黄连(姜制)质量标准
黄连（姜制）质量标准
文件编号：LT0308200山西振东道地药材部门：质量管理部题目：黄连（姜制）内控质量标准第1 页共2 页起草人：日期：审核人：日期：批准人：日期：生效日期：颁发部门：分发部门：变更记载：修订号：修订日期：批准日期：变更原因及目的：
1.目的：建立黄连（姜制）的质量标准，以确保质量。
2.范围：本公司所购进的黄连（姜制）成品。
3.责任：质量管理部 . QC 检验室 . 检验员对本标准负责。
4.引用标准：《中华人民共和国药典》
xx 版
第一部。
5.黄连的质量标准
5.1 黄连片的质量标准
5.1.1 性状本品呈不规则的薄片。外表皮灰黄色或黄褐色，粗糙，有细小的须根。切面或碎断面鲜黄色或红黄色，具放射状纹理，气微，味极苦。
5.1.2 鉴别取本品粉末 0.25g，加甲醇25ml，超声处理30 分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取黄连对照药材
0.25g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml 含 0.5mg 的溶液，作为对照品溶液。照《薄层色谱法检验标准操作程序》(附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一高效硅胶 G 薄层板上，以环己烷乙酸乙酯异丙醇甲醇水三乙胺(3：
3.5：1：
1.5：O.5：1)为展开剂，置用浓氨试液预饱和20 分钟的展开缸内.展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显4 个以上相同颜色的荧光斑点；对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
5.1.3 检查项目内控标准水分≤11.5%文件编号：
LT0308200部门：质量管理部题目：黄连（姜制）内控质量标准第
2 页共2 页总灰分≤
3.0%浸出物≥15.5％
5.1.4 含量测定以盐酸小檗碱计，含小檗碱(C20H17NO4)不得少于
5.O％，含表小檗碱(C20H17NO4).黄连碱(C19H13NO4)和巴马汀(C21H21NO4)的总量不得少于
3.3％。
5.2 姜黄连质量标准
5.2.1 性状本品形如黄连片，表面棕黄色。有姜的辛辣味。
5.2.2 鉴别同黄连片。
5.2.3 检查同黄连片。
5.2.4 含量测定同黄连片。
6.包装：塑料袋包装，每包40kg。标签内容：品名.规格.批号.数量.生产日期.合格证.企业名称等。
7.贮藏置通风干燥处。
黄连中生物碱的提取分离及检识
黄连中生物碱的提取分离及检识 （杨翊涵中药学一班 1302010138） 【摘要】黄连为多年生草本植物,是我国传统中药,在我国中西部地区分布广泛,具有清热燥湿,泻火解毒等功效,其根、茎味极苦,苦味源于所含的多种生物碱。本文总结整理了黄连中小檗碱提取分离实验过程的步骤方法，注意事项，并且整理了黄连中生物碱的有效成分、存在形式，生物碱的溶解性规律，以及实验过程中各种提取液，添加试剂的目的、原理与效果。【关键词】黄连生物碱小檗碱提取分离检识 1.1黄连有效成分 黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。 黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。 黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存
在于黄连中。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。 1.2小檗碱 小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。 2.1实验原理 生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物,大都有明显的生理活性,是许多中草药中的有效成分。它们是人类对植物研究得最早最多的一类有效成分,现已分离出有六千余种。这些生物碱在植物体内一般均与有机酸或无机酸结合成盐而存在,只有弱碱性生物碱往往呈游离状态,还有一些是与糖结合成苷而存在。小檗碱又名黄连素,是最先由毛莨科黄连（Coptis chinensis Fran）和芸香科黄柏(Phellodendron amurense Rup.)等植物中提出的一种黄色生物碱。黄连属植物的根茎、须根、叶中等都含有小檗碱、黄连
黄连(姜炙)质量标准
黄连（姜炙）质量标准 文件编号：LT0308200山西振东道地药材部门：质量管理部题目：黄连（姜炙）内控质量标准第1 页共2 页起草人：日期：审核人：日期：批准人：日期：生效日期：颁发部门：分发部门：变更记载：修订号：修订日期：批准日期：变更原因及目的： 1.目的：建立黄连（姜炙）的质量标准，以确保质量。 2.范围：本公司所购进的黄连（姜炙）成品。 3.责任：质量管理部 . QC 检验室 . 检验员对本标准负责。 4.引用标准：《中华人民共和国药典》 xx 版 第一部。 5.黄连（姜炙）的质量标准 5.1 黄连片的质量标准 5.1.1 性状本品呈不规则的薄片。外表皮灰黄色或黄褐色，粗糙，有细小的须根。切面或碎断面鲜黄色或红黄色，具放射状纹理，气微，味极苦。
