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水产动物疾病学实验(正文)(精)

水产动物疾病学实验(正文)(精)
水产动物疾病学实验(正文)(精)

水产动物疾病学实验指导

王文彬编

湖南文理学院生命科学学院

二〇〇八年十一月

目录

实验1 常见渔用药物的识别及给药方法 (1)

实验2 渔用氯制消毒剂有效氯的测定 (4)

实验3 水产动物常见病原体标本的观察 (7)

实验4 鱼用土法疫苗的制作及使用 (9)

实验5 鱼病的系统检查与诊断 (11)

实习指导 (13)

实验1. 常用渔药的识别及给药方法

一、实验目的

1. 识别常用渔药,了解并掌握各种药品的主要特性与基本用途;

2. 训练渔药的正确使用方法;

3. 通过给药方法的操作训练,培养学生实验动手能力。

二、实验内容

1. 常用渔药的识别;

2. 操作给药方法——注射法和药浴法;

3. 鱼苗、鱼种对几种常用渔药的毒性及忍受力试验(有兴趣的同学选做)。

三、材料与仪器用品

1. 实验材料:

活的鱼苗鱼种(鲤、鲫或黄颡鱼、黄鳝)。

常用渔药:聚维酮碘(PVP-I)、氯霉素、土霉素、(复方)新诺明、诺氟沙星、漂白粉、漂粉精、强氯精、防消散、优氯净、氯胺-T、晶体敌百虫、福尔马林、高锰酸钾、硫酸铜、硫酸亚铁、硫双二氯酚(别丁)、孔雀石绿、亚甲基蓝、沸石、呋喃唑酮(痢特灵)等。

2. 实验用品:

水族箱、搪瓷脸盆、瓷碗、烧杯、量筒、注射器、玻璃皿,吸管,吸水纸等。

四、实验原理与方法

(一)渔药的种类

药物是指对机体产生某种生理生化影响,并在疾病的治疗、预防和诊断方面有一定效果的化学物质。渔药(fishery drugs的种类从现有资料看,国内外大致有300种以上。Nelson Herwig(1979)收载了276种,不包括某些改善机体代谢技能的促生长药和饲料添加剂等。按药物的作用对象,并结合其他形式可将渔药分为以下十大类:

1. 抗病毒药:如聚乙烯吡咯烷酮碘(PVP-I)、免疫制剂等。

2. 抗细菌药:如抗菌素、磺胺类、呋喃类、抗菌中草药等。

3. 杀真菌剂:如孔雀绿、亚甲基蓝、制霉菌素等。

4. 杀藻类药:如生石灰、硫酸铜等。

5. 消毒防腐剂:醛类:福尔马林;

氧化剂:高锰酸钾;

卤素类:漂白粉、次氯酸钙(漂粉精)、三氯异氰尿酸(强氯精、鱼安)、二氯异氰尿酸(防消散)、二氯异氰尿酸钠(优氯净)、氯胺-T;

染料类:孔雀石绿、亚甲基蓝、吖啶黄;

表面活性剂:新洁尔灭等。

6. 杀虫驱虫药:如敌百虫、硫酸铜、硫双二氯酚、过氧化焦磷酸钠等。

7. 环境改良剂:如生石灰、过氧化钙、沸石等。

8. 营养及代谢改善剂:如维生素、激素等。

9. 麻醉剂:如间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐(MS222)等。

10. 抗霉抗氧化剂:如乙氧基喹宁等。

渔药选择的原则:①疗效高(有效性);②毒性低(安全性);③使用方便(方便性);④价格便宜(廉价性)。★识别以上常用的渔物。

(二)渔药的使用方法

1. 遍洒法(全池泼洒法):疾病防治中最常使用的一种方法。使用时,首先要准确测量池塘水体,计算药量,之后,称取药物用水溶解后均匀地泼到全池中去。此法适用于中、小型水体,施药方便,能较彻底地杀死养殖动物身上及其生活水体中的病原生物。但用药量大,且能杀死水体中的饵料生物,对环境也有一定污染。

★计算池塘水体的体积和施放漂白粉的药量。

2. 悬挂法:漂白粉挂篓,硫酸铜、敌百虫挂袋,在食场周围形成一消毒区,利用水产动物摄食时杀灭病原体。此法具有用药少、简便、副作用少等优点,但杀灭病原体不彻底,只适用于预防和早期治疗。一般需持续挂药三天。

3. 浸洗法(药浴法):在较小的容器内,配置一定浓度的药液,将患病水产动物放入其中进行短时间浸泡,以消灭寄生于体表的病原体。此法经常被用于转池及运输前后的苗种消毒。

4. 口服法:即将药物与水产动物喜吃的饲料一起拌以黏合剂,制成适口的药饵投喂,而达到杀灭体内病原体的方法。适用于预防和治疗疾病,但当病情严重时,患病动物已失去食欲,停止摄食或摄食不多时,则不能用。

口服药饵的制作方法一般有以下几种:

