错配修复蛋白IHC结果判读介绍

错配修复蛋白IHC结果判读介绍

MMR4个主要蛋白中任意一个或多个表达缺陷时，判读为错配修复蛋白表达缺陷（dMMR），若4个蛋白均表达正常，则判读为错配修复表达正常（pMMR）

随着药物临床实验的进展，适用于免疫治疗的癌症范围正在不断增加，错配修复的检测也变得越来越普遍。MMR功能缺失可以通过免疫组化来进行评估，本文介绍一些错配修复蛋白免疫组化中的异常表达模式及结果解释中常遇到的一些挑战。

错配修复蛋白免疫组化常见表达模式

一

正常MMR蛋白表达

图1，结直肠癌：MLH-1、MSH-2、MSH-6和PMS-2均有核表达(仅显示MLH-1)。肿瘤细胞及间质(图1A)、非肿瘤性大肠上皮(图1B)和淋巴结节的生发中心(图1C)，后两种为阳性对照组织。

MMR蛋白在肿瘤细胞内的表达通常比在许多内部阳性对照细胞中更强烈——尽管染色强度在不同实验室甚至不同染色之间也可能存在较大差异。

二

异常MMR蛋白表达

图2，结肠直肠癌：图2A是HE染色，图2B和图2C分别是MLH1及PMS2免疫组化染色。腺癌细胞MLH1和PMS2的核表达缺失，MSH2和MSH6正常核表达。

结果解释：该表达谱与MLH-1失活或该基因内存在突变相一致。

MLH-1和PMS-2核表达缺失是结直肠癌和子宫内膜癌中最常见的MMR异常表达模式。这种情况可能是由于MLH-1失活(更常见)或

突变(不常见)造成的。需要转诊进行临床遗传学评估。

三

MMR蛋白表达区域缺失

图3，转移性乳腺癌：MLH-1和PMS-2核表达的区域缺失（图3B和3C）。内部阳性对照表达，MSH-2和MSH-6核表达（未显示）。

结果解释：这种模式与MLH-1和PMS-2的克隆缺失相一致，可能是由于MLH-1中存在一个体细胞突变。因此，不需要转诊进行临床遗传学评估。

四

MMR蛋白的完全和区

域性缺失

图4，结直肠癌：MSH-6核表达的区域缺失(图4D到4F)，整个肿瘤中MLH-1(图4B)和PMS-2(图4G)核表达缺失，内部阳性对照正常表达，腺癌细胞中MSH-2正常核表达。

结果解释：在MSH-6免疫组化染色中，腺癌细胞表达和不表达MSH-6区域中内部阳性对照染色都表达，所以MSH-6异质性表达可能发生在肿瘤腺体之间或单个腺体内。MSH-6缺失的模式很可能是肿瘤细胞MSH-6突变的结果。

图5，结直肠癌：MSH-6核表达缺失（图5C）以及MSH-2异质核表达（图5B）。

在MSH-2染色中，腺癌细胞区域性不表达，内部阳性对照染色排除了染色过程中干片导致的不均匀这一可能性。MLH-1和PMS-2在腺癌细胞中保持核表达（未显示）。

结果解释：尽管这个染色模式不同寻常，但这种模式表明MSH-2或MSH-6存在突变。因此，建议进行临床遗传学评估。

图6，结直肠癌：存在细胞质MSH-2的表达（图6B和6C），没有显示核MSH-2或MSH-6(图6D)的表达。内部阳性对照表达，证实了MSH-2和MSH-6染色在技术上无缺陷。MLH-1和PMS-2在腺癌细胞中保持核表达（未显示）。

结果解释：这是一种异常的MSH-2表达模式，具有与核MSH-2表达相同的意义。因此，建议推荐进行临床遗传学评估。

图7，无柄锯齿状病变(SSL)：MLH-1点状核表达（图7B），同时PMS-2核缺失（图7C），内部阳性对照表达。MSH-2和MSH-6核表达（未显示）。

结果解释：这是一种异常的表达模式，具有与MLH-1核表达完全缺失相同的意义。这种点状模式并不是特定于SSL组织，也可以在其他组织例如CRC中看到，参见图11。

五

MMR蛋白在结直肠腺

瘤和腺癌中的表达

图8，结肠直肠腺瘤-腺癌：在腺癌细胞（图8D）和邻近的腺瘤细胞中显示PMS-2核表达缺失（图8B和8C）。不过，后一种细胞中PMS-2表达缺失表现为不均匀的阳性表达，内部阳性对照正常表达。MLH-1、MSH-2和MSH-6的正常核表达（未显示）。

结果解释：这种表达模式高度提示PMS-2中存在突变。约80%结直肠腺瘤病例存在林奇综合征，MMR蛋白IHC染色结果正好印证了这一比例的病例有MMR蛋白缺失表达。因此，当考虑到林奇综合征时，结直肠腺瘤中MMR蛋白表达缺失是一个很有用的工具。不过要注意的是，即使存在林奇综合征，在腺瘤中也可能四种MMR蛋白的均保留表达。因此，建议转诊进行临床遗传学评估。

六

皮脂腺肿瘤中MMR

蛋白的表达

图9，皮脂腺瘤：MLH-1核表达缺失（图9B），PMS-2核表达也缺失，但MSH-2和MSH-6均核表达（未显示）。

结果解释：这些病变MMR蛋白表达缺失可能与Lynch综合征有

关。MMR蛋白在皮脂腺肿瘤中不表达很常见（15-60%），MMR蛋白IHC对林奇综合征的敏感性很高（81-85%）。在大多数这些病变中，dMMR与潜在的MMR基因突变无关，因此MMR蛋白IHC识别林奇综合征的特异性相对较低（48%）。

七

MMR蛋白在其他癌症中

的表达

图10，少突胶质细胞瘤：MSH-2（图10B）和MSH-6（图10C）核表达缺失。内部阳性对照表达（在内皮细胞内-图10B和10C；在非肿瘤神经元中-图10D），MLH-1和PMS-2核表达（未显示）。

结果解释：这种表达模式高度提示MSH-2中存在突变。该病例患者5年前因结肠腺癌行结肠切除术，已知患有林奇综合征。在这种情况下，少突胶质细胞瘤中MSH-2和MSH-6表达缺失与林奇综合征引起的肿瘤相一致。如果没有已知的林奇综合征病史和临床遗传学的研究要求，对该肿瘤可能不会进行MMR蛋白IHC以确定它是否可能是由dMMR引起的。虽然林奇综合征最常与结直肠癌和子宫内膜癌相关，但越来越多的其他肿瘤与林奇综合征相关。

