实验五 杀虫剂的毒力测定

南京林业大学实验报告

林学（树木与观赏植物保护）专业三年级姓名 090101310 圣倩倩

实验五杀虫剂的毒力测定

一、实验目的

1.学习掌握杀虫剂毒力的测定技术

2.掌握杀虫剂致死中浓度（LC50）的计算方法

二、实验用品

电子天平、药匙、烧杯、量筒、容量瓶、镊子、吹风机、培养皿、剪刀等

供试药剂：灭多威

试虫：蚕

三、实验方法

1.药剂配制：先用少量丙酮将药剂配成母液，然后用蒸馏水将母液稀释成一系列梯度药液10，5，

2.5，1.25和0.625mg/L。

2.供试药液每个浓度为一个处理，并设对照，每个处理试虫10头。

3.将新鲜的桑叶分别浸入各个浓度的药液中，用夹子夹住风干后，分别接上蚕，放入培养皿中进行饲养5h，观察结果。

四、LC50的计算

1.死亡率（％）＝（死亡数/每一浓度处理试虫数）×100

更正死亡率（％）＝(处理死亡率-对照死亡率)/（100-对照死亡率）×100

2.将各剂量转换成对数值，各剂量的更正死亡率转化成机率值

3.毒力测定的结果

毒力测定的结果

4.以更正死亡率的机率值为y轴，剂量对数值为x轴，找出各点。各点间划一条近似直线。所划直线的倾斜度可依据直线左边各点垂直平方和接近于右边各点垂直距离平方和为准。

5.通过直线找出致死中浓度（LC50），即当机率值为5时（死亡率为50％），通过直线相对在横坐标上所得数值的反对数即为LC50。五、用作图法求出药剂对蚕毒力的LC50

实验分析：实验失败，家蚕的一龄幼虫活力低下；或者灭多威杀虫时间太长，导致家蚕的大量死亡；也有可能家蚕身体太小，不容易观察死亡。

29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定

29种常用杀菌剂对番茄枯萎病菌和青枯病菌的室内毒力测定 摘要：在实验室内，采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果，采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。结果表明，有10种杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力较强（Ec50值 相对抑制率计算公式如下： 抑菌率=对照菌落直径-处理菌落直径对照菌落直径-菌饼直径×100%。 1.2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定方法菌液的制备：将番茄青枯病菌在LB斜面上活化，移入50mLLB培养液中，在28℃下振荡（150r/min）培养过夜。用无菌水将番茄青枯病菌菌液稀释至浓度约为106cFU/mL，备用。 纸碟测定方法参照文献[12-15]：将29种杀菌剂分别制成浓度为1000、100、10、1mg/L，吸取20μL在LB平板中央，每处理重复3皿。设清水对照。用上述番茄青枯病菌稀释液（106cFU/mL）喷雾后，28℃培养过夜，调查抑菌圈直径，计算相对抑制率。应用Excel软件处理系统求出各单剂毒力回归方程、Ec50值及相关系数。 2结果与分析 2.1杀菌剂对番茄枯萎病菌的毒力测定 采用菌丝生长速率法测定了29种杀菌剂对番茄枯萎病菌的抑菌效果。 2.2杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定 采用纸碟法测定了29种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌效果。结果表明，有3种杀菌剂对番茄青枯病菌有较强的毒力，其Ec50值均小于10mg/L（表3、图2），其中3%中生菌素的毒力最强，Ec50值为3.3742mg/L。其余26种杀菌剂对番茄青枯病菌不表现毒力。 表33种杀菌剂对番茄青枯病菌的室内毒力测定结果 药剂名称毒力回归方程相关系数 （r）Ec50 （mg/L）3%中生菌素y=7.10x+1.250.96823.374280%代森锰锌y=5.58x+0.830.97565.58872%春雷霉素y=4.11x+1.210.94198.3587 3结论与讨论 番茄具有较高的营养价值，深受广大消费者的喜爱。番茄是江苏省重要的蔬菜品种，年种植面积达到5.33万hm2，其中70%以上为设施栽培。近年来，番茄的价格保持稳定并呈现上升趋势，番茄市场价格一般为4～5元/kg，最高市场价达到20元/kg，番茄种植效益优势十分明显。番茄已成为江苏省发展现代高效农业的优选作物，番茄产业的发展对促进江苏省“农业增效、农民增收”发挥着重要的作用。 随着设施番茄连续种植年代的增加，由枯萎病菌、青枯病菌引起的土传病害连作障碍日趋严重，已成为设施番茄安全生产的主要瓶颈。目前生产上防治番茄枯萎病、青枯病主要依靠化学农药，但防治效果并不理想。我们通过实地调查和研究分析发现，主要有以下原因：（1）农户不了解病菌侵染时期，不能做到适时用药。番茄枯萎病和青枯病是系统性病害，病原菌长期存活在土壤的病残体上，在番茄苗期定植时，从根部的伤口侵入，存活在番茄组织的木质部和韧皮部内，大量繁殖后导致番茄植株失水死亡。防治番茄枯萎病和青枯病必须在苗期定植时用药，一旦错过防治适期，病原菌侵入番茄植株体内，使用药剂也不会有防治效果。（2）农户不了解药剂的杀菌范围，不能做到对症下药。农户认为杀菌剂能够包治百病，手边有什么药剂就用什么药剂。我们从7个示范基地收集了29种药剂，试验结果表明，只有10种杀菌剂对番茄枯萎病菌生长有抑制作用，3种杀菌剂能有效抑制番茄青枯病菌繁殖，大部分杀菌剂可能对番茄的其他病害有防控效果，但是对枯萎病和青枯病基本没有防治作用。表明要有效地防控番茄枯萎病和青枯病，必须适时用药和对症下药。