5.1.2 鉴别取本品粉末 0.25g，加甲醇25ml，超声处理30 分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。另取黄连对照药材 0.25g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml 含 0.5mg 的溶液，作为对照品溶液。照《薄层色谱法检验标准操作程序》(附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一高效硅胶 G 薄层板上，以环己烷乙酸乙酯异丙醇甲醇水三乙胺(3： 3.5：1： 1.5：O.5：1)为展开剂，置用浓氨试液预饱和20 分钟的展开缸内.展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显4 个以上相同颜色的荧光斑点；对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 5.1.3 检查项目内控标准水分≤11.5%文件编号： LT0308200部门：质量管理部题目：黄连（姜炙）内控质量标准第 2 页共2 页总灰分≤ 3.0%浸出物≥15.5％ 5.1.4 含量测定以盐酸小檗碱计，含小檗碱(C20H17NO4)不得少于 5.O％，含表小檗碱(C20H17NO4).黄连碱(C19H13NO4)和巴马汀(C21H21NO4)的总量不得少于 3.3％。 5.2 姜黄连质量标准
2013执业药师中药化学考点串讲：黄连生物碱
黄连生物碱 (1)结构类型 黄连生物碱主要包括小檗碱、巴马丁、黄连碱、甲基黄连碱、药根碱、木兰碱等，均属于苄基异喹啉衍生物，除木兰碱为阿朴菲型外都属于原小檗碱型，且都是季铵型生物碱。以小檗碱含量最高(可达10%)，有抗菌、抗病毒作用。药根碱属于酚性季胺碱。 (2)小檗碱的理化性质 1)性状：小檗碱为黄色针状结晶，加热至110℃变为黄棕色，于160℃分解。盐酸小檗碱加热至220℃分解，生成红棕色的小檗红碱。 2)碱性：小檗碱属季铵型生物碱，可解离而呈强碱性，其pKa值为11.50。 3)溶解性：游离小檗碱能缓缓溶解于水中，易溶于热水或热乙醇，在冷乙醇中溶解度不大。小檗碱的盐酸盐在水中的溶解度较小，较易溶于沸水，难溶于乙醇。小檗碱与大分子有机酸，如甘草酸、黄芩苷、大黄鞣质等结合，形成的盐在水中的溶解度都很小。 4)互变异构小檗碱一般以季铵型生物碱的状态存在，可以离子化呈强碱性，能溶于水，溶液为红棕色。但在其水溶液中加入过量强碱，季铵型小檗碱则部分转变为醛式或醇式，其溶液也转变成棕色或黄色。醇式或醛式小檗碱为亲脂性成分，可溶于乙醚等亲脂性有机溶剂。 (3)小檗碱的鉴别反应 小檗碱除了能与一般生物碱沉淀试剂产生沉淀反应外，还具有两个特征性检识反应。 1)丙酮加成反应：在强碱性下，盐酸小檗碱可与丙酮反应生成黄色结晶性小檗碱丙酮加成物。 2)漂白粉显色的反应：在小檗碱的酸性水溶液中加入适量的漂白粉(或通入氯气)，小檗碱水溶液即由黄色转变为樱红色。 3)小糪红碱反应：盐酸小檗碱加热至220左右分解，生成红棕色小糪红碱，继续加热至285左右完全熔融。 4)变色酸反应：为亚甲二氧基的显色反应，试剂为变色酸和浓硫酸，阳性反应：红色。 (4)提取分离： 分离小檗碱，形成盐酸盐，分离甲基黄连碱，形成硫酸盐。 1) 常采用碱水加石灰乳提取(加碱后是药材中的生物碱盐转变为游离性的生物碱，游离季胺碱易溶于水)。 2) 用酸水提取，利用小檗碱含氧酸(硫酸、磷酸)的盐溶解度大于非含氧酸盐，根据碱性碱性强弱或溶解度的不同进行。 (5)生物活性：抗菌抗病毒
黄连中生物碱的提取与分离研究工艺
黄连中生物碱的提取与分离工艺研究综述 李芯玲 118318119 前言：黄连为多年生草本植物,是我国传统中药,在我国中西部地区分布广泛,具有清热燥湿,泻火解毒等功效,其根、茎味极苦,苦味源于所含的多种生物碱。 关键词：黄连，生物碱。提取，工艺研究 正文：黄连生物碱具有抗病毒、抗炎、抗菌、抗肿瘤、降血糖及免疫调节 等作用,在食品、保健、医药等领域应用非常广泛。【1】黄连是一种常见的中药，具有清热燥湿，泻火解毒的功效，主要有效成分为小檗碱，巴马汀，药根碱和 黄连碱。【2】目前，国内外对黄连生物碱的提取工艺，主要有回流提取法、酶 解提取法,稀酸盐析法,超声辅助提取法以及微波辅助提取等。 回流提取法常用水、乙醇等为提取剂，浸出液加热蒸馏，提取剂馏出后再 冷凝，重新回到浸出器中继续进行浸提,直至有效成分回流提取完成，一般步 骤为在一定量的黄连粉末中加入适量的乙醇，回流提取总生物碱，抽滤，最后 将滤液烘干得到生物碱。【3】但是乙醇比水易挥发，所以在生物碱提取液浓缩时，醇提比水提更容易，提取率较高，且乙醇无毒，适合大规模工业化生产， 具有广阔的前景，但耗时较长，并需要多次回流提取，才能有效提取完全，此外，提取过程中会有其他的成分溶出，因而杂志含量高。 酶解提取法的原理是利用纤维素的催化作用将纤维素水解成水溶性糖，使 细胞壁破裂，有效成分溶出，酶解法提取生物碱的一般步骤为取一定量的黄连 粉末，经酶解，盐析，碱化，然后结晶。采用酶解法提取总生物碱的提取率比 传统的乙醇回流发高出了24%，【4】该法省时，消耗少，生物碱得率相对较低，而且无毒无害，无污染，后处理简单等优点，属于绿色环保型提取工艺，符合 当前低碳经济的要求，但是酶解发提取对酶解的温度，时间等都有较高的要求，不同产地的黄连以及酶的种类不同，提取的工艺条件也有所差别。此外，酶的 价格也比较的高。所以在提取工艺的推广开发上有一定的影响。 稀酸盐析法的机理是利用在酸性溶液中小檗碱的硫酸的溶解度大，而盐酸 盐在冷水中溶解度非常小的性质。先加入硫酸使小檗碱转变为硫酸盐溶于酸， 接着加入盐酸再转化为盐酸盐而析出用0.3%硫酸水加热回流提取黄连须中总 生物碱,用石灰乳调节提取液pH为5～6,过滤;滤液用JG-101树脂吸附,用不同 洗脱剂分步洗脱;重结晶获得药根碱和小檗碱单体,盐析获得黄连总生物碱;用
生物碱中药化学_七_