八

结直肠锯齿状病变中

MMR蛋白的表达

图11，SSL：在这些SSL中，MLH-1核表达缺失（图11B至11D）。内部阳性对照表达。

结果解释：通常这与BRAF突变有关，由于MLH-1启动子序列的高甲基化-结直肠癌锯齿状通路的特征基因改变，PMS-2表达也缺失。在SSLs中，MLH-1(和PMS-2)的核表达(病例1-图11B和11C)和“最小偏差”发育不良(病例2-图11D)的核表达缺失，通常不发生在“腺瘤状”或“锯齿状”的发育不良模式。因此，这些MMR蛋白在IHC 上的表达缺失可以支持SSLs中常规发育不良的诊断，但如果没有MMR蛋白表达缺失，则不排除发育不良增生，需要基于形态学的判别。

九

MMR蛋白免疫组化染色

的技术问题

图12，子宫内膜腺癌：任何解剖部位和/或肿瘤类型的组织固定不良往往导致技术欠佳的MMR蛋白IHC，苏木精和伊红染色提示这种情况的发生（病例1-图12A；病例2-图12F）。在这种情况下，IHC 染色强度在相邻区域/恶性腺体之间存在显著差异（图12B），或者在单个恶性腺体内可能出现异质性（病例1-图12C和12D；以及病例2-图12G）。有时几乎没有明显的IHC染色，但弱染色可能为灰色或浅棕色细胞核(病例1-图12D)。在这种情况下，一个有用的线索是没有（几乎或完全）内部阳性对照染色。

单个组织块中肿瘤和非肿瘤组织区域之间的固定质量差异也可能导致肿瘤内dMMR的虚假染色，因为良性组织中MMR蛋白免疫组化染色通常较强(图12E)。然而，高倍镜检查经常会发现肿瘤内MMR蛋白免疫组化染色较弱和/或不均匀。

结果解释：MMR蛋白IHC在这两种情况中都没有显示出dMMR 的证据。请注意，术语“染色”已经在上面的段落中使用了，而不是“表达式”。这是因为在这些例子中，IHC染色（技术上）是次优的，而不是MMR蛋白表达的性质。MMR蛋白IHC的技术问题很常见，特别是当存在次优的组织固定时。建议与相应的苏木精和伊红染色切片进行比较，以确保组织块中存在充分固定和处理良好的肿瘤。在这些情况下，仔细检查IHC切片的内部阳性对照染色的存在和强度是非常必要的。外部阳性对照可以确认与IHC相关的过程已经以令人满意的方式发生。然而，并不排除在病例材料中存在抗原保存问题的可能性。

结论

在筛查林奇综合征时，识别dMMR非常重要，同时在帮助预测肿瘤是否可能对新的免疫疗法有反应时，这也越来越重要。虽然有几种检测dMMR的方法，但MMR蛋白免疫组化被广泛应用。在这种情况下，IHC解释的原则对所有肿瘤类型都是共同的。不仅需要评估MMR

在肿瘤细胞中的表达，而且在内部阳性对照细胞和组织中观察染色结果以确保结果准确性也尤为重要。

参考文献

Bateman A C. DNA mismatch repair protein immunohistochemistry – An illustrated guide[J]. Histopathology.

错配修复蛋白IHC结果判读介绍

错配修复蛋白IHC结果判读介绍 MMR4个主要蛋白中任意一个或多个表达缺陷时，判读为错配修复蛋白表达缺陷（dMMR），若4个蛋白均表达正常，则判读为错配修复表达正常（pMMR） 随着药物临床实验的进展，适用于免疫治疗的癌症范围正在不断增加，错配修复的检测也变得越来越普遍。MMR功能缺失可以通过免疫组化来进行评估，本文介绍一些错配修复蛋白免疫组化中的异常表达模式及结果解释中常遇到的一些挑战。 错配修复蛋白免疫组化常见表达模式 一 正常MMR蛋白表达 图1，结直肠癌：MLH-1、MSH-2、MSH-6和PMS-2均有核表达(仅显示MLH-1)。肿瘤细胞及间质(图1A)、非肿瘤性大肠上皮(图1B)和淋巴结节的生发中心(图1C)，后两种为阳性对照组织。 MMR蛋白在肿瘤细胞内的表达通常比在许多内部阳性对照细胞中更强烈——尽管染色强度在不同实验室甚至不同染色之间也可能存在较大差异。

二 异常MMR蛋白表达 图2，结肠直肠癌：图2A是HE染色，图2B和图2C分别是MLH1及PMS2免疫组化染色。腺癌细胞MLH1和PMS2的核表达缺失，MSH2和MSH6正常核表达。 结果解释：该表达谱与MLH-1失活或该基因内存在突变相一致。 MLH-1和PMS-2核表达缺失是结直肠癌和子宫内膜癌中最常见的MMR异常表达模式。这种情况可能是由于MLH-1失活(更常见)或

突变(不常见)造成的。需要转诊进行临床遗传学评估。 三 MMR蛋白表达区域缺失 图3，转移性乳腺癌：MLH-1和PMS-2核表达的区域缺失（图3B和3C）。内部阳性对照表达，MSH-2和MSH-6核表达（未显示）。 结果解释：这种模式与MLH-1和PMS-2的克隆缺失相一致，可能是由于MLH-1中存在一个体细胞突变。因此，不需要转诊进行临床遗传学评估。

肿瘤免疫组化指标含义大汇总

肿瘤免疫组化指标含义大汇总 在当前精准医疗的时代，免疫组化（IHC）在肿瘤的诊断中具有极其重要的意义。在常规肿瘤病理诊断中，5%-10%的病例单靠H。E。染色难以作出明确的形态学诊断。利用好肿瘤IHC,将使肿瘤的诊断与治疗轻松许多。 近年来，随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现，许多疑难肿瘤得到了明确诊断.尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断中的准确率可达50%-75%。 免疫组化(IHC)是免疫学与组织化学两种技术的结合,基本原理是应用抗原与抗体的特异性结合,再用显色剂显色以达到标记细胞的某种抗原物质的定性／定位检测技术。 (1)上皮性肿瘤标记 表皮角蛋白（EK）:鳞状上皮或高分化鳞癌 细胞角蛋白（CK）： CK7 ／CK18 标记腺上皮，通常在腺癌中表达. CK19 分布于单层上皮和间皮,常用于腺癌诊断，胆管（＋）。 上皮膜抗原（EMA)：低／未分化上皮高表达；常存在于间变大细胞／恶性横纹肌样瘤. P504：前列腺癌的敏感性为97％，特异性为100％。 HMB45：存在于恶性黑色素瘤。 （2）间叶源性肿瘤标记 波纹蛋白（Vimentin, Vim）：细胞中间死蛋白抗体，多数软组织肿瘤均可表达,但肌纤维较明显,在一些上皮性肿瘤也有阳性反应，作为间叶与上皮源性鉴别

