沙门菌生化部分检查

沙门氏菌检验

5.3 生化试验

5.3.1 自选择性琼脂平板上直接挑取数个可疑菌落，分别接种三糖铁琼脂。在三糖铁琼脂内，肠杆菌科常见属种的反应结果见表2。

表2 肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果

说明：在三糖铁琼脂内只有斜面产酸并同时硫化氢（H2S）阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能。

5.3.2 在接种三糖铁琼脂的同时，再接种蛋白陈水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7.2）、氰化钾（KCN）培养基和赖氨酸脱竣酶试验培养基及对照培养基各1管，于36±1℃培养18~24h，必要时可延长至48h，按表3判定结果。按反应序号分类，沙门氏菌属的结果应属于A1、A2和B1，其他5种反应结果均可以排除。

表3 肠杆菌科各属生化反应初步鉴别表

5.3.3 反应序号A1：典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、KCN和赖氨酸3项中有1项异常，按表4可判定为沙门氏菌。如有2项异常，则按A3判定为弗劳地氏柠檬酸杆菌。

表4

5.3.4 反应序号A2：补做甘露醇和山梨醇试验，按表5判定结果。

表5

5.3.5 反应序号B1：补做ONPG。ONPG十为大肠埃希氏菌，ONPG-为沙门氏菌。同时，沙门氏菌应为赖氨酸+，但甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸-。

5.3.6 必要时按表6进行沙门氏菌生化群的鉴别。

表6沙门氏菌属各生化群的鉴别

5.4 血清学分型鉴定

具体内容见GB/T4789.4-2003《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》中6.4。

5.5 菌型的判定和结果报告

综合以上生化试验和血清学分型鉴定的结果，按照GB/T4789.4-2003《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》中表8或有关沙门氏菌属抗原表判定菌型，并报告结果。

注：本文参照GB/T4789.4-2003《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》

沙门菌检查法

沙门菌检查法 1 简述 沙门菌属是肠杆菌科的重要致病菌，按Bergey系统细菌学手册第一卷（1984），沙门菌分5个亚属。2003年出版的第八版的临床微生物手册将沙门菌属分成两个菌种即肠炎沙门菌和乍得沙门菌，其中肠炎沙门菌分6个亚种，包括常见的伤寒、甲型副伤寒、乙型副伤寒、丙型副伤寒、，鼠伤寒，猪霍乱等沙门菌杂内，迄今已发现2501个血清型。O抗原抗血清A-E群包含了沙门菌分离株的95%，所以常用沙门菌A-F O多价血清进行沙门菌初筛试验。药品中的沙门菌，是以鉴定沙门菌属为准，即对没10g（或10ml）药品中是否检出沙门菌作出检验报告。 由于沙门菌血清型繁多，各血清型的生化及血清学特性虽密切相关，却不尽相同，采用一种增菌培养基和两种分离培养基，不可能涵盖所有沙门菌的最适增菌及分离条件。 此外，由于药品在生产过程中，常受到加热、干燥等加工步骤的影响，药品中污染的沙门菌可受到损伤或呈休眠状态，故须在增菌培养前先进行预增菌。然后再进行增菌及分离、三糖铁琼脂初步鉴别、生化试验、血清学试验等步骤。 2 仪器、设备及用具（见大肠埃希菌2）。 3 试液指示液（参见大肠埃希菌3） 3.1 无菌脲试液[附录2.5]。 3.2 酚磺酞指示液[附录 4.4]。

3.3 亮绿试液[附录2.9]。 3.4 氰化钾试液[附录2.14]。 3.5溴甲酚紫指示液[附录 4.5]。 3.6 革兰染色液[附录2.4，2.10，2.16]。 3.7 沙门菌属A-F“O”多价血清（即O多价1）生物制品研究所供应。 4 培养基 4.1 营养琼脂培养基[附录 5.2]。 4.2 营养肉汤培养基[附录 5.1]。 4.3 半固体营养琼脂培养基[附录 5.3]。 4.4 曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB）[附录 5.8]。 4.5 麦康凯琼脂培养基（MacC）[附录 5.9]。 4.6 四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）[附录 5.11]。 4.7 三糖铁琼脂培养基（TSI）[附录 5.10]。 4.8 胆盐硫乳琼脂培养基（DHL）[附录 5.13]。 4.9 沙门菌属志贺菌属琼脂培养基（SS）[附录 5.12]。 4.10 蛋白胨水培养基[附录 5.18]。 4.11 脲（尿素）琼脂培养基[附录 5.23]。 4.12 氰化钾培养基[附录 5.24]。 4.13 赖氨酸脱羧酶培养基[附录 5.25]。 5 对照用菌液 取乙型副伤寒沙门菌[CMCC（B）50094]是营养琼脂斜面培养物少许，接种至5ml营养肉汤培养基内，36℃±1℃培养18～24h后，用0.9%

0040沙门氏菌生化试验检验操作规程

目的建立沙门氏菌生化检验操作规程，确保检验数据的准确性。 依据《中国药典》2000版一部附录XIIIC-（80-81页）。 范围本标准适用于沙门氏菌生化检验操作。 责任人QC负责人、化验员。 内容 1使用仪器、玻璃器皿、培养基、染色剂及试剂。 1.1仪器： 托盘天平 1.2玻璃器皿： 150ml锥开瓶、试管、载玻片 1.3试液： 1.3.1靛基质试液：取对二甲基苯甲醛5.0g，加入乙醇75ml，充分振摇，使完全溶解后，再取浓盐酸25ml徐徐滴入（边滴边振摇，以免骤热使溶液色泽变深）即得。 1.3.2 0.9%氯化钠溶液：取氯化钠0.9g，加入蒸馏水100ml，微热使溶解，121℃灭菌30分钟，放冷，备用。 1.4染色剂： 1.4.1结晶紫染液：取结晶紫1.0g，加入95%乙醇20ml使溶解，加1%草酸铵水溶液80ml，混匀，静置48小时使用，置密闭棕色瓶中贮存。 1.4.2碘液：取碘化钾 2.0g，加水3-5ml使溶解，加入碘片1.0g，使全部溶解后加水稀释至300ml，置密闭棕色瓶贮存。 1.4.3沙黄试液：取沙黄0.25g，加95%乙醇10ml，使完全溶解后，加水100ml。 1.5培养基：

