现代色谱分析05章在线测试

《现代色谱分析》第05章在线测试

A B

C D

系统好坏的参数是（

A B

C D

TLC板上色斑位置的数值是（

A B

C D

中点样基线距边距离为（

A B

C D 、在薄层板上展开时，常见的现象是（

A B

C D

D、样品移行距离增加，但小于2倍

E、样品移行距离增加，但大于2倍

2、薄层色谱常用的通用型显色剂有：（）

A、碘

B、茚三酮

C、荧光黄溶液

D、硫酸溶液

E、三氯化铁-铁氰化钾试剂

3、下列哪些说法是正确的？（）

A、两组分的分配系数之比为1:2时，在同一薄层板上，它们R f 值之比为2:1

B、两组分的分配系数之比为1:2时，在同一薄层板上，它们容量因子之比也是2:1

C、两组分容量因子之比为1:2时，在同薄层板上，它们R f 值之比为3:2

D、薄层色谱的R f 值，即为样品在展开剂中停留时间的分数

4、薄层定量方法有（）

A、直接法

B、洗脱法

C、目视比色法

D、薄层扫描法

5、影响薄层扫描定量的因素是（）

A、吸附剂性能

B、薄层板质量

C、点样技术

D、显色

第三题、判断题（每题1分，5道题共5分）

正确错误

、分离亲脂性化合物常选择氧化铝、硅胶及聚酰胺为固定相（

正确错误值较小，则应加入适量极性小的溶剂（

正确错误

、展开剂中比例较小的溶剂，极性较大，对被分离物有较强的洗脱能力，称极性调节剂（正确错误

、化学键合相硅胶的烷基化程度越高，越有利于极性化合物的分离（）

正确错误

高效液相色谱实验报告

高效液相色谱实验报告 一、实验目的 1了解液相色谱的发展历史及最新进展 2 学习液相色谱的基本构造及原理 3 掌握液相色谱的操作方法和分析方法，能够通过HPLC分离测定来对目标化合物的分析鉴定。 二、实验原理 液相色谱法采用液体作为流动相，利用物质在两相中的吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的。当两相做相对移动时，被测物质在两相之间进行反复多次的质量交换，使溶质间微小的性质差异产生放大的效果，达到分离分析和测定的目的。液相色谱与气相色谱相比，最大的优点是可以分离不可挥发而具有一定溶解性的物质或受热后不稳定的物质，这类物质在已知化合物中占有相当大的比例，这也确定了液相色谱在应用领域中的地位。 高效液相色谱可分析低分子量、低沸点的有机化合物，更多适用于分析中、高分子量、高沸点及热稳定性差的有机化合物。80%的有机化合物都可以用高效液相色谱分析，目前以已经广泛应用于生物工程、制药工程、食品工业、环境检测、石油化工等行业。 三、高效液相色谱的分类 吸附色谱法、分配色谱法、空间排阻色谱法、离子交换色谱法、亲和色谱法、化学键合相色谱法 四、高效液相色谱仪的基本构造 高效液相色谱至少包括输液系统、进样器、分离柱、检测器和数据处理系统等几部分。 1 输液系统： 包括贮液及脱气装置、高压输液泵和梯度洗脱装置。贮液装置用于存贮足够量、符合HPLC要求的流动相。高效液相色谱柱填料颗粒比较小，通过柱子的流动相受到的流动阻力很大，因此需要高压泵输送流动相。 2 进样系统： 将待测的样品引入到色谱柱的装置。液相色谱进样装置需要满足重复性好、死体积小、保证柱中心进样、进样时引起的流量波动小、便于实现自动化等多项要求。进样系统包括取样、进样两项功能。 3 分离柱： 色谱柱是色谱仪的心脏、柱效高、选择性好、分析速度快是对色谱柱的一般要求。商品化的HPLC微粒填料，如硅胶和以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）等的粒度通常在3μm、5μm、7μm、以及10μm。采用的固定相粒度甚至可以达到1μm，而制备色谱所采用的固定相粒度通常大于10μm。HPLC填充柱效的理论值可以达到50000/m～160000/m理论板，一般采用100-300mm的柱长可满足大多数样品的分析的需要。由于柱效内、外多种因素的影响，因此为使色谱柱达到其应有的效率。应尽量的减小系统的死体积。 4 检测系统： HPLC检测器分为通用型检测器和专用型检测器两类。通用型检测器可连续测量色谱柱流出物（包括流动相和样品组分）的全部特性变化。这类检测仪器包括示差折光检测器、介

高效液相色谱(HPLC)法测定邻苯二甲酸酯

实验七高效液相色谱(HPLC)法测定邻苯二甲酸酯 一.实验目的 1、学习高效液相色谱仪的基本操作方法。 2、了解高效液相色谱仪原理和条件设定方法。 3、了解高效液相色谱法在日常分析中的应用。 二.实验原理 高效液相色谱法是以液体作为流动相，借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高分离速度、并采用颗粒极细的高效固定相制成的色谱柱进行分离和分析的一种色谱方法。 在高效液相色谱中，若采用非极性固定相，如十八烷基键合相，极性流动相，即构成反相色谱分离系统。反之，则称为正相色谱分离系统。反相色谱系统所使用的流动相成本较低，应用也更为广泛。 定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度（R）的计算公式为： R＝ 2[t (R2)-t (R1) ] /1.7*(W 1 ＋W 2 ) 式中 t (R2)为相邻两峰中后一峰的保留时间； t (R1) 为相邻两峰中前一峰的保留 时间； W 1及W 2 为此相邻两峰的半峰宽。除另外有规定外，分离度应大于1.5。 本实验对象为邻苯二甲酸酯，又称酞酸酯，缩写PAE，常被用作塑料增塑剂。它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品，如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液等数百种产品中。但研究表明，邻苯二甲酸酯在人体和动物体内发挥着类似雌性激素的作用，是一类内分泌干扰物。待测物性质见表1。 表1色谱柱测试条件 如果要检测不同条件对谱图分离的影响，可按表1配制几种物质的混合溶液，在不同条件下进行HPLC分离检测。