一线抗体。 结蛋白（Desmin，Des）：存在于平滑肌／横纹肌 肌动蛋白（Actin):平滑肌／血管内皮／肌上皮 肌球蛋白(Myotlobin）／肌红蛋白（myosin）：横纹肌 CD34：血管内皮,通常用于血管源性肿瘤的诊断。 （3)神经细胞／神经内分泌肿瘤标记： S—100:周围神经雪旺氏细胞特异性标记 胶质纤维酸性蛋白(GFAP):脑胶质细胞特异性标记抗体 神经原特异性烯醇化酶（NSE): 主要用于神经内分泌肿瘤诊断 Chr 嗜铬素：鉴别肾上腺髓质和皮质,用于神经内分泌肿瘤诊断。 神经内分泌肿瘤标记:Syn 突触素／NSE／嗜铬蛋白颗粒A（CgA） CK20:用于胃肠道腺癌、卵巢黏液性肿瘤、皮肤Merkel细胞癌诊断。 CD56：神经细胞黏附分子，主要分布于神经外胚层来源细胞，常用于星型细胞瘤、神经母胞瘤、神经内分泌肿瘤诊断，也是NK细胞瘤的重要标志,也标记小细胞肺癌。 我们来看几例收治的小细胞肺癌患者的IHC： 病例1:CD56（+），Syn（+)，CgA（-),p63(—),CK5（—）,TTF—1（+），CK（+)，LCA（—)，Ki-67(80%）。 病例2:CD56（+），Syn（+），CgA（弱+），ki—67（60％），P63（—),TTF-1（+)，CK(局灶+）. 病例3：CD56(+），Syn(+)，CK（+），Ki—67(〉75％），TTF—1（+），p63（-）,CK5

dmmr和pmmr的判读

dmmr和pmmr的判读 DMMR和PMMR是两个与基因突变有关的检测方法，用于判断肿瘤细胞中的基因突变情况。下面我将从多个角度来回答你的问题。 1. 定义和原理： DMMR（Mismatch Repair Deficiency）指的是肿瘤细胞中DNA错配修复系统的缺陷，导致DNA错配修复功能失效，进而导致基因组中的错配修复错误增加。 PMMR（Proficient Mismatch Repair）表示肿瘤细胞中DNA 错配修复系统正常，没有错配修复缺陷。 2. 检测方法： DMMR的检测方法主要包括免疫组织化学染色（IHC）和微卫星不稳定性（MSI）分析。IHC检测主要通过检测错配修复蛋白（如MLH1、MSH2、MSH6、PMS2等）的表达情况来判断是否存在错配修复缺陷。MSI分析则是通过检测肿瘤细胞中微卫星位点的稳定性来判断错配修复功能是否正常。

PMMR通常是通过排除DMMR的存在来判断的，即如果IHC和MSI结果均正常，则可以认为肿瘤细胞中的错配修复功能正常。 3. 临床意义： DMMR是一些肿瘤类型（如结直肠癌、子宫内膜癌等）的重要分子标志物，与肿瘤的发生、发展和预后密切相关。DMMR肿瘤对某些免疫治疗药物（如PD-1抑制剂）具有较好的治疗响应，因此DMMR检测对于指导免疫治疗的应用具有重要意义。 PMMR则意味着肿瘤细胞中的错配修复功能正常，可能对某些化疗药物具有更好的敏感性。 4. 结果解读： DMMR的判断标准通常是根据IHC和MSI结果的一致性来确定。如果IHC显示错配修复蛋白表达异常，同时MSI分析结果也显示微卫星不稳定性，则可以判断为DMMR。而如果IHC和MSI结果均正常，则可以判断为PMMR。 需要注意的是，DMMR和PMMR的判断结果可能会因不同实验

林奇综合征的特征、筛查和防治

林奇综合征的特征、筛查和防治 1.林奇综合征（Lynch Syndrome）的定义： 林奇综合征是指由于错配修复基因（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、EPCAM等）的胚系突变（图1）引起的一种遗传性结直肠癌。林奇综合征大部分是由于MLH1和MSH2的胚系突变引起的，两者分别占30%。另外有少量是由MSH6和PMS2的突变引起的，还有大约30%的患者的突变基因不明。海军军医大学附属长海医院肛肠外科高显华 图1. 基因的胚系突变和体系突变的区别。 2.林奇综合征的特点： 在2010 年之前，林奇综合征曾被称为遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC）。它是一种常染色体显性遗传，即有50%的可能性会遗传给下一代，男女遗传的概率是一样的。林奇综合征容易得多种癌症（图2），包括：结直肠癌、胃癌、子宫内膜癌、卵巢癌、胰腺癌、输尿管癌和肾盂癌、神经系统（胶质母细胞瘤）、小肠癌、皮脂腺癌、角化棘皮瘤等。它是最常见的遗传性结直肠癌综合征，大约占所有结直肠癌的3%。 图2.林奇综合征患者容易得多种癌症。 3. 林奇综合征的筛查： 如果患者符合“阿姆斯特丹I 标准”或者“修订版的贝塞斯达标准”，则建议进一步行错配修复基因蛋白（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）的免疫组化或微卫星不稳定性检测（MSI）。如果四个蛋白质任何一个为阴性，或者MSI检测为高度微卫星不稳定（MSI-H），则建议抽血行基因的胚系突变检测。但是，由于“阿姆斯特丹I 标准”和“修订版的贝塞斯达标准”的漏诊率很高，所以，现在国际上通用的NCCN指南建议所有的结直肠癌病人都行错配修复基因蛋白（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）的免疫组化或微卫星不稳定性检测（MSI）。 3.1 阿姆斯特丹I 标准（1990） (1) 家系中至少有3个人确诊结直肠癌，其中一个为另外两个的一

错配修复蛋白免疫组化检测方法步骤

一、概述 错配修复蛋白（Mismatch rep本人r protein，MMR）是一类重要的修复蛋白，它在误配修复（Mismatch rep本人r，MMR）通路中扮演关键角色。MMR通路主要负责修复DNA中的错配碱基，防止DNA复制过程中的突变。MMR蛋白的功能异常已被证实与多种肿瘤的发生和发展有关。对MMR蛋白的准确检测对于肿瘤的诊断、治疗和预后评估具有重要意义。 二、错配修复蛋白免疫组化检测方法步骤 1. 组织标本的固定与包埋 （1）收集组织标本后，用10中性缓冲福尔马林进行固定处理。一般固定时间为12-24小时。 （2）固定后的组织标本需要进行脱水、透明和包埋处理，以便制作石蜡切片。 2. 制备石蜡切片 （1）将固定包埋好的组织标本切割成4-5μm的厚度，然后用玻璃刀将切片转移到预热的载玻片上。 （2）石蜡切片可用于进一步的免疫组化染色。如果不立即进行染色，需要将切片保存在4℃的条件下，避免阳光直射。 3. 免疫组织化学染色 （1）取出石蜡切片，用xylene进行脱脂处理，然后用乙醇进行

