生物化学实验考核试题库

生物化学实验考核试题库

要求：参加考核的每位学生须从1－6号题中随机抽1题，从7－12号题中随机抽1题，从13－37号题中随机抽1题，从38－46号题中随机抽1题，共计4道考核题进行考核，总分为60分。

一、理论考核题

1盐析和盐溶（3分）2电泳（3分）3层析（色谱）（3分）4酶的活力单位（3分）5比活力（3分）6分子筛效应（3分）7电泳的原理（4分）

8离子交换层析的原理（4分）9亲和层析的原理（4分）

10凝胶过滤层析的原理（4分）

11吸附层析的原理（4分）

12透析技术的基本原理及其应用（4分）

13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途（6分）

14按层析过程的机理，层析法分哪四类？按操作形式不同又分哪三类？（7分）

15普通离心机的使用注意事项？（6分）

16可见分光光度计的使用注意事项？（6分）

17蛋白质含量测定的常用方法有那些？（6分）

18粗脂肪的提取和含量测定的基本原理（6分）

19索氏提取器是由哪几部分组成的？（6分）

20粗脂肪的提取和含量测定的简要操作步骤（6分）

21粗脂肪的提取实验中如何减少误差？（6分）

22凯氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分）

23凯氏定氮实验中用到的主要器材有哪些？（6分）

24核酸的含量测定常用的方法有哪些？（6分）

25双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分）

26双倒数法测定米氏常数的实验中，决定实验成败的因素有哪些？关键因素是什么？（7分）

27生物细胞的破碎的常用方法有哪些？（6分）

28酶的制备及提取过程中常注意哪些事项？（6分）

29蛋白质的分离常用的方法有哪些？（6分）

30甲醛滴定法测定氨基酸的基本原理（6分）

31为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？（6分）32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同？（6分）

33聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点？（6分）

34琼脂糖凝胶电泳的优点？（6分）

35提取某种植物组织中的总DNA时，使用的细胞提取液中的主要试剂成分是什么？各有什么作用？（7分）

36如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA？（6分）

37聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时，使用的电泳缓冲液PH＝8.3，那么样品应点在哪端？为什么？（6分）

二、技能或实验操作考核题

38说明纸层析和离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质? 列出纸层析和柱层析的一般操作步骤。（10分）

39凝胶电泳的一般操作步骤（11分）

40普通离心机的使用操作（示范）（10分）

41可见分光光度计的使用操作（示范）（10分）

42如果要105摄氏度干燥某种物质，如何使用干燥箱（示范）? （10分）

43要称取某种药品2.0g，如何使用天平（示范）？（10分）

44要配制500ml 0.01mol/L的NaOH溶液应如何配制？（10分）

45配制1L 0.01mol/L的HCl溶液应如何配制（已知浓盐酸比重是1.19g/L，重量百分比浓度为36.5％）？（11分）

46分别配制出10µg/ml，5µg/ml，2µg/ml，1µg/ml的DNA标准溶液，应如何配制？（尽可能节约）（10分）

答案：

1、盐析和盐溶：盐析：在蛋白质溶液中加入一定量的高浓度中性盐(如硫酸氨),使蛋白质溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析。盐溶：加入少量中性盐可增加蛋白质的溶解度,即盐溶现象。

2、电泳：带电粒子在直流电场中向着所带电性相反的电极移动的现象。

3、层析（色谱）：用不同物质在不同相态的选择性分配,以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，使混合物各组分以不同速度移动，从而达到分离的一种物理方法。

4、酶的活力单位：是指在特定条件下(25℃、最适的pH值和底物浓度),每分钟可催化1微摩尔(10-6摩尔)底物转化所需要的酶量。

5、比活力：代表酶制剂的纯度。根据国际酶学委员会规定比活力用每毫克蛋白所含的酶活力单位数表示。

6、分子筛效应：凝胶本身具有三维网状结构,大的分子在通过这种网状结构上的孔隙时阻力较大,小分子通过时阻力较小。分子量大小不同的多种成份在通过凝胶床时,按照分子量大小“排队,凝胶表现分子筛效应。

7、电泳的原理：电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。

8、离子交换层析的原理：离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。

9、亲和层析的原理：亲和层析是应用生物高分子与配基可逆结合的原理,将配基通过共价键牢固结合于载体上而制得的层析系统。这种可逆结合的作用主要是靠生物高分子对它的配基的空间结构的识别。

10、凝胶过滤层析的原理：一种利用带孔凝胶珠作基质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。凝胶过滤层析具有分子筛效应。

11、吸附层析的原理：组份在吸附剂表面吸附固定相是固体吸附剂,各能力不同而进行分离的方法。

12、透析技术的基本原理及其应用：

13、聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途：①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N，N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物，没有或很少带有离子的侧基，因而电渗作用比较小，不易和样品相互作用。

②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质，在聚合前可调节单体的浓度比，形成不同程度交链结构，其空隙度可在一个较广的范围内变化，可以根据要分离物质分子的大小，选择合适的凝胶成分，使之既有

适宜的空隙度，又有比较好的机械性质。一般说来，含丙烯酰胺7-7.5%的凝胶，机械性能适用于分离分子量范围不1万至100万物质，1万以下的蛋白质则采用含丙烯酰胺15-30%的凝胶，而分子量特别大的可采用含丙烯酰胺4%的凝胶，大孔胶易碎，小孔胶则难从管中取出，因此当丙烯酰胺的浓度增加时可以减少双含丙烯酰胺，以改进凝胶的机械性能。

③在一定浓度范围聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明，易观察，可用检测仪直接测定。

④丙烯酰胺是比较纯的化合物，可以精制，减少污染。合成聚丙烯酰胺凝胶的原料是丙烯酰胺和甲撑双丙烯酰胺。丙烯酰胺称单体，甲撑双丙烯酰胺称交联剂，在水溶液中，单体和交联剂通过自由基引发的聚合反应形成凝胶。

14、按层析过程的机理，层析法分哪几类？按操作形式不同又分哪三类？：根据分离的原理不同分类，层析主要可以分为吸附层析、分配层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。按操作形式不同又分层析可以分为纸层析、薄层层析和柱层析。

15、普通离心机的使用注意事项？：

(1).离心机要置水平位置,以保证旋转轴垂直地球水平面。

(2).使用前应检查套环是否平衡(台称)。

(3).离心杯及其外套(离心管套)是否平衡(台称)。

(4).样品倾入离心杯后应与离心管套一起两两平衡，平衡后把它们放置于转子

的对称位置。

(5).盖好盖子,打开电源开关,调整离心时间。

(6).启动离心时转速应由小至大,缓慢升速(一般要2~3min)。

(7).达到预定转速后再调整离心时间至预定时间(10min)。

(8).离心完成后要调整调速连杆至零位,同时关上电源。

(9).要等到转速为零时才能打开离心机盖,取出样品。

16、可见分光光度计的使用注意事项？：（1）使用过程中比色皿的四个面在槽中保持一定的位置,取用比色皿时手应该捏住四个棱而不能碰到面。比色皿应该避免磨损透光面。

（2）使用过程中不得打开盖子，保持仪器清洁,为避免溶液洒落对仪器造成的腐蚀，所有溶液的配置、倾倒都不要在仪器附近操作。比色皿放进样品池之前必须把外表

面擦干。

（3）当（仅当）操作者错误操作或其他干扰引起微机错误时，应该立即关断主机电源，重新启动，但无须关断灯源电源。

（4）光学器件和仪器运行环境需保护清洁。清洁仪器外表时 ,请勿使用乙醇乙醚等有机溶剂,请勿在工作中清洁,不使用时请加防尘罩。

17、蛋白质含量测定的常用方法有那些？：（1）微量凯式定氮法。（2）双缩脲法。（3）folin －酚试剂法。（4）紫外分光光度法。（5）考马斯亮蓝染色法。

18、粗脂肪的提取和含量测定的基本原理。：脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物, 能溶于脂溶性有机溶剂。本实验用重量法，利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性，用脂溶性溶剂将脂肪提取出来，借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行。通常使用的脂溶性溶剂为乙醚或沸点为30ºC -60 ºC的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外，还含有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故称为“粗脂肪”。

