ACQUITY UPLCTM BEH色谱柱的维护和使用指南
ACQUITY UPLC TM BEH色谱柱的维护和使用指南
感谢您选择Waters公司的ACQUITY UPLC TM BEH色谱柱，它是专门为了配合Waters的ACQUITY UPLC色谱系统设计的。它采用超纯试剂在满足GMP要求并获得ISO9001认证的条件下生产。ACQUITY UPLC TM BEH的每批填料都会用酸性、碱性和中性化合物的色谱分离进行检验，并且填料的指标控制非常严苛，以保证色谱柱卓越的重现性。每一根ACQUITY UPLC TM BEH色谱柱都是单独检测，色谱柱的性能图谱和填料的批次检验证书一起存储在eCord TM芯片上。
请注意：
我们不建议将ACQUITY UPLC TM BEH色谱柱用于普通的HPLC仪器。
内容提要：
第一节开始
A/ 色谱柱的连接
B/ 色谱柱安装
C/ 色谱柱平衡
D/ eCord TM安装
E/ 新色谱柱柱效测试
第二节色谱柱的使用
A/ 样品的准备
B/ pH范围
C/ 溶剂
D/ 压力
E/ 温度
第三节 色谱柱的清洗、再生和保存
A/ 清洗和再生
B/ 保存
第四节 eCord TM智能芯片技术介绍
A/ 简介
B/ 安装
C/ 生产信息
D/ 色谱柱使用信息
其它补充信息
A/ 延长ACQUITY UPLC TM BEH色谱柱使用寿命的小秘诀
B/ ACQUITY UPLC BEH色谱柱的建议流速和压力
C/ 开始使用ACQUITY UPLC TM BEH HILIC色谱柱
第一节开始
每一根ACQUITY UPLC TM BEH色谱柱的eCord TM智能芯片上都有针对填料的分析报告和针对色谱柱的性能报告：分析报告是针对填料的批次测试报告，其中包括填料的批号、非键合颗粒以及键合颗粒的分析、测试图谱和测试的色谱条件；性能测试报告是针对每根色谱柱的测试报告，包括以下信息：填料批号、色谱柱序列号、塔板数、拖尾因子、容量因子以及测试的色谱条件。用户应该储存这些信息用于将来的参考。
A.色谱柱的连接
ACQUITY UPLC TM系统是使用经过专门设计的可耐受高压并且有最小柱外体积的管路和接头，最优化的色谱柱进口管路（订货号430001084）是随仪器配置的，进样阀末端的管路清晰地用蓝色标记标示出来，将这根管路的另一端插入UPLC色谱柱的入口端并用5/16英寸的扳手拧紧。关于ACQUITY UPLC TM色谱柱的出口管路，请参考ACQUITY UPLC TM系统操作手册的相关检测器部分（货号71500082502）。
B.色谱柱安装
说明：以下流程中给出的流速适用于50×2.1mmI.D., 1.7um粒径的色谱柱，对于其它规格的色谱柱需要根据其它补充信息中的表格B中建议的流速和压力进行调整
1.Purge含有任何缓冲盐的泵系统，将色谱柱入口端连接到进样器的出口端（先
不要接检测器）
2.在0.1ml/min流速条件下用100％纯甲醇或乙腈冲洗色谱柱，然后在5分钟
内将流速升至0.5ml/min。
3.当溶液均匀地从柱子出口流出时，停掉流速，将色谱柱出口端接到检测器上
（这样操作可以避免气泡进入检测系统，并且可快速达到基线平衡）
4.按照步骤2的方法逐渐提高流速
5.一旦压力达到稳定值并且基线平衡好后，则进入下一步操作
6.说明：如果流动相中含有低浓度的流动相改性剂如离子对试剂，要达到完全
平衡可能需要100倍甚至200倍柱体积的流动相消耗；并且，对于含有甲酸
或甲酸铵的流动相也需要较长的时间达到初始平衡
C.色谱柱平衡
ACQUITY UPLC TM色谱柱是用100％乙腈保存的，在使用其它的流动相系统前一定要确保流动相和色谱柱内溶剂的“相容性”：至少用10倍柱体积的流动相平衡色谱柱的（见表一中不同规格色谱柱的柱体积数值），当柱压平稳后即可认为色谱柱基本上达到了热力学平衡。表一：不同规格ACQUITY UPLC TM色谱柱的柱体积（乘以10作为冲洗色谱柱所用的流动相体积）
柱长(mm) 内径1.0 mm 内径2.1 mm
ml 0.07
ml
20 0.016
30 0.024 ml 0.1 ml
ml
50 0.04
ml 0.2
ml
ml 0.4
100 0.08
ml
ml 0.5
150 0.12
为了避免流动相中的缓冲盐在色谱柱或系统中析出，在换上流动相之前，需要用5倍柱体积的含水的有机溶剂的混合溶液（要求有机溶剂的含量比流动相中的含量略低或相等，将缓冲盐溶液用水替代：如在使用60/40的甲醇/缓冲盐流动相之前先用5倍柱体积的60/40甲醇/水溶液冲洗色谱柱）。
对于ACQUITY UPLC TM HILIC色谱柱来讲，用50倍柱体积的50/50乙腈/水平衡，如果流动相中含有缓冲盐则要求流动相中缓冲盐的最终浓度是10 mmol/L（以水相部分的浓度计算）；在开始进样前，用20倍柱体积起始流动相进行平衡。
D.eCord安装
将eCord 放至色谱柱柱温箱旁边，由于eCord Button 是磁化的，因此不需要专门进行定位。
E.初始色谱柱柱效测试
?在开始使用色谱柱分析样品前先进行柱效测试，测试的样品可以是您实验室中常用的测试物或几种测试物的复合物；或者使用Waters柱性能测试报告中测试柱效所用的测试物二氢苊（说明：使用Waters的测试条件和样品进行测试，如果在等度条件下测试结果比标示值略低是正常的）
?计算塔板数，用这个数据作为对照，周期性地监控色谱柱的柱效
?随着色谱柱的使用，需要定期作同样的测试以便追踪色谱柱的性能变化，在不同一些UPLC仪器上测试的结果可能有一些差别，这同诸如管路连接、操作环境、系统电路、溶剂以及试剂的质量、色谱柱条件和操作者的技术都可能有关系
第二节色谱柱的使用
为确保ACQUITY UPLC BEH色谱柱具有稳定的性能，请遵守以下操作指导：
A/ 样品的制备
?样品中的杂质通常会污染色谱柱，建议采用合适的SPE技术（Oasis或Sep-pak）净化样品来避免这个问题，详情请参考https://www.docsj.com/doc/fb9546010.html,/sampleprep
?用流动相或比流动相洗脱强度弱的溶液（含有较少有机溶剂）溶解或稀释样品可以获得最好的峰形和检测灵敏度
?如果样品在流动相中不溶解或者溶解度很差时，要确保样品、样品溶液和流动相是互溶的，以避免样品在流动相中析出
?用0.2 μm的滤膜过滤样品以充分去除颗粒杂质，如果样品溶解在含有机溶剂的改性剂（如乙腈、甲醇）的溶剂中，在选择时要注意膜的材质不会在该溶剂中溶解，也可以在8000 rpm转速的条件下离心20分钟后移取上清液进样
?对于HILIC色谱柱的应用，样品必须溶解在100％纯有机溶剂中（如乙腈）
B/ pH范围
ACQUITY UPLC BEH C18, C8, Phenyl色谱柱的建议pH使用范围是1－12，Shield RP18的pH使用范围是2-11，HILIC是2-8（表二列出了常用的缓冲盐和改性剂）。并且，色谱柱的寿命和操作温度、缓冲盐的浓度也密切相关。比如在高温条件下使用pH 8的磷酸盐缓冲液流动相则会使色谱柱寿命缩短。
说明：在极端pH、高温或极高压力条件下使用会缩短色谱柱寿命。
表二、ACQUITY UPLC BEH色谱柱建议使用的缓冲盐体系
缓冲盐/流动相改性剂PKa 缓冲范围
±1 pH单位
挥发性? 是否MS
兼容？
备注