(1)药面:将药物、饵料(糠饼、麦麸、豆饼或菜饼)和黏合剂(榆树粉、面粉、红薯粉等),按适当的比例混和调匀后,做成适口的条状、颗粒状,晾干后投喂。

(2)药物草料:将药物混和在黏合剂中加热水调成糊状,再黏附于青草上投喂。

(3)药物米糠:将药物混和在黏合剂中加热水调成糊状,拌入米糠做成薄饼投喂。

(4)新鲜肉质药饵:将药物混和于黏合剂中搅匀,再把药糊涂在肉质饵料上投喂。

(5)混药:在饲料中加入药物,放入适量的水拌匀,直接投到食台上喂养。

5. 涂抹法:在体表患处涂抹较浓的药液以杀灭病原体。适用于产卵亲体检查和注射催产剂时。注意涂抹时,头部一定要朝上,以防药液流入鳃。

6. 浸沤法:应用中草药防治疾病时采用的方法,将捆扎好的中草药放在鱼池上风处,渗出药汁杀灭水体及水产动物体表的病原体。

7. 注射法:有两种类型,一类是给放养鱼种注射疫苗,另一类是给已患病的个体注射抗菌素等治疗药物。方式有肌肉注射和腹腔注射两种。此法费时费力,一般只用于亲本及名贵水产动物苗种的疾病防治。★用鲫鱼或鲤鱼操作注射法。

8. 口灌法:采用注射器(针尖套一软管将药液向水产动物的口腔或食道深部灌入。

渔药剂量原则:内用药按体重(患病与未生病的水产动物体重)计;外用药按水体体积计,即总用药量(g)= 水体体积(m3)×药物浓度(g / m3)。

(三)鱼苗、鱼种对几种常用渔药的毒性及耐受力试验

1. 试验材料:

试验用鱼为黄鳝(或其它鱼)鱼种。试验容器为31.5×23.5×11cm方形白色塑料箱,每箱盛药液5L,试验用水为曝气72h的自来水。

用于试验的药物为3~6种外用消毒灭菌杀虫药物,如高锰酸钾、硫酸铜和晶体敌百虫等。试验前先将药品配成母液,再根据实际用量吸取母液放入试验水族箱。

2. 试验方法:

试验前,先根据有关资料确定某种药物的浸浴浓度(5~11个浓度),或先按适当比例从低浓度到高浓度进行48h预备试验。根据试验结果确定试验浓度范围,按等对数间距设置5个浓度组及1个对照组,另外每个组设两个重复。试验期间增氧、不投饵,前8h作连续观察,不换液或24h换1次试验液(某些药物)。试验时,设对照组作比较,每组试验用10~20尾鱼,记录24h、48h及96h各水族箱中鱼的死亡尾数和中毒症状,计算死亡率。

在前 8h 对试验鱼作连续观察,并作 24、48、96h 的定时观察,做好供试鱼的存活记录,对96h未显毒性症状的试验鱼继续观察。根据用药浓度、死亡时间和死亡率,

★利用半对数座标用直线内插法求出中间忍受限度或半数致死浓度(LC50。

★或者,按照寇氏法(Karber),计算半数致死浓度(LC50:

Log LC50 = X M–d(∑p - 0.5

式中X M为死亡组最大剂量的对数, d为相邻组浓度对数差, p为各组的死亡率,Σp为各组死亡率的总和。

查反对数表求LC50,并按特伦堡(Turabell)公式:

Sc = 0.3×48h LC50/(24h LC50/48h LC502

或按经验公式:Sc = 96h LC50×0.1

求出安全浓度(Sc)。

作业:通过试验或以下实例,计算出所用试验鱼种对几种常用渔药的安全浓度。实例:黄颡鱼苗对3种渔药的耐受力(急性毒性)试验

表1 各试验液的药物质量浓度(mg/L)

药品试验组对照组

ⅠⅡⅢⅣⅤ

亚基蓝40.0 49.0 60.0 73.5 90.0 0

次氯酸钠 2.7 3.5 4.6 6.0 7.8 0

硫酸铜+硫酸

1.6

2.6 4.1 6.5 10.4 0

亚铁合剂

注:当实验药物的浓度已经远高于常用量而仍旧不死鱼时,则仅对被测的最高浓度作出评价。

表2 三种药物对黄颡鱼苗的半致死浓度和安全浓度

药物

浓度

/mg﹒L-

1

死亡率/% LC50 /mg﹒L-1

安全浓

/mg﹒L-

1

24h 48h 96h 24h 48h 96h 亚基蓝40.0 0 10 30

49.0 0 30 50

60.0 0 45 80

73.5 20 75 95

90.0 40 100 100

次氯酸

2.7 0 0 10

3.5 0 10 20

4.6 0 15 35

6.0 10 30 60

7.8 25 50 85

硫酸铜+

硫酸亚

铁合剂

1.6 15 20 30

2.6 30 35 60

4.1 40 55 90

6.5 85 95 100

10.4 100 100 100

请按寇氏法公式,计算出24h、48h、96h的半数致死浓度(LC50,再按特伦堡公式计算出三种药物的安全质量浓度,结果均填入表中。

实验2. 渔用氯制消毒剂有效氯的测定

一、实验目的

1. 了解渔用氯制消毒剂种类及其有效氯的标准含量;

