生物制品学—复习提纲
生物制品学
第一章——生物制品学绪论
一、生物制品与生物制品学的概念
1、什么是生物制品；（Biopreparate，biological products）
1）生物制品的定义：指以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为起始原材料，采用生物学技术，制成用以预防、治疗和诊断人类疾病的制剂。如疫苗、血液制品、生物技术药物、微生态制剂、免疫调节剂、诊断制品等。
（简单来说：就是利用某些生物作为原材料，通过生物学技术，制成可以用于疾病预防、治疗、诊断的制剂）
2）生物制品的特性
安全性、有效性、可接受性
2、什么是生物制品学；（biologics）
是研究各类生物制品的来源、结构特点、应用、生产工艺、原理、现状、存在的问题与发展前景等方面知识的一门科学。
（简单来说：研究生物制品的相关知识的学科。eg：如何生产、结构特点、原理、来源、优缺点）
（微生物学、免疫学、生物化学、分子生物学是其理论基础；现代生物技术是其技术基础）
二、生物制品学的起源与发展
1、现代生物技术的定义、分类与地位；
1）生物技术的定义：指应用自然科学及工程学的原理，依靠微生物、动物、植物体作为反应器将物料进行加工以提供产品来为社会服务的技术。
（简单来说：就是一种应用生物学、工程学的知识，靠各种生物作为反应器创造可服务社会的产品的技术）
2）生物技术的特点：①多学科性和综合性；②微生物、动植物作为生物催化剂；③最终目的将生物反应开发成为工业生产的工艺过程，即生物反应过程（Bioprocess）。
3）现代生物技术的定义：指以现代生命科学为基础,把生物体系与工程学技术有机结合在一起，按照预先的设计定向地在不同水平上改造生物遗传性状或加工生物原料，产生对人类有用的新产品或达到某种目的的综合性科学技术。
（简单来说：就是生物技术的定义上，基础变了，更深层了，涉及不同水平）
4）现代生物技术的分类
5）地位：
是21世纪影响国计民生四大科学技术支柱之一；是21世纪世界知识经济的核心；是当今国际竞争最为激烈的高科技领域之一。
2、生物制品学的起源与发展；
1）阶段划分（三个阶段）
经典生物技术阶段（classic biotechnology stage）——特点：以生物资源为材料；认识逐渐从“感性－理性－感性”，即“实践－理论－实践”；生物制品萌生
↓
近代生物技术阶段（recent biotechnology stage）——特点：产品种类多；生产设备先进、规模大；生产技术高；材料和成品的质量好、效价高；学科之间相互渗透和交叉
↓
现代生物技术阶段（modern biotechnology stage）——特点：生命科学进入了分子生物学时代；新产品种类多；新技术不断涌现、带动了生物工程产品的发展。
三、生物制品的分类与作用
1、生物制品的分类；
1）按组成及用途分
预防类、治疗类、诊断类
2）按来源分类
人源类、动物源类、植物源类、微生物源类
3）按使用对象分裂
用于人类、用于家禽类、用于家畜类、用于作物类
4）按结构与功能分类
疫苗类、抗体类、人血代替用品、重组细胞因子、反义寡核苷酸、重组激素类
2、生物制品的作用；
1）生物制品在疾病预防中的作用
2）生物制品对疾病的治疗作用
3）生物制品在疾病诊断方面的作用
第二章生物技术与生物制品学的国内外研究现状
一、生物技术与生物制品行业特点
1、生物制品行业的分类地位：根据国民经济行业分类标准，生物制品行业属于医药制造业中的生物、生化制品的制造行业。
2、生产特点
①起步晚、发展速度快，前景美好；
②研发的产品面广，具有高速的成长性和广阔的发展空间；
③有重大的科研价值、巨大的经济效益和社会效益。
3、行业特点
高回报、高技术、高投资、长周期、高风险、低污染
二、世界各国生物技术与生物制品产业发展的总特点
——全球化的生物医药发展浪潮已基本形成。生物医药的发展已成为衡量一个国家科技和经济整体实力的重要标志。
1、发展特点
1）产业化进程明显加快：
表现为：数量增加、销售额每5年翻一番，年增长率高达30%、向支柱产业发展
2）研发投入不断增加，市场并购重组高潮迭起：
表现为：研发投入占销售额的比重则在20%以上、
3）呈现市场集中、产品集中的显著趋势
表现为：发达国家主导、药企主导专利市场、产品集中
4）创新成果增多
表现为：新药种类增多；新技术、新试剂不断出现；专利数增加、新的生产工艺
实例：
新医疗技术——干细胞移植治疗(Stem Cell Therapy)、基因治疗(Gene Therapy)、移动医疗(MobileHealth)、精准医疗(Precision Medicine)
新型生物反应器和新分离技术
新检测技术
5）各国政府高度重视生物产业发展
表现为：把生物技术产业作为国家优先发展的战略性产业；发达国家加速抢占生物技术产业发展的制高点
三、国外生物技术产与生物制品产业发展概况
1、国外生物技术产业发展的基本状况
1）产品的销售额增长迅速
2）生物医药率先成为现代生物技术产业的主体产品
3）生物技术发展的“第二个浪潮”在农业领域兴起
4）生物技术发展的“第三次浪潮”在工业领域掀起
2、国外一些国家生物技术产业的发展模式和策略
1）发达国家已形成若干生物医药产业密集区
2）加速抢占发展制高点，自主创新成为发展关键。
3）战略性技术同盟成为新药开发的成功模式
4）生命科学家与创业投资者结合，不断拓展生物产业发展的新途径、新业态。
5）全球医药外包高速发展
四、我国生物技术产业与生物制品产业的现状
1、目前状况和主要成就
①已形成比较完备的生物制品生产体系和流通网络
②集聚化发展趋势日趋显著；
③创新与产业化能力不断提升
④国际合作积极推进；
⑤销售额快速增长
⑥制定了一系列的法规文件
2、我国生物技术与生物制品产业发展策略
1）战略条件分析
——优势
①政府高度重视
②我国生物产业规模不断壮大
③研发条件改善、基础设施改善
④人才和技术有了相当的储备
⑤生物、遗传资源丰富
⑥市场广阔
——劣势
①企业规模小，经济效益低，市场竞争环境不良；
②技术储备不足，自主创新能力薄弱，缺乏自主知识产权产品；
③科技投入不足；
④科技体制和发展高新技术产业的政策与机制尚不完善；
⑤产业化人才缺乏，研究与产业化脱节；
⑥生物企业不够集中，缺少沟通，没有做到协同发展；
——面临的冲击
①进口生物制品的冲击；
②外资企业直接进入的冲击；
③国外新药开发的冲击；
④外国公司市场开发的优势；
⑤知识产权的纷争。
2）总体战略与目标
——总体战略（Strategy）
● 坚持供给创新
● 坚持需求引领
● 坚持产业集聚
● 坚持人才兴业
● 坚持开放融合
——目标
按照《“十三五”国家战略性新兴产业发展规划》要求：
——重点任务
①构建生物医学新体系
②提升生物医学工程发展水平
③加速生物农业产业化发展
④推动生物制造规模化应用
⑤培育生物服务新业态
⑥创新生物能源发展模式
（任务：构建基于干细胞与再生技术的医学新模式；推进基因编辑技术研发与应用；加强合成生物技术研发与应用。）
——主要研制产品
传统疫苗的改造；新型疫苗的研制；抗体和蛋白质等生物技术药物的研制；重大疾病诊断和检测技术的研究；核酸药物的研制；基因治疗和细胞治疗等生物治疗产品的研制；产业化技术的研究
——保障措施（measure）
①完善管理方式
②构建产业创新体系
③强化知识产权保护和运用
④深入推进军民融合
⑤加大金融财税支持
⑥加强人才培养与激励
五、我国生物技术与生物制品产业展望
展望——鉴于我国经济在未来仍将保持中高速增长，居民可支配收入不断增长，人口老龄化进程加速，民众健康意识和消费能力不断提高，我国生物医药产业将在未来较长时期内持续中高速增长态势。
1、市场规模发展迅速，需求推动未来中国医疗市场规模迅速扩容。
2、自主创新示范区高速扩围，创新发展能力不断提升；
3、中西部园区全面崛起，东中西“五三二”格局初成；
4、紧盯“一带一路”，国际合作再启新篇；
5、生物医药产业园外包服务（CRO）更加完善。
第三章——生物制品的制备与常用技术
一、一般生物制品的制备方法
——生物制品制备：在不破坏生物活性物质的结构和功能的前提下，分离、提取、纯化生物体内的生物活性物质。
过程：原材料的选择和预处理→组织及细胞的破碎→提取→分离纯化→干燥与保存→制剂（1）原材料的选择、预处理和保存方法
1）原材料的来源：
——天然的生物材料；工程菌或细胞、人工改造的动植物
2）原材料选择所遵循的原则：
①有效成分含量高，新鲜；
②来源丰富、易得、产地较近；
③杂质含量少；
④成本低；
⑤质量稳定、可以控制；
⑥对具有手性物的原料，要了解它的同分异构体。
3）原材料选择的注意事项：
①植物的生长季节
②微生物的生长期
③动物的年龄与性别
4）原料的预处理：
——植物原料：就地去除不用的部分，保鲜处理。
——微生物原料：及时地将菌体细胞与培养液分开，进行保鲜储存。
——动物原料：采集后立即就地去除结缔组织、脂肪组织等不用的成分，迅速冻存。
5）原料的保存方法
①冷冻法——适用于所有生物原料。常用-40℃速冻。
②有机溶剂脱水法——适用于原料少而价值高、有机溶剂对活性物质没有破坏作用的原料，如脑垂体等。常用的有机溶剂是丙酮。
③防腐剂保鲜法——适用于液体原料，如发酵液、提取液等。常用乙醇、苯酚等。
（2）生物制品的提取
提取生物活性物质都必须遵循以下原则：
● 保持制品的天然状态，不丧失其生物活性；
● 提高提取率。
1）保护措施
①采用缓冲系统——常用的缓冲系统有：柠檬酸盐缓冲系统、磷酸盐缓冲系统、醋酸盐缓冲系统、碳酸盐缓冲系统、硼酸盐缓冲系统、Tri－HCl缓冲系统等。
