呼吸道合胞病毒蛋白的研究进展
呼吸道合胞病毒蛋白的研究进展
中国生物制品学杂志2006年9月第19卷第5期ChinJBiologicalsSeptember2006,V o1.19No.5?541?
呼吸道合胞病毒蛋白的研究进展
李光综述井申荣审校
【综述】
【摘要】本文对呼吸道合胞病毒基因组编码的病毒蛋白,包括膜蛋白,核蛋白,融合蛋白,基质蛋白及非结构蛋白的结
构和功能的研究进展进行比较全面的综述.
【关键词】呼吸道合胞病毒;病毒蛋白;结构;功能
呼吸道合胞病毒(RSV)是副粘病毒科肺病毒属
成员,中等大小,有包膜,基因组为非节段性单股负
链RNA,全长为15225个核苷酸,编码11个蛋白.
在RSV负链RNA基因组上从3至5端依次为
NS1,NS2,N,P,M,SH,G,F,M2,L,其中G,F,SH三
种蛋白位于膜上,M基因编码基质蛋白,N,P,L基
因编码的蛋白位于单股负链RNA上.M2—1,M2-2,
NS1,NS2编码的蛋白并不出现在成熟病毒颗粒中,
它们为非结构蛋白,只在特殊的阶段出现,发挥特殊
的作用.RSV表现出极小的抗原异质性,尽管这
样,RSV还是分为两个亚型:A和B.它们主要的区
别在于G,F,N,P蛋白上的抗原组成不同,其中G
蛋白的可变性最高,A和B亚型中的氨基酸序列只
有53%的同源性,相反,两个亚型间F和P蛋白则
有较高遗传及抗原同源性¨.
1.蛋白的结构与功能
1.1G蛋白:G蛋白(Glyeoprotein)属于Ⅱ型糖
蛋白,含有299个氨基酸,相对分子质量为90000,
包括N一端的胞浆区,疏水的锚定区和外功能区.外
功能区由两个粘液素样区域组成,这两个区域高度
可变,富含Ser,Thr和Pro,并含有大量N一连接寡糖
和O一连接寡糖【2J,同时它们之间有13个氨基酸,其
中含有4个非常保守的Cys残基,它们对G蛋白的
贴附活性并没有影响.G蛋白188位Arg和192
位Tyr可以通过诱导保护性免疫和启动嗜酸性粒细
胞的增殖来抵抗RSV感染,188位Arg周围的序列
对主要保护性表位至关重要,但对188位上游的表
位来说,影响要小一些j.
C一端的可变区域存在着许多宿主抗体可以识别
的表位,病毒通过改变这个区域的抗原结构,以逃避
宿主的免疫反应.通过N一端糖基化掩盖抗原表位
作者单位:昆明理工大学生物工程技术研究中心(昆明65O224).
通讯作者:井申荣,E—mail:jingshenrong@163.eom
可能是病毒逃避宿主免疫应答的另外一种方式.除
了膜G蛋白外,病毒还产生一种N一端截短了的可溶
性分泌型G蛋白,能使受侵染的细胞和释放的病毒
粒子逃避宿主的免疫应答.
最近有实验表明J,不表达膜G蛋白但可以表
达可溶性G蛋白的重组RSV毒株在体外实验中仍
能有效地侵染,在活体实验中,侵染力也仅有轻微的
减弱,这就意味着可溶性G蛋白能促进病毒的侵
染;既不表达膜G蛋白也不表达可溶性G蛋白的
RSV毒株也可以侵染宿主细胞,但这种突变型病毒
在侵染人和小鼠呼吸道上皮细胞时,效率降低很多,
表明G蛋白对病毒进入宿主细胞并不是必需的,但
作为一个辅助蛋白,可以促进贴附过程.
1.2F蛋白:F蛋白(Fusionprotein)对于RSV
来说是不可缺少的,在RSV的生命周期里最关键的
一
步就是进入宿主细胞,而这一步由F蛋白来介导,
所以F蛋白已经成为RSV疫苗的主要候选蛋白.
同许多其它病毒的F蛋白一样,RSV的F蛋白
是一种典型的I型糖蛋白.RSV首先合成F蛋白
前体(FO),为N一端糖基化的蛋白,有574个氨基酸,
相对分子质量为70000.FO没有活性,经过蛋白酶
的切割,形成C一端的F1和N一端的F2,F1和F2通过
二硫键相连.裂解发生在F2的C一端,由宿主细胞
的内源性蛋白酶来切割,该内源性蛋白酶具有胰蛋
白酶样的序列特异性,能暴露融合多肽F1N一端15～
17个疏水氨基酸.
F蛋白进入细胞膜的部分位于F1的N一端,而
穿膜部分位于靠近F1的C一端.邻近这两个功能区
的是两段7个核苷酸的重复序列,为HR?C和HR—
N,形成保守的三聚体发夹结构,RSV通过改变发夹
结构的构象,来介导病毒与宿主细胞膜的相互融合
及病毒进入,所以这个发夹结构是很好的药物靶点,
与HR—C区域结合的多肽能抑制病毒与细胞膜融合
前的构象改变.
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F蛋白还与Ras家族的RhoA有关,RhoA是
一
种鸟氨酸三磷酸酶,在RSV侵染的细胞中,RhoA
的表达有利于合胞体的形成.此外,RhoA的衍生多
肽与F蛋白有高度的亲和性,能够阻止病毒自由地进入宿主细胞.表面蛋白A(sP—A)和乳铁传递蛋白(Lr)对F蛋白有特异的结合性,能够调节RSV的感染,在呼吸道粘膜上的天然免疫中起着重要作用. 1.3SH蛋白:SH蛋白(Smallhydrophobicpro—
tein)在不同RSV亚型中所含氨基酸数目略有不同: A亚型中含有64个氨基酸,B亚型中含有65个.
尽管观察到SH蛋白在RSV感染的细胞中遍及
整个细胞质,但在富含神经节苷脂(GM1)的膜结构
中的高尔基复合体内积累得特别多,这就意味着在病毒感染时期,病毒分泌途径上的一些细胞器,如内质网和高尔基复合体,是SH蛋白的主要积累场所. 有一种假设认为SH蛋白可以形成离子通道.