1.5.1营养肉汤增菌液：取营养肉汤试药22g，加蒸馏水1000ml微热使溶解，按每瓶100ml分装，121℃灭菌15分钟，备用。 1.5.2四硫磺酸盐增菌液：取四硫磺酸盐试药4.6g，加蒸馏水100ml微热使溶解，121℃灭菌30分钟，备用。 1.5.3胆盐硫化琼脂培养基：取胆盐硫化琼脂培养基试药48g，加蒸馏水1000ml加热溶化后，116℃灭菌30分钟，冷却至60℃灭菌，倾注平皿，备用。 1.5.4曙红亚甲蓝琼脂培养基：取营养琼脂培养基（取营养琼脂试药4g，加水100ml，116℃灭菌备用）加热溶化后，取100ml，冷至60℃按无菌操作加入灭菌的20%乳糖溶液5 ml，曙红钠指示液2ml和亚甲蓝指示液1.5ml，摇匀，倾注平皿。 1.5.5沙门、志贺菌属琼脂：取沙门、志贺菌属琼脂试药60g，加蒸馏水1000ml，放置20分钟，用石棉网微火煮沸使完全溶解，冷至50℃左右倾入无菌平皿中凝固后，备用。麦康凯琼脂培养基：取麦康凯琼脂试药55g，加蒸馏水1000ml加热使溶解，116℃灭菌30分钟，备用。 1.5.6三糖铁琼脂培养基斜面：取三糖铁琼脂试药6.4g，加蒸馏水100ml，分装小试管，121℃灭菌20分钟，倾斜摆放，凝固后备用。 脲琼脂培养基：取脲琼脂试药2.9g加蒸馏水100ml，加热使溶解，121℃灭菌20分钟，备用。 1.5.7氰化钾培养基：取氰化钾培养基试药两份，每份1.4g，分别加蒸馏水100ml，加热使溶解，121℃灭菌20分钟，冷却后，一份加氰化钾试液1.5ml，另一份不加氰化钾试液，分别分装于12mm×100mm灭菌试管内，每管4ml，立即用灭菌橡胶塞塞紧，置冰箱4℃备用。 1.5.8赖氨酸脱羧酶培养基：取赖氨酸脱羧酶培养基试药两份，每份0.9g，分别加蒸馏水100ml加热溶解后；一份加L—赖氨酸0.1g，另一份不加作为对照，分别按每管 2.5ml 分装小试管，并滴加一层液体石蜡，121℃灭菌20分钟备用。 2操作步骤： 2.1增菌、分离培养： 2.1.1取供试品10g，加灭菌生理盐水100ml作供试品溶液，取营养肉汤增菌液3份，每份100ml，2份分别加入10ml供试品溶液，其中1份加入对照菌溶液作阳性对照，第3份加入10ml灭菌生理盐水作阴性对照。置36±1℃培养18—24小时，阴性对照应无菌落生长。取其余2份培养物各1ml，分别接种于四硫磺酸盐增菌培养基10ml 中，再置36±1℃培养18—24小时。分别划线接种于胆盐硫乳琼脂（或沙门、志贺菌属琼脂）培养基和麦康凯琼脂（或曙红亚甲蓝琼脂）培养基的平板上，置36±1℃培养18—24小时或延至40—48小时。当阳性对照的平板呈现阳性菌落时，供试品的平

沙门氏菌的检验方法

沙门氏菌的检验方法 沙门氏菌是一种主要引起食物中毒的致病菌，其检验方法主要包括培养分离、生化检测和分子生物学方法等。下面是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。 1. 培养分离 沙门氏菌可以通过在选择性培养基上进行培养分离来检测。常用的选择性培养基包括XLD培养基、SS培养基和BS培养基等。将待检样品接种于选择性培养基上，并采用适当的温度和培养时间进行培养。沙门氏菌在培养基上形成红色或无色的菌落，可以通过形态特征进行初步判断。 2. 生化检测 生化检测是通过检测沙门氏菌代谢产物或酶活性来进行的。常用的生化检测方法包括气体产生试验、亚甲蓝试验和尿嘧啶酸试验等。气体产生试验通过观察沙门氏菌在培养基中是否产生氢气或硫化氢气体来判断其存在。亚甲蓝试验则是通过观察沙门氏菌对亚甲蓝的还原作用来进行检测。尿嘧啶酸试验则是通过检测沙门氏菌产生的尿嘧啶酸来进行。 3. 血清学检测 血清学检测是通过检测人体血清中对沙门氏菌特异性抗体的存在来进行的。常用的血清学检测方法包括凝集试验、间接荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验等。在这些方法中，沙门氏菌抗原与患者血清中的抗体结合，形成可见的凝集物或荧光产物，从而判断是否感染沙门氏菌。

4. 分子生物学方法 分子生物学方法是通过检测沙门氏菌特异性基因序列来进行的。常用的分子生物学方法包括聚合酶链式反应（PCR）、核酸杂交和基因测序等。PCR方法可以通过特异性引物扩增沙门氏 菌基因的特定片段，从而进行检测。核酸杂交可以通过与沙门氏菌特异性探针结合，形成杂交信号来进行检测。基因测序则可以直接检测沙门氏菌菌株中的特定基因序列，确定其身份。 总结： 沙门氏菌的检验方法主要包括培养分离、生化检测、血清学检测和分子生物学方法等。这些方法通过不同的途径检测沙门氏菌的存在，可以提供准确鉴定和检测结果。在实际应用中，结合多种方法的综合应用可以提高检测结果的准确性和可靠性。