19、索氏提取器是由哪几部分组成的？：提取瓶，提取管和冷凝管三部分组成。

20、粗脂肪的提取和含量测定的简要操作步骤（6分）：1.抽提瓶在105℃±2℃烘箱中烘至恒重，材料干燥至恒重。

2.称取干燥后的材料1-2g,放入研钵中研磨(越细越好)将研磨好的材料用脱脂滤纸包住,用少许脱脂棉擦拭研钵壁上粘的材料及油脂,也一并放入滤纸包. 用棉线拴住滤纸包,将滤纸包放入抽提管，在抽提瓶中加入2/3体积的无水乙醚在70-75℃的水浴上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次，或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。

3 取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部吸完，擦净瓶外壁，将抽提瓶放入105℃±2℃烘箱中烘干至恒重。

21、粗脂肪的提取实验中如何减少误差？（6分）：（1）材料和提取瓶充分干燥。（2）材料尽可能的不损失。(3)提取充分完全。（4）提取后瓶子还要充分的干燥。

22、凯氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分）：样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氨,氨又与硫酸作用变成硫氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品氮的含量.以甘氨酸为例:

1.有机物中的氮在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，消化生成（NH4）2SO4

反应式为： H2SO4==SO2+H2O+[O]

R. CH.COOH+[O]==R.CO.COOH+NH3

NH3

R.CO.COOH+[O]==nCO2+mH2O

2NH3+H2SO4==(NH4)2SO4

2.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于 H3BO3 溶液中。

反应式为: 2NH4++OH-==NH3+H2O

NH3+H3BO3==NH4++H2BO3-

3. 再用已知浓度的HCI标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量。

23、凯氏定氮实验中用到的主要器材有哪些？（6分）：凯氏烧瓶，容量瓶

凯氏定氮装置移液管酸式滴定管分析天平电炉烘箱

24、核酸的含量测定常用的方法有哪些？（6分）（1）紫外分光光度法；

（2）定磷法：钼蓝比色法

（3）定糖法：

RNA+盐酸——糠醛+地衣酚——Ａ670，鲜绿色；

DNA+二苯胺——Ａ595,蓝色化合物

（4）琼脂糖凝胶电泳法

25、双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分）：Lineweaver和Burk将米氏方程改写成倒数形式：

26、双倒数法测定米氏常数的实验中，决定实验成败的因素有哪些？关键因素是什么？（7分）：

27、生物细胞的破碎的常用方法有哪些？（6分）：机械法：研磨，高速捣碎机；物理法：反复冻溶，超声波破碎，压榨法；化学雨生物化学法：自溶，溶胀法，酶解法，有机溶剂处理。

28、酶的制备及提取过程中常注意哪些事项？（6分）：

29、蛋白质的分离常用的方法有哪些？（6分）：1、前处理：选择适当的破碎细胞的方法破碎细胞，组织细胞破碎后，选择适当的介质（一般用缓冲液）把所要的蛋白质提取出来。2、粗分离：当蛋白质混合物提取液获得后，选用一套适当的方法，将所要的蛋白质与其他杂蛋白质分离开来。一般这一步的分级用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这种方法的特点是简便、处理量大，既能除去大量杂质，又能浓缩蛋白质溶液。

3、细分离：也就是样品的进一步提纯，一般使用层析法，包括凝胶过滤层析，离子交换层析，吸附层析以及亲和层析等。必要时还可以选择电泳法。

30、甲醛滴定法测定氨基酸的基本原理（6分）：

31、为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？（6分）：在聚丙烯酰胺凝胶系统中，加入一定量的十二烷基硫酸钠（SDS），形成蛋白质－SDS复合物，这种复合物由于结合了大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态，形成了仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间的天然的电荷差异，此时，蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量大小，而其它因素对电泳迁移率的影响几乎可以忽略不计。当蛋白质的分子量在15000～200000之间时，电泳迁移率与分子量的对数值呈直线关系，符合下列方程：

㏒10Mr = －b·mR + K

32、连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同？（6分）：不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳包含了两种以上的缓冲液成分、pH值和凝胶孔径，而且在电泳过程中形成的电位梯度亦不均匀。由此产生的浓缩效应、电荷效应和分子筛效应。

33、聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点？（6分）：①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N，N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物，没有或很少带有离子的侧基，因而电渗作用比较小，不易和样品相互作用。

②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质，在聚合前可调节单体的浓度比，形成不同程度交链结构，其空隙度可在一个较广的范围内变化，可以根据要分离物质分子的大小，选择合适的凝胶成分，使之既有适宜的空隙度，又有比较好的机械性质。一般说来，含丙烯酰胺7-7.5%的凝胶，机械性能适用于分离分子量范围不1万至100万物质，1万以下的蛋白质则采用含丙烯酰胺15-30%的凝胶，而分子量特别大的可采用含丙烯酰胺4%的凝胶，大孔胶易碎，小孔胶则难从管中取出，因此当丙烯酰胺的浓度增加时可以减少双含丙烯酰胺，以改进凝胶的机械性能。

③在一定浓度范围聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明，易观察，可用检测仪直接测定。

④丙烯酰胺是比较纯的化合物，可以精制，减少污染。合成聚丙烯酰胺凝胶的原料是丙烯酰胺和甲撑双丙烯酰胺。丙烯酰胺称单体，甲撑双丙烯酰胺称交联剂，在水溶液中，单体和交联剂通过自由基引发的聚合反应形成凝胶。

34、琼脂糖凝胶电泳的优点？（6分）：（1）琼脂含液体量大，可达98-99%，近似自由电泳，但是样品的扩散度比自由电泳小，对蛋白质的吸附极微。（2）琼脂作为支持体有均匀，区带整齐，分辨率高，重复性好等优点。（3）电泳速度快。（4）透明而不吸收紫外线，可以直接用紫外检测仪作定量测定。（5）区带易染色，样品易回收，有利于制止备。然而琼脂中有较多硫酸根，电渗作用大。琼脂糖是从琼脂中提取出来的，是由半乳糖和3.6-脱水-L- 半乳糖相互结合的链状多糖。含硫酸根比琼脂少，因而分离效果明显提高。琼脂（糖）电泳常用缓冲液的pH在6-9之间，离子强度为0.02-0.05。离子强度过高时，会有大量电流通过凝胶，因而产生热量，使凝胶的水份量蒸发，析出盐的结晶，甚至可使凝胶断裂，电流中断。常用的缓冲液有硼酸盐缓冲液与巴比妥缓冲液。为了防止电泳时两极缓冲液槽内pH和离子强度的改变，可在每次电泳后合并两极槽内的缓冲液，混匀后再用。

35、提取某种植物组织中的总DNA时，使用的细胞提取液中的主要试剂成分是什么？各有什么作用？（7分）：

36、如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA？（6分）：（1）用定糖法检测。（2）用紫外分光光度计检测。（3）用琼脂糖凝胶电泳检测。等

37、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时，使用的电泳缓冲液PH＝8.3，那么样品应点在哪端？为什么？（6分）：样品应点在负极端，因为电泳缓冲液PH＝8.3，在这样的环境中，血清蛋白的几种蛋白质电离后都带上负电荷，所以只有点样在负极端，外加电压后，才能向正极移动，彼此才能分开。