脱水处理。之后再用水进行清洗。 （2）使用3过氧化氢进行蛋白质过氧化物酶的去活化处理。然后用PBS进行洗涤，以消除余留的过氧化氢。 （3）滴加适量的MMR蛋白特异性的一抗，进行孵育。一抗选择需要根据实验需要进行确定。 （4）洗脱未结合的一抗，然后加入二抗进行孵育。之后进行洗脱，用DAB抗原结合酶进行染色。 （5）用水对切片进行清洗、脱水和透明处理。最后在载玻片上覆 盖玻片，用透明胶封闭切片。 4. 结果解读 免疫组化染色后，观察切片下的组织结构和染色结果。根据染色程度和组织分布情况，判断错配修复蛋白的表达情况。通常，错误匹配 修复蛋白的正常表达呈现为浅褐色的染色，异常表达则可能呈现出明 显的深褐色。 三、总结 错配修复蛋白免疫组化检测是一种常用的方法，用于评估修复通路 的功能状态和肿瘤细胞的表观特征。准确的实验步骤和操作规范是保 证检测结果准确性的关键。本文介绍了错配修复蛋白免疫组化检测的 操作步骤，希望对相关人员有所帮助。5. 质量控制 完成免疫组化染色后，需要对结果进行质量控制，以确保实验的准 确性和可靠性。需要对实验的重复性进行评估，通过重复染色处理相

MSI详解

MSI详解 微卫星（Microsatellite,MS）：是指分布在人类基因组中的简单重复序列（1-6碱基，重复次数5-50次）。其长度由重复单位的拷贝数决定，是一类呈高度多态性的遗传标记，可用于遗传性疾病的连锁分析和基因诊断。 微卫星不稳定性（microsatelliteinstability，MSI）, 是指由于在DNA复制时插入或缺失突变引起的MS序列长度改变的现象。 错配修复(MMR)基因是生物进化的保卫者，具有修复DNA碱基错配的功能。可以维持基因组的稳定性和降低自发性突变。目前已发现人类的MMR系统含有9个错配修复基因，其中以MLH1和MSH2功能最为重要。MMR基因一旦出现问题，基因在复制过程中产生的错误会不断累积起来。而这些基因错误往往就是癌症产生的元凶。 总之：产生MSI主要原因：MMR系统（MLH1、MSH2、》）错配修复功能缺陷（defectiveMMR，dMMR）。 结直肠癌是多种癌基因突变或抑癌基因失活累积导致基因组不稳定的结果，目前基因组不稳定主要有微卫星不稳定（15%）和染色体

不稳定（85%）两种途径，如下图所示： MSI在结直肠癌中的分类主要有两种：1、散发性结直肠癌（约占12%），2、林奇综合征（约占3%）。其中散发性结直肠癌与MLH1启动子甲基化有很大关系，并且散发性结直肠癌中有40%-60%的BRAF突变。林奇综合征与胚系MMR基因(hMLHl、hMSH2、hMSH6、hPMS2、hMSH3和hPMSl)突变有关，其中MLHl、MSH2基因最易发生突变，占林奇综合征患者的85％～90％，林奇综合征中无BRAF突变。 林奇综合征，是最常见的遗传性结肠癌，其临床特点是易患有多种癌症，主要是结直肠癌和子宫内膜癌。林奇综合征含有缺陷的错配修复基因。与其相关的主要有四个基因，分别是MLH1, MSH2, MSH6和PMS2。癌症的主要特征是微卫星不稳定（MSI，microsatellite instability），即在微卫星重复区域发生串联重复区域的改变。那如何筛查林奇综合征呢，下面给出一个图供参考：

错配修复蛋白（MLH1、PMS2、MSH2、MSH6）在IHC检测应用中的由来【终篇】

错配修复蛋白（MLH1、PMS2、MSH2、MSH6）在IHC检 测应用中的由来【终篇】 前文链接： 错配修复蛋白（MLH1、PMS2、MSH2、MSH6）在IHC检测应用中的由来【一】 认识错配修复系统 错配修复蛋白（MLH1、PMS2、MSH2、MSH6）在IHC检测应用中的由来【二】 错配修复缺失 三、微卫星不稳定的检测 MSI属于一种基因水平的变异现象，而背后的根源则是错配修复蛋白功能缺失。故无论从蛋白水平检测MLH1、MSH2、MSH6、PMS2等分子，还是在基因水平检测MSI状态均有助于判断该类病因。现已证明二者的符合性达到97.8%。 然而由于人们首先在结直肠癌中认识了微卫星不稳定现象，并且将结直肠癌被分为MSI-H（MSI高度不稳定）型和MSS（微卫星稳定型）以区别其在预后与治疗方面的差异。早期的检测方法为通过对Bat26、Bat25、D5S346、D2S123和D17S250五个微卫星位点的检测，根据其存在MSI的数量将结直肠癌分为MSI-H（具有两个和两个以上的位点改变）、MSI-L（只有一个位点发生改变）和微卫星稳定型(MSS)。MSI-L型在临床表现上与MSS肿瘤无明显差别，通常被归为MSS肿瘤。 随后当人们认识到为星星不稳定现象源于错配修复系统功能缺陷，并且对其机制研究透彻之后逐渐形成通过对错配修复蛋白的检测来确定MSI的方法，即错配修复蛋白免疫组织化学检测。免疫组织化学的方法具有方便、快捷、稳定等优点并且对Lynch综合征的确诊具有指

向性，因此被广泛接收，目前已几乎替代前者。 上述MSI的传统检测方法不能用于对Lynch综合征的确诊，而免疫组织化学方法因直接检测相关蛋白对Lynch综合征具有显著的指向性。为了提高对Lynch综合征的指向性，有学者建议将EpCAM列入错配修复蛋白检测行列。然而对Lynch综合征的确诊必需依赖于对MLH1、MSH2、MSH6、PMS2以及EpCAM基因进行突变或缺失的检查结果。 四、错配修复蛋白染色 错配修复蛋白染色结果判断应注意以下几点: 1）着色部位是否为核； 2）内对照（上皮细胞：正常肠上皮特别是腺体基底部细胞；间质细胞：淋巴细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞等）是否阳性； 3）肿瘤细胞的细胞核是否为阳性（通常任何肿瘤细胞表达即判断为该错配修复蛋白阳性） 错配修复蛋白结果解读: 一种或多种错配修复蛋白表达缺失提示为MSI-H肿瘤。通常MLH1功能缺陷会合并PMS2表达缺失，而MSH2缺陷则常合并MSH6表达缺失，反之不然。以下为错配修复蛋白免疫组织化学检测结果解读参考： 参考文献： 1.石迎雪,郑杰. 系统筛查微卫星不稳定性结直肠癌的意义和策略. 中华病理学杂志 2015，44（1）：9-14. 2.Modrich P. Mechanisms in eukaryotic mismatch repair. J