中国中医药报/2003年/12月/03日/ 生物碱中药化学(七) 刘斌 12.黄连生物碱的结构类型是什么?小檗碱有何主要理化性质和鉴别反应? (1)结构类型 黄连生物碱主要包括小檗碱、巴马丁 碱、甲基黄连碱、药根碱、木兰碱等,均属于苄基异喹啉衍生物,除木兰碱为阿朴菲型外都属于原小檗碱型,且都是季铵型生物碱。其中以小檗碱含量最高(可达10%),有抗菌、抗病毒作用。 (2)小檗碱的理化性质 1)性状小檗碱为黄色针状结晶,加热至110℃变为黄棕色,于160℃分解。盐酸小檗碱加热至220℃分解,生成红棕色的小檗红碱。 2)碱性小檗碱属季铵型生物碱,可离子化而呈强碱性,其p Ka值为11.50。 3)溶解性游离小檗碱能缓缓溶解于水中,易溶于热水或热乙醇,在冷乙醇中溶解度不大。小檗碱的盐酸盐在水中的溶解度较小,较易溶于沸水,难溶于乙醇。小檗碱与大分子有机酸,如甘草酸、黄芩苷、大黄鞣质等结合,形成的盐在水中的溶解度都很小。 4)互变异构小檗碱一般以季铵型生物碱的状态存在,可以离子化呈强碱性,能溶于水,溶液为红棕色。但在其水溶液中加入过量强碱,季铵型小檗碱则部分转变为醛式或醇式,其溶液也转变成棕色或黄色。醇式或醛式小檗碱为亲脂性成分,可溶于乙醚等亲脂性有机溶剂。 (3)小檗碱的鉴别反应 小檗碱除了能与一般生物碱沉淀试剂产生沉淀反应外,还具有两个特征性检识反应。 1)丙酮加成反应在强碱性下,盐酸小檗碱可与丙酮反应生成黄色结晶性小檗碱丙酮加成物。 2)漂白粉显色的反应在小檗碱的酸性水溶液中加入适量的漂白粉 (或通入氯气),小檗 碱水溶液即由黄色转变为樱红色。 13.汉防己生物碱的结构类型是什么?有 何主要理化性质?如何提取分离? (1)结构类型 汉防己甲素和汉防己乙素均为双苄基异喹 啉衍生物,氮原子呈叔胺状态;轮环藤酚碱为季 铵型生物碱。 (2)理化性质 1)碱性汉防己甲素和汉防己乙素分子结 构中均有两个处于叔胺状态的氮原子,碱性较 强。轮环藤酚碱属于原小檗型季铵碱,具强碱 性。 2)溶解性汉防己甲素和汉防己乙素亲脂 性较强,具有脂溶性生物碱的一般溶解性。但 由于两者分子结构中取代基的差异,前者为甲 氧基,后者为酚羟基,故汉防己甲素的极性较 小,能溶于冷苯;汉防己乙素极性较大,难溶于 冷苯。轮环藤酚碱为水溶性生物碱,可溶于水、 甲醇、乙醇,难溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。 (3)提取分离 汉防己用乙醇提取得总生物碱,然后根据 各成分溶解性和极性的差异进行分离。将总生 物碱溶于稀酸水,利用汉防己甲素和汉防己乙 素在苯中溶解度的差异,碱化后用苯萃取出汉 防己甲素,再用氯仿萃取出汉防己乙素;轮环藤 酚碱为水溶性生物碱,仍留在碱水层。汉防己 甲素和汉防己乙素的分离也可采用氧化铝柱色 谱,利用其极性的差异进行分离,汉防己甲素极 性小,先被洗脱,而汉防己乙素极性大,后被洗 脱。 ? 1994-2007 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. https://www.docsj.com/doc/a77109765.html,
第九章 中药制剂质量标准的制定
第九章中药制剂质量标准的制定 一、单项选择题（每题的5个备选答案中，只有一个最佳答案） 1.批准为试生产的新药，其质量标准的试行期为 A.1年 B.2年 C.3年 D.4年 E.5年 2．处方中全处方量应以制成多少个制剂单位的成品量为准 A.100个 B.400个 C.500个 D.800个 E.1000个 3.中药制剂的处方量中重量应以（）为单位 A.μg B.mg C.g D.kg E.均可 4. 中药制剂的处方量中容量应以（）为单位 A.μL B.mL C.L D.kL E.均可 5.中药制剂色泽如以两种色调组合，应以谁为主 A.前者 B.后者 C.同样 D.中间色 E.其它 6．外用药和剧毒药不描述 A.颜色 B.形态 C.形状 D.气 E.味 7．单味制剂命名时一般采用 A.原料名 B.药材名 C.剂型名 D.原料（药材）名与剂型名结合 E.均可 8．浸出物的建立是以测试多少个批次样品的多少个数据为准 A.5、10 B.5、20 C.10、20 D.10、10 E.20、20 9．在线性关系考察过程中，薄层扫描法的r值应在（）以上 A.0.9 B.0.99 C.0.995 D.0.999 E.0.9999 10．质量标准的方法学考察，重现性试验相对标准差一般要求低于 A.1% B.2% C.3% D.4% E.5% 11．中药新药稳定性试验考察中气雾剂考察时间为 A.半年 B.一年 C.一年半 D.二年 E.二年半 12．中药新药稳定性试验考察中丸剂室温考察时间为 A.半年 B.一年 C.一年半 D二年 E.二年半 13．中药制剂稳定性考察采用低温法时，温度宜在 A.10℃～15℃ B.15℃～20℃ C.20℃～25℃ D.25℃～30℃ E.37℃～40℃ 14．中药制剂稳定性考察采用低温法时，相对湿度要求为 A.60% B.65% C.70% D.75% E.80% 15．中药新药稳定性考察试验中，注射剂的考察时间为 A.半年 B.一年 C.一年半 D.二年 E.二年半 16．中药制剂的稳定性考察中初步稳定性试验共考察几次 A.２ B.３ C.４ D.５ E.６ 17．药品必须符合 A.《中华人民共和国药典》 B.部颁药品标准 C.省颁药品标准 D. 国家药品标准 E.均可 18．质量标准的制定必须坚持 A.安全有效 B.技术先进 C.经济合理 D.质量第一 E.全部 19．中药制剂质量标准的起草说明，性状描述要求至少观察几批样品 A.1～3 B.2～4 C.3～5 D.4～6 E.10批以上
双黄连口服液内控质量标准
