DIC 微分干涉差显微镜原理

微分干涉差显微镜(differential interference contrast )又称Nomarski相差显微镜，其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比，标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。

微分干涉差显微镜利用的是偏振光，这些光经棱镜折射后分成两束，在不同时间经过样品的相邻部位，然后在经过另一棱镜将这两束光汇合，从样品中厚度上的微小区别就会转化成明暗区别，增加了样品反差并且具有很强的立体感。

微分干涉显微镜能使细胞核及较大的细胞器如线粒体等具有较强的立体感，比较适合于显微操作。目前多用于基因注入、核移植、转基因动物等生物工程的显微操作。将微分干涉差显微镜接上录象机，可以观察活细胞中的颗粒及细胞器的运动。

这些薄膜与周围的水介质之间的折射率差异非常小，用普通的光学显微镜来成像显得捉襟见肘；然而DIC利用的是偏振光，这些光经棱镜折射后分成两束，在不同时间经过样品的相邻部位，然后在经过另一棱镜将这两束光汇合，从样品中厚度上的微小区别就会转化成明暗区别，增加了样品反差并且具有很强的立体感，从而实现清晰的成像。

德国物理学家Sauerbrey通过大量的研究发现厚度剪切压电石英晶体的谐振频率变化Δf与在晶体表面均匀吸附的刚性物的质量Δm之间存在着比例关系，他在1959年给出了Sauerbrey 方程：

式中f为晶体的固有谐振频率，又叫基频率, ( Hz), m 为晶体表面涂层质量(g), △ f 为晶体谐振频率的变化量，A为涂层面积(cm2)。

流式细胞仪：

粒子折射激光产生光信号。散射光不依赖任何细胞样品的制备技术，因此被称为细胞的物理特性，即细胞的大小和内部结构。散射光与细胞膜，核膜以及细胞结构的折射性、颗粒性密切相关，细胞形状和表面形貌也对其产生影响。前向角散射（FSC）光宇被测细胞的大小和面积有关，检测的是激光束照射方向宇手机散射光信号的光电倍增轴向方向的散射光信号。FSC不受细胞荧光染色的影响，常用于免疫表型分析的信号处理。侧向角散射（SSC）光宇被测细胞的颗粒密度和内部结构有关，对细胞膜、胞质和核膜的折射率更为敏感。SSC收集与激光束正交90度方向的散射光信号。图3-21细胞的光散射特性上述两种信号都是来自于激光源光束，目前采用这两个参数组合，可区分不同种类的细胞亚群，同时可获得细胞相关的重要信息，下图（图3-2）为FSC和SSc组成的二维散点图，从图中可以很容易的把全

血样本中淋巴细胞、单核细胞及粒细胞区分开。

各种显微镜下的细胞图像整理(含出处)

1.从科研文献中找出各类显微镜的细胞图像，截图说明图像科学含义，并列出参考文献 一.普通光学显微镜 细胞生物学杂志第26卷第3期 水稻原生质体细胞核及原生质体融合体的简易染色观察法 向太和* , 王利琳 ( 杭州师范学院生命科学学院, 杭州3 1 0 0 3 6 ) 二.暗视野显微镜 微生物学报ActaMicrobiologicaSinica 50(10) :1366 －1372; 4 October 2010 ISSN 0001 －6209; CN 11 －1995 /Q 分离自蜜蜂(Apismellifera)的三株螺原体的基本特性 回丽静，钟志平，胡冰，杨冰，纪燕玲，于汉寿* (南京农业大学，农业部环境微生物工程重点开放实验室，南京210095)

三.荧光显微镜 中华医院感染学杂志2010 年第20 卷第11期 乙胺丁醇耐药基因embB突变的杂交荧光显微观测 陈庆海1 , 黄君富1 , 府伟灵1 ,张雪2 , 匡红1 , 王珂1 ( 1.第三军医大学第一附属医院检验科, 重庆400038; 2.解放军第452医院检验科, 四川成都610021) 四.激光共聚焦显微镜

激光生物学报第16卷第1期2007年2月 不同应变对骨髓间充质干细胞系细胞骨架影响的研究* 赵红斌1, 2, 张西正1*, 吴金辉1, 郭勇1, 毛雁1 (1 .军事医学科学院卫生装备研究所, 天津300161;2 . 兰州军区总医院, 甘肃兰州730050 ) 五.相差显微镜 华西口腔医学杂志第28 卷第 4 期2010 年8 月West China Journal of Stomatology Vol．28 No.4 Aug.2010 小鼠增强型绿色荧光蛋白-过氧化物酶体增长因子活化受体γ2融合表达重组腺病毒的构建

光学显微镜的原理及构造

光学显微镜的原理及构造显微镜是人类认识物质微观世界的重要工具，是现代科学研究工作不可缺少的仪器之一。显微镜自1666年问世以来已有300多年的历史了，其间随着科学技术不断发展，显微镜的品种不断增加，结构和性能逐步得到完善和提高。 根据不同的使用用途，光学显微镜可分为普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、体视显微镜、偏光显微镜等10多种。目前，世界上许多国家都可以生产光学显微镜，牌名、种类繁杂，其中德国、日本等国制造的显微镜品质、数量占优势，但价格昂贵。 对于现代的光学显微镜，包括各种简单的常规检验用显微镜、万能研究以及万能照相显微镜等，首先要认识其构造及各部件的功能，同时要掌握正确的调试、使用和保养方法，才能在实际应用中面对各种要求时以不同的显微镜检方法，充分发挥显微镜应有的功能，提高常规检验工作效率. 光学显微镜的原理和构造 随着科学技术的发展，显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法；荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发，使荧光效率大为提高；微分干涉相衬方法基于偏光方法，而巧妙地利用了微分干涉棱镜，使之能应用于医学与生物学的样品，又能应用于金相样品的分析与检验。 下面以德国ZEISS公司生产的Axioplan万能研究用显微镜，简单介绍万能显微镜的基本组成部件。 1. 显微镜主机体（stand）　显微镜的主机体设计成金字塔形，而底座的截面呈T字形，使显微镜的整体相当稳固。显微镜的光学部件和机构调节部件、光源的灯室、显微照相装置、电源变压稳压器等，都可安装在主机体上或主机体内。 2. 显微镜的底座（base）　底座和主机体通常组成一个稳固的整体。底座内通常装有透射光照明光路系统（聚光、集光和反光）部件，光源的滤光片组，粗/微调焦机构，光源的视场光阑也安装在底座上。 3. 透射光光源（tranilluminator）　透射光光源由灯室（lamp housing）、灯座（lamp socket）、卤素灯（halogen lamp）、集光与聚光系统（lamp collector and lamp condenser）及其调整装置组成。 4. 透射光光源与反射光光源的转换开关（toggle switch）　这是新一代AXIO系列显微镜特有的装置，透射光和反射光可通用。当具有透/反两用的配置时，利用这一转换开关能方便而又迅速的使透射光 和反射光互相转换。在纯透射光的配置中，这一开关就改为电源开关。

