实验一使用高倍显微镜观察几种细胞

实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞

一、实验目的：

1、学会如何使用高倍显微镜观察细胞

二、实验材料：（实验材料可换）哺乳动物血细胞涂片、紫色洋葱表皮细胞临时装片、马蛔虫卵细胞永久装片

三、实验用具：载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、紫色洋葱、刀片、显微镜（物镜5X、10X、40X）

四、方法步骤：

方法指导

a低倍镜的使用

↓取镜→放镜→对光→放片→调焦(粗调焦和细调焦)

b 高倍镜的使用

定位→换镜→调焦(细调焦)

1、制作洋葱表皮细胞临时切片：

（1）取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。

（2）撕取洋葱表皮时先用刀片划个#字，取#中间部分，避免撕取的材料过大。将撕取的洋葱表皮置于载玻片的水滴上。

（3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作。

2、观察切片：

（1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。

（2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。

（3）使用5X物镜观察切片，使切片在视野中心，换成10X物镜，观察洋葱表皮结构。

（4）换成40X物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构。

3、哺乳动物血液涂片的制作及观察

4、马蛔虫卵细胞细胞永久装片的观察。

注意事项

1. 使用时先用低倍镜调整光线。选一较大的光圈对准通光孔，转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内，通过目镜，可以看到白亮的视野。观察活体标本或染色较浅的标本时，要适当使视野变暗，方能看得清楚。

2. 放置玻片标本时要对准通光孔正中央，并且不能反放玻片，如标本玻片反放时高倍镜下看不到物像，并容易压坏玻片或物镜。

3. 观察时要双目睁开，切勿闭上一只眼睛。左眼观察视野，右眼用以绘图。低倍镜用粗调螺旋调节物距，使粗准焦螺旋下降时，双眼要注视物镜与玻片之间的距离，到快接近时（约０.５cm）停止下降。在使用高倍镜观察时，不能转动粗调焦。粗、细调节螺旋都不能单方向过度地旋转。

4. 不要随便取出目镜，以防尘土落人物镜上。也不要任意拆卸任何零件，以防损坏。

5. 使用完毕后，转动粗调螺旋使镜台下降，取下玻片，转动物镜转换器，使物镜离开聚光孔。再镜筒使物镜接近载物台。然后以右手握镜臂，左手托镜座轻轻放人镜箱中。

6. 每次使用显微镜之前，先按显微镜登记卡片逐项检查显微镜各部分有无损坏。如发现损坏，应及时向教师报告。使用之后，认真填写显微镜使用登记卡片。

五、考点提示：

1、动物细胞的结构是什么样的？与植物细胞又什么不同？

2、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何？物体的大小如何？

3、高倍镜如何调节焦距？

生物实验报告单

1.用显微镜观察洋葱鳞茎表皮装片的同一部位，应选择下列哪组目镜和物镜的组合，在视野内所看到的细

胞数目最多？（）

A.目镜10×，物镜10×

B.目镜10×，物镜20×

C.目镜10×，物镜4×

D.目镜10×，物镜40×

2.使用显微镜观察植物细胞装片时，如果将低倍物镜转换成高倍物镜，看到的情况是（）。A.细胞

数目多，视野大而亮 B.细胞数目少，视野小而暗C.细胞数目多，视野大而暗 D.细胞数目少，视野小而亮

3.将“b”字放在显微镜下观察，视野内看到的物像是（）。A.b B.d C.q D.p

4.观察植物细胞装片时，在低倍镜下视野明亮，物像清晰，但换成高倍镜后，物像不见了。导致该现象的

可能原因是（）。A.没有移动装片，使物像在视野的中央 B.没有调节反光镜

C.没有调节粗准焦螺旋

D.没有调节细准焦螺旋

5在光照明亮的实验室里，用显微镜观察植物细胞时，在显微镜视野中能清晰看到细胞壁，但看不清楚细胞内容物。为便于观察，此时应（）。

A.改用凹面反光镜、放大光圈

B.改用凹面反光镜、缩小光圈

C.改用平面反光镜、放大光圈

D.改用平面反光镜、缩小光圈

6.在显微镜的低倍镜下，看到一个细胞偏向左上方，转换高倍镜观察前应该把该细胞移到视野中央，具体

做法是（）。

A.向左上方移动载玻片

B.向右下方移动载玻片

C.移动载玻片上的样品

D.调整准焦螺旋

7.用显微镜观察标本时,正确的操作顺序是( )