制药GMP管理文件 一、目的：制定双黄连口服液的内控标准，规范公司双黄连口服液的 生产。 二、适用范围：适用于双黄连口服液的生产与检验。 三、责任者：生产部、检验员、仓库保管员 四、正文： 双黄连口服液 【处方】金银花375g 黄芩375g 连翘750g 【制法】以上3味，黄芩切片，加水煎煮3次，第一次2小时，第 二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩并在80℃时 加入2mol/l盐酸溶液适量调节PH值至1.0～2.0，保温1小 时，静置12小时，滤过，沉淀加6～8倍量水，用40%氢氧化 钠溶液调PH值至7.0，再加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过， 滤液用2mol/l盐酸溶液调PH值至2.0，60℃保温30分钟， 静置12小时，滤过，沉淀用乙醇洗至PH值至7.0，挥尽乙醇 备用。金银花、连翘加水温浸0.5小时后，煎煮二次，每次 1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密谋为1.20～1.25
（70～80℃测），冷至40℃时缓慢加入乙醇，使含醇量达75%， 充分搅拌，静置12小时，滤取上清液，残渣加75%乙醇适量， 搅匀，静置12小时滤过，合并乙醇液，回收乙醇至无醇味， 加入黄芩提取物，并加水适量，以40%氢氧化钠溶液调节PH 值至7.0，搅匀，冷藏（4～8℃）72小时，滤过，滤液调节 PH值至7.0，加水制成1000ml，搅匀，静置12小时，滤过， 灌装，灭菌，即得。 【性状】本品为棕红色的澄明液体一，久置可有微量沉淀；味微苦。【鉴别】（1）取本品1ml，加75%乙醇溶液5ml，摇匀，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品及绿原酸对照品，分别加75%乙醇 制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法 试验，吸取上述三种溶液各2ul，分别点于同一以羟甲基纤维 素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水 （8.5：2.5：2）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干， 置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 （2）取本品1ml，加甲醇5ml，摇匀，静置，取上清液，作为 供试品溶液。另取连翘对照药材0.5g，加甲醇10ml，加热回流 20分钟，滤过，滤液作为对照药材主。照薄层色谱法试验，吸 取上述两种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏 合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（5：1）为展开剂， 展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑
黄连中生物碱的提取分离及检识
黄连中生物碱的提取分 离及检识 标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]
黄连中生物碱的提取分离及检识 （杨翊涵中药学一班 1302010138） 【摘要】黄连为多年生草本植物,是我国传统中药,在我国中西部地区分布广泛,具有清热燥湿,泻火解毒等功效,其根、茎味极苦,苦味源于所含的多种生物碱。本文总结整理了黄连中小檗碱提取分离实验过程的步骤方法，注意事项，并且整理了黄连中生物碱的有效成分、存在形式，生物碱的溶解性规律，以及实验过程中各种提取液，添加试剂的目的、原理与效果。 【关键词】黄连生物碱小檗碱提取分离检识 1.1黄连有效成分 黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。 黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。 黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。 1.2小檗碱 小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
【CN110279760A】一种黄连总生物碱胃内漂浮缓释片的制备方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910379809.2 (22)申请日 2019.05.08 (71)申请人 丽水市中心医院 地址 323000 浙江省丽水市莲都区括苍路 289号 (72)发明人 梅紫薇 朱延焱 徐艳艳 张霞燕 田伟强 骆松梅 石森林 黎启帆 黄俊杰 胡锦祥 来银芳 邵敬宝 (74)专利代理机构 北京弘权知识产权代理事务 所(普通合伙) 11363 代理人 逯长明 许伟群 (51)Int.Cl. A61K 36/718(2006.01) A61K 9/22(2006.01) A61K 47/36(2006.01) A61K 47/38(2006.01)A61K 9/50(2006.01)A61P 1/04(2006.01) (54)发明名称一种黄连总生物碱胃内漂浮缓释片的制备方法(57)摘要本申请中所制备的黄连总生物碱胃内漂浮缓释片，将单单元释药系统和多单元释药系统相结合，将处方量中80％的黄连总生物碱与辅料制成膜控型缓释微囊，将膜控型缓释微囊与其他亲水凝胶骨架材料等辅料和处方量中20％的黄连总生物碱压制成胃内漂浮片，使其在释放药物的前30分钟内，外部的药物和亲水凝胶骨架材料缓慢释放与溶蚀，这一阶段仅是处方量中20％的药物释放，因此不会出现突释的现象，30分钟后，外部药物和骨架溶蚀完毕后，释放出内部的微囊，内部微囊通过表面的膜孔控制释放，达到缓释效果，从而解决了现有技术中，单单元释放系统可能会出现药物突释，多单元释放系统存在个体释 放差异等问题。权利要求书2页 说明书8页 附图1页CN 110279760 A 2019.09.27 C N 110279760 A
中药材质量标准胡黄连
中药材质量标准胡黄连集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]
