对乙酰氨基酚片剂的相对生物利用度的测定实验讲义

对乙酰氨基酚片剂的相对生物利用度的测定

一、实验目的

1. 掌握尿药法测定相对生物利用度的实验设计与方法

2. 了解尿药法的特点和对乙酰氨基酚的体内过程

二、实验原理

对乙酰氨基酚在体内以原型（约5%）及葡萄糖醛酸结合物（55%~75%）和硫酸结合物（20%~40%）自尿中排出。因此，可采用尿药法测定生物利用度，其测定原理是对乙酰氨基酚及其代谢物水解成对氨基酚，对氨基酚在次氯酸钠的存在下与百里酚产生反应，生成蓝色染料，此染料在601nm 的波长处有最大吸收。

生物利用度是指药物或制剂服用后，主药到达大循环的相对数量和速度。它是药物制剂的质量的重要指标。绝对生物利用度的测定以静脉注射剂作为标准参比制剂，相对生物利用度常采用口服溶液剂，或市场认可、吸收较好且临床有效的制剂作为标准参比制剂。在评价生物利用度的参数中，相对生物利用度常用AUC 或尿药排泄总量的相对比值Fr 来反映吸收程度。

尿药数据法与血药浓度法一样，可以通过给药后收集各时间的尿样，经测定后拟合出动力学参数以及生物利用度数据。尿药法要求有较多的原形药物从尿中排出，并且药物的肾排泄过程符合一级速度过程。单室模型口服给药尿药法基本公式为：

dX u dt =k e X =k e k a FX 0k a −k

(e −kt

−e −k a t ) 式中，X0是给药剂量；F 为生物利用度；ka 为表观一级吸收速度常数；X 为体内药量；k 为一级消除速度常数；X 与Xu 为t 时间体内药量与排泄于尿中的原形药物累积；ke 为肾排泄速度常数。

当时间趋向无穷大时，后面一项相对于前面一项可以忽略不计，即变为单指数方程。取对数，并以平均尿药速度t

X u ∆∆代替瞬时速度

dt

dX u ，以集尿中点时间t 中代替t,则

得到下式：

k

k FX k k t k

t X a a e u --=∆∆0lg 303.2lg

＋中 因此，给药后收集尿样，以

()

t X u ∆∆lg 对t 中作图得一曲线，由末端直线斜率可求出k ，

并可计算出

1t 。

总排泄药量 ()k t X X X X X t u t

u

t u

t

u

u

∆∆+=+=→∞

→→∞

00

相对生物利用度＝

()()

()()

％

试标标试100X X X 00⨯u u X

三、仪器与材料

器材：分光光度计，电热套，具塞量筒，容量瓶，移液管，量筒

试剂：百里酚，4%次氯酸钠，10%氢氧化钠，对乙酰氨基酚（标准品，片剂，混悬液）

四、实验内容

（一）服药方案及注意事项

（1）受试者早上6:30起床，排出隔夜尿，喝水250mL 。禁食早餐。6:50采集尿样约80mL 做空白尿样(无需记录总体积)，供作标准曲线及其参比溶液用。

（2）7:00用200mL 温开水吞服0.5g 对乙酰氨基酚一片或约相当于对乙酰氨基酚0.5g 的混悬剂剂数毫升，分别于8、9、11、13、15、17、19、21时分别采集所有尿液于量筒，记录体积，取其中约50m 置于加盖小瓶内，置冰箱保存备用。

注意事项：对乙酰氨基酚混悬液或片剂各有两名尿样提供者，服药前48h 内禁服含对乙酰氨基酚类药物，服药者需禁食早餐，同时各服药者的午餐和晚餐应做到饮食一致，取样期间可适当喝水，但每次不超过200mL ，并避免在取样前30min 内喝水。

容器应贴上标签，注明样品编号、提供者代码以及药品代码，比如服用片剂（混悬剂）的提供者A ，服药1h 后的尿样标号为P1A （H1A ）。提供者之间相互配合，提醒取样时间。 （二）显色剂配制

1. 0.5%百里酚溶液试剂 称取百里酚0.5g ，溶于10%氢氧化钠100mL ，置棕色瓶保存得试剂（1）。

2. 0.04%次氯酸钠溶液： 量取4%次氯酸钠溶液1mL ，加水至100mL 得试剂（2）。

3. 显色剂（临用前配制）量取试剂 (1) 10mL ，加入试剂（2）0.6mL ，混匀即得。 （三）尿药标准曲线制作

1．储备液配制：精密称定105℃干燥至恒重的对乙酰氨基酚0.5g ，用热蒸馏水于100mL

容量瓶中溶解，冷却至室温后定容，得浓度为5mg/mL储备溶液。

2．标准溶液配制：分别精密吸取储备液0.5，1，2 ，3 ，4 ，5mL于50mL容量瓶中，加蒸馏水定容，得浓度分别为50，100，200，300，400，500µg/mL标准溶液。

3．绘制标准曲线：分别精密吸取上述浓度标准溶液各1mL（另取蒸馏水1mL，其余处理相同，作为参比溶液）于25 mL具塞试管中，分别加入空白尿液1mL、4moL/L HCL 4mL，水浴煮沸水解1h，取出冷却至室温，加蒸馏水至25mL，混匀。