①把装片放在载物台上,使标本位于低倍镜的正下方

②眼睛从侧面注视物镜,转动粗准焦螺旋是镜筒下降至标本0.5厘米处

③转动转换器,使低倍物镜对准通光孔④调节反光镜,左眼注视目镜,使视野变亮

⑤用左眼注视目镜,同时转动粗准焦螺旋是镜筒上升,直到看见物像,再用细

准焦螺旋调节, 使视野中的物像清晰⑥转动转换器,使高倍物镜对准通光孔

⑦转动细准焦螺旋, 直到物像清晰⑧将要观察的物像移到视野中央

A, ①③②④⑤⑦⑧⑥ B, ③④①②⑤⑧⑥⑦C, ④③①⑦②⑥⑤⑧ D, ①②③④⑦⑥⑤⑧

8.如果一个细小的物体被放大50倍，这里“被放大50倍”是指该细小物体的（）

A、体积

B、表面积

C、面积

D、长度或宽度

9,右图是光学显微镜的一组镜头，目镜标有5×字样和15×字样，物镜标有10×和40×字样。请根据图回答下面的问题。

（1）仔细观察叶绿体的形态时，显微镜的目镜、物镜及其与盖玻片间距离的组合为（用标号作答）。此时放大的倍数为。

（2）在观察时，③与④的显微视野中比较明亮的是。

（3）若在低倍镜视野中发现有一异物，当移动装片时，异物不动，转换高倍镜后，异物仍可观察到，此异物可能在（）。

A.物镜上

B.目镜上

C.装片上

D.反光镜上

使用显微镜观察几种细胞_导学案

第一章第二节细胞的多样性和统一性 第一课时实验：使用高倍镜观察几种细胞导学案 班级姓名 【学习目标】 1.使用高倍镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点。 2.运用制作临时装片的方法 【重点】：１、使用高倍显微镜的步骤和要点 ２、归纳比较观察到的细胞在结构上的异同点 【难点】：观察到的细胞在结构上的异同点 【自主学习】 1.观察细胞用高倍显微镜可以观察多种多样的细胞。 （1）转动__ _____使视野明亮；（2）先在_______倍镜下观察清楚，然后把要放大的物象移至____ ___；（3）转动______ _换成高倍物镜；（4）观察并用______ _调焦。（5）把蛙养在_______的玻璃钢内2-3h，待蛙的皮肤_______后，再移入_______的玻璃缸内，蛙的部分上皮就会龟裂，并脱落到水中。取水中浅灰色、透明的上皮膜，用于制片、观察，可看到蛙皮肤的单层_______。 2.右图是光学显微镜的结构示意图。请据图回答下列问题。 （1）在显微镜对光时，首先转动［］_______，使之对准［］ _______，并保持2cm的距离。然后转动［］_______选择一 个较大光圈。最后__ _眼注视目镜内，同时转动［］_____ __，得到一个明亮视野。 （2）在用低倍显微镜观察时，首先应将玻片中的标本放到 通光孔的_____ __。然后双目注视_______和_______之间的 距离，转动［］___ ____，使两者靠近但不能接近。最 后左眼注视目镜（右眼要求_______），先转动____ ___，直至出现物像，再转动［］____ ___调节至物像清晰。 【注意事项】 1.关于放大倍数：放大倍数= ×，指对长度或宽度的放大，即线性放大。而不是对面积的放大。 2.镜头长度与放大倍数的关系：与放大倍数成反比，与放大倍数成正比。

用显微镜观察人血细胞涂片

用显微镜观察人血细胞 涂片 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】

用显微镜观察人血细胞涂片一、教材： 红细胞是中间在一个“亮点”的，为什么因为成熟的红细胞的没有细胞核的，中间薄，周沿厚的两面凹的圆饼状的结构，在显微镜下看，中间的透光度大，而周沿的相对小，所以红细胞是中间在一个“亮点”的。白细胞是有细胞核的，而细胞一般的装片里，是被染成蓝色的，所以我们在显微镜下在细胞里蓝点的是白细胞，因为血小板又是没有细胞核的，而血小板的形状不一。 二、教法：熟练使用显微镜，找到要观察到的细胞。 三、学生： 学生已经掌握了显微镜的使用方法，但本实验对显微镜的使用提出了较高的要求，教师应该注意引导学生仔细调好显微镜。 四、实验前的准备：人血的永久涂片，显微镜。 五、实验内容：用显微镜观察人血细胞涂片。 六、实验目的认识红细胞和白细胞。 七、实验重点：认识红细胞和白细胞 实验难点：认识红细胞和白细胞 八、教学方法：实验法。 九、实验仪器和用品：人血的永久涂片，显微镜。 十、实验过程： 把人血的永久涂片，放在低倍显微镜下进行观察，并对照彩图四，认识红细胞。白细胞，比较它们的形态和数量。 十一、实验小结：

人体内的红细胞，白细胞和血小板，可由红骨髓内的细胞演变而来；也可由脾脏和淋巴结负责制造。 血细胞也有一定的寿命，红细胞的平均寿命约120天，白细胞寿命不等，约13天，血小板的平均寿命是7天。由于白细胞和血小板的寿命短，所以在血库中贮存的血液基本上只有红细胞。在4℃，加一定的保护剂的条件下，也只能保存6～7周。而需要补充白细胞和血小板时，则要给病人输新鲜的血。 十二、作业：探究实验报告单。

用高倍显微镜观察 叶绿体和细胞质的流动实验

用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动 一、教学目标： 1.练习使用显微镜，掌握高倍显微镜的使用方法。 2.观察叶绿体的形态和分布。 3.通过在显微镜下的实际观察，理解细胞质的流动是一种生命现象。 二、教学重点： 1.掌握高倍显微镜的使用方法。 2.观察叶绿体的形态和分布，理解叶绿体的形态和分布与功能的关系。 3.通过在显微镜下的实际观察，理解细胞质的流动是一种生命现象。 三、实验原理： 1.高等绿色植物的叶绿体存在于细胞质基质中，叶绿体一般是绿色的，扁平的椭球形或球形，可以用高倍显微镜观察它的形态和分布。 2.活细胞中的细胞质处于不断流动的状态。观察细胞质的流动，可用细胞质基质中的叶绿体的运动作为标志。 四、材料用具： 菠菜叶（或藓类的叶）、新鲜的黑藻 显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、刀片、培养皿、台灯、铅笔 五、实验步骤： （1）观察叶绿体装片： 取材：取一片藓类小叶或波菜叶稍带叶肉的下表皮（薄且有叶绿体） 制片：载玻片中央滴一滴清水，将叶片放入，加上盖玻片，制成临时装片 观察：先低倍镜找到叶片细胞后高倍镜观察叶绿体（形态和分布）[光强度的变化与叶绿体的位置关系] 绘图：（用铅笔画一个叶绿体形态和分布情况清楚的叶肉细胞） 注意事项：

1）选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮（稍带叶肉）作观察叶绿体的实验材料是实验成功的关键， 因为藓类属阴生植物，菠菜叶的下表皮是菠菜叶的背阳面，这样的细胞中的叶绿体大且数目少，便于观察。） 2）实验过程中的临时装片要始终保持有水状态，目的是为了防止叶绿体失水。 如果叶绿体失水，叶绿体就缩成一团，无法观察叶绿体的形态和分布。 3）正确使用低倍镜：取镜——对光——安放装片——下降镜筒——调焦。下降镜筒时，必须双眼注视物镜和装片的距离，以免压坏装片和碰坏物镜。 4）正确使用高倍镜：将低倍镜下看到的物像移到视野中央——转动转换器，换用高倍物镜——调整光圈和反光镜，使视野亮度适宜——调节细准焦螺旋，直至物像清晰。 （2）用显微镜观察细胞质的流动： 取材：将黑藻先放在光下、25℃左右的水中培养（生成足量叶绿体） 制片：载玻片滴水、放叶，加盖玻片，制成临时装片 观察：先低倍镜找到黑藻叶片细胞，后高倍镜观察到细胞内的叶绿体随细胞质液定向呈环形流动[适当增强光照、适当提高温度、切伤等均可加速流动。] 注意事项： 1）课前应检查实验材料，以便做到心中有数。观察细胞质的流动，理想的实验材料是黑藻。实验前教师必须检查供实验用的黑藻叶片细胞质的流动情况，如果发现细胞质不流动，或者流动很慢，应立即采取措施，加速其细胞质的流动。方法有三种，可以任选一种。一是进行光照，即在阳光或灯光下放置15～ 2Omin；二是提高盛放黑藻的水温，可加入热水将水温调至25℃左右；三是切伤一小部分叶片。 2）观察细胞质流动时，首先要找到叶肉细胞中的叶绿体，然后以叶绿体作为参照物，在观察时眼睛注视叶绿体，再来观察细胞质的流动。最后，再来仔细观察细胞质的流动速度和流动方向。 3）细胞质流动与新陈代谢有密切关系，呼吸越旺盛，细胞质流动越快，反之，则越慢。细胞质流动可朝一个方向，也可朝不同的方向，其流动方式为转动式（旋转式、环流式）。这时细胞器随细胞质基质一起运动，并非只是细胞质的运动。 4）寻找最佳观察部位：应寻找靠近叶脉部位的细胞进行观察，此处细胞水分供应充足，容易观察到细胞质的流动。