沙门菌属检验

文件页码：1/2 1．概述 沙门菌属是一类分布广泛、血清型较多、抗原复杂的肠道病原菌，分为6个亚属、2200种以上的血清型。伤寒沙门菌属亚属I，多价O抗血清D群，是临床上最为重要的沙门菌。 2. 标本类型 粪便、血液等标本。 3. 鉴定 3.1 形态与染色革兰阴性杆菌，菌体细长。有周鞭毛。 3.2 培养特性在麦康凯琼脂平板上35℃培养18～24小时，形成无色、透明的菌落。SS 琼脂平板上呈无色、透明菌落，但大部分菌落中央呈黑色（产H2S）。 3.3 生化反应氧化酶试验阴性，发酵葡萄糖，不发酵乳糖，三糖铁琼脂（TSI）为K/A，动力、赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验阳性，大多数菌株H2S试验阳性，IMViC-+--或-+-+。 3.4 鉴别要点 3.4.1 本菌属特征选择SS平板上无色透明、半透明或中心黑色的菌落，TSI为K/A，H2S阳性或阴性，动力试验阳性，，IMViC-+--或-+-+，氧化酶、脲酶试验阴性。符合上述特征者，可通过血清凝集试验作出诊断。 3.4.2 与志贺菌属的鉴别少数伤寒沙门菌在TSI上H2S阴性，动力不明显，易与志贺菌属相混淆，可用血清凝集试验相鉴别。 3.5 操作步骤 3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验。参见《三糖铁试验标准操作规程》。 3.5.2 血清学鉴定参见《沙门菌血清学检测标准操作规程》。 3.5.3 鉴定从SS琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4. 药敏 参见《药物敏感性试验标准操作规程》。 5. 质量控制 参见《质量管理程序》。 6. 检验结果解释与分析 沙门菌属的鉴定应依赖于传统或商品化系统生化反应和血清学两种方法。若生化反应符合沙门菌，但A-F多价血清不凝集，首先考虑是否存在表面抗原（Vi抗原），因为Vi抗原能阻断O抗原与相应抗体发生凝集，加热可将其破坏。应将细菌制成菌悬液，放入沸水中加热15-30分钟，冷却后再次做凝集试验。若去除Vi抗原后仍不凝集，此时应考虑是否为A-F以外菌群，应送专业实验室进行鉴定。 7. 临床意义 沙门菌主要通过污染的食品和水源经口感染，引起人类和动物的沙门菌病，出现相应的临床症状或亚临床感染，主要有胃肠炎、菌血症、肠热症等。

沙门氏菌的检验方法与注意事项

沙门氏菌的检验方法与注意事项 在日常微生物检验中，沙门氏菌比较常见，是一种致病性细菌，国家规定在 每25g的食品样本中不能检测出沙门氏菌，所以在检验沙门氏菌时，对试剂与培 养基有很高的要求，下面本文针对沙门氏菌的检验方式和注意事项作出简单介绍！ 一、沙门氏菌检测的原因和意义 根据相关统计显示，我们国家因细菌性食物中毒的人中，有70%-80%左右的 人是通过沙门氏菌造成的。人体倘若含有过多的大量沙门氏菌的动物性食物，就 会造成细菌性感染，以此在毒素的影响下产生食物中毒，造成伤寒、胃肠炎及副 伤寒。而且沙门氏菌的传播途径较多，肉、蛋和其他食物，从加工至销售的整个 过程当中都极易引发感染情况，所以准确、有效检验沙门氏菌有重大意义。 二、沙门氏菌的检验 （一）前增菌(无选择性) BPW（缓冲蛋白胨水）属于一种比较常见的增菌培养基，不包括任何抑制物质，有助于修复受损的沙门氏菌。促使受损的沙门氏菌细胞复苏至相对平稳的生 理状态。 （二）选择性增菌 TTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）内含有硫代硫酸钠，结合四硫磺酸钠，能够 对肠道共生菌进行有效抑制，而包含四硫磺酸钠还原酶的细菌，可以在这一培养

基当中生长繁殖；煌绿及胆盐能够控制大肠群菌、革兰氏阳性菌的繁殖，而伤寒 沙门氏菌依旧可以生长。SC（亚硒酸盐胱氨酸增菌液）能够对其他和伤寒沙门氏 菌进行选择性增菌，其含有的亚硒酸结合蛋白胨内的含硫氨基酸，促使亚硒酸与 硫的复合物生产，对细菌硫的代谢产生干扰，进而减少肠球菌、变形杆菌、大肠 埃希氏菌的繁殖生长。 （三）分离培养基(选择性) ①BS（亚硫酸铋琼脂）内含亚硫酸铋指示剂，可对大肠菌群、革兰氏阳性菌 进行抑制，但不会对沙门氏菌的繁殖产生影响；其他沙门氏菌、伤寒杆菌可以借 助葡萄糖，还原亚硫酸铋，使其形成硫酸铋，使黑色菌落附近有黑棕色的环，对 光可看到金属光泽。BS的压力和温度不可过高，避免选择性下降，需在使用前配制，放置阴暗处储存，48小时后丧失选择性，储存不合理会造成色浅，表示效果 开始减弱，联合TTB、SC使用能够提高检出率。 ②HE琼脂内的溴麝香草酚兰、胆盐、去氧胆酸钠等，可对革兰氏阳性菌繁殖 进行抑制；将檬酸铁铵与硫代硫酸钠运来检验H2S的形成，导致菌落中心为黑色；酸性复红及溴麝香草酚兰属于pH指示剂，发酵糖产酸的菌落表现橙黄色，不发 酵糖菌落表现蓝绿色。HE不可以高压灭菌，开水煮应在1分钟之内，通过水浴方 式冷却，可以储存24小时。 ③通常在对沙门氏菌进行快速筛选、分离时，采用沙门氏菌显色培养基。其 原理主要是通过沙门氏菌显色基团和特异性酶的独特反应，游离出色原，进而将 沙门氏菌于培养基上表现出相应的颜色，而其他肠道杆菌颜色则不一样。 三、沙门氏菌检验的注意事项 （一）前增菌和二次增菌必不可少 食物内含有的沙门氏菌通常不多，且会同时存在很多菌种，前增菌能够恢复 受损菌，而增菌能够对部分杂菌的繁殖进行有效抑制，因此通过前增菌及增菌实 施筛选、培养操作，能够提高后续培养分离的检出率。 （二）注意典型或可疑沙门氏菌菌落