错配修复蛋白免疫组化结果解读列表

错配修复蛋白免疫组化结果解读列表 在肿瘤学领域中，错配修复蛋白（MMR）免疫组化结果的解读对于诊断和治疗决策至关重要。MMR基因的功能异常与肿瘤的发生和发展密切相关，因此对MMR免疫组化结果的准确解读对于患者的诊断和治疗具有重要意义。在本文中，我们将深入探讨错配修复蛋白免疫组化结果的解读列表，帮助读者更好地理解和应用这一重要的临床信息。 一、错配修复蛋白免疫组化的基本原理 1. MMR基因的作用及其在DNA修复中的重要性 2. MMR基因的异常与肿瘤的关系 3. MMR免疫组化在肿瘤诊断中的应用价值 二、免疫组化结果的解读列表 1. MLH1的表达情况及其临床意义 2. MSH2的表达情况及其临床意义 3. MSH6的表达情况及其临床意义 4. PMS2的表达情况及其临床意义 三、错配修复蛋白免疫组化结果的临床意义 1. 对结直肠癌的诊断和预后的影响 2. 对子宫内膜癌的诊断和预后的影响 3. 对其他肿瘤的诊断和预后的影响

四、个人观点与理解 在实际临床工作中，对于错配修复蛋白免疫组化结果的解读需要结合病理形态学和分子病理学等多方面信息，进行综合分析和评估，才能更好地指导临床诊断和治疗决策。随着分子诊断技术的不断发展，对于MMR免疫组化结果的解读也需要不断更新和深化理解，以更好地服务于临床实践。 总结 通过本文的详细介绍和讨论，读者可以更好地了解错配修复蛋白免疫组化结果的解读列表，包括其基本原理、具体的解读内容以及临床意义，从而更好地应用这一重要的临床信息。对于医生和临床实践者来说，掌握并深入理解MMR免疫组化结果的解读列表，将有助于更准确地诊断肿瘤，制定个体化的治疗方案，提高患者的生存率和生活质量。 在这篇文章中，我们通过介绍了错配修复蛋白免疫组化结果的解读列表，并结合个人观点和理解对其进行了深入讨论。希望本文能够对读者有所帮助，也期待在未来的临床实践中，能够更多地应用这一重要信息，为患者的治疗和管理提供更好的支持和服务。错配修复蛋白（MMR）在肿瘤的发生和发展中起着重要作用，其功能异常与肿瘤的遗传不稳定性以及治疗反应密切相关。对MMR免疫组化结果的准确解读对于肿瘤的临床诊断和治疗具有重要意义。本文将进一步探讨错

错配修复(MMR)蛋白(MLH1、PMS2、MSH2和MSH

错配修复（ＭＭＲ）蛋白（ＭＬＨ１、ＰＭＳ２、ＭＳＨ２和ＭＳＨ６）表达与子宫内膜癌临床病理特征和预后相关性分析 作者：黄金长肖英黄雪梅 来源：《中国现代医生》2021年第05期

[摘要] 目的分析错配修复（MMR）蛋白表达与子宫内膜癌临床病理特征和预后相关性。方法选取我院2018年2月至2020年5月收治的70例子宫内膜癌（UCEC）患者，采用免疫组化法对4种蛋白（MLH1、PMS2、MSH2和MSH6）表达情况进行检测，并将4种MMR蛋白中1种及以上表达缺失判定为错配修复基因缺陷（dMMR），全部阳性则判定为错配修复基因完整（pMMR）。检测UCEC患者MMR蛋白缺失情况并对其与病理特征的关系进行分析。结果 4种MMR蛋白表达均定位于肿瘤细胞核，可作为内对照;dMMR组与pMMR组年龄、病理组织学类型、临床分期及淋巴结转移等比较，差异有统计学意义（P [关键词] 子宫内膜癌;错配修复;免疫组化;病理特征 [Abstract] Objective To analyze the correlation between expressions of mismatch repair （MMR） proteins and clinicopathological features and prognosis of endometrial carcinoma. Methods A total of 70 patients with uterine corpus endometrial carcinoma（UCEC） admitted to our hospital from February 2018 to May 2020 were selected， and the expression of four types of MMR proteins was detected by immunohistochemistry. The loss of expression of one or more of the four

错配修复蛋白免疫组化结果解读列表

错配修复蛋白免疫组化结果解读列表 错配修复蛋白免疫组化结果解读列表 引言 对于肿瘤治疗而言，错配修复蛋白（Mismatch Repair Protein，MMR）免疫组化结果解读是非常重要的一环。MMR蛋白在细胞中起到修复DNA错配的作用，而错配修复系统的缺陷则会导致微卫星不稳定现象的发生，进而促进肿瘤的发展。对于肿瘤组织中MMR蛋白的 免疫组化结果解读具有重要的临床意义。本文将针对错配修复蛋白免 疫组化结果解读列出一个详细的列表，旨在帮助读者更好地理解和解 读这些结果。 一、背景知识 1. 错配修复系统及其功能：错配修复系统是一种能够修复和纠正DNA 分子中错配碱基的重要系统。MMR蛋白是错配修复系统的主要成分之一，通过识别和修复DNA序列中的错配碱基，维护了基因组的稳定性。 2. 微卫星不稳定性（Microsatellite Instability，MSI）：在MMR缺陷的情况下，DNA序列中的微卫星位点容易发生插入、缺失或错位等错配，导致微卫星不稳定性的发生。MSI成为了MMR缺陷的重要标志。

二、错配修复蛋白免疫组化结果解读列表 在进行错配修复蛋白免疫组化结果解读时，以下是一些重要的要点和 列表供参考。 1. 错配修复蛋白的免疫组化染色结果 - 正常表达：正常表达指的是错配修复蛋白在细胞核和/或胞质中呈现 出良好的染色强度和均匀分布。正常表达通常意味着MMR系统的功 能正常，并具有DNA修复的能力。 - 异常表达：异常表达是指错配修复蛋白在细胞核和/或胞质中呈现出 较低的染色强度、不均匀的染色分布或无染色的情况。异常表达可能 暗示着MMR系统的缺陷或功能异常。 2. 错配修复蛋白免疫组化结果的解读 - 异常表达：当某个或多个错配修复蛋白的免疫组化结果为异常表达时，可能暗示着MMR系统的缺陷或功能异常。这种情况下，进一步检测 是否存在MSI现象以确定MMR缺陷的具体类型和程度非常重要。 - 正常表达：正常表达通常意味着MMR系统的功能正常，并具有DNA修复的能力。然而，即使错配修复蛋白的免疫组化结果为正常表达，仍然需要进一步检测可能存在的其他MMR缺陷。 3. MMR缺陷类型和相关检测 - MMR缺陷类型：在错配修复蛋白免疫组化结果为异常表达的情况下，进一步检测微卫星状态是确定MMR缺陷类型的关键。根据MSI的存