1997年Perez等在大肠杆菌中表达人RSV的SH 蛋白时,通过检测大肠杆菌膜渗透压的变化,间接证明了这一点.另外,还有一些研究说明SH蛋白有
助于维持病毒外壳的稳定性,可能参与编码毒力因子¨引.对RSV重组突变株的功能分析表明:SH蛋
白并不参与结合和感染,而且至少在C蛋白缺失的情况下,它还能抑制病毒感染细胞的融合以及病毒在细胞培养物中扩散u¨.在RSV侵染的Vero细胞中发现SH蛋白具有磷酸化位点,MAPKp38的抑制物SB203580能特异阻断这种磷酸化,表明SH蛋白磷酸化是通过依赖MAPKp38的途径进行的,在RSV侵染宿主细胞时,依赖MAPKp38途径的酪氨酸激酶活性变化导致了SH蛋白的改变,从而影响SH蛋白在细胞内的分布¨引.
1.4M蛋白:M蛋白(Matrixprotein)是基质蛋
白,有256个氨基酸,相对分子质量为28000.
病毒侵染细胞后,M蛋白出现在早期核中,可
以抑制宿主细胞的转录.RSV感染的宿主细胞核
提取物在体外有较低的转录活性,而且还可以抑制正常细胞核提取物的转录活性¨引.M蛋白具有RNA结合能力,这种结合能力没有序列和长度特异性.与RNA结合的区域位于120—170位氨基酸残基之间,Lys(121,130,156和157位)和170位的
Arg在副粘病毒科中是非常保守的,对RNA的结合能力是必需的.而且,无论M蛋白是否具有RNA
结合活性,都可以形成高分子寡聚物l】引.
1.5M2—1蛋白和M2-2蛋白:RSV的M2基因
处于F基因和L基因之间,编码两种假定的蛋白(Putativeproteins):M2—1和M2-2.
M2—1蛋白含191个氨基酸,由靠近M2mRNA
5端的ORF所编码,与M2-2的ORF有1O个氨基酸的重叠.
M2—1蛋白在RNA转录延伸中起促进作用,减
慢RNA的转录中止,有利于RNA转录时顺利读过
每个基因连接点¨.
M2—1蛋白有Cys3Hislzinc磷酸化的结合基序,
是其功能所必需的,并且通过该基序与N蛋白相互
作用.其磷酸化位点是位于58位和61位的Ser,这
种磷酸化作用在RNA转录中发挥重要的功能.此
外,在病毒侵染过程中,M2—1蛋白对RSVmRNA的单顺反子和多顺反子有结合能力¨.
M2-2蛋白含有9O个氨基酸.通过对M2-2基
因缺失的重组RSV毒株进行分析,M2-2蛋白对于
病毒复制来说可有可无,但在病毒侵染细胞时起很
大的作用,与致病机理也有密切关系ⅢJ.也有人认为,它对整个转录过程起调控作用J.
1.6L蛋白:L基因含有6501个核苷酸,包括
一
个ORF,编码2165个氨基酸的L蛋白(Largepol—ymeraseprotein),相对分子质量为250000,为RNA
聚合酶.通过与副粘病毒科其他成员的氨基酸序列
对比,RSV的L蛋白在N一端多出7O个氨基酸.原
因是L基因和上游M2基因有一段基因重叠,使用
了新的翻译起始位点.
如果L蛋白1049位上Asp突变成Asn,将影响
通读表现型,并特异地影响转录中止,但对整个基因
组的复制没有影响.当1049位表达Asn时,L蛋白
能够在每个基因接头处识别和中止转录,转录活性
明显高于此处表达Asp的L蛋白.
1.7P蛋白:P蛋白(Phosphoprotein)是RSV
RNA依赖RNA聚合酶复合体的关键成分之一,有244个氨基酸.
P蛋白在两簇Ser残基处是磷酸化的,一簇位
于[116/117/119],另外一簇位于[232/237].在病
毒复制中,这5个Ser残基降低了磷酸化电势;敲除
了5个磷酸化位点时,报告基因的表达量减少了20%.将敲除了2个磷酸化位点(S232A/S237A
[PP2])和5个磷酸化位点(S116L/S117R/S119L/
S232A/S237A[PP5])的突变基因分别导人有侵染
性的RSV A2毒株中,对∞P同位素标记的两种侵染
细胞进行免疫沉淀分析,发现P蛋白的磷酸化在前
者(rA2一PP2)中减少了80%,在后者(rA2一PP5)中减少了95%,N蛋白和P蛋白的相互作用也分别减少
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了30%和60%.两种突变株在Vero细胞中复制良
好,突变株rA2一PP2在Hep-2细胞中也能最大限度
地复制,而rA2.PP5在Hep-2细胞中几乎不能复制.
病毒在被侵染的Hep-2细胞中出芽生殖依赖于P蛋
白去磷酸化,因为大多数rA2一PP5仍然包含在细胞
里面.此外后者(rA2.PP5)在小鼠和棉鼠呼吸道上
的复制活性也比前者(rA2一PP2)低.这些实验说
明,虽然体外实验中P蛋白的磷酸化对于病毒的复
制是非必需的,但体内和体外实验均表明P蛋白的
磷酸化对于复制的效率有很大促进作用¨引.
1.8N蛋白:最近几年对N蛋白(Nucleoprote—
in)研究很少.N蛋白的突变可以影响其与RNA的
结合能力以及病毒的一些功能,如复制.开发一些
病毒(如麻疹,RSV,埃博拉和流感病毒)的减毒活疫
苗时,通过插入,缺失,替换和破坏N蛋白的磷酸化
位点来构建,也可以通过改变N蛋白的其他部分来
构建,例如在第389个氨基酸上,把丝氨酸替换掉,
最好是中性氨基酸,丙氨酸最为合适.