保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容

保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和 内容 集团企业公司编码：（LL3698-KKI1269-TM2483-LUI12689-ITT289-

保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容发布日期：2013-04-03 浏览次数:1605 字号：[] 毒理试验的四个阶段和内容 1第一阶段：急性毒性试验 经口急性毒性：LD50，联合急性毒性，一次最大耐受量试 验。 2第二阶段：遗传毒性试验，30天喂养试验，传统致畸试验 2.1基因突变试验：鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验 （Ames试验）为首选，其次考虑选用V79/HGPRT基因突变试验， 必要时可另选其它试验。 2.2骨髓细胞微核试验或哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试 验。 2.3TK基因突变试验。 2.4小鼠精子畸形分析或睾丸染色体畸变分析。 2.5其它备选遗传毒性试验：显性致死试验、果蝇伴性隐性 致死试验，非程序性DNA合成试验。 2.630天喂养试验。 2.7传统致畸试验。 3第三阶段：亚慢性毒性试验----90天喂养试验、繁殖试 验、代谢试验 4第四阶段：慢性毒性试验（包括致癌试验） 1、药物的毒性试验分为两类，其一特殊毒性试验，包含致癌、致残、致突变，号称三致试验；作此试验的单位必须是国家指定并认可的；一般单位即使做了也不被国家认可！通常一类创新药必须做的。无论一个药

物的药效如何好，只要含有三致试验的特殊毒性（动物若干代繁殖后，查看），该药物将不会允许上市的。 2、其二，一般毒性试验，通常用老鼠或兔子去做，主要是测定半数致死量；若某个药物的半数致死量是有效使用剂量的2倍以上，通常认为是临床使用安全的，若半数致死量比有效剂量略大一点，那就谁也不敢使用了，万一略微超一点量就会导致患者死亡！