中药材质量标准 中文名胡黄连 汉语拼音Huhuanglian 英文名RHIZOMA PICRORRHIZAE 来源本品为玄参科植物胡黄连Picrorrhiza kurroa Royle ex Benth.或西藏胡黄连Picrorrhiza scrophulariiflora Pennell的干燥根茎。 性状本品呈圆柱形，少有分枝，略弯曲，多已折断，长3～15cm，直径～1cm。表面灰褐色，栓皮脱落处呈棕黑色，节 间短，形成密集环纹，腹侧有较多疣状须根，状如卧蚕。近 地上茎部分的根茎可见密集的鳞叶残基。质脆，易断，折断 时现粉尘，断面稍平坦，木栓层灰色至灰褐色，皮部及髓部 淡棕色至棕褐色，维管束4～10个排列成环，木部灰白色。 细长柱状根茎，节间不明显，表面有浅纵皱，根痕少，栓皮 及木部较发达，中心有髓，残存须根较粗壮。气微，味极 苦。 鉴别（1）取本品粗粉2g，加醋酸乙酯50ml，回流提取1小时，滤过，滤液挥干，残渣用甲醇溶解使成2ml，作为供试品溶 液。另取胡黄连对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄 层色谱法（中国药典2000年版一部附录VIB）试验，吸取上 述两种溶液各3μl，分别点于同一用2%氢氧化钠溶液制备 的硅胶F254薄层板上使成条状，以氯仿-甲醇-水（70： 30：10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开14cm，取 出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 （2）本品在[含量测定]项下所得色谱峰中，应呈现与对照 品保留时间相同的色谱峰。 检查杂质取本品250g，通过二号筛，筛上物拣出杂质，与筛 下的碎末合并计为杂质，不得过4%。 地上茎、叶及须根不得过9%。 水分照水分测定法（中国药典2000年版一部附录IX H 第一法）测定，不得过%。 有机氯农药残留量六六六（总BHC）不得过千万分之二； 滴滴涕（总DDT）不得过千万分之二；五氯硝基苯 （PCNB）不得过千万分之一（中国药典2000年版一 部附录IX Q）。 浸出物
双黄连口服液成品质量标准.doc
XXXX公司 GMP管理文件 题目双黄连口服液成品质量标准编码 及检验操作规程 共 5 页 制定审核批准制定日期审核日期批准日期 颁发部门GMP 办颁发数量生效日期 分发单位质量部生产部 1.主题内容 本文件规定了双黄连口服液的技术指标、检验方法、贮藏条件、包装规格等内容。 2.适用范围 本文件适用于双黄连口服液成品的质量控制。 3.责任 本文件由质保部QA主管负责起草，质保部部长负责审核，厂长负责批准。 4.物料名称 商品名： 品名：双黄连口服液 汉语拼音： Shuanghuanglian Koufuye 英文名： 5.物料代码 6.引用标准、依据： 《中华人民共和国兽药典》 2010 年版二部 处方及剂型金银花375g 黄芩375g 连翘750g 吐温 80 5g 纯化水加至1000ml 本品为口服液。 8．技术指标 性状
本品为红棕色的澄清液体；微苦。 鉴别 8.2.1 取本品 1ml，加 75%乙醇溶液 5ml，摇匀，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品及绿原酸对 照品，分别加 75%乙醇制成每 1ml 含的溶液，作为对照液。照《薄层色谱法检验操作规 程》（编号： BZLCZTY01501）实验，吸取上述三种溶液各 1-2 μ l ，分别点于同 一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（ 365nm）下检视。供试品色谱中，在与黄芩苷对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；在与绿原酸对照品色谱相应位置上，显相同以颜色的荧光斑点。 8.2.2 取本品 1ml，加甲醇 5ml，摇匀，静置，取上清液，作为供试品溶液。另取连翘对照药 材 0.5g ，加甲醇 10ml，加热回流 20 分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。照《薄层 色谱法检验操作规程》（编号： BZLCZTY01501）实验，吸取上述两种溶液各 5μl ，分别点于同一硅胶 G包层板上，以三氯甲烷 - 甲醇（ 5:1 ）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 检查 8.3.1PH 值 取本品适量，依pH 值测定法操作规程（编码：BZLCZTY01701）检查，应为。 8.3.2 相对密度 按相对密度比重瓶测定法检查，相对密度应不低于。 8.3.2.1比重瓶测定法 取洁净、干燥并精密称定重量的比重瓶，装满供试品后，装上温度计，置20℃的水浴中放置若干分钟，使内容物温度达到20℃，用滤纸出去溢出测管的液体，立即盖上罩。然后将 比重瓶自水浴中取出，再用滤纸擦净比重瓶外壁，精密称定，减去比重瓶的重量，求得供试 品的重量后，将供试品倾去，洗净比重瓶，装满新沸过的冷水，再照上法测得同一温度时水 的重量，按下式计算，即得。 供试品的相对密度 =供试品的重量 / 水重量 含量测定 8.4.1黄芩
黄连中生物碱成分及药理作用研究进展