沙门氏菌生化鉴定

沙门氏菌生化试验判定步骤 三糖铁琼脂原理分析：本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。用于观察细菌对糖的利用和硫化氢（变黑）的产生。该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生 成的少量酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红，底部由于是 在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。而发酵乳糖的细菌(e.coli)，则产生大量的酸，使整个培养基呈现黄 色。如培养基接种后产生黑色沉淀，是因为某些细菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应， 生成黑色的硫化亚铁沉淀。 底层产酸：是因为细菌分解糖类物质使酚红退色变黄。 斜面产碱，低层产酸：是细菌分解葡萄糖(不能分解乳糖和蔗糖),由于量较少进而分解蛋白胨而产碱变红。因为底层是厌 氧环境，葡萄糖分解慢，２４小时培养后还没分解蛋白胨产碱；而斜面是需氧环境分解较快，一般８小时左右就把葡萄 糖分解完（此时斜面也是酸性），但继而分解蛋白胨产碱，斜 面又转为碱性。 2－志贺氏菌：都能分解葡萄糖，产酸不产气，大多不发酵乳 糖，不产生H2S。 4－大肠杆菌：能分解葡萄糖产酸产气，大多数能分解乳糖， 不产生H2S。 3－沙门氏菌：能分解葡萄糖，不发酵乳糖，大多数产生H2S， 多数产气。 赖氨酸脱羧酶试验 1、试验管及对照管均要加一层约10mm厚的灭菌石蜡或矿物油以覆盖表面，此可使培养基中的溶解氧通过细菌消耗掉，并控制培养基的pH。 2、阳性试验管培养初期（10—12h）因发酵葡萄糖产酸变黄，继续培养由于氨基酸脱羧产生胺类而使培养基由酸变碱，故又由黄变为紫色。阴性试验管则始终呈黄色。 氨基酸脱羧酶试验?(1)原理：某些细菌可产生氨基酸脱羧酶使氨基酸脱羧生成胺和二氧化碳。由于胺的生成使培养基变为碱性，可用指示剂指示出来。?(2)方法：将待检菌分别接种于1支氨基酸（赖氨酸，鸟氨酸或精氨酸）脱羧酶试验管和1支氨基酸脱羧酶对照管（无氨基酸），各覆盖至少0.5cm高度的无菌石蜡油，35℃孵育1~4d，观察结果。(3)结果：若为溴甲酚紫指示剂，则试验管紫色为阳性，黄色为阴性，对照管应为黄色。

沙门菌生化部分检查

沙门氏菌检验 5.3 生化试验 5.3.1 自选择性琼脂平板上直接挑取数个可疑菌落，分别接种三糖铁琼脂。在三糖铁琼脂内，肠杆菌科常见属种的反应结果见表2。 表2 肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果 说明：在三糖铁琼脂内只有斜面产酸并同时硫化氢（H2S）阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能。 5.3.2 在接种三糖铁琼脂的同时，再接种蛋白陈水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7.2）、氰化钾（KCN）培养基和赖氨酸脱竣酶试验培养基及对照培养基各1管，于36±1℃培养18~24h，必要时可延长至48h，按表3判定结果。按反应序号分类，沙门氏菌属的结果应属于A1、A2和B1，其他5种反应结果均可以排除。 表3 肠杆菌科各属生化反应初步鉴别表

5.3.3 反应序号A1：典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、KCN和赖氨酸3项中有1项异常，按表4可判定为沙门氏菌。如有2项异常，则按A3判定为弗劳地氏柠檬酸杆菌。 表4 5.3.4 反应序号A2：补做甘露醇和山梨醇试验，按表5判定结果。 表5 5.3.5 反应序号B1：补做ONPG。ONPG十为大肠埃希氏菌，ONPG-为沙门氏菌。同时，沙门氏菌应为赖氨酸+，但甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸-。

5.3.6 必要时按表6进行沙门氏菌生化群的鉴别。 表6沙门氏菌属各生化群的鉴别 5.4 血清学分型鉴定 具体内容见GB/T4789.4-2003《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》中6.4。 5.5 菌型的判定和结果报告 综合以上生化试验和血清学分型鉴定的结果，按照GB/T4789.4-2003《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》中表8或有关沙门氏菌属抗原表判定菌型，并报告结果。 注：本文参照GB/T4789.4-2003《食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验》

实验四 沙门氏菌属(Salmonella)的检验

实验四沙门氏菌属（Salmonella）的检验 1 目的 1.1 理解沙门氏菌属生化反应及其原理 1.2 掌握沙门氏菌属血清因子使用方法 1.3 掌握沙门氏菌属的系统检验方法 2 原理 沙门菌属是一大群寄生于人类和动物肠道，其生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。种类繁多，少数只对人致病。其他对动物致病，偶尔可传染给人。主要引起人类伤寒，副伤寒以及食物中毒或败血症。在世界各地的食物中毒中，沙门氏菌食物中毒常占首位或第二位。 食品中沙门氏菌的检验方法有五个基本步骤：1 前增菌；2 选择性增菌；3 选择性平板分离沙门氏菌；4 生化试验，鉴定到属；5 血清学分型鉴定。目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础，25g食品为标准分析单位。本实验以蛋品为检测样品，以已知的沙门氏菌和大肠埃希氏菌为对照。 3 材料 3.1 菌种 沙门氏菌（Salmonella sp.） 大肠埃希氏菌（E.col.） 3.2 检样 冻肉、蛋品、乳品等。 3.3 培养基 缓冲蛋白胨水（BP）、氯化镁孔雀绿（MM）增菌液、四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液、亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液、SS琼脂、EMB琼脂、亚硫酸铋琼脂（B S）、三糖铁琼脂（TSI）、蛋白胨水、尿素培养基、赖氨酸脱羧酶试验培养基、鸟氨酸脱羧酶试验培养基、丙二酸钠培养基、氰化钾（KCN）培养基、ONPG培养基、缓冲葡萄糖蛋白胨水、DHL琼脂、HE琼脂。 3.4 试剂 吲哚试剂、V-P试剂、甲基红试剂、氧化酶试剂，沙门菌A—F多价诊断血清，革兰氏染色液等。 3.5 器具 天平（称取检样用）、均质器或乳钵、显微镜、广口瓶、三角烧瓶、吸管、平皿、

