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生化分离技术复习题及答案

离心技术

1、什么是离心技术？这种技术主要应用于哪些方面？

离心技术是分子生物学和生物化学研究中不可缺少的一种技术。它是利用物质沉降系数、密度、浮力等方面的差别，用强大的离心力场将其分离、浓缩、纯化和鉴定的技术。离心技术既可以是制备性的也可以是分析性的。处理的样品可多可少（几千L至0.2mL以下），应用范围十分广泛。这项技术应用很广，诸如分离出化学反应后的沉淀物，天然的生物大分子、无机物、有机物，在生物化学以及其它的生物学领域常用来收集细胞、细胞器及生物大分子物质。

2、离心机的种类有哪些？主要性能如何？

根据性能，离心机分为三种类型，即低速离心机（转速在2000～6000r/min之间，最大RCF可达6000g）、高速离心机（转速在18000～25000r/min之间，最大RCF 可达60 000g）、超速离心机（转速在40 000～100 000r/min之间，最大RCF可达803 000g）。超速离心机按性能又分为分析型、制备型和分析制备型三类。

3、超速离心机主要由哪四个部分构成？分析性离心机构造的特点是什么？

超速离心机主要由驱动和速度控制、温度控制、真空系统和转头四部分组成。

分析性离心机使用了特殊设计的转头和光学检测系统，以便连续地监视物质在一个离心场中的沉降过程。从而确定其物理性质。分析性超速离心机的转头是椭圆形的，以避免应力集中于孔处。此转头通过一个有柔性的轴联接到一个高速的驱动装置上，转头在一个冷冻的和真空的腔中旋转，转头上有2～6个装离心杯的小室，离心杯是扇形石英的，可以上下透光，离心机中装有一个光学系统，在整个离心期间都能通过紫外吸收或折射率的变化监测离心杯中沉降着的物质，在预定的期间可以拍摄沉降物质的照片，在分析离心杯中物质沉降情况时，在重颗粒和轻颗粒之间形成的界面就像一个折射的透镜，结果在检测系统的照像底板上产生了一个“峰”，由于沉降不断进行，界面向前推进，因此峰也移动，从峰移动的速度可以计算出样品颗粒的沉降速度。

4、转子是离心机的附件，制备转子主要由哪几种？它们各适用于哪种离心方法？

⑴角式转头⑵荡平式转头：这种转头最适合做密度梯度区带离心，⑶区带转头：区带转头的“壁效应”极小，可以避免区带和沉降颗粒的紊乱，分离效果好，而且还有转速高，容量大，回收梯度容易和不影响分辨率的优点，使超离心用于

制备和工业生产成为可能。⑷垂直转头：适合用于密度梯度区带离心，离心结束后液面和样品区带要作九十度转向，因而降速要慢。⑸连续流动转头：可用于大量培养液或提取液的浓缩与分离。

5、塑料离心管都配有管盖，管盖的作用如何？

防止样品外泄。用于有放射性或强腐蚀性的样品时，这点尤其重要。防止样品挥发。支持离心管，防止离心管变形。

6、什么是离心力和相对离心力？

离心作用是根据在一定角速度下作圆周运动的任何物体都受到一个向外的离心力进行的。离心力（Fc）的大小等于离心加速度ω2X与颗粒质量m的乘积。相对离心力RCF就是实际离心场转化为重力加速度的倍数。

7、什么是沉降速度？

沉降速度是指在强大离心力作用下，单位时间内物质运动的距离。

8、简述离心技术的基本原理。

当物体围绕某一中心轴做圆周运动时，运动物体就受到离心力的作用。旋转速度越高，运动物体所受到的离心力就越大。如果装有悬浮液或高分子溶液的容器进行高速水平旋转，强大的离心力作用与溶剂中的悬浮颗粒或高分子，会使其沿着离心力的方向运动而逐渐背离中心轴。在相同转速条件下，容器中不同大小的悬浮颗粒或高分子溶质会以不同的速率沉降。经过一定时间的离心操作，就有可能实现不同悬浮颗粒或高分子溶质的有效分离。

9、相对离心力列线图在实际应用中有什么意义？

将离心机转数换成相对离心力时，先在离心机半径标尺上取已知的离心机半径和在转数标尺上取已知的离心机转数，然后将这两点间划一条直线，在图中间RCF 标尺上的交叉点，即为相应的离心力数值。例已知离心机转数为2500rpm，离心机的半径为7.7cm，将两点连接起来交于RCF标尺，此交点500×g即是RCF值。

10、沉降系数S有哪两个重要用途？

预计沉降时间；测定物质分子质量

11、按照实际工作的需要，已设计出的离心方法主要有哪些？

⒈平衡离心法根据粒子大小、形状不同进行分离，包括差速离心法和速率区带离心法。⒉等密度离心法又称等比重离心法，依粒子密度差进行分离，等密度离心

法和上述速率区带离心法合称为密度梯度离心法。⒊经典式沉降平衡离心法用于对生物大分子分子量的测定、纯度估计、构象变化等。

12、离心操作的注意事项主要有哪些？

1）使用各种离心机时，必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物，平衡时重量之差不得超过各个离心机说明书上所规定的范围，每个离心机不同的转头有各自的允许差值，转头中绝对不能装载单数的管子，当转头只是部分装载时，管子必须互相对称地放在转头中，以便使负载均匀地分布在转头的周围。

2）装载溶液时，要根据各种离心机的具体操作说明进行，根据待离心液体的性质及体积选用适合的离心管，有的离心管无盖，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀，而制备性超速离心机的离心管，则常常要求必须将液体装满，以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。每次使用后，必须仔细检查转头，及时清洗、擦干，转头是离心机中须重点保护的部件，搬动时要小心，不能碰撞，避免造成伤痕，转头长时间不用时，要涂上一层上光腊保护，严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管。

3）若要在低于室温的温度下离心时。转头在使用前应放置在冰箱或置于离心机的转头室内预冷。

4）离心过程中不得随意离开，应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。

5）每个转头各有其最高允许转速和使用累积限时，使用转头时要查阅说明书，不得过速使用。每一转头都要有一份使用档案，记录累积的使用时间，若超过了该转头的最高使用限时，则须按规定降速使用。

13. 比较差速沉降离心法与区带离心法的不同？

电泳技术

1、哪一年，哪个国家的科学家因为什么贡献获得了1948年的诺贝尔化学奖？1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius对电泳仪器作了改进，创造了Tiselius电泳仪，建立了研究蛋白质的移动界面电泳方法，并首次证明了血清是由白蛋白及α、β、γ球蛋白组成的，由于Tiselius在电泳技术方面作出的开拓性贡献而获得了1948年的诺贝尔化学奖。

2、电泳技术的基本原理？

电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。

3、何为电泳迁移率（m）和电泳相对迁移率（Rm）？

电泳迁移率（m）是指在单位电场强度（1V/cm）时带电分子的迁移速度

相对迁移率mR就是两种带电粒子在凝胶中泳动迁移的距离之比。

4什么是电渗作用？

液体在电场中，对于固体支持介质的相对移动，称为电渗现象。

5按分离原理电泳技术可分为哪几类？

电泳按其分离的原理不同可分为：

⑴区带电泳；⑵自由界面电泳；⑶等速电泳；⑷等电聚焦电泳

6醋酸纤维薄膜电泳的优点有哪些？

①醋酸纤维薄膜对蛋白质样品吸附极少，无“拖尾”现象，染色后蛋白质区带更清晰。②快速省时。③灵敏度高，样品用量少。④应用面广。⑤醋酸纤维薄膜电泳染色后，用乙酸、乙醇混合液浸泡后可制成透明的干板，有利于光密度计和分光光度计扫描定量及长期保存。

7琼脂糖凝胶电泳主要有哪些类型？

水平式板状琼脂糖凝胶电泳，垂直式琼脂糖凝胶电泳

8琼脂糖凝胶电泳的优点有哪些？

1）支持物透明、无紫外吸收特性，易于检测。2）凝胶制作简单。

3）分辨率高。4）重复性好。5）电泳区带易于染色，易于洗脱。

9什么是聚丙烯酰胺凝胶电泳？凝胶聚合的单体、交联剂是什么？聚合方法有哪两种方式？需要的加速剂和催化剂是何物？

聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳。聚丙烯酰胺凝胶是由单体的丙烯酰胺和交联剂甲叉双丙烯酰胺聚合而成。常用的催化聚合方法有两种：化学聚合和光聚合。化学聚合通常是加入催化剂过硫酸铵（AP）以及加速剂四甲基乙二胺（TEMED），光聚合的催化剂是核黄素

10聚丙烯酰胺凝电泳的优点有哪些？

①可以随意控制胶浓度“T”和交联度“C”，从而得到不同的有效孔径，用于分离不同分子量的生物大分子。②能把分子筛作用和电荷效应结合在同一方法中，达到更高的灵敏度。③电泳时不会产生“电渗”。④由于可以制得高纯度的单体原料，因而电泳分离的重复性好。⑤透明度好，便于照相和复印。机械强度好，有弹性，不易碎，便于操作和保存。⑥无紫外吸收，不染色就可以用于紫外波长的凝胶扫描作定量分析。⑦还可以用作固定化酶的惰性载体。