食品安全性毒理学评价程序

食品安全性毒理学评价程序（试行） 前言 为了保障广大消费者的健康，对于直接和间接用于食品的化学物质进行安全性评价是一项极为重要的任务。?根据目前我国的具体情况,制定一个统一的食品安全性毒理学评价程序,将有利于推动此项工作的开展，也便于将彼此的结果进行比较,随着科学技术和事业的发展此程序将不断得到修改完善。 目的?为我国食品安全性毒理学评价工作提供一个统一的评价程序和各项实验方法，为制定食品添加剂的使用限量标准和食品中污染物及其它有害物质的允许含量标准，并为评价新食物资源，新的食品加工、生产和保藏方法,提供毒理学依据,特制定本程序。 适用范围 一、用于食品生产、加工和保藏的化学和生物物质，如食品添加剂，食品加工用微生物等。?二、食品生产、加工、运输、销售和保藏等过程中产生和污染的有害物质,如农药残留、重金属、生物毒素、包装材料溶出物、放射性物质和洗涤消毒剂(用于食品容器和食品用工具）等。 三、新食物资源及其成份。 四、食品中其它有害物质。 总则?在评价一种物质的安全性时，应全面考虑以下几方面的因素,以进行综合评价: 一、化学结构:可以根据化学结构预测其毒性。?二、理化性质和纯度:试验样品必须符合既定的生产工艺、配方和理化性质。其纯度应与实际应用的相同。需要鉴别其毒性作用系该物质本身的作用还是杂质的作用,或进行其它特殊试验时可用纯品。必要时应考虑杂质的毒性。如农药，一般用原药，但对我国创制的新农药，则应同时用纯品和原药进行试验。?三、人的可能摄入量:除一般人群的摄入量外,还应考虑特殊和敏感人群(如儿童、孕妇及高摄入量人群)。?四、人体资料：由于存在着动物与人之间的种属差异，在将动物试验结果推论到人时,应尽可能收集人群接触受试物后的反应资料,如职业性接触和意 外事故接触等。志愿受试者体内的代谢资料对于将动物试验结果推论到人具有重要意义。 五、动物毒性试验和体外试验资料：即本程序(试行）所列的各项试验。虽然这些试验有不少缺陷,但是目前技术水平下所得到的最重要的资料，也是进行评价的主要依据。在试

七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定

七种杀菌剂对番茄早疫病病原菌室内毒力测定 方案，为番茄早疫病的防治提供科学依据，制定出切实可行的防治措施。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 供试菌株番茄早疫病病原菌株采集于豫北地区番茄种植大棚中的病果，经组织分离、纯化获得病原菌[10]。 1.1.2 试验药剂50%异菌脲（病可丹）可湿性粉剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%氯溴异氰尿酸（比秀）可湿性粉剂为以色列海法作用保护有限公司生产，80%丙森锌（好锌泰）水分散粒剂为陕西美邦农药有限公司生产，10%苯醚甲环唑（病可丹）水分散粒剂为山东鑫星农药有限公司生产，50%醚菌酯（信赖）可湿性粉剂为陕西美邦农药有限公司生产，3 2.8%烷基腈氧基醌（凯银）水分散粒剂、35%腐霉利悬浮剂为宜宾川安高科农药有限责任公司生产。 1.2 方法 1.2.1 杀菌剂单剂毒力测定将7种杀菌剂单剂与PDA培养基充分混匀，配制成0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00 mg/L系列浓度的平板。采用菌丝生长速率法测定，用5 mm打孔器在培养6 d后的番茄早疫病菌平板上打孔，用镊子取菌丝面向下接种在含药PDA培养基上，每皿1个菌碟，28 ℃倒置培养，以去离子水作为对照组，每个处理设3次重复，于接种后第3天检查菌丝生长情况并用十字交叉法测量菌落生长直径，通过菌丝生长抑制率值和各药剂浓度对数值间的线性回归性进行分析，求出各菌株EC50并计算相对抑菌率。抑菌率计算方法为每个菌落使用十字交叉法测量2次，取其平均数作为菌落的大小。计算7

种杀菌剂对菌丝生长的抑制百分率，公式如下： 菌落增长直径=菌落测量直径-菌盘直径 抑菌率=（对照菌落增长直径-含药培养基上菌落增长直径）/对照增长菌落直径×100%[11]以浓度对数为横坐标（x），相对抑制率几率值为纵坐标（y），求出各药剂对供试菌株的毒力回归曲线方程y=a+bx、相关系数r与有效抑制浓度（EC50）。根据EC50分析比较不同杀菌剂对供试病菌菌丝生长的影响[12]。 1.2.2 复配剂的毒力测定选择抑菌活性较好的异菌脲、苯醚甲环唑、醚菌酯、腐霉利4种农药按其单剂浓度梯度两两配制成1∶1、1∶2、2∶1的含药平板，以去离子水作为对照组，每处理设3次重复。分别以异菌脲、醚菌酯、苯醚甲环唑为标准药剂，根据供药试剂，计算各复配剂的实际毒力指数、理论毒力指数、联合毒力。根据共毒系数的大小评价复配剂的增效作用，并确定最佳配比。 毒力指数（TI）=（单剂标准药剂EC50/供试药剂EC50）×100 混剂实际毒力指数（ATI）=（标准药剂EC50 / 混剂EC50）×100 混剂理论毒力指数（TTI）=单剂A的TI×PA+单剂B的TI×PB（PA和PB分别为混剂中有效成分的百分含量） 共毒系数（CTC）=（混剂的实测毒力指数/混剂的理论毒力指数）×100 根据共毒系数类型的划分标准[13]，CTC≥170为明显增效，120≤CTC2 结果与分析 2.1 单剂抑菌率测定 异菌脲、氯溴异氰尿酸、丙森锌、苯醚甲环唑、醚菌酯、烷基腈氧基醌、腐霉利单剂在试验浓度下对茄链格孢属菌菌丝生长抑制率分别为76.15%～100%、8.76%～17.97%、2.01%～70.92%、71.82%～100%、51.35%～71.59%、42.46%～93.87%、32.16%～91.76%（图1，表1）。