黄连中生物碱成分及药理作用研究进展 发表时间：2016-05-25T09:19:25.937Z 来源：《医师在线》2016年1月第2期作者：王双燕石宝堂[导读] 生物碱是含负氧化态氮原子，存在生物有机体中的环状化合物，常表现出较强的生物活性[1]。 （ 1云南经济管理学院云南 650106 2昆明医科大学海源学院云南 650106） 【摘要】黄连中生物碱主要包括黄连碱、巴马汀、表小檗碱、药根碱，具有抗菌、抗炎、降血脂、降血糖、减肥、抗焦虑、抗肿瘤、保护胃黏膜等多种药理学作用，在心脑血管病、痴呆、糖尿病、感染性疾病的治疗，具有广阔的发展潜力。【关键词】黄连；生物碱；药理作用；研究进展 生物碱是含负氧化态氮原子，存在生物有机体中的环状化合物，常表现出较强的生物活性[1]。黄连是常用中药材，属毛莨科黄连属，始载于《神农百草经》，其根茎呈连珠状且色黄而被称为“黄连”，有清热燥湿、泻火解毒功效[2]。中药药理学研究是当前药学研究的热点领域，本文对黄连中生物碱成分及药理作用研究进行概述。 1 黄连中生物碱成分研究进展 小檗碱又称黄连素，被广泛应用于中药制剂，黄连是提取小檗碱的主要药材，目前已开发出多种制剂。黄连素是一种氮杂环化合物，在生物系统中可经氨基酸合成，熔点145℃，小檗碱以季铵型、醛型、醇型三种不同形成存在，其中前者最多。黄连碱主要来源于黄连根茎，是一种常见的异喹啉生物碱，在乙醇溶液中可以浅黄色针状结晶形式存在，其硫酸盐为黄色晶体，不溶于水和乙醇。巴马汀又被称为黄藤素，是黄连中特殊的生物碱，主要存在于黄连根茎部位，熔点198-201℃，易溶于热水，但在有机溶液中不易溶解，经氢化可生产延胡索乙素。药根碱属四氢异喹啉生物碱，组成与黄连素基本相同，熔点208～210℃，碘化物呈红黄色，易溶于水、乙醇，硝酸盐为黄棕色针状晶体，分解温度228～229℃。 2 黄连中生物碱药理作用研究进展 黄连中生物碱含量丰富，具有较好的抗菌作用，为天然的抗菌药物，长期以来被用于感染性疾病治疗；近年来还被用于防治老年痴呆性疾病[3]。随着现代医学的发展，黄连素的药理作用研究越来越深入，为黄连价值开发奠定了基础。 2.1 抗菌作用 黄连中的四种生物碱均有一定的抗菌作用，为一种广谱抗菌药物，研究证实对革兰氏阳性和阴性菌，如伤寒杆菌、肠炎沙门氏杆菌、金葡萄球菌、大肠杆菌、等都有一定的抑制作用。小檗碱最早被用于临床抗感染，其对大肠杆菌、霍乱弧菌具有较强的抑菌活性。体外研究证实其对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、哈氏弧菌也有较高的抑菌活性，但对停乳链球菌几乎无抑制作用[4]。小檗碱对许多致病菌都有不同程度抑制作用，但大多数研究也局限于体外实验阶段，其抑菌作用主要可能通过抑制拓扑异构酶I以及拓扑异构酶Ⅱ活性影响细菌DNA 合成发挥作用。黄连碱具有抑制A型单胺氧化酶作用，对白色念珠菌具有较强的抑菌活性，对白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌有一定的抑菌作用，其与真菌具有很高的亲和力，使其较易进入菌体细胞内，破坏细菌正常生理功能。巴马汀其对金黄色葡萄糖球菌、肺炎克雷伯菌、痢疾杆菌都有一定的抑制作用，已被用于妇科炎症、呼吸道感染、结膜炎的治疗。表小檗碱抑菌作用尚不清楚，可能存在潜在的抗菌作用。药根碱抑菌活性最小，但其抗菌方面研究空间仍较广阔。小檗碱药理研究较多，部分学者试图通过对小檗碱进行结构修饰以提高其抗菌活性，并取得一定成效，研究证实在小檗碱9位去甲基引入酰氧基或苯氧丁基，可增强其抗菌活性。但基团的引入对小檗碱抗菌活性提高不具有普遍性。 2.2 抗糖尿病作用 糖尿病是胰岛β细胞受损或完全破坏而不能正常代谢引起的疾病，血糖升高是糖尿病的主要症状。Hep G2细胞属于肝胚胎瘤细胞株，和人体肝细胞表型十分相似，βTC3细胞属于胰岛素瘤细胞株，具有分泌胰岛素功能。实验发现，小檗碱可促进Hep G2中葡萄糖消耗，且呈现明显的剂量依赖，在5～100μmol/l范围内，小檗碱作用量与细胞葡萄糖消耗量呈正相关，但不会影响细胞功能[5]。小檗碱还可通过降低醛糖还原酶活性改善糖尿病。实验研究证实黄连复合生物碱由于黄连生物碱的相互协同作用，可增进降糖效果，小檗碱降糖活性次之，黄连碱再次之，巴马汀最差。药物可能通过蛋白质磷酸化及其级联信号传导等多个靶位点，调控信号传导，触发胰岛素抵抗，进而降低血糖。 2.3 抗肿瘤作用 恶性肿瘤已成为死亡三大因素之一。研究发现，药根碱对黑色素瘤新生血管具有明显的抑制作用[6]。此外，含有小檗碱的黄连药材可作为食道癌治疗的药物之一。一项体外研究证实，小檗碱非毒性剂量可降低人肺癌细胞A549中的MMP-2、uPA水平，调节金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP-2）和尿激酶型纤溶酶原激活抑制剂（PAI）抑制肺癌细胞转移。在卷烟中添加黄连生物碱可使患者获益[7]。黄连中生物碱具有抗炎作用，可预防细胞突变。 2.4 抗心血管疾病 药用黄连用于治疗心脑血管病，对抗心力衰竭、抑制心肌炎、改善急性脑供血与供氧不足等疾病。小檗碱可调节心肌缺血、修正心衰，这可能与其作用于心肌周围阻碍血管，减少血液阻力，减轻心脏负荷有关。黄连解毒汤可改善脑部循环。药根碱具有明显的调脂作用，可上调LDLR蛋白表达，促进胆固醇转化为胆汁酸，提高胆汁酸排泄率，降低血胆汁酸含量。巴马汀可明显诱导巨噬细胞释放炎性因子NO，发挥抗炎作用。 3 小结 新药的研发并非一朝一夕之事，黄连中生物碱种类不多，但其药理学作用较复杂，体外研究、动物实验证实具有抗菌、抗炎、降血脂、降血糖、减肥、抗焦虑、抗肿瘤、保护胃黏膜等多种药理学作用，但对于临床研究仍较为肤浅。今后，应积极开展临床研究，结合临床实践研制相关衍生物，寻找更具有开创性、制剂意义的药理作用。 【参考文献】 [1] Manske R H F. The Alkaloids: Chemistry and Physiology, Vols. 1-20, New York, Academic Press, 1950-1979. [2]中华人民共和国卫生部药典委员会中华人民共和国药典[M]，化京:人民卫生出版化化学工业出版化2010, 285. [3]李亚娜，陶庆春.中药抑菌的研究现状及思考[J].国际检验医学杂志，2014， 35(2): 198-200.