最新版生物标志物丨肿瘤常见分子标志物之MSIMMR

最新版生物标志物丨肿瘤常见分子标志物之MSIMMR 如果只能用四个字简单概述MMR和MSI的关系，那么我想就是：因为所以；因为，错配修复基因功能缺陷（dMMR）导致错配修复蛋白的功能异常，所以，DNA复制过程中随机产生的错误无法被正常修复，进而出现了微卫星不稳定性高（MSI-H）的现象。 MSI的发生的原理就如同小学生抄课本一样，小学生照着课本抄（DNA复制），但是在抄的过程中也会抄错（MSI发生），可能一个字（单碱基）抄了很多遍，也可能好几个字（多碱基）抄了很多遍，这时候错误越来越多就会形成不同程度的错误（MSI-L/MSI-H）。那么MMR是什么呢？ MMR就类似于小学生的爸妈，当小学生抄课本出错的时候，爸妈是可以检查出错误的地方并进行修改（错配修复）。如果小学生的爸妈因为生病等原因自身出错了（dMMR）导致了他们没有时间来管理和教育孩子，小学生在这样的环境下，很容易写作业不用心，就会出现各种错误（MSI），这时候爸妈也没办法来进行一个检查和修改，故可以简单的认为是因为爸妈的问题（dMMR）导致了孩子作业出现了不同程度的错误（MSI），最终的影响结果就是成绩的下滑（肿瘤的发生），所以说爸妈的问题（dMMR）与孩子的成绩下滑（肿瘤的发生）是息息相关的。（基因Talks自编自导） MSI/MMR生物学意义 高度微卫星不稳定性（MSI-H）的癌症是由于DNA错配修复（MMR）基因的突变和/或启动子区域高度甲基化导致的，MMR基

因正是通过纠正碱基对在DNA复制过程中出现的任何错配/错误来编码正常的蛋白，错配修复缺陷（dMMR）会导致基因组发生10-100倍或更高的遗传突变频率，最终导致MSI-H的超突变肿瘤发生。 MSI/MMR的临床意义 ✦ MSI-H/dMMR的实体肿瘤通常具有免疫原性（immunogenic）和广泛的T细胞浸润性（T-cell infltration），从而使它们对免疫检查点抑制剂（ICIs）的治疗有较高的响应作用。 ✦ MSI状态并不能保证免疫检查点抑制剂（ICIs）会起作用，但是能够保证ICIs起作用时会有很高的疗效。 MSI/MMR的适用肿瘤

碱基错配修复途径-概述说明以及解释

碱基错配修复途径-概述说明以及解释 1.引言 1.1 概述 概述： 在细胞的DNA复制和修复过程中，常常会发生碱基错配错误，即DNA 链上的碱基与对应链的碱基配对不正确。这些错误会导致DNA序列的改变，影响细胞的正常功能。为了保证细胞的遗传信息传递的准确性，细胞进化出了多种碱基错配修复途径。 本文将重点讨论目前已知的两种主要的碱基错配修复途径，即mismatch repair（MMR）和base excision repair（BER）。 MMR是一种高度保守的修复途径，主要负责纠正由于DNA复制过程中的错误配对而引起的碱基错配。它通过识别新复制的DNA链上的不匹配碱基并进行修复，能够较为有效地纠正碱基错配，维护了基因组的稳定性。 而BER则是一种针对DNA链上存在的碱基损伤进行修复的机制。在生活环境中，DNA会受到一系列的内外因素的损伤，如化学物质、放射性射线等。BER途径是针对这些碱基损伤的修复过程，通过将受损的碱基切除并进行替换修复来保持DNA链的完整性。

综上所述，碱基错配修复途径在细胞中具有至关重要的作用，它们保证了基因组的稳定，并且维护了细胞的正常功能。对于进一步理解DNA 复制和修复的机制，以及相关疾病的发生发展具有重要的意义。本文将着重介绍MMR和BER这两个重要的修复途径，并探讨它们在细胞中的作用和调控机制。 文章结构部分的内容可以如下编写： 1.2 文章结构 本文将分为以下几个部分来介绍碱基错配修复途径： 第一部分，引言。在引言部分，我们将对碱基错配修复的概念进行概述，并简要介绍文章的结构和目的。 第二部分，正文。在正文部分，我们将详细介绍两种常见的碱基错配修复途径，分别是碱基切除修复途径（A）和同源重组修复途径（B）。我们将深入探讨每种修复途径的原理、特点以及重要的修复蛋白，以便读者对碱基错配修复的机制有更加清晰的了解。 第三部分，结论。在结论部分，我们将对整篇文章进行总结，概括碱基错配修复途径的重要性和应用价值。此外，我们还将展望未来在碱基错

免疫组化肾上腺疾病结果判读标准

免疫组化肾上腺疾病结果判读标准英文回答： Immunohistochemistry (IHC) is a commonly used technique in the diagnosis and classification of adrenal diseases. It involves the use of specific antibodies to detect and localize specific proteins within the adrenal tissue. The results of IHC staining are interpreted based on the intensity and distribution of the staining. In the case of adrenal diseases, there are several key proteins that are commonly targeted for IHC staining. These include adrenocorticotropic hormone (ACTH), cortisol, aldosterone, androgen receptor (AR), and steroidogenic enzymes such as 21-hydroxylase and 17α-hydroxylase. The expression and distribution of these proteins can provide valuable information about the underlying pathology. For example, in a patient with suspected adrenal adenoma, the IHC staining for cortisol and aldosterone

子宫内膜癌中错配修复蛋白、P27及Ki67的表达及临床意义

子宫内膜癌中错配修复蛋白、P27及Ki67的表达及临床意义王晨亮;彭丽姿;张靓 【摘要】目的了解子宫内膜样腺癌中错配修复蛋白(MMR)、P27及Ki67的表达及其相互关系.方法对所收集的正常子宫内膜、不典型增生的子宫内膜及子宫内膜样腺癌标本,采用SP三步法做错配修复蛋白、P27、Ki67的免疫组化检测,并分析错配修复蛋白、P27及Ki67的表达及临床意义.结果正常内膜中,错配修复蛋白缺失比例为5.0％(1/20),P27平均(67％),KI67平均(19％);不典型增生的内膜中MMR缺失的比例为6.2％(1/16),P27平均(68％),KI67平均(18％);高分化腺癌中MMR缺失的比例为7.7％(1/13),P27平均(38％),KI67平均(32％);中分化腺癌中MMR缺失的比例为11.1％(1/9),P27平均(35％),KI67平均(43％);低分化腺癌中MMR缺失的比例为37.5％(3/8),P27平均(78％),KI67平均(40％).结论错配修复蛋白在各组标本中分布无差异,P27在各组标本中分布存在差异,Ki67在各组标本中分布存在差异. 【期刊名称】《江西医药》 【年(卷),期】2018(053)006 【总页数】3页(P633-635) 【关键词】子宫内膜样腺癌;错配修复蛋白;P27;Ki67 【作者】王晨亮;彭丽姿;张靓 【作者单位】江西省九江市第一人民医院病理科,九江 332000;江西省九江市第一人民医院病理科,九江 332000;江西省九江市第一人民医院病理科,九江 332000