38、说明纸层析和离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质? 列出纸层析和柱层析的一般操作步骤。（10分）

纸层析是分配层析，利用分配系数不同，即氨基酸在两相中的溶解能力不同。离子交换层析利用氨基酸是两性物质，在一定pH下不同氨基酸带电性质和带电量不同，因此交换能力不同。

纸层析步骤：滤纸准备、样品处理、点样、平衡、展开、显色和定性定量分析。柱层析步骤：固定相准备、装柱、上柱、洗脱和收集、定性定量分析。

39、试述凝胶层析原理，说明凝胶层析的应用并列出常用凝胶名称（10分）。：凝胶层析柱装有多孔凝胶，当含有各组分的混合液流经凝胶层析柱时，各组分在层析柱内同时进行两种不同的运动。一种是随着溶液流动而进行的垂直向下的移动，另一种是无定向的分子扩散运动。大分子物质由于分子直径大，不能进入凝胶微孔，只能分布于凝胶颗粒的间歇中以较快速度流过凝胶柱。较小的分子能进入凝胶微孔，不断进出一个个颗粒的微孔内外，因此流动速度较慢，从而使混合溶液中各组分按照相对分子量由大到小顺序先后流出层析柱得到分离。

应用：不同分子量蛋白质分离、蛋白质分子量测定、蛋白质脱盐等。

常用凝胶：葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶。

39、凝胶电泳的一般操作步骤（11分）：制胶，加入电泳缓冲液，加样，电泳，剥胶，染色，脱色。

40、普通离心机的使用操作（示范）（10分）

41、可见分光光度计的使用操作（示范）（10分）

42、如果要105摄氏度干燥某种物质，如何使用干燥箱（示范）? （10分）

43、要称取某种药品2.0g，如何使用天平（示范）？（10分）

44、要配制500ml 0.01mol/L的NaOH溶液应如何配制？（10分）

答：准确称量0.2gNaOH用少量蒸馏水溶解，然后转入500ml的容量瓶中，再用蒸馏水少量多次（至少3次）洗涤烧杯，都转入容量瓶中，最后定容至刻度线，盖好容量瓶后混匀即可。

45、配制1L 0.01mol/L的HCl溶液应如何配制（已知浓盐酸比重是1.19g/L，重量百分比浓度为36.5％）？（11分）

根据公式：V1=B*C2*V2/（S*P）

其中：V1----浓酸应取量ml

B-----酸的摩尔质量g/mol

C2----欲配置溶液物质的量浓度mol/L

V2----欲配置溶液的体积L

S----浓酸的密度g/ml

P----浓酸的百分含量

1000ML0.01mol/L的HCl标液

那么V1=（36.5*0.01*1000）/（1.19*36.5%）=？

量取浓盐酸ml，加水稀释至1L即可。

46、分别配制出10µg/ml，5µg/ml，2µg/ml，1µg/ml的DNA标准溶液，应如何配制？（尽可能节约）（10分）

生物化学实验考试试题

1．1M硫酸如何配制？

2．1M盐酸如何配制？

3．1M氢氧化钠如何配制

4．蛋白质定量测定的方法有哪些？简要说明其原理

5．索氏提取法提取的为什么是粗脂肪？

6．通过本实验你掌握了几种鉴定蛋白质和氨基酸的方法?它们的原理是什么?

7．何谓蛋白质的等电点和沉淀反应？有何实用意义？

8．何谓纸层析法？

9．何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么

10．试述几种蛋白质含量的测定方法。

11．怎样制备扩展剂？

12．721分光光度计使用时应注意什么？

13．721分光光度计预热时为何要把比色室盖打开，能否用721测定紫外吸收？

14．可见光波长范围为多少？

15．如何用10.0mg/ml的蛋白质溶液配成300μg/ml蛋白质溶液？16．紫外比色的比色杯有何要求？

17．紫外比色法有何优点？

18．如何判断比色法测定底物浓度时所用的波长？

19．层析缸中平衡溶剂的作用是什么？

20．福林（Folin）—酚法测定蛋白质浓度的测定范围是多少？

21．什么是酶的最适温度及其应用意义？

22．紫外吸收法测定蛋白质浓度的原理是什么？

23．什么是酶反应的最适pH？pH对酶活性有什么影响？

24．什么是酶的活化剂？

25．什么是酶的抑制剂？与变性剂有何区别？本实验结果如何证明酶的专一性？

26．如何使用电子天平？

27．使用721分光光度计应注意哪些事项？

28．95%的乙醇如何配制成70%的乙醇？

29．40%的氯化纳如何配制？

30．电泳时所使用的前沿指示剂是什么？其作用是什么？

31．PAGE的原理是什么？

32．电泳时12个泳道是否均可用？

33．何为浓缩效应？

34．蛋白质浓度测定时样品配置时浓度为0.1mg /ml，测得结果为0.08mg /ml，说明了什么？

35．什么是波长扫描？

36．如何用10.0 mg /ml的蛋白母液，配成0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mg /ml的标准蛋白溶液？

37．用紫外吸收法测定蛋白浓度时，同样浓度的不同蛋白质，光密度值是否一定相等？

38．蛋白质的紫外波长扫描时，200nm处有一吸收峰，为什么？

39．若某实验获得的蛋白样品极少，还需有他用，如何测蛋白质浓度？40．什么是凝胶电泳的分子筛效应？

42．PAGE电泳与葡聚糖凝胶层析的分子筛效应一样吗？

43．对电泳所得的结果如何进行定量分析？

44．在等电点时蛋白质的溶解度为什么最低?试结合你的实验结果加以说明。45．在本试验中，酪蛋白处于等电点时则从溶液中沉淀析出，所以说凡是蛋白质在等电点时必然沉淀出来，上面这种结论对吗？为什么？请举例说明。

46．甲醛滴定时，加入氢氧化钠溶液滴定的是氨基，而不是羧基，为什么？

47．在电泳样品处理中加入40%蔗糖溶液的作用是什么？

48．Acr、Bis、Tris的全称什么？

49．SDS-PAGE能否用来制备蛋白质样品(分离纯化)?

50. 光聚合的催化剂是什么，什么时候用光聚合?

51. 化学聚合的催化剂是什么？什么时候用化学聚合?

52．凝胶的化学聚合与光聚合有何不同？

53．SDS-PAGE中SDS与蛋白质结合后引起哪些变化?

54．SDS-PAGE样品缓冲液中巯基乙醇的作用是什么?

55．SDS-PAGE中加入SDS的作用是什么?

56．TEMED的全称是什么？它在电泳时起什么作用？

57．电泳时决定凝胶浓度的参数是什么？

58．称量试剂，应用那种纸？

59．如何确定某一待测有色物的最大吸收峰?

60．什么叫波长扫描?

61．721型分光光度计的应用范围，及使用方法。

62．PAGE的不连续系统的意义是什么?

63．在肝脏中提取DNA时为什么要加EDTA？加入SDS有什么作用？64．何为定性实验和定量实验，它们有什么区别

65．若配制常用酸，标签上有重量百分比，还需什么条件可算出摩尔浓度? 66．说说分析实验结果的基本步骤？

67．怎样配制pH为7.8的磷酸缓冲液？

68．在你设计的试验中,如果实验室没有紫外-可见分光光度计，能否用721-分光光度计？

69．请你设计一个连续性的实验，从大豆中提取大豆球蛋白(提取、分离、纯化、检验)。

70．蛋白质电泳泳带出现拖尾现象，你认为是什么原因?