精密吸取上述水解液3mL于10mL具塞EP试管，加蒸馏水2mL，显色剂1mL，混匀，放置10min后于601nm波长处测定吸收度A（1h内完成测定）。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，并求出回归方程。

（四）尿药浓度测定

精密吸取样品尿液1mL（混悬液或片剂）（另取蒸馏水1mL，其余处理相同，作为参比溶液），加蒸馏水1mL， 4moL/L HCL 4mL，水浴煮沸水解1h，取出冷却至室温，加蒸馏水至25mL，混匀。

精密吸取样品尿液的水解液3mL于10mL具塞EP试管，加蒸馏水2mL，显色剂1mL，混匀，放置10min后于601nm波长处测定吸收度A（1h内完成测定），记录结果。

五、实验结果

1．绘制标准曲线，并求出标准曲线回归方程。

表1标准曲线数据

编号 1 2 3 4 5 6

标准浓度(µg/mL) 50 100 200 300 400 500

吸光度(A601)

回归方程

2．根据回归方程计算出各样品尿药浓度，记入表2。

表2 尿药浓度数据处理

时间(h)

t∆

(h)

t中

(h)

尿药浓度

(µg/mL)

u

X

∆

(µg)

t

X

u

∆

∆()t

X

u

∆

∆

lg

1

2

4

6

8

10

12

14

k= ∞

u

X＝

3．以

()t

X

u

∆

∆

lg

对t中作图得一曲线，由末端直线斜率可求出k，再求出总排泄药量∞u X。

4．将各小组混悬液或片剂的

∞

u

X

数据汇总，求出相对生物利用度r

F。

F r=

X u∞（片）/X0（片）

X u∞（混悬）/X0(混悬)

×100%

六、思考题

1．尿药法测定相对生物利用度的特点和局限性有哪些？2．影响实验结果的主要因素有哪些？

实验一 复方对乙酰氨基酚片的含量测定

第 1 页,共 1页 实验一 复方对乙酰氨基酚片的含量测定 一、目的要求 1掌握亚硝酸钠滴定法测定胺类药物含量的基本原理 2熟悉复方制剂含量测定的特点 二、实验原理 复方对乙酰氨基酚片由对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸、咖啡因三种药物组成，根据其结构的不同，可通过亚硝酸钠滴定法测定对乙酰氨基酚的含量。 1、对乙酰氨基酚的测定： 第一步，水解，得到芳香伯胺 第二步，重氮化定量反应： 三、仪器与试药 1恒温水浴锅、酸式滴定管、碱式滴定管、三角瓶 2氯仿、乙醇、酚酞指示剂、0.1mol/L 氢氧化钠液；稀硫酸、溴化钾、含锌碘化钾淀粉指示液、0.1mol/L 亚硝酸钠液 3复方对乙酰氨基酚片（市售品） 四、操作步骤 精密称取上述细粉适量，（约相当于对乙酰氨基酚0.3g ），加稀硫酸40mL ，附回流冷凝管，加热回流1小时，冷却，加水50mL 、盐酸20mL 、溴化钾3g ，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用0.1mol/L 亚硝酸钠液迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水将尖端洗涤，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至用细玻璃棒蘸取溶液少许，划过涂有含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板上，即显蓝色条痕，停止滴定，5分钟后，再蘸取溶液少许划过一次，如仍显蓝色条痕，即为终点，即得。每1mL 亚硝酸钠液（0.1mol/L ）相当于15.12mg 的对乙酰氨基酚（C8H9NO2）。 五、计算 NH.COCH 3 OH + H 2O 稀H 2SO 4 △ OH NH 2 + CH 3 COOH OH + NaNO 2 + 2HCl N + N. Cl - OH + NaCl +2 H 2O

对乙酰氨基酚片剂的相对生物利用度的测定实验讲义

对乙酰氨基酚片剂的相对生物利用度的测定 一、实验目的 1. 掌握尿药法测定相对生物利用度的实验设计与方法 2. 了解尿药法的特点和对乙酰氨基酚的体内过程 二、实验原理 对乙酰氨基酚在体内以原型（约5%）及葡萄糖醛酸结合物（55%~75%）和硫酸结合物（20%~40%）自尿中排出。因此，可采用尿药法测定生物利用度，其测定原理是对乙酰氨基酚及其代谢物水解成对氨基酚，对氨基酚在次氯酸钠的存在下与百里酚产生反应，生成蓝色染料，此染料在601nm 的波长处有最大吸收。 生物利用度是指药物或制剂服用后，主药到达大循环的相对数量和速度。它是药物制剂的质量的重要指标。绝对生物利用度的测定以静脉注射剂作为标准参比制剂，相对生物利用度常采用口服溶液剂，或市场认可、吸收较好且临床有效的制剂作为标准参比制剂。在评价生物利用度的参数中，相对生物利用度常用AUC 或尿药排泄总量的相对比值Fr 来反映吸收程度。 尿药数据法与血药浓度法一样，可以通过给药后收集各时间的尿样，经测定后拟合出动力学参数以及生物利用度数据。尿药法要求有较多的原形药物从尿中排出，并且药物的肾排泄过程符合一级速度过程。单室模型口服给药尿药法基本公式为： dX u dt =k e X =k e k a FX 0k a −k (e −kt −e −k a t ) 式中，X0是给药剂量；F 为生物利用度；ka 为表观一级吸收速度常数；X 为体内药量；k 为一级消除速度常数；X 与Xu 为t 时间体内药量与排泄于尿中的原形药物累积；ke 为肾排泄速度常数。 当时间趋向无穷大时，后面一项相对于前面一项可以忽略不计，即变为单指数方程。取对数，并以平均尿药速度t X u ∆∆代替瞬时速度 dt dX u ，以集尿中点时间t 中代替t,则 得到下式： k k FX k k t k t X a a e u --=∆∆0lg 303.2lg ＋中 因此，给药后收集尿样，以 () t X u ∆∆lg 对t 中作图得一曲线，由末端直线斜率可求出k ，