另外,在细菌表达N蛋白的研究中,1—92位的
氨基酸序列对核衣壳的结构形成是必需的,121—
160位的序列对维持基因组螺旋状稳定性非常重
要.进一步分析表明,在N一端存在一个潜在结构
域,可能参与同P蛋白的相互作用,对核衣壳的组
装是必要的¨.
1.9NS蛋白:NS蛋白(Non.structureprotein)
有两个成员:NSI和NS2,分别含136和124个氨基
酸.NS蛋白一般出现在侵染的宿主细胞中,在成熟
病毒粒子中没有发现,所以称为非结构蛋白.
NS蛋白对宿主的IFN有抑制作用,但机制尚不
清楚].RSV如果缺少NS蛋白,病毒的毒性会减
弱,宿主细胞也会减少一些激动素和调理素的分泌,
如IL.8,TNF.d等¨.
非节段负链RNA病毒往往通过转录梯度
(Transcriptiongradient)来控制转录,靠近启动子的
基因(Promoter.proximalgenes)转录梯度高于其下游
的基因.而NS1基因就是由靠近RSV启动子的基
因所编码的,丰度较高.在一些副粘病毒中,由不同
基因末端信号引起的转录中止效率的差异可以调节
基因表达水平.NS1和NS2中止效率很低,在增加
NS1和NS2,或单独增加其中一个基因末端信号中
止效率的重组体内,发现相关多顺反子的通读mR—
2020儿童呼吸道合胞病毒感染诊断、治疗和预防专家共识
2020儿童呼吸道合胞病毒感染诊断、治疗和预防专家共识 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)是世界范围内引起5岁以下儿童急性下呼吸道感染(ALRTI)最重要的病毒病原。RSV感染是造成婴幼儿病毒性呼吸道感染住院的首要因素。为进一步规范儿童RSV感染的诊断、治疗及预防，以国内外RSV最新研究进展为参考，特制定《儿童呼吸道合胞病毒感染诊断、治疗和预防专家共识》。 一般治疗 对于急性期患儿应动态观察及评估病情变化，当血氧饱和度持续低于90%～92%时，给予氧疗。对于重症患儿，还可选择无创持续性正压通气(CPAP)或机械通气等呼吸支持治疗。当存在上气道阻塞并引起呼吸困难或喂养困难时可给予口鼻腔吸痰或9 g/L盐水滴鼻缓解鼻塞症状，保持呼吸道通畅。 患儿若能正常进食，建议继续经口喂养，如出现呼吸急促，呼吸困难，进食后呛奶易引起误吸等情况，可给予鼻胃管营养摄入，必要时可给予静脉营养，以保证体内水电解质内环境的稳定。 药物治疗
1.抗病毒药物 干扰素 对于RSV感染引起的下呼吸道感染，在抗感染、平喘、吸氧补液等常规基础治疗上，可试用重组人α干扰素进行抗病毒治疗。干扰素α1b 2～4 μg/(kg?次)，2次/d，疗程5～7 d；干扰素α2b 10万～20万IU/(kg?次)，2次/d，疗程5～7 d。 利巴韦林 目前尚无足够的证据证实利巴韦林在治疗RSV感染中的有效性，故不推荐常规使用。 2 支气管舒张剂 支气管舒张剂(如β2受体激动剂)单独或联合抗胆碱能类药物雾化在RSV 感染后引起喘息患儿中的疗效尚不明确。 对于RSV感染伴喘息症状患儿可试用支气管舒张剂，然后观察临床效果，如用药后临床症状有所缓解，可继续应用；如用药后无改善，则考虑停用。 对于RSV感染已经引起呼吸衰竭需要呼吸机辅助通气的重症患儿，支气管舒张剂还可能增加心动过速等不良反应的风险，需慎用。
呼吸道合胞病毒
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 呼吸道合胞病毒 导语：带小孩时间十分困难的一件事情，带好小还就更加困难了。之所以困难，原因就是小孩的身体处于发育阶段，所有的身体器官都很稚嫩，孩子体内对 带小孩时间十分困难的一件事情，带好小还就更加困难了。之所以困难，原因就是小孩的身体处于发育阶段，所有的身体器官都很稚嫩，孩子体内对病毒的抗体还很少，所以小孩很容易患病。有时候在你不知不觉中，小孩子就会得了病，其实根本不是因为你的原因引起的。常见的小孩疾病就有肺炎等，而引起肺炎的罪魁祸首很有可能就是呼吸道合胞病毒。 可能说到呼吸道合胞病毒大家会感觉很陌生，因为平时根本不会涉及到这一方面的知识。但是这个病毒却和我们的生活息息相关，尤其喜欢找上婴幼儿，从而导致婴幼儿发生支气管炎、肺炎等。那么，到底什么是呼吸道合胞病毒呢？ 呼吸道合胞病毒是一种RNA病毒，属副粘液病毒科。该病经空气飞沫和密切接触传播。多见于新生儿和6 个月以内的婴儿。潜伏期3～7日。婴幼儿症状较重，可有高热、鼻炎、咽炎及喉炎，以后表现为细支气管炎及肺炎。少数病儿可并发中耳炎、胸膜炎及心肌炎等。成人和年长儿童感染后，主要表现为上呼吸道感染。确诊可分离病毒及做血清补体结合试验和中和试验。应用免疫荧光技术检查鼻咽分泌物中病毒抗原，可作快速诊断。治疗以支持和对症疗法为主，有继发细菌感染时，可用抗菌药治疗。预防同其他病毒性呼吸道感染。 被呼吸道合胞病毒感染后，要特别重视一般治疗，注意隔离，努力防止继发细菌或其他病毒感染。如无继发细菌感染，只用中医治疗即可。一般治疗参阅支气管肺炎节，其他可参阅腺病毒肺炎节，由于本 常识分享，对您有帮助可购买打赏
七项呼吸道病毒检测试剂盒 鉴定 使用说明书
七项呼吸道病毒检测试剂盒（鉴定）使用说明书 【产品名称】 通用名称：七项呼吸道病毒检测试剂盒 英文名称：D3 Ultra DFA Respiratory Virus Screen & ID Kit 【包装规格】 鉴定试剂：80人份/盒 【预期用途】 用于临床定性检测7种呼吸道病毒：甲型（A型）流感病毒，乙型（B型）流感病毒，呼吸道合胞病毒，腺病毒，副流感病毒1、2和3型。 【检验原理】 荧光素（FITC）标记的单克隆抗体与病毒抗原结合，形成稳定的抗原-抗体复合物，在荧光显微镜下观察，呈现特异性绿色荧光。 【主要组成成份】 组份名称规格主要成分 1 DFA染色试剂鉴定试剂流感A试剂： 2 mL 每试剂瓶为一项与病毒 抗原相对应的荧光单克 隆抗体 流感B试剂：2 mL 腺病毒试剂：2 mL 呼吸道合胞病毒试剂：2 mL 副流感1试剂：2 mL 副流感2试剂：2 mL 副流感3试剂：2 mL 2 40X浓缩洗液25 mL PBS 3 固定液15 mL 甘油 4 阳性质控板5块包被病毒抗原 【储存条件及有效期】 2oC-8oC避光保存18个月。 【适用仪器】 荧光显微镜，激发波长490 nm，发射波长520 nm。 【样本要求】 鼻咽部取样后保存于生理盐水中，应在24小时内送检。 【检验方法】 1、取样：用鼻咽拭子从病人的鼻咽部取样或者使用鼻腔灌洗液，将鼻咽拭子放入储存管中（含有生理盐水）。 2、样本准备步骤： ①将样本充分震荡混匀约10-15秒。 ②在400-600xg转速下离心5-10分钟。 ③弃上清。 ④在沉淀中加2-3 mL PBS缓冲液（不能使用试剂盒中的浓缩洗液），充分震荡混匀约10-15秒。 ⑤在400-600xg转速下离心5-10分钟。 ⑥吸走上清和黏液层，小心不要吸到沉淀。 ⑦重复步骤4到6，直至黏液层被完全去除。 ⑧在沉淀中加0.5-1 mL的PBS缓冲液。 ⑨用移液器反复吹吸来重悬细胞沉淀，形成一个略混浊的悬液。 3、直接样本测试步骤： ①在8孔板上的孔内滴加25 μL的细胞悬浊液，每样本需滴加七孔。 ②样本完全风干。