②添加保护剂——加入还原剂可以防止目的物被氧化；加入金属螯合剂可防止金属离子抑制目的物活性。
③抑制水解酶的作用——加入酶抑制剂；选用一定pH的缓冲系统，减少酶的释放或降低酶活力。
2）生物组织与细胞破碎（obtrite of tissue and cell）
Ⅰ.概念：指采用不同手段破坏细胞外围使细胞内含物释放出来，转入液相中，以便于进行产物的分离纯化的过程。（细胞破碎对提高提取率很重要）
Ⅱ.胞破碎的步骤与方法：
①细胞收集——收集的方法主要是：离心分离和过滤技术。
②细胞破碎——收集的方法有机械法、非机械法
机械法——固体剪切作用（珠磨法、压榨法）
——液体剪切作用（高压匀浆法、超声破碎法）
——高速珠磨法（high spced Bead mill）
优点：破碎效率高，适用范围较广，特别是坚硬植物材料；兼有破碎与冷却双重功能，减少了产物失活的可能性；
缺点：设计操作时要充分考虑冷却系统的热交换能力；影响破碎率的参数较多，优化设计较复杂。
——高压匀浆法（High-pressure homogenization）（作用机理是液体剪切作用）
优点：对生物大分子的机械破坏作用小；适用于量少、较柔软、易分散的组织细胞；破碎程度高。
缺点：不适合于易造成堵塞的团状或丝状真菌、较小的革兰氏阳性菌和含有包含体的基因工程菌。
——超声波振荡破碎法（Ultrasonication）（使用时注意降温，防止过热）
特点：操作简单，重复性较好。局部产热，损失活性。
适用：是一种强烈的细胞破碎方法，多用于微生物和组织细胞的破碎。
非机械法——物理方法（反复冰融法、冷热交替法、干燥法）
——化学方法（自溶法、溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法）
——反复冻融法
特点：设备简便, 活性保持好；耗时、耗能，大规模应用困难。
适用：多用于动物性材料，大肠杆菌和细胞壁较薄的细胞，特别适用于位于细胞间质的酶的释放，但大多数对微生物细胞作用较差。
——冷热交替法（急热骤冷法）
将材料投入沸水中，维持85～90℃数分钟，冰水浴中急速冷却，是细胞壁结构破坏。用于从细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时。
——自溶法（Autolysis）
将新鲜的生物材料置于一定的pH和适当的温度环境，细胞结构在自身所具有的各种水解酶（如蛋白酶和酯酶等）的作用下发生溶解，使细胞内含物释放出来。
——溶胀法
将新鲜的生物材料置于低渗溶液或低浓度盐溶液中，由于渗透压差的存在，溶剂分子大量进入细胞，将细胞膜胀破释放出细胞内含物。
——有机溶剂处理法
利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶剂或SDS等表面活性剂处理细胞，将细胞膜溶解，从而使细胞破裂。多用于破碎细菌，提取核酸时；此法也可以与研磨法联合使用。
——酶解法
特点：作用条件温和，内含物成分不易受到破坏；细胞壁损坏的程度可以控制；细胞外形较完整，不残留细胞碎片；此法适用多种微生物；但使用受到酶的价格和通用性的影响；不适于工业生产。
③通常：
细菌：加溶菌酶，再结合反复冻融或加EDTA；
酵母：常用β-葡聚糖酶；
霉菌：加几丁质酶；
植物材料：加纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶等
④机械破碎法和非机械破碎法的比较
⑤选择破碎方法的依据
——细胞的处理量
——细胞壁的强度和结构
——目标产物对破碎条件的敏感性
——破碎程度
3）提取（extraction）
目的和作用：
除去与目的产物性质差异较大的杂质；
使物料浓缩，为后续的精致工序创造条件。
Ⅰ.固液分离
方法：离心法、过滤法、双水相分配法
①离心（centriugation）
离心是利用离心力，分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的方法。
②过滤技术（flitrtion）
原理：在一定的压力差下，利用多孔性介质截留固液悬浮液中的固体粒子，进行固液分离。（实验室常用膜过滤技术，包括：微滤；超滤；反渗透）
——微滤（micro- flitrtion）：截留直径0.1～10µm。用于分离细胞、细胞碎片、包含体和蛋白质沉淀物等固体颗粒。
——超滤（ultra-flitrtion）：截留直径为0.001～0.1µm，通常以截留相对分子质量划分。用于分离病毒、蛋白质、多糖和核酸等大分子物质。具有浓缩、精制和透析的功能。
——反渗透（reverse osmosis）：反渗透又称之为逆渗透，是一种以压力差为推动力，从溶液中分离出溶剂的膜分离操作。因为它和自然渗透的方向相反，故称反渗透。截留直径为
0.00001～0.1µm。用于脱去抗生素、氨基酸等小分子中的水分。
③双水相萃取系统
是由两种水溶性高聚物或一种高聚物与无机盐在水溶液中混合而成。
（常用的双水相系统有聚乙二醇-葡聚糖和聚乙二醇-无机盐）
双水相萃取系统优点：
——分相快，操作条件温和，含水量高（70%-90%）接近生理环境。
——克服离心分离中设备投资大、能耗高的缺点，也不存在膜过滤中的泄漏和堵塞的问题。——易于工艺方法和连续操作，可直接从培养液或提取液中提取目的蛋白。
Ⅱ.影响提取的因素
①目的物在提取的溶剂中溶解度的大小；
②由固相扩散到液相的难易度；
③溶剂的pH值和提取时间。
4）分离纯化（isolation and depuration）——是生物制品制备过程中的核心技术
Ⅰ.分离纯化的实质与最终目标
除去各种杂质、将目标产品成分进行富集与浓缩
Ⅱ.常用的方法和技术
离心法、沉淀法、层析、电泳
Ⅲ.理想的分离纯化方法的确定
根据物质的物理化学性质和具体实验条件进行预试、参考借鉴前人经验
Ⅳ.分离纯化技术的要求
①技术条件温和：能保持产物生物活性；尽可能在较低温度和洁净环境中进行。
②选择性好：能从复杂的混合物中有效的将目的产物分离。
③收率高
④两个技术间能直接衔接；
⑤整个分离纯化过程要快，时间短；
⑥保持环境清洁，防止杂物污染。
Ⅴ.分离纯化工艺应遵循的原则
①具有良好的稳定性和重复性；
②尽可能减少组成工艺的步骤；
③各技术步骤间要相互适应和协调；
④尽可能少用试剂；
⑤所用时间要短
⑥必须收率高、易操作、能耗低
⑦具有较高的安全性
二、各类生物制品分离纯化的方法
蛋白质、氨基酸、糖类、脂类、核酸
（1）蛋白质类制品的分离纯化
1）分离纯化方法
沉淀法、按分子大小分离方法、按分子所带电荷分离方法、亲和层析法、按疏水性分离方法Ⅰ.沉淀法（precipitation）
原理：通过破坏蛋白质胶体颗粒表面的水化膜或电荷，使蛋白质发生沉淀。
方法：盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、与靶物质结合沉淀法
①盐析法（salting out）
中性盐
蛋白质溶液——→水化层减弱中和电荷——→溶解度下降沉淀
（常用中性盐有硫酸铵、硫酸钠、硫酸钾和磷酸钠等）
——硫酸铵优点：
在水中的溶解度大，温度系数小，不影响活性，分离效果好，价廉易得。
——硫酸铵缺点：
缓冲能力较差，铵离子的存在会干扰蛋白质的测定。
②有机溶剂沉淀法（organic solvent precipitation）
水溶性有机溶剂
蛋白质溶液——→介电常数降低水化膜破坏——→溶解度下降沉淀
（此法分辨力比盐析高，但蛋白质较易变性，应在低温下进行）
③等电点沉淀法（isoelectric precipitation）
在低的离子强度下，调pH至等电点，使蛋白质所带净电荷为零，降低了静电斥力，而疏水力使分子间相互吸引，形成沉淀蛋白质。
Ⅱ.按分子大小分离方法
原理：蛋白质胶体颗粒的大小不同，可以通过不同孔径的介质。蛋白质胶体颗粒的大小不同，扩散速度和沉降速度不同。
方法：透析法、超滤法、凝胶过滤法、超离心法
①透析（dialysis）
蛋白质是高分子化合物，不能透过半透膜。将蛋白溶液装入用半透膜制成的透析袋中，可将蛋白质溶液中的小分子化合物除去，这种方法叫透析。
应用：除盐和浓缩
②超滤（ultrafiltration）
利用在压力下使大分子滞留超滤膜，而小分子及溶剂滤过的方法叫超滤；
应用: 蛋白质溶液除盐、浓缩及分离纯化。
③凝胶过滤法（gel chromatography）
也称分子排阻层析（SEC）或分子筛层析，这是根据分子大小不同分离蛋白质混合物最有效的方法之一。常用的填充材料是葡萄糖凝胶（Sephadex ged）和琼脂糖凝胶（agarose gel）。优点：
——凝胶结构稳定，本身不与样品发生化学反应。
——操作条件较温和，不易引起生物活性物质的变性。
——样品得率高，重复性好。
缺点：
——要求样品和洗脱液的粘度要低。
——凝胶颗粒内部网络孔径大小非常有限，可被
——纯化的物质的分子量范围受到限制。
——凝胶结构对某些溶质分子具有吸附作用。
——样本体积增大。
应用：脱盐和更换缓冲液、蛋白质分子的分级分离、蛋白质分子量测定
Ⅲ.按分子所带电荷分离方法
原理：蛋白质和酶为两性电解质，在远离等电点的pH时便会带正电荷或带负电荷。
方法：电泳法、离子交换层析法、等电聚焦
①电泳（electrophoresis）
蛋白质在电场中可向其所带电荷相反的方向移动，这种现象叫电泳。
应用：分离蛋白质和测分子量。
②离子交换层析（Ion Exchange chromatography）
