般操作步骤。（10分） 39凝胶电泳的一般操作步骤（11分） 40普通离心机的使用操作（示范）（10分） 41可见分光光度计的使用操作（示范）（10分） 42如果要105摄氏度干燥某种物质，如何使用干燥箱（示范）（10分） 43要称取某种药品，如何使用天平（示范）（10分）

生物化学实验考试试题(完整版)

生物化学实验 二、填空题： 1. 测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法)，(紫外吸收法)，( Folin-酚试剂法（或Lowry法）)和（考马斯亮蓝G-250染色法）。 2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以（以一定时间内分解的H2O2量）来表示，当CA T 与H2O2反应结束，再用（碘量法）测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以（聚丙烯酰胺凝胶）作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由（Acr）和交联剂（Bis）在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备（分离）胶，其自由基的引发剂是（Ap），催化剂是（TEMED）；光聚合法适于制备大孔径的（浓缩）胶，催化剂是（核黄素）。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：（吸附层析），（分配层析），（离子交换层析），（凝胶层析）和（亲和层析）。 5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管（等重）且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S的亲合力愈（大），Km愈大，表示E对S 的亲合力愈（小）。 7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必须__（打开）____（打开、合上）样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的（抗逆性）密切相关。 9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成的，在具有自由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：（化学法）和（光聚合法）。 11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：（柱层析），（纸层析），（薄层层析）和（薄膜层析）。 参考答案： 生物化学实验 一、名词解释： 1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。 4、酶活性：酶催化化学反应的能力，往往以酶促反应的初速度表示。 5、分光光度法：基于溶液对光吸收的大小来确定被测组份的含量的分析方法称为分光光度法或吸光光度法。 6、层析技术：是利用被分离的混合物中各组分的理化性质（分子的形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分配系数等）的不同，使各组分以不同程度在流动相和固定相中进行分配，最终达到分离目的。 7、比活力：即每毫克酶蛋白所含酶的活力单位数。比活力高，表示酶纯度高。 二、填空题： 9. 丙烯酰胺单体（Acr），N，N’-甲叉双丙烯酰胺（Bis）

临床生物化学检验测试题(含答案)

临床生物化学检验测试题（含答案） 一、单选题（共100题，每题1分，共100分） 1、人体含ALT最丰富的组织是 ( ) 。 A、肝细胞 B、心肌 C、骨骼肌 D、白细胞 E、肾脏 正确答案：A 2、检测葡萄糖的特异性最高的方法是 ( ) 。 A、4种方法特异性没有区别 B、硫酸铜还原法 C、己糖激酶法 D、葡萄糖氧化酶法 E、邻甲苯胺法 正确答案：C 3、标本存放于冰箱一天后测定可造成 ( ) 。 A、血Na＋升高 B、血Cl－升高 C、血K＋升高 D、血Cl－升高 E、血K＋不变 正确答案：C 4、导致嘌呤分解增加的疾病不包括 ( ) 。 A、髓外浆细胞瘤 B、多发性骨髓瘤 C、白血病 D、红细胞增多症 E、甲减腺功能减退症 正确答案：E 5、不参与血液pH平衡调节的是 ( ) 。 A、神经系统的调节 B、血液的缓冲系统调节 C、肺对CO2排出的调节

D、每日饮水量、尿的调节 E、肾脏对酸碱物质排出的调节 正确答案：D 6、所谓选择性蛋白尿是 ( ) 。 A、肾小球有选择性地保留了尿中的蛋白 B、分子量<70 000的蛋白可通过肾小球滤过及出现在尿中 C、肾小管有选择性地重吸收了尿中的蛋白 D、尿蛋白定性阴性 E、分子量>70 000的蛋白可通过肾小球滤过及出现在尿中 正确答案：B 7、胆固醇可衍生成 ( ) 。 A、TSH B、ACTH C、肾上腺髓质激素 D、肾上腺皮质激素 E、前列腺素 正确答案：D 8、利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是 ( ) 。 A、吸附层析法 B、离子交换层析法 C、凝胶层析法 D、分配层析法 E、亲和层析法 正确答案：B 9、进行总钙和离子钙测定时，不能采用的标本为 ( ) 。 A、晨尿 B、肝素抗凝血浆 C、血清 D、脑脊液 E、EDTA抗凝血浆 正确答案：E 10、细胞间液与血浆组成成分的主要差别是 ( ) 。 A、阳离子种类

生物化学检验测试题(附答案)

生物化学检验测试题（附答案） 1、患者男，17岁，近半年来腹部不适，多次剧烈腹痛。空腹12h抽血分 离血浆，呈奶样乳白色，但经15000r/min离心30min后，发现血浆下层较透明，而表面为奶油层，该患者血浆中下列哪项脂蛋白可能升高 A、HDL B、CM C、VLDL D、LDL E、IDL 答案：B 2、极低密度脂蛋白中含量最多的成分是 A、载脂蛋白 B、磷脂 C、胆固醇酯 D、甘油三酯 E、胆固醇 答案：D 3、判断甲状腺功能最基本的筛选试验是 A、TT3 B、FT4 C、TSH D、TT4 E、FT3 答案：D 4、用于确诊实验的分析方法，必须有较高的 A、实验的总有效率 B、阳性结果的预示值 C、阴性结果的预示值 D、诊断特异性 E、诊断灵敏度 答案：D 5、常用于检测卵巢癌相关的肿瘤标记物是 A、CA19-9 B、AFP C、PSA