TFA 0.3
-
是是离子对试剂，能够抑制MS信号,通常使用的浓度范围为0.02-0.1%
乙酸 4.76 - 是是同乙酸铵一起使用具有最大的缓冲能力,通常使用的浓度范围0.1-1.0% 甲酸 3.75 - 是是同甲酸铵一起使用具有最大的缓冲能力,通常使用的浓度范围0.1-1.0% 乙酸铵 4.76 3.76-5.76 是是通常使用1-10mM浓度,注意钾盐和钠盐是非挥发性的
甲酸铵 3.75 2.75-4.75 是是通常使用1-10mM浓度,注意钾盐和钠盐是非挥发性的
磷酸盐1 2.15 1.15-3.15 否否传统的低pH值缓冲体系,UV透光度很好
磷酸盐2 7.2 6.2-8.2 否否当pH值超过7时,降低操作温度/缓冲盐浓度以及使用保护柱可以将色谱
柱寿命最长化
N-甲基吗啡
啉
~8.4 7.4-9.4 是是通常使用浓度是不超过10mM
氨水9.2 是是保持浓度不超过10mM,温度在30摄氏度以下
碳酸氢铵10.3(HCO32-)
9.2 (NH4+)
6.3 (H2CO3-) 6.8-11.3 是是通常使用浓度为5-10mM(使用MS需保证离子源温度超过150摄氏度);用
氨水或乙酸调节pH值;在pH10的情况下具有很好的缓冲能力
说明:使用碳酸氢铵而非碳酸铵
乙酸铵9.2 8.2-10.2 是是通常使用浓度为1-10mM
甲酸铵9.2 8.2-10.2 是是通常使用浓度为1-10mM
CAPSO (3-环
已胺基-2-羟
基丙磺酸)
9.7 8.7-10.7 否否两性离子缓冲液,同乙腈互溶,通常使用浓度为1-10mM,气味很小
Glycine甘氨
酸
2.4,9.8 8.8-10.8 否否两性离子缓冲液,比使用硼酸盐对柱子的损伤更小些
1-甲基哌啶10.2 9.3-11.3 是是通常使用浓度是1-10mM
CAPS 10.4
9.5-11.5
否否两性离子缓冲液,同乙腈互溶,通常使用浓度为1-10mM,气味很小
三乙胺(乙酸盐) 10.7 9.7-11.7 是是通常使用浓度为0.1-1.0%.当使用乙酸滴定时形成挥发性的缓冲盐(不可用
盐酸或磷酸);在pH 7-9 时分析DNA被用作离子对试剂
吡咯烷11.3 10.3-12.3 时是温和的高pH缓冲液体系,对色谱柱损伤很小
C/ 溶剂
为了使色谱柱的性能达到最好，建议使用高品质的色谱溶剂。所有水相流动相在使用前都必
须经过0.2um滤膜过滤，建议使用Gelman Acrodisc过滤器。含有悬浮颗粒的溶剂通常会堵
塞色谱柱入口滤片，这将导致柱压升高，分离度变差。
D/ 压力
尽管ACQUITY UPLC BEH 色谱柱能够耐受15000 psi的压力，但为了获得更长的使用寿命，
我们还是建议色谱柱在10000 psi （689 bar 或69 Mpa）压力下使用。这是在速度（流动相
线速度或体积流速）、分辨率和色谱柱使用寿命之间的一个平衡。而且，造成压力急剧升高
的梯度运行也会缩短色谱柱的使用寿命。
说明：在极端pH、高温或极高压力条件下使用会缩短色谱柱寿命。
E/ 温度
ACQUITY UPLC BEH色谱柱的建议使用温度是20－90度，这是为了提高分离选择性、降
低流动相粘度并同时提高传质速率。当在高pH条件下使用时，建议使用较低的温度，在高
温条件下如超过70度时也会使色谱柱的使用寿命缩短
说明：在极端pH、高温或极高压力条件下使用会缩短色谱柱寿命。
第三节色谱柱清洗、再生和保存
A/ 清洗和再生
色谱柱峰形发生改变、色谱峰分叉、出现肩峰、保留时间波动、分辨率降低或者压力升高都
表明色谱柱被污染了，用有机溶剂冲洗（请注意避免盐的析出）通常可以洗去这些污染物，
如果有机溶剂清洗不能解决问题，请采用以下清洗和再生的过程。
根据样品的性质以及你了解的污染物的性质选择清洗方法，用50/50乙腈/水清洗ACQUITY UPLC BEH HILIC 色谱柱以去除极性污染物，如果不能解决问题，用5/95的乙腈/水冲洗。用20倍柱体积的HPLC溶剂清洗色谱柱，将流动相温度升至35－55度可以提高清洗的效率。如果您的柱子在清洗后柱效还是没有改变，请与Waters公司联系。
表三、色谱柱清洗过程
极性样品非极性样品蛋白质样品
1、水1、异丙醇或者异丙醇和水的混
合溶液（注意避免盐析出）
选择1、反复进几针DMSO
2、甲醇2、四氢呋喃
3、四氢呋喃3、二氯甲烷
4、甲醇4、正己烷选择2、10-90%的B流动相冲洗（A为0.1%的TFA水溶液；B为0.1%的TFA的乙腈溶液）
5、水5、异丙醇或者异丙醇和水的混
合溶液（注意避免盐析出）6、流动相6、流动相选择3、用7M的盐酸胍或7M 尿素水溶液清洗
B/ 色谱柱的保存
在室温条件下，如果四天之内不使用ACQUITY UPLC色谱柱，请将柱子保存在100％乙腈中；对于高温条件下的应用，在工作结束后即快速将色谱柱保存在100％乙腈中以延长色谱柱的使用寿命。不要将色谱柱保存在缓冲盐流动相条件下，如果流动相中含有缓冲盐，先用10倍柱体积的液相色谱级水冲洗色谱柱然后换上100％乙腈保存，将柱子两端的堵头拧紧以防止柱床干涸。
如果在室温条件下，超过四天不使用ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱，请将色谱柱保存在95/5乙腈/水中，如果所使用的流动相中含有缓冲盐，请先用10倍柱体积的含水乙腈/水溶液冲洗。
说明：如果色谱柱已经使用了含有甲酸或甲酸铵等的流动相后用100％乙腈冲洗或保存，则该柱子再用甲酸体系的流动相时则需要较长的时间来达到平衡。
第四节 eCORD TM介绍
A/ 简介
eCORD TM智能芯片是一个新型的技术，它可以为用户提供ACQUITY UPLC色谱柱在使用过程中的性能参数。这个芯片是永久性地同ACQUITY UPLC色谱柱连在一起的，可确保用户在其它UPLC仪器上使用此色谱柱的时候依然保存着它的使用记录。
在生产过程中，有关ACQUITY UPLC色谱柱的质量控制信息以及产品性能追溯信息即下载到eCORD TM智能芯片上。这避免了打印在纸上的Certificate of Analysis（测试报告），一旦用户将此色谱柱安装到UPLC仪器上，软件将自动地将储存在芯片上的关键参数下载到色谱柱历史的文件中。在这个手册中，我们将解释eCORD TM智能芯片如何提供追溯色谱柱历史的方法，从而让用户确认他们装到仪器上的色谱柱是一根性能优良的色谱柱。
B/ 安装
将色谱柱安装到柱温箱内，将eCord按扣固定在柱温箱侧板上。只要eCord安装在柱温箱上，则色谱柱将会被Empower或Masslynx软件识别，并且会让使用者获得色谱柱的全部使用信
息。
C/ 色谱柱的相关生产信息
eCORD TM智能芯片储存了以下信息：
装填色谱柱填料的QC性能测试报告以及填料的质量标准；厂家对该色谱柱进行质量控制的测试条件（包括流动相、测试条件和样品），测试结果以及质量标准
D/ 色谱柱使用信息
eCORD TM智能芯片为用户提供色谱柱使用数据，屏幕的上方可以确定ACQUITY UPLC色谱柱的键合相类型、色谱柱规格以及色谱柱的序列号。通过eCORD TM智能芯片能够获得的色谱柱的使用信息包括：所分析的样品总数，进样的总针数，总的样品组数，第一针以及最后一针进样的时间，最高的操作压力和所使用的最高温度。并且eCORD TM智能芯片能够将色谱柱的使用历史根据样品组进行细化存储，包括起始日期、样品组名称、使用者、系统名称、样品组的进样针数、样品组的样品量、分析该样品组时的最大压力和最高温度以及色谱柱是否满足系统适用性的要求等等。