71．蛋白质电泳分离蛋白质电泳条带集中在负极且分不开，你认为是什么原因, 应做什么调整?

72．何谓消化？如何判断消化终点？

73．凯氏定蛋样品消化时，加入粉末硫酸钾-硫酸铜混合物的作用是什么？

74．固体样品为什么要干燥？

75．如何证明蒸馏器洗涤干净？

76．蒸馏时冷凝管下端为什么要浸在液体中？

77．实验中应如何避免误差？

78．凯氏定蛋实验中，怎样判断所加的NaOH是足够量的？

79．凯氏定蛋测得的蛋白质是什么蛋白质？

80．在利用醋酸纤维膜电泳分离血清蛋白时，要将点样端靠近负极，这是什么道理。81．测定米氏常数时，我们使用的酶和底物各是什么？用什么来终止反应？

82．酶促反应的初速度与底物什么有关系？

83．测定蛋白质紫外吸收的波长一般是多少, 为什么可以用紫外法测定蛋白质浓度。

84．我们实验中所用的离心机的最大转速是多少？

85．离心机的转子一般分为角转子、连续转子、垂直转子和甩平转子，你在实验中用的是什么类型的转子？

86．试述双缩脲法定量测定蛋白质含量的原理。

87．试述紫外法定量测定蛋白质含量的原理。

88．试述考马斯亮兰法定量测定蛋白质含量的原理。

89．使用离心机时离心管一定要平衡吗？

90．指出下列试剂的作用：

(1)消化含氮样品时使用的浓硫酸、硫酸钾及硫酸期粉末。

(2)蒸馏滴定中的30%氢氧化钠溶液、2％硼酸溶液及2％硼酸溶液中的指示剂。91．连续电泳和不连续电泳的区别是什么？

92．如何通过凝胶电泳测定蛋白质的分子量？

93．试述分子筛的基本原理。

94．电泳的Rf值如何计算？

95．在SDS—PAGE凝胶电泳实验中，为什么要加SDS，它有什么作用？

96．在绘制标准曲线时，应注意些什么？

97．你还知道其它电泳方法吗?

98．在化学实验中你的实验能力、观察能力及实验设计能力有提高吗？还有什么不足？

99．在生化实验中你都使用过什么仪器？是否全部掌握？如果没有原因是什么？

100．通过这门实验课，你觉得掌握了什么知识？还有什么建议？

生物化学实验习题及参考答案

生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的？（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、?-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用? D、沉淀作用? 10、有关变性的错误描述为（） A、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变 B、蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性改变 C、 加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易沉淀 11、双链DNA热变性后（） A、黏度下降 B、沉降系数下降 C、浮力密度下降 D、紫外吸收下降 12、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（） A、天冬氨酸 B、脯氨酸 C、赖氨酸 D、丝氨酸 13、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？（） A、His的咪唑基 B、Arg的胍基 C、Cys的巯基 D、Trp的吲哚基

17181食品生物化学实验考试试题库 1

17181食品生物化学实验考试试题库 1本学期做过的实验中涉及物质含量测定的有几个，幷说出实验名称及其测定原理。答：有蛋白质含量、样品中的含糖量这两个；涉及蛋白质含量的试验有双缩脲法测定蛋白质浓度、紫外线吸收法和微量凯氏定氮法；样品中含糖量涉及的试验是总糖和还原糖的测定； 双缩脲法测蛋白原理：具有两个或两个以上的肽键化合物特有双缩脲反应，在碱性溶液中与铜离子形成紫色配合物，在540mm处有最大吸收，在一定浓度范围内蛋白质浓度与双缩脲反应所呈的颜色深浅成正比，可用比色法定量测定。 紫外吸收法原理：由于蛋白质中的酪氨酸，色氨酸，苯丙氨酸含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，吸收峰在280nm左右。 微量凯氏定氮法测定原理：凯氏定氮也称克氏定氮，样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氨(消化)，氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。 总糖和还原糖的测定试验原理：还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3，5—二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3—氨基—5—硝基水杨酸，再过量的氢氧化钠碱性溶液中此化合物呈橘红色在540mm处，一定浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系利用比色法可测定样品中的含糖量。 2、测定蛋白质含量的实验有哪些？幷说明测定原理。 答：紫外吸收法测蛋白质含量原理：蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸残基，使蛋白质在280nm处有最大吸收峰。在一定浓度范围内，蛋白质溶液280nm吸光度与蛋白质浓度成正比，可以用这一性质用作蛋白质定量测定 凯氏定氮法测蛋白质含量原理：有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵.硫酸铵与强碱反应,放出氨.将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定.根据测得的氨量,计算样品的总氮量. 双缩脲：双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2)在碱性溶液中可与铜离子产生紫红色的络合物，这一反应称为双缩脲反应 3、紫外吸收法测蛋白质含量与双缩脲法测蛋白质含量都使用了分光光度计，二者在使用方法上有何不同？幷指出这两种方法的优缺点？ 答：紫外吸收法测得是260nm和280nm的吸光度，本方法对测定微量蛋白质的测定即快又方便，它还适用于硫酸铵或其他盐类混杂的情况下，这时用其他方法测定则比较困难。此方法有时会产生误差。 双缩脲法测蛋白质测得是540nm处吸光度，此方法最常用于需要快速但不要求十分精确得测定。硫酸铵不干扰此反应，铜离子容易被还原，有时会出现红色沉淀。 4、使用分光光度计测物质含量时为什么要有空白管？对空白管所装物质有何要求？ 使用分光光度计测物质之外含有一样的组分,以此来做标准,然后被测定样品吸收的单色光与之进行对比得到的测量数据。

生物化学考试试题含参考答案

生物化学考试试题含参考答案 1、酶活性是指（） A、酶所催化的反应 B、无活性的酶转变为有活性的酶 C、酶与底物的结合力 D、酶的催化能力 E、酶必需基团的解离 答案：D 2、与珠蛋白结合的是( ) A、血红素 B、胆绿素 C、胆红素 D、胆素原 E、胆素 答案：A 3、能对单链DNA起稳定作用的（） A、半保留复制 B、SSB蛋白 C、DNApoll D、逆转录 E、DNA连接酶 答案：B 4、电子传递过程中主要的调节因素是（） A、ATP/ADP B、FADH2 C、Cyt b D、NADH E、O2 答案：A 5、DNA解链达到50%时的温度（） A、增色效应 B、减色效应 C、爆发式 D、渐进式 E、熔点

6、下列关于呼吸链的叙述哪项是错误的（） A、复合体Ⅲ和Ⅳ为两条呼吸链共有 B、可抑制Cytaa3阻断电子传递 C、递氢体只递氢，不传递电子 D、Cytaa3结合较紧密 E、ATP的产生为氧化磷酸化 答案：C 7、1，3-二磷酸甘油酸的前体是( ) A、磷酸烯醇式丙酮酸 B、2-磷酸甘油酸 C、磷酸二羟丙酮 D、3-磷酸甘油醛 E、6-磷酸葡萄 答案：D 8、关于糖的有氧氧化下述哪项是错误的( ) A、产物是二氧化碳和水 B、是细胞获得能量的主要方式 C、三羧酸循环是三大营养物质相互转变的途径 D、有氧氧化在胞浆中进行 E、一分子葡萄糖氧化时可产生30或32分子ATP 答案：D 9、在下列反应中，以下哪项是可逆反应( ) A、己糖激酶 B、葡萄糖激酶 C、磷酸甘油酸激酶 D、6-磷酸果糖激酶-1 E、丙酮酸激酶 答案：C 10、体内生成促红细胞生成素的主要器官是（） A、肝 B、肺 C、肾 D、胰 E、小肠