离子交换层析（IEC）是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。
应用：常用于样品分子大小相似，但在一定条件下带电荷状态不同的蛋白质的分离。
离子交换层析法的优点：
——分辨率高，容量大，操作简单；
——灵敏度高、重复性、选择性好；
——分离速度快；
——易自动化。
（可用于纯化的各阶段——粗纯、中间和精制）
Ⅳ.亲和层析法（affinity chromatography，AFC）
原理：利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力，达到分离目的。
特点：过程简单、迅速；分离效率高；目标产物纯度高；专一性强。
Ⅴ.疏水层析法（hydrophobic interaction chromatography，HIC）
疏水层析法是根据被分离组分分子表面的疏水残基与固定相的疏水配基之间结合力差异进行的层析分离方法。
原理：蛋白质表面存在的疏水补丁；蛋白质发生（局部可逆性）变性时，原本隐藏于分子内部的疏水残基暴露至分子表面；在高盐浓度下，暴露于分子表面的疏水残基容易与疏水性固定相结合。依次用从高至低离子强度洗脱液可将疏水作用由弱到强的组分分离开。
（2）氨基酸类制品的分离纯化（isolation and depuration of Aa）
1）氨基酸的用途
已能生产20种及其衍生物百多种，年总产量百万吨；主要用于医药、食品、饲料及化工行业；
2）氨基酸的生产方法
生产方法：4种。天然蛋白质水解法（酸水、碱水、酶水）；化学合成法；发酵法；酶促合成法
①盐酸水解（protein hydrolysis）：为常用方法，其优点是水解迅速、完全，产物全部是L-型氨基酸，缺点是色氨酸全部被破坏，丝氨酸等部分被破坏。
②碱水解法（base hydrolysis）：易产生消旋作用，较少应用。
③酶水解法（enzyme hydrolysis）：水解不够完全，过滤困难。
④化学合成与酶促合成法
——化学合成法：一般得到的是DL-型氨基酸，尚需要对异构体拆分；
——酶促合成法：也是酶工程在医药工业上的应用，优点是技术工艺简单，转化率高，副产物少和易提纯等。
⑤发酵法（fermentation）：发酵菌株，从培养液中提纯氨基酸；应用最广。
3）氨基酸分离纯化的方法
沉淀法、吸附层析法、离子交换法
①沉淀法（percipitation）
根据形成沉淀的原理不同分为两种：
一是：溶解度差异沉淀法——依据不同氨基酸在水中或其他溶剂中的溶解度差异进行沉淀分离。
二是：特殊试剂沉淀——用特殊试剂沉淀某种氨基酸
②吸附层析法（adsorption hydrolysis）
是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱状的一种层析方法。
（常用的吸附剂：有极性的和非极性的两种。极性的：羟基磷灰石、硅胶、氧化铝、人造沸石等。非极性的：活性炭等。）
特点：价廉、装置简单、易再生、分辨率较好。
③离子交换法（ion-exchange)
氨基酸是两性电解质。在一定pH条件下, 不同氨基酸带电性质及解离状态是不相同的，因此在离子交换剂上被吸附的强度不同。常用的离子交换剂为强酸型阳离子交换树脂，洗脱主要用pH梯度洗脱。
（3）糖类制品的分离纯化
1）糖类物质的种类
糖类：单糖、寡糖、多糖（﹥20个）、黏多糖
衍生物：糖蛋白、脂多糖（糖复合物）
2）药用价值：
抗凝、降血脂、提高免疫力、抗肿瘤、抗辐射。
3）制备方法：
原料来源不同，分离提取和纯化工艺不同。
Ⅰ.简单糖的制备
制备：
乙醚脱脂→乙醇温浸→醋酸铅去杂→浓缩→再乙醇温浸去杂→脱色→浓缩→冷却→结晶Ⅱ.多糖的提取
①多糖来源：动植物器官、菌类及微生物发酵产物。
②粘多糖的提取:
——非降解法（non-degradation）
用于从含一种粘多糖的动物组织中提取粘多糖，采用的溶剂是水或盐溶液。
——降解法（degradation）
用于从组织中提取结合比较牢固的粘多糖，可采用碱或酶等试剂。
Ⅲ.分离纯化
沉淀法、离子交换层析法
①有机溶剂沉淀法（Organic solvent precipitation）：乙醇是从提取液中沉淀多糖的最简易方法，也适用于分级分离。用碱性季铵盐与酸性多糖、黏多糖形成季铵络合物也可沉淀粘多糖。粘多糖的聚阴离子能与某些阳离子表面活性剂结合成不溶于水的盐。
②离子交换层析法（ion exchange chromatagraphy)：粘多糖的聚阴离子能够很好地被阴离子交换剂吸附和分离。洗脱可用NaC1溶液进行梯度洗脱。
（4）脂类制品的分离纯化
1）脂类的特性：不溶于水，但溶于乙醚、氯仿、苯；在水中相互聚集形成内部疏水的聚集体；自然状态下是以结合形式存在的。
2）种类：甘油三酯；类酯：磷脂类、糖苷、固醇、类固醇
①提取方法
直接抽提法：游离形式的脂类可直接提取。如，卵磷脂、脑磷脂、亚油酸
水解法：用有机溶剂破坏结合键，将脂质溶解。溶剂：醇、氯仿、水等。
②分离方法（沉淀法、吸附层析法、离子交换层析法）
——沉淀法（precipitation）：由于不同脂质在丙酮中溶解度不同，故常用它进行沉淀。——吸附层析法（adsorption chromatography）：通过极性和离子力等把各种化合物结合到固体吸附剂上。（常用吸附剂：硅胶、氧化铝等）
③离子交换层析法( Ion exchange chromatography ): 脂质分子的存在有非解离、两性离子和酸式解离三种状态。根据它们在一定pH条件下的解离情况，选择适当的离子交换剂可将它们提纯。
（5）核酸类制品的分离纯化
1）制备和提取方法
①提取法
破碎细胞
↓
先提取核酸与蛋白质复合物
↓
解离核酸与蛋白质
↓
分离RNA与DNA
②发酵法主要用于生产单核苷酸
2）纯化方法：盐析法及沉淀法、离心法、膜分离法
三、基因工程生物制品的制备
（1）基因工程生物制品的定义
——指采用重组DNA技术，对编码所需蛋白质的基因进行遗传修饰，利用质粒或病毒载体将目的基因导入适当的宿主细胞，表达并翻译成蛋白质，经过提取和纯化等步骤制备而成的具有生物学活性的蛋白质制品，用于疾病的预防、治疗或诊断。
（2）基因工程生物制品制备的主要程序
①目的基因的克隆
②构建DAN重组体
③DAN重组体转入宿主菌或细胞—上游技术
④建立工程菌或工程细胞
⑤工程菌或细胞发酵—下游技术
⑥表达产物的分离纯化
⑦除菌
⑧产品的检验—成品
⑨包装
——上游技术：是指目的基因获得、载体切割、连接、转入合适的宿主细胞、筛选、克隆表达和优良生物物种的选育、基因工程、细胞工程、生物反应过程
——下游技术：主要是指基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程1）目的基因的获得
①逆转录法（Reverse Transcription）
②PCR扩增
③化学合成法
2）目的基因的克隆与诱导表达
3）种子系统或细胞库的建立
种子系统或细胞库系统实行三级管理制：
种子批系统——原始种子批、主种子批、工作种子批
细胞库系统——细胞种子、主细胞库、工作细胞库
4）生物制品的产业化
实验室试验→归属研发部门完成
小试、大试→归属中试部门完成
①小试——就是根据试验室效果进行放大。
②中试——中试是中间性试验（pilotscale experiment）的简称，其过程有小量中试、放量中试和小批量生产。中试的任务是对生产工艺、工装、生产环境测试程序及工作程序、结构验证、产品数据、产品可靠性、物料可采购性、研发遗留问题等进行验证。
5）基因工程生物制品生产的基本过程
——基因工程产品的后处理— —分离纯化技术和工艺不仅影响产品的质量和成本，也决定着产品的产量。
6）影响基因工程生物制品分离纯化工艺设计的因素
基因工程生物制品生产工艺中，上游和下游涉及的各种因素均对分离纯化技术和工艺有直接影响
℃.含目的产物的起始物料的特点
①菌种类型及其代谢特性
● 菌种的各种生物学性质；
● 产物和副产物种类；
● 表达方式，产物在细胞内所处的位置；
● 毒物等。
②原材料和培养基的来源及其质量
③生产工业和条件
℃.物料中杂质的种类、浓度和性质
● 相关性杂质：发酵过程中的副代谢产物。
● 非相关性杂质：包括色素、热原质、毒性物质等有机杂质。
● 性质：结构、相对分子量、电荷性质及数量、生物学特性、稳定性、溶解度、分配系数、挥发性、吸附性能等。
℃.目的产物的分子特性
——指目标产物的化学、物理和生物学特性。
℃.产品质量的要求
——产品质量标准和用途决定了对产品纯度、生物活性、比活的要求。
7）选择分离纯化方法的依据
根据产物表达形式来选择
根据分离单元之间的衔接选择
根据分离纯化工艺的要求来选择
℃.根据产物表达形式来选择
①分泌型表达
——发酵上清液的特点：
体积大，且目标产物浓度通常较低；多为悬浮液，粘度大，不易过滤；滤液浑浊、滤速极慢；含有高价无机离子；
——发酵上清液处理的目的：
发酵液杂质的去除：包括除去蛋白质、多糖、高价无机离子以及色素、热原质、毒性物质等有机物质；
改善发酵液的物理性能：流变性质、颗粒粒度。
小结：
（1）分泌性表达
——体积大、浓度较低，纯化前浓缩，用沉淀和超滤
（2）产物在周质表达
——低浓度的溶菌酶处理，渗透压休克法，亲和层析等
（3）细胞内可溶性表达产物
——首选亲和分离方法、离子交换色谱
（4）细胞内不溶性产物——包含体
——先离心回收包涵体，再依次洗涤、溶解、变性、复性、纯化
四、生物制品的保存与运输
（1）生物制品的保存
1）液态保存
——低温下保存、超低温保存、高浓度保存、在保护剂下保存、在稳定pH条件下保存、真空保存