生物药剂与药动学实验教学大纲

生物药剂与药动学实验教学大纲 （药学专业本科） 一、课程基本信息 课程名称：生物药剂学与药物动力学实验 英文名称：the Experiment of Biopharmaceutics and Pharmacokinetics 课程代码：505016015 课程类别：实践课 实验总学时：36学时实验总学分：1.5学分 二、教学目的及要求 教学目的： 实验课是生物药剂学与药物动力学课程中必不可少的重要的实践环节，通过实验，使课堂中讲授的重要理论和概念得到验证、巩固和充实，并适当地扩大知识面，加深学生对课堂教学内容的理解，掌握生物药剂学与药物动力学实验的设计及数据的处理方法，掌握实验方法在医药学相关领域的应用，掌握专业实验技能，培养学生独立思考和独立工作能力以及科学的工作态度和习惯。授课对象为药学专业的本科生。 基本要求： 1．由指导教师讲清实验的基本原理、要求、实验目的，注意事项及主要设备的操作方法； 2．实验小组每组人数为4～5人，每个实验时间为6～8学时，由学生独立操作完成实验。 3．学生完成规定的实验内容后，所记录的现象和数据、使用的仪器和负责的清洁工作，经指导教师检查，原始数据签字后符合要求，方可离开实验室。 4．教学实验除验证课堂理论外，要求掌握相关实验仪器的工作原理和使用方法，并启发学生对部分实验环节进行设计。 三、教学内容

实验一片剂溶出度的测定 [教学要求] 掌握片剂溶出度测定的方法以及溶出度测定仪的调试与使用； 掌握实验中影响溶出度测定结果的因素以及实验设计中针对这些影响因素所采取的措施； 熟悉中国药典中收载的三种溶出测定方法的差异； 熟悉溶出度测定结果的分析和统计学评价方法，利用威布尔概率纸拟合求算溶出参数的方法和单因素随机变量的方差分析方法； 熟悉溶出度的概念，了解溶出度与口服固体制剂中药物吸收的关系，及溶出度的测定在药物评价中的意义和运用。 [教学时数] 6学时 [教学内容] 1．实验课基本要求； 2．讲解片剂溶出度测定的方法以及溶出度测定仪的调试与使用； 3．讨论实验中影响溶出度测定结果的因素以及实验设计中针对这些影响因素所采取的措施，分析溶出度测定结果和统计学评价方法； 4．学生提问； 5．实验操作。 实验二尿药法测定对乙酰氨基酚片的药动学参数（一）[教学要求] 掌握尿药法测定药物动力学参数的原理与方法； 掌握尿药法测定固体口服制剂生物利用度的原理； 熟悉生物样品（尿）测定制备方法； 熟悉尿药法标准曲线的建立。 [教学时数]

实验血药法测定扑热息痛片的生物利用度[1](精)

实验二血药法测定对乙酰氨基酚片的生物利用度 一、实验目的： 1 掌握血药法测定固体口服制剂生物利用度的原理及方法。 2 掌握药动学参数的求算。 3 熟悉生物利用度在药物评价中的意义。 4 了解血清生物样品的处理方法。 二、仪器： 1．仪器： 具塞离心管10ml 3支;20ml 16支; 刻度吸管1ml 1支;5ml 3支;10ml 1支; 滴管2～3支； 玻璃漏斗3～4cm直径8个;5ml塑料离心管8支; 紫外－可见分光光度计 其他：滤纸、试管架、刀片、塑料夹、酒精棉球、脱脂棉、注射器、注射针头、兔盒等物件。 2．试药： ①0.12N氢氧化钡溶液：取分析纯氢氧化钡19克，加新鲜煮沸放冷的蒸馏水溶解并稀释至1000 ml，静置过夜，过滤即得。 ②2%硫酸锌溶液：取分析纯硫酸锌20克，加蒸馏水溶解并稀释至1000ml即得。 三、实验内容： 1．家兔空白血的采集： 取体重3kg左右家兔一只，心脏取血约30ml，于10ml具塞离心管中，37℃水浴中保温1小时，以5000转/分的转速离心10 min，取空白血清供标准曲线制备用。 2．标准曲线的制备： 精密称取扑热息痛对照品50mg，置100ml容量瓶中，以蒸馏水溶解，并添加至刻度摇匀，精密吸取10ml于50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度摇匀即成100μg/ml的标准溶液，分别吸取表1中“标准液取量”于20ml具塞试管中，分别加定量蒸馏水使成10ml，然后各加上述血清1ml混匀，再各加0.12N氢氧化钡4.5ml，混匀，放置2分钟，再分别加入2%硫酸锌溶液4.5ml，混匀，即现出明显乳状浑浊，用双层滤纸过滤，去初滤液，收集续滤液于10~15ml干燥具塞试管中，以1号管溶液作空白对照，于245nm处测定吸收度(A)，结果记录于表1。 3．家兔体内血药浓度的测定： ①血样品的采集： 取体重3kg的健康家兔一只，实验前二天下午禁食，实验当日晨耳静脉取血4ml，作为空白，然后即口服给予扑热息痛片，剂量为500mg/只，在给药后0.25、.50、1、2、3、4、5小时耳静脉采血4ml，供测定血药浓度用，喂药4小时后可以喂食，采血时间于表2。 ②血药浓度测定： 将采取的血样按前空白的处理方法处理后，精密吸取血清1 ml，加蒸馏水10ml，余下按标准曲线制备中“……再各加0.12N氢氧化钡溶液4.5ml”起进行操作，测得值记于表2。