菌种毒力试验方法

菌种毒力试验方法 一、产毒液体培养基的制备 1.马铃薯-酵母膏-蔗糖培养基 取去皮马铃薯200-300g，切成小块，加水1000mL，煮沸20min，纱布过滤，制成马铃薯汁并补充水分至1000mL，加入10g酵母膏，100g蔗糖，分装后121℃高压灭菌15min。 2.麦芽汁-酵母膏培养基 1000mL麦芽汁中加入10g酵母膏，分装后121℃高压灭菌15min。 3.麦芽汁-蛋白胨培养基 1000mL麦芽汁中加入1g蛋白胨，分装后121℃高压灭菌15min。 4.葡萄糖天门冬素培养基 葡萄糖10.0 g 天门冬素0.5 g K2HPO4 0.5 g 蒸馏水1000.0 mL 调pH 7.2-7.4，分装后121℃高压灭菌15min。 5.高氏合成1号培养基 可溶性淀粉20.0 g KNO3 1.0 g K2HPO40.5 g MgSO4·7H2O 0.5 g NaCl 0.5 g FeSO4·7H2O 0.01 g 蒸馏水1000.0 mL 调pH 7.2-7.4，分装后121℃高压灭菌15min。 6.麦芽汁培养基 200 mL麦芽汁分装后，121℃高压灭菌15min。 7.0.5%蛋白胨培养基 取2.0g葡萄糖，0.6g酵母膏，1.0g蛋白胨，4.0g琼脂，加蒸馏水至200mL，分装后121℃高压灭菌15min。 二、培养物制备 将送检菌种或转种的纯培养物（适宜的培养基斜面，28±1℃培养5-7d），确证为纯培养物后，分别接种于适宜的产毒培养基中，一般菌种接种于麦芽汁-酵母膏、麦芽汁-蛋白胨及马铃薯-酵母膏-蔗糖三种产毒培养基中，放线菌接种于葡萄糖天门冬素培养基和高氏合成1号培养基中，红发夫酵母接种于麦芽汁培养基和0.5%蛋白胨培养基中，置28±1℃培养14d。

N 病毒毒力测试实验

毒力测试技术路线 前言: 虫媒病毒（Arbovirus ）是指由吸血昆虫传播的病毒，其特点是病毒可在昆虫体内繁殖，但昆虫本身不发病，昆虫通过叮咬将病毒传播给人、畜引起疾病，因此虫媒病毒可以引起人畜共患传染病（1）。套式病毒（Nidoviruses ）包括了冠状病毒（Coronaviridae ）和动脉炎病毒（Arteriviridae ）及罗尼病毒（Roniviridae ），主要感染哺乳动物、少数禽类及无脊椎动物（虾），由于其独特的套式转录机制和