11聚丙烯酰凝胶分离物质的依据是什么？

聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据被分离物质所带电荷多少及其分子大小、形状的不同，在电场作用下，产生不同移动速度而分离的方法。它具有电荷和分子筛双重作用。

12不连续系统PAGE建立了哪些不连续性？分离物质的依据是什么？

孔径不连续：大孔胶——浓缩胶,小孔胶——分离胶

缓冲系统不连续:电极缓冲液Tris-Gly ；制胶缓冲液Tris-Hcl

PH不连续：电极缓冲溶液————pH8.3,浓缩胶缓冲溶液————pH6.7,分离胶缓冲溶液————pH8.9.. 分离物质的依据是电荷效应、分子筛效应和浓缩效应

13.SDS-PAGE分离蛋白质的原理是什么？如何测定蛋白质的分子质量？

电泳样品加入强还原剂，使SDS与蛋白质充分结合，以使蛋白质完全变性和解聚，并形成棒状结构。SDS与蛋白质结合后使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，平均每两个氨基酸残基结合一个SDS分子，这时各种蛋白质分子本身的电荷完全被SDS掩盖。这样就消除了各种蛋白质本身电荷上的差异。亚基大小靠凝胶分子筛效应分离。SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳还可以用于未知蛋白分子量的测定，在同一凝胶上对一系列已知分子量的标准蛋白及未知蛋白进行电泳，测定各个的标准蛋白的电泳距离（或迁移率），并对各自分子量的对数（log Mr）作图，即得到标准曲线。测定未知蛋白质的电泳距离（或迁移率），通过标准曲线就可以求出未知蛋白的分子量。

14.IEF-PAGE分离蛋白质的原理是什么？

等电聚焦电泳是根据两性物质等电点（pI）的不同而进行分离的，它具有很高的分辨率，可以分辨出等电点相差0.01的蛋白质，是分离两性物质如蛋白质的一种理想方法。等电聚焦的分离原理是在凝胶中通过加入两性电解质形成一个pH梯度，两性物质在电泳过程中会被集中在与其等电点相等的pH区域内，从而得到分离。

层析技术

1、英国生物学家Martin和Synge，首先提出了色谱塔板理论。他们提出的两个远见卓识预言是什么？因此, 他们在那一年被授予诺贝尔化学奖？

英国生物学家Martin和Synge提出了远见卓识的预言：一、流动相可用气体代替液体，与液体相比，物质间的作用力减小了，这对分离更有好处；二、使用非常细的颗粒填料并在柱两端施加较大的压差，应能得到最小的理论塔板高(即增加了理论塔板数)，这将会大大提高分离效率。前者预见了气相色谱的产生，并在1952年诞生了气相色谱仪，它给挥发性的化合物的分离测定带来了划时代的变革；后者预见了高效液相色谱（HPLC）的产生，在60年代末也为人们所实现，现在HPLC已成为生物化学与分子生物学、化学等领域不可缺少的分析分离工具之一。因此, Martin和Synge于1952年被授予诺贝尔化学奖。

2、层析技术分离物质的基本原理是什么？

层析的一般原理是所有的层析系统都由两部分组成，即：固定相和流动相。由于被分离物质之间在两相中的分配系数不同，使得被分离物在层析过程中被有效的分开。

3、层析系统由什么组成？

层析系统都由两部分组成，即：固定相和流动相

4、解释分配系数、有效分配系数和理论塔板数（n）概念。

分配系数是指在一定的条件下，某种组分在固定相和流动相中含量（浓度）的比值，常用K来表示。分配系数是层析中分离纯化物质的主要依据。

容量因子D:又称有效分配系数（B）,指固定相与流动相中溶质量的分布比。

理论塔板数（n）用来表示柱中发生的相间有效平衡的次数，N越大，平衡次数越多，洗脱区带越集中，层析柱越有效。理论塔板数（n）等于柱长除以理论塔板高度。

5、影响分配系数的因素有哪些？

分配系数主要与下列因素有关：

①被分离物质本身的性质；②固定相和流动相的性质；③层析柱的温度。

6、什么是层析技术的分辨率（或分离度）？提高分辨率Rs 的方法有哪些？

分辨率一般定义为：相邻两个峰的分开程度。用Rs来表示。

为了提高分辨率Rs 的值，可采用以下方法：⑴使理论塔板数N增大，则Rs上升。

①增加柱长，N可增大，可提高分离度②减小理论塔板的高度③采用适当的流速，也可使理论塔板的高度降低，增大理论塔板数。

⑵改变容量因子D（固定相与流动相中溶质量的分布比）。我们可以通过改变柱温（一般降低温度），改变流动相的性质及组成（如改变pH值，离子强度，盐浓度，有机溶剂比例等），或改变固定相体积与流动相体积之比（如用细颗粒固定相，填充的紧密与均匀些），提高D值，使分离度增大。

⑶增大a（分离因子，也称选择性因子，是两组分容量因子D之比），使Rs变大。

7、最常用的层析技术是依据各种原理建立的液相柱层析技术，简述其基本操作方法。

柱层析的基本操作包括以下一些步骤：

⑴装柱：一般要求柱子装的要均匀，不能分层，柱子中不能有气泡等。否则要重新装柱。

⑵平衡

柱子装好后，要用所需的缓冲液（有一定的pH和离子强度）平衡柱子。

⑶加样

加样量的多少直接影响分离的效果。一般讲，加样量尽量少些，分离效果比较好。

⑷洗脱

当我们选定好洗脱液后，洗脱的方式可分为简单洗脱、分步洗脱和梯度洗脱三种。

⑸收集、鉴定及保存

在生化实验中，基本上我们都是采用部分收集器来收集分离纯化的样品。在合并一个峰的各管溶液之前，还要进行鉴定。最后，为了保持所得产品的稳定性与生物活性，我们一般采用透析除盐、超滤或减压薄膜浓缩，再冰冻干燥，得到干粉，在低温下保存备用。

⑹基质（吸附剂、交换树脂或凝胶等）的再生

许多基质（吸附剂、交换树脂或凝胶等）可以反复使用多次，而且价格昂贵，所以层析后要回收处理，以备再用，严禁乱倒乱扔。

8、凝胶过滤分离大分子物质的机理是什么？

凝胶层析是依据分子大小这一物理性质进行分离纯化的。层析过程如图11 所示。凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒，凝胶颗粒的内部具有立体网状结构，形成很多孔穴。当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后，各个组分就向固定相的孔穴内扩散，组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子

大小。比孔穴孔径大的分子不能扩散到孔穴内部，完全被排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动，它们经历的流程短，流动速度快，所以首先流出；而较小的分子则可以完全渗透进入凝胶颗粒内部，经历的流程长，流动速度慢，所以最后流出；而分子大小介于二者之间的分子在流动中部分渗透，渗透的程度取决于它们分子的大小，所以它们流出的时间介于二者之间，分子越大的组分越先流出，分子越小的组分越后流出。这样样品经过凝胶层析后，各个组分便按分子从大到小的顺序依次流出，从而达到了分离的目的。

9、什么是外水体积、内水体积、基质体积、柱床体积、洗脱体积？

外水体积是指凝胶柱中凝胶颗粒周围空间的体积，也就是凝胶颗粒间液体流动相的体积。内水体积是指凝胶颗粒中孔穴的体积，凝胶层析中固定相体积就是指内水体积。基质体积是指凝胶颗粒实际骨架体积。而柱床体积就是指凝胶柱所能容纳的总体积。洗脱体积是指将样品中某一组分洗脱下来所需洗脱液的体积。

10、分子量为8万和10万Da的蛋白质能否用Sephadex-75柱分开？为什么？

否。Sephadex G-75对球形蛋白的分级分离范围为3,000－70,000，它表示分子量在这个范围内的球形蛋白可以通过Sephadex G-75得到较好的分离。8万和10万Da的蛋白质超出其分级分离范围。

11、凝胶过滤柱层析有哪些实际用途？

1）. 生物大分子的纯化

2）. 分子量测定

3）. 脱盐及去除小分子杂质

4）. 去热源物质

5）. 溶液的浓缩

12、凝胶柱层析测定蛋白质分子质量的原理如何？

在一定的范围内，各个组分的Kav以及Ve与其分子量的对数成线性关系。

Kav＝－b lg MW＋c

Ve＝－b' lg MW＋c'

由此通过对已知分子量的标准物质进行洗脱，作出Ve或Kav对分子量对数的标准曲线，然后在相同的条件下测定未知物的Ve或Kav，通过标准曲线即可求出其分子量。凝胶层析测定分子量操作比较简单，所需样品量也较少，是一种初步测定蛋白分子量的有效方法。

13、简述Sephadex-25分离血红蛋白和铁氰化钾的原理。

本实验属于凝胶层析，Sephadex-25作为基质，具有立体网状结构，筛孔直径一致，且呈珠状颗粒。这种基质对生物大分子可以完全或部分排阻于筛孔之外，而对小分子物质则不能排阻，但可让其在筛孔中扩散、渗透。大分子无法进入凝胶颗粒之间的流动相中，因而以较快速度首先流出层析柱，而小分子则能自由出入凝胶颗粒中，并很快在流动相和固定相之间形成动态平衡，因此就要花费较长的时间流经柱床，从而使不同大小的分子得以分离。