对乙酰氨基酚片的溶出度的测定

实训四对乙酰氨基酚片的溶出度的测定 一、实训目的 1、掌握片剂中溶出度检查的操作方法。 2、掌握溶出仪、紫外可见分光光度计的正确操作方法。 3、熟悉片剂中溶出度质量评定的方法，熟悉容量分析操作方法。 4、了解溶出仪的主要结构，了解溶出度检查的目的和意义。 二、实训原理 溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。凡检查溶出度的制剂，不再进行崩解时限检查。药物只有固体制剂中的活性成分溶解之后，才能为机体吸收。溶出度试验能有效地区分同一药物制生物利用度的差异，是控制固体制剂内在的重要指标之一。对乙酰氨基酚的溶解度大小、辅料的亲水性程度和制片工艺都会影响制剂的溶出度，对乙酰氨基酚溶出度测定采用转篮法。 三、实训操作 1、中国药典（2005年版）溶出度测定，第一种是转篮法，操作方法如下： （1）转篮分篮体与篮轴两部分，均为不锈钢金属材料制成。篮体A由不锈钢丝网（丝径为0.54mm，孔径0.425mm）焊接而成，呈圆柱形，内径为22.2mm土1.0mm，上下两端都有金属边缘。篮轴B的直径为9.4～10.1mm，轴的末端连一金属片，作为转篮的盖；盖上有通气孔（孔径2.0mm）；盖边系两层，上层外径与转篮外径同，下层直径与转篮内径同；盖上的三个弹簧片与中心呈120°角。转篮旋转时摆动幅度不得超过土1.0mm。 （2）操作容器为1000ml的圆底烧杯，内径为98～106mm，高160～175mm；烧杯上有一有机玻璃盖，盖上有2孔，中心孔为篮轴的位置，另一孔供取样或测温度用。为使操作容器保持恒温，应外套水浴；水浴的温度应能使容器内溶剂的温度保持在37℃土0.5℃。转篮底部离烧杯底部的距离为25mm土2mm。 （3）电动机与篮轴相连，转速可任意调节在50～200r/min，稳速误差不超过±4％。运转时整套装置应保持平稳，不得晃动或振动。 （4）仪器应装有6套操作装置，可一次测定6份供试品。取样点位置应在转篮上端距液面中间，离烧杯壁10mm处。 2、测定法

对乙酰氨基酚片的测定

对乙酰氨基酚片的测定 本品含对乙酰氨基酚（C8H9NO2）应为标示量的95.0%～105.0%。性状：本品为白色片、薄膜衣或明胶包衣片，除去包衣后显白色。鉴别：仪器及试液 一般实验仪器和红外分光光度仪 三氯化铁试液：取三氯化铁9g ，加水使溶解成100ml，即得。 稀盐酸：取盐酸234ml，加水稀释至1000ml，即得。本液含HCL应为9.5%～10.5%。 亚硝酸钠试液：取亚硝酸钠1g，加水使溶解成100ml，即得。 碱性β-奈酚试液：取β-奈酚0.25g，加氢氧化钠溶液(1→10)10ml使溶解，即得本液应临用新制。 分析步骤 取本品10片于研钵中研细精密称量（约相当于对乙酰基酚0.5g）粉末于研钵中用25ml量筒量取乙醇20ml分次研磨使对乙酰氨基酚溶解。滤过，合并滤液，蒸干残渣备用。 （1）取上述残渣少许于试管中加水2滴，三氯化铁试液1滴，即显蓝紫色。 （2）取上述残渣约0.1g置试管中用5ml移液管加稀盐酸5ml，置水浴中加热40分钟，放冷。取0.5ml置小试管中滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用移液管加水3ml稀释后，加碱性β-奈酚试液2ml，振摇即显红色。 取本品细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚100mg），加丙酮10ml，研