2. 掌握漂白粉等氯制剂有效氯含量的测定方法。

二、实验内容

1. 认识常用的渔用氯制消毒剂的种类,了解其有效氯的标准含量;

2. 采用碘量法、维生素C法、蓝黑墨水滴定法等,分别测定漂白粉、优氯净等氯制剂有效氯的含量。

三、材料与仪器用品

1. 漂白粉、精制淀粉(配制:将可溶性淀粉加无水酒精润湿,研磨2 h,烘干而成)、碘化钾晶体、维生素C(含量100 mg/片)、蓝黑墨水、醋酸、0.1 mol / L 硫代硫酸钠液、稀盐酸、蒸馏水。

2. 电子天平、研钵、玻璃棒、500ml容量瓶、量筒、移液管、吸管、大小烧杯、白瓷碗。

四、实验原理与方法

(一)渔用氯制消毒剂种类及其有效氯的标准含量

氯制消毒剂药物主要用于鱼、虾类体表或环境消毒,没有严格的抗菌谱,对微生物与机体间也无明显的选择作用,只存在差异,是一类较能迅速杀灭微生物的药物。其杀灭机理是氧化细菌原浆蛋白中的活性基团,并和蛋白质的氨基结合而使其变性。渔用氯制消毒剂药品主要有6种(见表1)。

表1 渔用氯制消毒剂的种类及其有效氯的标准含量

名称化学名分子式性状有效氯的标准含量

漂白粉含氯石灰Ca(ClO2 + CaCl2 +

CaO + Ca(OH2

白色颗粒状粉

末,有氯臭

一般含25~35%

漂粉精次氯酸钙Ca(ClO2

白色粉末,

有氯臭

60~70%或80~85%

氯胺-T

别名:氯亚明

甲苯磺酰氯胺钠C7H7O2NClSNa·3H2O白色微黄晶粉24~26%

优氯净二氯异氰尿酸钠C3O3N3Cl2Na

白色晶粉,

有浓氯气味

原粉60~64%

防消散二氯异氰尿酸C3HO3N3Cl2

白色粉末,

有氯臭

原粉71%

强氯精三氯异氰尿酸C3O3N3Cl3

白色粉末,

有氯臭

原粉约90%

(二)漂白粉的鉴别和有效氯含量的测定方法

漂白粉是水产药物中一种廉价和广泛使用的强力杀菌剂和消毒剂。药浴和泼洒均很方便,能预防和治疗多种微生物引起的疾病。但是,漂白粉在空气中容易潮解而失去有效氯,受日光作用也迅速分解,对金属有腐蚀作用,故必须盛放在密闭陶器内,存放于阴冷干燥处。如保管不善,会造成失效。用这种有效成分减少或已完全失效的漂白粉,按正常用量拿来使用,就会对疾病无治疗效果。

1. 漂白粉的鉴别方法:

本品遇稀盐酸,即产生大量的氯气。

2. 漂白粉有效氯含量的测定方法:

(1)碘量法

称取漂白粉2 g,置研钵中,分次加水25ml,研磨调匀,移置500ml的容量瓶中,并将研钵用水洗净,洗液并入容量瓶中。然后,用蒸馏水稀释至刻度,密塞,静置

10 min;摇匀,准确量取混悬液100ml,加碘化钾1 g与醋酸5ml,用硫代硫酸钠液(0.1 mol / L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液,继续滴定至蓝色消失,即得漂白粉有效氯含量(每1ml的0.1 mol / L硫代硫酸钠溶液相当于3.546 mg的氯)。

(2)维生素C法

①取含量100 mg维生素C 1片,压成粉状,加入15 ~ 20ml清洁水中使其溶解。

②加碘化钾晶体2小匙(约200 mg)和精制淀粉2小匙至维生素C溶液内。

③用吸管吸取欲测定的1% 漂白粉溶液,滴入上述溶液内,边滴入边搅动,至出现蓝色1分钟不褪色为止。记录用去1% 漂白粉溶液的毫升数,代入下列简化公式:

漂白粉有效氯含量(%)= 400 / 用去1%漂白粉溶液毫升数

例如,用去1%漂白粉溶液20ml,代入公式,400 / 20 = 20,即该漂白粉有效氯含量为20%。

(3)蓝黑墨水滴定法

①取瓶内上、中、下的漂白粉混匀,称量5g,用水(不含氯的干净水)将漂白粉混和研碎,稀释到100 ml,充分搅拌后,静置。

②待溶液澄清后,用移液管或注射器吸取一定量的上清液,一滴一滴地滴入白瓷碗内,共38滴(不能多,也不能少),记下用去的毫升数,再用38滴除以用量,得出每滴溶液用去的毫升数。

③将上面用过的移液管或注射器洗净擦干,吸取少量墨水在管内转动后弃掉(避免管壁上存留的少许水分,使墨水浓度变稀)。然后再吸取一定量的墨水向碗中的漂白粉进行滴定,边滴边摇动均匀,溶液颜色由棕色变为黄色,最后出现稳定的蓝绿色时,即为滴定终点。记下所用蓝黑墨水的毫升数。计算公式:

漂白粉含氯量 =(消耗蓝黑墨水毫升数 / 每1滴漂白粉上清液毫升数)×1%

例如:漂白粉38滴上清液共用去2ml,每滴为:2ml / 38 = 0.05ml

滴定漂白粉上清液所用蓝黑墨水为1ml,则漂白粉有效氯含量为:

漂白粉有效氯含量 =(1ml / 0.05ml)×1% = 20%

注意事项:①滴漂白粉上清液及蓝黑墨水时,滴管要垂直,这样滴出的滴量较均匀;②漂白粉加水搅拌,静置澄清后的上清液,测定过程要在半小时内完成,所得结果才基本一致,因此要求动作要快。

(4)“水生”漂白粉有效氯测定器比量法(略)

★采用以上任意两种方法对比测定漂白粉的有效氯含量(%)。

在实际应用中,当漂白粉的有效氯含量,经测定与标准含量相差较大时(±5%),可按下式计算校正浓度:

校正浓度 =(有效氯标准含量×使用浓度)/ 有效氯实测含量

例如,使用1 g / m3水浓度漂白粉时,经实测现有漂白粉有效含量仅为20%,而漂白粉的标准含量为30%,则:校正浓度 = 30×1 / 20 = 1.5

即使用1 g / m3水浓度的漂白粉消毒池水时,在1 m3水体中用有效氯标准含量30%的漂白粉为1 g,而用20%有效氯含量的漂白粉需用1.5 g。

作业:根据上述实验测定,计算出所测漂白粉的有效氯含量,若采用不同方法测定有误差,请分析原因。

实验3. 水产动物常见病原体标本的观察

一、实验目的

1. 学习在显微镜下辨认水产动物常见细菌性病和水霉病的病原菌形态结构特点。

2. 在显微镜下认识鞭毛虫、孢子虫和纤毛虫中一些水产动物常见原虫的形态结构特征。

3. 在显微镜下认识单殖吸虫、复殖吸虫、棘头虫和线虫等水产动物常见蠕虫的形态结构特征。

二、实验内容

1.观察鱼、虾、贝等水产动物各种常见病原体的玻片标本或浸制标本;

2. 识别并了解气单胞菌、假单胞菌、弧菌等病原细菌,水霉菌,鳃隐鞭虫、锥体虫、碘泡虫、单极虫、车轮虫、小瓜虫和毛管虫等寄生原虫,指环虫、锚首虫、独孤吸虫、颈穴吸虫、棘头虫、线虫、绦虫等寄生蠕虫的形态结构特征;

3. 观察寄生于活体黄鳝肠道中的复殖吸虫、棘头虫和体腔中线虫的形态与寄生状况,鲤、鲫鳃部单殖吸虫和肠道中绦虫的形态结构与寄生状况。

三、材料与仪器用品

活体黄鳝与鲤鲫,鱼虾贝等水产动物各种常见病原体的玻片标本或浸制标本,各种水产动物病原体的图片软件资料。

生物显微镜,连续变倍体视镜,显微数据图像采集系统,多媒体教学系统等;

解剖盘,解剖器械,载玻片,盖玻片,玻璃皿,吸管,吸水纸等。

四、实验方法及步骤

(一)水产动物的寄生微生物

1. 病毒

观看主要的水产动物病毒种类图片,认识各种动物病毒的形态结构。

2. 细菌

在显微镜(油镜)下,观察气单胞菌、假单胞菌、弧菌、屈挠杆菌、耶尔森氏菌、爱德华氏菌等属细菌种类的涂片玻片标本,认识各种水生病原菌的形态结构。

3. 真菌及藻类

在显微镜下,观察水霉菌的菌丝体及孢子,卵甲藻,注意它们的形态结构特点。

(二)水产动物的寄生虫

1. 原虫

在显微镜下,观察鳃隐鞭虫、锥体虫、碘泡虫、单极虫、车轮虫、小瓜虫和毛管虫等寄生原虫的玻片标本,注意它们的形态结构特点。

2. 蠕虫

水产动物的寄生蠕虫包括单殖吸虫、复殖吸虫、绦虫、棘头虫和线虫五大类。

(1)观察寄生蠕虫的玻片标本及浸制标本

在显微镜下,观察各种指环虫、锚首虫、独孤吸虫、颈穴吸虫、棘头虫、线虫、绦虫等寄生蠕虫的玻片标本,观察各种大型寄生蠕虫的浸制标本,并注意认识它们的形态结构特征。

(2)采集处理鱼类寄生蠕虫的标本

采集黄鳝、鲤、鲫等淡水鱼鳃部的单殖吸虫和消化道内的复殖吸虫、绦虫、棘头虫及体腔中线虫。观察活体的单殖吸虫、复殖吸虫、绦虫、棘头虫和线虫的形态结构与寄生状况。学会各种鱼类寄生蠕虫标本的处理。

3. 甲壳类

在显微镜下,观察鱼类寄生甲壳类中华鳋、锚头鳋等鳋类(桡足类)、鲺(鳃尾类)、蟹奴(蔓足类)和鱼怪(等足类)等标本。采集并观察鲤、鲫、鲢、鳙等淡水鱼鳃上寄生的活体甲壳类。学会甲壳类标本的处理。