血红蛋白是一种相对分子量较高的生物大分子，溶液外观呈红色，而铁氰化钾是相对分子质量较低的无机小分子，溶液外观颜色为黄色。在实验过程中，明显可见两者分离的过程。铁氰化钾因相对分子质量较小，在层析柱中呈现本来的黄色带而远远地落在血红蛋白后面。

14、在凝胶层析柱中分离某有效成份时，洗脱体积是140ml，其外水体积和总体积分别是60ml和200ml，求分配系数是多少？

Kav=(V e-V0)/(V t-V0)

=（140-60）/（200-60）

=0.57

15、离子交换剂由哪几部分组成？何为阳离子和阴离子交换剂？

离子交换剂可以分为三部分：高分子聚合物基质、电荷基团和平衡离子

平衡离子带正电的离子交换剂能与带正电的离子基团发生交换作用，称为阳离子交换剂；平衡离子带负电的离子交换剂与带负电的离子基团发生交换作用，称为阴离子交换剂。

16. 0.015mol/LNa2SO4溶液的离子强度？

I = 1/2ΣCZ2

= 1/2（0.015×2×12 +0.015×22）

= 0.045

二、名词解释：

1. 离心技术是分子生物学和生物化学研究中不可缺少的一种技术。它是利用物质沉降系数、密度、浮力等方面的差别，用强大的离心力场将其分离、浓缩、纯化和鉴定的技术。

2. 沉降系数表示单位离心力场下的沉降速率即通过单位离心力场所需要的时

间，因此其单位为秒。1S单位等于1×10-13秒。

3. 电泳：带电颗粒在电场中向着与其电性相反电极方向移动的现象。

4. 液体在电场中，对于固体支持介质的相对移动，称为电渗现象。

5. 区带电泳：电泳过程中，待分离的各组分分子在支持介质中被分离成许多条明显的区带，这是当前应用最为广泛的电泳技术。

6. 自由界面电泳：这是瑞典Uppsala大学的著名科学家Tiselius最早建立的电泳技术，是在Ｕ形管中进行电泳，无支持介质，因而分离效果差，现已被其他电泳技术所取代。

7. 等电聚焦电泳：由两性电解质在电场中自动形成pH梯度，当被分离的生物大分子移动到各自等电点的pH处聚集成很窄的区带。

8. 在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或超临界体等，都称为流动相。

9. 分配系数：是指在一定的条件下，某种组分在固定相和流动相中含量（浓度）的比值，常用K来表示。分配系数是层析中分离纯化物质的主要依据。

10. 在一定条件下，在相同的时间内某一组分在固定相移动的距离与流动相本身移动的距离之比值。常用Rf来表示。

11. 在一定条件下，在相同时间内，某一组分在固定相中移动的距离与某一标准物质在固定相中移动的距离之比值。它可以小于等于1，也可以大于1。用Rx 来表示。

12. 排阻极限是指不能进入凝胶颗粒孔穴内部的最小分子的分子量。

13. 层析法是一种基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同，使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。

14. 能对抗外来少量强酸\强碱或稍加稀释不引起溶液PH值发生明显变化的作用叫做缓冲作用;具有缓冲作用的溶液,叫做缓冲溶液。

15. 同离子效应：在弱电解质溶液的平衡体系中，加入与弱电解质含有相同离子的、易溶的强电解质时，使解离平衡发生移动，降低弱电解质解离作用，这种现象称为同离子效应。

16. 分辨率一般定义为：相邻两个峰的分开程度。用Rs来表示。

17. 分配层析是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中，不同物质的分配系

数不同而达到分离目的的一种层析技术。

18. 凝胶过滤层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。

19. 离子交换层析是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。

20. 亲和层析是根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力（如酶和抑制剂、抗体和抗原、激素和受体等），将某种配体连接在载体上作为固定相，而对能与配体特异性结合的生物大分子进行分离的一种层析技术。亲和层析是分离生物大分子最为有效的层析技术，具有很高分辨率。

21. 外水体积是指凝胶柱中凝胶颗粒周围空间的体积，也就是凝胶颗粒间液体流动相的体积。

22. 内水体积是指凝胶颗粒中孔穴的体积，凝胶层析中固定相体积就是指内水体积。

23. 基质体积是指凝胶颗粒实际骨架体积。

24. 柱床体积就是指凝胶柱所能容纳的总体积。

25. 洗脱体积是指将样品中某一组分洗脱下来所需洗脱液的体积。

26. 吸水率是指1g干的凝胶吸收水的体积或者重量，但它不包括颗粒间吸附的水份。

27. 床体积是指1g干的凝胶吸水后的最终体积。

28. 热源物质是指微生物产生的某些多糖蛋白复合物等使人体发热的物质。

三、填空：

1. 离心机可分为工业用离心机和实验用离心机。

2. 制备性离心机可分为三类：普通离心机、高速冷冻离心机和超速离心机。

3. 制备性超速离心的分离方法有两种：差速沉降离心法和密度梯度区带离心法（或区带离心法）。

4. 生物化学研究中，沉降系数S有两个重要用途：预计沉降时间和测定物质分子质量。

5. 超速离心机转速可达50000～80000pm，相对离心力最大可达510000×g。

6. 超速离心机主要由四部分组成驱动和速度控制、温度控制、真空系统和转头。

7. 常用的分离纯化方法和技术有离心技术、电泳技术、层析技术、一般生化分离应用技术。

8. 电泳装置主要包括电源和电泳槽两个部分。

9. 电泳槽可以分为水平式和垂直式两类。

10. 影晌电泳分离的主要因素：待分离生物大分子的性质、缓冲液的性质、电场强度和焦耳热、电渗、支持介质的筛孔。

11. 将下列缩写符号译成中文：PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳；IEF等电聚焦；CE 毛细管电泳；IEC离子交换层析；SDS十二烷基磺酸钠。

12. 电泳按支持介质的不同可分为纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳五类。

13. 纸电泳点样方法有干点法和湿点法。

14. 琼脂糖凝胶电泳分为垂直及水平型两种。

15. 聚丙烯酰胺凝胶电泳中常用的催化聚合方法有两种化学聚合和光聚合。

16. pH梯度的组成方式有二种：人工pH梯度和天然pH梯度。

17. CE的优点可概括为三高二少：高灵敏度、高分辨率、高速度、样品少、成本低。

18. 在层析技术中，温度对分辨率的影响，是对分离因子与理论塔板高度的综合效应。

19. 一般来说，分离纯化极性大的分子（带电离子等）采用正相色谱（或正相柱），而分离纯化极性小的有机分子（有机酸、醇、酚等）多采用反相色谱（或反相柱）。

20. 根据固定相基质的形式分类，层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。

21. 根据流动相的形式分类，层析可以分为液相层析和气相层析。

22. 根据分离的原理不同分类，层析主要可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。

23. 在生化实验中，基本上我们都是采用部分收集器来收集分离纯化的样品。

24. 葡聚糖凝胶主要由Pharmacia Biotech生产。常见的有两大类，商品名分别为Sephadex和Sephacryl。

25. 一般的凝胶层析实验可以分为两类：分组分离和分级分离。

26. 纸电泳定量测定的方法有洗脱法和光密度法。

27. 在PAGE中，当T保持恒定，C为4％时，有效孔径最小，C大于或小于4％时，有效孔径变大。

28. PAGE实验中最常用的C是2.6％和3％。

29. 等电聚焦电泳是根据两性物质等电点（pI）的不同而进行分离的。

30. 变性PAGE可分为三类SDS-PAGE、尿素-PAGE和SDS-尿素-PAGE。

31. 在电泳时，当样品pI=pH ，其净电荷数为0，电场中不动；当pI ＞pH，净电荷数为正，电场中向负极移动；当pI ＜pH，净电荷数为负，电场中向正极移动。