较长基因组（12.7~31.7bp）的特征，被认为是最复杂的单股正链RNA病毒（2）。 国内，深圳市龙岗区疾控中心开展了虫媒监测项目，从医院监测点捕获的成蚊标本中首次发现昆虫套式病毒NDiV，并应用C6/36细胞成功地分离到NDiV 病毒，是目前国内对NDiV的研究仅有这一篇报道（3）。 国外,2011年，mBio报道了首篇昆虫套式病毒的研究（4），在科特迪瓦的原始森林的库蚊中首次发现了昆虫套式病毒，命名为Cavally virus（CA VV）。同年，PlOS Pathogens刊登（5）同为昆虫套式病毒的研究，病毒于2002年在越南急性脑炎病人的脑脊液中分离成功（6），在当地库蚊标本也分离得到，作者Phan Thi Nga 根据病毒的分离地点将其命名为Nam Dinh Virus（NDiV）。由于NDiV和CA VV 的宿主与分子特性相似，与套式病毒中的已有家族存在差异，故Phan Thi Nga 将其归类为Nidoviruses的新家族，命名为Mesoniviridae（7）。传统意义的套式病毒（Nidoviruses）包括冠状病毒（Coronaviridae）、动脉炎病毒（Arteriviridae）及罗尼病毒（Roniviridae），主要感染哺乳动物、少数禽类及无脊椎动物（虾），由于其独特的套式转录机制和较长基因组（12.7~31.7kb）的特征，被认为是最复杂的单股正链RNA病毒。在科特迪瓦与越南发现的昆虫套式病毒填补了套式病毒存在于节肢动物的空白。目前最长的单股正链ssRNA+节肢动物病毒，NDiV 与CA VV核酸序列长度约为20.2kb，这显示它们可能是套式病毒中如猪生殖与呼吸综合征病毒的短基因病毒（small genomes）与SARS冠状病毒的长基因病毒（large genomes）之间的进化连接。目前，国外关于NDiV的研究报告仅有Phan Thi Nga发表的两篇论文（5,7），国内的研究报告有“中国国内首次发现Nam Dinh 病毒”。研究程度只涉及病毒的分子结构学领域。虽然该病毒曾在越南急性脑炎病人的脑脊液中分离得到，但尚未有具体的病理因果证据证明该病毒的致病性。 NDiV是否为新的虫媒病毒仍然需要进行深入的研究与论证，后续研究将有助于我国新分离虫媒病毒的致病性的研究，对探讨病毒与人类疾病的关系，对新发病毒的危害作出更客观的评估。 NDiV毒力测试实验步骤： 1．1 NDiV 乳鼠脑病毒悬液制备与保存 1~2 日龄健康乳鼠（昆明品系），脑内接种NDiV C6/36 细胞病毒悬液