其它补充信息：
A/ 延长ACQUITY UPLC色谱柱寿命的秘诀：
（1）
?关注水的品质；
?关注溶剂的品质
?关注流动相的配制、保存以及流动相随时间发生的变化；
?关注样品、缓冲盐和流动相的溶解性和是否互溶；
?关注样品的前处理过程；
（2）当出现问题的时候，通常只需要改变一个不合适的操作习惯就可以
（3）请牢记：
?使用在线过滤片【订货号：205000343（含过滤片卡套以及6个过滤片），700002775（过滤片替换装，5个/包）】
?尽可能避免使用100％纯水相流动相以避免流动相长菌
?纯水相流动相每24小时需要重新配制（如果一定需要使用纯水相流动相）
?梯度条件下，在流动相A中加入5－10%的有机溶剂可以避免流动相长菌（通过调整梯度表即可得到同样的分离，请和Waters联系索取具体的梯度表调整方法）?用0.2微米的滤膜过滤流动相的水相溶液
?保证纯水系统处于正常工作状态
?使用超纯水（10 megohm-cm）以及高品质溶剂
?选择使用有效的样品净化技术（SPE、过滤等）
（4）尽可能避免
?使用100％水相流动相
?使用不合格的瓶装水
?不彻底清洗流动相储液瓶，每次将新配的流动相直接倒入没有充分清洗或还存有旧流动相的储液瓶内
?磷酸盐缓冲液和高于70％乙腈含量的流动相，这将导致缓冲盐沉淀的概率增加（5）当发生柱压升高或者色谱峰分叉的问题时，千万不要把坏了的色谱柱作为“嫌疑犯”，应该分析色谱柱出现问题的原因：
?压力
?流动相、是否长菌、是否有流动相缓冲盐析出或样品析出的问题
?色谱峰拖尾
?样品是否含有颗粒型杂质，前处理方法是否合适
?留意样品溶液的溶剂强度
（6）记住：ACQUITY UPLC 色谱柱的流速通常比较低，因此流动相消耗比较慢（因此在
配制流动相的时候应该注意）
（7）需要分析的同流动相相关的问题如下：
?我是不是使用100％纯水相流动相？我可以在流动相A中加入少量的有机溶剂吗？
?我用0.2微米的滤膜过滤了我的水相流动相吗？
?我的流动相使用了多长时间了？我是否在流动相瓶子上贴好了配制日期的标签？
?我每天都新配流动相吗？
?我用的水的质量如何？最近水的质量有改变吗？纯水机的工作状况如何？最后一次检修服务的时间是什么时候？
?我在使用pH 7的磷酸盐缓冲溶液吗？（磷酸盐缓冲溶液是非常容易长菌的流动相）（8）需要分析的同样品有关的问题如下：
?如果我只是进标样溶液，是否会出现这些问题？
?如果将标准品溶解在水中并且按样品的操作流程处理（SPE、过滤等等），还出现这些问题吗？
?样品是否随时间发生了变化？
B/ ACQUITY UPLC BEH色谱柱的建议流速和压力
1.0mm I.D. ACQUITY UPLC BEH色谱柱（40摄氏度）
3 4 5 6 UPLC线速度
(mm/sec)
色谱柱规格体积流速压力psi 体积流速压力psi 体积流速压力psi 体积流速压力psi
1.0*30mm 0.10 2600 0.13 3400 0.17 4500 0.20 5300
1.0*50mm 0.10 4300 0.13 5600 0.17 7400 0.20 8700
1.0*100mm 0.10 8600 0.13 11200 0.17 14600 0.20 17200
1.0*150mm 0.10 12800 0.13 16700 0.17 21800 0.20 25600
2.1mm I.D. ACQUITY UPLC BEH色谱柱（40摄氏度）
3 4 5 6 UPLC线速度
(mm/sec)
色谱柱规格体积流速压力psi 体积流速压力psi 体积流速压力psi 体积流速压力psi
2.1*30mm 0.45 3000 0.60 4100 0.75 5100 0.90 6100
2.1*50mm 0.45 4800 0.60 6400 0.75 8000 0.90 9500
2.1*100mm 0.45 9100 0.60 12100 0.75 15200 0.90 18200
2.1*150mm 0.45 13400 0.60 17900 0.75 22400 0.90 26900
C/ 开始使用ACQUITY UPLC TM BEH HILIC色谱柱
操作条件要求：
?由于ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱不含有任何键合相，因此其pH使用范围
为1-8，可以在90摄氏度稳定范围内使用
?同其它任何色谱柱一样，在极端pH、压力以及高温条件下使用将缩短色谱柱寿命
色谱柱平衡：
?用50倍柱体积的50/50乙腈/水平衡，如果流动相中含有缓冲盐则要求流动相中缓冲盐的最终浓度是10 mmol/L（以水相部分的浓度计算）；
?在开始进样前，用20倍柱体积的起始流动相平衡后再进样
?如果使用梯度条件，在进样前用8-10倍柱体积的流动相平衡
?没有充分平衡的色谱柱将可能会出现保留时间的波动
?总是保持流动相中缓冲液的浓度为10mM（包括梯度条件下的应用）将得到更好的峰形
流动相要求：
?总是经常保持至少5％的极性溶剂在流动相体系中或梯度流动相中（如5％水，5％甲醇或2％水＋3％甲醇等），这将保证HILIC色谱填料始终处于水化润湿状态?在流动相体系中至少需要保证含有40％的有机溶剂（如乙腈）
?尽量避免使用磷酸盐体系的流动相（磷酸盐缓冲液可能会在HILIC流动相体系中析出）
?同甲酸或乙酸流动相相比，甲酸铵或乙酸铵缓冲溶液作流动相可以得到重现性更好的结果。如果方法中一定要用甲酸或乙酸，应该用0.2%（v/v）而不是0.1%（v/v）
进样溶液的要求：
?如果可能，进样溶剂应该是100％有机溶剂，要尽可能去除样品溶液中的水或将其含量最低化。选择洗脱强度弱的HILIC溶剂如乙腈、异丙醇、甲醇等?通用的进样溶液是75/25乙腈/甲醇，使用此条件可以获得较好的样品溶解度和色谱峰形
?避免使用水或DMSO作进样溶剂（色谱峰形很差）
?如果样品内含有水或DMSO，需要使用反相SPE技术将溶剂体系转换为乙腈。如果确实不能进行此操作，需要用有机溶剂稀释水或DMSO。
其它需要注意的问题：
?ACQUITY UPLC TM BEH HILIC色谱柱仅仅是用来分析和保留强极性碱的，酸性、中性或非极性化合物没有保留
?对于分子量低于200道尔顿的强极性碱，ACQUITY UPLC TM BEH HILIC色谱柱的最佳流速范围是0.4~0.8ml/min
?同Atlantis HILIC 硅胶基质的色谱柱相比，ACQUITY UPLC TM BEH HILIC色谱柱的保留要弱（梯度条件下保留约低20％，等度条件下保留约低35～65％），这是由于BEH颗粒的表面硅羟基浓度较低的原因
?在HILIC的使用中，请注意水是洗脱能力最强的溶剂，因此样品溶液中必须尽可能避免含水
?摸索条件建议使用一个梯度条件（从95％乙腈至50％乙腈的梯度），如果没有保留，则用95：3：2的乙腈：甲醇：水相缓冲液进行等度分析
?将流动相中的水换成甲醇、丙酮或异丙醇也能提高保留
?请确保进样针清洗的弱清洗溶剂是起始流动相（如高有机溶剂），否则峰形将变差.