作业:请用检索表的形式,区别所观察的各种病原体标本的形态结构特征。

实验4. 鱼用土法疫苗的制作及使用

一、实验目的

了解土法免疫的原理,掌握鱼用土法疫苗的制作及其使用方法。

二、实验内容

1. 鱼用土法疫苗的制作;

2. 将原毒疫苗灭活处理后获得的减毒疫苗接种于鱼体,使鱼体产生抗体,即获得免疫。

三、材料与仪器用品

典型病症的病鱼标本(活的或刚死的),0.7%生理盐水、碘酒、甲醛、敌百虫。

生物显微镜,冰箱,培养箱,超净工作台,多媒体教学系统等。解剖器具、水浴锅、天平、量筒、纱布、研钵、三角烧瓶、注射器、载玻片,盖玻片,玻璃皿,小镊子,吸管,吸水纸等。

四、实验原理与方法

(一)原理

将某一种病毒或病原菌悬液灭活处理后获得的去毒疫苗接种于鱼体,使鱼体产生抗体,能抵御由该病毒或病原菌引起的疾病,即获得免疫。

(二)方法步骤

1. 组织浆灭活疫苗的制备:

选取患典型病症的鱼(活的或刚死的)→ 碘酒消毒(鱼体和解剖工具)→ 剖腹→ 取肝、脾、肾等内脏组织块→ 称重→ 剪碎、研磨→ 加无菌生理盐水(保存者5倍,即用者10倍)匀浆→ 双层纱布过滤→ 病毒或病原菌悬液→ 60~65℃水浴2小时→ 去毒疫苗→ 注射(鱼种0.1ml/尾,大鱼0.2ml/kg)。

如做病毒疫苗,在上述步骤中,肝、脾、肾等组织匀浆后,要通过低温离心

(30min,3000~3500r/min),取上清液再加青霉素1000单位/ml、链霉素

1000μg/ml;混匀后,再在4℃下过夜除菌后即为病毒悬液,再加福尔马林至最终浓度为0.1%;摇匀后,置32℃恒温水浴锅灭活72h。封口,贴上标签,4℃冰箱保存。

不是马上使用的疫苗,应加防腐剂(1%福尔马林)小瓶分装,石蜡封口,低温保存。

2. 疫苗的安全及效力试验:

生产实际应用中,在使用前,应对疫苗进行安全试验和效力试验。

(1)安全试验方法步骤如下:

①设置试验缸和对照缸各1只,各放入健康鱼种10尾,将温度逐渐升高至28℃。

②试验缸的鱼每尾腹腔注射上述制备的疫苗0.1~0.3ml,对照缸的鱼每尾腹腔注射无菌生理盐水0.1~0.3ml,饲养观察15天。

③如两缸鱼都不发病、不死亡,则说明注射技术过关,疫苗安全;如两缸鱼都死,则说明注射技术不过关,试验应重做;如对照缸的鱼不死,而试验缸的鱼发病且死亡,则说明疫苗灭活不够,须再灭活1次,灭活时间可比第一次稍短,灭活后再做安全性试验,如仍不安全,则这批疫苗只好废弃不要,证实安全了再进一步做效力试验。

(2)效力试验方法步骤如下:

对做过安全试验的两缸鱼,均采用每尾腹腔注射病毒或病原菌悬液0.1~0.3ml,继续饲养观察15天。如试验缸的鱼不发病、不死亡,而对照缸的鱼发病且死亡,则证明疫苗有效;反之,两缸鱼都发病死亡,则证明疫苗无效,应全部废弃不用。

在进行免疫注射时,先要用1/500~1/400的晶体敌百虫浸洗鱼体,其目的之一是麻醉鱼体、便于操作;之二是杀灭体表寄生虫等。注射方法采用腹腔或肌肉注射。

(三)注意事项:

1.保持器皿清洁,药品用量准确。

2.组织应充分研磨,使病原释放完全。

3.灭活的温度及时间要严格控制,时间太短,去毒效果差;时间太长,抗原性差。

4.有条件的,应进行安全试验。

5.防腐剂用量要适当,过多会影响抗原性。

作业:扼要总结鱼用土法疫苗的制作及其使用的经验,请分析成败的原因。

实验5. 鱼病的系统检查与诊断

一、实验目的

1. 学习鱼病的系统检查操作技术;

2. 学会鱼类微生物病、原虫病和蠕虫病等的诊断方法与技术。

二、实验内容

1. 系统检查1—2尾病鱼,熟悉鱼病的检查步骤、检查顺序、检查标准及操作技术要点;

2. 观察一些常见的病鱼标本,识别各种传染性鱼病和寄生性鱼病的主要症状,初步学习鱼病的诊断方法。

三、材料与仪器用品

1.实验材料:

活的或刚死的病鱼(如黄鳝、鲤鱼和鲫鱼等),鱼类常见微生物病、原虫病和蠕虫病的病鱼浸制标本,各种鱼类微生物病、原虫病和蠕虫病的图片软件资料。

2. 仪器用品:

生物显微镜,连续变倍体视镜,显微数据图像采集系统,多媒体教学系统,电子天平等;解剖器具、尺子、载玻片、盖玻片、湿布、生理盐水、培养皿、记录本、吸管、吸水纸等。

四、实验原理与方法

(一)鱼体检查

病体鱼的检查包括肉眼检查(目检)和显微镜检查(镜检)。

1.检查步骤:

编号(地名 + 双号码,例:湘10-3)→ 记录时间、地点→ 种类鉴定→ 称重→ 测量大小(全长、标准长、体高)→ 记录年龄→ 肉眼检查体表→ 逐个器官检查(先肉眼、后镜检)。

2.检查顺序:

粘液→ 鳍→ 鼻腔→ 血液→ 鳃→ 口腔→ 脂肪组织→ 肠胃→ 肝→ 脾→ 胆囊→ 心脏→ 鳔→ 肾→ 膀胱→ 性腺→ 眼→ 脑→ 脊髓→肌肉。

3.检查标准:检查时,以体表、鳃和消化道为重点,可参考下列标准。

(1)体表粘液:检查鱼体左右两侧。

(2)鳍:将各种鳍条都剪下,加少量清水于玻璃板上,逐个检查。

(3)鳃:取左右第一、二鳃片于玻片上,加少量清水,先观察,再镜检。

(4)鼻腔:取出粘液,左右各检查一片。

(5)眼:眼珠、玻璃液,左右各查一片。

(6)口腔:上下颌各查一片。

(7)肠道:分前、中、后三段,每段检查二片。

4.注意事项:

(1)检查时保持鱼体湿润,不可由其在空气中干燥。

(2)取内脏时,要保持器官的完整,不混淆、污染。

(3)取出的器官加少许生理盐水,以防干燥。

(4)用过的器具洗净后方可再用。

(5)一时难以诊断的病鱼,要注意保留标本。

(6)做好记录。

(二)现场调查

1. 了解病鱼在池中的各种现象

急性型的病鱼,一般在体色和体质上与正常鱼差别不大,仅病变部位稍有变化,一旦出现死亡,死亡率随即急剧上升,常在短期内出现死亡高峰。而慢性型的病鱼则

往往体色较黑,体质瘦弱,离群独游,活动缓慢,死亡率一般是缓慢上升,在比较长的时间内出现死亡高峰。

还有一种情况,病鱼的体色和体质都变化不大,但鱼在池中表现出不安状态,一时上跳下窜,一时急剧狂游。出现这种现象,可能由两种因素:或因体外寄生虫(如鲺)的侵袭,或由水中有毒物质(如农药、工业废水)引起。

2. 了解饲养管理情况

对施肥、投饵、放养密度、规格与品种、动网和各种操作,以及历年来发病的情况等等,应做详细的了解。此外,对气候变化和敌害(水兽、水鸟、水生昆虫等)的发生情况也应同时了解。

3. 了解水质变化

包括测定水的pH值和溶氧量,化验分析水化学成分。

根据以上鱼的症状和流行情况进行初步诊断,鉴定出病原体后可确诊。

作业:扼要总结鱼病的系统检查操作技术要点,并对所检病鱼做出初步诊断结果。

水产动物疾病学实习

一、实习目的

熟悉并掌握常见鱼病及其它水产动物疾病的调查、诊断和防治技术,培养学生动手操作的能力和解决生产实际问题的能力。

二、实习内容

1. 鱼病的现场调查、诊断及池塘防病、治病技术操作;

2. 野外鱼用中草药的识别采集和病鱼、病原体标本的收集与保存。

三、时间安排

时间为1周,穿插在水产养殖生产实习中进行。

四、实习方法及步骤

(一)鱼病的现场调查方法

表2 鱼病现场调查记录表

发病时间:年月日

地点:,养鱼场(户):养鱼池(塘)

环境:水源,水域面积

平均水深(厘米),水色

底质, pH

周围环境

饲养管理:放养日期,鱼种来源

放养规格,放养密度

混养情况

。鱼类生长:规格厘米

清塘消毒情况:

。防治情况:

。发病史:

。(二)现场检查基本方法

1. 一般性检查:

主要采用目检的方法。适合于检查一些病症明显或肉眼可以看到的病原体。即用肉眼检查病鱼体鳃部等的症状和大型的寄生虫。如草鱼体表局部或大部分充血、发炎溃烂、鳞片脱落,则可初步诊断为赤皮病。鲢、鳙鱼体表有针状的锚头鳋虫,被锚头鳋寄生的地方,四周发炎、红肿,则可诊断为锚头鳋病。

2. 系统检查:

在一般性检查基础上,特别是在一些症状不明显的可疑病情况下,一般都应作系统检查。其方法主要采用显微镜对病体材料进行检查,或进行病原菌分离、或做有关功能性的检测。如对病鱼镜检的器官有:体表、鳃、口腔、脂肪组织、胃、肠、肝、脾、胆囊、肾脏、心脏、鳔、膀胱、性腺、眼、脑、肌肉等。检查这些器官或部位的病变情况,镜检这些部位的病原体等。