牛常见呼吸道疾病的预防与治疗
龙源期刊网 https://www.docsj.com/doc/fa4962090.html, 牛常见呼吸道疾病的预防与治疗 作者：齐丽娜 来源：《新农村》2018年第05期 引言 牛呼吸道疾病是由多种致病因素共同作用而产生的一种新型疾病，出现在我国境内部分省份，这种疾病具有发病快和传染快的特点。如果防治不及时将会导致牛大量的死亡，辽宁地区的养牛业正处在快速发展阶段，牛呼吸道疾病预防与治疗也影响着其发展的速度。本文分析了牛呼吸道疾病的预防治疗措施，希望通过本次的研究对这一新型的疾病进行科学、合理的预防以及治疗。 牛呼吸道疾病的发生对牛养殖业带来了严重的影响，在现代养牛业中，牛出现呼吸道疾病会影响其生产效益和经济效益。还可能对人类的身体健康造成威胁。引起牛呼吸道疾病的病原菌包括牛支原体、巴氏杆菌及曼氏杆菌等，除病原菌外，湿冷环境、毒素侵袭、缺氧脱水、天气条件恶劣及灰尘均可能诱发牛呼吸道疾病。通过预防与治疗，尽量减少牛呼吸道疾病的传播。 1牛呼吸道疾病的认识以及发病情况 1.1牛支原体病 危害养牛业的一种致病性支原体就包括牛支原体病，可引起牛的急性呼吸系统疾病，同时还会持续感染。牛支原体病的分布很广，通常与细菌、病毒一起配合。但是，牛支原体存活的周期并不长，在环境中的生存能力较差，如果无阳光的天气，牛支原体大概可以存活10天左右；在水中可存活14天；如果温度上升为20℃左右，可存活10天左右。 1.2牛巴氏杆菌病 牛巴氏杆菌病是牛的一种急性传染病，又称出血性败血症。以发生高热、肺炎和内脏广泛出血为特征。感染这种疾病的牛，通常会出现胸部炎性水肿、咽喉炎性水肿和头颈炎性水肿。由于牛巴氏杆菌的常见性，一年四季都会发病，但这种疾病生存能力很差，经过阳光照射，病菌很快就会死亡消失。 1.3牛呼吸道合胞体病毒病 一种以呼吸困难、鼻炎和多核细胞性肺炎为特征的牛急性传染病。病原为牛呼吸道合胞体，传播迅速，发病率很高，但病死率低。其传染源是病牛和带毒牛。感染该病毒后，表现为上呼吸道咳嗽、鼻眼有分泌物，严重的表现为精神忧郁、体温升高、产奶量下降及呼吸急促等等。严重的还可能发展为呼吸窘迫等。
呼吸道合胞病毒RSV疫苗
呼吸道合胞病毒RSV 一、背景资料 1.1 呼吸道合胞病毒肺炎 呼吸道合胞病毒肺炎（respiratory syncytial virus pneumonia）简称合胞病毒肺炎，临床表现为咳嗽、流鼻涕、发烧、有时喘息，与流感症状相似，是一种小儿常见的间质性肺炎，多发生于婴幼儿。由于母传抗体不能预防感染的发生，出生不久的小婴儿即可发病，但新生儿较少见。国外偶有院内感染导致产科医院新生儿病房爆发流行的报道。在北京，48%的病毒性肺炎和58%的毛细支气管炎系由合胞病毒引起（1980～1984）；在广州，小儿肺炎及毛细支气管炎的31.4%由合胞病毒引起（1973～1986）；在美国，20%～25%的婴幼儿肺炎和50%～75%的毛细支气管炎由合胞病毒引起。 1.2 人类呼吸道合胞病毒 人类呼吸道合胞病毒（Human Respiratory Syncytial Virus，简称HRSV或RSV）是引起小儿病毒性肺炎最常见的病原，可引起间质性肺炎，及毛细支气管炎。RSV为中型单股反链RNA病毒，属于副粘液病毒科，肺病毒属，只有一个血清型。RSV在电镜下所见与副流感病毒类似，病毒颗粒大小约为150nm，较副流感病毒稍小，对乙醚敏感，无血球凝集性，在人上皮组织培养形成特有的合胞（syncytium），病毒在胞浆内增殖，可见胞浆内包涵体。 1.3 RSV分子生物学信息 RSV基因组为长约15.2kb的单股负链RNA，编码11种蛋白，包括3种跨膜包膜糖蛋白(F,G和小疏水蛋白SH)，1种基质蛋白(M)，4种核衣壳蛋白(N,P,L 和M2-1)，2种非结构蛋白(NS1和NS2)为I型干扰素拮抗剂，1种RNA调节因子(M2-2)。其中G和F为主要中和抗原，能刺激机体产生血清中和抗体和呼吸道粘膜的分泌型sIgA，根据G蛋白抗原性差异分为A和B两个亚型。N，F，P，NS2和M等蛋白可诱导机体产生CD8+细胞毒性T细胞(CTLs)。 二、RSV疫苗 2.1 RSV疫苗研究背景 由于呼吸道合胞病毒是引起婴幼儿支气管炎和肺炎的主要原因，也可导致免疫缺陷病人和老年人群发病和死亡。所以被世界卫生组织WHO列为全球最优先发展的疫苗之一。经过多年研究RSV疫苗取得一些进展，但尚未有疫苗上市。目前主要集中在亚单位疫苗和活疫苗的研究上，其中减毒活疫苗和活病毒载体疫苗最有可能用于预防婴幼儿RSV感染而受到关注。 20世纪60年代研制的福尔马林灭活疫苗(FI-RSV)不仅不能防止婴幼儿感染，而且接种后支气管炎和肺炎发生率及严重程度大大增加，现在认为至少2个原因导致该结果(1)FI-RSV未能诱导产生高亲和力、有中和活性抗体，也未能产生保护性CD8+T细胞应答，使得FI-RSV诱导产生的免疫力不足以控制RSV感染； (2)FI-RSV诱导产生了Th2偏向的CD4+T细胞应答，介导的炎症反应导致疾病增强作用(ERD)发生。RSV 天然感染不能产生持久免疫力, 反复感染常见，作为疫苗主要目标人群的新生儿免疫系统发育不成熟，难以产生高效价及高亲和力的抗体, 同时体内存在的母传抗体能介导免疫干扰或抑制作用。RSV存在两种抗原亚型(A和B)的RSV, 在同一个流行季节，不同亚型的RSV可引起再次感染等，这些因素对疫苗的安全性及免疫原性均提出了很高要求。因此, 一个成功的
免疫荧光检测呼吸道病毒