七年级初一科学上册 2. 2.2显微镜的使用 观察细胞-含答案2020

七年级科学上册2. 2.2显微镜的使用观察细胞 基础闯关全练 1．（2019浙江杭州一中期中）下列关于显微镜的操作，其中属于“对光”环节的是( ) A B C D 2．（2018福建龙岩中考）显微镜下观察到洋葱根尖不同分裂阶段的细胞后，要使看到的物像更清晰，可略微转动( ) A．反光镜B．遮光器 C．细准焦螺旋D．粗准焦螺旋 3．（2018浙江温州中考）用如图所示的显微镜进行对光时，低倍镜正对通光孔，若要改变视野亮度，可调节( ) 图2-2-5 A．物镜转换器B．细准焦螺旋 C．粗准焦螺旋D．反光镜 4．（2018浙江温州四中期中）小科在显微镜下看到了“上”，实际在载玻片上的是( ) A B C D 5．（2018北京中考）关于“观察人口腔上皮细胞”实验的叙述，不正确的是( ) A．在载玻片中央滴加生理盐水 B．碘液染色有利于观察 C．应先用低倍镜进行观察 D．能观察到细胞壁 6．某同学用显微镜观察了洋葱鳞片叶内表皮细胞和人的口腔上皮细胞，作了如下记录，其中正确的是( ) ①洋葱鳞片叶内表皮细胞中央有较大的液泡 ②口腔上皮细胞主要由细胞膜、细胞质、细胞核组成 ③洋葱鳞片叶内表皮细胞中有叶绿体 ④视野中有气泡可能是盖盖玻片时操作不当造成的 ⑤视野中光线过强时，应调节反光镜和光圈 ⑥要想看到更多的细胞应换用放大倍数更大的目镜或物镜 A．①②④⑤B．②③④⑥ C．①③⑤⑥D．②③④⑤ 7.观察口腔上皮细胞，应在载玻片中央滴一滴_______。如果把口腔上皮细胞放在______中，细胞会因吸水膨胀而破裂。为了更清晰地看到细胞各部分的结构，应用______染色。

能力提升全练 1．（2018山东滨州中考）显微镜是生物学研究中常用的观察仪器，下列有关光学显微镜使用的叙述，正确的是( ) 图2-2-6 A．对光时，转动①使②对准通光孔 B．视野过暗，应调节③和⑦ C．使视野中的物像更清晰，应调节④ D．若要将位于视野右上方的物像移到中央，应向左下方移动玻片 2．（2018四川达州中考）图一至图四是某同学制作并观察“人体口腔上皮细胞”临时装片的部分图片。据图判断，错误的是( ) 一 二三四 图2-2-7 A．图一中制作临时装片正确的操作顺序是c→a→d→b B．图二中③将细胞内部与外界环境分隔开来，使细胞有一个比较稳定的内部环境 C．若该同学在显微镜下看到如图三所示的视野，则说明在制作临时装片时，图一中步骤d 操作不当 D．若该同学在显微镜视野中看到图四甲，要从图四甲变成图四乙，需先将临时装片向右上方移动，再转动转换器，选择高倍物镜 3.( 2018浙江嵊州期中)制作洋葱表皮细胞临时装片的操作步骤为：①盖上盖玻片；②用滴管在载玻片中央滴上一滴清水；③用镊子撕下一小块洋葱表皮；④用镊子把洋葱表皮展平，操作顺序排列正确的是( ) A．②④①③B．②③④① C.③②④①D．④②③① 4．（2019浙江宁波质检二）小科在实验室进行“制作洋葱表皮细胞临时装片并用显微镜观察”的实验。请你一起完成以下问题： (1)实验桌上摆放有以下四瓶试剂：①清水、②生理盐水、③稀碘液。制作洋葱表皮细胞临时装片时，小科需要用到的试剂有________（填序号）。

用高倍显微镜观察叶绿体实验步骤教学提纲

用高倍显微镜观察叶绿体实验步骤

活动目标 1．使用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体的形态和分布。 2．识别光学显微镜下的叶绿体和线粒体。 背景资料 1．相关知识 地球上绝大多数生命活动所需能量的最终源头是太阳能。绿色植物是主要的能量转换者，完成这一能量转换的细胞器是叶绿体。叶绿体利用光能将二氧化碳和水合成糖类等有机物，同时产生氧。在高等植物细胞中叶绿体呈椭球形，长径5～10 μm，短径2～4 μm，厚2～3 μm。高等植物的叶肉细胞中一般含50～200个叶绿体，可占细胞质的40%。叶绿体的数目因同种植物不同细胞类型、生态环境、生理状态而有所不同。在藻类细胞中，叶绿体形状多样，有网状、带状、裂片状和星形等，而且体积巨大，长径可达100 μm。 线粒体是动植物细胞中重要的细胞器，与能量转换有关。线粒体一般呈粒状或棒状，因不同的细胞种类和生理状态而不同，可呈环形、哑铃形、线状、分支状或其他形状。线粒体数目因细胞种类和生理状态不同有所差异，一般在一个细胞中有数百到数千个。植物细胞因有叶绿体的缘故，线粒体数目相对较少；肝细胞中约有1 300个线粒体，占细胞体积的20%；巨大变形虫中线粒体数目可达50万个；许多哺乳动物成熟的红细胞中无线粒体；酵母细胞中有一个大型分支状的线粒体。线粒体通常分布在细胞生命活动旺盛的区域。例如，在肝细