32. 英国生物学家Martin和Synge首先提出了色谱塔板理论

42.将下列缩写符号译成中文：Arc丙烯酰胺；Bis甲叉双丙烯酰胺；AP过硫酸

铵；TEMED四甲基乙二胺；PP聚丙烯；PE聚乙烯。

43. 不连续PAGE中不连续系统包括孔径不连续，缓冲系统不连续和pH不连续。

44.层析法的最大特点是分离效率高。

45.柱层析中流动相一般称为洗脱剂，薄层层析时称为展层剂。

46.层析操作中，当Rs=1.5时，两组分基本完全分开，每种组分的纯度可达到

99.8%。

47.柱层析中一般要求柱子装的要均匀，不能分层，柱子中不能有气泡等。

48.柱层析中洗脱的方式可分为简单洗脱、分步洗脱和梯度洗脱三种。

49.凝胶过滤层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质分子的大

小进行分离的一种层析技术。

50.凝胶过滤层析中，一般Kav值在0－1之间，如果Kav值大于1，则表示这

种物质与凝胶有吸附作用。

51.凝胶过滤层析中，对于某一型号的凝胶，在一定的分子量范围内，各个组分

的Kav与其分子量的对数成线性关系。

52.层析用的凝胶颗粒大，流速快，但分离效果差。

53.凝胶的种类很多，常用的凝胶主要有葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖

凝胶以及聚丙烯酰胺和琼脂糖之间的交联物。

54.葡聚糖凝胶中最常见的是Sephadex系列，它是葡聚糖与3－氯－1,2环氧丙

烷（交联剂）相互交联而成，交联度由环氧氯丙烷的百分比控制。

55.Sephacryl是葡聚糖与甲叉双丙烯酰胺交联而成。

56.聚丙烯酰胺和琼脂糖交联凝胶由于含有聚丙烯酰胺，所以有较高分辨率；而

它又含有琼脂糖，这使得它又有较高的机械稳定性。

57.根据与基质共价结合的电荷基团的性质，可以将离子交换剂分为阳离子交换

剂和阴离子交换剂。

58.1937年瑞典Uppsala大学的Tiselius发明了自由界面电泳

59.电泳按其聚丙烯酰胺凝胶的孔径可以通过改变丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺

的浓度来控制，低浓度的凝胶具有较大的孔径

60.分离的原理不同可分为：区带电泳，自由界面电泳，等速电泳，等电聚焦电

泳。

61.SDS它可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结

构，强还原剂 -巯基乙醇可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质的四级结构。

62.PAGE和SDS－PAGE有两种系统，即只有分离胶的连续系统和有浓缩胶与

分离胶的不连续系统。

63.把沉降系数10-13秒称为一个Svedberg单位，简写S。

64.离心操作中，当ρP＞ρm，则S＞0，粒子顺着离心方向沉降。

65.等密度离心法和速率区带离心法合称为密度梯度离心法

66.等密度离心法常用的梯度液是CsCl。

67.分析性超速离心机主要由一个椭圆形的转子、一套真空系统和一套光学系统

所组成。

生化分离技术试题及答案word版本

生化分离技术试题及答案

浙江理工成教院期终考试《生化分离技术》试卷A试卷教学站年级班级学号姓名一、填空题（每空1分，共21分）。 1、生化分离是从生物材料、微生物的发酵液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关生化产品的过程，一般采用如下工艺流程：发酵液→（）→细胞分离→（细胞破碎→细胞碎片分离）→（）→（）→成品加工。 2、提取的产物在细胞内，选用细胞破碎法；在细胞膜附近则可用细胞破碎法；提取的产物与细胞壁或膜相结合时，可选用机械法和化学法相结合的细胞破碎法。 3、发酵液的预处理目的主要包括改变和。 4、典型的工业过滤设备有和。 5、反萃取是将目标产物从转入的过程。 6、超临界流体萃取的溶剂可分为非极性和极性溶剂两种，常用的极性溶剂有和、非极性有。 7、按膜的孔径的大小分类，可将膜分为、、和等。 8、冻干操作过程包括：、和。二、判断题（每题1分，共15分）

1、盐析是指向蛋白质溶液中加入某些浓的中性盐后，使蛋白质凝聚而从溶液中析出，以达到分离、提纯生物大分子的目的。（） 2、常用的盐析剂有葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺、明胶等。（） 3、萃取是利用化合物在两种互不相容的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从一种溶剂内转移到另一种溶剂中，经过反复多次的萃取，将绝大部分化合物提取出来的方法。（） 4、双水相萃取的体系的两相是不含有水分的。（ ) 5、膜分离操作中，所有溶质均被透过液传送到膜表面上，不能完全透过膜的溶质受到膜的截留作用，在膜表面附近浓度升高，这种现象叫做浓差极化。（） 6、凝胶色谱是利用不同生物分子的电离能力不同而达到物质分离目的的。（） 7、离子交换色谱是利用不同分子的大小不同而达到物质分离目的的。（） 8、亲和色谱是利用生物分子之间的亲和力的不同而达到物质分离目的的。（） 9、要增加目的物的溶解度，往往要在目的物的等电点附近进行提取。（） 10、蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进行，因为温度高会增加其溶解度。（）

模拟试题(二)含答案

《中国古建筑史》模拟试题（二）一、选择题（每题1分，共30分） 1．清明上河图所表现的是（c ）城的风貌。Ａ、西汉长安Ｂ、唐长安Ｃ、北宋汴梁Ｄ、明南京 2．《营造法式》是哪个朝代的著作？（c） A汉B唐C宋D清 3.我国砖普遍用于民居砌墙始于哪个朝代？（d） A秦B唐C宋D明 4.下面哪个城市不属于我国七大古都？（d） A杭州B南京C开封D苏州 5．唐长安城位于汉长安城的：（a） A东南B西南C东北D西北 6．按尊卑顺序排列，下列哪组屋顶形式是正确的？（c） A歇山顶、庑殿顶、硬山顶、悬山顶 B庑殿顶、歇山顶、硬山顶、悬山顶 C庑殿顶、歇山顶、悬山顶、硬山顶 D歇山顶、庑殿顶、悬山顶、硬山顶原始社会晚期黄河流域最具代表性的建筑类型是：（b） A干阑式建筑B木骨泥墙房屋C穴居D巢居 9．历代帝王陵墓中“因山为陵”的是：（b） A秦代B唐代C宋代D明代河南洛阳龙门石窟开凿于：（a） A北魏B北周C隋D唐我国用琉璃瓦的历史始于哪个朝代？（a） A南北朝B唐C春秋D西周 13．佛光寺东大殿平面柱网为：（c） A单槽B双槽C金厢斗底槽D分心槽 14．我国已知最早采用榫卯技术构筑房屋的实例是：（c） A浙江余姚河姆渡遗址B西安半坡村遗址C河南偃师二里头宫殿遗址D陕西岐山凤雏村遗址

15．原始社会晚期长江流域最具代表性的建筑类型是：（a） A干阑式建筑B木骨泥墙房屋C穴居D巢居 16．我国已知最早的庭院式建筑是：（b） A西安半坡遗址B陕西岐山凤雏村遗址C河南偃师二里头宫殿遗址D浙江余姚河姆渡村遗址 17．我国已知最早、最严整的四合院实例是：（b） A湖北蕲春建筑遗址B陕西岐山凤雏村遗址C河南偃师二里头宫殿遗址D安阳小屯村殷墟宫殿遗址我国瓦的普遍使用是在哪个时期？（b） A西周B春秋C战国D秦 19．我国砖的使用始于：（a） A西周B春秋C战国D秦 20．著名的河北赵县安济桥的设计人是：（b） A李诚B李春C宇文恺D鲁班 21．《园冶》的作者是：（a） A李诚B李春C计成D苏东坡 22．我国佛教的四大名山是指：（a） A五台山、九华山、峨嵋山、普陀山 B五台山、武当山、峨嵋山、普陀山 C武当山、九华山、峨嵋山、普陀山 D武当山、五台山、峨嵋山、九华山 23.著名的《考工记》成书于：（b） A春秋B西周C战国D商 24．明朝天坛祈年殿三檐颜色为：（d） A全部青色B全部绿色C全部淡蓝色D分别为青、黄、绿三色 26．《园冶》是哪个朝代的著作？（a） A明B唐C宋D清 28．现存甘肃敦煌莫高窟开凿于：（a） A北魏B北周C隋D唐原始社会晚期黄河流域最具代表性的建筑类型是：（b） A干阑式建筑B木骨泥墙房屋C穴居D巢居 30、我国宋代的建筑官书是。（c） A、《木经》 B、《考工记》 C、《营造法式》 D、《工程做法》

安全知识答题及答案

安全知识答题姓名：部门：成绩：一、选择题（每题2分，共30分） 1、《安全生产法》立法的目的是为了加强安全生产监督管理，防止和减少（），保障人民群众生命和财产安全，促进经济发展。 A生产安全事故B火灾、交通事故C重大、特大事故 2、从业人员经过安全教育培训，了解岗位操作规程，但未遵守而造成事故的，行为人应负（）责任，有关负责人应负管理责任。 A领导B管理C直接 3、“三同时”是指劳动保护设施与主体工程同时设计、同时施工、（）。 A同时投产B同时结算C同时检修 4、（）是提高职工安全技术素质的有效措施。 A实践锻炼B加强批评C加强安全教育和培训 5、（）级以上的大风与雷暴雨天，禁止在露天进行悬空作业。 A四B五C六 6、钻探机场地基应平整，坚固，稳定，适用。钻塔底座的填方部分，不得超过塔基面积的（）。 A1/2B1/4C1/3 7、在野外遇上洪水时，应（）过河最为安全。 A利用绳子结伴依次B手挽手依次C独立迅速 8、清除电焊熔渣或多余的金属时，应怎样做才能减少危险（） A清除的方向须靠向身体B佩戴眼罩和手套等个人防护器具 C须开风扇，加强空气流通，减少吸入金属雾气 9、警告标志的含义是提醒人们对周围环境引起注意，以避免可能发生危险的图形标志,其基本外型（）。 A带斜杠的圆形框B圆形边框C正三角形边框 10、三相插头三个字母L、E、N代表什么意思哪种是对的？（） AN火线、E地线、L、零线BL火线、E地线、N零线CE火线、L地线、N地线 11、若皮肤沾上化学品，应（）。 A立即用清水缓缓冲洗患处B立即用布抹干C尽快完成工作后，就医治疗 12、从事一般性高处作业脚上应穿（）。