微分干涉相衬法在材料显微分析中的应用

微分干涉相衬法在材料显微分析中的应用 陈祥，宋晋生，李言祥 (清华大学机械工程系，北京100084) 摘要: 微分干涉相衬法(DIC) 作为一种极具前途的分析检验方法，具有对金相样品的制备要求较低，所观察到的样品各组成相间的相对层次关系突出，呈明显的浮雕状，对颗粒、裂纹、孔洞以及凸起等能作出正确的判断，能够容易判断许多明场下所看不到的或难于判别的一些结构细节或缺陷，可进行彩色金相摄影等优点。但在目前的金相检验工作中，DIC 法还利用得很少。本文简单介绍了微分干涉相衬的基本原理，并结合计算机金相图像分析介绍了DIC法在金属材料显微金相分析中的应用。 关键词: 微分干涉相衬法；DIC；显微分析；图像分析 在现代金相显微镜检验方法中，微分干涉相衬法(DIC) 是一种极具前途的分析检验方法，是金相检验的一种强有力的工具，其特点主要为: (1) 对金相样品的制备要求降低，对于某些样品，甚至只需抛光而不必腐蚀处理即可进行观察。优点是可以观察到样品表面的真实状态，如将试样抛光后在真空下发生马氏体相变，不用腐蚀就可以观察到马氏体的相变浮凸； (2) 所观察到的表面具有明显的凹凸感，呈浮雕状，样品各组成相间的相对层次关系都能显示出来，对颗粒、裂纹、孔洞以及凸起等都能作出正确的判断，提高了金相检验准确性，同时也增加了各相间的反差； (3) 用微分干涉相衬法观察样品，会看到明场下所看不到的许多细节，明场下难于判别的一些结构细节或缺陷，可通过微分干涉进行反差增强而容易判断； (4) 微分干涉相衬法基于传统的正交偏光法，又巧妙地利用了在渥拉斯顿棱镜基础上改良的DIC 棱镜和补色器(λ- 片) 等，使所观察的样品以光学干涉的方法染上丰富的色彩，从而可利用彩色胶卷或者数码产品(CCD 摄像头以及数码相机) 进行彩色金相显微摄影。由于微分干涉相衬得效果与样品细节的浮雕像以及色彩都是可以调节的，因而比正交偏光更为优越。 微分干涉相衬法在生物医学领域得到了广泛的重视，然而，到目前为止从发表的有关材料金相研究的论文中，国内外基于微分干涉相衬法进行材料金相研究的工作开展得很少。其原因主要有两个方面:一方面是由于配备微分干涉相衬部件的金相显微镜不是很多；另一方面，许多材料科学工作者还没有意识到微分干涉相衬法在材料研究中的优势。 本文基于Neophot32 大型光学金相显微镜，介绍了微分干涉相衬法的基本原理，并结合计算机图像分析在材料金相检验中进行了应用(本文中所有金相组织图像均由清华大学机械工程系开发的金相图像分析 软件采集) 。

显微镜原理与构造

随着科学技术的发展，显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法；荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发，使荧光效率大为提高；微分干涉相衬方 法基于偏光方法，而巧妙地利用了微分干涉棱镜，使之能应用于医学与生物学的样品，又 能应用于金相样品的分析与检验。 下面以德国ZEISS公司生产的Axioplan万能研究用显微镜，简单介绍万能显微镜的基 本组成部件。 1. 显微镜主机体（stand）显微镜的主机体设计成金字塔形，而底座的截面呈T字形，使显微镜的整体相当稳固。显微镜的光学部件和机构调节部件、光源的灯室、显微照相装置、电源变压稳压器等，都可安装在主机体上或主机体内。 2. 显微镜的底座（base）底座和主机体通常组成一个稳固的整体。底座内通常装有 透射光照明光路系统（聚光、集光和反光）部件，光源的滤光片组，粗/微调焦机构，光源的视场光阑也安装在底座上。 3. 透射光光源（tranilluminator）透射光光源由灯室（lamp housing）、灯座（lamp socket）、卤素灯（halogen lamp）、集光与聚光系统（lamp collector and lamp condenser）及其调整装置组成。 4. 透射光光源与反射光光源的转换开关（toggle switch）这是新一代AXIO系列显 微镜特有的装置，透射光和反射光可通用。当具有透/反两用的配置时，利用这一转换开关能方便而又迅速的使透射光和反射光互相转换。在纯透射光的配置中，这一开关就改为电 源开关。 5. 电源开关（mains switch）与亮度调节旋钮（brightness control）电源开关用 来接通或切断显微镜所需用的交流电源。电源开关旋钮也可调节照明光源的亮度，使所观 察的视域可随时获得适当的亮度，可调范围为3-12V。作显微照相时，可根据曝光以及彩 色底片色温的要求来调节灯光的亮度。当准备关掉电源之前，应先将亮度调节旋钮调到最小。 6. 粗、微调焦旋钮（coaxial coarse/fine focusing controls）调焦旋钮转动时带 动燕尾导板上下移动，而导板上则装有物台托架和聚光镜托架，从而使物台趋向或远离物 镜达到调焦的效果。 7. 透射光用的滤光片选择按钮（push buttons for filter magazine）透射光显微 镜检方法所需用的一组滤光片已安装在显微镜的底座内，通过底座外的按钮就可以根据不 同的需要来选择适用的一块或一组滤光片。通常的滤光片配套有： (1) 蓝色色温转换滤光片：用来把光源的色温由3200K转换成日光型彩色底片所需 的5500K色温； (2) 绿色滤光片：用来增强相差观察方法中成像的反差，或者以黑白底片作显微照相时，可以提高片成像的反差；