成人呼吸道感染病毒病原学检测 摘要: 目的了解哈尔滨医科大学附属第二医院成人呼吸道病毒感染的流行特征。方法采用直接免疫荧光法（DIF），对2007年4月-2008年6月住院的399名16-87岁呼吸道疾病患者痰标本进行七种病毒检测。结果399例患者中病毒检测阳性者54例，病毒总体阳性率13.53％。首位病毒为呼吸道合胞病毒29例（7.27％）和流感病毒A型27例（6.77％），其次为副流感病毒3型17例（4.26％）、副流感病毒1型13例（3.26％）、腺病毒5例（1.25％）、流感病毒B型2例（0.50％）和副流感病毒2型2例（0.50％），混合感染22例（5.51％）。64-87岁年龄组病毒检出率最高（18.12％），32-47岁年龄组病毒检出率最低（6.94％）。肺炎、支气管炎、支气管扩张、哮喘、慢性阻塞性肺疾病（COPD）均有病毒检出，其中以COPD检出率最高（16.67％），其次是哮喘（15.38％）。结论病毒在成人呼吸道感染中占有重要的地位，感染主要集中在48-87岁年龄阶段（15.38％），COPD 和哮喘病毒感染率最高，以呼吸道合胞病毒和流感病毒A型最为常见。 关键词呼吸道病毒感染；成人 Abstract: Objective To understand the epidemiologic feature of respiratory tract viral infection in the adults of Harbin Medical University The Second Affiliated Hospital.Methods From April 2007 to June 2008, a total of 399 hospitalized adults were studied.Sputum were screened for virus by direct immunofluorescent (DIF) assay.Results Virus was identified in 54 patients ( 13.53%) .The most prevalent was respiratory syncytial viruses (RSV) (29, 7.27%) , followed by influenza A (27, 6.77%) , parainfluenza 3(17,4.26%) , parainfluenza 1(13,3.26%) , adenovirus (5, 1.25 %) ，influenza B (2, 0.50 %) , parainfluenza 2 (2, 0.50%) , and mixed viral infection(22, 5.51%).The highest virus detection rate (18.12%) occur in adults between 64 and 87 years, virus detection rate of the lowest (6.94%) exist in 37-47-year-old.Pneumonia, bronchitis, bronchiectasis, asthma, chronic obstructive pulmonary disease (COPD) have detected the virus, with the highest detection rate of COPD (16.67%), followed by asthma (15.38%).Conclusions Viruses still play an important role in respiratory tract infections in adults and was concentrated in the 48-87 age group(15.38%), the infection rate of COPD and asthma was the highest. Respiratory syncytial virus and influenza A virus was the most common types. Key words Respiratory tract viral infection;Adults 材料和方法 1.研究对象2007年4月-2008年6月随机选择哈尔滨医科大学附属二院呼吸 科住院病人399例。其中年龄16岁-87岁，男性214例，女性185例。 2.设备及试剂荧光显微镜（TS100），离心机（TGL20LM），漩涡混合器（XH-B）， 37℃培养箱（SKP-02.500），直接免疫荧光试剂盒（3137，chemicon）。 3.病毒抗原检测
呼吸道合胞病毒和腺病毒的检测与分型
呼吸道合胞病毒和腺病毒检测与分型 首都儿科研究所 邓洁 大家好！下面我跟大家交流一下呼吸道合胞病毒和腺病毒的检测与分型方法。 呼吸道合胞病毒是属于副粘液病毒科的一种RNA病毒。它是造成世界范围内婴幼儿下呼吸道病毒性感染最常见的原因之一，特别是2 — 6个月的小婴儿在感染呼吸道合胞病毒以后常常可以发生严重的毛细支气管炎和肺炎。另外呢它还是引起老年人慢性支气管炎加重以及免疫损伤患儿下呼吸道感染的重要病原。 呼吸道合胞病毒最早是在1956年在伴有感冒症状的猩猩体内分离到的。在1957年又从患有下呼吸道疾病婴儿的鼻咽分泌物中分离到，由于它在细胞中可以引起细胞融合病变，所以呢就根据它在组织培养中的细胞病变特征呢命名为呼吸道合胞病毒。 呼吸道合胞病毒呢它是由包裹负链RNA的核衣壳和包膜组成，其RNA全长为15225个核苷酸，编码10个蛋白。其中呢G蛋白和F蛋白呢是位于病毒颗粒的表面，是呼吸道合胞病毒的主要糖蛋白。 呼吸道合胞病毒的抗原变异，在70年代应用动物高价免疫血清的交叉中和试验即证明呼吸道合胞病毒毒株之间存在着细微的差异。在80年代随着特异的呼吸道合胞病毒单克隆抗体的应用，发现呢在G蛋白、F 蛋白、P蛋白以及N蛋白等蛋白上存在着抗原的变异性。 呼吸道合胞病毒亚型有什么差异呢？我们说呼吸道合胞病毒分为两个亚型A和B，它们的主要区别呢，主要是在于G、F、N、P蛋白上的抗原组成不同，其中G蛋白的可变性最高。A和B亚型G蛋白之间仅存在5%的抗原相关性，而F蛋白则接近50%。在氨基酸水平上，A和B亚型G蛋白只有53%的同源性，而F蛋白则为89%。 那么呼吸道合胞病毒亚型与反复感染有什么关系呢？我们说由于G蛋白是激发机体产生保护性抗体最主要的病毒抗原之一，而不同亚型呼吸道合胞病毒G蛋白激发机体产生的保护性抗体呢，不能有效地提供亚型间的交叉保护作用。所以亚型的存在呢可能是同呼吸道合胞病毒的反复感染有关。 那么呼吸道合胞病毒A、B亚型的致病性又有哪些区别呢？这都是一些文献的报道，有一些文献报道呢，说A亚型呼吸道合胞病毒呢具有较强的致病性。另外呢还有的人报道是B亚型合胞病毒，无论是在病毒的滴度、形成细胞融合病变的大小和培养时间上，均明显的较A亚型差。也就是说和上面的那个报道是一致的。另外呢还有人报道是婴幼儿合胞病毒感染以后呢同，对同型G蛋白的抗原反应呢B亚型较A亚型更加强烈和有效。 那么我们进行呼吸道合胞病毒亚型监测有什么意义呢？我们说呢呼吸道合胞病毒和疾病的严重程度之间的关系目前呢还没有定论，而且呢亚型的存在可能与呼吸道合胞病毒的反复感染有关。因此我们认为监测人群中呼吸道合胞病毒的流行以何种亚型为主呢，对流行病学研究及疫苗的发展都是有极其重要的意义的。 我国呼吸道合胞病毒感染与流行情况是什么的呢？呼吸道合胞病毒的感染呢具有明显的季节性，在我国南方流行高峰呢主要是在夏秋季，在北方呢则主要发生在冬春季。沈皆平教授以及王之梁教授都曾有过这方面的报道。 呼吸道合胞病毒与流喘肺炎呢，又有什么关系呢？在我国每隔数年就会出现一次由呼吸道合胞病毒感