三.仪器与试剂 1、仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪，50ul微量注射器。 2、试剂 甲醇（色谱专用），高纯水 四.实验步骤 1、色谱条件 色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶（C8） 柱温：室温 流动相：初始为高纯水：30％，甲醇：70％ 检测器：DAD检测器; 检测波长：220nm； 进样体积：100μl定量环，实际注射每次可控制在200μl。 2、待测溶液的配制 首先用甲醇做溶剂配制储备液：邻苯二甲酸二甲酯（0.3880g/L），邻苯二甲酸二乙酯（0.2770g/L），邻苯二甲酸二丁酯（0.3776g/L）。然后各取1mL储备液用水和甲醇（20：80）稀释至10mL，作为待测溶液。 3、色谱测定 (1) 按操作规程开启电脑，开启脱气机、泵、检测器等的电源，启动Agilent 1100在线工作软件，设定操作条件。流量为1.000ml/min。 (2) 待仪器稳定后，开始进样。将进样阀柄置于“LOAD”位置，用微量注射器吸取混合物溶液50ul，注入仪器进样口，顺时针方向扳动进样阀至“INJECT”位置，此时显示屏显示进样标志。 (3) 记下各组分色谱峰的保留时间及峰面积及分离比。 (4) 实验完毕，清洗系统及色谱柱。依次用甲醇-水（60：40）、甲醇-水（70：30）……直到纯甲醇作流动相清洗，每次清洗至基线走稳，至少清洗15min。 五.实验结果

实验5 高效液相色谱应用实验

实验5高效液相色谱应用实验 一、实验目的 1、熟悉高效液相色谱分离分析的原理。 2、掌握根据保留值，用已知纯物质对照定性的分析方法。 3、掌握用归一化法定量测定混合物各组分的含量。 4、掌握用微量进样器进样的基本操作和色谱软件的一般操作。 二、方法原理 高效液相色谱法是一种重要的色谱分离技术。根据所用固定相和分离机理的不同，一般将高效液相色谱法分为分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱等。 在分配色谱中，组分在色谱柱上的保留程度取决于它们在固定相和流动相之间的分配系数K： 组分在固定相中的浓度 K= ———————————— 组分在流动相中的浓度 显然，K值越大，组分在固定相上的保留时间越长固定相与流动相之间的极性差值也越大。因此，出现了流动相为非极性而固定相为极性物质的正相色谱法和流动相为极性而固定相为非极性的反相色谱法。目前应用最广的固定相是通过化学反应的方法将固定液键合到硅胶表面上，即所谓的键合固定相。若将正构烷烃等非极性物质（如n-C18烷）键合到硅胶基质上，以极性溶剂（如甲醇和水）为流动相，则可分离常用的有机化合物。 三、仪器与试剂 高效液相色谱仪、紫外（254nm）检测器、色谱柱C18柱（250mm×4.6mm）、注射器（25μL） 流动相甲醇+ 水（使用前应超声波脱气）、甲苯、苯甲醇、苯甲酸（均为分析纯）、未知混合样品（甲苯、苯甲醇、苯甲酸的混合溶液） 四、实验步骤 1. 以流动相为溶剂，配制甲苯、苯甲醇、苯甲酸的标准溶液，浓度均为10mg/mL。 2. 在老师的指导下开启液相色谱仪，设定操作条件。 3. 待仪器稳定后，分别用注射器进甲苯、苯甲醇、苯甲酸溶液各5μL，进样的同时，要作好记录保留时间。 4. 进未知混合样品5μL，记下各组分色谱峰的保留时间。 5. 以标准物的保留时间为基准，给未知样品各组分定性。 6. 根据标准物的峰面积，估算未知样品中相应组分的含量。

HPLC实验高效液相色谱分析实验

仪器分析实验报告实验名称：高效液相色谱分析实验

一、实验目的 1. 了解HPLC的结构，了解仪器的开、关程序。 2. 了解流动相的制备和样品溶液的制备。 3. 知道仪器的运行程序和进行样品分析。 二、仪器和试剂 仪器：美国安捷伦1200型HPLC、10μL的微量注射器 试剂：磷酸乙腈溶液(PH=3)、重蒸水、邻氯苯甲酸 三、实验步骤 1.流动相的准备 流动相只有一组：PH=3的磷酸乙腈溶液，进过脱气，用蠕动泵输送。2.开机，色谱柱平衡 当1完成后，开机，待色谱柱平衡。 3.样品溶液的准备 配置好邻氯苯甲酸溶液，按要求选好滤纸的孔径大小。用低压过滤装置过滤，由于美国安捷伦1200型HPLC配有脱气装置，因此滤液无需事先脱气就可以进行分析。 4.基线的查看 由于仪器内部压力的变化可以引起基线的不断波动，因此，需等待压力稳定后，基线平稳才能进行进样。 5.样品进样分析

用10μL的微量注射器取5μL的邻氯苯甲酸，微量注射器中不能有气泡，将微量注射器的针头插入到注射的孔时，打开微量注射阀，将邻氯苯甲酸注射进去后，迅速关闭阀门，抽出针头，等待仪器的分析结果。 6.色谱柱的清洗 分析工作结束后，要清洗进样阀中的残留样品，也要用适当的液体来清洗色谱柱。 7.关机 实验完毕后，关闭仪器和电脑。 四、实验数据及处理 1.LC参数 2.色谱柱参数 3.四元泵状态 A：0.0％流速：1.000ml/min B：0.0％压力：91bar C：0.0％ D：0.0％

5.色谱分析谱图见附页，经过注射5μL的邻氯苯甲酸，得到三组实验色谱图， 根据谱图列表数据如下： 色谱柱长(L)、理论塔板高度(H)与理论塔板数(n)三者的关系为： n = L / H 理论塔板数和色谱参数之间的关系为： n = 16 ( t R / W b ) 2 = 5.54 ( t R / Y1/2 ) 2 则取第五组数据计算得： t R=2.437 min = 146.22s Y1/2 = 2.354(0.1375min / 4 ) = 4.855125 s n = 5.54 ( t R / Y1/2 ) 2 =5025 (块)