微分干涉原理

微分干涉原理 在材料显微分析如何使用微分干涉相衬法微分干涉相衬法(DIC)作为一种极具前途的分析检验方法，具有对金相样品的制备要求较低，所观察到的样品各组成相间的相对层次关系突出，呈明显的浮雕状，对颗粒、裂纹、孔洞以及凸起等能作出正确的判断，能够容易判断许多明场下所看不到的或难于判别的一些结构细节或缺陷，可进行彩色金相摄影等优点。但在目前的金相检验工作中，DIC法还利用得很少。 在金相显微镜检验方法中，微分干涉相衬法(DIC)是金相检验的一种强有力的工具，其特点主要为: 1、对金相样品的制备要求降低，对于某些样品，甚至只需抛光而不必腐蚀处理即可进行观察。优点是可以观察到样品表面的真实状态，如将试样抛光后在真空下发生马氏体相变，不用腐蚀就可以观察到马氏体的相变浮凸。 2、所观察到的表面具有明显的凹凸感，呈浮雕状，样品各组成相间的相对层次关系都能显示出来，对颗粒、裂纹、孔洞以及凸起等都能作出正确的判断，提高了金相检验准确性，同时也增加了各相间的反差。 3、用微分干涉相衬法观察样品，会看到明场下所看不到的许多细节，明场下难于判别的一些结构细节或缺陷，可通过微分干涉进行反差增强而容易判断。 4、微分干涉相衬法基于传统的正交偏光法，又巧妙地利用了在渥拉斯顿棱镜基础上改良的DIC 棱镜和补色器(λ-片)等，使所观察的样品以光学干涉的方法染上丰富的色彩，从而可利用彩色胶卷或者数码产品(CCD 摄像头以及数码相机)进行彩色金相显微摄影。由于微分干涉相衬得效果与样品细节的浮雕像以及色彩都是可以调节的，因而比正交偏光更为优越。微分干涉相衬法在生物医学领域得到了广泛的重视，然而，到目前为止从发表的有关材料金相研究的论文中，国内外基于微分干涉相衬法进行材料金相研究的工作开展得很少。其原因主要有两个方面:一方面是由于配备微分干涉相衬部件的金相显微镜不是很多；另一方面，许多材料科学工作者还没有意识到微分干涉相衬法在材料研究中的优势。 一、微分干涉相衬法的基本原理： 1、微分干涉相衬法所需部件：起偏器、检偏器、微分干涉相衬组件插板(DIK组件插板)，以及补色器(λ- 片)。起偏器和检偏器是在对金相样品进行正交偏振光观察中必不可少的基本配套部件，组装在明/暗场照明组件中，也是微分干涉相衬法必不可少的部件。起偏器是把光源变为按东- 西方向振动的线偏振光；检偏器可以使满足干涉条件的相干光进行干涉。DIK组件插板是微分干涉相衬法的核心部件，其上装配有以渥拉斯顿棱镜为基础改良后的DIC棱镜。DIK组件插板上有两个调节旋钮，其中较大的一个用来调节组成DIC棱镜的两个棱镜间的相对位置，使其厚度产生微小的改变从而引起光程或光程差的微小变化，产生明显的干涉相衬效果；较小的一个用来调节DIC棱镜的高低位置，以配合不同倍数物镜后焦平面位置上的差异，从而确保DIC观察视场中能获得均匀的照明。补色器(λ- 片) 由石膏制成，插在线偏振光的照光路中用以增加一个光波波长约550nm的光程差，使干涉级序升高一级，保证视野中样品的不同组织细节获得丰富的色彩，从而利于金相组织的观察和分析。 2、微分干涉相衬的基本原理：微分干涉相衬法的基本原理如图1所示。由光源出射的照明光经起偏器后变为东-西方向振动的线偏振光，第一次进入DIC棱镜内部时分为寻常光(o光)

显微镜基础知识问答

Q：什么是数值孔径NA？ A：数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数，是判断两者（尤其是对物镜而言）性能高低的重要标志。数值孔径越高，分边率越高，焦深则越小。 Q：是否可以在无限远光学系统上使用有限远筒长的物镜？ A：您可能能够将物镜拧上物镜转盘，但由于无限远光学系统光路上的结像透镜的关系，使用有限远系统的物镜不能得到最佳的图像。 Q：是否可以在有限远筒长的显微镜上使用无限远系统的物镜？ A：不能。因为像有限远光学系统不包含可使平行光路聚焦在目镜光栏面的结透镜。 Q：相差物镜是否可以用于其他观察方法? A：是的，可以。仅需移动相差聚光镜到“0”位置同时使用柯勒照明。相差物镜在其后焦平面上有相板，但是大部分光不受这个相板的影响。因此，对图像质量仅有轻微的影响，对明场图像依然有用。Ol ympus制造的相差物镜还可应用于荧光观察。 Q：相差物镜上标记的Ph1、Ph2、Ph3是什么意思？ A：相差物镜要配合安装在聚光镜的环状光阑来使用。光阑的直径要与物镜的NA值相匹配。Olympu s UIS的物镜，Ph1表示物镜的NA值不超过0.50；Ph2表示NA值在0.55至1.0之间；Ph3表示N A值大于1.0（油镜）。长工作距离的物镜使用专用的相差环。 Q：是否可以为视频显微方法选择高NA值的物镜观察微小标本的细节？ A：是的，可以。当您通过目镜观察时眩光可能图像的细节变暗，但必要的信息往往包含在其中，那么视频增强技术可以处理这些信息并且获得极好的视频图像。 Q：是否应该购买我所能买得起的最好的物镜？ A：通常是这样的，但不总是。如果你所观察的标本的厚度有几个微米，平场消色差或平场半复消色差物镜就很好了，因为比起平场复消色差物镜有更好的焦深。如果用于彩色照相，平场半复消色差比平场消色差物镜得到的图像要好。平场复消色差物镜在微小细节上可以得到极好的观察和照相的效果，但往往要花费比平场半复消色差物镜高几倍的价格。 Q：如何避免在滴油时损伤40倍的干式物镜？ A：如果您经常使用100倍的油镜，您可能想用50倍的油镜来替换掉40倍的干镜。50倍的平场消色差油镜（NA0.90）比标准的40倍平场消色差或消色差干镜（NA 0.65）得到更加明亮的图像,更好的清晰度。 Q：如何减少在40倍干镜上沾上香柏油？ A：当您在转换40倍干镜和100倍油镜时，尽量避免40倍的干镜浸到油上。实验室经常将这两款物镜装在相对的方向上 Q：为什么有时候40倍的物镜成象效果比20倍差？ A：当标本的厚度大于标准厚度0.17MM，或在盖玻片上有其他物质。为了改善成象效果，您可以用带校正环干式物镜，或用40倍和50倍的油镜来取代40倍的干式物镜，因为油浸物镜对盖玻片厚度