《生化分离工程》思考题与答案

第一章绪论 1、何为生化分离技术？其主要研究那些容？生化分离技术是指从动植物组织培养液和微生物发酵液中分离、纯化生物产品的过程中所采用的方法和手段的总称。 2、生化分离的一般步骤包括哪些环节及技术？一般说来，生化分离过程主要包括4 个方面：①原料液的预处理和固液分离，常用加热、调PH、凝聚和絮凝等方法；②初步纯化（提取），常用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作；③高度纯化（精制），常选用色谱分离技术；④成品加工，有浓缩、结晶和干燥等技术。 3、生化分离工程有那些特点，及其重要性？特点：1、目的产物在初始物料（发酵液）中的含量低；2、培养液是多组分的混合物，除少量产物外，还有大量的细胞及碎片、其他代物（几百上千种）、培养基成分、无机盐等；3、生化产物的稳定性低，易变质、易失活、易变性，对温度、pH 值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面力等非常敏感；4、对最终产品的质量要求高重要性：生物技术产品一般存在于一个复杂的多相体系中。唯有经过分离和纯化等下游加工过程，才能制得符合使用要求的产品。因此产品的分离纯化是生物技术工业化的必需手段。在生物产品的开发研究中，分离过程的费用占全部研究费用的50 ％以上；在产品的成本构成中，分离与纯化部分占总成本的40～ 80 ％；精细、药用产品的比例更高达70 ～90 ％。显然开发新的分离和纯化工艺是提高经济效益或减少投资的重要途径。

4、生物技术下游工程与上游工程之间是否有联系？它们之间有联系。①生物工程作为一个整体，上游工程和下游工程要相互配合，为了利于目的产物的分离与纯化，上游的工艺设计应尽量为下游的分离纯化创造条件，例如，对于发酵工程产品，在加工过程中如果采用液体培养基，不用酵母膏、玉米浆等有色物质为原料，会使下游加工工程更方便、经济；②通常生物技术上游工程与下游工程相耦合。发酵- 分离耦合过程的优点是可以解除终产物的反馈抑制效应，同时简化产物提取过程，缩短生产周期，收到一举数得的效果。 5、为何生物技术领域中往往出现“丰产不丰收”的现象？第二章预处理、过滤和细胞破碎 1、发酵液预处理的目的是什么？主要有那几种方法？目的：改变发酵液的物理性质，加快悬浮液中固形物沉降的速率；出去大部分可溶性杂质，并尽可能使产物转入便于以后处理的相中（多数是液相），以便于固液分离及后提取工序的顺利进行。方法：①加热法。升高温度可有效降低液体粘度，从而提高过滤速率，常用于粘度随温度变化较大的流体。控制适当温度和受热时间，能使蛋白质凝聚形成较大颗粒，进一步改善发酵液的过滤特性。使用加热法时必须注意加热温度必须控制在不影响目的产物活性的围，对于发酵液，温度过高或时间过长可能造成细胞溶解，胞物质外溢，而增加发酵液的复杂性，影响其后的产物分离与纯化；②调节悬浮液的pH 值，pH 直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷性质，适当调节pH 可以改善其过滤特性；③凝聚和絮凝；④使用惰性助滤剂。

模拟试卷2及答案

模拟试卷二一、选择题（请将正确答案的序号填写在题中的括号中。每题2分，满分30分） 1、在XY平面上，某圆弧圆心为(0，0)，半径为80，如果需要刀具从(80，0)沿该圆弧到达(0，80)，程序指令为（B ）。（A）G02 XO．Y80．I80.0 F300 （B）G03 XO．Y80．I-80．0 F300 （C）G02 X8O.Y0.J80．0 F300 （D）G03 X80．Y0．J-80．0 F300 2、在G00程序段中，（C）值将不起作用。（A）X （B）S （C）F （D）T 3、下列（D ）不适应在加工中心上生产。（A）需要频繁改型的零件（B）多工位和多工序可集中的零件（C）难测量的零件（D）装夹困难的零件 4、数控机床中把脉冲信号转换成机床移动部件运动的组成部分称为（C ）。（A）控制介质（B）数控装置（C）伺服系统（D）机床本体 5、数控机床的旋转轴之一B轴是绕（ B ）旋转的轴。（A）X轴（B）Y轴（C）Z轴（D）W轴 6、使用（B ）可使刀具作短时间的无进给光整加工，常用于车槽、镗平面、锪孔等场合，以提高表面光洁度。（A）G02 （B）G04 （C）G06（D）G00 7、数控机床坐标轴确定的步骤为（C ）。（A）X→Y→Z （B）X→Z→Y （C）Z→X→Y 8、下列（B ）的精度最高。（A）开环伺服系统（B）闭环伺服系统（C）半闭环伺服系统（D）闭环、半闭环系统 9、（B ）命令是有条件停止。（A）G00 （B）M01 （C）M05 （D）M19 10、在CRT/MDI面板的功能键中，用于刀具偏置数设置的键是（B ）。（A）POS （B）OFSET （C）PRGRM （D）SYSTEM 11、精车轮廓时，为保证零件加工面光洁度的一致性，应使用（C ）。（A）G94 （B）G95 （C）G96 （D）G87 12、单段运行功能有效时，（B ）。（A）执行一段加工结束（B）执行一段保持进给（C）连续加工（D）程序校验 13、程序“D01 M98 P1001”的含义是（D ）。（A）调用P1001子程序（B）调用O1001子程序（C）调用P1001子程序，且执行子程序时用01号刀具半径补偿值（D）调用O1001子程序，且执行子程序时用01号刀具半径补偿值 14、执行程序后G98 G81R3 Z-5 F50后，钻孔深度是（A ）。（A）5mm （B）3mm （C）8mm （D）2mm 15、（B ）与虚拟制造技术一起，被称为未来制造业的两大支柱技术。（A）数控技术（B）快速成形法（C）柔性制造系统（D）柔性制造单元二、判断题（请将判断结果填入括号中。正确的填“√”，错误的填“×”。每题2分，满分30分）（）1、机床回零后，显示的机床坐标位置一定为零。（√）2、加工中心具有刀库和刀具交换装置。

2020年国家安全知识竞赛试题及答案

2020年国家安全知识竞赛试题及答案一、问答题 1、扑救电器火灾应首先做什么?答：切断电源。 2、发生火灾拨通“119”后，应向“119”台报告哪些情况? 答：应报告失火部位所在的区县、街道，燃烧的物质，火势大小，所威胁的物质，报警人姓名、单位、电话号码等情况，并派人到路口迎接消防车的到来。 3、.当你发现液化石油气瓶、灶具漏气时应怎么办? 答：(1)、首先关闭气瓶角阀，并开窗通风，使可燃气体散开;(2)、严禁动用电器和一切火源;(3)、立即找液化石油站及时修理或更换。 4、液化石油气钢瓶为什么不能用火烘烤或其他方式加热? 答：液化石油气本是气体，采用增加压力的方法，才变成液体，所以钢瓶内的饱和蒸汽压比一般液体的大，而且随温度的升高，瓶内液体迅速气化，压力更会急剧增加，当超过气瓶的耐压强度时，就有发生爆炸的危险。 5、有一个地方着火后，一个同志扛起泡沫灭火器就跑去救火，他这么做行吗?为什么? 答：不行。因为：当他扛泡沫灭火器后，灭火器筒内的化学药剂发生化学反应生产二氧化碳气体的泡沫，并以一定的压力从喷嘴喷出，这样就达不到灭火的目的。 6、泡沫灭火器不能扑救什么火灾? 答：(1)、不能扑救电器火灾;(2)、不能扑救忌水性物品火灾;(3)、贵重物品、仪表火灾。

因为泡沫中含百分之九十七的水分，因此不能扑救电器火灾(水有导电性)和忌水物质火灾(与忌水性物品连触能燃烧)，和贵重物品、仪表火灾(留有污迹)。 7、怎样使用干粉灭火器? 答：先拔掉保险销，一手握住喷嘴对准火点，另一手压下压把。 8、使用电褥子怎样注意防火? 答：(1)电褥子不能长时间通电，人员离开后必须切断电源;(2)电褥子严禁折叠使用，防止电热丝损坏发生事故;(3)沙发床不宜使用电褥子，而且电褥子开关必须放在不易碰触的地方;(4)电褥子通电后如果产生过热现象，就应停止使用。 9、预防森林火灾的几不准是什么? 答：(1)不准在山林地区上坟烧纸。(2)不准在山林地区烧荒开地，烧茬子，燎地边。(3)不准在山林地区吸烟、动用明火等。 10、烟头为什么会引起火灾? 答：因为烟头虽小，但其表面温度一般在200-300°c，中心温度可达700-800°c左右，一般可燃物(如纸张、棉花、柴草、木材等)的燃点都在130°c-350°c，都低于烟头的温度。所以乱仍烟头很容易发生火灾。 11、我国消防工作贯彻什么样的方针? 答：预防为主、防消结合。 12、对于失火罪，根据《中华人民共和国刑法》的规定，应如何处罚? 答：处3年以上、7年以下有期徒刑。 13、全国消防安全宣传日是哪天? 答：11月9日 14、《中华人民共和国消防法》是某年某月某日施行的?