临床生物化学测试题及参考答案

临床生物化学测试题及参考答案 一、单选题（共80题，每题1分，共80分） 1、血小板在静息状态下不表达，激活后表达的是 ( ) A、P-选择素 B、GPIb/IX复合物 C、GPIa/IIa复合物 D、GPIIb/IIIa复合物 正确答案：A 2、不属于贫血形态学分类的是 ( ) A、小细胞低色素性贫血 B、增生性贫血 C、大细胞性贫血 D、大细胞不均一性贫血 正确答案：B 3、缺铁性贫血外周血常见 ( ) A、球形红细胞 B、红细胞缗钱状 C、靶形红细胞 D、小细胞低色素性红细胞 正确答案：D 4、一病人怀疑自己在近一周来服用了一种含铅的药，要求给他进行检验，以了解是否对健康有害。你将优先采集哪种生物样品。( ) A、汗液 B、头发 C、血液 D、指甲 正确答案：C 5、妊娠妇女血清黄体酮水平降低可见于( )。 A、异位妊娠 B、葡萄胎 C、妊娠期糖尿病 D、多胎妊娠 正确答案：A 6、对不同蛋白质反应性一致的测定方法是( )。

A、紫外分光光度法 B、比浊法 C、酚试剂法 D、双缩脲法二、多项选择题 正确答案：D 7、胰岛素的化学本质是 ( ) A、蛋白质 B、氨基酸衍生物 C、脂肪酸衍生物 D、类固醇 正确答案：A 8、胎盘合成雌激素的前体物质为( )。 A、胆固醇 B、DHEAS C、6a-OH-DHEAS D、17-羟黄体酮 正确答案：B 9、过氧化物酶染色强阳性的白血病是 ( ) A、急性红白血病 B、急性粒细胞白血病 C、急性单核细胞白血病 D、多毛细胞白血病 正确答案：B 10、气溶胶是指( )。 A、空气中颗粒物 B、空气中液滴 C、空气中粉尘 D、颗粒物悬浮在空气中形成的分散体系正确答案：D 11、以下非PNH的临床表现的选项为 ( ) A、反复血栓形成 B、与睡眠有关的阵发性溶血发作 C、血红蛋白尿 D、出现神经系统症状

考试试题

1.组成白质的氨基酸在自然界存在什么差异_____E_______. A.种族差异 B.个体差异 C.组织差异 D.器官差异 E.无差异 2.血浆γ-球蛋白的等点电在什么范围内___C_________. A.5.3 B.5.3-6.3 C.6.3-7.2 D.7.2-8.2 E.7.2 3.测定酶活性常用的方法是：_____D_______. A.分离提纯酶蛋白，称取重量核算酶活性 B.测定酶蛋白在280nm处紫外吸收值，计算酶活性 C.测定最适条件下完成酶促反应所需的时间 D.测定最适条件下一定量的血清中的酶单位时间催化底物减少或产物增加量 E.以上都不对 4. 泛酸是下列那种酶辅酶的组成成分______E______. A.FMN B.NAD+ C.NADP+ D.TPP E.CoASH 5.在形成酶-底物复合物时_______B_____. A.酶的构象和底物构象都发生变化 B.主要是酶的构象发生变化 C.主要是底物的构象发生变化 D.主要是辅酶的构象发生变化 E.酶和底物构象都不发生变化 6.胆囊中有限量胆汁酸之所以能发挥最大限度乳化食物中脂肪的作用原因是 __D__________. A.饭后胆汁酸立即一次全部倾入小肠 B.饭后胆汁酸缓慢地分泌到小肠 C.饭后可进行一次胆汁酸肠肝循环 D.饭后可进行2-4次胆汁酸肠肝循环 E.饭后肝内立即加速胆汁酸的生成，以满足乳化脂肪的需要 7."分子病"首先是蛋白质什么基础层次结构的改变____A________. A.一级 B.二级 C.超二级 D.三级 E.四级 8.胰岛素分子由二条肽链共多少氨基酸残基组成_____D_______. A.20 B.31 C.39 D.51 E.80 9.胰岛素分子中链间二硫键有几个______B______. A.1 B.2 C.3 D.4 E.5 10.下列哪一项不是Km值的意义___E_________.

生物化学实验试题与答案

生物化学实验考核试题库 一、理论考核题 1盐析和盐溶（3分）2电泳（3分）3层析（色谱）（3分）4酶的活力单位（3分）5比活力（3分）6分子筛效应（3分）7电泳的原理（4分） 8离子交换层析的原理（4分）9亲和层析的原理（4分） 10凝胶过滤层析的原理（4分） 11吸附层析的原理（4分） 12透析技术的基本原理及其应用（4分） 13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途（6分） 14按层析过程的机理，层析法分哪四类按操作形式不同又分哪三类（7分） 15普通离心机的使用注意事项（6分） 16可见分光光度计的使用注意事项（6分） 17蛋白质含量测定的常用方法有那些（6分） 18粗脂肪的提取和含量测定的基本原理（6分） 19索氏提取器是由哪几部分组成的（6分） 20粗脂肪的提取和含量测定的简要操作步骤（6分） 21粗脂肪的提取实验中如何减少误差（6分） 22凯氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分） 23凯氏定氮实验中用到的主要器材有哪些（6分） 24核酸的含量测定常用的方法有哪些（6分） 25双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分） 26双倒数法测定米氏常数的实验中，决定实验成败的因素有哪些关键因素是什么（7分）27生物细胞的破碎的常用方法有哪些（6分） 28酶的制备及提取过程中常注意哪些事项（6分） 29蛋白质的分离常用的方法有哪些（6分） 30甲醛滴定法测定氨基酸的基本原理（6分） 31为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量（6分） 32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同（6分） 33聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点（6分） 34琼脂糖凝胶电泳的优点（6分） 35提取某种植物组织中的总DNA时，使用的细胞提取液中的主要试剂成分是什么各有什么作用（7分） 36如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA（6分） 37聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白时，使用的电泳缓冲液PH＝，那么样品应点在哪端为什么（6分） 二、技能或实验操作考核题 38说明纸层析和离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质列出纸层析和柱层析的一般操作步骤。（10分） 39凝胶电泳的一般操作步骤（11分） 40普通离心机的使用操作（示范）（10分） 41可见分光光度计的使用操作（示范）（10分） 42如果要105摄氏度干燥某种物质，如何使用干燥箱（示范）（10分） 43要称取某种药品，如何使用天平（示范）（10分）

生物化学实验考试试题(完整版)

生物化学实验 二、填空题： 1. 测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法)，(紫外吸收法)，( Folin-酚试剂法（或Lowry法）)和（考马斯亮蓝G-250染色法）。 2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以（以一定时间内分解的H2O2量）来表示，当CA T 与H2O2反应结束，再用（碘量法）测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以（聚丙烯酰胺凝胶）作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由（Acr）和交联剂（Bis）在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备（分离）胶，其自由基的引发剂是（Ap），催化剂是（TEMED）；光聚合法适于制备大孔径的（浓缩）胶，催化剂是（核黄素）。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：（吸附层析），（分配层析），（离子交换层析），（凝胶层析）和（亲和层析）。 5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管（等重）且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S的亲合力愈（大），Km愈大，表示E对S 的亲合力愈（小）。 7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必须__（打开）____（打开、合上）样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的（抗逆性）密切相关。 9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成的，在具有自由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：（化学法）和（光聚合法）。 11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：（柱层析），（纸层析），（薄层层析）和（薄膜层析）。 参考答案： 生物化学实验 一、名词解释： 1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。 4、酶活性：酶催化化学反应的能力，往往以酶促反应的初速度表示。 5、分光光度法：基于溶液对光吸收的大小来确定被测组份的含量的分析方法称为分光光度法或吸光光度法。 6、层析技术：是利用被分离的混合物中各组分的理化性质（分子的形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分配系数等）的不同，使各组分以不同程度在流动相和固定相中进行分配，最终达到分离目的。 7、比活力：即每毫克酶蛋白所含酶的活力单位数。比活力高，表示酶纯度高。 二、填空题： 9. 丙烯酰胺单体（Acr），N，N’-甲叉双丙烯酰胺（Bis）