五种杀菌剂对梨黑斑病的室内毒力测定

梨黑斑病又称裂果病，是梨树的三大病害之一，由 真菌的链格孢菌（Alternaria alternate （Fr.）Keissl ）侵染所 引起[1]。侵染可分为春季分生的新孢子引起的初次侵染 和由初次侵染后在田间引起再侵染两部分组成[2]。梨树 花期和幼果期是该病潜伏侵染时期，在果实贮藏期间 最易发病并且不易控制和防范[3]。 链格孢菌属半知菌亚门链格胞属。病斑上的黑霉是病菌的分生孢子梗和分生孢子。分生孢子梗褐至黄褐色，丛生，基部稍粗，上端略细，有分隔。孢子脱落后有胞痕。分生孢子串生，倒棍棒形，有纵横分隔，成熟的孢子褐色。在20~30℃之间病原菌能生长,pH 值限定4~12。在相对湿度为50%~100%时孢子可萌发，在水滴82019年3月2019（2）北方果树NORTHERN FRUITS DOI:10.16376/https://www.docsj.com/doc/fa9313479.html,ki.bfgs.2019.02.003 中图分类号：S436.612.1+4文献标识码：B 文章编号：1001－5698（2019）02－0008－03 五种杀菌剂对梨黑斑病的室内毒力测定 梁魁景，侯晓杰，高小宽，张志强，欧阳汝欣 （衡水学院生命科学系，河北衡水053000） 收稿日期：2018-12-20 基金项目：2018年度高层次人才科研启动基金项目（2018GC13）；衡水学院校级项目（项目编号：2018LX15） 作者简介：梁魁景（1983-），男，硕士，讲师，主要从事园林植物病虫害防治研究，（电子信箱）zwbh201011@https://www.docsj.com/doc/fa9313479.html, 。摘要：梨黑斑病由链格孢菌（Alternaria alternata ）引起，是目前梨果采后贮藏和运输过程中的主要疾病之 一。为筛选出防治梨黑斑病病的高效药剂，作者调查了衡水地区常用的农药并最终确定5种有效杀菌剂，分别是10%中生·寡糖素、60%多菌灵、32.5%苯甲·嘧菌酯、1.8%辛菌胺醋酸盐、15%络氨铜。用这5种药剂对菌丝进行室内毒力测定。经测定发现，这5种药剂对梨黑斑病病原菌的生长都有一定的抑制作用，其中效果最好的是15%络氨铜，药剂浓度为1000mg/L 时，平均菌落生长量为0.5mm ，抑制率达到92.25％，EC 50为0.652mg/L ；其次为1.8%辛菌胺醋酸盐；60％多菌灵抑菌效果最差，药剂浓度达到1000mg/L 时，平均菌落生长量为3.4mm ，EC 50为681.719mg/L 。 关键词：梨黑斑病；杀菌剂；室内毒力测定 Determination of Indoor Toxicity of Five Fungicides on Alternaria alternata Disease of Pear Fruits LIANG Kui-jing ，HOU Xiao-jie ，GAO Xiao-kuan ，ZHANG Zhi-qiang ，OUYANG Ru-xin （College of Life Science ，Hengshui University ，Hengshui Hebei 053000，China ） Abstract ：Pear black spot disease is caused by Alternaria alternata and is one of the main diseases during the postharvest storage and transportation of pear fruit.In order to screen out high efficiency agents for preventing and treating pear black spot disease ，the authors investigated the commonly used pesticides in Hengshui area and finally identified five effective fungicides ，namely10%Zhongsheng ·oligosaccharide ，60%carbendazim ，and 32.5%benzophene.Azoxystrobin ，1.8%octosamine acetate ，15%copper amide.The mycelium was assayed for indoor virulence using these five agents.It was found that these five agents have a certain inhibitory effect on the growth of P.sylvestris pathogens.The best effect is 15%lycopene copper.When the concentration is 1000mg/L ，the average colony growth is 0.5.Mm ，reaching 92.25%，EC 50is 0.652mg/L ；followed by 1.8%octosamine acetate ；60%carbendazim bacteriostatic effect is the worst ，when the concentration of the drug reaches 1000mg/L ，the average colony growth is 3.4mm ，The EC 50is 681.719mg/L.Key words ：Pear Black Spot ；Fungicide ；Indoor Toxicity

实验五 杀虫剂胃毒毒力测定

实验五杀虫剂胃毒毒力测定(3学时，综合性) 1、实验目的 通过学习了解杀虫剂胃毒毒力测定原理、方法；掌握药膜法测定胃毒毒力的程序、方法。 2、实验原理 杀虫剂胃毒毒力测定的基本原理是使药剂随食物经口器被试虫吞食，经中肠吸收后起毒杀作用。 测定胃毒毒力的方法有三种： （1）毒饵法：将药剂与昆虫喜食的饲料混合制成毒饵，饲喂供试昆虫，这种方法的缺点是不能避免触杀和熏蒸作用的发生。 （2）微量注射法：用微量注射器将一定量药剂自试虫口器注入，这种方法因操作时易刺破昆虫口腔柔软组织，故一般很少应用。 （3）叶片夹毒法：将定量的药粉或药剂附着在一定面积的圆形叶片上，与另一片同样面积的无毒叶片粘合在一起，喂养昆虫，然后根据取食面积计算实际吞食药量，此法适用于植食性、取食量大的咀嚼式口器的昆虫，如鳞翅目幼虫、蝗虫、蟋蟀等，所以本实验采用叶片夹毒法进行。 3 实验材料与用具 （1）实验材料： 供试药剂：4000I/微升Bt（苏云金杆菌）悬浮剂 供试昆虫：室内不接触农药条件下饲养的黄粉虫3龄幼虫 （2）实验用具：培养皿、滤纸、烧杯、胶头滴管、蒸馏水、苹果等。 4 实验步骤 （1）蒸馏水将氟虫腈等比稀释50、100、200、400、800、1600倍备用，对照为蒸馏水； （2）培养皿底部垫上滤纸，滴加少量蒸馏水均匀打湿，标记。 （3）每培养皿接入10头试虫，每处理或对照重复3次。（4）将叶牒，在药液或蒸馏水中浸渍5-10s后取出，晾干，置于相应浓度标记的培养皿中。