光学显微镜的常用分类

光学显微镜的常用分类 光学显微镜有多种分类方法：按使用目镜的数目可分为双目和单目显微镜；按图像是否有立体感可分为立体视觉和非立体视觉显微镜；按观察对像可分为生物和金相显微镜等；按光学原理可分为偏光、相衬和微差干涉对比显微镜等；按光源类型可分为普通光、荧光、紫外光、红外光和激光显微镜等；按接收器类型可分为目视、数码（摄像）显微镜等。所以在选购显微镜前，一定要确定哪种显微镜适合自己。常用的光学显微镜有生物显微镜、体视显微镜、金相显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、相衬显微镜、倒置显微镜等。 1、生物显微镜 生物显微镜放大倍数一般在40X-2000X之间,光源为透射光。生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察，同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛，是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证的必备检验设备。 2、体视显微镜 体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜，是一种具有正像立体感的目视仪器。体视显微镜放大倍数在7X-45X左右,也可以放大到90X,180X,225X。在生物、医学领域广泛用于切片操作和显微外科手术；在工业中用于微小零件和集成电路的观测、装配、检查等工作。它利用双通道光路，双目镜筒中的左右两光束不是平行，而是具有一定的夹角--体视角（一般为12度--15度），为左右两眼提供一个具有立体感的图像。它实质上是两个单镜筒显微镜并列放置，两个镜筒的光轴构成相当于人们用双目观察一个物体时所形成的视角，以此形成三维空间的立体视觉图像。 目前体视显微镜的光学结构是由一个共用的初级物镜，对物体成象后的两光束被两组中间物镜----变焦镜分开，并成一体视角再经各自的目镜成象，它的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得的，因此又称为连续变倍体视显微镜。随着应用的要求，目前体视显微镜可选配丰富的选购附件，如荧光，照相，摄象，冷光源等等。

几种显微镜的区别

荧光显微镜 小广告O(∩_∩)O~川大细胞425297250 1.荧光技术 （1）荧光原理 荧光分子吸收入射光能量后，电子由基态跃迁到激发态。激发态电子不稳定，会自发跃迁回基态，并辐射荧光。辐射荧光λ＜入射光λ。 （2）荧光探针 ①荧光素如：罗丹明B ②荧光蛋白如：绿色荧光蛋白（GFP） （3）荧光分类 ①自发荧光：如叶绿素、血红素等荧光分子经紫外线照射后，能够自发辐射红色荧光。 ②诱发荧光：物质经荧光染料染色后，再经紫外线照射，进而辐射荧光。 2.荧光显微镜 （1）荧光显微镜概述 荧光显微镜是指利用短波长电磁波为光源，激发样品辐射荧光，之后利用样品产生的自发荧光或诱发荧光，对细胞内特异性蛋白质进行定性与定位研究的装置。 （2）荧光显微镜的特殊构件 ①石英透镜 ②滤光片系统 激发滤片，位于光源与样品之间，滤过可见光，只允许作为光源的紫外光通过。 阻断滤片，位于物镜与目镜之间，只允许荧光分子产生的荧光通过。 （3）荧光显微镜的特点 ①优点：荧光显微镜主要用于定性、定位研究细胞内特异性蛋白质。可以观察活细胞。 ②缺点：无法排除来自样品焦平面以外的荧光，使得图像的反差与分辨率降低。 3.激光扫描共焦显微镜 （1）激光扫描共聚焦显微镜概述 激光扫描共焦显微镜是指以激光为光源，对样品进行逐点、逐行、逐面扫描成像的装置。其物镜与聚光镜共焦点，以提高分辨率。通过调节焦平面即可获得样品不同层次的图像，通过计算机分析和模拟，可以构筑样品的三维图像。 （2）激光扫描共焦显微镜的成像原理 ①光源为激光，经双色镜反射后，通过物镜汇聚于样品某一焦点，激发荧光。样品所激发的荧光经透镜汇聚成像，通过共焦小孔被检测器检出。 ②物镜与聚光镜共焦点，使得只有从样品焦平面发出的荧光聚焦成像，其他部分的激发荧光不能通过共焦小孔，检测器不能检出。 （3）激光扫描共焦显微镜的特点 ①分辨率比普通荧光显微镜提高1.5倍。 ②通过改变焦平面，可以获得样品不同层次的图像，从而可以构筑样品的三维图像。 ③可以实现长时间活细胞动态观察。

显微镜介绍与感想

科学技术史论文题目：显微镜的原理及应用 系别：政治学与行政学 班级：1班 姓名：王瑞芳 学号：2010183124 日期：2011-11-26

显微镜的应用及原理 摘要：显微镜是一种既古老又年轻的科学工具，从诞生至今，已有三百年的历史显微镜的用途十分广泛，例如在生物学中，化学中，物理学中，天文等等在一些科研工作中都是离不开显微镜。以及从人体到植物纤维等各种东西的内部构造。显微镜的种类有很多，同时显微镜的原理不尽相同，应用的方面也有不同，但是相同的是显微镜把一个全新的世界展现在人类的视野里。人们第一次看到了数以百计的“新的”微小动物和植物，显微镜带领人们走进微观世界。对人类历史的发展起了重大作用。 关键词：显微镜原理应用影响 显微镜在科研技术中发挥着重大作用，目前，几乎成了科学技术的形象代言，你只需看媒体上有关科学技术的报道中频频出现其身影，便可见此言之不谬也。 显微镜，即将微小物体或物体的微细部分高倍放大，以便观察的仪器或设备。它广泛应用于工农业生产及科学研究。生物学和医学工作者在业务中也经常使用显微镜。大致分为光学显微镜和电子显微镜。 光学显微镜有很多种，下面介绍主要光学显微镜的原理：1．双目体视显微镜 双目体视显微镜又称"实体显微镜"或"解剖镜"，是一种具有正象立体感地目视仪器。在生物、医学领域广泛用于切片操作和显微外科手术；在工业中用于微小零件和集成电路的观测、装配、检查等工作。它利用双通道光路，双目镜筒中的左右两光束不是平行，而是具有一定的夹角--体视角（一般为12度--15度），为左右两眼提供一个具有立体感的图像。它实质上是两个单镜筒显微镜并列放置，两个镜筒的光轴构成相当于人们用双目观察一个物体时所形成的视角，以此形成三维空间的立体视觉图像。 2．金相显微镜 金相显微镜是专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。这些不透明物体无法在普通的透射光显微镜中观察，故金相和普通显微镜的主要差别在于前者以反射光，而后者以透射光照明。在金相显微镜中照明光束从物镜方向射到被观察物体表面，被物面反射后再返回物镜成像。这种反射照明方式也广