生物化学试题库(试题库 答案及解析)

生物化学试题库及其答案——糖类化学 一、填空题 1。纤维素是由________________组成，它们之间通过________________糖苷键相连。 2.常用定量测定还原糖的试剂为________________试剂和 ________________试剂。 3.人血液中含量最丰富的糖是________________,肝脏中含量最丰富的糖是________________,肌肉中含量最丰富的糖是________________. 4。乳糖是由一分子________________和一分子________________组成，它们之间通过________________糖苷键相连。 5.鉴别糖的普通方法为________________试验。 6。蛋白聚糖是由________________和________________共价结合形成的复合物. 7。糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛（或缩酮)等形式的化合物。 8.判断一个糖的D—型和L—型是以________________碳原子上羟基的位置作依据. 9。多糖的构象大致可分为________________、________________、 ________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是 ________________。

二、是非题 1.[ ］果糖是左旋的，因此它属于L-构型。 2.［ ]从热力学上讲，葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳定。 3.[ ]糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端,所以它们都有还原性. 4。[ ]同一种单糖的α—型和β—型是对映体。 5.［ ]糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋. 6.[ ］D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖，后者存在于自然界。 7.［ ]D—葡萄糖,D—甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。 8.［ ]糖链的合成无模板,糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 9.［ ]醛式葡萄糖变成环状后无还原性。 10。[ ］肽聚糖分子中不仅有L—型氨基酸，而且还有D—型氨基酸。 三、选择题 1。［ ]下列哪种糖无还原性？ A。麦芽糖 B。蔗糖 C.阿拉伯糖 D。木糖 E.果糖 2.[ ］环状结构的己醛糖其立体异构体的数目为 A.4 B。3 C。18 D。32 E.64 3.[ ]下列物质中哪种不是糖胺聚糖？ A.果胶 B。硫酸软骨素 C。透明质酸 D.肝素 E。硫酸粘液素

临床生物化学检验测试题(含答案)

临床生物化学检验测试题（含答案） 一、单选题（共100题，每题1分，共100分） 1、人体含ALT最丰富的组织是 ( ) 。 A、肝细胞 B、心肌 C、骨骼肌 D、白细胞 E、肾脏 正确答案：A 2、检测葡萄糖的特异性最高的方法是 ( ) 。 A、4种方法特异性没有区别 B、硫酸铜还原法 C、己糖激酶法 D、葡萄糖氧化酶法 E、邻甲苯胺法 正确答案：C 3、标本存放于冰箱一天后测定可造成 ( ) 。 A、血Na＋升高 B、血Cl－升高 C、血K＋升高 D、血Cl－升高 E、血K＋不变 正确答案：C 4、导致嘌呤分解增加的疾病不包括 ( ) 。 A、髓外浆细胞瘤 B、多发性骨髓瘤 C、白血病 D、红细胞增多症 E、甲减腺功能减退症 正确答案：E 5、不参与血液pH平衡调节的是 ( ) 。 A、神经系统的调节 B、血液的缓冲系统调节 C、肺对CO2排出的调节

D、每日饮水量、尿的调节 E、肾脏对酸碱物质排出的调节 正确答案：D 6、所谓选择性蛋白尿是 ( ) 。 A、肾小球有选择性地保留了尿中的蛋白 B、分子量<70 000的蛋白可通过肾小球滤过及出现在尿中 C、肾小管有选择性地重吸收了尿中的蛋白 D、尿蛋白定性阴性 E、分子量>70 000的蛋白可通过肾小球滤过及出现在尿中 正确答案：B 7、胆固醇可衍生成 ( ) 。 A、TSH B、ACTH C、肾上腺髓质激素 D、肾上腺皮质激素 E、前列腺素 正确答案：D 8、利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是 ( ) 。 A、吸附层析法 B、离子交换层析法 C、凝胶层析法 D、分配层析法 E、亲和层析法 正确答案：B 9、进行总钙和离子钙测定时，不能采用的标本为 ( ) 。 A、晨尿 B、肝素抗凝血浆 C、血清 D、脑脊液 E、EDTA抗凝血浆 正确答案：E 10、细胞间液与血浆组成成分的主要差别是 ( ) 。 A、阳离子种类

生物化学实验试题与答案

生物化学实验试题与答案 生物化学实验考核试题库 一、理论考核题 1盐析和盐溶（3分后）2电泳（3分后）3层析（色谱）（3分后）4酶的活力单位 （3分后）5比活力（3分后）6分子筛效应（3分后）7电泳的原理（4分后）8色谱法层 析的原理（4分后）9亲和层析的原理（4分后）10凝胶过滤器层析的原理（4分后） 11吸附层析的原理（4分） 12输血技术的基本原理及其应用领域（4分后） 13聚丙烯酰胺凝胶电泳的主要优点及用途（6分） 14按层析过程的机理，层析法分哪四类？按操作方式形式相同又分哪三类？（7分后）15普通离心机的采用注意事项？（6分后）16可知分光光度计的采用注意事项？（6分后）17蛋白质含量测量的常用方法存有那些？（6分后）18粗脂肪的抽取和含量测量的基本原理（6分后）19索氏抽取器就是由哪几部分共同组成的？（6分后）20粗脂肪的抽取和含 量测量的详细操作步骤（6分后）21粗脂肪的抽取实验中如何增加误差？（6分后）22凯 氏定氮法测定总氮量的基本原理（6分后）23凯氏定氮实验中使用的主要器材存有哪些？（6分后）24核酸的含量测量常用的方法存有哪些？（6分后） 25双倒数法测定米氏常数的基本原理（6分） 26双倒数法测定米氏常数的实验中，同意实验胜败的因素存有哪些？关键因素就是什么？（7分后） 27生物细胞的破碎的常用方法有哪些？（6分）28酶的制备及提取过程中常注意哪些事项？（6分）29蛋白质的分离常用的方法有哪些？（6分） 30甲醛滴定法测量氨基酸的基本原理（6分后） 31为什么sds－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？（6分）32连续聚丙烯酰胺凝胶电泳与不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么不同？（6分）33聚丙烯酰胺凝胶电泳的优点？（6分）34琼脂糖凝胶电泳的优点？（6分） 35抽取某种植物非政府中的总dna时，采用的细胞提取液中的主要试剂成分就是什么？各存有什么促进作用？（7分后） 36如何证明提取到的某种核酸是dna还是rna？（6分） 37共聚丙烯酰胺凝胶电泳拆分血清蛋白时，采用的电泳缓冲液ph＝8.3，那么样品应 当点在哪端的？为什么？（6分后）

生化实验试题参考

生化实验试题参考 生物化学实验 二、填空题： 1. 测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法)， (紫外吸收法)，( Folin-酚试剂法（或Lowry法） )和（考马斯亮 蓝G-250染色法）。 2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以（以一定时间内分解的H2O2量）来表示，当CAT 与H2O2反应结束，再用（碘量法）测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以（聚丙烯酰胺凝胶）作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由（Acr）和交联剂（Bis）在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备（分离）胶，其自由基的引发剂是（Ap），催化剂是（TEMED）；光聚合法适于制备大孔径的（浓缩）胶，催化剂是（核黄素）。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：（吸附层析），（分配层析），（离子交换层析），（凝胶层析）和（亲和层析）。 5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管（等重）且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S 的亲合力愈（大），Km愈大，表示E对S 的亲合力愈（小）。