生化分离技术考试复习题库(含详细答案)

《生化分离》考试复习题库一、选择题 1.下列不是超临界萃取工艺的方法是（）。 A 等温法 B 等压法 C 吸附法 D 交换法 2.影响絮凝效果的因素有很多，但不包括（）。 A 絮凝剂的浓度 B 溶液pH值 C 溶液含氧量 D 搅拌速度和时间 3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱，在化合物分离中，先被洗脱下来的为（）。 A 杂质 B 小分子化合物 C 大分子化合物 D 两者同时下来 4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（）。 A 增大 B 减小 C 先增大，后减小

D 先减小，后增大 5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是（）。 A 增大滤过面积 B 降低料液温度 C 加压或减压 D 加入助滤剂 6.下列方法中，哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法 A 调节等电点 B 降低温度 C 添加表面活性物质 D 添加助滤剂 7.助滤剂应具有以下性质（） A 颗粒均匀、柔软、可压缩 B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩 C 粒度分布广、坚硬、不可压缩 D 颗粒均匀、可压缩、易变形 8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法，不包括（） A 沉淀法 B 变性法 C 吸附法 D 萃取法 9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是（）

A 样品可被分离成一系列的样品组分区带 B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质 C 离心时间越长越好 D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况 10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。以下不属于助滤剂的是（） A 氯化钙 B 纤维素 C 炭粒 D 硅藻土 11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类，下列不属于机械法的是（） A 加入金属螯合剂 B 高压匀浆法 C 超声破碎法 D 珠磨法 12.萃取操作是利用原料液中各组分（）的差异实现分离的操作。 A 溶剂中的溶解度 B 沸点 C 挥发度 D 密度 13.两相溶剂萃取法的原理为：

大学英语模拟题二及答案

2008年4月统考模拟试题二第一部分：交际英语（共10小题；每小题1分，满分10分）此部分共有10个未完成的对话，针对每个对话中未完成的部分有4个选项，请从Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四个选项中选出可以填入空白处的最佳选项，并用铅笔将答题卡上的相应字母涂黑。 1. --Can you turn down the radio, please? -- _________. A. Oh, I know B. I'm sorry, I didn't realize it was that loud C. I'll keep it down next time D. Please forgive me 2. -- Hello, I'd like to speak to Mark, please. -- _________. A. Yes, I'm Mark B. This is Mark speaking C. It's me here D. This is me 3. --Can I give you a hand. It seems pretty heavy. -- _________. A. It's none of your business B. Sorry, I don't know you C. Thanks, I can manage that D. No, it's not heavy 4. --I'd like to make a reservation for two days. My name is Wang Ming-Ming. -- _________. A. Single room or double room B. You're too late for the room C. We don't have any room D. Our hotel is very expensive 5. -- Would you fill in this registration form? _________? -- I don't know how to do that. A. What should I write B. It's too difficult. C. Where is the form D. Would you please help me 6. --Look, would you like to go out tomorrow evening? --________. My parents are coming to see me. A. I'm afraid I can't tomorrow evening B. I don't like to go out with you C. I have no time tomorrow evening D. I won't go out with you 7. --Do you mind turning off the TV? I'm studying for the exam.

消防安全知识问答题库及答案

消防安全知识问答题库及答案消防安全知识问答题库及答案 1、家庭室内装修要注意采取哪些防火措施? 家庭室内装饰要采取以下防火措施：(1)尽量选用不燃或难燃材料进行装饰;(2)要选用燃烧产物、热分解产物毒性少，发烟量少的材料;(3)电器设备和线路设计、安装要符合消防安全要求;(4)室内装饰装修要留出安全通道;(5)建筑内部装饰不应遮挡消防设施，且不应妨碍消防设施的正常使用。 2、公共娱乐场所应采取哪些防火措施? 党和政府十分重视公共娱乐场所消防安全工作，国务院制定了《娱乐场所管理条例》，公安部颁布了《公共娱乐场所消防管理规定》，按照《条例》和《规定》要求，公共娱乐场所应采取如下措施： (1)全面实行消防安全责任制，明确各级人员消防安全职责，建立健全各项消防安全管理制度，经常检查，狠抓落实。 (2)公共娱乐场所应设置在三楼以下建筑物内，建筑耐火等级不宜低于二级。 (3)经核准设置在地下建筑、三楼以上或三级耐火等级建筑的，应当符合特定防火安全要求。 (4)应采用不燃、难燃烧材料进行装修，局部采用可燃材料的，应作防火处理。 (5)电气线路、用电器具应请电工安装，电气应穿管铺设，不得超负荷用电和擅自拉接电线。 (6)安全出口数目、疏散宽度和距离，应符合国家有关建筑设计防火规范的规定。不得设置门槛、台阶，疏散门应向外开启，不得

采用卷帘门、转门、吊门、侧拉门和影响疏散的遮档物，严禁阻塞安全出口和将门上锁。 (7)应设置应急照明和疏散指示标志。 (8)应按国家有关规范规定，安装自动报警和自动灭火设施，配备足够的消防器材。 (9)认真履行建筑消防审核、竣工验收和治安、文化部门的有关审批手续。 (10)严格核定场所人员容量，不得超员。 (11)严禁带入和存放易燃易爆物品。 3、电气火灾原因有哪些? 电气火灾主要有短路、过负荷、接触电阻过大、漏电、电热器使用不当、静电和雷电。 4、点燃的蚊香为什么要注意防火? 蚊香具有很强的阴燃能力，点燃后没有火焰，但能长时间持续燃烧。蚊香燃烧时，中心温度高达700℃，超过了多数可燃物的燃点，一旦接触到可燃物会引起燃烧，甚至扩大成灾。 5、用蜡烛照明为什么要注意防火? 蜡烛作为一种可以移动的火源，稍不当心，就可能烧熔、流淌，或者倒下，遇可燃物容易引起火灾。 6、香烟头为什么能引起火灾? 烟头表面温度为200—300℃，中心温度可达700—800℃，它超过了棉麻、毛织物、纸张、家具等可燃物的燃点，若乱扔烟头接触到这些可燃物，容易引起燃烧，甚至酿成火灾。 7、吸烟在哪些情况下容易引起火灾? (1)躺在床上和沙发上吸烟;(2)在禁止吸烟的地方吸烟;(3)在修理汽车和清洗零件时;(4)乱扔未熄灭的烟点和火柴梗。

生化分离技术复习部分题答案

一、名词解释： 1、梯度洗脱：在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。或者答流动相由几种不同极性的溶剂组成，通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性，使每个流出的组分都有合适的容量因子k'，并使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。（可在离子交换层析中查)。 2、分辨率：是相邻两个峰的分开程度，用相邻两峰对应的洗脱体积之差比上两个半峰宽之和的平均值表示。 3、亲和层析：利用生物分子与其配体间特异性的、可逆性的亲和结合作用而对样品进行分离，配体被固定在载体上，特异性结合经过的与其亲和性的生物分子的一种层析技术。 4、等电聚焦：使电泳的介质中形成一个连续的、稳定并有一定范围的线性pH梯度，电泳时蛋白质等待分离的两性分子可以在这种pH梯度中迁移，直到迁移聚集于与其等电点（pI）相同的区域，从而形成一种分辨率极高的电泳聚焦效应。 5、盐析：增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低，以致使电解质类物质从溶液里沉淀出来的一种作用现象。附资料：它是蛋白质分离纯化中经常使用的方法，最常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠和氯化钠等。 6、保留时间tR：从开始进样至柱出口处被测组分出现浓度最大值时所需的时间,称为保留时间。层析分离技术的一个参数。 7、双向电泳：等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合的电泳方法，即先进行第一向水平电泳——等电聚焦电泳（按照pI分离），然后再进行第二向垂直电泳——SDS-PAGE（按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。 8、密度梯度离心：在呈密度梯度的惰性介质中以一定的离心力进行离心，让各组分会依其密度分布在梯度中与其自身密度相同的液层中的依密度而分离的离心法。附资料：密度梯度可以离心前预先制备(如叠加不同浓度蔗糖、甘油)或在离心中自然形成(如使用氯化铯时)。可用于分析型或制备型的离心分离。通常分为差速区带离心和等密度离心两种方式。二、填空题（要点)： 2、最常用的几种蛋白质的沉淀方法:盐析法(中性盐沉淀)、有机溶剂沉淀、选择性沉淀(热变性沉淀和酸碱变性沉淀)、等电点沉淀、有机聚合物沉淀、聚电解质沉淀法、金属离子沉淀法。 4、细胞破碎的方法：1)物理：高压匀浆法、珠磨法、超声波破碎法、渗透压冲击法；2)化学：外加酶法、酶自溶法、化学试剂法。 5、聚丙烯酰胺凝胶单体：（一些资料）聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE（Polyacrylamide gel electrophoresis）聚丙烯酰氨凝胶电泳，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成，聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有两种：化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵（AP）为催化剂，以四甲基乙二胺（TEMED）为加速剂。在聚合过程中，TEMED催化过硫酸铵产生自由基，后者