显微镜的发明与应用

显微镜的发明与应用 最早的显微镜出现在16世纪末。据载，1590年的某日，荷兰朱德尔堡的眼镜商汉斯·简森（Hans Jansen）在自己的店铺里观看儿子查卡里亚斯·简森（Zacharias Jansen,1580-1638）玩弄透镜。当他偶然将两块大小不同的透镜重叠在适当的距离时，可以见到远处钟楼的景象，并且增大了许多，他们惊异极了。老简森以一个商人的敏感性，试将一块凹透镜与一块凸透镜分别装在一根直径1英寸、长1 英尺半的铜管的两端，世界上第一台原始的显微镜便诞生了，它的放大倍数约为8-12倍。于是老简森开始将此“幻镜”出售给市人。后来，简森的邻居眼镜商里伯度将此镜奉献给荷兰政府作战争的武器，从而使整个欧洲知道了望远镜。 将显微镜用于科学研究，是17世纪的事。最早将显微镜用于科学研究工作的人，应说是伽利略。1609年伽利略访问威尼斯，听到有关望远镜的消息，他返回帕多瓦后，即自行研制望远镜用于天文学的研究，并取得了许多成就。他也试图研究制造显微镜，却远没有望远镜成功，因为放大倍数太小，应用价值不大。意大利人马尔皮基（Marcello M,1628-1694）首先把显微镜用于生物物体组织结构的观察，是组织学、胚胎学的先驱。他于1661年发表通过显微镜研究得到的最初成果，证实了毛细血管的存在，这一发现填补了哈维血液循环学说的空白，使之更为完整。英国科学家虎克（Robert hooke,1635-1702）是科学实验仪器的发明家与制造家，他于1665年出版了《显微镜学》（Micrographies），公布了他的研究成果，

他制成可放大140倍的显微镜，并改进了显微镜的采光法，但他对生物学的贡献不大。荷兰科学家雷文虎克（Leeuwenhoek Anton van,1632-1723）是一位体魄强健、性格坚定、目光敏锐，而又具有永不满足的好奇心与锲而不舍的进取精神的长寿学者，在他90多年的生涯中，对显微镜的研究表现出极大的热情。他制造及收集了250多个显微镜和400多个透镜，最高可放大200-300倍。他还应用显微镜进行许多精细的观察，如对肌肉组织和精子活动的观察，对微生物和红细胞的观察，并阐明了毛细血管的功能，补充了红细胞形态学研究等。 总之，显微镜发明于16世纪末，而于17世纪始应用于科学研究中，它大大扩充了人类的视野，把人类的视觉从宏观引入到微观，了解到动物体内的细微结构，给医学界以极大的帮助，直接导致了19世纪细胞学、微生物学等学科的建立。 光学显微镜的发明过程 显微镜的发明者 房屋是用一块块砖石砌成的,植物体是由许多细胞组成的.所以说,细胞是构成植物体的基本单位.既然如此.那就让我们先从细胞讲起吧。在丰富多彩的生物世界里,要想探索生物体内的奥秘,必须借助于显微镜.就说咱们现在要研究的细胞吧,离开显微镜能行吗当然不行，那么，显微镜是谁先发明的呢让我们顺着历史的脚步,在科学史的画卷中,进行一番考证吧.提起显微镜的发明,那可是怪有趣味的!

微分干涉显微镜工作原理完整版

微分干涉显微镜工作原 理 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

微分干涉显微镜工作原理 在材料显微分析如何使用微分干涉相衬法微分干涉相衬法(DIC)作为一种极具前途的分析检验方法，具有对金相样品的制备要求较低，所观察到的样品各组成相间的相对层次关系突出，呈明显的浮雕状，对颗粒、裂纹、孔洞以及凸起等能作出正确的判断，能够容易判断许多明场下所看不到的或难于判别的一些结构细节或缺陷，可进行彩色金相摄影等优点。但在目前的金相检验工作中，DIC法还利用得很少。 在金相显微镜检验方法中，微分干涉相衬法(DIC)是金相检验的一种强有力的工具，其特点主要为: 1、对金相样品的制备要求降低，对于某些样品，甚至只需抛光而不必腐蚀处理即可进行观察。优点是可以观察到样品表面的真实状态，如将试样抛光后在真空下发生马氏体相变，不用腐蚀就可以观察到马氏体的相变浮凸。 2、所观察到的表面具有明显的凹凸感，呈浮雕状，样品各组成相间的相对层次关系都能显示出来，对颗粒、裂纹、孔洞以及凸起等都能作出正确的判断，提高了金相检验准确性，同时也增加了各相间的反差。 3、用微分干涉相衬法观察样品，会看到明场下所看不到的许多细节，明场下难于判别的一些结构细节或缺陷，可通过微分干涉进行反差增强而容易判断。 4、微分干涉相衬法基于传统的正交偏光法，又巧妙地利用了在渥拉斯顿棱镜基础上改良的DIC 棱镜和补色器(λ-片)等，使所观察的样品以光学干涉的方法染上丰富的色彩，从而可利用彩色胶卷或者数码产品(CCD 摄像头以及数码相机)进行彩色金相显微摄影。由于微分干涉相衬得效果与样品细节的浮雕像以及色彩都是可以调节的，因而比正交偏光更为优越。微分干涉相衬法在生物医学领域得到了广泛的重视，然而，到目前为止从发表的有关材料金相研究的论文中，国内外基于微分干涉相衬法进行材料金相研究的工作开展得很少。其原因主要有两个方面:一方面是由于配备微分干涉相衬部件的金相显微镜不是很多；另一方面，许多材料科学工作者还没有意识到微分干涉相衬法在材料研究中的优势。 一、微分干涉相衬法的基本原理： 1、微分干涉相衬法所需部件：起偏器、检偏器、微分干涉相衬组件插板(DIK 组件插板)，以及补色器(λ- 片)。起偏器和检偏器是在对金相样品进行正交偏振光观察中必不可少的基本配套部件，组装在明/暗场照明组件中，也是微分干涉相衬法必不可少的部件。起偏器是把光源变为按东- 西方向振动的线