磨溶解，滤过，滤液水浴蒸干，残渣经减压干燥，用红外分光光度仪检测，采用压片法，取残渣约1～1.5mg，置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾或氯化钾细粉月200～300mg（与供试品的比约为200:1）作为分散剂，充分研磨混匀，置于直径为13mm的药片模具中，使铺展均匀，抽真空约2min，加至（0.8×106）kPa（约8～10T/㎝2），保持压力2min，撤去压力并放弃后取出制成的供试片，目视检测，片子应呈透明状，其中样品分布应均匀，并无明显的颗粒状样品。亦可采用其他直径的压膜制片，样品与分散剂的用量需相应调整以制得浓度适合的片子测定。 溶出度的测定 1、掌握片剂中溶出度检查的操作方法。 2、掌握溶出仪、紫外可见分光光度计的正确操作方法。 3、熟悉片剂中溶出度质量评定的方法，熟悉容量分析操作方法。 4、了解溶出仪的主要结构，了解溶出度检查的目的和意义。 二、实训原理 溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。凡检查溶出度的制剂，不再进行崩解时限检查。药物只有固体制剂中的活性成分溶解之后，才能为机体吸收。溶出度试验能有效地区分同一药物制生物利用度的差异，是控制固体制剂内在的重要指标之一。对乙酰氨基酚的溶解度大小、辅料的亲水性程度和制片工艺都会影响制剂的溶出度，对乙酰氨基酚溶出度测定采用转篮法。 三、实训操作

实训六--对乙酰氨基酚片的质量检验

实训六对乙酰氨基酚片的质量检验 一、实训目标 通过本实训，要求掌握对乙酰氨基酚片的质量检验的程序、方法与操作技能，掌握检验结果的处理与判断，能够规范书写检验原始记录及检验报告书。 二、质量标准 对乙酰氨基酚片 Duiyixian’anjifen Pian Paracetamol Tablets 本品含对乙酰氨基酚（C8H9NO2）应为标示量的95.0％~105。0％. 【性状】本品为白色片、薄膜衣或明胶包衣体，除去包衣后显白色。 【鉴别】取本品的细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.5g)，用乙醇20ml分次研磨使对乙酰氨基酚溶解，滤过，合并滤液，蒸干，残渣照对乙酰氨基酚项下鉴别(1）(2)项试验，显相同反应. 【检查】溶出度取本品，照溶出度测定法（附录1[1]ⅩC第一法），以稀盐酸24ml 加水至1000ml为溶出介质，转速为每分钟100 转，依法操作，经30分钟时，取溶液5ml 滤过，精密量取续滤液1ml，加0。04％氢氧化钠溶液稀释至50ml，摇匀,照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）,在257nm 的波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸收系数（E cm%11）为715计算出每片的溶出量，限度为标示量的80％，应符合规定。 其他应符合片剂项下有关的各项规定(附录ⅠA）. 【含量测定】取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg),置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml及水50ml,振摇15分钟,加水至刻度，摇匀,用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，照对乙酰氨基酚含量测定项下方法，自“置100ml量瓶中”起，依法测定，即得. 【类别】同对乙酰氨基酚。 【规格】（1）0.1g（2) 0。3g（3）0.5g 【贮藏】密封保存。 四、实训过程 (一）仪器、试药准备及实训用液的制备

对乙酰氨基酚的制备及质量检查

对乙酰氨基酚分散片的制备及质量检查 【摘要】 目的：考察制备对乙酰氨基酚分散片的最佳处方及工艺并进行药物质量检查。 方法：通过单因素实验筛选对乙酰氨基酚最佳崩解剂，然后通过正交试验得到涉及黏合剂用量，崩解剂用量和加入方法的最佳制备工艺。 结果：最优崩解剂为交联羧甲纤维素钠（CCNa）,用量7%，采用内外加法；黏合剂为PVP，用量2%；硬度控制在2kg左右。 结论：用本法制备对乙酰氨基酚分散片可操作性强，但多数质量检查不符合要求。 【关键词】对乙酰氨基酚；分散片；正交试验 【前言】分散片指在水中能迅速崩解并均匀分散的片剂。分散片可以迅速释放药物从而提高药物的生物利用度，另外它具有易生产、便携等特点。一般需要对分散片进行崩解时限，混悬性或分散均匀度和溶出度的检查。国内外广泛用于分散片中的崩解剂主要有羧甲基淀粉钠(CMS-Na)、交联聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、交联羧甲纤维素钠(CCNa)、低取代羧丙纤维素(L-HPC)等。分散片质量检查的项目是：崩解时限、溶出度检查、分散均匀性检查等。 对乙酰氨基酚(Acetaminophen)又名扑热息痛(paracetamolum APAP)，属苯胺类解热镇痛药，临床上用于发热、头痛、风湿痛、神经痛及痛经等，适于对阿司匹林过敏的患者。对乙酰氨基酚目前已有片剂(胶囊型)、注射剂、胶囊、咀嚼片、混悬液、滴剂等多种剂型，其中片剂胶、囊剂为常用。由于该药物在水中溶解度较小且在水溶液存在稳定性问题,同时该药物吸收血药达峰时为10——60min。由对硝基酚钠经还原成对氨基酚，再酰化制得。本论文研究的对乙酰氨基酚分散片可以满足一些特殊用药需求，并为工业生产提供一定理论依据。 一仪器与试药 1仪器： 乳钵，托盘天平，片剂四用检测仪；尼龙筛（16目），单冲压片机，RCZ-8A智能溶出仪，WFZ UV-2000紫外分光光度计，FT-2000A脆碎度检查仪，LB-2B崩解时限测定仪，LIBROR-1600TP分析天平，101-4AB电热鼓风干燥箱。 2试药： 对乙酰氨基酚原料药，可压性淀粉，硫脲，硬脂酸镁，羧甲基淀粉钠（CMS-Na），交联聚吡咯烷酮（PVPP），低取代羟丙级纤维素（L-HPC），交联羧甲基纤维素钠