D、CEA E、CA125 答案：E 6、无酸碱平衡紊乱时 A、PaCO2减少 B、PaCO2增高 C、pH正常 D、HCO3-]增高 E、HCO3-]减少 答案：C 7、患者女，30岁。厌油无食欲，突发高热3天，肝区疼痛，巩脱黄染.疑诊为急性病毒性肝炎。急性病毐性肝炎时，明显升高的酶应该是 A、GGT B、LDH C、ALT D、CK E、ALP 答案：C 8、合成肌钙蛋白Ⅰ的细胞是 A、骨骼肌细胞 B、肝实质细胞 C、肝间质细胞 D、浆细胞 E、心肌细胞 答案：E 9、高钾血症见于 A、呼吸性碱中毒 B、大量补充氨基酸 C、细胞大量坏死 D、代谢性碱中毒 E、大量补充葡萄糖 答案：C 10、组织间液和血浆所含溶质的主要差别是 A、Cl- B、HCO3-

生物化学实验试题与答案

生物化学实验试题与答案 生物化学实验考核试题库 一、理论考核题 1盐析和盐溶（3分后）2电泳（3分后）3层析（色谱）（3分后）4酶的活力单位 （3分后）5比活力（3分后）6分子筛效应（3分后）7电泳的原理（4分后）8色谱法层 析的原理（4分后）9亲和层析的原理（4分后）10凝胶过滤器层析的原理（4分后） 11吸附层析的原理（4分） 12输血技术的基本原理及其应用领域（4分后） 13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途（6分） 14按层析过程的机理，层析法分哪四类？按操作方式形式相同又分哪三类？（7分后）15普通离心机的采用注意事项？（6分后）16可知分光光度计的采用注意事项？（6分后）17蛋白质含量测量的常用方法存有那些？（6分后）18粗脂肪的抽取和含量测量的基本原理（6分后）19索氏抽取器就是由哪几部分共同组成的？（6分后）20粗脂肪的抽取和含 量测量的详细操作步骤（6分后）21粗脂肪的抽取实验中如何增加误差？（6分后）22凯 氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分后）23凯氏定氮实验中使用的主要器材存有哪些？（6分后）24核酸的含量测量常用的方法存有哪些？（6分后） 25双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分） 26双倒数法测定米氏常数的实验中，同意实验胜败的因素存有哪些？关键因素就是什么？（7分后） 27生物细胞的破碎的常用方法有哪些？（6分）28酶的制备及提取过程中常注意哪些事项？（6分）29蛋白质的分离常用的方法有哪些？（6分） 30甲醛滴定法测量氨基酸的基本原理（6分后） 31为什么sds－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？（6分）32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同？（6分）33聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点？（6分）34琼脂糖凝胶电泳的优点？（6分） 35抽取某种植物非政府中的总dna时，采用的细胞提取液中的主要试剂成分就是什么？各存有什么促进作用？（7分后） 36如何证明提取到的某种核酸是dna还是rna？（6分） 37共聚丙烯酰胺凝胶电泳拆分血清蛋白时，采用的电泳缓冲液ph＝8.3，那么样品应 当点在哪端的？为什么？（6分后）

生物化学实验习题及参考答案

生物化学实验习题及参考答案 生物化学实验习题及解答一、名词解释 1、pi； 2、层析； 3、透析； 4、sds-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、tm值；8、同工酶；9、km值；10、dna变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（）a、双缩脲反应b、凯氏定氮c、紫外吸收d、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的？（） a、葡萄糖――molish反应 b、胆固醇――libermann-burchard反应 c、色氨酸―― 坂口（sakaguchi）反应d、氨基酸――茚三酮反应3、sanger试剂就是（） a、苯异硫氰酸 b、2，4-二硝基氟苯 c、丹磺酰氯 d、?-巯基乙醇4、肽键在下列哪个 波长具有最大光吸收？（）a、215nmb、260nmc、280nmd、340nm 5、以下蛋白质组分中，哪一种在280nm具备最小的光吸收？（） a、色氨酸的吲哚基 b、酪氨酸的酚环 c、苯丙氨酸的苯环 d、半胱氨酸的硫原子6、sds凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（）a、在一定ph值条件下所带 的净电荷的不同b、分子大小不同c、分子极性不同d、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵结晶后，可以采用透析法除去硫酸铵。硫酸铵与否从透析袋中除净，你采用以下哪一种试剂检查？（） a、茚三酮试剂 b、奈氏试剂 c、双缩脲试剂 d、folin-酚试剂8、蛋白质变性是由于（） a、一级结构发生改变 b、亚基裂解 c、空间构象毁坏 d、辅基开裂9、大枣牛奶或生 蛋清营救重金属盐中毒就是依据蛋白质具备（）a、胶体性b、粘性c、变性促进作用d、 结晶促进作用10、有关变性的错误叙述为（） a、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变 b、蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性 发生改变c、冷却、紫外线照射、超声波等可以引发蛋白质变性d、变性蛋白质粘度 减少，极易被酶水解，极易结晶 11、双链dna热变性后（） a、黏度上升 b、沉降系数上升 c、浮力密度上升 d、紫外稀释上升