光学显微镜工作原理

光学显微镜工作原理 1. 1. 引言 2. 2. 显微镜基本原理 3. 3. 显微镜图像质量 4. 4. 显微技术的类型 5. 5. 荧光显微技术 6. 6. 光学显微镜的组成部件 7.7. 了解更多信息 8.8. 阅读所有物理学类文章 自十六世纪末发明以来，光学显微镜加深了我们对基础生物 学、生物医学研究、医疗诊断和材料科学的认识。光学显微 镜最多可将物体放大1000倍，以展现其微观细节。如今，这 项技术已远远超出罗伯特·虎克和列文虎克（Antoni van Leeuwenhoek）所发明的第一台显微镜的水平。人类研发的特 殊技术和光学设备可以揭示出活细胞的结构和生化机能。显 微镜甚至已进入数字时代，利用电荷耦合器件（CCD）和数码 相机来捕捉图像。然而，这些高级显微镜的基本原理却与您 生平第一节生物课上用过的学生显微镜非常相似。 光学显微镜的工作原理与折射望远镜极为相似，仅有一些细微的差别。下面让我们简单地了解一下望远镜的工作原理。 望远镜要从昏暗、遥远的物体上采集大量光线，因此需要巨大的物镜，以尽可能多采集一些光线并使物体看起来更加明亮。物镜很大，因而物体的图像会出现在一段距离之外的焦点位置，这就是为何望远镜比显微镜长得多的原因。望远镜的目镜随后放大图像，使物体就像在您眼前一样。 洋葱皮细胞（200倍） 光学显微镜工作原理

普通学生 光学显微镜的示意图，显示各个部件和光路 与望远镜相反，显微镜必须从距离很近、范围极小、厚度极薄且明亮清晰的样本上采集光线。因此显微镜不需要巨大的物镜。相反，显微镜的物镜很小，而且呈球形，这就意味着显微镜两侧的焦距都要短得多。物镜将物体的图像对焦在显微镜镜筒内的不远处。随后图像由第二个透镜放大，这个透镜称为接目镜或目镜，使物体如同在您眼前一般。 望远镜和显微镜之间另一个主要区别在于，显微镜带有光源和聚光器。聚光器是一种透镜系统，用于将光源的光线聚焦到样本上的一个微小而明亮的点，即物镜检查的同一区域。 显微镜与望远镜之间还有一个不同之处：后者配有固定物镜和可换目镜，而前者配有可换物镜和固定目镜。通过更换物镜（从相对扁平、低放大倍数的物镜到较圆、高放大倍数的物镜），显微镜可以观察越来越微小的区域——采光不是显微镜物镜的主要任务，但却是望远镜的。 本文后半部分将详细讨论显微镜的组成部件。 制作简易显微镜 您可以用放大镜和纸片制作简易显微镜： 1. 准备两片放大镜和一张印有图像的纸。 2. 将一片放大镜固定在纸张上方不远处。印刷图像看起来变 大了一点。 3. 将另一个放大镜放在您的眼睛和第一个放大镜之间。 4. 上下移动第二个放大镜，直到印刷图像清晰为止。您会发 现印刷图像要比在第一个放大镜中看到的图像更大。 此外，您还可以制作一个类似针孔相机的简易针孔显微镜。 显微镜图像质量 使用显微镜观察样本时，您所看到的图像质量将在以下几方面进行评估：

微分干涉显微镜工作原理

微分干涉显微镜工作原理 在材料显微分析如何使用微分干涉相衬法微分干涉相衬法(DIC)作为一种极具前途的分析检验方法，具有对金相样品的制备要求较低，所观察到的样品各组 成相间的相对层次关系突出，呈明显的浮雕状，对颗粒、裂纹、孔洞以及凸起等能作 出正确的判断，能够容易判断许多明场下所看不到的或难于判别的一些结构细节或缺 陷，可进行彩色金相摄影等优点。但在目前的金相检验工作中，DIC法还利用得很少。 在金相显微镜检验方法中，微分干涉相衬法(DIC)是金相检验的一种强有力的工具，其特点主要为: 1、对金相样品的制备要求降低，对于某些样品，甚至只需抛光而不必腐蚀处理即 可进行观察。优点是可以观察到样品表面的真实状态，如将试样抛光后在真空下发生 马氏体相变，不用腐蚀就可以观察到马氏体的相变浮凸。 2、所观察到的表面具有明显的凹凸感，呈浮雕状，样品各组成相间的相对层次关系 都能显示出来，对颗粒、裂纹、孔洞以及凸起等都能作出正确的判断，提高了金相检 验准确性，同时也增加了各相间的反差。 3、用微分干涉相衬法观察样品，会看到明场下所看不到的许多细节，明场下难于判别 的一些结构细节或缺陷，可通过微分干涉进行反差增强而容易判断。 4、微分干涉相衬法基于传统的正交偏光法，又巧妙地利用了在渥拉斯顿棱镜基础上改 良的DIC 棱镜和补色器(λ-片)等，使所观察的样品以光学干涉的方法染上丰富的色 彩，从而可利用彩色胶卷或者数码产品(CCD 摄像头以及数码相机)进行彩色金相显微摄影。由于微分干涉相衬得效果与样品细节的浮雕像以及色彩都是可以调节的，因而 比正交偏光更为优越。微分干涉相衬法在生物医学领域得到了广泛的重视，然而，到 目前为止从发表的有关材料金相研究的论文中，国内外基于微分干涉相衬法进行材料 金相研究的工作开展得很少。其原因主要有两个方面:一方面是由于配备微分干涉相衬 部件的金相显微镜不是很多；另一方面，许多材料科学工作者还没有意识到微分干涉 相衬法在材料研究中的优势。 一、微分干涉相衬法的基本原理： 1、微分干涉相衬法所需部件：起偏器、检偏器、微分干涉相衬组件插板(DIK组件插板)，以及补色器(λ- 片)。起偏器和检偏器是在对金相样品进行正交偏振光观察中必 不可少的基本配套部件，组装在明/暗场照明组件中，也是微分干涉相衬法必不可少的 部件。起偏器是把光源变为按东- 西方向振动的线偏振光；检偏器可以使满足干涉条