呼吸道合胞病毒性肺炎的由来
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢呼吸道合胞病毒性肺炎的由来 导语：呼吸道合胞病毒性肺炎是一种小儿常见的肺部疾病，多发于婴幼儿。其发病年龄比较特殊，因为一般来讲新生儿是不会有这种疾病出现的，因为它有 呼吸道合胞病毒性肺炎是一种小儿常见的肺部疾病，多发于婴幼儿。其发病年龄比较特殊，因为一般来讲新生儿是不会有这种疾病出现的，因为它有来自母体的体抗力，但是一般来讲在六个月以后就会有这种疾病的发生。这种疾病除了是自带有外，还感染的原因。所以各位家长要预防次疾病的出现。 病因：呼吸道合胞病毒（RSV，简称合胞病毒，也属副粘病毒科）是引起小儿病毒性肺炎最常见的病原，可引起间质性肺炎，及毛细支气管炎。在北京，48%的病毒性肺炎和58%的毛细支气管炎系由合胞病毒引起（1980～1984）；在广州，小儿肺炎及毛细支气管炎的31.4%由合胞病毒引起（1973～1986）；在美国，20%～25%的婴幼儿肺炎和50%～75%的毛细支气管炎由合胞病毒引起。 病理改变：合胞病毒感染的潜伏期为2～8天（多为4～6天）。合胞病毒肺炎的典型所见是单核细胞的间质浸润。主要表现为肺泡间隔增宽和以单核细胞为主的间质渗出，其中包括淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞。此外肺泡腔充满水肿液，并可见肺透明膜形成。在一些病例，亦可见细支气管壁的淋巴细胞浸润。在肺实质出现伴有坏死区的水肿，导致肺泡填塞、实变和萎陷。少数病例在肺泡腔内可见多核融合细胞，形态与麻疹巨细胞相仿，但找不到核内包涵体。 诊断：近十年来合胞病毒肺炎及毛细支气管炎占我国婴幼儿病毒性肺炎第一位，其症状与副流感病毒肺炎、轻症流感病毒肺炎及轻症腺病毒肺炎临床上几乎无法区别。重症流感病毒肺炎及重症腺病毒肺炎 预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏
呼吸道合胞病毒感染与支气管哮喘发病的关系研究
当代医学2019年10月第25卷第29期总第544期Contemporary Medicine，Oct.2019，Vol.25No.29Issue No.544 呼吸道合胞病毒感染与支气管哮喘发病的关系研究 刘凌志，董必英，郭栋伟 （柳州市中医医院呼吸与危重症医学科，广西柳州545001） 摘要：支气管哮喘是一种十分常见的呼吸道疾病，其病理本质是一种慢性非特异性炎症，发病与遗传因素和环境因素都密切相关，但关于具体发病机制到目前为止并未完全明确。呼吸道合胞病毒是一种常见的病毒，在婴幼儿中的感染率较高。近些年来，越来越多的观察研究表明：婴幼儿期呼吸道合胞病毒感染与日后支气管哮喘的发生具有一定的相关性。现就呼吸道合胞病毒感染及其对机体所造成的损害与支气管哮喘发病之间的关系做一综述。 关键词：呼吸道合胞病毒；气道高反应性；支气管哮喘 支气管哮喘是世界上最常见的慢性疾病之一，发病率呈逐年上升趋势，我国已成为全球哮喘病死率最高的国家之一。支气管哮喘的具体发病机制至今未明，其中环境因素如各种变应原、药物以及病原体感染是其发病原因之一。目前越来越多的流行病学资料与实验研究表明：支气管哮喘的发生与感染呼吸道病毒密切相关[1]。其中，最为重要的当属呼吸道合胞病毒感染，呼吸道合胞病毒在婴幼儿中具有极高的感染率，已有研究证实婴幼儿时期感染呼吸道合胞病毒可参与日后支气管哮喘的发生与急性发作过程[2-3]。现就呼吸道合胞病毒感染与支气管哮喘的发生关系作一综述。 1呼吸道合胞病毒简介 呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus pneu-monia，RSV）是一种常见的RNA病毒，属副黏液病毒科。其基因组为一股单链负链RNA，编码8个结构蛋白和2个非结构蛋白。重要的结构蛋白有融合蛋白F与粘附蛋白G，两者在该病毒感染宿主细胞过程中是必不可少的，并且在该病毒引起的免疫反应中发挥重要作用[4]。RSV可经空气飞沫和密切接触传播，在小儿呼吸道感染中常见，尤其是新生儿和6个月以内的婴儿，有研究证实到2岁时，所有婴幼儿均有一次或多次感染RSV的经历[2]。感染RSV后可有高热、鼻炎、咽炎、喉炎及RSV细支气管炎，常表现出反复性喘息症状，部分患者可在以后发展为持续性哮喘[5]。确诊RSV感染可通过检测呼吸道分泌物中的病毒、病毒抗原或病毒特异性核酸序列等。利用抗体检测抗原应用广泛但缺乏敏感性与特异性，培养细胞分离病毒可弥补这一缺陷，现在多应用聚合酶链式反应技术检查分泌物中病毒特异性核酸序列，可以作快速诊断[6]。 2呼吸道合胞病毒感染与机体免疫反应 目前已证实患支气管哮喘的机体会出现免疫功能调节紊乱，主要特征之一是T细胞的活化。免疫学根据T细胞所产生的细胞因子的不同以及对病原体的免疫反应的最终本质差别将T细胞分为Th0、Th1和Th2细胞，Th0细胞又可以分化为Th1和Th2细胞。Th1细胞主要产生IL-2、IL-12、IFN-γ；Th2细胞主要产生IL-4、IL-5、IL-6、IL-10。IL-4和IL-5的分泌会促进嗜酸性粒细胞和IgE产生，因此，Th2免疫反应与1型超敏反应和过敏相关，而导致IFN-γ占优势的Th1免疫反应是具有保护作用的。 RSV感染后可引起机体对其产生先天性与获得性免疫效应，Haynes LM等[7]发现机体感染RSV后，体内Toll样受体4（TLR4）、Toll样受体2（TLR2）与Toll样受体6（TLR6）在对RSV的先天性免疫反应中发挥重要作用。Openshaw P等[8]利用Balb/c小鼠模型发现：与其他病毒感染不同，Balb/c小鼠在感染RSV后，CD4+T细胞会对RSV特异性抗原做出反应，并进一步引发Th2免疫反应，导致肺中嗜酸性粒细胞大量浸润，进一步的研究证明，引起上述反应的RSV抗原是其表面的粘附蛋白G。Chang J等[9]研究发现RSV感染后可通过干扰TCR介导的信号转导，进而抑制肺组织中的CD8+T的活性与外周气道中CD8+T的记忆效应，使IFN-γ的分泌减少。之前，Hayat C等[10]已经证明CD8+T可通过分泌IFN-γ减弱RSV 的粘附蛋白G引起的肺组织中的Th2免疫反应。因此，RSV 感染后可通过导致IFN-γ减少，Th2免疫反应增强造成损害。 