模拟试题二及答案

模拟试题二及答案一、（共20分，每小题5分）计算题 1.应用冲激函数的性质，求表示式23()t t dt δ∞-∞ ?的值。解:23()300t t dt δ∞-∞ =?=? 2．判断系统是否为线性时不变系统：()(2)r t e t =。解: 线性时变系统 3．有一LTI 系统，当激励)()(1t u t x =时，响应)(6)(1t u e t y t α-=,试求当激励 ())(23)(2t t tu t x δ+=时，响应)(2t y 的表示式。（假定起始时刻系统无储能）。解: ()()t t u t u t dt -∞?=?， ()()d t u t dx δ= ，该系统为LTI 系统。故在()t u t ?激励下的响应1 26()6()(1)t t t y t e u t dt e ααα ---∞ =?=--? 在()t δ激励下的响应2 2()(6())6()6()t t d y t e u t e u t t dx αααδ--= =-+ 在3()2()tu t t δ+激励下的响应1818 ()12()12()t t y t e e u t t αααδαα --=--+ 4．试绘出时间函数)]1()([--t u t u t 的波形图。

二、（15分，第一问10分，第二问5分）已知某系统的系统函数为2 5 ()56 s H s s s += ++，试求（1）判断该系统的稳定性。（2）该系统为无失真传输系统吗？请写出判断过程。 21255 ()56(2)(3) 2,s s H s s s s s s s ++= = ++++∴=-=-3,位于S复平面的左半平面所以,系统稳定. (2) 由于05 ()()3) jwt j H j Ke j j ωωωω-+= ≠+＋2（，不符合无失真传输的条件，所以该系统不能对输入信号进行无失真传输。三、（10分）已知周期信号f (t )的波形如下图所示，求f (t )的傅里叶变换F (ω)。 f (t )的傅里叶级数为 1j 1()e d t n T F f t t T ω-= ??3 j π2111 2 221()(1)e d 2n t G t G t t --??=--???? ?π sin 41(1)πn n n ??=--? ? 所以()()F F f t ω=????()2π πn n F n δω∞=-∞ =-∑()π sin 421(1)πn n n n n δω∞ =-∞ ??=---? ?∑ 四、（15分）求下列函数的拉普拉斯逆变换。

生化分离考点

生化分离考点 Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】

1.生化分离过程的特点：（1）生物物质的生活活性大多是在生物体内的温和条件下维持并发挥作用的；（2）用作医药、食品和化妆品的生物产物与人类生命息息相关；（3）原料液中常存在与目标分子在结构、构成成分等理化性质上极其相似的分子及异构体，形成用常法难于分离的混合物；（4）原料液中目标产物的浓度一般很低，有时甚至是微量的。 2.分离效率的评价（三个指标）：浓缩程度、分离纯化程度、回收率 3.Stokes 为液体密度式中，d p kg/m3），ρ L 为重力沉降速度（kg/m3），μ（kg/m3），g 为重力加速度（kg/m3），v g 为液体黏度。 L 4.区带分离法：是生化研究中的重要分离手段，根据立新操作条件不同，分为差速区带离心和平衡区带离心，两种区带离心法均事先在离心管中用某种低分子溶质调配好密度梯度，在密度梯度之上加待处理的料液后进行离心操作。 5.离心分离设备：常用的有管式和碟片式两大类。 6.革兰氏阴性和阳性的区别：革兰阳性菌的细胞主要由肽聚糖层组成，而革兰阴性菌的细胞壁在肽聚糖层的外侧还有分别由脂蛋白和脂多糖及磷脂构成的两层外壁层。革兰阳性菌的细胞壁比较厚，约15-50nm，肽聚糖含量占 40%-90%；革兰阴性菌的肽聚糖层约，外壁层约8-10nm。因此，革兰阳性菌的细胞壁比革兰阴性菌坚固，较难破碎。 7.习题：管式离心机的转筒内径为12cm，筒长70cm，转数为15000r/min。设离心机的校正系数为一，利用其浓缩酵母细胞悬浮液，处理能力为min。（1）计算酵母细胞的重力沉降速度；（2）破碎该酵母细胞后，细胞碎片直

安全知识试题及答案

南阳中学安全知识竞赛试卷班级________姓名________得分 _ 试卷说明：本次知识竞赛采用100分制,竞赛时间为45分钟.请同学们认真作答,赛出好成绩一、是非判断题(每题1分,共15分.正确的写"A",错误的写"C".) 1、家里用的一次性打火机不会引起爆炸.( ) 2、小青家电饭锅的内胆坏了,她就用其他的钢精器皿代替,这样做节约能源, 值得大家学习.( ) 3、晓斌在宿舍里经常从一张床上跳到另一张床上,他说这能锻炼身体.( ) 4、安装灯泡是件简单的事情,但我们还是要先切断电源.( ) 5、高楼发生火灾时使用电梯逃生比较快.( ) 6、抽烟是一种时尚,青少年学生不在校时可以适当抽一些.( ) 7、萧军因为在学校的游泳比赛中获得冠军,所以假期他去游泳从不要父母陪伴.他说:"我是冠军,用不着担心的."( ) 8、吸过的烟头直接扔进纸篓,会使纸张燃烧,引起火灾.( ) 9、患有疾病或身体不适时,只要自己注意点,是可以参加紧张剧烈的体育活动的. ( ) 10、只要不影响交通,在道路上是可以使用旱冰鞋滑行的.( ) 11、行人须在人行道上行走,没有人行道的靠马路边上行走.( ) 12、体育运动中,如果安排的不科学,可能会造成运动损伤,如跑步,常会发生踝关节、腰关节扭伤及软组织损伤.( ) 13、运动后不要喝大量白开水,更不应该暴食冷饮,而需要多喝盐开水.( ) 14、一旦人触电后,出现"假死"的现象,应立即打电话,请医生来,旁人不要触碰.( ) 15、如果发生轻微红肿的轻度烫伤,可以用冷水反复冲洗,再涂些清凉油即可.( ) 二、单项选择题.(每题2分,共40分) 1、在运动时不慎扭伤,下列做法不正确的是( ) (A)立即停止运动.(B)马上揉搓患处,缓解疼痛. (C)可以用冷敷或用冷水浸泡. 2、如果在校外有人向你勒索金钱,事后你最应该做什么?( ) (A)尽快告诉爸爸妈妈或老师. (B)不能让任何人知道这件事,免得遭报复. (C) 以后每天带点钱,免得没钱挨打. 3、在火场中,充满了各种各样的危险:烈焰、高温、烟雾、毒气等.下面几种保护措施,哪一条是不正确的?( ) (A)在火场中站立、直行,并大口呼吸. (B)迅速躲避在火场的下风处. (C)用湿毛巾捂住口鼻,必要时匍匐前行. 4、如果你经常外出带着家门的钥匙,下面的哪种做法可能会有危险?( ) (A)把钥匙挂在脖子上.(B)把钥匙放在衣兜里. (C)把钥匙放在随身的包里.

生化分离技术(主要内容)

生化分离技术(主要内容) -标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

生化分离技术：描述回收生物产品分离过程原理和方法的术语，是指从动植物组织培养液或微生物发酵液中分离、纯化生物产品过程中所采用的方法和手段的总称。生化分离过程是生物技术转化为生产力不可缺少的重要环节，其技术进步程度对生物技术的发展有着举足轻重作用，为突出其在生物技术领域中的地位和作用，常称它为生物技术的下游工程。分离纯化过程的难点：目的产物在细胞或反应液中含量不高，杂质种类多，数量大；杂质性质与产物相似；产物稳定性不高。生化分离技术的主要种类：沉淀分离（盐析、有机溶剂沉淀、选择性变性沉淀、非离子聚合物沉淀）；膜分离（透析、微滤、超滤、纳滤、反渗透）；层析分离（吸附、凝胶、离子交换、疏水、反相、亲和层析）；电泳分离（SDS-PAGE、等电聚焦、双向电泳、毛细管电泳）；离心分离（低速、高速、超速离心分离技术），生化分离的特点：成分复杂；含量甚微；易变性/易被破坏；具经验性；均一性的相对性。预处理需注意的条件：⑴温度尽可能低⑵提取液的量要保证“充分浸入”⑶加入足量酚类吸附剂⑷加入足量氧化酶抑制剂⑸搅拌转速要恰当⑹ pH控制在合适范围，一般5.5～7