7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必 须__（打开）____（打开、合上）样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植 物的（抗逆性）密切相关。 9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流 动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而 成的，在具有自 由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：（化学法）和（光聚合法）。 11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：（柱层析），（纸层析），（薄层层析）和（薄 膜层析）。 参考答案： 生物化学实验 一、名词解释： 1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极 方向移动的现象。 2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结 构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的 分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。

临床生物化学检验理论考核试题

临床生物化学检验理论考核试题 一、选择题 1. 胰岛素由何种细胞分泌（）[单选题] * A. 胰岛α细胞 B. 胰岛β细胞√ C. 胰腺δ细胞 D. 胰岛α细胞和β细胞 E. 皆不是 2. 有关1型糖尿病的叙述错误的是（）[单选题] * A. 胰岛β细胞的破坏 B. 胰岛素绝对不足 C. 常见于青少年 D. 常检出自身抗体 E. 胰岛素抵抗√ 3. 有关2型糖尿病的叙述错误的是（）[单选题] * A. 胰岛β细胞的功能减退 B. 胰岛素相对不足 C. 常见于肥胖的中老年成人 D. 常检出自身抗体√ E. 胰岛素抵抗

4. 当血糖超过肾糖阈值时，可出现（）[单选题] * A. 生理性血糖升高 B. 病理性血糖升高 C. 生理性血糖降低 D. 病理性血糖降低 E. 尿糖√ 5. 测定血糖的标本最常采用的抗凝剂和防腐剂组合是（）[单选题] * A. 碘乙酸钠-EDTA.Na2 B. 叠氮钠-肝素锂 C. 氟化钠-草酸钾√ D. 氟化钠-肝素钠 E. 冰醋酸-肝素 6. 随机血糖的参考值范围为（）[单选题] * A. 2.8~7.8mmol/L B. 3.89~6.11mmol/L√ C. 4.5~5.9mmol/L D. 7.0~11.1mmol/L E. <11.1mmol/L 7. 血糖测定的常规方法是（）[单选题] * A. 己糖激酶法 B. 葡萄糖氧化酶法√ C. Follin-Wu法

D. 邻甲苯胺法 E. 同位素稀释-质谱分析法 8. 血糖测定的参考方法是（）[单选题] * A. 己糖激酶法√ B. 葡萄糖氧化酶法 C. Follin-Wu法 D. 邻甲苯胺法 E. 同位素稀释-质谱分析法 9. 反映机体即时葡萄糖水平的是（）[单选题] * A. 空腹血糖√ B. 晚期糖基化终末产物 C. 精化白蛋白 D. HbA1c E. 空腹胰岛素 10. 在糖精尿病前期（）[单选题] * A. HbA1c介于5.7%-6.4%√ B. HbA1c介于4%-6% C. HbA1c介于6%-7% D. HbA1c介于7%-8% E. HbA1c介于8%-9% 11. 常用来分析同工酶的方法是（）[单选题] * A. 电泳法√

临床生化化学及检验肿瘤的生物化学检验试题库

临床生化化学及检验肿瘤的生物化学检验试题库 一、单选题： 1.下列关于肿瘤的描述错误的是： A.细胞的无控制异常增生是肿瘤的特性之一。 B.肿瘤细胞是正常细胞在各种致瘤因子长期作用下，发生异常分化和过度无限和生长。 C.人体正常细胞被病素感染，病毒的全部或部分基因整合到细胞基因组中形成肿瘤细胞。 D.基因调控失常和是肿瘤发生的条件。 E.正常免疫功能缺损，肿瘤细胞逃避免疫监视才能生存与发展。 2.关于癌基因： A.存在于逆转录病毒中的，感染细胞能融合到宿主细胞内并引起肿瘤的一类基因。 B.原癌基因受到多种致瘤因子作用，激活形成癌基因。 C.癌细胞内形成的特定基因，它们使细胞具有无限增殖、侵袭、转移功能。 D.用分子技术敲除癌基因，就可避免肿瘤发生。 E.只要有癌基因存在，肿瘤迟早会发生，应对此类人群加强

体检。 3.下列基因中，属于抑癌基因的是 A. RB B. H-ras C. c-myc D. abl E. N-ras 4.肿瘤标志物是 A.癌细胞产生的物质，它的存有助于癌细胞的生长、增殖和转移。 B.机体对肿瘤发生的反应性物质。 C.癌细胞产生的，正常细胞没有或含量很低的物质，或宿主细胞对癌细胞反应产生的正常细胞成份，但在量上或质上与正常或良性疾病有明显区别。 D.癌基因的表达产物。 E.肿瘤细胞特有的物质，是肿瘤诊断的依据。 5.曾作为肝癌高发区筛选普查的肿瘤标志物是A.CEA

B.AFP C.CA19-9 D.AFU E.CA125 6.属于胚胎性抗原的是：A.CA15-3 B.AFU C.CEA D.PSA E.H-ras 7.肝细胞癌、胃癌、结肠直肠癌和胰癌时均有可能升高的肿瘤标志物是 A.HCG B.AFU C.CA125 D.Scc E.CEA 8.不属于糖蛋白肿瘤标志是：A.CA125 B.CA19-9 C.TAG72 D.HCG E.Scc 9.常用于乳癌诊断联合检测的是： A.CA125, CEA B.CA19-9, CA15-3 C.NSE, CEA D.CA15-3, CEA E.AFP, CEA 10.下列那种情况AFP不会升高 A.原发性肝癌 B.原发性肝癌手术后肠转移 C.来源于内胚 层的肿瘤 D.妊娠期E.膀胱肿瘤肝转移。 11.下列那种标志物不是肝细胞癌的标志物：A.CA125 B.CA19-9 C.AFP D.GGT E.AFU 12.Cyfra 21-1属于那类标志物 A.胚胎性标志物 B.糖蛋白类标志物 C.基因类标志物

“生物化学实验”理论知识考查题

1.酶有什么不同于一般催化剂的特性?在酶的分离纯化过程中要注意哪些环节? 1、高效性 2、专一性 3、条件温和 4、酶活性的可调控性 5、酶催化的活性与辅酶、辅基和金属离子有关 6、不稳定易失活 酶是一种特殊的蛋白质,在分离纯化过程中需要注意温度以及ＰH值等的控制,注意在纯化过程中所使用的缓冲溶液的离子强度的控制(常用ＰBＳ缓冲溶液),在实际纯化过程中，一般要在低温冰箱中进行,缓冲溶液中注意加入EDＴA二钠盐(1-5mM)螯和重金属离子一般避免酶失活。 ２.如何评价蛋白质纯化方法的优劣？ 判断分离提纯方法的优劣，一般用两个指标来衡量,一是总活力的回收；而是比活力的提高倍数。理想的分离提纯方法希望比活力和总活力越高越好，但两者往往不可兼得。因此在考虑分离条件和方法时,需要在比活力多提高一些和总活力多回收一些作适当的选择。 ３、纯化蛋白质的层析方法有哪些? 凝胶过滤层析;离子交换层析；疏水层析；亲和层析;聚焦层析;高效液相层析。 ４、请回答Q Sephaｒｏse－柱层析法纯化蔗糖酶的基本原理是什么? 离子交换剂是以纤维索或葡聚糖凝胶等不溶性物质为母体，通过酯化、醚化或氧化等化学反应.引入阳性或阴性离子基团的特殊制剂.可与带相反电荷的化学物质进行交换吸附。 Q Sephａrｏse柱代表季氨基琼脂糖色谱,以琼脂糖作为不溶性母体引入季铵型基团,为强阴离子交换剂。酵母蔗糖酶的等电点为５．0左右，在Tｒis－HCｌ缓冲液(ｐH7.3)下带负电。在pH７左右,ＱSepｈaroｓe凝胶带正电,与带负电的蔗糖酶结合。洗脱液中的离子基因与结合在离子交换剂上的蛋白质离子基团相竞争时．亲合力小的蛋白质分子先被解吸而洗脱下来,而亲合力大者则后被解吸．而后洗脱下来。因此依靠增加缓冲液的离子强度和(或)改变酸碱度.即可改变蛋白质的吸附状态,使不同亲合力的蛋白质得以分离。 ５.什么是酶活力？根据实验体会,在进行酶活力测定时要注意哪些问题? 什么是酶活力: 酶活力也称为酶活性，是指酶催化一定化学反应的活力。测定酶活力实际就是测定酶促反应的速度，一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定酶活力。酶促反应速度可用单位时间内、单位体积中底物的减少量或产物的增加量来表示。酶催化反应速度愈大，酶活力愈高，反之活力愈低。