胞中呈均匀分布；在肾细胞中靠近微血管，呈平行或栅栏状排列；在精子中集中在尾的基部。线粒体在细胞质中可以向生命活动旺盛的区域迁移。 2．实验原理 （1）叶绿体的观察植物绿色部位的细胞中含有叶绿体。如果将叶片的横切片制成临时装片，就可以在显微镜下观察到叶绿体。某些植物幼嫩的叶也可直接用于观察叶绿体。 （2）线粒体的观察线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所，内含细胞色素氧化酶系。健那绿是一种碱性染料,可以专一性地对线粒体进行染色。与线粒体内的细胞色素氧化酶系发生作用时，染料始终保持氧化状态,呈蓝绿色;而线粒体周围的细胞质中的染料被还原为无色的状态。通过染色可以在高倍显微镜下观察到呈现蓝绿色的线粒体。 操作指南 1．材料藓类、菠菜或黑藻的叶，人的口腔上皮细胞，洋葱内表皮细胞。2．用具显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，消毒牙签。 3．试剂及配制方法 （1）试剂清水，健那绿染液。 （2）试剂的配制方法

用显微镜观察洋葱表皮细胞实验步骤

用显微镜观察洋葱表皮细胞实验步骤 实验过程 操作要求注意事项 （1）制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片准 备 用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干 净；用滴管在载玻片中央滴1-2滴清水。 用手捏住载玻片、盖玻片的两侧。 小心划伤。滴清水时，应滴在载 玻片中央，不宜过多。 取 材 用刀片切取一块洋葱鳞片叶（大约0 、5 平方厘米），用镊子撕取洋葱鳞片叶的内 表皮；把撕取的表皮浸入载玻片上的水滴 中，并展平。 用刀片时应小心，防止划伤。切 块时应注意切块的大小。当把表 皮在清水中展平时，有时表皮会 粘在镊子上，这时用解剖针或用 镊子在清时中轻轻晃动即可。 盖 盖 玻 片 用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载 玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要 观察的材料上。 一定让盖玻片的一边先接触水 滴，然后轻轻放下，否则会出现 大量水泡。 染 色 把一滴碘液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸 从盖玻片的另一侧吸引，使染液浸润标本 的全部。 滴加染色液时，可让载玻片一头 略高，然后用吸水纸从另一侧吸 引，连续两三次，这样才能充分 染色。 （2）用显微镜观察洋葱鳞片叶表皮细胞取 镜 与 安 放 一手握镜臂，一手托镜座，把显微镜放在 实验台中央略偏左，距实验台边缘约7厘 米。 一定用双手，显微镜位置放正确。 对 光 上升镜筒，转动转换器，使低倍物镜对准 通光孔；一只眼注视目镜，另一只眼睁开， 同时转动反光镜，使视野明亮。 注意双眼睁开。

安放玻片将玻片轻放载物台上，标本正对通光孔； 用压片夹压住玻片的两端。 注意标本摆放的位置，一定正对 通光孔。 调焦双手转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降， 同时眼睛从侧面看着物镜下降，直到物镜 接近玻片；一只眼睛注视目镜，同时转动 粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升至视野中出 现物像，微调细准焦螺旋使物像清晰。 将物镜下降时，一定从侧面看着， 小心压破玻片。 观察移动玻片，将物像移到视野中央，在低倍 镜下观察洋葱鳞片叶表皮细胞。 视野中若出现气泡（边缘粗而黑， 压玻片时会移动或变形），此时应 移动标本。

植物细胞工程综合大实验

植物细胞工程综合大实验（一） ——培养基配制和无菌操作 一、实验目的与要求 熟练掌握器皿的洗涤 MS培养基的配制分装 培养基和物品的高压灭菌 实验室的消毒灭菌 植物材料的取材及流水冲洗 无菌操作 材料的培养观察 二、实验原理 植物细胞的全能性。 三、仪器设备与器具 电子天平、移液枪、冰箱、高压锅、超净工作台、 三角瓶、烧杯、容量瓶、培养皿、搪瓷缸、镊子、 解剖刀、酒精灯、试剂瓶、玻璃棒、线绳、pH试纸、封口膜、试管刷、洗涤剂、打火机等。 四、实验材料 彩云阁茎段（用于诱导愈伤组织） 茎节（用于诱导芽） 五、实验方法与步骤 （一）器皿的洗涤

一般器皿 有培养物但未污染的器皿 有培养物且污染的器皿 （二）MS培养基的配制分装 1、MS培养基母液的配制 母液A-F，每组配制A-E 100ml、F 50ml 0.1%升汞的配制 75%酒精的配制 6-BA NAA 2、MS培养基的配制 按每人配制100ml，分5小瓶。 过程如下；每组按1L配制，先取容器内加70%的蒸馏水； 加入蔗糖30g/L；量取母液A-F；加入PGR（自己设计）；用容量瓶定容；用0.1-1N NAOH或HCl调整pH5.6-5.8；每人分100ml；加琼脂粉8g/L；分装到5个小三角瓶中、封口。 （三）培养基和物品的高压灭菌 培养基、无菌水（每组至少5瓶）、空瓶（每组至少2个）、烧杯（每组至少1个）、培养皿（每组至少一套）、接种工具（2套），包好或者分好以备高压灭菌。 高压锅的使用。 （四）实验室的消毒灭菌

75%的酒精擦拭超净工作台内表面，新洁尔灭水进行超净工作台外表面、培养架表面、墙壁及其他房间表面的擦拭。 （五）植物材料的取材及流水冲洗 选取适宜的彩云阁茎节及茎段，切割成适宜大小后放在流水下冲洗。 （六）无菌操作 演示。 （七）材料的培养观察 接种完的材料放在培养室的培养架上进行培养。培养初期每天观察一次，持续1周。之后每2-3天观察一次。 统计指标： 污染率（%）= （污染的外植体个数／接种外植体的总数）×100%。 愈伤组织诱导率（%）= （长愈伤外植体个数／接种外植体总数）×100%。 芽诱导率（%）= （长芽外植体个数／接种外植体的总数）×100%。（八）结果与分析