《现代色谱分析》第02章在线测试(满分)

《现代色谱分析》第02章在线测试（满分） 《现代色谱分析》第02章在线测试剩余时间：57:28 答题须知：1、本卷满分20分。 2、答完题后，请一定要单击下面的“交卷”按钮交卷，否则无法记录本试卷的成绩。 3、在交卷之前，不要刷新本网页，否则你的答题结果将会被清空。 恭喜，交卷操作成功完成！你本次进行的《现代色谱分析》第02章在线测试的得分为20分（满分20分），本次成绩已入库。若对成绩不满意，可重新再测，取最高分。 测试结果如下： ? 1.1 [单选] [对] 纸色谱法与薄层色谱法常用正丁醇-醋酸-水（4:1:5，V/V）作为展开剂，正确的操作方法是：（）? 1.2 [单选] [对] 理论塔板数增加一倍，分离度增加的倍数是（） ? 1.3 [单选] [对] 以硅胶为固定相的薄层色谱按作用机制属于（） ? 1.4 [单选] [对] 色谱系统的分离度应为（） ? 1.5 [单选] [对] 描述组分在流动相与固定相间的“平衡”关系的参数是（） ? 2.1 [多选] [对] 衡量区域宽度的方法有（） ? 2.2 [多选] [对] 不正常的色谱峰有（） ? 2.3 [多选] [对] 塔片理论在解释色谱流出曲线上较成功的是（） ? 2.4 [多选] [对] 影响分离度R的因素有（） ? 2.5 [多选] [对] 可增加相对保留值的参数是（） ? 3.1 [判断] [对] 描述相邻两组分分离好坏的指标可用分离度表示（） ? 3.2 [判断] [对] 反映色谱柱柱型特性的参数是保留值（） ? 3.3 [判断] [对] 对某一组分来说，在一定柱长下，色谱峰的宽或窄主要决定于组分在色谱柱中的分配比（）? 3.4 [判断] [对] fs＜0.95为拖尾峰（） ? 3.5 [判断] [对] n影响峰的宽窄（） 第一题、单项选择题（每题1分，5道题共5分） 1、纸色谱法与薄层色谱法常用正丁醇-醋酸-水（4:1:5，V/V）作为展开剂，正确的操作方法是：（B ） A、三种溶剂混合后直接用作展开剂 B、三种溶剂混合、静置分层后，取上层作展开剂 C、三种溶剂混合、静置分层后，取下层作展开剂 D、依次用三种溶剂作展开剂 2、理论塔板数增加一倍，分离度增加的倍数是（B ） A、1 B、1.4 C、1.5 D、2 3、以硅胶为固定相的薄层色谱按作用机制属于（A ） A、吸附色谱 B、离子交换色谱 C、分子排阻色谱 D、亲合色谱

高效液相色谱仿真实验

高效液相色谱仿真实验 一、实验概述： 以液体做流动相的色谱称为液相色谱。人们把已经比较成熟的气相色谱理论应用于液相 色谱，使液相色谱得到了迅速的发展。随着其他科学技术的发展，出现了新型的高压输液泵、 高效的固定相和柱填充技术、高灵敏度的检测器，加上计算机的应用，使得液相色谱实现了 高效率和高速度。这种分离效率高、分析速度快的液相色谱称为高效液相色谱（High performanee liquid chromatography, HPLC ）。 二、实验装置： Agilent（安捷伦）1100系列液相色谱系统简介： Agile nt1100 系列HPLC组件和系统，将Agile nt长期的化学分析经验与领先的计算机技术结合，把网络技术引入了实验室。从1996年以来，在全球已经安装了超过130,000台1100组件和55,000多套化学工作站数据处理系统，成为目前单一型号市场占有率最高的液 相色谱系统。 本仿真软件是模拟用Agile nt化学工作站的数据处理系统进行样品分析和数据采集（色谱图）的过程。 注：本软件只是模拟分析的过程和内容，并不涉及其原理，所以实验中的参数调节对结果并 没有影响，而真实实验结果是随参数的变化而变化的，这一点需要特别注意！ 实验主界面:

3 刮创制画宣 ■ I ； 1 I ■ ■ I ' rill ■■ IB III I I I 1 I 稠环芳S.VXE 回醇和醞的分折 J 监 &］窑无醉的仔高“貂 割有机绥的分离,T 胳 丈件名⑧:|稠环芳咗.孤￡ 文件类型 ①：卜站仿宣实验丈祥 2.1狐） 三］ 厂以貝读方式打开? 用鼠标左键点中你要做的实验，此文件名会出现在对话框的“文件名” 一栏的文本框 中，在此实验文件上面双击左键或者点击“打开”按钮打开实验文件。 三、实验操作： 第一步：选取实验 点击主菜单上的“实验选取”，会出现如下的对话框: 取消| 化学工作站界面:

色谱分析试题及答案

色谱试题及答案 一、填空（每题2分） 1气相色谱分析是一种分离分析方法，它的特点是适合于多组分混合物的定性和定量分析。 2气相色谱定性法：是利用同一种物质在相同条件之下，在一根色谱柱上保留时间相同。 3在实验条件恒定时，峰面积或峰高与组分的含量成正比，因此可以利用峰面积或峰高来进行定量。 4色谱柱是气相色谱法的核心部分，许多组成复杂的样品，其分离过程都是在色谱柱内进行的，色谱柱分为两类：填充柱和毛细管柱。 5色谱柱老化的方法由固定液的性质而定，老化的最高温度应低于固定液的最高使用温度20~30℃，但要高于实际工作温度。 6装柱老化时，应将柱的入口端与色谱仪的气化室相连接（柱不能接反，否则固定相将在柱中移动，使柱效发生变化）。开始老化时出口不得接检测器，以免流出物沾污检测器。 7 色谱分析各组分保留时间变短和分离变坏，说明柱子失效，原因来自样品和载气的污染。活化的方法是提高柱温，增加载气流速，让色谱柱内污染物流出。 8 载气纯度不符合要求时，会使基线不稳，噪声大。 9 氢气表和氢气钢瓶嘴是反扣螺纹，逆时针方向松开；而氮气表和氮气瓶嘴及其他气体的瓶嘴都是正扣螺纹。 10气相色谱定量方法有归一化法、内标法、外标法等方法。