临床生物化学检验技术考试题库及答案（4）

临床生物化学检验技术考试题库及答案（4） 临床生物化学检验技术试题及答案 第三章血浆蛋白质与含氮化合物的生物化学检验 一、单项选择题 1. 下列物质属于含氮化合物的是：（） A. 蛋白质 B. 氨基酸 C. 嘌呤核苷酸 D. 嘧啶核苷酸 E. 以上都是 2. 临床上血清总蛋白的首选最方便、最实用的常规方法是：( ) A. 凯氏定氮法 B. 双缩脲法 C. 酚试剂法 D. 紫外分光光度法 E. 染料结合法 3. 正常血清蛋白电泳上显示的宽γ区带主要成分是: ( ) A. 转铁蛋白 B. 结合珠蛋白 C. 免疫球蛋白 D. 血色素结合蛋白 E. 铜蓝蛋白 4. 下列血浆蛋白质中哪些不属于运输载体类：（） A. 血浆脂蛋白 B. 转铁蛋白 C. 铜蓝蛋白 D. 结合珠蛋白 E. α1-抗胰蛋白酶 5. 下列关于清蛋白说法错误的是：（）

A. 由肝实质细胞合成 B. 血浆中含量最多的蛋白质 C. 维持血浆胶体渗透压的主要蛋白 D. 在血浆中的半寿期10d E. 唯一一种不含糖的血浆蛋白质 6. 临床上检测血清蛋白的最常用方法是：（） A. 溴甲酚绿法 B. 电泳法 C. 免疫扩散法 D. 免疫比浊法 E. 电化学测定法 7. 下列关于α1-抗胰蛋白酶说法，错误的是：（） A. 分子量约为52kD B. 发挥作用时与pH高低无关 C. 醋酸纤维素薄膜电泳中位于α1区带 D. 主要由肝细胞合成 E. 人血浆中主要的丝氨酸蛋白酶的抑制剂 8. 关于α2-巨球蛋白，下列说法错误的是：（） A. 属于急性时相反应蛋白 B. 血浆中分子量最大的糖蛋白 C. 低清蛋白血症α2-MG含量可显著增高 D. 严重的急性胰腺炎时α2-MG含量降低 E. 检测方法主要是免疫比浊法 9. 铜蓝蛋白的功能不包括：（） A. 血浆铜的转运 B. 具有铁氧化酶作用 C. 抗氧化作用 D. 可将大部分Fe3+运输到骨髓，用于Hb合成 E. 铜的无毒性代谢库 10. 下列关于C-反应蛋白说法错误的是：（）

生物化学试题库及答案

生物化学试题库及答案 1、由己糖激酶催化的反应的逆反应所需的酶是 A、磷酸化酶 B、丙酮酸脱氢酶 C、果糖二磷酸酶； D、磷酸果糖激酶 E、葡萄糖—6—磷酸酶； 答案：E 2、可作为合成DNA的原料是： A、ATP B、ADP C、cAMP D、dATP E、UMP 答案：D 3、在3′末端有CCA-OH的是： A、tRNA B、mRNA C、rRNA D、RNA E、DNA 答案：A 4、关于结合酶的论述正确的是： A、酶蛋白与辅酶共价结合 B、辅酶与酶蛋白结合紧密 C、酶蛋白决定酶的专一性 D、酶蛋白具有催化活性 E、辅酶能稳定酶分子构象 答案：C 5、电子按下列各途径传递，能偶联磷酸化的是 A、FAD—CoQ B、Cyt—Cytaa3 C、Cytaa3—O2 D、CoQ--Cytb E、琥珀酸--FAD

6、CO和氰化物中毒致死的原因是 A、抑制Cytc中Fe3+ B、抑制Cytaa3中Fe3+ C、抑制Cytb中Fe3+ D、抑制血红蛋白中Fe3+ E、抑制Cytc1中Fe3+ 答案：B 7、进行底物水平磷酸化的反应是 A、琥珀酰CoA→琥珀酸 B、3-磷酸甘油醛→1，3-二磷酸甘油酸 C、6-磷酸果糖→1，6-二磷酸果糖 D、葡萄糖→6-磷酸葡萄糖 E、丙酮酸→乙酰Co 答案：A 8、维生素C的生化作用是: A、只作供氢体 B、只作受氢体 C、既作供氢体又作受氢体 D、是呼吸链中的递氢体 E、是呼吸链中的递电子体 答案：C 9、有关生物转化作用的描述，错误的是 A、使疏水性物质水溶性增加 B、肝是进行生物转化最重要的器官 C、作用的实质是裂解生物活性物质? D、有些物质经过生物转化毒性增强? E、使非极性物质的极性增加 答案：C 10、下列哪种情况尿中胆素原族排泄量减少 A、肠道阻塞 B、碱中毒 C、溶血 D、肝功能轻度损伤 E、胆道阻塞

生物化学测试题及答案

生物化学第一章蛋白质化学测试题 一、单项选择题 1．测得某一蛋白质样品的氮含量为0．40g,此样品约含蛋白质多少 B每克样品6.25 A．2．00g B．2．50g C．6．40g D．3．00g E．6．25g 2．下列含有两个羧基的氨基酸是：E A．精氨酸B．赖氨酸C．甘氨酸 D．色氨酸 E．谷氨酸 3．维持蛋白质二级结构的主要化学键是：D A．盐键 B．疏水键 C．肽键D．氢键 E．二硫键三级结构 4．蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是：B A．天然蛋白质分子均有的这种结构 B．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C．三级结构的稳定性主要是次级键维系 D．亲水基团聚集在三级结构的表面 E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基 5．具有四级结构的蛋白质特征是：E A．分子中必定含有辅基

B．在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成 C．每条多肽链都具有独立的生物学活性 D．依赖肽键维系四级结构的稳定性 E．由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6．蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定：C A．溶液pH值大于pI B．溶液pH值小于pI C．溶液pH值等于pI D．溶液pH值等于7．4 E．在水溶液中 7．蛋白质变性是由于：D A．氨基酸排列顺序的改变B．氨基酸组成的改变C．肽键的断裂 D．蛋白质空间构象的破坏E．蛋白质的水解 8．变性蛋白质的主要特点是：D A．粘度下降B．溶解度增加C．不易被蛋白酶水解D．生物学活性丧失 E．容易被盐析出现沉淀 9．若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时,该溶液的pH值应为：B A．8 B．＞8 C．＜8 D．≤8 E．≥8 10．蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸 E