人教版高中生物必修一1.2.1实验 使用高倍显微镜观察细胞 教案设计

实验：使用高倍显微镜观察几种细胞 课标要求： 理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些涉及的方法和技能进行综合运用。 学情分析： 安徽省淮南市初中生物课程使用的教材版本为北师大版，此版本在《生物学》七年级上册的《第3章第1节细胞的基本结构和功能》一课中设计了三个实验活动，对光学显微镜的使用和临时装片的制作进行了非常详尽的描述。通过初中的实验教学学生应该能够掌握低倍显微镜的使用和动植物多种材料临时装片的制作。但是我们的教育发展具有不平衡性，许多农村中学甚至县城初中都还没有条件开展生物实验课。并且中考中暂时还不考生物学科，初中学生对生物的学习重视程度也不够，这造成了学生并没有掌握那些在初中就应该熟练掌握的实验技能。这是我们安徽地区高中学生普遍存在的现状，我们高中生物实验教学相当于是零起点，所以本节实验教学在指导学生使用高倍显微镜观察几种细胞之前，我们会安排学生学习初中教材中相关内容，如光学显微镜的结构、使用方法和成像特点，动植物材料临时装片的制作等。 实验分析： 1、地位分析 本实验在高中生物实验教学中的地位非常重要，是高中生物学习遇到的第一个实验，也是许多其他生物实验的基础，没有学会正确使用显微镜和制作临时装片，其他诸多实验就无法开展。所以本次分组实验要求学生学习掌握光学显微镜的使用方法，学会制作多种生物材料的临时装片，并使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点，尝试绘制细胞的结构图。高中生物实验中用到临时装片的制作和显微镜的使用主要有如下几个：（1）使用高倍显微镜观察几种细胞。 （2）检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质（脂肪的检测）。 （3）观察DNA和RNA在细胞中的分布。 （4）体验制备细胞膜的方法。 （5）用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体。 （6）植物细胞的吸水和失水（质壁分离和复原）。 （7）观察根尖分生组织细胞的有丝分裂。 （8）观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片。 （9）低温诱导植物染色体数目的变化。 （10）探究培养液中酵母菌数量的动态变化。 2、目的要求 （1）说出普通显微镜主要构件的名称和用途。 （2）掌握正确使用显微镜的操作方法。 （3）通过观察微型字符的临时装片了解显微镜的成像特点。 （4）学习制作多种动植物材料的临时装片。 （5）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点，尝试绘制细胞结构图。3、材料器具 （1）器具：显微镜、载玻片、盖玻片、生理盐水、碘液、镊子、滴管、消毒牙签、纱布、吸水纸、大烧杯、小烧杯、玻璃皿或培养皿、单面刀片、采血针、酒精灯等。 （2）材料：口腔上皮细胞、洋葱、菠菜、池水、自制微型字符和自带微小物品等。 4、方法步骤

植物细胞工程

HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY 烟草叶片愈伤组织诱导与植株再生的研究Research on Callus Induction and Plant Regeneration of Tobacco Leaves 姓名: 黄金波 CANDIDATE：Huang-Jin Bo 学号: 2012304200510 STUDENT ID：2012304200510 课程: 植物细胞工程实验CURRICULUM：Plant Cell Engineering Experiment 班级: MAJOR: 生技1201班Biotechnology 1201 指导老师：SUPERVISOR：柳俊齐迎春陈浩 Liu-Jun Qi-Ying Chun Chen-Hao 中国武汉 WUHAN， CHINA

二○一四年十二月DEC, 2014

烟草叶片愈伤组织诱导与植株再生的研究 黄金波 华中农业大学生命科学技术学院生技1201班 [摘要] [目的]以烟草叶片为材料，通过这次实验，基本掌握植物愈伤组织诱导与植株再 生的原理和方法，熟练掌握相关实验操作技术；另外，通过本次实验，完成烟草植株再生，并对比光照和黑暗等不同方法，对诱导愈伤组织状态和诱导率的影响，进行结果分析。 [方法]在无菌条件下，把烟草叶片剪成1cm2大小的小方块，先通过含0.25mg/L NAA和0.25mg/L BA的MS诱导培养基在光照和黑暗条件下诱导培养；三周后，转接到含0.25mg/L NAA和1.0mg/L BA的MS分化培养基中光照培养；两个月后，观察结果，统计分析。 [结果]诱导培养后，在光照条件下和在黑暗条件下培养的均有67.7%的被污染了；用剩下的33.3%全部接种到分化培养基上培养。结果表明分化率在光照条件下和在黑暗条件下无差别；每个愈伤组织分化芽数在光照条件下明显多于在黑暗条件下诱导；分化芽状态在黑暗和光照条件有一定的区别，分化植株苗在光照和黑暗条件下诱导没有明显区别。 [结论]光照条件和在黑暗条件下诱导可以影响愈伤分化芽数和分化芽状态。 [关键词] 烟草叶片；愈伤组织；细胞工程；分化；诱导；植株再生 Research on Callus Induction and Plant Regeneration of Tobacco Leaves Huang-Jin Bo Huazhong Agriculture University , College of Life Science and Technology , Biotechnology 1201 [Abstract] [Objective]Using tobacco leaves as materials, through the experiment, we should handle the basic principle and method of plant callus induction and plant regeneration，master related experiments’technology; In addition, through this experiment, to complete the tobacco plant regeneration, and compared different methods of callus induction, such as light and dark state, and the effects to the state and induction rate, then analyzing the results. [Method]The tobacco leaf was cut into 1 cm2 size small squares under aseptic conditions. Firstly induced in the MS induction medium with 0.25 mg/L NAA and 0.25 mg/L BA, under the condition of light and dark, respectively; Three weeks later, transferred to MS differentiation medium with 0.25 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA culturing under light; Two months later , observing the results, and analyzing the statistics. [Results]After the induction culturing, 67.7% materials were polluted both under the condition of light and dark; rest 33.3% materials were inoculated to the differentiation medium, continuing to cultivate. As a result, it was successfully. The results show that there are no obvious differences between with the light condition and dark condition. Each number of callus bud differentiation under the condition of the light induced significantly more than in the