二、判断（每题2分） 1 色谱柱没装上色谱仪之前，两端必须封口，防止和空气接触。柱 子存放期间，应避免剧烈振动、碰撞或弯曲。 2 气相色谱仪使用的各种气体压力为0.2～0.5Mpa。因此需要通过 减压表使钢瓶气源的输出压力下降。 3 减压表一般分为氢气表和氮气表（氧气表）两种。氮气表可以安 装在除了氢、乙炔和其他燃气瓶以外的各种气瓶上。 4 使用钢瓶气时，打开钢瓶阀，再把T形阀杆从全开调到需要的压 力。 5 气相色谱仪的气路要认真仔细检漏。用氢气作载气时，氢气若从 接口漏进柱恒温箱，可能发生爆炸事故。最常用的检漏方法是皂膜检漏法 6 色谱仪开机:打开主机电源，接通载气，开电脑，设置仪器参数。 7 设置所需柱箱温度、进样口温度和检测器温度（FID），检测器的 温度应高于150℃，否则点火后造成检测器内积水而影响基线的稳定性）。 8 打开空气、氢气阀门，分别调节两路气体流量（由流量计显示） 为适当值。操作中气体流速一般控制的比例为：氮气：氢气：空气=1：1：3。 9 测定液化气中硫化氢时，要带防尘面具，残气排放在通风橱内。 10 气体发生器内的水多些少些没太大关系，只要工作就行，硅胶变 红还可用。 二简答（每题10分） 1 简述气相色谱工作原理 利用试样中各组份在气相和固定液液相间的分配系数不同，当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组份就在其中的两相间进行反复多次分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同，因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分

高效液相色谱定量分析分析实验

高效液相色谱定量分析实验 一、实验目的 ⑴进一步熟悉HPLC仪器的基本构造及工作原理，熟悉HPLC的基本操作； ⑵了解色谱定量操作的主要方法以及各自特点； ⑶学习未知样品中甲苯的定量分析方法。 二、实验原理 ⑴校正因子： （1）绝对校正因子；（2）相对校正因子。 ⑵常见的色谱定量分析方法主要有： （1）归一化法。特点：简单、方便、准确，但要求所有组分必须全部出峰。 （2）内标法。特点：使用相对校正因子定量，结果准确，但操作繁琐，由于需要增加内标物，增大分离的难度。 （3）标准曲线法（外标法）。简单、方便，由于采用绝对校正因子定量，结果受到操作技术因素以及具体色谱条件影响较大。 （4）内标标准曲线法。 三、仪器与试剂 LC-1000型高效液相色谱仪、甲醇(色谱纯)、二次去离子水、甲苯、系列甲苯标准溶液、平头微量注射器（100 l）、待测溶液 四、LC-1000型高效液相色谱仪操作步骤 ⑴流动相的预处理 用甲醇和二次去离子水配成500 mL (V/V=90:10)的甲醇溶液，用0.45μm 有机滤膜过滤，超声波清洗器脱气10～20 min，装入流动相贮液瓶。 ⑵高效液相色谱仪操作 （1）依次打开高压输液泵、紫外检测器电源开关 （2）打开色谱N2000在线工作站，选择通道，建立运行方法。 （3）打开三通阀(逆时针半圈)，按“Purge”排除流路中的气泡。排气完毕后，按“Stop” 键，停泵，关闭三通阀。按“Flow”设置流速1.0 mL/min，“Enter”确认。 （4）按“设定”键，检测波长254 nm。按“↓”键，输入“1”，开启氘灯。 （5）按“Run”键，启动输液泵。 （6）检查基线，零点校正，待基线稳定后，用平头微量注射器取试液20 μL，将进样阀柄置于“Load”位置时注入样品，转动阀柄至“Inject”位置，同时点击软件“采集数据”。注意！平头微量注射器用甲醇清洗3次后，再用试液清洗3次，避免气泡。 （7）待所有色谱峰流出完毕后，按“停止采集”键，保存数据并在N2000离线工作站处理数据，记录组分的峰面积。 注意！注射器进不同样品前，使用专用清洗注射器在进样阀的“Load”和“Inject”位置，用流动相清洗2～3次。 (4) 结束工作：所有样品分析完毕后，流动相继续流动10～20 min，至基线稳定。关闭检测器，按“Stop”停泵。关闭泵电源。 五、实验内容 ⑴分别采集系列甲苯溶液以及未知试样的色谱图，根据保留时间定性，确定甲苯组分峰的位置，并测定各自的峰面积。 ⑵根据实验数据，利用外标法绘制标准工作曲线，并计算待测溶液中甲苯的含量。