中药质量标准制定范文
中药质量标准制定 目前我国新药的研制，明确要求制订临床研究用质量标准及生产用质量标准。目的是保证临床研究试验药品的质量稳定一致及上市药品的质量，从而保证药品的安全和有效。在新药取得批准文号后，其它研究资料的药效，毒理，临床研究资料均已完成历史使命，可存档备用，但唯有质量标准伴随产品“终身”。只要有药品生产，销售使用，就要用质量标准的监测和保证。因此，质量标准的制定，不仅在研制新药中，而且对老药再评价均具有相当重要的地位。 第一节质量标准的分类 一、法定标准 经过卫生部与省、市、自治区卫生行政部门批准的标准有国家标准（包括药典和部颁标准）及地方标准。国家标准对产品的质量指标是一些基本要求，是企业应达到的起码合格水平。鉴于目前中药标准一般水平不高，所以应认识到符合低标准的高合格率，并不表示产品先进，故质量标准必须逐步提高，特别是新药的质量必须具有国内先进水平，并真正已起到控制真伪、优劣的作用。 二、企业标准 一般有两种情况，一种为检验方法尚不够成熟，但能达到某种程度的质量控制；一种为高于法定标准要求，主要指多增加了检测项目或提高了限度标准，作为创优，企业竞争，特别是对保护优质产品本身，严防假冒等均为重要措施。 第二节质量标准的特性 质量标准通常具有如下特性： 一、权威性 药品必须符合国家药品标准或省、市、自治区药品标准，但国家均不排除生产厂可以采用非药典方法进行检测。例如：六味地黄丸的含量测定；药典收载了薄层色谱光密度法测定处方中山茱萸中熊果酸的含量，若企业暂无薄层色谱扫描仪，则可采用薄层色谱比色法与其对比，测定结果一致或有一定相关且稳定，在日常检验中即可采用比色法控制产品质量，但偶有产品含量处于合格边缘，或需要仲裁时，只有各级法定标准，特别是国家药典具有权威性。 二、科学性 质量标准是对具体对象研究的结果，它有适用性的限制。在药材中如天然朱砂的标
不同种类酒炮制黄连对生物碱类主要成分的影响
Advances in Analytical Chemistry 分析化学进展, 2016, 6(1), 14-19 Published Online February 2016 in Hans. https://www.docsj.com/doc/a77109765.html,/journal/aac https://www.docsj.com/doc/a77109765.html,/10.12677/aac.2016.61003 The Effects of Processing the Coptis chinensis Using Different Types of Wine on the Main Components of Alkaloids Kai Chen, Jianyong Yuan* College of Pharmacy, Chongqing Medical University, Chongqing Received: Jan. 30th, 2016; accepted: Feb. 22nd, 2016; published: Feb. 25th, 2016 Copyright ? 2016 by authors and Hans Publishers Inc. This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY). https://www.docsj.com/doc/a77109765.html,/licenses/by/4.0/ Abstract Objective: To compare the effect of different types of wine on the main compositions and contents of the alkaloids of Coptis chinensis. Methods: the main components of Wine rhizoma coptidis alkaloids and the contents of coptisine, jatrorrhizine, palmatine and berberine are determined by HPLC. Re-sults: After HPLC detection, peak number and retention time are consistent, but the content of total alkaloids varies in different degrees. After sorghum liquor 60? processing, the total alkaloids i n-crease most significantly. But after Jingjiu 35? processing, the total alkaloids reduce. Conclusion: The research finds that after sorghum processing, the content of total alkaloids increases most signifi-cantly and that the sorghum processing can provide evidence for choosing the auxiliary wine. Keywords HPLC, Alkaloids, Alcohol Coptis, Sorghum Liquor, Yellow Wine 不同种类酒炮制黄连对生物碱类主要成分 的影响 陈凯，袁建勇* 重庆医科大学药学院，重庆 *通讯作者。
讨论HPLC法测定黄连中生物碱的含量
讨论HPLC法测定黄连中生物碱的含量 引言 黄连为多年生毛茛科草本植物，药用部分主要取自黄连、三角叶黄连、峨嵋山野连或云连的根茎。野生黄连主要产于四川、云南、湖北，现今多采用荫棚栽培。秋季采挖，除去须根和泥沙，干燥。黄连作为临床常用药物，用于治疗湿热痞满、呕吐吞酸、泻痢、黄疸、高热神昏、心火亢盛、心烦不寐、血热吐衄、目赤、牙痛、消渴、痈肿疔疮;外治湿疹、湿疮、耳道流脓等。此外，黄连还具有很多药理作用譬如：抗病毒作用、抗阿米巴作用、抗炎、抗腹泻作用、对心血管作用、降血糖作用、降血脂作用、抗氧化作用、对血液系统的影响、抗溃疡作用。 由于黄连的种类与炮制方法都非常多，地理分布也比较广泛，因此作为药材它们的质量不易控制。黄连的主要药用成份生物碱的含量的准确测定对评价不同产地黄连与质量监控具有重要意义。黄连生物碱含量测定的方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、薄层扫描法(TLCS)与紫外分光光度法(UV)等，它也是一味具有广泛药效作用的中药，在国内外很多种疾病的治疗都用到了它，且黄连新的药效又不断被发现。尤其是其是在抗癌、降血糖和改善心脑血管功能等方面均具有较好的药效，越来越受到人们的重视，因此，对黄连进行深入研究，对黄连中的各种生物碱进行全面的分析，以开发生药资源，扩大其药效作用，将有很大的社会效益和广泛的开发前景。
1 实验部分 1.1 仪器与试剂 日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪、KQ-250DE型数控超声波清洗器、HH数显恒温水浴锅、上海博讯电热鼓风干燥箱GZX-9070MBE、BL电子分析天平FA2204N、容量瓶(10ml、25ml)、烧杯、玻璃棒、移液管、漏斗、微孔滤膜(0.45m)、移液枪;盐酸小檗碱化学对照品(中国药品生物制品鉴定所，批号：110713-200208)纯度为98%，黄连(味连、过120网目筛)、乙腈均为色谱纯，十二烷基硫酸钠、甲醇、磷酸二氢钾、磷酸、盐酸均为分析纯、水为蒸馏水。 1.2 对照品溶液的制备 对照品盐酸小檗碱在105℃下的烘箱中干燥至恒重，精密称取对照品约15.0mg，用甲醇溶解并定容到25.00ml，得对照品溶液的浓度为 0.06mgml-1。 1.3 供试品溶液的制备 精密称取黄连粉末样品(过120目筛，80℃干燥)约50mg，加盐酸-甲醇(1：100)溶液45ml，60℃水浴锅中温浸15min，超声处理(功率250W，频率40KHz)30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，用普通滤纸滤过，取滤液，用0.45m滤膜再次过滤，再定容与25ml容量瓶，即得供试品溶液。 1.4 液相色谱分析条件 液相色谱分析条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂;以乙腈、0.05molL-1磷酸二氢钾溶液(V：V=50：50;每100ml中加十