沙门氏菌检验 (2)

沙门氏菌检验 1.范围 本法适用于食品中沙门氏菌的检验。 2.设备和材料 处微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 2.1 冰箱：2℃～5℃。 2.2 恒温培养箱：36℃±1℃，42℃±1℃。 2.3 均质器。 2.4 振荡器。 2.5 电子天平：感量0.1g。 2.6 无菌锥形瓶：容量500mL，250mL。 2.7 无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。 2.8无菌培养皿：直径90mm。 2.9 无菌试管：3mm×50mm、10mm×75mm。 2.10 无菌毛细管。 2.11 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 2.12 全自动微生物生化鉴定系统。 3.培养基和试剂 3.1 缓冲蛋白胨水（BPW）。 3.2 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液。 3.3 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液。 3.4 亚硫酸铋（BS）琼脂。 3.5 HE琼脂。 3.6 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂。 3.7沙门氏菌属显色培养基。 3.8 三糖铁（TSI）琼脂。 3.9 蛋白胨水、靛基质试剂。 3.10 尿素琼脂（pH7.2）。 3.11 氰化钾（KCN）培养基。 3.12 赖氨酸脱羧酶试验培养基。 3.13 糖发酵管。 3.14 邻硝基苯β-D-半乳糖苷（ONPG）培养基。 3.15 半固体琼脂。 3.16 丙二酸钠培养基。 3.17 沙门氏菌O和H诊断血清。 3.18 生化鉴定试剂盒。 4.检验程序 沙门氏菌检验程序见图1。 42℃±118h～24h 36℃±1℃，18h～24h 5.操作步骤

5.1 前增菌 称取25g（mL）样品放入盛有225mL BPW 的无菌均质杯中，以8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或置于盛有225mL BPW的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定pH值，用1mol/mL无菌NaOH或HCl调pH至6.8±0.2.无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8h～18h。 如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min，或2℃～5℃不超过18h解冻。 5.2 增菌 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL，转种于10mL TTB内，于42℃±1℃培养18h～24h。同时，另取1mL转种于10mL SC内，于36℃±1℃培养18h～24h。 5.3 分离 分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板（或HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板）。与36℃±1℃分别培养18h～24h（XLD平板、HE琼脂平板或沙门氏菌属显色培养基平板）或40h～48h（BS琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落，各个平板上的菌落特征见表1。 表1 沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 5.4 生化试验 5.4.1 自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可以菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线，再于底层穿刺；接种针不要灭菌，直接接种懒氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板，于36℃±1℃培养18h～24h，必要时可延长至48h。在三糖铁琼脂和懒氨酸脱羧酶试验培养基内，沙门氏菌属的反应结果见表2。 表2 沙门氏菌属在三糖铁琼脂和懒氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果 5.4.2 接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时，可直接接种蛋白胨水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（pH7.2）、氰化钾（KCN）培养基，也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。于36℃±1℃培养18h～24h，必要时可延长至48h，按表3判定结果。将已挑菌落的平板储存于2℃～5℃或室温至少保留24h，以备比必要时复查。

沙门氏菌基本知识及检测方法

沙门氏菌基本知识及检测方法 沙门氏菌属Salmonella是肠杆菌科的一个大属,有2000多个血清型,我国发现的约有100个;沙门氏菌广泛存在于猪、牛、羊、家禽、鸟类、鼠类等多种动物的肠道和内脏中;1880年Eberth首先发现伤寒杆菌,1885年Salmon分离到猪霍乱杆菌,由于Salmon发现本属细菌的时间较早,在研究中的贡献较大,遂定名为沙门氏菌属Salmonella ;本属细菌绝大多数成员对人和动物有致病性,能引起人和动物的败血症与胃肠炎,甚至流产,并能引起人类食物中毒,是人类细菌性食物中毒的最主要病原菌之一; 根据沙门氏菌的致病范围,可将其分为三大类群;第一类群：专门对人致病;如伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌甲型、乙型、丙型;第二类群：能引起人类食物中毒——食物中毒沙门氏菌群,如鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、纽波特沙门氏菌等;第三类群：专门对动物致病,很少感染人,如马流产沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌;致病性最强的是猪霍乱沙门氏菌Salmonella cholerae,其次是鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium和肠炎沙门氏菌Salmonella enteritidis; 一、沙门氏菌属的生物学特征： 1.形态染色特性：G-无芽孢杆菌;大小通常为～μm ×～μm,菌端钝圆,散在,偶有短丝状,无荚膜,除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外均有周身鞭毛,能运动,绝大多数菌株有菌毛;需氧或兼性厌氧菌,生长温度范围为10～42℃,最适生长 温度为37℃,适宜pH为～,对营养要求不高,在普通培养基中生长旺盛,胆盐可促进其生长; 2.培养特性：需氧或兼性厌氧菌；生长温度范围为10～42℃,最适生长温度为37℃；适宜pH为～；对营养要求不高,在普通培养基中生长旺盛；胆盐可促进其生长; §普通琼脂：圆形、光滑、无色半透明、边缘整齐或不太整齐的中等大小2 ～ 4mm 菌落;鸡白痢、鸡伤寒、猪副伤寒、甲型副伤寒沙门氏菌等只能长成细小菌落; §麦康凯琼脂和伊红美兰琼脂EMB：菌落无色半透明 §SS琼脂和DHL琼脂：无色半透明、中心黑色或几乎全部黑色多数菌株的菌落