显微镜常见问题集锦

显微镜常见问题集锦 文章来自：https://www.docsj.com/doc/a74669109.html,/timemodel/article/2010-04-10/294224.html 1．暗场与相差能在同一台显微镜上以便于吗？ 答：暗场与相差可行在同一台显微镜上以便于。但一般是在正置显微镜上。倒置显微镜上以便于暗场比较麻烦。 2．我想请教一下，霍夫曼原理和微分干涉原理各有什么特点，什么类型的显微镜会用到这些原理？贵公司的显微镜有使用此原理的吗？ 答：霍夫曼是在微分干涉的基础上发展起来的，主要用于检测透明标本和显微注射。比如活细胞检测，转基因等。 微分干涉的特点是分辨率高。但只能使用玻璃的培养皿，而且聚光镜的工作距离短，不适合显微操作。霍夫曼的分辨率没有微分干涉高，但可行使用塑料培养皿（比较经济方便），而且聚光镜的工作距离比较长，适合显微操作（因为空间大）一般霍夫曼都是应用在倒置显微镜上，微分干涉则应用较广倒置和正置显微镜都可行。我们的显微镜当然会有这些检测方法，BX51，BX61，IX51，IX71，IX81等高档显微镜都可行增加这些功能。而且可行在一台显微镜上以便于两种或多种检测方式。（当然，霍夫曼和微分干涉一般没有必要同时使用） 3．N.A值决定物镜的分辨率、焦深、图像亮度的基本数据，请问如何用N.A值大小决定分辨率（解析力）、焦深、图像亮度？ 答：分辨率=波长/NA。波长为照明光源的波长，单位微米。如果为

可见光是400--700nm. 平均波长为550nm，所以可行简化成0.55微米。 焦深=Kn/M Na. K为常数约240。n为介质的折射率。M是总放大倍率。NA为物镜的数值孔径。图象亮度由于影响因素太多，无法用简单的公式表术。以上两个公式都是在理想状态下的情况，真实检测中实际的分辨率还回受聚光镜等其他因素影响。 4．体视显微镜可行看到的最小尺寸为多少?可否用于非陶粒滤料体系?解剖时可行适用普通工具吗?还有,是否有哪类显微镜适用于非陶粒滤料体系? 答：体式显微镜能看到的最小尺寸需要由物镜，放大倍率等决定。 当然可行用于非陶粒滤料体系，而且用的还相当多。可直接在体式镜下使用普通工具进行解剖。 5．我们想知道的是体式显微镜最大的放大倍数,不知可否告知? 我们想要检测的物体类似于铅笔尖的形状,但尺寸要远远小于铅笔尖,其尺寸在微米级乃至微米级以下.不知可否适用? 答：体视显微镜如果增加辅助透镜并且更换高倍率的目镜，可行达到600多倍。但是倍率越高，工作距离就越短，能够检测到的视野就越小，显微操作的难度就越大。 关于分辨率的问题，主要看所配的物镜NA值。一般体视镜增加辅助透镜的话也就能达到0.275左右。计算下来最大分辨率可行达到2微

微分干涉显微镜工作原理

微分干涉显微镜工作原理

研究用系统金相显微镜，涵盖明场、暗场、偏光等观察方式。 ·透射、反射两种照明系统可选，配有大功率透反射式双光路柯勒照明系统。·适用于工矿企业、高等院校及科研等机构作材料内部组织结构分析。 NMM-800RF NMM-800TRF 光学系 统 无限远系统● ● 目镜超大视野目镜EW10×/ 22,镜简Φ30● ● 无穷远平场消色差物镜5×/ 0.12/ ∞/ - (明场用) ● ● 10×/ 0.25/ ∞/ - (明暗场共用) ● ● 20×/ 0.4/ ∞/ 0 (明暗场共用) ● ● 50×/ 0.75/ ∞/ 0 (明场用) ● ● 100×/ 0.9/ ∞/ 0 (明场用) ● ● 40×/ 0.65/ ∞/ 0.17● 100×/ 1.25/ ∞/ 0.17● 40×/ 0.6/ ∞/ 0 (明暗场共用) ○ ○ 50×/ 0.75/ ∞/ 0 (明暗场共用) ○ ○ 最大标 本高度 30mm ● ● 观察头铰链式三目观察头，30°倾斜，瞳距 48-75mm ● ● 反射照明24V/ 100W卤素灯（预对中）,亮度可调● ● 柯勒照明系统，非球面集光器● ● 起偏镜、检偏镜○ ○ 起偏、检偏同步连接板○ ○ 蓝、绿、黄滤色片和磨砂玻璃● ● 透射照明系统摆出式聚光镜 NA0.9/ 0.25 ● 24V/ 100W卤素灯，非球面集光器● 蓝色滤色片● 滤光片ND25、ND6 ○ ○ 调焦系统粗微动同轴调焦，微调格值1μm，粗动松 紧调节，带限位装置 ● ● 转换器内向式五孔转换器● ● 载物台矩形双层活动平台186×138mm，移动范围 74mm×50mm ● ●

DIC 微分干涉差显微镜原理

微分干涉差显微镜(differential interference contrast )又称Nomarski相差显微镜，其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比，标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。 微分干涉差显微镜利用的是偏振光，这些光经棱镜折射后分成两束，在不同时间经过样品的相邻部位，然后在经过另一棱镜将这两束光汇合，从样品中厚度上的微小区别就会转化成明暗区别，增加了样品反差并且具有很强的立体感。 微分干涉显微镜能使细胞核及较大的细胞器如线粒体等具有较强的立体感，比较适合于显微操作。目前多用于基因注入、核移植、转基因动物等生物工程的显微操作。将微分干涉差显微镜接上录象机，可以观察活细胞中的颗粒及细胞器的运动。 这些薄膜与周围的水介质之间的折射率差异非常小，用普通的光学显微镜来成像显得捉襟见肘；然而DIC利用的是偏振光，这些光经棱镜折射后分成两束，在不同时间经过样品的相邻部位，然后在经过另一棱镜将这两束光汇合，从样品中厚度上的微小区别就会转化成明暗区别，增加了样品反差并且具有很强的立体感，从而实现清晰的成像。 德国物理学家Sauerbrey通过大量的研究发现厚度剪切压电石英晶体的谐振频率变化Δf与在晶体表面均匀吸附的刚性物的质量Δm之间存在着比例关系，他在1959年给出了Sauerbrey 方程： 式中f为晶体的固有谐振频率，又叫基频率, ( Hz), m 为晶体表面涂层质量(g), △ f 为晶体谐振频率的变化量，A为涂层面积(cm2)。 流式细胞仪： 粒子折射激光产生光信号。散射光不依赖任何细胞样品的制备技术，因此被称为细胞的物理特性，即细胞的大小和内部结构。散射光与细胞膜，核膜以及细胞结构的折射性、颗粒性密切相关，细胞形状和表面形貌也对其产生影响。前向角散射（FSC）光宇被测细胞的大小和面积有关，检测的是激光束照射方向宇手机散射光信号的光电倍增轴向方向的散射光信号。FSC不受细胞荧光染色的影响，常用于免疫表型分析的信号处理。侧向角散射（SSC）光宇被测细胞的颗粒密度和内部结构有关，对细胞膜、胞质和核膜的折射率更为敏感。SSC收集与激光束正交90度方向的散射光信号。图3-21细胞的光散射特性上述两种信号都是来自于激光源光束，目前采用这两个参数组合，可区分不同种类的细胞亚群，同时可获得细胞相关的重要信息，下图（图3-2）为FSC和SSc组成的二维散点图，从图中可以很容易的把全