(1)镜检病鱼体表黏液:用解剖刀或镊子刮取鱼体表的黏液,用载玻片(即用镊子取少许黏液放在载玻片上,加滴清水,盖上载玻片压平)放在显微镜下检查(由低倍到高倍);或用压展法(即把刮下的黏液全部放在玻璃板(6×12cm)上,再用一块同样大小的玻璃板盖上压成薄片)放在解剖镜下检查。黏液中一般常见的寄生虫有:波豆虫、隐鞭虫、孢子虫、小瓜虫、车轮虫、线虫、吸虫、绦虫、锚头鳋、中华鳋等。

(2)镜检查病鱼鳃:用载片法,在显微镜下检查鳃组织。先用低倍镜检查,看是否有比较大型的寄生物,而后,用中倍和高倍镜检查。鳃上一般常见的寄生虫有:水霉、鳃霉、隐鞭虫、孢子虫、车轮虫、毛管虫、斜管虫、半眉虫、小瓜虫、指环虫、鳋类等。

(3)镜检病鱼肠、胃:先把胃肠外壁的脂肪组织除净,把消化道前后拉直摆在解剖盘内,把胃(有胃鱼)剪下剖开,刮取胃内食物,用压展法镜检。把肠分为前、中、后三部分检查。把前肠、中肠、后肠分别剪开,用镊子各取一点内含物(最好是从肠内壁刮下的),用载片法检查。肠内壁的黏液全部刮下,用压缩法检查。消化道常见的寄生虫有:六鞭毛虫、变形虫、孢子虫、艾美虫、肠袋虫、复殖吸虫、线虫、绦虫、棘头虫等。

(4)镜检病鱼肾脏:肾要分前、中、后三部分检查。用镊子分别从肾的三个部位取少许组织,用载片法镜检。肾脏中常见的寄生虫有:孢子虫、艾美虫、锥体虫、吸虫、线虫等。

(5)镜检病鱼眼睛:用镊子从鱼眼窝内挖出眼球,放在载玻片或玻璃板上剪破眼球,取玻璃体和水晶体,用压展法镜检。可发现有吸虫幼虫。幼虫乳白色,较透明,能蠕动。

(三)野外渔用中草药的识别与采集

(略)

(四)病鱼及病原体标本的收集与保存

见参考书目3、8、9、12。

(五)水产药物用药量计算

1. 体内用药的药量计算

水产动物疾病防治,体内用药剂量按体重计算。对内服药来说,这里指的体重不仅是患病的水产动物的体重,也包括未生病的水产动物体重在内。在估计养殖水体中水产动物体重时,可根据放养时的总尾数和总重量及现时的生长情况来估算。实际的投药量应等于投药标准量乘以水产动物总重量(即投药量 = 投药标准量×水产动物总重量)。注射药则按实际的病体重量(个数)来计算。实际用药量等于用药标准量乘以病体重量(个数)。

2. 体外用药的药量计算

水产动物病害防治用药量的计算,体外用药的剂量,以水体的体积为单位计算。即水体的体积乘以所用药物浓度,得出总的用药量。计算公式为:

总用药量(g)= 水体体积(m3)×药物浓度(g / m3)

或总用药量(mg)= 水体体积(L)×药物浓度(mg / L)

治疗水产动物疾病的药物用量(见表3)。

表3 治疗鱼病的药物用量对照表

物浓度

0.1 0.2 0.5 0.7 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 4.0 5.0

水体体积

1 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 4.0 5.0

2 1.0 1.4 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10

5 1.0 2.5 3.5 5.0 7.5 10 12.5 15 20 25

10 1.0 2.0 5.0 7.0 10 15 20 25 30 40 50

50 5.0 10 25 35 50 75 100 125 150 200 250

100 10 20 50 70 100 150 200 250 300 400 500

150 15 30 75 105 150 225 300 375 450 600 750 200 20 40 100 140 200 300 400 500 600 800 1000 250 25 50 125 175 250 375 500 625 750 1000 1250 300 30 60 150 210 300 450 600 750 900 1200 1500 350 35 70 175 245 350 525 700 875 1050 1400 1750 400 40 80 200 280 400 600 800 1000 1200 1600 2000 450 45 90 225 315 450 675 900 1125 1350 1800 2250 500 50 100 250 350 500 750 1000 1250 1500 2000 2500 550 55 110 275 385 550 825 1100 1375 1650 2200 2750 600 60 120 300 420 600 900 1200 1500 1800 2400 3000 650 65 130 325 455 650 975 1300 1625 1950 2600 3250 700 70 140 350 490 700 1050 1400 1750 2100 2800 3500 750 75 150 375 525 750 1125 1500 1875 2250 3000 3750 800 80 160 400 560 800 1200 1600 2000 2400 3200 4000 850 85 170 425 595 850 1275 1700 2125 2550 3400 4250 900 90 180 450 630 900 1350 1800 2250 2700 3600 4500 950 95 190 475 665 950 1425 1900 2375 2850 3800 4750 1000 100 200 500 700 1000 1500 2000 2500 3000 4000 5000