实验三-复方对乙酰氨基酚片的含量测定

实验三复方对乙酰氨基酚片的含量测定 、目的要求 1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。 2、掌握复方片剂的分析特点。 二、基本原理 复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。 各成分之间性质差异大。乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，K a =3.27X 10-4,可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，K b =0.7X 10-14,不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。反应式表示如下： 1、乙酰水杨酸的测定原理 等当点时,由于生成物水杨酸钠的水解,溶液呈微碱性,所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。 2、对乙酰氨基酚的测定原理 COOH O OC +NaOH CH 3 3 COONa O +H 2O OCCH 3 3

3、咖啡因的测定原理O CH 3 H 3CNH 3C N 3N ＋2I+KI+H 2SO 4N O N N O CH 3 3 I 2（剩余）+2Na 2s 2O 32NaI+Na 2s 4O 6 三、实验方法 取本品20片，精密称定，研细备用。 （一）乙酰水杨酸的含量测定 药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219g 〜0.242g 。 精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g ）,置分液漏斗中，加水15ml ,摇匀，用氯仿振摇提取4次（20ml ,10ml ,10ml ,10ml ）,提取氯仿液用同一分水10ml 洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L 氢氧化钠液滴定，即得。每1ml0.1mol/L 氢氧化钠液相当于18.02mg 的C 9H 804。 按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数 g /片=T ".f xW W 平均片重 称样量 其中：T 一为滴定度；V —消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子 酣战指示液取酶酰1外加乙醉100ml 使溶解，即得付 变色池围仅无色》红人 （二）对乙酰氨基酚的含量测定 CH 3N HII 4+KHs04 CH 3 3 COOH 碘与淀粉作用，变蓝 O II —C-CHj 终点时4HCI+2Kl +2KCL+2Mme1+ 2 +NaNO 2——AHO

(完整word版)新-实验六紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量的方法学研究

实验六紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚片的含量的方法学研究 一、目的要求 1. 掌握确证分析方法的效能指标内容和要求。 2. 熟悉建立分析方法的基本思路. 3。掌握紫外分光光度法的原理及操作。 二、实验原理 对乙酰氨基酚结构中含有苯环共轭系统,在0。4％氢氧化钠溶液中,于257nm波长处有最大吸收，其吸收系数为%1 E715. 1cm C8H9NO2 151。16 三、仪器与试剂 对乙酰氨基酚片，对乙酰氨基酚对照品，氢氧化钠,容量瓶,量筒，紫外分光光度计,研钵。 四、实验步骤 1. 线性与浓度范围取对乙酰胺基酚对照品约40mg，精密称定，置250mL量瓶中,加0.4％氢氧化钠溶液50mL溶解后，加水稀释至刻度，摇匀.分别精密量取2，4，6,8,10，12mL，置100mL量瓶中,加入0。4％氢氧化钠溶液10mL，加水稀释至刻度,摇匀，照分光光度法，在257nm的波长处测定吸收度。将浓度C对吸收度A回归,得线性回归方程：A=a+bC(r= ,n=6).线性浓度范围0.0032～0。0192mg/mL。 2。供试品测定法取本品10片，精密称定,研细，精密称取适量(约相当于对乙酰氨基酚40mg）,置250ml 量瓶中，加0。4 ％氢氧化钠溶液50ml及水50ml，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml ，置100ml 量瓶中,加0。4 ％氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀， E)为715 计算，即得。 照分光光度法,在257nm 的波长处测定吸收度，按C8H9NO2 的吸收系数（%11cm 3. 回收率试验取本品10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg），共6份,置250ml量瓶中，按1：1比例，分别向其中加入对乙酰氨基酚对照品，其余照“供试品测定法”项下的方法操作，按标准曲线法或百分吸收系数法计算回收率. 4. 精密度试验照“供试品测定"项下的方法操作，计算片剂含量相当于标示量的百分数,6份测定结果的相对标准偏差(RSD）即为精密度试验结果。 五、注意事项 1。为减少误差,各样品应尽量平行操作. 2. 比色皿每次用完后应清洗干净。 六、思考题 1。测定方法的效能指标包括哪些内容？ 2。精密度的表示方法有哪几种？ 补充：

No.29对乙酰氨基酚泡腾片临床试验计划及研究方案

对乙酰氨基酚泡腾片临床试验计划及研究方案 目录 一、受试者选择和试验条件 二、参比制剂 三、受试制剂 四、试验设计 五、血清药物浓度的测定方法 六、绘制血药浓度曲线 七、数据统计分析 八、结论 九、参考文献