实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞

实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞 一、实验目的： 1、学会如何使用高倍显微镜观察细胞 二、实验材料：（实验材料可换）哺乳动物血细胞涂片、紫色洋葱表皮细胞临时装片、马蛔虫卵细胞永久装片 三、实验用具：载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、紫色洋葱、刀片、显微镜（物镜5X、10X、40X） 四、方法步骤： 方法指导 a低倍镜的使用 ↓取镜→放镜→对光→放片→调焦(粗调焦和细调焦) b 高倍镜的使用 定位→换镜→调焦(细调焦) : 1、制作洋葱表皮细胞临时切片： （1）取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。 （2）撕取洋葱表皮时先用刀片划个#字，取#中间部分，避免撕取的材料过大。将撕取的洋葱表皮置于载玻片的水滴上。 （3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作。 2、观察切片： （1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。 （2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。 （3）使用5X物镜观察切片，使切片在视野中心，换成10X物镜，观察洋葱表皮结构。 （4）换成40X物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构。 3、哺乳动物血液涂片的制作及观察 4、马蛔虫卵细胞细胞永久装片的观察。 ] 注意事项 1. 使用时先用低倍镜调整光线。选一较大的光圈对准通光孔，转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内，通过目镜，可以看到白亮的视野。观察活体标本或染色较浅的标本时，要适当使视野变暗，方能看得清楚。 2. 放置玻片标本时要对准通光孔正中央，并且不能反放玻片，如标本玻片反放时高倍镜下看不到物像，并容易压坏玻片或物镜。 3. 观察时要双目睁开，切勿闭上一只眼睛。左眼观察视野，右眼用以绘图。低倍镜用粗调螺旋调节物距，使粗准焦螺旋下降时，双眼要注视物镜与玻片之间的距离，到快接近时（约０.５cm）停止下降。在使用高倍镜观察时，不能转动粗调焦。粗、细调节螺旋都不能单方向过度地旋转。 4. 不要随便取出目镜，以防尘土落人物镜上。也不要任意拆卸任何零件，以防损坏。 5. 使用完毕后，转动粗调螺旋使镜台下降，取下玻片，转动物镜转换器，使物镜离开聚光孔。再镜筒使物镜接近载物台。然后以右手握镜臂，左手托镜座轻轻放人镜箱中。 6. 每次使用显微镜之前，先按显微镜登记卡片逐项检查显微镜各部分有无损坏。如发现损坏，应及时向教师报告。使用之后，认真填写显微镜使用登记卡片。 五、考点提示： 1、动物细胞的结构是什么样的与植物细胞又什么不同 2、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何物体的大小如何 )

人教版教学教案实验一 用显微镜观察多种多样的细胞

第一章走近细胞实验一用显微镜观察多种多样的细胞 实验目的：认识显微镜的结构，初步掌握使用显微镜的方法。 能力目标：能独立使用显微镜，观察到清晰的图像。 情感目标：认同显微镜的规范操作方法，爱护显微镜。 学习重点：显微镜的使用方法。 学习难点：规范使用显微镜。 知识链接： 学习过程： 一、光学显微镜的结构和显微镜的使用 ●基础知识： 1．结构： 光学部分： 目镜、镜筒、物镜、和（有平面镜和凹面镜） 机械部分： 镜座、镜柱、镜臂、（上有通光孔、压片夹）、镜头转换器、。 注：目镜无旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越小；物镜有旋转螺丝，镜头越长，放大倍数越大。2．显微镜的使用（视频播放） （1）一般的使用程序： 取镜安放→放置玻片标本→观察→高倍镜观察。 （2）低倍镜的使用方法 ①把所要观察的玻片标本放在上，用压住，标本要正对通光孔的。 ②转动，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止。 ③眼看目镜内，同时反向缓缓转动粗准焦螺旋，使镜筒，直到看到物像为止，再稍 稍转动，使看到的物像更加清晰。 （3）高倍镜的使用方法 选好目标：在下将需要观察的目标移到视野中央。 ↓ 换用高倍镜：转动移走低倍物镜，换上 ↓ 调节亮度：调节，使视野亮度适宜 ↓ 调焦：缓慢调节，使物像清晰。 ●分析、讨论并回答下列问题 1.使用高倍镜观察的步骤和要点是什么？ 2.为什么换高倍镜之前要把观察的目标移到视野中央？

3.换上高倍镜后能不能用粗准焦螺旋来调节？ ●典型例题 1. 【A级】在使用显微镜的过程中，调光和观察时操作者的两眼应（） A.左眼注视目镜，右眼闭着 B.右眼注视目镜，左眼闭着 C.左眼注视目镜，右眼睁着 D.右眼注视目镜，左眼睁着 2. 【A级】关于“显微镜的结构和使用”的实验，用显微镜观察标本时，正确的操作顺序应是…（） ①把装片放在载物台上，使标本位于低倍镜的正下方②眼睛从侧面注视物镜，转动粗准焦螺旋使镜筒下降至离标本0.5 cm处③转动转换器，使低倍物镜对准通光孔④调节反光镜，左眼注视目镜，使视野明亮⑤用左眼注视目镜，同时转动粗准焦螺旋使镜筒上升，直到看见物像；再用细准焦螺旋调节，使视野中的物像清晰⑥转动转换器使高倍物镜对准通光孔⑦转动细准焦螺旋，直到物像清晰 ⑧将要观察的物像移动到视野中央 A.①③②④⑤⑦⑧⑥ B.③④①②⑤⑧⑥⑦ C.④③①⑦②⑥⑤⑧ D.①②③④⑦⑥⑤⑧ 二、呈像原理、放大倍数计算方法 ●基础知识： 2．显微镜成像特点：与实物相比是倒置的，即显微镜成像。 3.视野中物像的移动方向与装片中实物的运动方向正好。 4.显微镜的放大倍数是。 放大倍数= ×，这里放大的是长度或宽度，而不是面积和体积。 5.放大倍数与视野范围内细胞数量变化的关系： （1）一行细胞数量的变化，可根据放大倍数与视野范围成反比的规律计算。 （2）圆形视野范围内细胞数量的变化，可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。 6.污点判断：玻片移，目镜转，物镜换●分析、讨论 1.观察写有“上”字的标本．并写下你在视野中看到的图象。 2.放大倍数不同，看到的细胞个数与大小有什么不同？ 3.显微镜使用完后，怎么办？ ●典型例题： 1.【A级】一个细小物体若被显微镜放大50倍，这里“被放大50倍”指的是细小物体的（） A.体积 B.表面积 C.像的面积 D.长度或宽度 2.【A级】当显微镜的目镜为10×、物镜为10×时，在视野直径范围内看到一行相连的8个细胞。若目镜不变，物镜换成40×时，则在视野中可看到这行细胞中的（） A.2个 B.4个 C.16个 D.32个 3. 【A级】当你开始用低倍物镜观察自制的装片时，如果发现视野中有一异物，移动装片，异物并不动，转换高倍物镜后，异物仍在。这异物可能在… （） A.反光镜上 B.装片上 C.物镜上 D.目镜上 4. 【B级】显微镜目镜为10×，物镜为10×，视野中被相连的64个分生组织细胞所充满，若物镜转换为40×后，则在视野中可检测到的分生组织细胞数为个。 课堂小结通过本节课的学习，你掌握了哪些知识和方法？请赶快动手写下来吧！ 当堂检测 1.【A级】在低倍镜下，如果一个细胞偏向视野的右前方，要将其移到视野中心，应将玻片向哪个方向移动（） A 左前方 B 右前方 C 左后方 D 右后方 2.【A级】说说显微镜各部分的名称。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 课后作业 1.【C级】如下图所示，1、2为物镜长度；3、4为目镜长度；5、6为观察时当成像清晰时物镜与标