郑大远程教育现代色谱分析在线练习参考答案

郑大远程教育《现代色谱分析》在线练习参考答案 你当前正在学习《现代色谱分析》课程01版，本课程共4学分，分6个教学章。考试形式：撰写论文；考试级别：远程教育学院。 本课程你已通过考试，并取得了学分。成绩是：89 《现代色谱分析》第01章在线测试的得分为 20分 恭喜，交卷操作成功完成！你本次进行的《现代色谱分析》第01章在线测试的得分为20分（满分2 0分），本次成绩已入库。若对成绩不满意，可重新再测，取最高分。 测试结果如下： ? 1.1 [单选] [对] 气相色谱应归属的范畴是（A ） ? 1.2 [单选] [对] 毛细管电色谱所依靠的驱动力为（B ） ? 1.3 [单选] [对] GLC、LLC均应归属于（ B）、 ? 1.4 [单选] [对] 能将分离分析一次完成的方法是（D ） ? 1.5 [单选] [对] 1952年获诺贝尔化学奖的学者是（ B） ? 2.1 [多选] [对] 按流动相的状态分类，色谱法可分为（ ABC） ? 2.2 [多选] [对] 按操作形成分类，色谱法可分为（ABC ） ? 2.3 [多选] [对] 属分配色谱范畴的是（AB ） ? 2.4 [多选] [对] 属吸附色谱范畴的是（ CD） ? 2.5 [多选] [对] 制备型色谱仪主要用于（AB ） ? 3.1 [判断] [对] 薄层色谱属于液相色谱的范畴。（V ） ? 3.2 [判断] [对] 离子交换色谱和离子色谱的原理是一样的。（ X） ? 3.3 [判断] [对] 色谱法对分析对象的鉴别力是较强的。（X ） ? 3.4 [判断] [对] 亲和色谱用于分离纯化生化样品。（V ） ? 3.5 [判断] [对] 色谱法是用于分离有色物质的技术。（X ） 《现代色谱分析》第02章在线测试的得分为 20分 恭喜，交卷操作成功完成！你本次进行的《现代色谱分析》第02章在线测试的得分为20分（满分2 0分），因未超过库中记录的成绩18分，本次成绩未入库。若对成绩不满意，可重新再测，取最高分。 测试结果如下： ? 1.1 [单选] [对] 分离度增加一倍，柱长增加的倍数是（D ） ? 1.2 [单选] [对] 容量因子的表示式为 C ? 1.3 [单选] [对] 两组分的保留时间分别为8.0和10.0min，峰宽分别为2.8和3.2mm，记录纸速为5.0mm/min，则两峰的分离度为（B ） ? 1.4 [单选] [对] 描述组分在流动相与固定相间的“平衡”关系的参数是（ D） ? 1.5 [单选] [对] 色谱的定性参数有（ D） ? 2.1 [多选] [对] 描述色谱流出曲线的基线情况，可用的参数是（AB ）

《现代色谱分析》第02章在线测试.doc

B 、VR C 、R C A 、n = 5. 45 (tR/wl/2) 2 C B 、n = 5. 5(tR/wl/2)2 E C 、n = 5. 54 (tR/wl/2) 2 C D 、n=4.55(tR/wl/2)2 5、描述组分在流动相与固定相间的“平衡”关系的参数是（） A 、tR E I)、k 第..题、多项选择题（每题2分，5道题共10分） 1、衡量区域宽度的方法有（） 17 A 、标准差 《现代色谱分析》笫02章在线测 《现代色谱分析》第02章:在线测剩余时间:59:18 答题须知：1、本卷满分20 2、答完题后，请一定要单击F 面的“交卷”按钮交卷，否则无法记荥本试卷的成 3、在交卷之前，不要刷新本网页，否则你的答题结果将会被清 第一题、单项选择题（每题1分，5道题共5 1、组分在固定相定的质量为mA （g ）,在流动相中的质量为mB （g ）,而该组分在固定相中的浓度为CA （g/nd ） ,在流动相中的浓度为CB （g/ml ）, 则此组分的分配系数是：（） C A > inA/mB C B 、niB/mA C c 、mA/ (niA+mB) ￡ I)、CA/CB 2、容量因子的表示式为 C A 、 Cs/Cm C B 、 Cm/Cs E C 、 Ws/Wm C I)、Wm/Ws 3、色谱系统的分离度应为（） C A 、应等于2. 5 C B 、应大于3.0 区C 、应大于1.5 C I ）、应小于1.5 4、理论塔板数的计算公式是 1 7 B 、峰底宽

C、半峰宽 厂D、峰局 2、用于描述相平衡的参数是（） 厂A、峰宽 厂B、流速 1 C、分配系数 17 D、容量因子 3、衡量柱效高低的色谱参数有（） 17 A、峰宽 17 B、n 匠C、II 厂D、流速 4、影响气相传质过程的因素是（） "A、填充物粒度 1 B、载气的相对分子质量 「C、弯曲因子 17 I）、扩散系数 5、可增加相对保留值的参数是（） 'A、降低柱温 [7 1 B、固定相种类 「C、流动相种类 r D、升高柱温 第三题、判断题（每题1分，5道题共5分） 1、不被固定相吸附或溶解的组分,从进样开始到柱后出现最大值时所需要的时间为死时间（） E正确C错误

实验四 高效液相色谱法测定水体中的苯酚及α-萘酚

高效液相色谱法测定水体中的苯酚和α-萘酚 一、实验目的 1、了解色谱法的分离原理，初步学会使用高效液相色谱仪； 2、利用高效液相色谱仪分离测定水体中的苯酚及α-萘酚。 二、实验原理 1、色谱法的分离原理 溶于流动相中的各待测组分经过色谱柱固定相时，由于各组分与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸收、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，达到分离的目的，又称色层法、层析法。 2、高效液相色谱仪使用原理 高效液相色谱仪由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成四个系统即高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。 储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。 正是根据物质的定性与定量关系，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。 3、苯酚及α-萘酚的分离原理及标准溶液准备 对于一些组分比较简单的已知范围的混合物，或无已知物的情况下，可以利用保留值定性。保留值的大小取决于分配系数之比，即与组分的性质、固定液的性质及柱温有关，与固定液的用量、柱长、流速及填充情况无关。在一定操作条件下，用对照品配成不同浓度的对照液，定量进样，用峰面积或峰高对对照品的量（或浓度）做校正曲线，求回归方程，然后在相同条件下分析试样，计算含量，这种方法称为校正曲线法。通常截距近似为零，若截距较大，说明存在一定的系统误差。本实验，苯酚的波长为270nm，α-萘酚的波长为295nm。使得两种物质