【正文语种】中文 【中图分类】R737.33 子宫内膜癌作为女性生殖道常见的恶性肿瘤，近年来随着生活环境及饮食结构的变化，发病率越来越高，普通人群中发病率为6.32/10万[1]。而在子宫内膜癌中， 又以子宫内膜样腺癌为主要发病类型。其发病的主要原因是由无抵抗的高水平的雌激素不断刺激，导致细胞持续增殖，直至恶变 [2]。女性子宫内膜本身受机体激素周期性调控，呈现规律的增生及脱落；当女性 内分泌系统不稳定的时候，尤其是在围绝经期期间，由于卵泡的衰竭，不能产生足够的孕激素，与雌激素协同作用于子宫内膜，使得子宫内膜的持续性增生。当细胞分裂增生的过程中，如果出现DNA修复功能受损，就容易导致肿瘤的发生。因此，在临床上，患者常伴有肥胖、多囊卵巢、月经紊乱等症状；而在微观层面则常常伴随DNA修复功能的异常。 1 材料和方法 1.1 材料收集我院及九江市妇幼保健院2013年-2017年病理标本66例，其中 正常内膜20例，非典型增生内膜16例，高分化子宫内膜样癌13例，中分化子 宫内膜样癌9例，低分化子宫内膜样癌8例。年龄34-69岁。 1.2 方法所有标本均经过10%的中性缓冲甲醛固定，标准取材，常规制片，HE 染色；组织采用免疫组化SP三步法，检测错配修复蛋白、P27及Ki67的表达情况。SP试剂盒购自北京中杉金桥试剂公司，即用型，MLH1、PMS2、MSH2、MSH6、P27、Ki67。试剂经过校验，实验过程按照说明书进行，同时以组织内非肿瘤细胞作为内对照。 1.3 结果判定所有标记均为细胞核着色，呈棕黄色改变，任何强度的着色均视为

MSI检测规范，最新共识指南一文讲清！

MSI检测规范，最新共识指南一文讲清！ 微卫星 (Microsatellite) 是遍布于人类基因组中的短串联重复序列。机体在正常状态下，微卫星的长度和排序保持不变，并且稳定遗传，而肿瘤组织的微卫星由于重复单位的插入或缺失，导致微卫星长度的改变引起一系列现象称为微卫星不稳定性（Microsatellite Instability, MSI）。 根据微卫星状态可分为：高度微卫星不稳定（MSI-H）、低度微卫星不稳定（MSI-L）、微卫星稳定（MSS）。 对于不同肿瘤，其存在 MSI-H 的比率是不同的，具体比例如下图所示： 图片来自 Bonneville R.et al.,JCO Precis Oncol，2017[3] （注：UCEC，子宫体子宫内膜癌；COAD，结肠腺癌；STAD，胃腺癌；READ，直肠腺癌；ACC，肾上腺皮质癌；UCS，子宫癌肉瘤；CESC，宫颈鳞状细胞癌和宫颈腺癌；WT，维尔姆斯肿瘤；MESO，间皮瘤；ESCA，食管癌；BRCA，乳腺癌；KIRC，肾透明细胞癌；OV，卵巢浆液性囊腺癌；CHOL，胆管癌；THYM，胸腺瘤；LIHC，肝细胞癌；HNSC，头颈部鳞状细胞癌；SARC，肉瘤；SKCM，皮肤黑色素瘤；LUSC，肺鳞状细胞癌；PRAD，前列腺腺癌；LUAD，肺腺癌；BLCA，膀胱癌；NBL，小儿神经母细胞瘤；LGG，低级别胶质瘤；CLL，慢性淋巴细胞白血病；GBM，多形性胶质母细胞瘤；AML，小儿急性髓系白血病（TARGET）；CTCL，皮肤 T 细胞淋巴瘤；DLBC，弥漫性大 B 细胞淋巴瘤；KICH，肾嫌色；KIRP，肾肾乳头状细胞癌；LAML，急性髓系白血病（TCGA）；NPC，鼻咽癌；PAAD，胰腺癌；

免疫组化(IHC)标准化

免疫组化（IHC）标准化 云南省第三人民医 院病理科 徐开军 免疫组化（IHC）是病理诊断的主要辅助手段之一。虽然免疫组化在各个实验室已经常规开展，但是由于各个实验室选择的抗体试剂厂家、抗原修复方法、检测系统等不同，免疫组化实验技术操作方法亦不相同，染色结果会出现各种差异。免疫组化染色技术操作步骤看似简单，但步骤较多且环环相扣，而且许多因素影响着免疫组化的结果，包括技术人员是否熟练掌握整个实验的操作程序、抗体的特异性、检测方法的敏感性、组织标本的固定、抗原的修复及修复液的PH值等众多因素。所以，完成一张满意的免疫组化切片并非那么简单。20 世纪末，非生物素型聚合物（Polymer）检测系统的出现，可以有效地防止内源性生物素的干扰，而且灵敏度高，操作便捷，已被免疫组化实验室广泛应用。当前，免疫组化技术标准化的讨论是建立在由福尔马林固定，石蜡包埋的组织切片并使用非生物素型聚合物检测方法的基础上而展开的。 1、免疫组化染色前的处理：组织的固定、取材、脱水、包埋、切片与展片、烤片、脱蜡。 （1）组织的固定：固定的目的是防止组织、细胞自溶与腐败，凝固或沉淀组织、细胞内物质，以保持组织和细胞固有形态和结构。对免疫组化而言更重要是保存组织、细胞内的抗原，防止抗原破坏和弥散。需高度重视的是手术或穿刺离体组织必须马上放于标本袋固定，固定后应与病理申请单及时送交病理科。病理医生有责任与手术送检科室进行必要的配合与沟通，避免手术后的病理标本随意丢放。 由于免疫组化的固定剂种类较多，性能各异，不同抗原其稳定性各不相同，因此，要了解不同固定剂的特征。常采用甲醛、戊二醛、Bouin、B5等固定液。由于中性缓冲福尔马林渗透力强、组织收缩小，能使大多数抗原物质保存较好，提高免疫组织化学检测的阳性率，因此推荐作为病理标本的首选固定液。应避免使用含重金属的固定剂。 10%中性缓冲福尔马林配制方法： 40%甲醛100ml 磷酸二氢钠4g 磷酸氢二钠 6.5g