①低温保存：蛋白质样品在-10～-20℃以下冰冻保存比较理想。
②高浓度保存：一般蛋白质在高浓度溶液中比较稳定，否则容易受水化作用的影响引起亚基解离和表面变性
③在稳定pH条件下保存：保存液态蛋白质样品时，可将溶液的pH值调到等电点
④加保护剂保存：加入某些稳定剂可以降低蛋白质溶液的极性，以免变性失活
2）固态保存（conservation of solid）
——固态的蛋白质和酶比在溶液中要稳定得多，所以常制成干粉或结晶保存。
冷冻干燥保存的优点：
①低温条件有效地防止了制品理化及生物特性的改变，有效保护了热敏性药物、生物制品有效成保份的稳定性。
②真空条件对于一些易氧化的物质具有很好的保护作用。
③经过冻干后制品水份含量非常低，受污染的机会减小，这不仅方便了运输还延长了制品保存期限。
④加水后能够快速溶解并恢复原有水溶液的理化特性和生物活性。
注：不同制品或制剂使用不同的保护剂,一般情况下
● 菌种或毒种保存：常用甘油作保护剂；
● 细胞株保存：常用二甲基亚砜（DMSO）；
● 疫苗冷冻真空干燥制备时：加脱脂乳（或二甲基亚砜）和蔗糖等（不同国家有不同配方）；
● 干扰素类生物活性物质的保存：加葡聚糖。
（2）生物制品的运输
1）生物制品的运输应遵守下列原则：
①尽量采用最快速的运输方法，以缩短运输时间
②尽量用冷藏方法运输，尽量避免夏季运送制品
③冬季运输应注意防止制品发生冻结
五、生物制品的质量检测与控制
六、生物制品的质量管理
生物制品考试复习资料(名词解释)
1、联合免疫：采用多种具有免疫原性的抗原联合制成多联或多价疫苗，注射这种疫苗克预防多种传染病或相同疾病的不同亚型，也可将多种疫苗同时进行免疫接种，已达到预防多种传染病的目的。 2、免疫佐剂：凡非特异地通过物理或化学的方式与抗原结合而增强其特异免疫性的物质 3、先天性免疫系统：是人体天生具有的免疫保护系统，包括四道主要防线，即物理防线、生理防线、吞噬细胞防线和感染反应防线。 4、基因工程亚单位疫苗：又称生物合成亚单位疫苗或重组亚单位疫苗，主要是指将病原微生物的抗原基因用分子生物学的方法分离，然后与载体DNA相连接，再经载体将抗原基因带进受体进行复制与表达，最后将基因工程表达的蛋白质抗原分离纯化后制成的疫苗。 5、肿瘤坏死因子：是一类具有广泛生物学活性的细胞因子，能引起肿瘤出血性坏死。对各种正常细胞具有广泛的免疫生物学活性。 6、单克隆抗体：是将抗体产生细胞与具有无限增值能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及克隆花使杂交瘤细胞成为纯的单克隆细胞系而产生。 7、抗原：指能够刺激机体产生免疫应答，并能与免疫应答产生抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合，发生免疫效应的物质。 8、转基因植物疫苗：通过介导特定的外源基因来获得转基因植物，以改良植物、研究植物功能，生产具有重要经济价值的蛋白质。 9、细胞因子：是人类或动物的各类细胞分泌的具有多样性生物活性的因子，是一组可溶性的不均一的蛋白质分子，能够调节细胞的生长与分化 10、类毒素：是一种主动免疫制剂，用于细菌毒素性疾病的预防，包括白喉、破伤风等类毒素。 11、灭火疫苗：是将自然强毒株或标准菌株人工大量培养后，经加热处理或福尔马林、戊二醛、B-丙内酯等化学处理制成的。灭火疫苗需加工佐剂以提高其免疫效果。 12、集落刺激因子：是一类能参与造血调节过程的酸性糖蛋白分子，在体外培养中能刺激骨髓造血细胞分化增值为细胞集落，又称造血刺激因子或造血调节因子。 13、疫苗：是一种特殊的药物，一类由免疫学的经验、理论和生物技术共同发展而产生的生物制品，它与一般药物具有明显的不同，主要用于健康人群，通过免疫机制预防疾病发生。 14、离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。 15、蛋白质等电点沉淀：当蛋白质溶液的PH=pI时，蛋白质的净电荷为0，因而失去了水化和分子间相斥的作用，疏水性氨基酸残基暴露，蛋白质分子相互靠拢、聚集，最后形成沉淀析出，即等电点沉淀。 16、免疫原性：指疫苗接种进入机体产生免疫应答的强度和持续时间，影响因素包括：1，抗原的强弱、大小和隐定性2，抗原的理化性质
生物制品与工艺学复习大纲
1生物制品定义 生物制品（biological product）是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防、治疗和诊断的药品。 2生物制品的分类: 按来源分：人源生物制品、动物源生物制品、植物源生物制品、微生物源生物制品 按用途分：预防类、治疗类、诊断类 3.英国科学家Edward Jenner在1796年5月14日做了一次具历史意义的新尝试，并于1798年发表了论文，开创了世界上最早的弱毒活病毒疫苗，即牛痘苗的应用，从而诞生了最早的生物制品。 4.生物制品必须具备两个重要条件：安全性和有效性 5.生物制品产品免疫学鉴定方法: 放射免疫、酶联免疫 6.生物制品的生产特点：a、起步晚、发展快 b、巨大的科 研价值、重大的经济和社会效益 c、产品面广，具有高速成长性和广阔的发展空间 7.人源性生物制品的特点：（1）.效价高、疗效可靠(2).安全性好、不易产生副作用(3).稳定性好(4).资源有限、研究意义重大 8.人源性生物制品的种类： a.按化学本质可分为多肽和蛋白类制品、糖类制品、脂类制品、核酸及核苷酸类制品等。
b.按其生理功能可分为酶与辅酶类制品、激素类制品、酶抑制剂类制品、细胞因子类制品等。 c.按原料来源可分为血液制品、尿液制品、胎盘制品及体液细胞来源的各种活性物质。 9.血液制品定义：由健康人的血浆或特异免疫人血浆分离、提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白组分或血细胞组分制品. 10.血液成分制品定义：用物理的或机械的方法分离出来的血液的一部分，如各种血细胞、血浆等，属于“单供者制品”，即从单个或血型相同的供血者血液中采集的。 11血浆制剂包括：新鲜冷冻血浆、普通冷冻血浆、新鲜液体血浆和冷沉淀. 12血浆蛋白主要成分：白蛋白（Alb）、免疫球蛋白（IgG）13 IgG 是再次体液免疫反应产生的主要Ig，在血清中含量最高，IgG是唯一能通过胎盘的Ig；从正常人血清中提取的IgG可有多种抗体活性，如抗甲肝、乙肝、麻疹、腮腺炎病毒、破伤风和白喉抗毒素等。 14.纤维蛋白原制剂（Fg）是一种糖蛋白，主要在肝脏中合成，是血浆黏滞性的主要决定因素。 15.组织纤溶酶原激活剂是一种糖蛋白，可激活血液内的纤溶酶原转变成纤溶酶。临床上应用于急性心肌梗塞的溶栓治疗。
生物制品复习资料
生物制品复习资料https://www.docsj.com/doc/7919317675.html,work Information Technology Company.2020YEAR
生物制品复习资料 一、名词解释： 1.生物制品：（biologics）－－是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备，用于人类和动物疾病预防、治疗和诊断的药品。 2.疫苗：(Vaccines)指人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂，或用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制剂，用于人工自动免疫。疫苗是由病原体制成的。（由特定细菌、病毒、立克次体、螺旋体、枝原体等微生物以及寄生虫等制成的主动免疫制品，一律答为疫苗。） 3.弱毒（减毒）疫苗：是指将微生物的自然强度株通过物理、化学和生物方法，连续传代，使其对原宿主失去致病力，或产品引起亚临床感染，但仍保持良好的免疫原性遗传特性，用这样的菌毒株制备的疫苗。 4.灭活疫苗：凡将特定细菌、病毒等微生物及寄生虫毒力致弱或采用异源毒制成的疫苗，称“活疫苗”；用物理方法或化学方法将其灭活后制成的疫苗，称“灭活疫苗”。 5.微生态制品：是用非病原性微生物，如乳酸杆菌、醋样芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌或双歧杆菌等活菌制剂，口服治疗动物正常菌群失调引起的腹泻的一类具有调整微生物失调恢复微生态平衡促进宿主健康作用的生物制品。 6.原代细胞： 7.传代细胞：是适应在体外培养条件下持续传代培养的细胞。例如宫颈癌细胞，中国仓鼠卵巢细胞。 8.血液制品：由健康血液分离提纯或由重组DNA技术制成的各种制剂。如血浆、白蛋白、各种球蛋白及纤维蛋白等，称为血液制品。 9.人血液代用品：(human blood substitute)是指能够携带氧、维持血液渗透压和酸碱平衡及扩充血容量的人工制剂。获准上市牛血红蛋白进行适当的化学修饰制成人血液代用品 10.保护剂：指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。（作用机制：防止失去结合水阻止结合水形成结晶、降低膜内外渗透压差、提供复苏和修复所需的营养） 11. 高免血清：多克隆抗体，是利用某种疫（菌）苗按一定程序反复免疫某种动物，并经抗体检测其滴度达到一定水平后，屠宰被免疫动物并收集全血后，经特殊处理而制成的一种生物制品。 12.佐剂：（Adjuvant）或“免疫佐剂”凡能非特异地通过物理或化学的方式与抗原结合而增强其特异免疫性的物质。 （用于疾病预防、治疗、免疫制备中。） 13.无菌动物：就是指不能检测出任何活的微生物和寄生虫的动物。