沙门氏菌检验

沙门氏菌的检验 1. 目的 规范沙门氏菌检测方法，使产品检验有据可依。 2. 消毒灭菌要求 微生物检测用的玻璃仪器、金属用具及培养基、被污染与接种的培养物等必须经灭菌后方能使用。 注：本实验采用湿热灭菌法，吸管、培养皿、培养基等盖好塞子并包好瓶口在高压灭菌锅中按要求的温度与压力灭菌,一般就是121C （1、5MPa下灭菌20min。 3. 原理 沙门氏菌的检验分四个连续阶段： 4. 操作步骤 4、1准备工作 配制实验所需的缓冲蛋白胨水、亚硒酸盐胱氨酸培养基（无需灭菌）、HE培养基、三糖铁培养基等，并将准备好的均质杯、吸管、培养皿、大试管等一起灭菌。 4、2前增菌 在无菌环境下,称取25g待检样品放入盛有225ml灭菌好的缓冲蛋白胨水中, 然后放到36±「C的恒温培养箱内进行前增菌4-6h;

4、3增菌 在无菌环境下，用灭菌好的吸管吸取10ml 前增菌液接种与100ml 亚硒酸盐胱 氨酸培养基中进行二次增菌,恒温培养箱36± 1C ,培养18-24h; 4、4分离培养 将增菌培养液摇匀，以无菌操作，用直径3mm 的接种环挑取一环，划线于表面 无凝结水的BS 与SS 琼脂平板各一个，于36± 1C 培养18-24h 。观察各个平板上 有无典型或可疑沙门氏菌属的菌落。如无典型或可疑菌落 ，应再继续培养24 ± 2h 。然后观察培养的平板（黄色的菌落就是大肠杆菌；蓝绿色或蓝色，产硫化氢, 菌落中心黑色或几乎全黑色为可疑沙门氏菌）。 沙门氏菌属各亚属在其她选择性琼脂平板的菌落特征 4、5生化实验 用灭菌好的接种针在培养平板上挑取可疑的沙门氏菌单菌落，接种到三糖铁 培养基上,恒温培养箱36 ± 1C ,培养18-24h;典型沙门氏菌培养物斜面显红色 （碱性）,底端显黄色（酸性），有气体产生，形成硫化氢（琼脂变黑） 三糖铁培养 基变化表 肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果

食品微生物学检验沙门氏菌检验(三)

食品微生物学检验沙门氏菌检验（三） 5.5.1 抗原的预备普通采纳1.2%～1.5%琼脂培养物作为玻片凝集实 验用的抗原。O血清不凝集时，将菌株接种在琼脂量较高的(如2%～3%)培养基上再检查；假如是因为Vi抗原的存在而阻挡了O凝集反应时，可挑取菌苔于1mL生理盐水中做成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。H抗原发育不良时，将菌株接种在0.55%～0.65%半固体琼脂平板的中心，俟菌落扩散生长时，在其边缘部分取菌检查；或将菌株通过装有 0.3%～0.4%半固体琼脂的小玻管1次～2次，自远端取菌培养后再检查。 5.5.2 多价菌体抗原(0)鉴定在玻片上划出2个约1cm×2cm的区域， 挑取1环待测菌，各放1/2环于玻片上的每一区域上部，在其中一个区域下部加1滴多价菌体(O)抗血清，在另一区域下部加入1滴生理盐水，作为对比。再用无菌的接种环或针分离将两个区域内的菌落研成乳状液。 将玻片倾斜摇动混合1min,并对着黑暗背景举行观看，任何程度的凝集现象皆为阳性反应。 5.5.3多价鞭毛抗原(H)鉴定同5.5.2。 5.5.4 血清学分型(选做项目) 5.5.4.1 0抗原的鉴定用A～F多价O血清做玻片凝集实验，同时用生理盐水做对比。在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。被A～F多价O血清凝集者，依次用O4；O3、O10；O7；O8；O9；O2和O11因子血清做凝集实验。按照实验结果，判定O 群。被O3、O10血清凝集的菌株，再用O10、O15、O34、O19单因子血清做凝集实验，判定E1、E2、E3、E4各亚群，每一个O抗原成分的最后确定均应按照O单因子血清的检查结果，没有O单因子血清的要用两个O复合因子血清举行核对。不被A～F多价O血清凝集者，先用9种多价O血清检查，如有其中一种血清凝集，则用这种血清所包括的O群血清逐一检查，以确定O群。每种多价O血清所包括的O因子如下： 5.5.4.2 H抗原的鉴定属于A～F各O群的常见菌型，依次用表6所述H因子血清检查第1相和第2相的H抗原。表6 A～F群常见菌型H抗原表不频繁的菌型，先用8种多价H血清检查，如有其中一种或两种血清凝集，则再用这一种或两种血清所包括的各种H因

沙门氏菌检测标准方法及实验关键点

沙门氏菌检测标准、方法及实验关键点 ．检验沙门氏菌的原因和意义： 据统计我国细菌性食物中毒中70%～80%是由沙门氏菌引起的，人一旦摄入含有大量沙门氏菌 (105～(106个/g)的动物性产品，就会引起细菌性感染，进而在毒素作用下发生食物中毒导致胃肠炎、伤寒和副伤寒且沙门氏菌的传播媒介众多，肉、蛋以及食品从加工到出售的过程中都十分容易发生污染。因此对沙门氏菌的检验事关重大。 二、检测及鉴定： 沙门氏菌的检测要在二级生物安全实验室及二级生物安全柜(在负压情况下防止致病微生物气溶胶飘离实验室对实验人员及环境造成污染)中进行。 沙门氏菌典型菌落形态：