高效液相色谱实验

实验1 气相色谱分析条件的选择和色谱峰的定性鉴定 一、目的要求 1.了解气相色谱仪的基本结构、工作原理与操作技术； 2.学习选择气相色谱分析的最佳条件，了解气相色谱分离样品的基本原理； 3.掌握根据保留值，作已知物对照定性的分忻方法。 4.掌握归一化法测定混合物各组分的含量。 二、基本原理 气相色谱是对气体物质或可以在一定温度下转化为气体的物质进行检测分析。由于物质的物性不同，其试样中各组份在气相和固定液液相间的分配系数不同，当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时，组份就在其中的两相间进行反复多次分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同，虽然载气流速相同，各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定时间的流动后，便彼此分离，按顺序离开色谱柱进入检测器，产生的讯号经放大后，在记录器上描绘出各组份的色谱峰。根据出峰位置，确定组分的名称，根据峰面积确定浓度大小。 对—个混合试样成功地分离，是气相色谱法完成定性及定量分析的前提和基础。而其中气相色谱分离条件的选择至为关键。主要涉及以下几个方面： 1. 载气对柱效的影响： 载气对柱效的影响主要表现在组分在载气中的扩散系数D m(g)上，它与载气分子量的平方根成反比，即同一组分在分子量较大的载气中有较小的D m(g) 。根据速率方程： （1）涡流扩散项与载气流速无关； （2）当载气流速u 小时，分子扩散项对柱效的影响是主要的，因此选用分子量较大的载气，如N2、Ar，可使组分的扩散系数D m(g)较小，从而减小分子扩散的影响，提高柱效； （3）当载气流速u 较大时，传质阻力项对柱效的影响起主导作用，因此选用分子量较小的气体，如 H2、He 作载气可以减小气相传质阻力，提高柱效。 2. 载气流速（u）对柱效的影响： 从速率方程可知，分子扩散项与流速成反比，传质阻力项与流速 成正比，所以要使理论塔板高度H最小，柱效最高，必有一最佳流速。 对于选定的色谱柱，在不同载气流速下测定塔板高度，作H-u 图。 由图可见，曲线上的最低点，塔板高度最小，柱效最高。该点所 对应均流速即为最佳载气流速。在实际分析中，为了缩短分析时间， 选用的载气流速稍高于最佳流速。 3. 固定液的配比又称为液担比。

色谱分析试题

色谱分析试题 一、填空题 1、在色谱法的分类中，按两相状态分类，可分为气相色谱和液相色谱。 2、分离度是一个反映总分离效能的指标，其计算公式为R=2×（T R2-T R1）/ （W2+W1），其值≥ 1 时，相邻两峰基本上分开了。 3、一台完整的气相色谱仪，是由分析单元、显示记录单元和数据处理单元 组成的。 4、固定液是涂在担体表面上起分离作用的一种液体。 5、不被固定相滞留的组分，从进样到峰极大值时所需的时间称为死时间。 6、色谱检测器根据信号记录方式的不同，可分为微分型和积分型两种。 7、热导池的热敏元件选用电阻值大，电阻温度系数高的金属或热敏电阻。 8、对汽化室的要求是热容量大，死体积小，无催化作用。 9、要求固定液的化学稳定性好，是指固定液必须不能与载体、载气及被测 组份发生化学反应。 10、在固定液的分类中，按极性分可以分为六级，其中非极性以–1 表示， 弱极性以+1 +2 表示。 11、在进行微量分析时，假如载气不纯，则在谱图上有可能会出现反峰。 12、处理载体的目的主要是为了改善峰形。 13、红色载体和白色载体均属于硅藻土型载体。 14、在气相色谱的分离过程中，组分与固定液分子之间的作用力起着特殊 的作用。 二、选择题 1、气液色谱的分离主要是根据各组分在固定液上的（1 ）不同。 （1）溶解度；（2）吸附能力；（3）热导系数。 2、热导检测器的热丝温度与池体温度的差值与热导池灵敏度之间的关系为 （ 2 ）。 （1）差值大，灵敏度低；（2）差值大，灵敏度大；（3）基本上没有关系。 3、检测器的温度必须保证样品不出现（2 ）。 （1）升华；（2）冷凝；（3）汽化。 4、气相色谱分析中，对载气的净化要求是根据（4 ）而决定的。 （1）检测器类型；（2）固定相性质；（3）分析要求；（4）以上三项都是。 5、选择固定相的基本原则是（1 ）原则。 （1）相似相溶；（2）极性相同；（3）官能团相同。 6、能产生二倍信号的物质量叫（3 ）。 （1）灵敏度；（2）响应值；（3）最小检测量。 7、定量分析法中，（3 ）法要求操作条件要严格稳定。 （1）内标；（2）面积归一；（3）外标；（4）内标与外标。 8、角鲨烷和液体石腊都属于（3 ）型固定液。 （1）强极性；（2）中等极性；（3）非极性。 9、在分析操作中，发现两相邻峰的分离情况变坏，则首先应考虑检查的是（1 ）。

实验四__高效液相色谱实验(3.7)

实验一高压液相色谱系列实验 一、实验目的 1．熟悉岛津液相色谱仪的整套装置、工作原理、工作流程；会较熟练操作和使用LC Solution工作站。 2．掌握外标法测定植物胡萝卜素的实验方法。 二、实验原理 液相色谱法就是同一时刻进入色谱柱中的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱中运行时，在两相间进行反复多次（103～106次）地分配过程，使得原来分配系数具有微小差别的各组分，产生了保留能力明显差异的效果，进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开来，最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器，在记录仪上或色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。测定各组分在色谱图上的保留时间（或保留距离），可直接进行组分的定性；测量各峰的峰面积，即可作为定量测定的参数，采用工作曲线法（即外标法）测定相应组分的含量。 液相色谱仪工作原理图 高效液相色谱仪是实现液相色谱分离分析过程的装置，如上图所示。贮液器中存贮的载液（用作流动相的液体常需除气）经过过滤后由高压泵输送到色谱柱入口（当采用梯度洗脱时，一般需用双泵系统来完成输送）。样品由进样器注入载液系统，而后送到色谱柱进行分离。分离后的组分由检测器检测，输出信号供给记录仪或数据处理装置。如果需收集馏分作进一步分析，则在色谱柱出口将样品馏分收集起来，对于非破坏型检测器，可直接收集通过检测器后的流出液。其中输液泵，色谱柱及检测器是仪器的关键部件。