对乙酰氨基酚泡腾片临床试验计划及研究方案 对乙酰氨基酚，化学名为N-（4-羟基苯基）乙酰胺。属于乙酰苯胺类解热镇痛药，对中枢神经系统前列腺素合成的抑制作用比对外周神经的前列腺素合成的抑制作用强，因而解热作用较强，镇痛作用较弱，但作用缓和、持久。主要用于上呼吸道感染引起的发热、头痛和其他慢性钝痛。 我公司研究开发的对乙酰氨基酚泡腾片，属于《药品注册管理办法》分类化学药品第6类，按要求应进行生物等效性研究，因此特制定本计划和方案。 本项目的临床研究方案将遵循《赫尔辛基宣言》和国际医学科学组织委员会颁布的《人体生物医学研究国际道德指南》的道德原则精神，对受试者的个人权益给予充分的保障，同时，按照《中国药典》2005版附录中《药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则》，确保实验的科学性和可靠性。试验方案须经伦理委员会审议同意并签署批准意见后方可实施，受试者签署知情同意书后才能参加该项实验。 一、受试者选择和试验条件 1 试者选择 1.1性别：男性； 1.2 年龄：18-40岁；同一批试验者年龄差不宜超过10岁； 1.3 体重：标准体重±10%，[标准体重＝(身高(cm)－80)×0.7]；同一批受试者体重应相近； 1.4 身体健康，无心、肝、肾、消化道、代谢异常、神经系统疾病等病史，并进行健康检查，如心电图、血压、肝肾、肺功能和血象等； 1.5 无过敏史和神经系统疾病史以及体位性低血压； 1.6 两周前至试验期间不服用任何其它药物，试验期间禁烟、酒及含咖啡因的饮料受试期间禁烟、酒、茶和任何药物，避免剧烈活动，并由医护人员监护； 1.7 与试验单位签订知情同意书。 2 受试者的例数 根据《药品注册管理办法》的要求，本试验选用24例。 二、参比制剂 根据《中国药典》2005版附录中《药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导

对乙酰氨基酚的生物利用度和药物动力学参数的测定

对乙酰氨基酚的生物利用度和药物动力学参数的测定 对乙酰氨基酚的生物利用度和药物动力学参数的测定 【实验目的】 掌握用血药浓度法（静脉注射与口服给药）测定药物制剂的生物利用度和药物动力学参数的原理与方法，并加深对这些参数的理解。 【实验原理】 对乙酰氨基酚水解生成对氨基苯酚，对氨基苯酚在次溴酸钠的存在下，能与苯酚产生反应，生成靛蓝染料，靛蓝染料在波长620nm处有最大吸收。 为了排除血浆中的蛋白的干扰，测定血药浓度时首先应加入适量20％的三氯醋酸沉淀蛋白。 【实验方法】 1、血药标准曲线的制备 （1）标准贮备液的配制：精密称取105℃干燥恒重的对乙酰氨基酚400mg，用热蒸馏水溶解于100ml容量瓶中，冷却至室温后稀释至刻度，至冰箱保存备用（4000μg/ml）。 （2）标准溶液的配制：分别精密吸取上述4000μg/ml的浓贮备液1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml、7.0ml于100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，得40μg/ml、80μg/ml、120μg/ml、200μg/ml、280μg/ml的标准溶液。 （3）空白血浆的制备：将实验动物家兔耳缘静脉处毛拔掉，涂擦酒精，用100W 灯泡烤5min，将耳静脉横向切开，用经1％肝素溶液处理并烤干的离心管采血约9ml。然后将刀口贴上棉球，用夹子夹住。离心得上清液血浆约4.5ml，制备标准曲线用3ml。剩下放置冰箱供测样品用。 （4）标准曲线的制备：取干燥洁净离心管6支，标上管号。精密吸取各种浓度的标准液0.5ml。按表1程序操作，于分光光度计波长620nm处，以空白血浆按同法作对照，测定吸收度。 表1：

操作 标准液浓度（μg/ml） 0 40 80 120 200 280 标准液（ml）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 空白血浆（ml）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 20％三氯醋酸（ml）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 涡旋混合后离心（3500转/分）10 10 10 10 10 10 小心吸取上清液（ml） 1 1 1 1 1 1 浓盐酸（ml）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 煮沸（h） 1 1 1 1 1 1 40％氢氧化钠溶液（ml）0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 显色剂加至（ml）10 10 10 10 10 10 摇匀放置（min）40 40 40 40 40 40 测定吸收度A 1 2 3 平均A 2、静脉给药血药浓度的测定 （1）先准备7支EP管，标上试管号备用。 （2）取雄性家兔1只，每只称重。精密称取0.25g对乙酰氨基酚于25ml容量瓶内。加灭菌注射用水适量，在37℃下溶解，并稀释至25ml。静脉注射15ml，立即记下开始时间然后按15min、30min、1h、1.5h、2.5h、4h、6h定时采血约1.5ml，每份样品离心10min （3500转/分），将上清液血浆转移至一个编号的洁净干燥EP管中，置冰箱保存备用。 （3）先准备7支离心管并编号取出所有样品血浆及空白血浆。在室温解冻后，吸取0.5ml，按表2程序操作。用分光光度计在波长620nm处，以空白血浆按同法处理作对照，测定吸收度A。 表2 操作 取血样时间 0 15min 30min 1h 1.5h 2.5h 4h 6h 蒸馏水（ml）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 空白血浆（ml）0.5 0 0 0 0 0 0 0 样品血浆（ml）0 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 20％三氯醋酸（ml）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 涡旋混合后离心（3500rpm）