生物制品学—复习提纲
生物制品学 第一章——生物制品学绪论 一、生物制品与生物制品学的概念 1、什么是生物制品；（Biopreparate，biological products） 1）生物制品的定义：指以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为起始原材料，采用生物学技术，制成用以预防、治疗和诊断人类疾病的制剂。如疫苗、血液制品、生物技术药物、微生态制剂、免疫调节剂、诊断制品等。 （简单来说：就是利用某些生物作为原材料，通过生物学技术，制成可以用于疾病预防、治疗、诊断的制剂） 2）生物制品的特性 安全性、有效性、可接受性 2、什么是生物制品学；（biologics） 是研究各类生物制品的来源、结构特点、应用、生产工艺、原理、现状、存在的问题与发展前景等方面知识的一门科学。 （简单来说：研究生物制品的相关知识的学科。eg：如何生产、结构特点、原理、来源、优缺点） （微生物学、免疫学、生物化学、分子生物学是其理论基础；现代生物技术是其技术基础） 二、生物制品学的起源与发展 1、现代生物技术的定义、分类与地位； 1）生物技术的定义：指应用自然科学及工程学的原理，依靠微生物、动物、植物体作为反应器将物料进行加工以提供产品来为社会服务的技术。 （简单来说：就是一种应用生物学、工程学的知识，靠各种生物作为反应器创造可服务社会的产品的技术） 2）生物技术的特点：①多学科性和综合性；②微生物、动植物作为生物催化剂；③最终目的将生物反应开发成为工业生产的工艺过程，即生物反应过程（Bioprocess）。 3）现代生物技术的定义：指以现代生命科学为基础,把生物体系与工程学技术有机结合在一起，按照预先的设计定向地在不同水平上改造生物遗传性状或加工生物原料，产生对人类有用的新产品或达到某种目的的综合性科学技术。 （简单来说：就是生物技术的定义上，基础变了，更深层了，涉及不同水平） 4）现代生物技术的分类
生物制品学
1.生物制品的概念：是由微生物（细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）或微生物代谢产物、动物 毒素、人或动植物主要组织经纯化或现代生物技术加工制成的产品，用于预防、治疗和诊断疾病。 广义的生物制品还包括一些保健品，如微生态制剂。 2.生物制品学：是指研究各类生物制品的来源、结构特点、应用、生产工艺、原理、现状、存在问题 与发展前景等诸方面知识的一门科学。 3、研究内容：是研究各类生物制品的结构、功能、制备工艺、开发现状与发展战略等内容。 4、研究对象：是针对多种恶性传染病的预防、诊断和多种疾病的治疗剂，以及为达到某种特殊医学 目的或保健用的生物制品。 5、生物制品的作用：其主要应用在疾病的免疫预防、诊断及治疗方面： ①.在免疫预防上，许多国家借助生物制品控制或消灭了很多危害严重的传染性疾病。疫苗可 用于有效防制动物和人的疫病。如牛瘟、人的天花病。 ②.在诊断上，很多国家研制成功相应疫病的血清学和分子生物学诊断试剂盒。如猪瘟等ELISA 抗体检测试剂盒在发达国家普遍使用。我国研制的鸡副伤寒玻片凝集抗原等也已得到广泛使用。 ③.在治疗上，如有些动物传染病的高免血清、痊愈血清和卵黄抗体等生物制品具有帮助动物 机体杀死、抑制或消除病原体致病作用，因而成为减少经济损失的重要手段。 6、疫苗：凡接种动物后能产生自动免疫和预防疾病的一类生物制剂均称为疫苗。 7、疫苗的种类(按疫苗抗原种类、数量、来源可分为)：a.弱毒疫苗 b.重组活疫苗 c.基因工程活载体疫苗 d.病毒抗体复合物疫苗 e.灭活疫苗 f.亚单位疫苗g.基因工程亚单位疫苗h.抗独特型疫苗i.基因疫苗又称DNA疫苗'或核酸疫苗j.单(价)疫苗k.多价疫苗l.混合疫苗m.同源疫苗n.异源疫苗 8、重组活疫苗: 通过基因工程技术，将病原微生物致病性基因进行修饰，突变或缺失，从而获得 弱毒株制成的疫苗。 9、基因工程亚单位疫苗: 将病原体免疫保护基因克隆于原核或真核表达系统，实现体外高效表 达，获得重组免疫保护蛋白所制造的一类疫苗。
兽医生物制品学复习资料
1.基因疫苗：又称DNA疫苗或核酸疫苗将编码某种抗原蛋白的基因置于真核表达元件的控制之下，构成重组表达质粒DNA，将其直接导入动物体内，通过宿主细胞的转录翻译系统合成抗原蛋白，从而诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。 2.亚单位疫苗：病原体经物理和化学方法处理，除去其无效的毒性物质，提取其有效抗原部分制备的疫苗。 3.多价疫苗：指同一种微生物中若干血清型菌（毒）株的增殖培养物制备的疫苗。 4.混合疫苗：又称多联苗，指利用不同微生物增殖培养物，按免疫学原理方法组合而成。 6.同源疫苗：指利用同种、同型或同源微生物株制备的，又应用于同种类动物免疫预防的疫苗。 7.微生态制剂：又称益生素、活菌制剂或生菌剂。是用非病原微生物，如乳酸杆菌，蜡样芽孢杆菌等活菌制剂，口服治疗畜禽正常菌群失调引起的下痢。 8.灭活：指破坏微生物的生物学活性、繁殖能力和致病性，但尽可能不影响其免疫原性，被灭活的微生物主要用于生产灭活疫苗；或指破坏诊断血清或待检血清中的补体活性，以避免补体对诊断试验的干扰作用。 9.保护剂：又称稳定剂，是指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。 10.佐剂：凡是可以增强抗原特异性免疫应答的物质均称为佐剂。 11.乳化剂：“乳剂”是将一种溶液或干粉分散成细小的微粒，混悬与另一不相溶的液体中所形成的分散体系。两相间的界面活性物质称为乳化剂。 12.ISCOM免疫刺激复合物：是由抗原物质与由皂树皮提取的一种糖苷Quil A,
与胆固醇按1：1：1混合后自发形成的一种具有较高免疫活性的脂质小泡。 13.抗体酶（催化抗体）：是具有催化活性的免疫球蛋白。 14.近交系动物：近交系是指近交程度相当于20代以上连续全同胞或亲子交配，近交系数达98.6%以上、群体基因达到高度纯合和稳定的动物群。 15.封闭群动物：通常把5a以上不从外部引种，只在群体内进行随机交配，由此生产的群体称之为封闭群。 16.清洁级动物：清洁级动物载微生物控制方面，除要求必须带有人兽共患病原和烈性传染病病原及常见传染病病原之外，还要求排除对科学实验研究干扰大的病原体的动物。 17.SPF动物：无特定病原体动物指动物体内外不带有特定的微生物和寄生虫。 18.悉生动物：又称已知菌动物，是动物体带有确知的微生物，并在隔离系统内饲养的动物。 3.影响灭活作用的因素？ 答：①灭活剂特异性②微生物种类与特性③灭活剂浓度④灭活温度⑤灭活时间⑥酸碱度⑦有机物存在。 4.保护剂的作用机理；冻干保护剂的组成；兽医常用的冻干保护剂有哪些？(P48) 答：⑴冻干保护剂的作用机制：①防止活性物质失去结构水及阻止结构水形成结晶而导致生物活性物质的损伤；②降低细胞内外的渗透压差、防止细胞内结构水结晶，以保持细胞的活力；③保护或提供细胞复苏所需的营养物质。⑵冻干保护剂通常由营养液、赋形液和抗氧化剂三部分组成。⑶兽医常用的冻干保护剂有：①5%蔗糖（乳糖）脱脂乳保护剂：用途是羊痘、鸡新城疫、鸡痘和鸭瘟等病毒性活疫苗的保护剂。②明胶蔗糖保护剂：用途是猪肺疫和猪丹毒等细菌性活疫苗
生物制品学
一、名词解释。 1.生物制品学是研究各类生物制品的来源、结构、功能、特点、应用、生产工艺、原理、现状、存在问题与发展前景等诸多方面知识的一门学科。 2.生物制品是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防，治疗和诊断的药品。 3.联合疫苗是由两种或两种以上疫苗抗原的原液配制而成的具有多种免疫原性的灭活疫苗或活疫苗。 4.药品生产质量管理规范是用科学、合理、规范化的条件和方法来控制药品生产的全过程，将差错发生的可能性降到最低，从而保证生产出优质药品的一套管理制度。 5.诊断制品是指用于检测疾病或机体功能状态的各种诊断试剂，可用于指导人们对疾病的预防和治疗。 6细菌类诊断制品是根据抗原与抗体能特异性结合的原理，将细菌及其代谢产物制成已知的抗原以检测未知的抗体或用细菌及其相关抗原免疫动物制成已知的抗体以检测未知的抗原的诊断制品。 7病毒类诊断制品是根据病毒抗原与其相应抗体发生特异结合的原理制备的病毒抗原或其抗体，用于检测样本中的病毒抗体或抗原，以诊断是否病毒感染或鉴定病毒的诊断制品。 8.抗原在集体内能刺激免疫系统发生免疫应答，并能诱导机体产生可与其发生特异反应的抗体或效应细胞的物质，称为抗原。 9.疫苗一切通过注射或黏膜途径接种，可以诱导机体产生针对特定致病原的特异性体液或细胞免疫，从而使机体获得保护或消灭该致病原能力的生物制品统称为疫苗。 10.核酸疫苗(nucleic acid vaccine) 又称基因疫苗或DNA疫苗，就是把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内，使外源基因在活体内表达，产生的抗原能激活机体的免疫系统，引发免疫反应。 11.遗传重组疫苗(genetic recombinant vaccine) 是指利用经遗传重组方法获得的重组微生物制成的疫苗。 12.基因工程疫苗(gene enginered vaccine) 也称遗传工程疫苗，是指使用重组DNA技术克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原产物或重组体本身制成的疫苗。 13.冷链系统(cold chain) 对于疫苗来说，从制造疫苗的部门直至使用疫苗的现场之间的各个环节，疫苗均应保存在规定的保冷状态之下，这一保冷系统，在EPI活动中称为冷链系统。 14.免疫佐剂(adjuvant) 凡能特异地通过物理或化学的方式与抗原结合而增强其特异免疫性的物质称为免疫佐剂。 15.微生态制剂又称微生态调节剂，是根据微生态学的基本原理，利用人体内正常微生物群成员或对其有促进作用的其他微生物等物质制成的生物制品，它具有调整微生态失调、恢复微生态平衡、促进宿主健康的作用。 16.免疫调节剂又称为生物反应调节剂，是能够调节、增强、兴奋和恢复机体生命功能的一大类生物药物，是维持人体四大网络（NICE网络：神经、免疫、细胞基因和内分泌）平衡的有效调节剂，其来源于生物体自身的一些分子和细胞。 17.减毒活疫苗是指将微生物的自然强毒株通过物理、化学、和生物学方法，连