结直肠癌与微卫星不稳定（MSI）的10个临床问题

结直肠癌与微卫星不稳定（MSI）的10个临床问题 来源：北京大学肿瘤医院消化内科 微卫星不稳定（MSI）是指由于错配修复（MMR）蛋白缺失（dMMR）导致微卫星序列（通常由1~6个核苷酸为单位的串联重复DNA序列）复制错误不能被修复，当错误累积到一定程度即形成微卫星高度不稳定（MSI-H）。 目前在结直肠癌（CRC）诊疗中已常规开展微卫星稳定性检测，但其对CRC的临床指导意义部分尚存在争议。以下我们将提出并回答10个CRC与MSI的临床问题，以期能引发一些思考并提供临床参考建议。 1 哪些结直肠癌需要进行MSI/MMR检测?

目前越来越多的证据显示，无论家族史和发病年龄，对CRC患者进行林奇综合症（LS）的筛查有助于发现更多的LS患者，而MSI/MMR检测是筛查的重要手段；对于Ⅱ期CRC预后、高危Ⅱ期辅助治疗的选择，以及Ⅳ期CRC免疫治疗均有明确的指导作用。 虽然微卫星状态对Ⅲ期CRC的价值尚存在争议，但氟尿嘧啶单药辅助化疗不获益的结论对不能耐受含铂方案的患者仍有重要提示价值。因此，美国NCCN指南及美国胃肠病协会均建议对所有CRC无论年龄及分期，都应该进行MSI/MMR检测。 2 如何选择MSI/MMR的检测方法？ 目前检测微卫星状态的方法主要有三种，包括免疫组化（IHC）、聚合酶链式反应（PCR）以及二代测序（NGS）。 2.1 聚合酶链式反应（PCR） 采用PCR方法比较肿瘤组织和正常组织DNA中重复核苷酸序列长度是最早确立检测CRC微卫星状态的分子手段，也是MSI检测的金标准。目前最常用的Bethesda标准由2个单核苷酸重复序列（BAT-25和BAT-26）和3种二核苷酸重复序列（D5S346，D2S123和D17S250）构成。 就Bethesda标准而言，五个位点中出现2个或以上的不稳定（Pentaplex panel出现3个及以上或更大panel中存在≥30%的重复不稳定序列）为MSI-H，存在1个位点（或更大panel中10%~30%的重复不稳定序列）为微卫星低度不稳定（MSI-L），而无不稳定位点（或更大panel中＜10%重复序列）则为微卫星稳定（MSS）。

食管癌病理标本处理及报告规范

附件2食管癌病理标本处理及报告规范 1标本规范化前处理 1.1手术切除标本 ①标本采集：术中应对病变部分尽量完整切除，避免挤压变形。若有特殊部位如切缘或可疑病变，应准确定位并有效标记（如染料或手术缝线标记）。 ②标本从采集到固定要在30min内完成，并记录标本离体时间及浸入固定液时间（精确到min）。标本需剖开，沿肿瘤对侧打开食管壁。黏膜面向上，固定于软木板或泡沫板，固定于标准化容器中。 ③用统一标准容器盛放、送检标本，保证安全，避免污染。 ④固定液须用10%中性缓冲福尔马林溶液浸泡，液体容积要达到标本体积的5~10倍。 ⑤盛放标本的容器贴标签（姓名、年龄、科室、住院号、手术方式和名称、手术部位、标本名称及数量）后，与病理送检单一起置于专门的标本保管间，由专人运送至病理科并按规定交接。 1.2活检标本 ①如果是多部位标本采集，应按不同部位以不同容器固定并标记，申请单上应分别记录和描述。 ②活检小标本离体后，内镜医师将其展平，贴在滤纸上，立即放入固定液中，以便包埋时将展平的黏膜立埋。需要重复采集的标本要做到每采集1次，按规范固定1次，不允许多次采集后一起集中固定。 1.3内镜下黏膜切除术/内镜黏膜下剥离术标本 应由内镜医师展平标本，黏膜面向上，固定于软木板（或泡沫板）上，标记口侧及肛侧方向，立即完全浸入足量固定液中。 2病理检查申请单及标本签收 2.1常规病理标本 ①病理科接收标本时，要认真核对病理送检单及标本容器标签。 ②核对送检单、容器标签及容器内标本是否相符，送检标本是否按规定固定。 ③病理科接收人员与送检人员严格核查无误后，双方在“病理标本交接登记本”签字确认。 2.2术中快速病理标本 术前填写术中冰冻预约单并送至病理科，病理科医师提前准备，必要时请临床提供影像学资料等。 2.3不合格病理标本处理制度与程序 ①若标本送检不合格，标本和送检单应一同退回，由手术或主管医师按规范整改后重新送检。 ②不合格的病理送检由病理科接收人员在“不合格送检记录本”登记，定期汇报。 3标本取材 3.1手术切除标本 取材时记录切除食管长度、肿瘤部位、肿瘤距口侧、肛侧及环周切缘的距离、肿瘤大体分型、大小、切面颜色、质地、浸润深度、是否累及EGJ（累及者需记录肿瘤中心到EGJ的距离）、肿瘤旁或肿痛周围食管黏膜/肌壁检查所见、各组淋巴结大小和切面情况。EGJ腺癌建议采用SieWert分型。 必要时涂碘识别病变（碘不染色区）。可从口侧至肛侧取多条组织分块包埋（包括肿瘤、肿瘤旁黏膜及两端切缘），并记录组织块对应的方位（见图1）o推荐纵向取两端切缘与肿痛的关系，对肿瘤距两端切缘较远者，也可横向取两端切缘。单独送检的闭合器切缘应剔除闭合器后全部取材观察。对肿瘤侵犯最深处及可疑环周切缘受累处应重点取材。推荐使用墨汁或碳素墨水标记环周切缘。对黏膜糜烂、粗糙或碘不染色等区域或周围食管/胃壁内结节及EGJ应分别取材。若附有纵隔胸膜、肺或膈肌等邻近器官，应观察取材。对早期食管癌或新辅助治疗后根治术标本，建议将可疑病变区和瘤床全部取材： 送检的分组淋巴结应全部包埋取材。标准的二野或三野清扫且未经新辅助治疗的根治术标本应检出15枚以上淋巴结。若第一次未找到15枚，建议复检。 环周切缘是指食管的基底切缘。环周切缘阳性是指环周切缘有肿瘤，建议用0、0~lmm及Nlmm注明肿瘤距环周切缘的距离。