2.1.1植物细胞工程的基本技术导学案

2.1.1植物细胞工程的基本技术 【学习目标】1、简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。 2、尝试进行植物组织培养。 【学习重点】1、植物组织培养的原理和过程 2、植物体细胞杂交的原则 【学习难点】植物组织培养的实验 课 前 案 读课本，独立完成下列问题 （要求：能准确写出关键词与句，以课本为准） 一、细胞工程 1．概念：应用 和 的原理和方法，通过 或 上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的 或获得 的一门综合科学技术。 2．分类：根据操作对象不同，可分为 、 。 二、植物细胞的全能性 1、植物细胞的基本结构包括 、 、 、 。 2、植物细胞主要的增殖方式是 ，细胞分化是指 ，_____________________________________________________________________________原因是 。 3、全能性是指 ，表现为全能性的原因是 。 4．在理论上，生物的任何一个细胞都具有 ，但在生物的生长发育过程中，细胞并不表现 ，而是分化成各种 。 5．特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会有 地表达出各种 ，分化形成 不同的细胞，从而构成生物体的不同 。 三、植物组织培养技术 1．原理：植物细胞具有 ，具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成 的潜能。 2．过程: 离体植物的 ??→ ?脱分化 _ 组织??→ ?再分化幼根和芽或 胚状体 ??→ ?发育 完整植株。 3．细胞脱分化：已 的细胞经过诱导后，失去其特有的 而转变成未分化 细胞的过程。 4．植物组织培养：在 和 的条件下，将 的植物器官、组织、细 胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生 、丛芽，最终形 成完整植株。 四、胡萝卜的组织培养实验 1、实验原理 生物体细胞一般都是由受精卵经过有丝分裂形成的，因而都含有该生物的全套的遗传信息，都 具有发育成完整个体的潜能。因此，植物体的根、茎、叶细胞都具有 ，在一定的营养和激素条件下，可以脱分化形成 。将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽，进而发育成 。 2、实验步骤 ①．将 用自来水充分洗净，削去外皮，并切成段。用酒精棉球擦手 。 ②．在超净工作台(或接种箱)上将胡萝卜段用酒精溶液消毒30s 后，立即用 清洗2～3次，再用 处理30min 后，立即用无菌水清洗2～3次。 ③．用 的滤纸吸去胡萝卜段表面的水分。然后，在 瓷砖上，用无菌的解剖刀将胡萝卜段切成1 cm 厚的横切片，再选取有 的部位，切取1 cm 。左右的小块。 ④．将 接种到培养基上，用锡箔纸封盖瓶口，并用橡皮筋扎紧。然后，在培养瓶上贴上标签，写明材料名称、接种日期和小组号。 ⑤．将接种后的胡萝卜组织块，放在 恒温避光条件下培养。4d 后，检查培养材料的污染情况；14d 后，观察愈伤组织的生长状况。然后，在恒温箱中继续避光培养。在培养过程中，注意定期观察和记录愈伤组织的生长情况。 ⑥．培养一段时间后，将生长良好的 转接到分化培养基上，培养一段时间后，胡萝卜的愈伤组织就可以诱导出 。然后将试管苗移栽到大田，培养成 。 五、植物体细胞杂交技术 1．概念：不同种植物的 ，在一定条件下融合成 ，并把杂种细胞培育成新的 的技术。 2．过程 离体的细胞果胶酶纤维素酶???→ ?不同细胞原生质体--------→原生质体融合 →杂种细胞→杂种植株。 【预习自测】 1、下列细胞的全能性最高的是 ( ) A 、植物的卵细胞 B 、植物的花粉 C 、被子植物的受精卵 D 、被子植物的叶肉细胞 2．下列属于组织培养的是 ( ) A ．花粉培育成单倍体植株 B ．芽发育成枝条 C ．根尖分生区发育成成熟区 D ．未受精的卵细胞发育成个体 3．组织培养的理论根据是 ( ) A ．培养基中营养物质全面 B ．细胞的全能性 C ．细胞的分裂 D ．细胞的分化 4．愈伤组织细胞在一种包含所有必需物质的培养基中培养了几个小时，其中一种化合物具有放射性(氚标记)。当这些细胞被固定后镜检．利用放射自显影技术发现放射性物质集中于细胞核、线粒体和叶绿体。可以肯定标记的化合物是 （ ） A 一种氨基酸 B ．尿嘧啶核苷酸 C ．胸腺嘧啶脱氧核苷酸 D ．葡萄糖

植物细胞工程实验 (1)