生物制品总复习整理
一、《生物制品学》有关的概念 1、什么是生物制品（biological products） 指以微生物、植物、动物体作为起始材料，采用现代生物技术或手段人为地创造条件，生产某些初级代谢产物或次级代谢产物,制成用以诊断、治疗或预防疾病或达到某种特殊医学目的的医药用品，通称生物制品. 2、什么是外毒素？什么是类毒素？ 外毒素：一些细菌在培养过程中产生的毒性物质。 类毒素：外毒素经化学法处理后，失去毒力作用，而保留抗原性，这种类似毒素而无毒力作用的物质称为类毒素。 制剂的特点：吸收慢，刺激时间长，抗体滴度高，免疫效果好。 3、高免疫血清 指由特定抗原免疫动物（如，马），分离血浆或血清，精制而成的生物制品。 4、等电点沉淀法（Isoelectric point precipitation） 是利用蛋白质在等电点时溶解度最低，而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。 5、质量管理（quality management，QM） 确定质量方针、目标和职责并在质量管理体系中通过诸如质量策划、质量控制、质量保证和质量改进使其实施的全部管理职能的所有活动。 6、质量控制（quality control，QC） 为达到质量要求所采取的作业技术或活动。 7、什么是血液制品（blood products）？ 指由健康人的血浆或特异免疫人血浆，经分离、提纯或由重组DNA技术制成
的血浆蛋白组分，以及血液有形成分统称为血液制品。 用于治疗或被动免疫预防。 8、什么是冷沉淀（cryoprecipitate）？ 又称冷沉淀抗血友病因子。 将约200ml 新鲜冷冻血浆在1～6摄氏度复融后留下冰渣状不溶性成分，迅速高速离心，移去上层血浆，剩下的白色沉淀物即为“冷沉淀”。 用于治疗甲型血友病、血管性血友病、先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及因子XⅢ缺乏症病人。 9、什么是疫苗？ 疫苗是针对疾病的病原微生物或其蛋白质（多肽、肽）、多糖或核酸，以单体或通过载体经预防接种进入人体后，能诱导产生特异性体液免疫和细胞免疫，从而使机体获得预防该疾病的免疫力。 10、什么是基因工程疫苗（engineering vaccine）？ 指通过基因工程方法或分子克隆技术，分离出病原的保护性抗原基因，将其转入原核或真核表达系统，使其表达出该病原的保护性抗原，制成疫苗；或者将病原的毒力相关基因删除掉，使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗。 ●基因工程疫苗类型 基因工程亚单位疫苗 基因工程载体疫苗 蛋白质工程疫苗 基因缺失疫苗 基因疫苗
生物制药复习重点
学习好资料欢迎下载 【专业符号】 rhIFN 重组人干扰素 EPO 促红细胞生成素 rhGH 重组人生长激素 rhtPA 重组人组织纤溶蛋白酶源激活剂INS 胰岛素 HBV 乙肝病毒 HBsAg 乙型肝炎表面抗原 IL 白细胞介素 CSF 集落刺激因子 SOD 超氧化物歧化酶 PEG 聚乙二醇 Ag 抗原Ab 抗体 SCF 超临界流体 RCF 相对离心力 HPLC 高效液相色谱 SDS-PAGE SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法HIC 疏水作用层析 IEF 等点聚焦电泳 PCR 聚合酶链反应技术 ELISA 酶联免疫反应 G-CSF 粒细胞集落刺激因子 LacZ β-半乳糖苷酶 IPTG 异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷DTT 二硫苏糖醇 CM 羧甲基 DEAE 二乙氨基乙基 MVL 脂质体多囊颗粒 McAb 单克隆抗体 IFN 干扰素 CSF 集落刺激因子 HAMA人抗鼠抗体反应 GF 生长因子 【名词解释】 1生物药物：来源于生物体的，用于预防治疗和诊断或用于调节机体生理功能，促进集体康复、保健物质。 干细胞：是一类未分化的细胞或原始细胞，是具有自我复制能力的多潜能细胞。转基因动物：将外源基因导入哺乳动物的受精卵和胚胎中，使导入基因与受精卵染色体整合，并将外源基因稳定的传给自带，使子代表现外源基因的性状。 基因治疗：在基因水平上治疗疾病的方法，其手段包括，基因置换，基因修正，基因修饰，基因失活，引入新基因等。反义药物（信息药物）：是根据碱基互补原理，用人工合成或生物体内合成的载有特殊生物信息的药物分子和特殊核酸酶。生物技术：利用生物有机体和其部分组成成分，形成新的技术手段来发展新产品和新工艺的一种技术体系。 细胞工程：通过细胞融合入，核质转移，染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法，重组细胞的结构和内含物，以获得人们所需的特定的细胞，细胞产品和新物种的生物工程技术。 酶工程：指通过化学方法，酶学方法和DNA重组技术改善自然酶的形成，结果和性质，提高酶的催化效率，降低成本并在大规模工业生产化中应用。 微生物工程：又称发酵工程，是一门利用微生物的生长和代谢活动来生产各种有用物质的工程技术，是生物工程的重要组成部分。 2生化药物：从生物体分离纯化制得的生化基本物质，以及用化学合成，微生物合成或现代生物技术制得的一类药物。 生物技术药物：利用生物体或其组成部分发展产品的技术体主要是DNA重组技术研制的药物。 基因工程药物：利用重组DNA技术，将该基因导入可以大量产生的受体细胞中不断繁殖或表达，并能进行大规模生产的基因或蛋白质。 生物制品：引用普通的或以基因工程，细胞工程，蛋白质工程，发酵工程等生物技术获得的微生物，细胞及各种动物和人源组织和液体等生物材料制备，用于疾病预防，治疗和诊断的药品。 疫苗：一切通过注射或黏膜途径接种，可以诱导机体产生针对特定致病原的特异性抗体或细胞免疫，从而使机体获得保护或消灭该致病原的生物制品。 3 亲和层析：利用生物分子与配基之间所具有的专一而又可逆的亲和力 纸层析法：纸纤维上吸附的水为固定相，有机溶剂为流动相，当流动相流经固定相，样品中各组分电荷，亲和力等差异，各组分分配不同，以不同速度前进而分离。 超临界流体萃取技术：supercritical fluid,scf 利用超临界流体，即其温度和压力略超过或靠近临界温度（Tc）和临界压力（pc），介于气体和液体之间的流体为萃取剂，从固体或液体中萃取出某种高沸点或热敏性成分。 4基因工程:是指在分子水平上按照人们的设计方案将DNA片段插入载体DNA分子，从而实现DNA分子体外重组，产生新的自然界从未有过的重组DNA，然后再将之引入特定的宿主细胞，进行扩增和表达，使宿主细胞获得新的遗传性状的技术。 蛋白质工程：基因工程的基础上，结合蛋白质结晶学，计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科的基础知识通过对基因的人工定向改造等手段，对蛋白质进行修饰，改造和拼接以生产出能满足人类需要的新型蛋白质的技术。 重组DNA技术：在体外将两个或多个不同的DNA片段全部或部分构建成一个DNA分子的方法。 限制性内切酶：一类能识别并切割双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶。聚合酶链反应技术：指在四种脱氧核苷三 磷酸存在下，以寡聚糖核苷酸为引物，以 单链DNA为模板，经DNA聚合酶催化， 合成DNA互补链达到基因扩增目的的过 程。 原位杂交：直接用探针与菌落或组织细胞 中核酸杂交，未改变核酸位置。 插入失活：抗四环素基因上插入一个外源 基因后，导致抗四环素基因失活，变成只 对氨苄青霉素有抗性。 5初生氨基酸：微生物通过固氮作用，硝 酸还原自然界吸收氨使酮酸氨基化成相 应的氨基酸，或微生物通过转氨酶作用， 将一种氨基酸的氨基转移到另一种酮酸 上，生成的新氨基酸。 固定化酶：借助物化方法，将酶限制或定 位于特定空间仍具有催化活性。 次生氨基酸：在微生物作用下，以初生氨 基酸为前体转化成的其他氨基酸。 吸附法：通过载体表面和酶分子表面的次 级键相互作用。 物理吸附：通过氢键，疏水键和π-电子力 等将酶固定于不溶性载体。 共价结合法：借助共价键将酶的活性非必 需侧脸集团和载体的功能基因进行偶联。 交联法：利用双功能或多功能试剂CHO —戊二醛CHO在酶分子间，或酶分子与 载体间。交联以共价键。 包埋法：将酶或细胞定位于凝胶网络或微 胶囊内技术。 脂质体：是具有脂双层结构和一定包裹空 间的微球体。 