（5）24小时后，观察实验结果，统计死亡率、校正死亡率（均为3个重复的平均值），计算毒力回归方程及LC50值。 5 结果观察及计算 24小时后检查昆虫生存和死亡情况，并按下表记录，逐步计算毒力回归方程及LC50值。

【名词解释毒理学】毒理学安全性评价名词解释

【名词解释毒理学】毒理学安全性评价名词 解释 名词解释 1、外来化学物质：既非人体的组成成分，也不是人体所需的营养物质，而是存在于人类生活和外界环境中，可能通过一定环节或途径与机体接触并进入机体，呈现一定生物学作用的化学物质。 2、安全性：指一种外来化学物质在规定的使用方式和用量条件下，对人体健康不致产生任何损害，即不引起急性、慢性中毒，亦不对接触者（包括老、弱、病、幼、孕妇）及其后代产生潜在危害。 3、危险度：指一种外来化学物质在具体的接触条件下，对机体造成损害可能性的定量估计。 4、最小有作用剂量（最小有作用剂量毒物？）即在一定时间内，一种外来化合物按一定方式或途径与机体接触，能使某项观察指标开始出现异常变化或使机体开始出现损害作用所需的最低剂量。也可称为中毒阈剂量 5、最大无作用剂量（NOEL ）：即在一定时间内，一种外来化合物按一定方式或途径与机体接触，根据目前的认识水平，用最灵敏的试验方法和观察指标，未能观察到任何对机体的损害作用的最高剂量。又称：未观察到作用的剂量或未观察到效应的水平 6、致死量:(1)绝对致死量(LD100) 指能引起一组实验动物全部死亡的最低剂量。(2)★半数致死量(LD50) 指能引起一

组实验动物中死亡50%所需剂量，也称致死中量。(3)最小致死量(MLD) 指仅能引起一组实验动物个别死亡的剂量。(4)最大耐受量(LD0) 指能引起一组实验动物全部中毒但无一死亡的剂量。 7、脂水分配系数：是指化合物在脂(油) 相和水相的溶解分配率，即化合物的水溶性与脂溶性间达到平衡时，的其平衡常数。 8、蓄积率：指在一定期间内，外来化合物在机体内的蓄积量与同一期间进入机体总量的百分比。蓄积率越高，表明该化学物质蓄积性越大。 9蓄积系数：是指达到同一效应（如ED50或LD50）分次给予实验动物所需外来化合物总剂量（以LD50(n)表示）与一次给予所需剂量（以LD50(1)表示）之比，以K 表示。即：K=LD50(n)/LD50(1) 10、实验动物（Laboratory Animal）：是指经人工饲育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确或来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、检定以及其它科学试验的动物。 11、急性毒作用带（acute effect zone, Zac）：指化合物的毒性上限与毒性下限的比值，也就是引起试验动物的死亡之剂量与最低剂量的剂量范围的宽窄。 通常以LD50代表毒性上限，急性阈剂量（阈浓度）代表毒性下限，其公式为：（见课件） Zac 值的大小可反应急性阈剂量距离LD50的宽窄。Zac 值越大，表明化合物引起急性死亡的危险越小，反之表明引起

农药安全性毒理学评价程序

农药安全性毒理学评价程序 本程序规定了农药安全性毒理学评价的原则、项目及要求。本程序适 用于在我国申请登记及需要进行安全性评价的各类农药。 —、总则 1在评价农药的安全性时，毒理学方面应考虑以下诸因素 1.1化学名称，化学结构 1.2 产品组成(有效成份含量及其他成份含量) 1.3 理化性质夕卜观、比重、蒸气压、溶解度、孚L化性、悬浮性、相混性、熔点、沸点等。 1.4 一般毒性试验和特殊毒性试验项目，依此划分为四个阶段，可根据申请登记的农药类别及有规定进行相应试验。 1.5 每人每日容许摄入量的规定根据动物试验中最大无作用计量， 按下列公式计算 每人每日容许摄入量(ADI) mg/kg体重二最大无作用剂量 (mg/kg)/ 安全系数。根据农药的性质及其他因素确定安全系数，一般为100。每人每日容许从食品中摄入的农药量二ADI(mg/kg)x60( 人体标 准体重,kg) 最大残留限量(MRL) = ADIx60/1.2 (每人每日食品摄入总量)x 某种食品所占比例。如每月食品结构为：谷物12.5公斤，薯类3公斤，干豆1.25