细胞的破碎：用一定方法（机械/物理/化学/酶法）打开细胞壁或膜，使细胞内含物有效释放出来。挤压：微生物细胞在高压下通过一个狭窄的孔道高速冲出，因突然减压而引起一种空穴效应，使细胞破碎。沉淀：溶液中溶质由液相变成固相析出的过程。本质：通过改变条件使胶粒发生聚结，降低其在液相中的溶解度，增加固相中的分配率。作用：分离、澄清、浓缩、保存盐溶：低浓度中性盐离子对蛋白质分子表面极性基团及水活度的影响，增加蛋白质与溶剂相互作用力，使其溶解度增大。盐析：中性盐浓度增至一定时，水分子定向排列，活度大大减少，蛋白质表面电荷被中和，水膜被破坏，从而聚集沉淀。有机溶剂沉淀法：使溶液的介电常数大大降低，从而增加带电粒子自身之间的作用力，易聚集沉淀；争夺酶、蛋白质等物质表面的水分子，破坏水化层，使分子易碰聚产生沉淀。沉淀条件讨论：1. 温度；2. pH ；3. 浓度；4. 离子强度；5. 有机溶剂的选择；6. 多价阳离子的影响；7. 溶剂用量膜分离或膜过滤定义：用天然或人工合成高分子薄膜，以外界能量或化学位差为推动力，对两个或两个以上组分的溶质和溶剂进行分离、提纯和富集的方法。膜：两相之间的一个不连续区间，是隔开两种流体的一个薄的阻挡层。膜分离的特点：过程为常温过程；不发生相变；密闭系统中进行；产品不受污染；选择性好；适应性强；实现自动化操作。项目膜类型操作压力分离机理适用范围技术特点不足之处微滤(MF) 对称微孔膜 0.02～10μm 0.01 MPa～ 0.2 MPa 颗粒大小、形状含微粒或菌体溶液的分离操作简便，通水量大，工作压力低，制水率高。有机污染物的分离效果较差。超滤(UF) 不对称微孔膜 0.001～0.1μm 0.1 MPa～ 0.5 MPa 颗粒大小、形状有机物或微生物溶液的分离与微滤技术相似。与微滤技术相似。纳滤(NF) 带皮层不对称复合膜1～50 nm 0.5 MPa～ 2.5 MPa 优先吸附、表面电位硬水或有机物溶液的脱盐可对原水进行部分脱盐和软化，生产优质饮用水。常需预处理，工作压力较高。反渗透(RO) 带皮层不对称复合膜＜1 nm 1.0 MPa～ 10 MPa 优先吸附、溶解扩散海水或苦咸水的淡化几乎可去除水中一切杂质，包括悬浮物、胶体、有机物、盐、微生物等。工作压力高；制水率低；能耗大。按膜断面的物理形态：表面活性层（ 0.1~1μm，分离作用，其孔径和性质决定膜的分离特性，厚度决定传质速度）；多孔支撑层（100~200μm，机械支撑作用，对分离特性和传质速度影响很小）表征膜性能的参数：孔的性质；水通量；耐压能力；pH适用范围；对热和溶剂的稳定性；截留分子量分布膜的劣化：膜本身不可逆转的质量变化（化学性：水解、氧化；物理性：固结、干燥；生物性：微生物代谢产物）。污染膜是否清洗的判据：进出口压力降；透水量或透水质量；定时清洗。污染膜的常用清洗方法：机械方法；加起溶解作用的物质；加起氧化作用的物质；加起渗透作用的物质；切断离子结合作用。浓差极化：指外源压力迫使分子量较小的溶质通过薄膜，而大分子被截留于膜表面，并逐渐形成浓度梯度的现象。

2018年高考语文模拟试题(卷)二(附答案解析)

一、现代文阅读（35分）（一）论述类文本阅读（本题共3小题，9分）阅读下面的文字，完成1～3题。在人类文学艺术的宝库里，喜剧艺术的重要性不言而喻。俄国思想家巴赫金就说过：“一切真正伟大的东西，都应包含有笑的因素。” 当前，喜剧文化日益成为中国审美文化的重要形态。电视娱乐化浪潮此起彼伏；喜剧电影日趋繁荣；在戏剧演出市场，喜剧颇受观众青睐。各种形式、各种风格的喜剧艺术奏响了这个时代的喜剧大合唱。不过，当下的喜剧发展也是问题丛生。各种搞笑、逗乐、嬉闹，都被视为喜剧，将喜剧等同于娱乐，喜剧成了一个容纳所有娱乐形式的大箩筐，搞笑的东西都往里装。当今时代，喜剧的处境非常尴尬，有些所谓“喜剧”，实际是闹剧而已，甚至为了逗乐而陷入低俗娱乐。喜剧被扭曲、被矮化，喜剧因戴上了名缰利锁而失魂。何谓喜剧之魂？乐观自信、理性超脱、自由狂欢的喜剧精神乃是喜剧之魂。伟大的喜剧艺术作品一定是喜剧精神高扬的作品。以戏剧为例，中外戏剧史上，真正优秀的戏剧作品，要么悲剧精神强烈，要么喜剧精神鲜明。而优秀的正剧也并非悲喜调和、不悲不喜，而是悲喜交融、有喜有悲。而当代不少所谓的“喜剧”作品，则多是不喜不悲、平淡寡味的平庸之作。数年前，哲学家俞吾金曾断言，一个“以喜剧美学为主导性审美原则的时代已经悄然来临”。当今时代，人们需要通过喜剧的笑声来稀释沉重、抵抗孤独、化解焦虑。喜剧是嘲讽愚陋、抨击邪恶、褒美贬丑、祛邪扶正的艺术。喜剧就是vx理性的精神、敏锐的眼光、智慧的头脑、批判的视角审视纷繁复杂的现实人生，让人对自己的存在及其周围的环境保持清醒的认识，能够以“轻松、幽默和爽朗”的乐观态度面对生活的种种考验。一部喜剧艺术史证明，那些贴近现实人生、针砭时弊、鞭挞邪恶、追求真理、充分高扬起喜剧精神的作品，才是老百姓乐于接受的。可是，多年来，已经很难看到这种精·心构思、发人深思的喜剧作品了。有追隶轻松效果、浅薄庸俗的滑稽楚剧，却缺少从心灵深处汲取的智慧；有对历史的随意篡改和戏说，却失去了对是非善恶的判断力和追求正义与真理的勇气。有“巨无霸”式的大制作，却没有灵魂的大震撼。当代的喜剧精神内涵容易被“一种肤浅的现世观念和欲望的快乐原则所取代”。如果将喜剧等同于平庸浅薄的逗乐、搞笑，那将是喜剧的矮化和异化，是喜剧的悲剧。真正的喜剧是理性和智慧的产物。伟大的喜剧作家，不仅才华横溢，而且胆识超群，他正视现实、敢说

小学生安全知识竞赛试题及答案

小学生安全知识竞赛试题及答案一、选择题 1．未满＿＿＿的儿童，不能像大人一样到马路上骑自行车。因为马路上车很多，容易出危险。 A．10岁 B．11岁√ C．12岁 2．骑自行车时，千万不要与＿＿＿抢道；不要双手撒把骑车。 √A．机动车 B．自行车 C．行人 3．火车运行途中，不要把＿＿＿的任何部分伸到车窗外，也不要乱走动，以免碰伤，烫伤。√A．身体 B．物品 C．食品 4．地铁到站或启动时要留意听清＿＿＿，以免造成提前下车或过站。 A．别人说话 B．收音机√C．广播 5．船在水上航行，受＿＿＿条件影响较大。 A．身体 B．健康√C．气候 6．电器起火时，要先＿＿＿。 A打家里电话报警√B切断电源 C用灭火器灭火 7．放烟花爆竹应该在哪里放？ A人多的地方√B堆放着易燃物处 C 草地上 8．衣服着火时，需＿＿＿。 A 扑在地上打滚√ B 用手拍身上的火 9. 当油起火时，应用＿＿＿。 √A 泡沫灭火器 B干粉灭火器 C 1211灭火器 10. 点蚊香要在＿＿＿的地方点。 A 窗口 B桌子上√C 空地上 11．足球比赛时＿＿＿ . A．穿带铁钉的足球鞋√B.穿普通的足球鞋 12．上体育课时，要穿＿＿＿ . √A. 运动服 B. 礼服 13．上体育课时，＿＿＿ . A. 可带别针、小刀等金属硬物√ B.不带与体育课无关的物品 14．初学游泳的人＿＿＿ . √A. 应准备一些防护用品 B. 可直接下水游泳 15．在单杠、双杠练习时，周围应摆放＿＿＿ .

√A. 海绵垫 B. 纸张 16．要饮用＿＿＿水。 √A、优质 B、自来 C、白开 D、泉 17．冷饮有＿＿＿作用。 A、生病√ B、消暑 C、润喉 D、凉爽 18．食物中毒是＿＿＿。 √A、非常危险 B、一般危险 C、没什么大不了 D、很可怕 19．平时要注意＿＿＿的意识。 √A、自我保护 B、中毒 C、眼睛 D、身体 20．放置时间＿＿＿的食品，不能吃。 A、不久√ B、过久 C、短 21．郊游乘搭交通工具时，应该 A、一拥而上 B、不着急，慢慢来 C、随便上哪个都行√ D、按计划讲次序动作快 22．火灾发生时应马上＿＿＿。 √A 沿防火通道朝楼下跑 B 乘电梯逃走 C跳下窗23．郊游一般安排在什么季节较好？ √A、春季 B、夏季√C、秋季 D、冬季 24．在参观生产场所时，应该 A、东摸西看 B、跟同学追打玩耍 C、不感兴趣一走了之√ D、按指示参观和操作 25．参观游览时，应该 A．随心所欲自由行动 B、好看就自己慢慢看 √C、按计划服从指挥 D、独来独往 26．千万不要到去玩耍。 A、沙滩√ B、建筑工地 C、乐园 27．在外面不能吃给的东西。 √A、陌生人 B、家人 28．千万不要被宠物，不然很危险！ √A、抓伤 B、舔 29．爬高是非常危险的，一不小心就会跌伤。 A、脚趾√ B、大脑 30．千万不要到建筑施工场地去玩，那里暗藏着许多。 A、游戏 B、宝藏√ C、危险