抗体药物：抗体是有机体在抗原性物质的 刺激下所产生的一种免疫球蛋白，能与细 菌，病毒或毒素等异源性物质结合而发挥 预防，治疗疾病作用。 细胞因子：多种细胞所分泌的能调节细胞 生长分化、调节免疫功能、参与炎症发生 和创伤愈合等小分子多肽。 多肽类药物：机体特定腺体合成并释放的 一种物质，通过与远程敏感细胞表面的手 提相互作用而使靶细胞发生变化。 基因工程技术：利用重组DNA及蛋白质 工程技术对编码抗体的基因按不用需要 进行加工改造和重新装配，经转染适当的 受体细胞所表达的抗体分子，第二代单克 隆抗体。 单克隆抗体：由一个杂交瘤细胞的细胞株 （或克隆系）产生的抗一种抗原决定簇的 抗体。 单克隆抗体技术：体外能无线增殖的骨髓 瘤细胞和能分泌抗体的小鼠肝脏B淋巴 细胞融合，制备杂种细胞，再通过筛选和 克隆化培养生产某种预定性质的单克隆 抗体，又可在体外无限增值。 质粒：独立于染色体外能够进行自我复制 的双链DNA分子。 【填空题】 疫苗分类 1传统性疫苗:a灭火疫苗b减毒疫苗 2新型疫苗:a重组疫苗b核酸疫苗 3治疗（预防）性疫苗:a重组幽门螺杆菌 疫苗Hp；b乙肝（HBV）治疗性疫苗；c 针对自身免疫性疾病治疗性疫苗；d心血 管病疫苗；e肿瘤疫苗；f糖尿病疫苗 抗体药物结构分类 1诊断性抗体：单克隆抗体和多抗2鼠源 和兔源3治疗性抗体：人源性或人源化抗 体 抗体药物按结构分5类 1鼠或兔源抗体：用于各种诊断试剂， OKT-3，美国FDA批准的第一单抗，抗 CD3，用于治疗和预防急性肾移植排斥反 应。 2嵌合抗体：人源序列2/3，鼠源1/3 3人源化抗体：人源序列90%，鼠源序列 10% 4全人源抗体：噬菌体展示技术Humira, 转基因小鼠技术Vectibix 5抗体片段：Fab 、scFv.、dsFv、Diabody、 Minibody 生物技术的基本内容 a基因工程b细胞工程c酶工程d 微生 物工程：发酵工程 酶与细胞的固定化方法 酶：a可溶——间歇；b固定化——间歇 （吸附、包埋）；连续（交联、共价键结 合） 基因药物种类 1基因治疗2反义核酸药物3小干扰RNA 生物制品分类 1 疫苗 2 抗毒素及免疫血清3血液制品 4 细胞因子及重组DNA产品 5 诊断制 品 生物药物分类 按化学本质和化学特性分类 1 氨基酸类药物及其衍生物：a单一氨基 酸制剂 b 复方氨基酸制剂 2 多肽和蛋白质类药物：a多肽b 蛋白质 类药物 c 细胞生长因子 3 酶类药物：a助消化的酶类b消炎酶c 心血管疾病的治疗酶d 抗肿瘤类 e 其 他酶类f辅酶类药物 4 核酸及其降解物和衍生物：a核酸类b 多聚核苷酸c核苷、核苷酸及其衍生物 5 多糖类药物 6 维生素与辅酶 7 脂类药物：a磷脂类b多价不饱和脂肪 酸和前列腺素c胆酸类d固醇类f卟啉类 按原料来源分类：人体组织来源、动物组 织来源、微生物来源、植物来源、海洋生 物来源 按功能用途分类：治疗药物、预防药物、 诊断药物、其他生物医药用品、 常用提取方法：1.酸、碱、盐水溶液提取 方法2有机溶剂提取3表面活性剂提取 方法与反胶束萃取法4双水相萃取法 5 超临界萃取法 测定蛋白质的浓度方法：凯氏定氮法、紫 外吸收法、分光光度法、考马斯亮兰法 蛋白质纯度的方法：色谱纯、电泳纯、结 晶纯 层析分离方法：吸附层析、分配层析、离 子交换层析、凝胶层析、亲和层析、疏水 作用层析 空间结构分析方法 二级结构的比例：圆二色谱法 三维结构：a X射线晶体衍射法-蛋白质晶 体b 核磁共振c电子显微镜 按分子大小分离方法：有超滤法、透析法 （膜分离法）、凝胶过滤法、超速离心机 法 按所带电荷差异分离方法：电泳、离子交 换层析、等点聚焦 亲和层析方法：免疫亲和层析、生物亲和 层析、金属螯合亲和层析、染料亲和层析、 凝集素亲和层析 重组DNA技术必备的四个工具：工具酶、 载体、目的基因（靶基因）、宿主细胞 主要工具酶：限制性内切酶、T4 DNA连 接酶、大肠杆菌DNA聚合酶I、反转录酶 质粒三种构型：cccDNA、LDNA、OCDNA PCR技术反应周期三个步骤：高温变性、 低温退火、适温延伸 PCR技术的应用：遗传性疾病的基因诊 断、传染病的诊断（肝炎病毒）、癌基因 监测、法医学（亲子鉴定）上的应用、DNA 测序、基因克隆、引入基因点突变，基因 融合等 DNA重组体筛选和鉴定方法：抗生素抗 性基因分析法、X-gal显色反应筛选重组 体、质粒小量快速提取加酶切鉴定 20种蛋白质氨基酸和分类 根据R基侧链的极性：a非极性AA b 极性AA 最大吸收波长：Trp最大吸收波长为 279nm, phe259nm, tyr278 α-氨基参加的反应:与亚硝酸反应（脯氨 酸除外）、与酰化试剂反应、烃基化反应、 Edman反应、脱氨基反应、 α-氨基和α-羧基共同参加的反应和作 用：茚三酮反应、成肽反应、 发酵法的基本过程：培养基与灭菌—菌种 —菌种—灭菌接种发酵—产品提取及分 离纯化 氨基酸分析主要方法：纸层析法、薄层层 析法、高效液相层析法（HPLC）、质谱 （MS） 氨基酸分离方法：溶解度法、特殊试剂沉 淀法、吸附法、离子交换法、等电点沉淀 法 氨基酸的生产方法和特点：蛋白质水解 法、化学合成法、发酵法、酶法 固定化方法：a载体结合法：共价结合法、 离子结合法、物理吸附法b交联法c包埋 法：格子型、散胶囊型 多肽抗生素的作用：抗菌活性，免疫活性， 抗氧化作用，结合矿物质，杀虫、抗病毒 作用 多肽药物的种类：1、多肽激素：促皮质 激素、胃泌素、胸腺素2、多肽类细胞生 长调节因子：表皮生长因子、转移因子等 3、其他生化药物：蜂毒、蛇毒、各种水 解物 与蛋白质分离纯化相关的理化特性：分子 大小，分子形状，带点特性，溶解特性， 与配体特异性结合不同，吸附性质，变性 和复性 蛋白质的粗分级方法：硫酸铵分级沉淀， 有机溶剂分级沉淀，超速离心，等电点沉 淀，透析、超过滤，蛋白质结晶 蛋白质溶液的浓缩方法：盐析浓缩，有机 溶剂沉淀浓缩，葡聚糖凝胶浓缩，聚乙二 醇透析浓缩，超滤浓缩，真空减压浓缩与 薄膜浓缩 【简答题】 生物制药分类方法？能举二例。（填空题） 生物制品的概念（名解）、特点、分类（填 空）。 1 其质量控制和质量检定是采用生物学 分析方法，其效价或生物活性检定有其变 异性 2 生物制品原材料、中间品、成品、运输、 贮存、甚至使用保持在“冷链”系统中 3 特别是预防制品使用对象不是病人，而 是健康人群 4 生物制品的质量控制实行生产全过程 监控。 离子交换色谱的操作步骤 1 离子交换剂预处理 2 离子交换剂转型（阳离子交换剂用 NaOH处理，可转为Na+型，用HCl处理， 则转为H+型；阴离子交换剂用NaOH处 理转为OH-型，用HCl处理转为Cl-型等） 3 装柱 4 溶剂或缓冲液平衡 5 上柱（加样） 6 洗脱和收集（洗脱液中应含有离子，样 品离子交换，交换剂亲和力） 7再生（再次转型） 分离纯化原理 1 根据分子形状与分子大小 2 根据电荷差异 3 根据分子极性与溶解度大小 4 根据吸附特性 5 根据生物配基特性 基因工程的基本过程 1 目的基因（靶基因）的制备 2 能自我复制并具有选择几号的载体的 选择与制备 3 目的基因与载体的链接 4 将重组DNA分子转入适当的宿主细 胞，并在其中进行复制、扩增 5 重组子的筛选与鉴定 6 表达产物的鉴定 7 工程菌（细胞）的大规模培养 8 表达产物的分离与纯化 Ⅱ型限制酶的基本特性 1 识别位点为4~8核苷酸序列 2 识别位点即为切割位点 3 位点上核苷酸顺序通常呈双重旋转对 称结构，即呈回文结构。 理想质粒载体具备的条件 1 其分子结构中带有多克隆位点（MCS）， 多个单一限制酶切位点 2 构建后的重组质粒必须易于转化 3 带有一个以上强选择性标记 4 分子量较小，属松弛型复制控制（拷贝 数多，可大10~200个拷贝受宿主细胞的 控制不严），便于操作 5 宿主范围小，无感染性 6 具有复制起始点（origin,ori） 表达载体具备的条件 1 一个强启动子Lac（乳糖启动子）或Trp （色氨酸启动子）、及其两侧的调控序列 2 有SD序列且该序列与起始密码A TG之 间要有合适的距离 3 在克隆基因与启动之间有正确的阅读 框架 4 外源基因下游有转录终止子等 目的基因获得的常用方法 1 基因分离的物理方法 2 基因的化学合成 3 聚合酶链反应技术（PCR） 4 cDNA文库的建立（逆转录法） 5 基因组文库法 6 鸟枪法，又成散弹法 AA在医药中的应用：构成蛋白质的基本 组成单位；蛋白质营养价值是氨基酸作用 的反映（八必须）；氨基酸制剂：改善营 养状况促进康复（精氨酸组氨酸外界补 充）；治疗消化道疾病：谷氨酸甘氨酸及 其衍生物；治疗肝病：精氨酸盐酸盐、谷 氨酸钠、蛋氨酸、瓜氨酸；治疗脑及神经 系统疾病；肿瘤治疗；高氨血症、肝机能 障碍：精氨酸；低钾症心脏病、肝病、糖 尿病：天冬氨酸；秃发症：半胱氨酸；降 压，心绞痛：组氨酸 固定化酶概念与特性：借助理化方法，将 酶限制或定位与特定空间，仍具有催化活 性，此即为固定化酶，又叫固着酶;优点： 稳定性提高，半衰期延长；酶与底物易于 分开，可长期反复使用；产品易纯化，质 量高；可连续生产，自动控制；酶利用率 高；“三废”少；缺点：要进行固定化载 体和固定化条件的选择；活力有损失；酶 需经纯化制备；投资大，成本高；对操作 管理人员要求高。 发酵法的基本过程：培养基与灭菌；接种 及发酵罐培养控制；取样及分离纯化。技 术关键是选择合适工业化的高产氨基酸 新菌种及其优化发酵条件。 