液相色谱柱的使用常识1版
液相色谱柱的使用常识 色谱柱信息 (1) 安装色谱柱 (2) 平衡色谱柱 (2) 平衡色谱柱的意义（反相柱、硅胶柱、极性柱） (2) 平衡色谱柱的方法 (2) 色谱柱的保存 (3) 色谱柱的再生 (4) 色谱柱的维护 (4) 液相色谱工作中和色谱柱有关的故障及解决办法 (5) 色谱柱信息 从色谱柱上的标签可以至少获得以下一些信息： 1）生产商、商品名称、规格、货号（Part No.）、填料类型、批次、柱号。 其中，生产商、商品名称、规格和货号，方便下次采购同样产品，对于药物质检这是常见的需求。 而填料类型、批次和柱号，是发现新柱存在质量问题时联系销售商或生产商时重要和必需的信息之一。原因：批次，往往与填料信息密切相关，填料是一批批生产出来的，重现性上的严重缺陷可能是某个批次填料的整体问题，提供批次信息，可以帮助技术服务人员在第一时间查询全球是否有同样批次的投诉报告；柱号，是这根柱子的“身份证”，换柱和退柱时的必需信息，也是实验室器材管理应当记录存档的必要信息。 2）流向。绝大部分色谱柱都有方向的要求。应当仔细检查，按流向标志将色谱柱接入HPLC 系统。 注意在使用此色谱柱的过程中不要遗失、毁坏或沾污这个标签，以便在使用过程中出现问题时我们可以对该柱子的生产过程进行追溯。为方便管理，还可以自行在柱上贴一些管理标签，如购入时间、负责人员，等。 贴心提示： ①当您接到一根新的色谱柱时，要阅读并保存好使用说明书（使用前应当至少阅读一遍）、 出厂技术证书或分析测试报告（Certificate of Analysis），有时为两份，一份是该批次填料 选择性测试报告，一份是该柱的柱效测试报告。
色谱柱的维护及注意事项
色谱柱的维护 更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片（同时可以修补色谱柱） 注意：在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前，应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗，而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。 1．将修补工具中的2套入柱芯的顶端 2．将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中，并顺时针方向旋转到旋紧 3．一手握柱芯，另一只手轻轻地向外拉3，取出柱芯顶端的滤网 4．用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料 5．将新的填料用甲醇润湿，然后填入挖去的部位，压平 6．照（左图）装上新的玻璃棉滤网，并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端 7．柱芯顶端套上2，然后参照（左图）将滤网放入 8．压紧，然后取下2，再用4将滤网的边缘压平 平衡色谱柱反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。 硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡 如何平衡色谱柱？ 平衡过程中，将流速缓慢地提高 用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡） 色谱柱的再生进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。 表1 建议用来冲洗的溶剂体积 色谱柱尺寸柱体积所用溶剂的体积 125-4 1.6ml 30ml 250-4 3.2ml 60ml 250-10 -20ml 400ml 请根据下表选择您的再生方法： 极性固定相（如Si，NH2*，DIOL基色谱填料）的再生： 正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水** 非极性固定相（如反相色谱填料RP－18，RP－8，CN等）的再生：
液相色谱仪色谱柱使用及维护
液相色谱仪色谱柱使用及 维护 Prepared on 22 November 2020
液相色谱仪色谱柱使用及维护 每天用足够的时间来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长！------ 一定得做！ 新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。 卡套柱的安装（不加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套（见左图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧 5．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 6．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 注意：使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。 卡套柱的安装（加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯（见左图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将"子弹头"预柱放入卡套片内
5．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧 6．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 7．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片（同时可以修补色谱柱） 注意：在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前，应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗，而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。 1．将修补工具中的2套入柱芯的顶端 2．将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中，并顺时针方向旋转到旋紧 3．一手握柱芯，另一只手轻轻地向外拉3，取出柱芯顶端的滤网 4．用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料 5．将新的填料用甲醇润湿，然后填入挖去的部位，压平 6．照（左图）装上新的玻璃棉滤网，并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端 7．柱芯顶端套上2，然后参照（左图）将滤网放入 8．压紧，然后取下2，再用4将滤网的边缘压平 平衡色谱柱反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会
气相色谱仪维护保养知识
气相色谱仪的维护保养知识 俗话说得好：没有不好骑的马，只有骑不好马的骑师。只有把GC当朋友，好好了解它的习性、掌握维护保养要领并坚持保养它才能服服帖帖听你的话。 GC主要有载气系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统共五个主要组成部分，要做好保养首先得先了解GC各部分构造以及可更换或清洁的零部件，这部分知识可参考各种GC产品使用说明书。 下面主要就GC各功能部分维护保养经验、要领一一列举： 一、载气系统： 载气系统主要包括气源（气体钢瓶或发生器）、减压阀、限流器、净化器、载气管路等部分，载气系统最主要的维护工作就是检漏，可采用厂家提供的检漏液或者自行配制肥皂水振摇起泡，涂抹在管路连接或阀等有缝隙的地方察看。卸下高压、低压表头检定过的国产减压阀大部分用不了多长时间就会发生泄漏。检漏工作应定期作，周期示实际情况而定。每次更换气瓶、减压阀等也需要检漏。需要注意的是，不要将载气管路长时间放空，应采用堵头堵住两端，尽量避免空气进入载气管路。在质谱应用中，如果拆卸过载气管路，可看到水峰（18）和氮气峰（28）等长时间下不来，此时可稍微拧松GC入口管路螺帽，开载气吹半个小时或更长时间。 净化器在载气系统中作用很大，可以帮助去除气体源中污染设备和影响分析结果的水分、烃类、氧气等等杂质。净化管有很多种选择，主要有氧气净化管、水分净化管、烃类净化管、综合净化管等等。除了部分水分及烃类净化管可以再生处理以外，一般均为一次性使用，寿命示实际情况而定。可再生类净化管一般有显色指示，根据指示确定是否需要再生处理，再生处理步骤为取出吸附剂，烘箱中加热烘烤，最后干燥冷却后重新填装连接管路。 二、进样系统（进样口）： 目前各厂家GC进样口主要有填充柱进样口、分流/不分流柱进样口、PTV (温度可编程蒸发进样口) 、VI (挥发物接口) 、COC(冷柱头进样口) 、气体进样阀接 口 (气体样品)等多种进样口类型以及ALS(自动进样器) 、顶空进样、吹扫捕集进样等进样附件。其中主要以填充柱进样口、分流/不分流柱进样口应用最广，填充柱进样口主要在老的标准方法以及气体分析、大体积进样分析等应用中常用，目前主流的进样口主要为分流/不分流柱进样口，由于其分析要求一般比较高（如农残分析等），维护工作尤其重要，如维护不到位，其分析结果差异较大。