三、仪器与试剂 1．仪器 1）液相色谱仪(岛津公司) 2）微量注射器、容量瓶等 2．试剂 甲醇（色谱纯）、二次蒸馏水、胡萝卜素、异丙醇、乙腈 四、实验条件 UV检测器:280nm 流动相：乙腈：醇=4:1 流速：1.0ml/min 进样量：20 μl 柱温：25 五、实验步骤 1、熟悉仪器基本构成、流动相的流路系统；熟悉仪器的基本操作 2．配制测定溶液各取200ul胡萝卜素标准溶液及样品溶液于2ml试管中混合。 3．开启电脑及色谱仪各部分，等系统稳定后准备使用。 4．用微量注射器准确抽取20.0 μL溶液，注射入进样口。注意不要将气泡抽入针筒。在相同的色谱条件下，以内标法确定样品的浓度。 六、思考题 1．如何快速建立未知物的液相色谱方法？一般应考虑哪些主要因素？如何选择合适的色谱柱？ 2．哪些条件会影响浓度测定值的准确性？ 3. 与气相色谱法比较，液相色谱法有那些优点？

现代分离专业技术试题

填空部分: 1、我们测定气相色谱仪灵敏度时，如果用10２-白色担体，邻苯二甲酸二壬酯固定液, 此时按两相所处的状态属于（气—液) 色谱;按固定相性质属于(填充柱) 色谱； 按展示方式属于(冲洗) 色谱;按分离过程所依据的物理化学原理属于（分配)色谱。 2、液相色谱分析中常用以低压汞灯为光源，波长固定式的紫外(UV)检测器,它是以 低压汞灯的最强发射线(253.８）nｍ做为测定波长。 3、根据分离原理的不同,液相色谱可分为（液—液）;(液—固）；（离子交换)；（凝胶）色谱法。 4、固定相分为（液体）和(固体)固定相两大类。固体固定相可分为（吸附剂）， （高分子多孔小球），(化学键合）固定相三类。 5、保留值大小反映了(组分)与（固定相）之间作用力的大小,这些作用力包括 （定向力），(诱导力)，（色散力），（氢键作用力）等。 6、柱温选择主要取决于样品性质。分析永久性气体,柱温一般控制在（50℃以上); 沸点在３0０℃以下的物质，柱温往往控制在（150℃以下）;沸点300℃以上的物质, 柱温最好能控制在(2０0℃以下）;高分子物质大多分析其裂解产物。若分析多组分 宽沸程样品,则可采用（程序升温）;检测器可采用(FＩＤ）。 7、在气相色谱分析中，载气钢瓶内贮存气体都有明显的标记，如氮气,瓶外漆（黑色)， 用黄色标写“氮”;氢气漆(深绿色),红色标写“氢”。 ８、固定液按相对极性可粗分为(五)类,异三十烷是(非极性）固定液,属(0)级； β，β,—氧二丙腈是(强极性）固定液，属(5）级。 9、采用TCＤ检测器时,要注意先(通载气）后（加桥电流）并且(桥电流）不可过大， 否则易烧损铼钨丝。 1０、色谱基本参数测量与计算的关键是(控制色谱操作条件的稳定）。 11、气相色谱中，对硫、磷化合物有高选择性和高灵敏度的检测器是火焰光度检测器（ＦP Ｄ)和硫磷检测器（SPD）；

《现代色谱分析》第01章在线测试

恭喜，交卷操作成功完成！你本次进行的《现代色谱分析》第01章在线测试的得分为19分（满分2 0分），本次成绩已入库。若对成绩不满意，可重新再测，取最高分。 测试结果如下： ? 1.1 [单选] [对] 吸附色谱法应包含的方法有（） ? 1.2 [单选] [对] 分配色谱法应包含的方法有（） ? 1.3 [单选] [错] 毛细管电色谱所依靠的驱动力为（） ? 1.4 [单选] [对] GLC、LLC均应归属于（）、 ? 1.5 [单选] [对] 能将分离分析一次完成的方法是（） ? 2.1 [多选] [对] 按流动相的状态分类，色谱法可分为（） ? 2.2 [多选] [对] 按固定相的状态分类，色谱法可分为（） ? 2.3 [多选] [对] 按操作形成分类，色谱法可分为（） ? 2.4 [多选] [对] 下列分离技术中，只有分离功能，没有分析功能的是（） ? 2.5 [多选] [对] 属吸附色谱范畴的是（） ? 3.1 [判断] [对] 薄层色谱属于液相色谱的范畴。（） ? 3.2 [判断] [对] 凝胶色谱是按分子尺寸大小进行分离的方法。（） ? 3.3 [判断] [对] 色谱仪有分析型和制备型。（） ? 3.4 [判断] [对] 色谱法对分析对象的鉴别力是较强的。（） ? 3.5 [判断] [对] 色谱法是用于分离有色物质的技术。（） A B C D 、分配色谱法应包含的方法有（ A B C D 、毛细管电色谱所依靠的驱动力为（

A、色谱力 B、电场力 C、色谱与电场力 D、都不是 4、GLC、LLC均应归属于（）、 A、吸附色谱 B、分配色谱 C、亲合色谱 D、毛细管电色谱 5、能将分离分析一次完成的方法是（） A、蒸馏法 B、萃取法 C、离心法 D、色谱法 第二题、多项选择题（每题2分，5道题共10分） 1、按流动相的状态分类，色谱法可分为（） A、GC B、LC C、SFC D、重结晶 2、按固定相的状态分类，色谱法可分为（） A、GSC B、GLC C、LLC D、LSC 3、按操作形成分类，色谱法可分为（） A、柱色谱法 B、平面色谱法 C、逆流分配法 D、体积排阻法 4、下列分离技术中，只有分离功能，没有分析功能的是（）