固定化生产L-Asp:菌种培养（天冬氨酸 酶）；E-coli的固定（菌体明胶戊二醛凝固 洗涤）；转化反应（延胡索酸铵转化液）； 产品纯化与精致（过滤PH2.8结晶稀氨水 溶解活性炭脱色真空干燥） 多肽及蛋白质类药物的制备过程：原材料 的获取---预处理---细胞破碎（研磨、超声、 渗透压、酶）---蛋白溶解（酸碱、醇、去 垢剂、尿素）---粗提（沉淀、相分离、分 子筛、透析）----精制（各种色谱、电泳分 离、差速离心）---保存（浓缩、干燥制 剂、） 胸腺素（α1）制备工艺：1、大肠杆菌惯 用密码子将Tα1 、28个氨基酸转化为核 苷酸序列，pET-rhTα1基因的串联，得到 Tα1的n（2-8）串体；2、对基因工程菌 进行诱导表达；（3）基因工程菌的培养和 高密度发酵；（4）融合蛋白的粗提、纯化 和裂解：（5）胸腺素α1的纯化。 简述胰岛素的结构特点：51个氨基酸，有 A（21）、B（30）两条链，两个链之间由 两个二硫键连接，在A链本身还有一个二 硫键 胰岛素提取制备方法的基本过程：1.提取 2.碱化、酸化3减压浓缩4去脂、盐析5 精制（1）除酸性蛋白（2）锌沉淀（3） 结晶 基因工程方法生产胰岛素的基本步骤：在 实验室中将人胰岛素基因A、B链的人工 合成基因分别组合到E.coli的不同质粒 上，然后再移至菌体内，着种重组质粒在 E.coli细胞内进行正常的复制和表达，从 而使带有A、B链基因的工程菌株分别产 生人胰岛素A、B链，然后再用人工的方 法，在体外通过二硫键使这2条链连接成 有活性的人胰岛素。 淋巴细胞杂交瘤技术的基本过程：1选择 制备亲本细胞2细胞融合3筛选及克隆 化培养4大量生产5分离纯化。
生物制品学复习重点2013年秋季
生物制品学复习要点2013年秋季 一、《生物制品学》有关的概念 1、生物制品（biological products）指以微生物、植物、动物体作为起始材料，采用现代生物技术或手段人为地创造条件，生产某些初级代谢产物或次级代谢产物，制成用以诊断、治疗或预防疾病或达到某种特殊医学目的的医药用品，通称生物制品。 2、外毒素：一些细菌在培养过程中产生的毒性物质。 类毒素：外毒素经化学法处理后，失去毒力作用，而保留抗原性，这种类似毒素而无毒力作用的物质称为类毒素。 制剂的特点：吸收慢，刺激时间长，抗体滴度高，免疫效果好。 3、高免疫血清：指由特定抗原免疫动物（如，马），分离血浆或血清，精制而成的生物制品。 4、中试：中间性试验（pilotscale experiment）的简称，是产品在大规模生产前的较小规模试验，即产品 正式投产前的试验。 5、上游技术是指目的基因获得、载体建立、连接、转入合适的宿主细胞、筛选、克隆表达和优良生物物 种的选育、基因工程、细胞工程、生物反应过程。 下游技术主要是指基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 6、血液制品（blood products）：指由健康人的血浆或特异免疫人血浆，经分离、提纯或由重组DNA技 术制成的血浆蛋白组分，以及血液有形成分统称为血液制品。用于治疗或被动免疫预防。 7、GMP：GMP是Good Manufacturing Practices for Drugs 的缩写，即“良好作业规范”，或“优良制造 标准”，药品生产质量管理规范。是一种特别注重在生产过程中实施对产品质量与卫生安全的自主性管理制度。 8、疫苗：针对疾病的病原微生物或其蛋白质（多肽、肽）、多糖或核酸，以单体或通过载体经预防接种 进入人体后，能诱导产生特异性体液免疫和细胞免疫，从而使机体获得预防该疾病的免疫力。 9、预防性疫苗：指用于尚未被感染的人体，使机体免疫系统做好准备，一旦将来病原体侵入能做出及时 的免疫反应疫苗。 10、治疗性疫苗：是指用于被病原体感染的病人，诱导机体产生特异的免疫反应或增强免疫反应，以达 到治疗或防止疾病恶化的天然、人工合成或用基因重组技术表达的产品或制品。 11、联合疫苗（mixed vaccine）：由不同种病原体的增殖培养物，按免疫学原理和方法组合而成的疫苗。 12、基因工程疫苗：指通过基因工程方法或分子克隆技术，分离出病原的保护性抗原基因，将其转入原 核或真核表达系统，使其表达出该病原的保护性抗原，制成疫苗，或者将病原的毒力相关基因删除掉，使成为不带毒力相关基因的基因缺失苗。 多肽或亚单位疫苗 颗粒载体疫苗 基因工程疫苗类型病毒活载体疫苗 细菌活载体疫苗 基因重配疫苗 基因缺失疫苗
兽医生物制品复习资料(朱善元版)
生物制品复习题 第一章兽医生物制品的免疫学基础 1. 抗原的定义：抗原是一类能刺激机体免疫系统发生免疫应答，并能与相应免疫应答产物在体内外发生特异性结合的物质。 2. 免疫应答：是机体免疫系统对抗原刺激所产生的以排除抗原为目的的生理反应过程 3. 免疫应答的基本过程：免疫应答的发生,发展和最终效应是一个相当复杂,但又规律有序的生理过程,这个过程可以人为地分成三个阶段。抗原识别阶段（antigen-recognitingphase）是抗原通过某一途径进入机体,并被免疫细胞识别,递呈和诱导细胞活化的开始时期,又称感应阶段。一般，抗原进入机体后，首先被局部的单核-巨噬细胞或其他辅佐细胞吞噬和处理,然后以有效的方式（与MHCⅡ类分子结合）递呈给TH细胞；B细胞可以利用其表面的免疫球蛋白分子直接与抗原结合, 并且可将抗原递呈给TH细胞。T细胞与B细胞可以识别不同种类的抗原，所以不同的抗原可以选择性地诱导细胞免疫应答或抗体免疫应答,或者同时诱导两种类型的免疫应答.另一方面，一种抗原颗粒或分子片段可能含有多种抗原表位，因此可被不同克隆的细胞所识别,诱导多特异性的免疫应答。淋巴细胞活化阶段是接受抗原刺激的淋巴细胞活化和增殖的时期，又可称为活化阶段。仅仅抗原刺激不足以使淋巴细胞活化,还需要另外的信号；TH细胞接受协同刺激后，B细胞接受辅助因子后才能活化；活化后的淋巴细胞迅速分化增殖,变成较大的细胞克隆。分化增殖后的TH细胞可产生IL-2,IL-4,IL-5和IFN等细胞因子，促进自身和其他免疫细胞的分化增殖，生成大量的免疫效应细胞。B细胞分化增殖变为可产生抗体的浆细胞，浆细胞分泌大量的抗体分子进入血循环，.这时机体已进入免疫应激状态,也称为致敏状态。抗原清除阶段是免疫效应细胞和抗体发挥作用将抗原灭活并从体内清除的时期，也称效应阶段.这时如果诱导免疫应答的抗原还没有消失，或者再次进入致敏的机体，效应细胞和抗体就会与抗原发生一系列反应。抗体与抗原结合形成抗原复合物,将抗原灭活及清除；T效应细胞与抗原接触释放多种细胞因子，诱发免疫炎症；CTL直接杀伤靶细胞.通过以上机制，达到清除抗原的目的。 4. 初次应答和再次应答的抗体产生有何特点？ 初次应答(primaryresponse)动物机体初次接触抗原，也就是某种抗原首次进人体内引起的抗体产生过程称为初次应答。抗原首次进入体内后，B细胞克隆被选择性活化，随之进行增殖分化，大约经过10次分裂，形成一群浆细胞克隆，导致特异性抗体的产生。初次应答有以下特点①第一具有潜伏期。机体初次接触抗原后，在一定时期内体内查不到抗体或抗体产生很少，这一时期为潜伏期，又称为诱导期。潜伏期的长短视抗原的种类而异，如细菌抗原一般经5～7d 血液中才出现抗体，病毒抗原为3—4d，而毒素则需2—3周才出现抗体。潜伏期之后为抗体的对数上升期，抗体含量直线上升，然后为高峰持续期，抗体产生和排出相对平衡，最后为下降期。 ②初次应答最早产生的抗体为IgM，可在几天内达到高峰，然后开始下降；接着才产生IgG，即IgG抗体产生的潜伏期比IgM长。如果抗原剂量少，可能仅产生IgM，lgA产生最迟，常在IgG产生后2周至1—2个月才
生物制品复习题和答案2019版
生物制品复习题和答案2019版 一、填空 1、目前基因工程抗体有以下几种类型，包括嵌合抗体、重构抗体、单链抗体、 Ig相关分子、噬菌体抗体。 2、按微生物学控制程度由松到严，将实验动物分为普通级动物、清洁级动物，无特定病原体动物、无菌动物、悉生动物。 7、按遗传质量控制可将实验动物分为四类，即近交系动物、杂交群动物、突变系动物、 封闭群动物等。 3、一般生物制品制备流程是：培养增殖、分离纯化、浓缩、制剂、检验。 4、诊断用生物制品的最基本要求是特异性强和敏感度高。包括诊断用抗原、诊断用抗体和 标记抗体三类。 5、细胞因子是一组由机体免疫细胞和非免疫细胞合成和分泌的小分子或中等分子量的可溶性蛋白质与糖蛋白。根据的细胞因子的生理功能将其为以下种类：、干扰素、集落刺激因子、白细胞介素、肿瘤坏死因子、趋化因子、生长因子、促红细胞生长素。 6、基因工程疫苗包括以下几种，即基因工程亚单位疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗、 基因缺失活疫苗、蛋白质工程疫苗、转基因植物疫苗。 8、对生物组织与细胞破碎的方法有高压匀浆法、高速珠磨法、超声振荡破碎法、压力法、反复冻融法、化学渗透法、酶溶破碎法等。 20 等。 9、动物生物制品的质量检验主要包括○16 、○ 17、○18、○19 、○ 10、抗体具有特异性结合相关抗原、激活补体、结合细胞、介导细胞毒、促进吞噬和通过胎盘等功能。发挥其抗肿瘤、抗感染、免疫调节与监视、解毒等作用。 11、实验动物通过注射方法给药的方式包有：皮内注射、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、静脉注射。 12、生物制品成品的质量检验主要内容包括物理性状检验、无菌检或纯粹检、安全检验、效力检验、其他检验等。 13、对实验动物小白鼠采血的方法有尾静脉、眼眶动脉和静脉（摘眼球法）、眼眶静脉丛、心脏、大血管、断头等。 二、选择题 1、下列物质中抗原性最好的是：