色谱柱的使用和维护
正相、反相和极性胶联柱使用手册 更多资料请访问：https://www.docsj.com/doc/fb9546010.html, Chrompack HPLC Normal-,Reversed phase and Polar bonded columns 注意 此色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂（pH>7.0）或酸性溶剂（pH<2.0）会导致柱子损坏。 1 简介 此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。硅胶形态的柱子用于正相（非水）条件。 反相（C8，C18，ODS，RP-8和RP-18）通常用于反相条件（水相）。 极性胶联型（APS，diol，CN和NH2）依照应用目的，可以用于正相和反相条件。建议不要将一个相同的柱子用于差别非常大的条件下，这是因为柱子在特定的条件下，固定相的性质会发生变化，所以在其他的条件下，会影响柱效。也不建议将硅胶柱用在反相条件下或者将方向柱用在正相条件下，这是因为这种过程会发生重复性差的问题（每一次注射之间和柱与柱之间的比较）。 2 色谱柱老化 在开始分析工作以前，柱子必须经过正确的老化。一个没有正确老化的柱子可能会带来问题，诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。 A．在反相条件下老化 要老化这类柱子，首先要使用乙腈或者甲醇淋洗，然后你选用的洗脱液进行平衡。 在发货以前，每根柱子都已经测试过并进行了老化。因此没有必要在第一次使用时用水冲洗）。 如果流动相中使用了添加物（例如缓冲液或离子对试剂），建议使用正确比例的但不含此添加物的流动相进行缓冲冲洗。缓冲冲洗应当首先以低流速进行，最后再使用正常流速。 B．在正相条件下老化 柱效可能会受水与固定相的键合的严重影响。柱子的干燥（激活）或润湿（失活）可能是需要的。使用的溶剂可能是水饱和的或者是无水的。干燥柱子可以使用无水的二氯甲烷。 C．对于极性键合柱的特殊说明 由于这些柱子可以用于反相或者正相条件，在进行老化以前，一定要首先检查你要使用的淋洗溶剂或洗脱液是否可以与封装在柱子里的溶剂相混溶。如果这些溶剂不能混溶，必须先使用一个合适的缓冲溶剂进行冲洗。 3 洗脱液 注意第节和第2节。一定不要使用pH低于2或者高于7的缓冲液，这是由于它们会改变固定相的性质。极性键合柱最好使用在3到5 之间。在使用以前，洗脱液要进行脱气，以及使用0.5微米的滤膜过滤，以免发生检测和泵送问题。 一定要在开始使用系统以前检查水溶液中有否微生物生长，否则你的柱子会堵塞，柱压会升高到无法接受的水平。 4 流量和压力 增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。 如果你想更换柱子，，要降低流量至0，等待洗脱液完全流出柱子为止（2分钟）。
(完整版)色谱柱的使用及维护
前言 液相色谱的分离原理是,在色谱柱流动相中样品的不同组分与固定相发生吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和等作用,由于作用力的大小、强弱不同,各种组分在固定相中滞留的时间也不同,因而先后从以 固定相中流出而得到分离。因此液相色谱分离的关键之一是色谱柱中的固定相。柱效的好坏直接影响目标化合物的分析和检测。但在液相色谱运行过程中,色谱柱极易发生问题,因此掌握正确使用和维护 色谱柱的知识非常必要。色谱柱使用过程中容易发生柱堵塞引起系统压力过高;柱效低引起峰拖尾、变宽;柱污染、损坏导致鬼峰等问题。引起这些问题的内在原因有: (1) 硅羟基的死吸附。色谱柱的基材硅胶粒子表面存在硅胶羟基。任何物质在色谱柱中都存在双分配效应,即在流动相与固定相之间进行分配,又在流动相与硅羟基之间进行分配。被分析物质被硅羟基吸附称为非特异性吸附,或称死吸附。当硅羟基对被分析物质的吸附趋近于饱和状态时,色谱柱柱效下降,峰形出现拖尾、变宽。 (2) 重金属。色谱柱的基材硅胶粒子无论纯度多高,无论怎样处理,都会有不少于5 ×10- 6 的重金属以金属氧化物的形式残存在硅胶粒子的表面,这些金属氧化物很容易与其它化合物形成螯合物,使其被氧化,产生不对称峰或拖尾峰。例如儿茶素和大多数中药,因含有多酚结构,极易被金属氧化物氧化,影响其分离效果。 (3) 碳流失。固定相经长期使用,会有部分碳链被流动相洗脱下来,随流动相一起流出色谱柱外, 造成碳流失。 (4) 缓冲液中盐的析出。在做色谱分析时,有时流动相中会含有缓冲盐溶液。分析结束后,如果没有先用含一定配比的水相流动相冲洗,而直接用纯有机相冲洗,瞬间柱子中的微环境是高有机相、低水相。这时流动相中的缓冲盐溶液极易析出盐,将柱子堵塞,使柱压升高,柱效下降。 (5) 色谱柱变干。如果对色谱柱保存不当,使色谱柱中的保存液全部挥发,柱子内部变干,造成色谱柱的损伤,影响分离效果。 2 色谱柱的使用 新柱使用前应先检查产品包装、外观是否完好。认真阅读说明书及性能测试报告,了解新柱子的最佳性能指标,如某色谱条件下的柱压、柱效等。有时分析用的流动相与柱子的保存试剂不同,故在分析样品之前,应使用合适的试剂将柱子中的保存试剂清洗出来。要注意清洗用的流动相与保存溶剂的相溶性。反相C18 柱通过出厂测试后多保存在乙腈中,可用10～20 倍柱体积的甲醇或乙腈来平衡色谱柱。流速要缓慢提高,如开始0. 3～0. 5mL/ min , 10～15min 后可慢慢加快。 硅胶柱和极性色谱柱通过出厂测试后一般保存在正庚烷中。如果分析时需要使用含水的流动相,则使用前须用乙醇或异丙醇冲洗,流速0. 1～0. 3mL/ min ,将正庚烷冲洗干净后,再用流动相平衡。 实验过程中可以记录色谱柱的一些性能指标,如柱效、柱压等,供今后参考。每次分析样品前,要用流动相对色谱柱进行平衡,待基线平稳后再进样分析。梯度洗脱用初始流动相平衡。一次样品分离完成后,要有足够的时间使系统恢复平衡,再进行下一次分析。一般流动相平衡时间为30min ,若系统中有盐或水,平衡时间应延长。 3 色谱柱的清洗与保存 色谱柱清洗是日常的重要维护工作。如果样品分子残留在柱子、接头、流通池中,会污染系统,影响对其它样品的分析,降低柱效。因此分析工作结束后,要用适当的溶剂清洗系统中残留的样品。在反相系统中, 若流动相中无酸、碱、盐类物质, 可用90 %甲醇冲洗30～60min ,若含酸、碱、盐类物质,则要先用10 %甲醇或乙腈,或用与分析用流动相相同的
液相色谱仪色谱柱使用及维护
液相色谱仪色谱柱使用 及维护 Document number：PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998
液相色谱仪色谱柱使用及维护 每天用足够的时间来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长！------ 一定得做！ 新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。 卡套柱的安装（不加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套（见左图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧 5．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 6．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 注意：使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。 卡套柱的安装（加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯（见左图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将"子弹头"预柱放入卡套片内
5．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧 6．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 7．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片（同时可以修补色谱柱） 注意：在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前，应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗，而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。 1．将修补工具中的2套入柱芯的顶端 2．将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中，并顺时针方向旋转到旋紧 3．一手握柱芯，另一只手轻轻地向外拉3，取出柱芯顶端的滤网 4．用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料 5．将新的填料用甲醇润湿，然后填入挖去的部位，压平 6．照（左图）装上新的玻璃棉滤网，并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端 7．柱芯顶端套上2，然后参照（左图）将滤网放入 8．压紧，然后取下2，再用4将滤网的边缘压平 平衡色谱柱反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会