公斤，食油0.75公斤，糖类0.5公斤，肉禽类2公斤，鱼0.75公斤，蛋1.0公斤，奶 0.75公斤，蔬菜10.0公斤，水果1.5公斤，总计34公斤，每人每日总摄入量则为 1.13 公斤。各种食品所占比例为：谷物0.37(36.76%), 薯类0.09(8.82%), 干豆0.04(3.68%), 食油 0.02(2.21%), 糖类0.01(1.47%), 肉禽类0.06(5.88%) ，鱼0.02(2.21%), 蛋 0.03(2.94%), 奶0.02(2.21%), 蔬菜0.29(29.41%), 水果0.04(4.41%) 。 1.6 人群接触毒性和意外事故的毒性资料。开发新品种农药时，对在实验、试产和大田试验阶段的密切接触人员，必须保留完整的健康记录，并定期随访。申请登记时，递交上述资料。在新品种农药正式投产和使用的最初阶段 (根据具体情况确定年限) ，设置健康监测点，对包括最密切接触和高危人群在内的观察对象实施健康监测。对已使用的农药，如发现有可疑致癌、致畸及其他严重远期危害时，要有计划地进行流行病学调查和毒理学重新评价。在发生意外事故的情况时，应深入现场，作事故后撤调研、搜集有关资料。 1.7 代谢产物和主要杂质的毒性。 2 农药试验样品的选择，一般为原药，如系新品种农药，则应同时采用原药及制剂。 3 按照申请农药登记的不同情况及生产和销售的需要，对提交评审的资料，分别要求如下： 3.1 凡属申请正式登记的农药品种，一般需具备四个阶段的全套资料，尤其是新投产、产量大、使用面广的、或估计有可疑潜在性危害的农药。进口农药必须提交四个阶段的完善毒理学试验资料，进行必要的毒理学验证实验。 3.2 凡属申请临时登记或用于药效实验的农药，可先提交相当于第

保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容

保健食品安全性毒理学评价试验的四个阶段和内容 : 1605 毒理试验的四个阶段和内容 1 第一阶段：急性毒性试验 经口急性毒性：LD50 ，联合急性毒性，一次最大耐 受量试验。 2 第二阶段：遗传毒性试验，30天喂养试验，传统致 畸试验 遗传毒性试验的组合应该考虑原核细胞与真核细胞、体内试验与体外试验相结合的原则。从Ames试验或 V79/HGPRT基因突变试验、骨髓细胞微核试验或哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验、4.1.2.3或4.1.2.4试验中分 别各选一项。 2.1 基因突变试验：鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验（Ames试验）为首选，其次考虑选用V79/HGPRT 基因突变试验，必要时可另选其它试验。 2.2 骨髓细胞微核试验或哺乳动物骨髓细胞染色体 畸变试验。 2.3 TK基因突变试验。 2.4 小鼠精子畸形分析或睾丸染色体畸变分析。 2.5 其它备选遗传毒性试验：显性致死试验、果蝇伴

性隐性致死试验，非程序性DNA合成试验。 2.6 30天喂养试验。 2.7 传统致畸试验。 3 第三阶段：亚慢性毒性试验----90天喂养试验、繁 殖试验、代谢试验 4 第四阶段：慢性毒性试验（包括致癌试验） 1、药物的毒性试验分为两类，其一特殊毒性试验，包含致癌、致残、致突变，号称三致试验；作此试验的单位必须是国家指定并认可的；一般单位即使做了也不被国家认可！通常一类创新药必须做的。无论一个药物的药效如何好，只要含有三致试验的特殊毒性（动物若干代繁殖后，查看），该药物将不会允许上市的。 2、其二，一般毒性试验，通常用老鼠或兔子去做，主要是测定半数致死量；若某个药物的半数致死量是有效使用剂量的2倍以上，通常认为是临床使用安全的，若半数致死量比有效剂量略大一点，那就谁也不敢使用了，万一略微超一点量就会导致患者死亡！