RSV初次感染后可使机体产生RSV特异性抗体IgE。Da-khama A等[11]利用野生型大鼠发现初次感染RSV后所产生的RSV特异性抗体IgE，在机体再次感染RSV后发挥重要作用，IgE可使野生型大鼠气道反应性增高，气道内嗜酸性粒细胞浸润，气道内所产生的T细胞因子也偏向于Th2表型，而使用抗IgE抗体可通过减少Th2型细胞因子与增加IFN-γ的产生减轻上述效应。2012年Krishnamoorthy N等[12]发现机体早期RSV感染不仅可诱导肺内产生Th2型炎症反应，还可破坏调节性T细胞（Treg）抑制免疫反应的相关功能，从而降低气道对可吸入性抗原的免疫耐受，极大地增加了日后发展为支气管哮喘的可能性。所以机体在早期感染RSV后，通过免疫反应不仅即时对气道造成损害，而且为以后RSV与其他因素相互作用导致支气管哮喘的形成埋下了伏笔。 通讯作者：刘凌志，E-mail：275182743@https://www.docsj.com/doc/fa4962090.html, doi：10.3969/j.issn.1009-4393.2019.29.082--综述-- — —191
呼吸道合胞病毒单克隆抗体使用说明书
Injectable Medication Guideline: Synagis (Palivizumab) Background: Respiratory syncytial virus (RSV) is a common disease of childhood and causes acute upper respiratory tract infections in patients of all ages. Most RSV-infected infants experience upper respiratory tract symptoms, and 20% to 30% develop lower respiratory tract infections with their first RSV infection. Certain conditions increase the risk of severe or fatal RSV infection. These include preterm birth; cyanotic or complicated congenital heart disease, especially when the condition causes pulmonary hypertension; chronic lung disease of prematurity, and immunodeficiency disease or therapy causing immunosuppression at any age. In the U.S., more than 125,000 hospitalizations due to RSV infection occur annually. Outbreaks of RSV usually begin in November or December, peak in January or February, and end in March or April. Synagis (palivizumab), a humanized mouse RSV monoclonal antibody, has been shown to reduce the risk of serious RSV disease and to reduce RSV-related hospitalizations in high-risk infants and children. Synagis is administered at a dose of 15mg/kg once every 30 days. Five monthly doses will provide more than 20 weeks of protective serum antibody concentration for most infants. Synagis is administered intramuscularly (IM). Synagis is not effective in the treatment of RSV and it is not approved or recommended for this indication. Synagis is FDA-approved for the prevention of serious lower respiratory tract disease caused by RSV in pediatric patients at high risk of RSV disease. Safety and efficacy were established in infants with bronchopulmonary dysplasia (BPD), infants with a history of premature birth (≤35 weeks gestation), and children with hemodynamically significant congenital heart disease (CHD). Synagis is associated with high cost. Patients receiving Synagis must meet strict approval criteria. Criteria (based on documented RSV risk factors): ?Infants born at 28 weeks gestation or earlier and who are less than 12 months of age as of November 1st. A maximum of five monthly doses is recommended for patients in this category. ?Infants born between 29 to 32 weeks gestation and who are less than 6 months of age as of November 1st. A maximum of five monthly doses is recommended for patients in this