常用色谱柱简介
常用色谱柱简介 气相色谱毛细柱 （键合，聚二甲基硅氧烷） HP-1，DB-1，P-1，CP-SIL5CB， Ultra-1,007-1,RTx-1,AT-1 类似固定相：SE-30，SP-2100，OV-1，OV-101,使用 温度：-60℃-320℃ 应用范围：烷烃，芳烃，多环芳烃，醇，酚，酮，酯，醛，胺，卤代烃，吡啶，糖衍生物，氨基酸衍 生物，维生素衍生物，镇痛药，农药，溶剂，胆固SPB-50型中等极性柱 醇，香料，咖啡，食品添加剂等。 (键合, 50%二苯基,50%二甲基聚硅氧烷) 对照品牌：HP-50，HP-17，DB-17，RTx-50，AT-50 SPB-5型弱极性柱 类似固定相：OV-17, SP-2250,使用温度：30℃-310℃（键合，5%苯基，95%甲基聚硅氧烷） 应用范围：烷烃，低沸点芳烃，多环芳烃，醇，甘 对照品牌：HP-5，DB-5，BP-5，CP-SIL 8CB， 油三酸酯，喹啉，卤素化合物，香料，农药，酯，Ultra-2, ,RTx-5,AT-5 镇痛药，除草剂等。 类似固定相：SE-54，SE-52，OV-73 使用温度： -60℃-320℃ PTE-5，PTE-5QTM型弱极性柱
应用范围：烷基苯，多环芳烃，醇，酚，酮，脂肪(MS专用柱,键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷) 酸酯，苯二甲酸酯，硝基芳烃，芳胺，烷基胺，联 对照品牌：HP-5 MS，DB-5 MS, DB-5.625，XTI-5， 苯胺，卤代烃，多氯联苯，，糖类衍生物，维生素衍BPX625，半挥发污染物分析柱（US EPA方法525， 生物，有机酸，镇痛药，农药，抗组胺药，溶剂，625.5，625） 生物碱，防腐剂，香料等。 类似固定相：SE-54,SE-52 使用温度：-60℃-320℃ 应用范围：多氯联苯，胺，有机磷，有机氯农药，SUPELCOWAX 10型极性柱 含氯除草剂，酚，苯胺，香料等。 (键合,聚乙二醇二万) 对照品牌：HP-Wax，DB-Wax，BP-20，CP-Wax 52CB，SPB-1701型中等极性柱 HP-INNO Wax,AT-Wax (键合, 14%氰丙基,86%二甲基聚硅氧烷) 类似固定相：PEG-20M, CARBOWAX-20M,使用温 对照品牌：HP-1701，DB-1701，RTx-1701，AT-1701，度：35℃-280℃ BP-10，CPSil19CB 应用范围：低沸点芳烃，醇，酮，酸，酯，醛，醚， 类似固定相：OV-1701,SP-2250 使用温度：室温-280 乙二醇，丙二醇，甘油，吡啶，胺，亚硝胺，卤代 ℃ 烃，胆汁酸衍生物，冰片，薄荷，精油，香料，酒，
色谱柱管理规程
色谱柱管理规程 1.目的 本文件规定了色谱柱的采购、接收、使用、保养和保存，以确保色谱柱达到合理应用和规范应 用的管理规范。 2.适用范围 本文件适用于本公司色谱分析用色谱柱的管理。 3.责任 3.1.本文件由质量部QC负责起草，质量部部长审核，生产技术副总经理批准。 3.2.质量部QC负责实施。 3.3.QC主管负责监督检查。 4.内容 4.1.色谱柱的采购 QC根据检验需要提出购买申请，注明柱子固定性类型、购买数量、规格、用途等，QC主管审核批准。由供应部从定点供应商处购买。 4.2.接收 4.2.1.编号、登记 对于新购进的色谱柱必须造册编号登记，贴上标签,注明编号。编号用阿拉伯数字表示，以此类推不重复使用。 填写色谱柱登记表，内容包括:生产公司、品名、型号规格、编号、购进时间、启用时间、固定 相类型、单价等。 4.3.存放 色谱柱分类存放。不同的色谱柱按柱子当时柱效不同放入不同的盒中，并标注不同状态以便区分避免混淆。色谱柱按照不同的柱效分为三类，使用良好；需要保养；停止使用。 保养前放入“需要保养”的盒中； 保养后并能提高柱效达到检验要求的放入“使用良好”的盒中； 保养后不能提高柱效并影响检验结果的放入“停止使用”的盒子中。 4.4.使用与保养 每启用一根色谱柱,在色谱柱标签上填写启用日期，放入“使用良好”的色谱柱盒中。 对于不同的样品可使用不同的色谱柱，也可使用同一根色谱柱，但必须确保色谱柱类型、柱效符 合要求。 对于一些使用频率少的柱子,因为放置时间长,容易干柱影响柱效, 每根柱子每三个月保养一次, .
每一次做好保养记录。 频繁使用的柱子，因为使用时间长，造成柱效降低或柱压增高等不利于检验结果的现象时，也要 对柱子作出相应的保养处理，并做好保养记录。 4.5.使用后清洗 色谱柱每次使用后要对柱子进行冲洗。冲洗分为两个方法：方法一（流动相为简单的有机相与水 混合的）用50%的甲醇冲洗15-30分钟，最后用纯甲醇冲洗15-30min；方法二（流动相中含磷酸或盐类或缓冲液的）先用重蒸馏水冲洗15min，然后用50%的甲醇冲洗15-30min，最后用纯甲醇冲洗15-30min。色谱柱的使用和冲洗方法都体现在高效液相色谱仪使用记录里面。 4.6.色谱柱的保存 4.6.1.气相色谱柱 对于暂不使用的色谱柱，应小心存放，可用硅橡胶块、帽或其他方式将两端封闭，置于盒中。 4.6.2.液相色谱相 首先色谱柱必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存于水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。反相色谱柱可以贮存于甲醇或乙腈中，正相色谱柱可以贮存于经脱水处理后的正已烷中， 离子交换柱可以贮存于含5%甲醇或含0.05%叠氮化钠的水中，并将色谱柱两端密封，以免干燥，室温保存。 4.7.色谱柱的保养方法 应按所附说明书的要求对色谱柱进行保养。不同的色谱柱采用不同的保养方法。对于较昂贵的液相色谱柱,可以在柱前加一保护柱(预柱),防止样品中杂质污染分析柱,对于制备柱,因其进样量大,使用保护柱尤为重要。 4.8.报废 对于柱效完全不符合要求的色谱柱或由于其他原因已不能使用的色谱柱，经QC主管批准后，做好停用记录,不能随意丢弃,存放与“停止使用”的盒子中。每年集中清理一次，废弃处理。 5．记录 色谱柱的相关记录由QC整理,QA收集归档保存三年. 6.相关记录 R-SMP07047-01色谱柱登记记录 R-SMP07047-02色谱柱保养记录 R-SMP07047-03色谱柱停止使用记录 .
色谱柱的使用和维护注意事项
色谱柱的使用和维护注意事项 色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。 1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。 2、应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。 3、一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。 4、选择使用适宜的流动相(尤其是pH)，以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶"饱和"，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。 5、经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右。 6、保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要
拧紧，防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置或更长时间。 7、色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出 1-2mm高度(注意把被污染填料取净)再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相(与柱内相同)填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善，但是很难恢复到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱(5-30mm)，可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效，这是值得的。通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料，只能在pH2-9范围内使用。柱子使用一段时间后，可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶，特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。 8、新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷，使柱效下降，这时也可补加填料使柱效恢复。每次工作完后，最好用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素(氟、氯、溴)的化合物可能会
C18色谱柱维护与保养