生化鉴定显示： API20E 生化鉴定是根据快速酶促反应及代谢产物的检测技术发展的一种细菌编码鉴定法，广泛应用于临床、食品中革兰氏阴性杆菌的快速鉴定。 限值要求： 参考CAC、ICMSF、欧盟、澳大利亚和新西兰、 美国、加拿大、香港、台湾等国际组织、国家和地 区的即食食品中沙门氏菌限量标准及规定， 《GB29921-2013食品中致病菌限量》按照二级采 样方案对所有11类食品设置沙门氏菌限量规定， 具体为n=5，c=0，m=0（即在被检的5份样品 中，不允许任一样品检出沙门氏菌）。 三、沙门氏菌传统检测方法 的关键控制点 1、样品处理 尽可能缩短解冻时间，使竟争菌群生长最少，并减 小对沙门氏菌的损伤致病菌取样一定要均匀并具有 代表性（蛋黄蛋清混匀取样）。 2、培养基及培养方面

（1）没有一种培养基可疑准确无误的筛选出沙门氏菌，必须选择多种选择性培养基同时筛选，只能说显色培养基综合选择性更强。 （2）试剂和培养基的配置一定要严格按照说明书配置，是否需要高压灭菌，添加剂用量及培养基保存条件。 （3）有1%沙门氏菌乳糖发酵阳性，为了避免漏检乳糖阳性菌必须选择不依赖乳糖的培养基，目前BS培养基认为是最适合的。 （4）BS培养基是分离沙门氏菌的高效培养基，特别适用于伤寒类的沙门氏菌，不是所有的选择性培养基都能有效分离出伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌，BS是分离伤寒类沙门氏菌的首选培养基。（5）BS不能高压，不能过热溶解，只能在使用前一天配置，保存在阴暗处，48h后失去选择性，保存不当，颜色变浅标明已经开始减效。 （6）HE不能高压灭菌，煮沸不能超过1min，水域中冷却，只能保存一天；XLD平板不能高压，不能过热煮沸，保存一天。 （7）TTB的添加剂必须在棕色瓶储存，不能见光，否则选择性减弱。TTB有碳酸钙沉淀，分装时

沙门菌检查

1．简述 沙门属是肠杆菌科的重要致病菌，药品中的沙门菌，是以鉴定沙门菌属为准，即对每10g （或10ml）药品中是否检出沙门菌作出检验报告。由于药品在生产过程中，常受到加热、干燥等加工步骤的影响，药品中污染的沙门菌受到损伤或呈休眠状态，故须在增菌培养前先进行预增菌。然后再进行增菌及分离、三糖铁琼脂初步鉴别、生化试验、血清学试验等步骤。 2．仪器、设备及用具（参见大肠埃希菌2）。 3. 试液、指示液（参见大肠埃希菌3）。 3.1 无菌脲试液。 3.2 酚磺酞指示液。 3.3 亮绿试液。 3.4氰化钾试液 3.5 溴甲酚紫指示液 3.6革兰染色液 4.培养基 4.1营养琼脂培养基。 4.2营养肉汤培养基。 4.3半固体营养琼脂培养基。 4.4曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB）。 4.5麦康凯琼脂培养基（MacC）。 4.6四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）。 4.7三糖铁琼脂培养基（TSI）。 4.8胆盐硫乳琼脂培养基（DHL）。 4.9沙门菌属志贺菌属琼脂培养基（SS）。 4.10蛋白胨水培养基。 4.11脲（尿素）琼脂培养基。 4.12氰化钾培养基。

4.13赖氨酸脱羧酶培养基。 5.对照用菌液 取乙型副伤寒沙门菌[CMCC（B）50094]的营养琼脂斜面培养物少许，接种至5ml营养肉汤培养基内，36℃±1℃培养18~24h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至1:106（浓度相当于50~100cfu/0.1ml），作阳性对照用菌液。其菌液浓度可用平板菌落计数法测得。即取0.1ml加入平皿内，倾注营养琼脂，混匀，或以0.1ml均匀涂布于事先准备好的营养琼脂平板上，经培养后点计求得。 6.操作方法 6.1准备工作：（见细菌、霉菌和酵母菌计数6）。 6.2供试液的制备：（见细菌、霉菌和酵母菌计数7）。 6.3阳性对照试验、阴性对照试验（见大肠埃希菌 7.1）。 6.4增菌培养 6.4.1预增菌取营养肉汤培养基2份，每份200ml，1份加入10g或者10ml供试品混匀，另1份加入稀释剂10ml作阴性对照，36℃±1℃培养18~24h，观察。摇动阴性对照瓶后应清亮透明，无菌生长。 6.4.2增菌培养轻微摇动供试品增菌培养瓶，吸取1ml接种于1管含10ml四硫磺酸钠亮绿培养基的试管中，培养18~24h。 6.5分离培养轻微摇动供试品增菌培养瓶，以接种环沾取1~2环培养液划线于胆盐硫乳琼脂（DHL）或沙门菌志贺菌琼脂（SS）平板及曙红亚甲蓝（EMB）琼脂或麦康凯琼脂平板各1个，倒置培养24~48h，必要时延长至40~48h。检查平板上有无疑似沙门菌菌落。沙门菌在上述平板上的菌落形态见下表 沙门菌的菌落特征 6.6初步鉴别试验 从每个供试品的分离平板上挑取2~3个疑似菌落分别接种于三粮铁琼脂斜面，接种时应以接针轻轻接触单个菌落中心部位，沾取培养物划线于三糖铁琼脂斜面并穿刺到底层或先穿刺底层再划线斜面，培养18~24h，观察结果。