植物细胞工程 实验一 培养基母液的制备 一、实验目的与意义 学习和掌握培养基母液的配制方法。 在配制培养基前，为了使用方便和用量准确，常常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物质、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母液。当配制培养基时，只需要按预先计算好的量吸取母液即可。 二、实验器材 电子天平（称量为0.0001g ）、电子天平（称量为0.01g ）、烧杯（500ml 、100ml 、50ml ）、容量瓶（1000ml 、100 ml 、50 ml 、25 ml ）、细口瓶（1000 ml 、100 ml 、50 ml 、25 ml ）、药勺、玻璃棒、电炉。 三、实验药品 NH 4NO 3、KNO 3、CaCl 2·2H 2O 、MgSO 4·7H 2O 、KH 2PO 4、KI 、 H 3BO 3、 MnSO 4·4H 2O 、 ZnSO 4·7H 2O 、 Na 2MoO 4·2H 2O 、CuSO 4·5H 2O 、CoCl 2·6H 2O 、FeSO 4·7H 2O 、Na 2-EDTA·2H 2O 、肌醇 、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B 6)、盐酸硫胺素(维生素B 1)、甘氨酸。 四、实验步骤 每种母液均配制500ml ，各成分的质量如下： 1、大量元素母液的配制 表1 MS 培养基大量元素母液制备 序号 药品名称 培养基浓度（mg/L ） 扩大20称量(mg) 备注 1 NH 4NO 3 1650 16500 蒸馏水定容至500ml 2 KNO 3 1900 19000 3 CaCl 2·2H 2O 440 4400 4 MgSO 4·7H 2O 370 3700 5 KH 2PO 4 170 1700 各成分按照表1培养基浓度含量扩大20倍，用称量为0.01g 的电子天平称取，用蒸馏水分别溶解，按顺序逐步混合。后用蒸馏水定容到500ml 的容量瓶中，即为20倍的大量元素母液。到入细口瓶，贴好标签保存于冰箱中。配制培养基时，每配1L 培养基取此液50ml 。 注意： ①配制大量元素母液时，某些无机成分如Ca 2+、SO 42一 、Mg 2十 和H 2PO 4一 等在一起可能 发生化学反应，产生沉淀物。为避免此现象发生，母液配制时要用纯度高的双蒸水溶解，药品采用等级较高的分析纯，各种化学药品必须先以少量双蒸水使其充分溶解后才能混合，混合时应注意先后顺序。特别应将Ca 2+、SO 42一 、Mg 2十 和H 2PO 4一 等离子错开混合，速度宜慢， 边搅拌边混合。

实验三 植物细胞骨架的光学显微镜观察

实验三植物细胞骨架的光学显微镜观察 一、实验目的 了解细胞骨架的结构特征及其制备技术。 二、实验器具及试剂 1．器具 普通光学显微镜、50ml烧杯、玻璃滴管、容量瓶、试剂瓶、载玻片、盖玻片、镊子、小剪刀、吸水纸、擦镜纸。 2．试剂 M-缓冲液：咪唑、KCL、MGCL2、EGTA【乙二醇双醚四乙酸】、EDTA、疏基乙醇或DTT(二硫苏糖醇)；（PH6.8）磷酸缓冲液（用NaHCO3调PH值）；Triton X-100，用M-缓冲液配制；考马斯亮蓝R250,其溶剂为：甲醇46.5ml、冰醋酸7ml、蒸馏水46.5ml；戍二醛、乙醇、叔丁醇、正丁醇、二甲苯、中性树胶等。 3. 实验材料 洋葱鳞茎 三、实验内容 细胞骨架事由蛋白质丝组成的复杂网状结构，根据其组成成分和形态结构可分为微管、微丝和中间纤维。它们对细胞形态的维持，细胞的生长、运动、分裂、分化，物质运输，能量转换，信息传递，基因表达等起到重要作用。当用适当浓度的Triton X-100处理细胞时，可经细胞质膜中和细胞质中的蛋白质和全部脂质被溶解抽提，但细胞骨架系统的蛋白质不受破坏而被保存，经用戊二醛固定，考马斯亮蓝R250染色后，可在光学显微镜下观察到由微丝组成的微丝束为网状结构，就是细胞骨架。 （一）溶液配制 （1）M-缓冲液配制： M-缓冲液(10×原液) ：咪唑34.04g，氯化镁 (MgCl2?6H2O)1.02g，EGTA（乙二醇双醚四乙酸） 3.8g，EDTA (乙二胺四乙酸)0.29g，巯基乙醇0.78g (0.7ml)蒸馏水加至1 000 ml。使用时，取100 ml (10×原液)加900 ml蒸馏水。 （2）6mmol/L（PH6.5）磷酸缓冲液配制：

用高倍显微镜观察叶绿体实验步骤

活动目标 1．使用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体的形态和分布。 2．识别光学显微镜下的叶绿体和线粒体。 背景资料 1．相关知识 地球上绝大多数生命活动所需能量的最终源头是太阳能。绿色植物是主要的能量转换者，完成这一能量转换的细胞器是叶绿体。叶绿体利用光能将二氧化碳和水合成糖类等有机物，同时产生氧。在高等植物细胞中叶绿体呈椭球形，长径5～10 μm，短径2～4 μm，厚2～3 μm。高等植物的叶肉细胞中一般含50～200个叶绿体，可占细胞质的40%。叶绿体的数目因同种植物不同细胞类型、生态环境、生理状态而有所不同。在藻类细胞中，叶绿体形状多样，有网状、带状、裂片状和星形等，而且体积巨大，长径可达100 μm。 线粒体是动植物细胞中重要的细胞器，与能量转换有关。线粒体一般呈粒状或棒状，因不同的细胞种类和生理状态而不同，可呈环形、哑铃形、线状、分支状或其他形状。线粒体数目因细胞种类和生理状态不同有所差异，一般在一个细胞中有数百到数千个。植物细胞因有叶绿体的缘故，线粒体数目相对较少；肝细胞中约有1 300个线粒体，占细胞体积的20%；巨大变形虫中线粒体数目可达50万个；许多哺乳动物成熟的红细胞中无线粒体；酵母细胞中有一个大型分支状的线粒体。线粒体通常分布在细胞生命活动旺盛的区域。例如，在肝细胞中呈均匀分布；在肾细胞中靠近微血管，呈平行或栅栏状排列；在精子中集中在尾的基部。线粒体在细胞质中可以向生命活动旺盛的区域迁移。 2．实验原理 （1）叶绿体的观察植物绿色部位的细胞中含有叶绿体。如果将叶片的横切片制成临时装片，就可以在显微镜下观察到叶绿体。某些植物幼嫩的叶也可直接用于观察叶绿体。 （2）线粒体的观察线粒体是细胞进行有氧呼吸的主要场所，内含细胞色素氧化酶系。健那绿是一种碱性染料,可以专一性地对线粒体进行染色。与线粒体内的细胞色素氧化酶系发生作用时，染料始终保持氧化状态,呈蓝绿色;而线粒体周围的细胞质中的染料被还原为无色的状态。通过染色可以在高倍显微镜下观察到呈现蓝绿色的线粒体。 操作指南 1．材料藓类、菠菜或黑藻的叶，人的口腔上皮细胞，洋葱内表皮细胞。 2．用具显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，消毒牙签。 3．试剂及配制方法