C18色谱柱的维护与保养 1、新柱的处理： 我们每次新买的柱子虽然是经厂家测试过并密封好的，可是有的柱子到达手中时已经过很长的时间了，因此，我们每拿到一根新的色谱柱都必须要对柱子进行处理。首先，是配制好65%的乙腈/水，再把色谱柱正确的连接在色谱仪上，出口放空（注意：出口端切不可连上检测器，以免污染了检测器），以低流速0.1ml/min~0.5ml/min（如果是LC/MC柱子，则应以0.3ml/min进行）均可，不可以高流速进行，等看见柱子出口有液体流出后，过20分钟后再接上检测器，以循序渐进的方法将流速调至1.0ml/min（如果是LC/MC柱子则应以0.3ml/min进行），继续冲洗2~8小时。 2、新柱的使用： 首先我们确认所分析样品流动相的PH是不是在色谱柱PH的耐受范围(2~8)之内，以免损伤柱子!如果，确认在柱子的使用范围之内，就用做样品的流动相平衡柱子(如果流动相中含用缓冲盐溶液，在平衡柱子之前务必要先用5%甲醇或5%乙腈去过渡30分钟以上。再用带盐的流动相去平衡色谱柱。)当色谱柱平衡了足够时间，基线非常平稳的时候，方可进样分析。不管是分析什么样的产品，由于各种各样的因素，样品中总有杂质。因此，最好在色谱柱前端加上保护柱。以增加色谱柱的使用寿命！ 3、色谱柱清洗： ①如果样品分析中只用到一般的乙腈、甲醇和水的流动相，在做完样品之后可直接用55%~65%乙腈/水或者用55%~65%甲醇/水冲洗色谱柱40~80分钟，然后以纯甲醇或乙腈冲洗30分钟，即可保存；②如果样品分中流动相里含用
缓冲液或酸或离子对试剂的流动相，在做完样品之后的清洗必须按照如下步骤进行清洗柱子:先用5%的甲醇/水或5%的乙腈/水，以1ml/min,冲洗1.5小时以上(如果色谱柱更长，则还需要增加适当时间);然后用55%~65%甲醇//水冲洗色谱柱30~60分钟.最后用甲醇或乙腈以1ml/min冲洗30分钟。 4、色谱柱的再生： 当色谱柱用过很长的时间之后，就可能发生柱压力升高、分离度不好、柱效降低、峰形不好等等情况，这时我样就需要对色谱柱进行再生，以延长色谱柱的使用寿命。具体方法有如下：先用5%甲醇/水或者是5%乙腈/水，把色谱柱反向以1ml/min,冲洗60分钟以上.然后用四氢呋喃以1ml/min冲洗30分钟以上；再用65%甲醇/水或者65%乙腈/水，以流速1ml/min冲洗60分钟。最后用纯甲醇或乙腈冲洗30分钟保存即可。 备注：甲醇、乙腈、四氢呋喃均要用质量好色谱纯。水用是重蒸留水。
色谱柱的使用和维护
一.安装、启用和维护中重点注意事项 色谱柱既是液相色谱仪的最核心部件，价格相对昂贵，请牢记它是高档仪器中的高档部件，给它以足够的尊重和关怀。如避免强烈的碰撞和震动，尽管色谱柱从1米高的实验台掉落到水泥地上不至于100%会损坏，但50%的可能损坏你也承受不起。另外不要让柱床变干，避免在严寒环境受冻等。 1. 柱头类型和不锈钢毛细管接头的匹配 色谱柱是消耗品，不是仪器原配的情况很多。上图表明柱连接的6种不同方式（数字单位是英寸），如果两者类型不匹配将会产生漏液或者死体积过大的现象。接头比柱头深度长，不易拧紧而漏液；接头比柱头深度短，柱头内留有空隙而产生死体积，使谱带展宽和峰拖尾。
2. 溶剂的匹配转换 色谱柱内保存溶剂和仪器系统内存留溶剂，如果和流动相不匹配，使用前需进行转换。特别是流动相含缓冲盐时，如保存溶剂是纯有机相或有机相比例高，直接将新柱接入使用，会导致缓冲盐在柱内结晶析出，最严重会将新柱永久不可逆地损坏。正相柱保存溶剂一般为正己烷，如果要转换成HILIC柱模式使用，由于正己烷和甲醇乙腈的互溶性不好，转换中间需用二氯甲烷或乙酸乙酯过渡。 3. 新柱使用前的平衡和老化 厂家出厂检验时一般都已进行过平衡，但色谱柱到最终用户时间不一，用户正式测定前最好对色谱柱再次平衡。最好的平衡兼老化一起进行的方法是运行几次完整的分析程序（包括进样），直到观察到峰形、保留时间和峰面积稳定为止。所谓“老化”是借用了气相的术语，目的是达到分析物在色谱柱以及整个液相系统流路中的吸附饱和。对某些特定的待测物，如分子量大于1000的，因扩散速度慢，老化时间相应要长，可采取大浓度进样或在同一个洗脱周期内连续进样多针的方式加快老化。 4. pH使用范围 一般认为硅胶基质柱子的pH使用范围是2-8，这是很粗略的。硅胶类型、使用温度、硅胶表面所键合的固定相类型以及缓冲盐的不同，对此均有影响。硅胶比孔容小、键合密度大的填料pH耐受范围要大
色谱柱老化
新填充的色谱柱不能马上使用还需要进行老化处理。老化的目的有两个，一是为了彻底除去填充物中的残余溶剂，和某些挥发性杂质，另一个目的是促进固定液均匀的、牢固分布在单体的表面上。 老化的方法： ----把柱子与汽化室连接，与检测器一端要断开，以氮气为载气，流速是正常的一半即，温度选择固定液的最高使用温度，老化时间大约20小时，老化完成后将仪器温度降至近室温关闭色谱仪，待仪器温度恢复室温再将色谱柱连接到检测器上（老化时接汽化室的一端最好接在检测器上），开机，在使用温度下看基线是否平稳，如果平稳色谱柱就算老化好了，否则要继续老化。建议到实验室社区看看。 三乙胺，有机化合物，系统命名为N,N-二乙基乙胺，是具有有强烈的氨臭的无色透明液体，在空气中微发烟。微溶于水，可溶于乙醇、乙醚。水溶液呈弱碱性。易燃，易爆。有毒，具强刺激性。工业上主要用作溶剂、固化剂、催化剂、阻聚剂、防腐剂，及合成染料等。 危险性类别：第3.2类中闪点一级易燃液体 外观与性状：无色油状液体，有强烈氨臭。 熔点(℃)：-114.8 相对密度（水=1）：0.726 沸点(℃)：89.5 爆炸上限%(V/V)：8.0 引燃温度(℃)：249 爆炸下限%(V/V)：1.2 溶解性：微溶于水，溶于乙醇、乙醚等多数有机溶剂。[2] 毒性：有毒，对皮肤和黏膜有刺激性，LD50 460mg/kg。空气中最高容许浓度30mg/m3 有机碱，与无机酸生成可溶的盐类。[3]易燃，其蒸气与空气可形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸。与氧化剂能发生强烈反应。其蒸气比空气重，能在较低处扩散到相当远的地方，遇火源会着火回燃。具有腐蚀性。[2] 健康危害：对呼吸道有强烈的刺激性，吸入后可引起肺水肿甚至死亡。口服腐蚀口腔、食道及胃。眼及皮肤接触可引起化学性灼伤。 操作注意事项：密闭操作，加强通风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴导管式防毒面具，穿防毒物渗透工作服，戴橡胶耐油手套。远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。防止蒸气泄漏到工作场所空气中。避免与氧化剂、酸类接触。充装要控制流速，防止静电积聚。搬运时要轻装轻卸，防止包装及容器损坏。配备相应品种和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。倒空的容器可能残留有害物。
液相色谱仪色谱柱使用及维护
液相色谱仪色谱柱使用及维护 每天用足够的时间来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长！------ 一定得做！ 新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。 卡套柱的安装（不加预柱）1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套（见左图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧 5．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 6．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 注意：使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。 卡套柱的安装（加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯（见左图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将"子弹头"预柱放入卡套片内 5．将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧 6．然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 7．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片（同时可以修补色谱柱） 注意：在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前，应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗，而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈，以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。 1．将修补工具中的2套入柱芯的顶端 2．将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中，并顺时针方向旋转到旋紧 3．一手握柱芯，另一只手轻轻地向外拉3，取出柱芯顶端的滤网 4．用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料 5．将新的填料用甲醇润湿，然后填入挖去的部位，压平 6．照（左图）装上新的玻璃棉滤网，并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端 7．柱芯顶端套上2，然后参照（左图）将滤网放入 8．压紧，然后取下2，再用4将滤网的边缘压平 平衡色谱柱反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动