沙门菌检测技术

沙门菌为常见的肠道病原菌之一，在自然界分布广泛，种类繁多，所致疾病统称沙门菌感染，其中由伤寒、副伤寒沙门菌引起的急性全身系统性传染病是我国《传染病防治法》中规定报告的乙类传染病，而由非伤寒沙门菌引起的食物中毒则占我国内陆地区细菌性食物中毒的首位。 及时准确地检验沙门菌，为诊断和控制由该菌引起的疾病提供依据。沙门菌检验程序主要包括：标本采集、标本的处理与接种、菌株分离与鉴定和PCR检测几个步骤。 标本采集 标本采集前，应准备好所需的培养基和器材，主要有：血液需氧培养瓶、血琼脂平板、XLD（木糖赖氨酸脱氧胆盐）琼脂平板、BS（亚硫酸铋）琼脂平板、SC（亚硒酸盐胱氨酸）增菌液、酒精灯、采样瓶、剪刀、镊子等。 沙门菌检验标本主要分为：食品样品、可疑食物中毒标本，沙门菌患者标本。 可疑食物中毒标本主要有：可疑食品、相关环境标本、疑似病人标本。 可疑食品的采集：在采集可疑食物中毒标本时，应重点采集剩余食物以及食品加工有关的炊事用具，操作人员的手、肛试等相关环境标本。采样时，用棉试子涂抹物品表面后，置于少量增菌培养基内，也可根据情况在接种现场接种分离平板。 沙门菌感染患者标本的采集：沙门菌感染患者应采集新鲜粪便标本或肛试子直接接种分离平板和增菌液。对伤寒、副伤寒患者，在病程的第1~2周，可采集静脉血液4~8ml，接种血液需氧培养瓶中。 每个标本需做好标识和记录，采集的食品样品4℃保存，已接种标本的增菌液和培养基，室温下保存，2小时内送达实验室。 标本的处理与接种 沙门菌标本的处理与接种常用培养基有：TTB（四硫磺酸钠）增菌液、SC(亚硒酸盐胱氨酸)增菌液、XLD琼脂平板、BS琼脂平板和麦康凯（MaC）琼脂平板。 可疑中毒食品标本的处理：对采集的标本通常按1:10的比例分别接种于100mlTTB和100ml增菌液中，每瓶增菌液加入标本约10g，同时还可将可疑中毒食品标本直接接种于分离平板。将接种后的TTB增菌液置42℃培养箱中培养18~24小时，将SC增菌液和分离平板置37℃培养箱中培养18~24小时，待观察。取培养后增菌液转种XLD琼脂平板和BS琼脂平板，将接种后的平板置37℃培养箱中培养24~48小时，待观察。 血液（骨髓）标本的处理：将已接种标本的血液培养瓶直接放置37℃培养箱中培养7天，在培养期间分别于培养的第1天、第2天和第7天取培养液一环接种血琼脂平板，将平板置37℃培养箱中培养18~24小时，待观察。培养至第7天时，如培养物仍无菌生长，则可判为阴性。 肛试子及其他环境标本的处理：将现场采集已接种标本的分离平板和增菌液直接放置37℃培养箱中培养18~24小时，待观察。取出18~24小时培养的增菌液转种XLD琼脂平板和麦康凯琼脂平板。将接种完毕的平板置37℃培养箱中培养18~24小时，待观察。 菌株分离与鉴定 主要实验试剂有：氧化酶（试剂）、三糖铁（TSI）、动力—靛基质—尿素半固体（MIU）和赖氨酸铁琼脂斜面、API20E、沙门菌诊断血清。 沙门菌菌株的鉴定主要试验有：菌体形态观察，菌落形态观察，氧化酶实验，初步生化鉴定（系统生化鉴定），血清学分型。 菌落形态观察：在XLD平板上沙门菌菌落呈粉红色、光滑、湿润、边缘整齐、产H2S的菌株，可形成中心黑色或全部黑色的菌落。在BS琼脂平板上，沙门菌菌落呈黑色有金属光泽、棕色或灰色，培养基周围可呈现黑色或棕色，有些菌株可形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。在麦康凯琼脂平板上，沙门菌菌落为无色、透明或半透明、光滑湿润、边缘整齐、

沙门菌的检查方法及鉴定

沙门菌的检查方法及鉴定 沙门菌是一类致病性细菌，可以引起沙门氏菌病。你所提到的沙门菌的检查方法及鉴定可以从以下几个方面进行说明： 1.标本采集和处理： 对于沙门菌的检查，首先需要采集相关的临床样本，常见的有粪便、血液、尿液、食物、水等。采集样本时要采用无菌技术，并且要避免污染和混杂。 2.沙门菌的常规培养： 将样本置于适当的富营养培养基上进行培养，常用的富营养培养基有MacConkey琼脂培养基、XLD琼脂培养基等，这些培养基对于沙门菌的生长提供了必要的条件。常规培养通常在37摄氏度下进行，培养时间一般为24小时。 3.大肠杆菌群的初步筛选： 沙门菌属于大肠杆菌群，因此在初步筛选时可以通过革兰染色法进行鉴定。革兰染色后，沙门菌呈现革兰阴性杆菌的形态。 4.生化试验： 生化试验是沙门菌鉴定的重要手段，通过不同菌株对不同营养源的利用及产物生成情况的检测，可以进一步缩小筛选范围。常见的生化试验包括： a.培养基试验：通过在不同培养基上生长情况的观察和分析，来判断菌株是否为沙门菌。

b.酸碱试验：通过观察剧烈酸化或碱化现象，来检测杨氏氏培养碱解 试验。 c.碳源利用试验：通过检测菌株对不同碳源的利用情况，如糖耐试验、麦芽糖利用试验等。 d.氨基酸利用试验：通过检测菌株对不同氨基酸的利用情况，如亮氨 酸加芥黄悬液试验等。 e.钠乙酸淀粉试验：沙门菌在生长过程中分泌出来的α-淀粉酶能将 淀粉分解成葡萄糖，通过观察菌株对淀粉的降解能力，来鉴定菌株是否为 沙门菌。 5.血清学试验： 血清学试验是沙门菌鉴定的关键步骤，通过检测菌株在特定的抗血清 中的凝集反应来进行。根据不同的菌株反应特性，可以进一步鉴定沙门菌 的种属和亚属。 6.分子生物学方法： 随着分子生物学技术的发展，PCR、基因测序和基因芯片等分子生物 学方法在沙门菌的鉴定中得到广泛应用。这些方法主要通过检测和分析沙 门菌的特异基因序列，可以快速准确地进行鉴定。 总之，沙门菌的检查方法及鉴定可以通过标本采集和处理、常规培养、革兰染色、生化试验、血清学试验和分子生物学方法等多个方面进行。不 同的方法可以相互印证，提高鉴定的准确性和可靠性。