生物化学实验(山东联盟)智慧树知到课后章节答案2023年下滨州学院

生物化学实验（山东联盟）智慧树知到课后章节答案2023年下滨州学院 滨州学院 第一章测试 1.生物实验中的一次性手套及沾染EB致癌物质的物品,应（）。 A:洗洗再用 B:丢弃在普通垃圾箱内 C:随意放在实验室 D:统一收集和处理 答案:统一收集和处理 2.普通玻璃制品的最高受热不可超（） A:180℃ B:250℃ C:500℃ D:140℃ 答案:180℃ 3.实验人员都要注意防止被实验设备产生的X射线照射,下列能够产生X射线 的仪器是（） A:X射线衍射仪 B:721分光光度计 C:气相色谱 D:液相色谱 答案:X射线衍射仪 4.在实验内容设计过程中,要尽量选择（）做实验 A:实验残液 B:危化品 C:不可回收物 D:低毒物品 答案:低毒物品

5.学生在使用剧毒物品时,必须由教师或实验室工作人员在场指导。（） A:错 B:对 答案:对 第二章测试 1.实验室精确量取液体的仪器有移液管、移液枪、量筒。（） A:错 B:对 答案:错 2.离心离心时离心管必须配平。（） A:错 B:对 答案:对 3.移液枪使用完毕应调回最大量程存放。（） A:错 B:对 答案:对 4.电子分析天平应避免频繁更换放置位置，更换位置后应重新调水平。（） A:错 B:对 答案:对 5.分光光度计的比色皿盛样品液应为（）

A:1/2左右 B:2/3左右 C:装满 D:1/4左右 答案:2/3左右 第三章测试 1.扩展剂中正丁醇和乙酸的体积比例是（） A:1/1 B:1/4 C:1/2 D:4/1 答案:1/2 2.蛋白质和氨基酸均与茚三酮有显色反应。（） A:错 B:对 答案:对 3.缝制半圆柱形纸筒时，可以下边宽些以求放的稳定。（） A:错 B:对 答案:错 4.本实验所选样品里只有脯氨酸与茚三酮显色为黄色。（） A:错 B:对 答案:对 5.分配系数越小的样品，比移值也越小，也就是层析样点距原点越近。（） A:对 B:错 答案:错

生化实验试题参考

生化实验试题参考 生物化学实验 二、填空题： 1. 测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法)， (紫外吸收法)，( Folin-酚试剂法（或Lowry法） )和（考马斯亮 蓝G-250染色法）。 2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以（以一定时间内分解的H2O2量）来表示，当CAT 与H2O2反应结束，再用（碘量法）测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以（聚丙烯酰胺凝胶）作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由（Acr）和交联剂（Bis）在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备（分离）胶，其自由基的引发剂是（Ap），催化剂是（TEMED）；光聚合法适于制备大孔径的（浓缩）胶，催化剂是（核黄素）。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：（吸附层析），（分配层析），（离子交换层析），（凝胶层析）和（亲和层析）。 5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管（等重）且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S 的亲合力愈（大），Km愈大，表示E对S 的亲合力愈（小）。

7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必 须__（打开）____（打开、合上）样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植 物的（抗逆性）密切相关。 9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流 动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而 成的，在具有自 由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：（化学法）和（光聚合法）。 11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：（柱层析），（纸层析），（薄层层析）和（薄 膜层析）。 参考答案： 生物化学实验 一、名词解释： 1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极 方向移动的现象。 2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结 构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的 分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。

生物化学实验习题及解答

生物化学实验习题及解答LT

改变C、加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易沉淀 11、双链DNA热变性后（） A、黏度下降 B、沉降系数下降 C、浮力密度下降 D、紫外吸收下降 12、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（） A、天冬氨酸 B、脯氨酸 C、赖氨酸 D、丝氨酸 13、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H 的受体，也可以作为H的供体？（） A、His的咪唑基 B、Arg的胍基 C、Cys的巯基 D、Trp的吲哚基 三、填空 1、脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（）色物质，而其他氨基酸与茚三酮产生（）色的 物质。 2、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（）、（）、（）三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。 3、移液枪在每次实验后应将刻度调至（），让

弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命，并严禁吸取（）。 4、使用离心机时，如有噪音或机身振动时，应立即（），并且离心管须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管，则另外一支要用（）代替。 5、测定蛋白质浓度的方法主要有（）、（）、（）。 6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有（）和（）等。 7、核酸在260nm附近有强吸收，这是由于（）。 8、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260（），同样条件下，单键DNA 的OD260（）。 9、硝酸纤维素膜可结合（）链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，称（）印迹法。 10、常用二苯胺法测定（）含量，用苔黑酚法测定（）含量。 11、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（）、（）、（）、（）、（）。 12、温度对酶活力影响有以下两方面：一方面（），另一方面（）。