category. ?Infants born between 32 to 35 weeks gestation and who are less than 3 months of age as of November 1st and who have one of the following two risk factors for hospitalization due to RSV: ?Infant attends child care, defined as a home or facility where care is provided for any number of infants or young toddlers in the child care facility; or ?Infant has school age siblings or school age relatives living in the house ?Infants in this category may receive prophylaxis with Synagis until they reach 3 months of age and should receive a maximum of 3 monthly doses. ?Infants with chronic lung disease (CLD) who are less than 2 years of age as of November 1st who are receiving or have received medical therapy for CLD within the past 6 months (includes supplemental oxygen, nebulizer treatments, bronchodilators, diuretics, or chronic corticosteroid therapy). A maximum of five monthly doses is recommended for patients in this category. ?Infants born before 35 weeks gestation who have congenital abnormalities of the airway or neuromuscular disease. A maximum of five monthly doses is recommended for patients in this category. ?Infants and children who are less than 2 years of age as of November 1st with hemodynamically significant cyanotic or acyanotic congenital heart disease. Those most likely to benefit are infants and children receiving medication for congestive heart failure (digoxin, diuretic), those with moderate to severe pulmonary hypertension, and those with cyanotic heart disease. A maximum of five monthly doses is recommended for patients in this category. ?Infants and children with immune deficiency who may benefit from RSV prophylaxis (severe combined immunodeficiency, acquired immunodeficiency syndrome (HIV/AIDS), transplant recipients, or children immunocompromised due to chemotherapy). A maximum of five monthly doses is recommended for patients in this category.
呼吸道合胞病毒蛋白的研究进展
呼吸道合胞病毒蛋白的研究进展 中国生物制品学杂志2006年9月第19卷第5期ChinJBiologicalsSeptember2006,V o1.19No.5?541? 呼吸道合胞病毒蛋白的研究进展 李光综述井申荣审校 【综述】 【摘要】本文对呼吸道合胞病毒基因组编码的病毒蛋白,包括膜蛋白,核蛋白,融合蛋白,基质蛋白及非结构蛋白的结 构和功能的研究进展进行比较全面的综述. 【关键词】呼吸道合胞病毒;病毒蛋白;结构;功能 呼吸道合胞病毒(RSV)是副粘病毒科肺病毒属 成员,中等大小,有包膜,基因组为非节段性单股负 链RNA,全长为15225个核苷酸,编码11个蛋白. 在RSV负链RNA基因组上从3至5端依次为 NS1,NS2,N,P,M,SH,G,F,M2,L,其中G,F,SH三 种蛋白位于膜上,M基因编码基质蛋白,N,P,L基 因编码的蛋白位于单股负链RNA上.M2—1,M2-2, NS1,NS2编码的蛋白并不出现在成熟病毒颗粒中, 它们为非结构蛋白,只在特殊的阶段出现,发挥特殊 的作用.RSV表现出极小的抗原异质性,尽管这 样,RSV还是分为两个亚型:A和B.它们主要的区 别在于G,F,N,P蛋白上的抗原组成不同,其中G 蛋白的可变性最高,A和B亚型中的氨基酸序列只 有53%的同源性,相反,两个亚型间F和P蛋白则 有较高遗传及抗原同源性¨. 1.蛋白的结构与功能 1.1G蛋白:G蛋白(Glyeoprotein)属于Ⅱ型糖 蛋白,含有299个氨基酸,相对分子质量为90000, 包括N一端的胞浆区,疏水的锚定区和外功能区.外 功能区由两个粘液素样区域组成,这两个区域高度 可变,富含Ser,Thr和Pro,并含有大量N一连接寡糖 和O一连接寡糖【2J,同时它们之间有13个氨基酸,其 中含有4个非常保守的Cys残基,它们对G蛋白的 贴附活性并没有影响.G蛋白188位Arg和192 位Tyr可以通过诱导保护性免疫和启动嗜酸性粒细 胞的增殖来抵抗RSV感染,188位Arg周围的序列 对主要保护性表位至关重要,但对188位上游的表 位来说,影响要小一些j. C一端的可变区域存在着许多宿主抗体可以识别 的表位,病毒通过改变这个区域的抗原结构,以逃避