显微镜的原理和使用

光学显微镜的原理和应用 简介 一、光学显微镜发展历史与最新进展 已近400年的历史。十九世纪之前发展非常缓慢。 1665年：英国物理学家R.Hoock的第一台显微镜的雏形。 十八世纪初：慧更斯目镜的发明。 十九世纪中：Lister和Amici制造了消色差物镜，部分消除了色差，后者首次制成水浸物镜，使数值孔径NA>1。 1886年：Ernst Abbe与Carl Zeiss第一个生产出了复消色差物镜,消除了球差和色差的干扰，提高了数值孔径(1.4)，并奠定了现代光学理论原理。 1893年：August K?ler教授发明了著名的柯勒照明。 1890-1899年：金相显微镜、消像散透镜和双筒目镜以及第一台体视显微镜的诞生。 二十世纪初：出现了齐焦物镜。 1932年底：诞生了透射电子显微镜，电子显微镜的分辨率是传统光学显微镜的1000倍以上。 1930－1940年：显微分光光度计的出现，预示着显微定量技术的开始。 1940－1950年：出现了荧光显微镜。 二次大战之前：Zeiss公司基于诺贝尔奖获得者荷兰物理学家Frits Zernike 的光学理论制造了第一台观察活细胞的相差显微镜。 1955年：物理学家Georges Nomarski改良了Wollaston棱镜，诞生了另外一种增强活细胞反差技术的显微镜－Nomarski干涉显微镜即微分干涉差显微镜。 1975年：Robert Hoffman又提出了一种增强活细胞反差的技术，即Hoffman调制相差显微镜。 1970－80年：医学图像处理与分析系统 1970－80年：流式细胞仪 1980－90年：诞生了激光扫描共焦显微镜。比普通光学显微镜的分辨率提高了1.5倍。80年代末和90年代初：诞生了双光子扫描显微镜。 二十世纪90年代末~至今：全内反射显微镜，物镜数值孔径达到了1.6。 分辨率： 普通光学显微镜：xy- 0.25 μm 共焦显微镜：xy- 0.18 μm，z- 300nm 全内反射显微镜：z- 100nm 4pi：z<100nm STED：xy- 20nm 透射电镜：xy- 0.1nm 二、生物光学显微镜主要种类： 眀场透射光显微镜: 观察经过组化染色的标本。 暗视野显微镜：适于观察未染色的标本－活细胞。散射光成像。 相差显微镜：适于观察活细胞。光相位差转换成振幅差。

显微镜常见问题

显微镜常见问题 Q：什么是数值孔径NA？ A：数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数，是判断两者（尤其是对物镜而言）性能高低的重要标志。数值孔径越高，分边率越高，焦深则越小。 Q：是否可以在无限远光学系统上使用有限远筒长的物镜？ A：您可能能够将物镜拧上物镜转盘，但由于无限远光学系统光路上的结像透镜的关系，使用有限远系统的物镜不能得到最佳的图像。 Q：是否可以在有限远筒长的显微镜上使用无限远系统的物镜？ A：不能。因为像有限远光学系统不包含可使平行光路聚焦在目镜光栏面的结透镜。 Q：相差物镜是否可以用于其他观察方法? A：是的，可以。仅需移动相差聚光镜到“0”位置同时使用柯勒照明。相差物镜在其后焦平面上有相板，但是大部分光不受这个相板的影响。因此，对图像质量仅有轻微的影响，对明场图像依然有用。 Olympus制造的相差物镜还可应用于荧光观察。 Q：相差物镜上标记的Ph1、Ph2、Ph3是什么意思？ A：相差物镜要配合安装在聚光镜的环状光阑来使用。光阑的直径要与物镜的NA 值相匹配。Olympus UIS的物镜，Ph1表示物镜的NA值不超过0.50；Ph2表示NA值在0.55至1.0之间；Ph3表示NA值大于1.0（油镜）。长工作距离的物镜使用专用的相差环。

Q：是否可以为视频显微方法选择高NA值的物镜观察微小标本的细节？ A：是的，可以。当您通过目镜观察时眩光可能图像的细节变暗，但必要的信息往往包含在其中，那么视频增强技术可以处理这些信息并且获得极好的视频图像。 Q：是否应该购买我所能买得起的最好的物镜？ A：通常是这样的，但不总是。如果你所观察的标本的厚度有几个微米，平场消色差或平场半复消色差物镜就很好了，因为比起平场复消色差物镜有更好的焦深。如果用于彩色照相，平场半复消色差比平场消色差物镜得到的图像要好。平场复消色差物镜在微小细节上可以得到极好的观察和照相的效果，但往往要花费比平场半复消色差物镜高几倍的价格。 Q：如何避免在滴油时损伤40倍的干式物镜？ A：如果您经常使用100倍的油镜，您可能想用50倍的油镜来替换掉40倍的干镜。50倍的平场消色差油镜（NA0.90）比标准的40倍平场消色差或消色差干镜（NA 0.65）得到更加明亮的图像,更好的清晰度。 Q：如何减少在40倍干镜上沾上香柏油？ A：当您在转换40倍干镜和100倍油镜时，尽量避免40倍的干镜浸到油上。实验室经常将这两款物镜装在相对的方向上。 Q：为什么有时候40倍的物镜成象效果比20倍差？ A：当标本的厚度大于标准厚度0.17MM，或在盖玻片上有其他物质。为了改善成象效果，您可以用带校正环干式物镜，或用40倍和50倍的油镜来取代40倍的干式物镜，因为油浸物镜对盖玻片厚度变化的敏感性较小。