色谱柱使用维护保养操作规程
目的：建立色谱柱使用维护保养操作规程，规范色谱柱的使用、维护行为。 范围：适用于色谱柱的使用、维护和保养。 依据： 责任：药分部 内容: 1.操作规程 一般要求是一根柱子用于同一个系列的产品，稳定性试验用专用柱。 1.1.新色谱柱在使用之前，首先应查看说明书，检查柱子的pH值范围是否与待验产品的要求相一致，确认柱子和仪器的接头以及管路是否相匹配，并注意柱子上标示的流向箭头，一切确认无误后，编上编号，在《色谱柱启用、报废台帐》上登记开始使用时间、生产厂家、型号规格等。 1.2.使用时，应按各色谱柱的要求进行色谱柱的维护保养，并在色谱柱使用登记表中登记使用日期、所测产品的名称及批次、使用前后维护保养的具体内容； 1.3使用后，及时填写《色谱柱使用台帐》。 2.维护规程 2.1.液相色谱柱的维护 2.1.1. 色谱柱使用时，确认柱子的编号、型号规格与待验产品的要求相一致，流动相的pH值应与柱子说明书上规定的pH值相适应，然后旋开两端的封头，接到高效液相色谱仪上，使色谱柱的箭头指向与流动相流向一致。 2.1.2.流动相应经过0.45um滤膜过滤并脱气后使用，柱压不要超过300bar（3000psig），最高操作温度不得超过60℃。 2.1. 3.流动相如果是非盐类的，用流动相冲洗约30min，按《高效液相色谱仪操作规程》进行操作，然后进行样品的检验。如果是盐类的，用有机相：水=10：90的溶液冲洗约10min，再换上相对应的流动相，按《高效液相色谱仪操作规程》进行操作，然后进行样品的检验。 2.1.4.检验完毕，如流动相中含有盐类物质，应先用有机相：水=10：90的溶液以1ml/min的流速冲洗约40min，然后用HPLC级的乙腈或甲醇以1ml/min的流速冲洗约30min，关闭液相色谱仪，取下色谱柱，在柱两端旋上封头，以防止柱内的有机溶剂流失而使柱内填料发干变松，柱效下降。不用的色谱柱放入液相色谱分析室的专用贮存柜中。 2.1.5.拿用时要轻拿轻放，避免剧烈震动。 2.1.6.不允许反向连接和冲洗柱子。 2.1.7.柱子的再生：每使用二十次，就按以下程序进行再生一次，以延长柱子的使用寿命。冲洗程序：按柱子上所示箭头方向，依次用高纯水－甲醇－氯仿－甲醇以1ml/min的流速分别冲洗约
C18色谱柱维护 常识
【讨论】高效液相色谱柱的保护 各位同仁，为保证我们的分析效果，延长色谱柱的使用寿命，大家一起来贡献一下自己在色谱柱使用过程中的护柱秘诀吧。 我先来聊聊，算是抛砖引玉了 1、最好用预柱。（但要注意，若有时出峰异常，要先看看是不是它有问题了） 2、每次做完分析，都要进行冲洗， 分析用流动相中若无酸、碱、盐类物质，建议用90％甲醇冲洗30～60min； 若分析用流动相中含以上物质，要先用10％甲醇（或用与分析用流动相同比例，把含酸、碱、盐溶液换成水）冲洗1小时左右，再梯度走到90％甲醇冲洗30～60min（若用多元泵）。有必要时再循环几次，可以适当缩短时间。 若长时间不用该色谱柱，要冲洗好后，用纯甲醇或乙腈封存。 3、若流动相中用到离子对试剂，更应该好好冲洗，且该色谱柱最好作为专用，不能再做其它物质分析用。因色谱柱填料性质已与原来所不同，在该柱上所摸索的色谱条件，可能在其它同类柱子上得不到重现。 4、尽量避免反冲，除非该色谱柱厂家明确说明允许。 5、普通C18柱尽量避免在40℃以上的温度下分析。 6、定期测柱效，有下降，可以用10％异丙醇甲醇冲洗色谱柱。若柱效还没有改善，可以再生，甲醇－二氯甲烷－甲醇。 呵呵，还有的一时想不起来了，各位有经验的战友请发表高见！ 1．样品要采用0.22或0.45μm滤膜过滤，流动相采用0.45μm滤膜过滤并脱气。 2．大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围 3．避免流动相组成及极性的剧烈变化。 4. 避免纯水冲洗反相色谱柱。 5．每次测试完毕，要用20倍柱体积的流动相冲洗色谱柱（分析色谱柱250×4.6mm柱体积3.2ml）。如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕后将柱子用纯水冲洗干净，并保存于乙腈中。 6．压力升高是需要更换预柱的信号。 1：溶剂中的不溶物—应使用色谱纯溶剂，膜过滤（孔径不超过0.45μm） 2：样品中的不溶物—应对样品进行膜过滤（孔径不超过0.45μm） 3：泵，进样器等中的不溶物—在泵和进样器之间安装内置过滤器，在进样器和柱之间安装预过滤器 4：柱内不溶物的形成：由于溶剂的不互溶而产生的沉淀—用能溶解沉淀物的溶剂冲洗色谱柱；在不互溶溶剂中由于进样而产生的沉淀—检查样品液和流动相是否互溶；由于温度的改变或固定相的干涸而产生的沉淀—将色谱柱密封紧，并保持室温恒定！ 还有就是平衡色谱柱、色谱柱的再生： 1 平衡色谱柱：反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。 硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或
仪器使用记录模板
仪器设备使用记录 仪器设备名称：型号：编号：年月使用日期使用起止时间使用项目使用状态使用人备注 第页
pH 计使用记录 型号：编号：年月 使用日期使用时间环境温度使用项目校正范围使用状态使用人备注 第页
高效液相色谱仪使用记录 仪器型号: 编号： 基本信息 日期：使用人：样品： 开机时间：关机时间 流动相：使用盐的通道:□A □B □C □D 色谱柱的型号编号：柱压：流速： 启动时柱压：流速：停用时柱压：流速： 冲洗柱子的方法及时间： 备注： 基本信息 日期：使用人：样品： 开机时间：关机时间 流动相：使用盐的通道：□A □B □C □D 色谱柱的型号编号：柱压：流速： 启动时柱压：流速：停用时柱压：流速： 冲洗柱子的方法及时间： 备注： 基本信息 日期：使用人：样品： 开机时间：关机时间 流动相：使用盐的通道：□A □B □C □D 色谱柱的型号编号：柱压：流速： 启动时柱压：流速：停用时柱压：流速： 冲洗柱子的方法及时间： 备注： 基本信息 日期：使用人：样品： 开机时间：关机时间 流动相：使用盐的通道：□A □B □C □D 色谱柱的型号编号：柱压：流速： 启动时柱压：流速：停用时柱压：流速： 冲洗柱子的方法及时间： 备注： 第页
气相色谱仪使用记录 仪器型号: 编号： 基本信息 日期：使用人：样品： 开机时间：关机时间 色谱柱的型号编号：检测器的类型：口FID 口 ECD 色谱柱最高使用温度：进样口温度： 检测器温度：流量: 所涉及溶剂： 进样方式：□手动□自动□顶空 备注： 基本信息 日期：使用人：样品： 开机时间：关机时间 色谱柱的型号编号：检测器的类型：口FID 口 ECD 色谱柱最高使用温度：进样口温度： 检测器温度：流量: 所涉及溶剂： 进样方式：□手动□自动□顶空 备注： 基本信息 日期：使用人：样品： 开机时间：关机时间 色谱柱的型号编号：检测器的类型：口FID 口 ECD 色谱柱最高使用温度：进样口温度： 检测器温度：流量: 所涉及溶剂： 进样方式：□手动□自动□顶空 备注： 基本信息 日期：使用人：样品： 开机时间：关机时间 色谱柱的型号编号：检测器的类型：口FID 口 ECD 色谱柱最高使用温度：进样口温度： 检测器温度：流量: 所涉及溶剂： 进样方式：□手动□自动□顶空 备注： 第页
色谱柱使用操作规程
【分享】色谱柱使用操作规程-sop 1.目的： 建立色谱柱使用操作规程. 2.范围：适用于仪器分析（HPLC、GC）前对检测条件适用性的确认和HPLC分析结束后对的色谱柱的清洗。 3.责任：QC检验员对本标准实施负责. 4.内容： 4.1. 系统适用性试验的定义：按SOP项下要求对仪器进行适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，应达到规定的要求；或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子。 4.1.1.色谱柱的理论板数（n）: n=5.54(tR/Wh/2)2 TR—保留时间，min； Wh/2—半峰宽高度。 4.1.2.分离度： tR2—为相邻两峰中后一峰的保留时间； tR1—为相邻两峰中前一峰的保留时间； W2及W1—为此相邻两峰的峰宽。 4.1.3.重复性：取各品种项下的对照溶液，连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0％。4.1.4.拖尾因子： W0.05h--为0.05峰高处的峰宽； d1—为峰极大至峰前沿之间的距离； 除另有规定外，T应在0.95—1.05之间。 4.2步骤： 4.2.1.按具体分析方法操作，用流动相走基线约40分钟（正常流速），待基线平稳。 4.1. 5.基线平稳后，按要求进系统适用性溶液或对照溶液分析，记录色谱图，进行评估，符合要求后，待测样品。 4.1.6.进样品溶液，记录结果。 4.1.7.测试完毕后，清洗约30min，一般流速为正常测样流速的1至1.5倍，冲洗约40min。 走空白，按1000积分无任何杂质显示。当所测样品杂质在30min 后出峰时，走空白时间约为60min。如果有杂质显示，继续清洗