黄连质量标准
黄连质量标准 内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
目的 制定黄连质量标准，使之在购入、验收、使用、储存、放行过程中标准化、规范化，确保购入、验收、使用、储存、放行全过程有法可依。 适用范围 适用于黄连的购入、验收、使用、储存、放行。 责任 物控部、质量部、生产部。 内容
【物料名称】黄连 汉语拼音 Huanglian 英语名称 COPTIDIS RHIZOMA 【物料编码】310 【编制依据】《中国药典》2015年版（一部）P303 【性状】味连多集聚成簇，常弯曲，形如鸡爪，单支根茎长3～6cm,直径～。表面灰黄色或黄褐色，粗糙，有不规则的结节状隆起、须根及须根残基，有的节间表面平滑如茎秆，习称“过桥”。上部多残留褐色鳞叶，顶端常留有残余的茎或叶柄。质硬，断面不整齐，皮部橙红色或暗棕色，木部鲜黄色或橙黄色，呈放射状排列，髓部有的中空。气微，味极苦。 雅连多为单支，略呈圆柱形，微弯曲，长4～8cm，直径～1cm。“过桥”较长。顶端有少许残茎。 云连弯曲呈钩状，多为单支，较细小。 【鉴别】（1）本品横切面：味连木栓层为数列细胞，其外表有皮，常脱落。皮层较宽，石细胞单个或成群散在。中柱鞘纤维成束或伴有少数石细胞，均显黄色。维管束外韧型，环列。木质部黄色，均木化，木纤维较发达。髓部均为薄壁细胞，无石细胞。 雅连髓部有石细胞。 云连皮层、中柱鞘及髓部均无石细胞。 （2）取本品粉末,加甲醇25ml,超声处理30分钟，滤过，取滤液作为供 试品溶液。另取黄连对照药材,同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015版四部通则0502）试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一硅 胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水-三乙胺（3::1:::1）为 展开剂，置用浓氨试液预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫 外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显
黄连生物碱的提取纯化及降脂作用
黄连生物碱的提取纯化及降脂作用 侯 宏1,李学刚1*,李 平2,王小华2,冯 平2 (1.西南大学药学院,重庆400715;2.重庆北碚区中医院,重庆400700) 摘要 目的:提取纯化黄连主要生物碱并研究其降脂作用。方法:采用乙醇浸泡、加酸加碱及大孔吸附树脂提取总生物碱,用萃取、柱层析及重结晶分离黄连生物碱。以高脂饲料喂养鹌鹑建立高脂模型,观察各用药组对鹌鹑血清TC 、TG 、LDL -C 及HDL -C 影响。结果:小檗碱、黄连碱及巴马汀有明显降低TC 、LDL -C 水平的作用。结论:小檗碱、黄连碱及巴马汀有明显降脂作用。 关键词 黄连生物碱;提取;纯化;血脂;鹌鹑 中图分类号 R28511 文献标志码 A 文章编号 1007-4813(2011)01-0007-02 基金项目:重庆市科委攻关项目(CSTC 2010AC5007);科技部重大新药创制课题(2010ZX09401-306-3-10)。 作者简介:侯 宏(1986-),女,硕士研究生。研究方向:天然产物化学。*通信作者:李学刚,博士研究生导师。E -mail:xuegangli2000@https://www.docsj.com/doc/a77109765.html, 黄连为毛茛科植物黄连Co ptis chinensisFranch ,三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao 或云连Coptis teeta wall.的干燥根茎。其活性成分为原小檗碱型生物碱,主要包括盐酸小檗碱、黄连碱、巴马汀 及总生物碱。研究[1-5]表明,黄连有抗菌、抗病毒、抗心律失常、抗肿瘤、降血糖及降血脂等作用。黄连提 取纯化方法很多,有水提、醇提以及柱层析纯化 等[6-8],本实验采用乙醇结合酸溶碱沉的方法提取生物碱并再进一步纯化,在降血脂方面研究提供依据。1 材料 111 药材和试剂 黄连采自重庆石柱黄连GAP 基地;柱层析硅胶D101大孔树脂、乙醇、硫酸、Ca(OH )2(成都科隆试剂公司);脂脉康胶囊(12粒@3板/盒,批号20090502,国药准字ZI4020737,山西安特生物制药股份有限公司);胆固醇(安徽天启化工科技有限公司,纯度\9218%)。猪油、鲁花花生油(超市购买),总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL -C)、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL -C)测定试剂盒(南京建成生物研究所)。 112 主要仪器 RE -52AA 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHZ -D(ó)循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂);TG16-W 微量高速离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司);E OSBRAVO 全自动生化分析仪。113 动物 鹌鹑,雌雄各半,2个月龄,体质量(130?20)g,购于重庆万盛鹌鹑养殖场。 2 方法和结果 211 提取和分离 黄连干燥根茎(10kg)粉粹,95%乙醇浸泡24h 过滤,倒出滤液,反复3次,合并滤液, 减压浓缩得浸膏2000g,通过预实验,浸膏采用5倍 量的015%H 2SO 4溶解,放置2h,再加Ca(OH)2调pH 值9~10,然后其将一部分加入装有D101大孔树脂的柱中,先用蒸馏水洗至无色,再用95%乙醇以2B V/h 洗脱,收集洗脱液,减压浓缩得总生物碱的量;另一部分用氯仿、正丁醇萃取,其中取正丁醇萃取物上硅胶柱色谱,并利用重结晶手段,得到化合物小檗碱、黄连碱及巴马汀。212 黄连生物碱对血清TC 、TG 、LDL -C 及HDL -C 的影响 选用健康鹌鹑70只用普通饲料适应性喂养1周,随机分为7组:正常对照组,模型组,脂脉康组(460mg/kg,按人用量通过体表面积折算)及小檗碱、黄连碱、巴马汀、总生物碱组(剂量100mg/kg,根据前期血脂实验研究所得)。除正常组喂普通饲料外,其余各组喂高脂饲料(79%普通饲料+14%猪油+6%花生油+1%胆固醇)[9-10] 。于实验开始后第4周禁食12h,颈静脉取血1mL,分离血清,利用全自动生化分析仪测定血清中TC 、TG 、LDL -C 、HDL -C 。结果用均数?标准差( x ?s )表示,并进行t 检验,见表1。 结果显示,用高脂饲料连续喂养鹌鹑4周后血清TC 、LDL -C 、HDL -C 与正常组相比明显升高,表明造模成功;与模型组相比,所有药物组均可以降低鹌鹑血脂指标,其中,小檗碱、黄连碱、巴马汀可明显降低血清TC,差异有统计学意义,但总生物碱降TC 效果不明显,均可明显降TG,差异有统计学意义,在一定程度上药物组均可提高HDL -C,但差异无统计学意义。黄连碱降血脂指标最明显。 ) 7)