高效液相色谱实验

高效液相色谱实验I. 色谱柱的评价 请在实验前预习《基础分析化学实验（第二版）》137－140页。 【目的】 (1) 了解高效液相色谱仪的工作原理； (2) 学习评价液相色谱反相柱的方法。 【原理】 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支。它采用高压输液泵和小颗粒的填料，与经典的液相色谱相比，具有很高的柱效和分离能力。色谱柱是色谱仪的心脏，也是需要经常更换和选用的部件，因此，评价色谱柱是十分重要的。而且对色谱柱的评价也可以检查整个色谱仪的工作状况是否正常。 评价色谱柱的性能参数主要有： （1）柱效（理论塔板数）n 式中t r 为测试物的保留时间，W 1/2为色谱峰的半峰宽。 （2）容量因子k ’ 式中t 0为死时间，通常用已知在色谱柱上不保留的物质的出峰时间作死时间。 (3) 相对保留值（选择因子）α 式中k 1’和k 2’分别为相邻两峰的容量因子，而且规定峰1的保留时间小于峰2的。 (4) 分离度R s 式中t r1、t r2分别为相邻两峰的保留时间，W b1、W b2分别为两峰的底宽。对于高斯峰来讲，W b =1.70W 1/2。 为达到好的分离，我们希望n 、α和R s 值尽可能大。一般的分离（如α=1.2，R s =1.5），需n 达到2000。柱压一般为104 kPa 或更小一些。本实验采用多核芳烃作测试物，尿嘧啶为死时间标记物，评价反相色谱柱。 【仪器和试剂】 Waters 510高效液相色谱仪（由Waters 510高压输液泵，Rheodyne 7725i 进样器，440检测器和记录仪组成） 色谱柱：5 cm ×4.6 mm I.D., YWG-C 18H 37 (ODS)，10 μm 流动相：甲醇－水(80+20) 样品I ： 含尿嘧啶 (0.010 mg ·mL －1)、萘 (0.010 mg ·mL － 1)、联苯 (0.010 mg ·mL －1)、菲（0.006 mg ·mL － 1）的甲醇混合溶液； 样品I I ：尿嘧啶的甲醇溶液；萘的甲醇溶液；联苯的甲醇溶液；菲的甲醇溶 液。溶液浓度约为0.01mg ·mL － 1； 【实验内容】 （1）准备流动相。将色谱纯甲醇和色谱纯水按比例配制200mL 溶液，混合 均匀并经超声波脱气后加入到仪器储液瓶中。 （2）检查电路连接和液路连接正确以后，接通高压泵、检测器和记录仪的电 源。设定操作条件为：流速1.0 mL ·min － 1，压力上限2?104 kPa (约3000 psi)，检测波长254 nm （该仪器检测波长已固定），灵敏度0.2 AUFS ， 记录仪走纸速度1.0 cm ·min － 1，记录灵敏度为5 mV 。开启记录仪走纸开关记录基线。并调节基线到合适位置（一般为距右10%处）。 （3）待基线平稳后（建议观察检测器的读数显示），将进样阀手柄拨到“Load ” 的位置，使用专用的液相色谱微量注射器取5μL 样品注入色谱仪进样口，然后将手柄拨到“Inject ”位置，同时按一下检测器的标记按钮，同时计时，记录色谱图。 （4）重复（3）的实验两次。 （5）用同样方法进纯样品的甲醇溶液，确定出峰顺序。 （6）根据三次实验所得结果计算色谱峰的保留时间、半峰宽，然后计算色谱 柱参数n 、k ’，以及相邻两峰的α、R s （7）将流速降为0，待压力降为0后关机。 思考题 1. 高效液相色谱与气相色谱相比有什么相同点和不同点？ 2. 如何保护色谱柱延长使用寿命？ 2 2/1r )/(54.5W t n =0 0r /)('t t t k -=1 2'/'αk k ＝) /()(2b2b1r1r2s W W t t R +-=

高效液相色谱实验

化学与材料工程学院 环境监测分析实验报告 实验名称：高效液相色谱分析苯-甲苯混合物 专业班级：应化13 学号： 150313135 姓名：朱建南 指导教师：翟春 实验地点：敬行楼A210 实验日期： 2016年 11月 28日

高效液相色谱实验 一、实验目的 1．了解HPLC仪器的基本构造和工作原理，掌握HPLC的基本操作； 2．学习苯-甲苯混合物的定性分析方法； 3．评价色谱柱柱效； 4．了解色谱定量操作的主要方法以及各自特点； 5．学习未知样品的定量分析方法。 二、实验原理 不同组分因在互不相溶的流动相与固定相中的分配比不同，当两相做相对运动时，组分在两相之间反复进行多次分配，最终实现不同组分的分离。 色谱仪器的构成：包括高压输液系统、进样系统、分离系统，检测系统等 1．色谱定性分析方法 a保留时间定性 b 峰高增量定性 2．色谱定量分析方法 a 归一化法,要求所有组分必须全部出峰。 b 标准曲线法（外标法）。简单、方便, 结果受到操作技术因素以及具体色谱条件影响较大。 三、仪器与试剂 LC-1602A型高效液相色谱仪、甲醇(色谱纯) 、苯、甲苯、苯－甲苯 四、高效液相色谱仪操作步骤 1. 流动相的预处理 甲醇溶液，用0.45μm 有机滤膜过滤，超声波清洗器脱气10～20 min，装入流动相贮液瓶。 2. 准备苯-甲苯混合试样和苯、甲苯标样 3. 高效液相色谱仪操作 a 依次高压输液泵和检测器电源开关； b 打开色谱工作站，在仪器控制面板中，设置波长，并开灯； c打开三通阀，在仪器控制面板中，设置流速为5ml/min, 启动高压泵，排除流路中的气泡。排气结束后，点击停止按钮，停止高压泵。 d 关闭三通阀，设置最小压力(0.1)和最大压力(20)，并设置实验需要的流速 (0.5ml/min)，启动高压泵。 e用平头微量注射器洗涤进样口后，取试液30 μL，将进样阀柄置于“Load”位置时