对乙酰氨基酚片溶出度测定

项目任务书项目 3.4对乙酰氨基酚片溶出度测定姓名： 提出问题 如何测定对乙酰氨基酚片溶出度？欲使溶出度测定结果准确，实验过程应注意哪些问题？ 任务分析1．掌握片剂溶出度测定的方法以及溶出度测定仪的调试与使用。 2．掌握实验中影响溶出度测定结果的因素以及实验设计中针对这些影响因素所采取的措施。 3. 熟悉溶出度的概念，了解溶出度与口服固体制剂中药物吸收的关系，以及溶出度的测定在药物评价中的意义和运用。 4. 学会754紫外-可见分光光度计的正确使用。 相关知识及资料 溶出速度除与药物的晶型、颗粒大小有关外，还与制剂的生产工艺、辅料、贮存条件等有关。为了有效地控制固体制剂质量，除采用血药浓度法或尿药浓度法等体内测定法推测吸收速度外，体外溶出度测定法是一种较简便的质量控制方法。对于口服固体制剂，特别是对那些体内吸收不良的难溶性的固体制剂，以及治疗剂量与中毒剂量接近的药物的固体制剂，均应作溶出度检查并作为质量标准。 对乙酸氨基酚（扑热息痛）由Morse于1878年首次合成，是目前广泛应用的解热镇痛药，和其它解热镇痛药相比，它具有起效快、作用缓和而持久、不良反应小等特点，是世界各地医生和医院所推荐的安全有效的解热镇痛药。但其可压性差、易裂片，生产中多采用高黏度的黏合剂以解决外观问题，但崩解时间延长，不利于药物溶

出。所以对乙酸氨基酚的溶出度是一项重要的质量指标。在实际应用中溶出度仅指一定时间内药物溶出的程度，一般用标示量的百分率表示，如药典规定30分钟内对乙酰氨基酚的溶出限度为标示量的80%。 一、项目描述 二、材料清单 序号各种材料清单数量备注 1 乙酰氨基酚片 6 2 盐酸 3 氢氧化钠 4 溶出度测定仪 1 5 50毫升容量瓶 6 6 注射器 1 7 滤膜 6 8 烧杯等 9 754紫外-可见分光光度计 1 10 说明：以上为一名学生所需材料 三、项目实施过程 （一）任务分析： 通过本模块的学习，学生明确 1. 在片剂中，溶出度检查的重要性，并掌握片剂溶出度测定的方法；

生物药剂学与药物动力学实验讲义

生物药剂学与药物动力学 实验讲义 中药药剂学教研室编写 2006年12月

目录 实验一片剂溶出度试验 (4) 实验二尿药法测定水杨酸钠片剂的生物利用度 (7) 实验三扑热息痛血管外给药的药物动力学研究 (10) 实验四大鼠在体小肠吸收实验 (13) 实验五氨茶碱药物动力学的研究 (15)

生物药剂学与药物动力学实验须知 生物药剂学与药物动力学属于药物临床应用学科的范畴，具有综合性强、应用性强、创新性强等特点。生物药剂学与药物动力学实验是教学的重要组成部分，是理论与实践结合的主要方式之一。通过实验课不仅能印证、巩固和扩展教学内容，还能训练基本操作技能，培养良好的实验作风。 为保证实验课顺利进行，并达到预期的目的，实验中必须做到以下六个方面： 1．预习实验内容通过预习，明确实验目的与要求，对实验内容做到心中有数，并能合理安排实验顺序与时间。要明确每个处方中药物与辅料的用途。 2．遵守实验纪律不迟到，不早退，不旷课，保持实验肃静，未经许可，不得将实验室物品带离实验室。 3．重视药剂卫生进入实验室必须穿整洁的白工作服。先将工作台面擦洗干净再开始做实验。实验过程中应始终注意台面、地面的整洁，各种废弃物应投入指定位置，不能随手乱丢，更不能弃入水槽内。完成实验后，应将容器、仪器清洁，摆放整齐，台面擦净，经教师同意后方能离开。值日生负责整理公用器材，清扫实验室，关好水、电、门、窗。 4. 细心操作、勤于思考称量药品、试剂时，要在称量前（拿取时）、称量时和称量后（放回时）进行三次核对。称量完毕应立即盖好瓶塞，放回原处。对剧毒药品更要仔细核对名称与剂量，并准确称取。实验中要严格控制好实验条件，认真操作每一道工序，以保证成品质量。实验成品应标明名称、规格、配制者、配制时间，并交教师验收。实验中遇到问题应先独立思考，再请教他人。在实验中逐步形成整洁、细致、严谨、冷静、善于观察、善于思考、勤于动手的实验风格。 5．正确使用仪器、注意安全使用仪器时要按使用方法正确操作，不熟悉操作方法时，应在教师指导下使用。各种仪器、容器使用时要注意轻拿、轻放，用毕要清洁后放回规定位置。 6. 写好实验报告实验报告是考察学生分析总结实验资料能力和写作能力的重要方面，亦是评定实验成绩的重要依据。实验报告的格式如下所示： 【实验目的及原理】写出实验目的及原理。 【实验操作】写出具体实验步骤和实验条件。 【实验结果】记录各采样时间点及采样的状态，按要求对数据进行处理，并将全班数据进行综合，求其平均值和标准差。 【讨论】阐述实验原理、实验收获与教训、建议等。 【思考题】回答实验思考题。 每一实验内容逐一按以上顺序书写实验报告。