注:表中药物浓度单位为ppm(10-6),用药量为g,水体体积为m3。如表上没有需要找的水体或浓度时,可以把表上

二三个水体和浓度数相对照的用药量相加。

应用举例:

(1)全池泼洒法用药浓度为1g / m3水体,测得池水体积为300 m3。我们可从表中横行第5行、竖行第10行交叉处的数字为300g,得出泼洒的总用药量为300g。

水产动物疾病学综合实验2015

水产动物疾病学综合实验安排 第一天第二天第三天第四天第五天 上午现场调查 给药方法操作: 泼洒法 挂袋挂篓 口服法鱼苗鱼种检查 成鱼检查 收集 锥体虫并染 色 染色: 锚头鳋、 中华鳋、 鲺 考试 下午鱼类甲壳动物病及 其病原体的观察 收集锚头鳋、中华鳋等 成鱼检查 收集车轮虫、锚 头鳋、中华鳋、 鱼虱等 收集车轮虫 并染色 染色交寄生虫染 色切片标本

水产动物疾病学综合实验指导 一、实验目的与要求: 1. 水产动物疾病学综合实验是为了满足现代水产养殖行业对生产、培养科研技术操作人员的需要,使学生掌握水产动物疾病学的基本知识及基本技能,同时培养学生的创新、创业及社会服务能力,成为水产养殖行业防病治病的技术人才。 2. 通过实验了解水产动物疾病种类及其特点;能较准确地诊断水产动物疾病。 3. 能正确地使用渔药,能有效地防治水产动物疾病。 二、实验内容: 1. 现场调查; 2. 渔药使用:泼洒法;挂袋挂篓法;口服法; 3. 显微镜诊断疾病; 4. 寄生虫标本的收集与染色; 三、实验操作及其步骤: 1.现场调查: 池塘是水生动物生存的基础,疾病的发生除了由病原生物直接感染和侵袭外,首先应了解池塘周围的环境和水体物理、化学因素的变化对养殖生物发病的影响。发病现场的调查可为全面查明发病原因,及时发现和正确判断病鱼提供依据。 ①调查发病养殖水体环境和发病史 发病养殖水体环境是指养殖水体周围有哪些工厂,工厂是否排放污(废)水,这些污(废)水是否含有对鱼类有毒的物质,是否经过处理后排放等。同时,还要着重强调调查养殖水体情况,了解放养前清塘的方法、清塘药物的剂量、清塘

后放养鱼种的时间、鱼种消毒的药量等。这些与养殖生物疾病的发生关系较大,同时还应了解养殖水体近几年发生疾病的危害程度,以及所采用的防治方法和效果等。 ②了解池塘水质状况 水温水温是养殖生物疾病发生的重要因素,水温高低与疾病的发生和流行有着密切的关系。一般病毒性鱼病和细菌性鱼病,在水温为25~30℃时传染性最强,32℃以上和18℃以下时感染减弱。因此江苏、浙江和湖南、湖北一带,每年5~6月和8~9月份是细菌病、病毒病流行高峰。暴发性鱼病需要需要的水温范围较大,流行的时间也更长些。有些寄生虫病,如车轮虫病和指环虫病是夏季危害鱼苗、鱼种的流行病,而有些疾病如水霉病、小瓜虫病、斜管虫病和鱼波豆虫病,通常在20℃以下发病,属于低温季节的流行病。 A.谁的酸碱度(pH)由于高密度养殖,池塘有机质多氢离子浓度微偏高 (pH偏低),易发生水霉病。酸性水也常常引起嗜酸性卵甲藻病的暴发。在氢离子浓度较低(pH较高)的盐碱养殖水体,水温较低时易大量繁殖三毛金藻,分泌毒素,致使池鱼中毒死亡。 B.溶解氧水中含氧量的多少关系到养殖生物的生长和生存,同疾病的发生 有明显的相关性。正常池塘的溶解氧含量要求4毫克/升,最低不能低于1毫克/升,对于各种不同的鱼类和不同的生长阶段,因其生理需求不一样而对溶氧的需求不同。溶解氧长时间过低会影响鱼类生长,降低鱼体的抗病能力,同时为病原菌的繁殖,生长创造了条件。 C.检测水质对发病水体进行水的pH、溶解氧、氨氮、亚硝酸盐、磷酸盐、 硬度、化学耗氧量的分析,了解水质的基本营养盐变化情况,对可能因环境因子致病的因素应根据具体情况选择分析。 ③调查饲养管理情况 A.了解鱼种放养情况: 放养数量过多就会出现相互拥挤、摄食不足、生长不良 的现象,导致养殖生物体对疾病的抵抗能力降低,有利于病原菌的感染和传播。夏花培育至冬片鱼种一般亩放养量为7000~10000尾。 B.了解投饲和施肥状况: 投喂的饲料不新鲜或不按照“四定”投喂,鱼类很容 易患细菌性肠炎病。夏天在池塘内施用不经发酵的有机肥,易使池塘水质恶化、缺氧、并促使致病菌核寄生虫大量繁殖。

实验动物学试题及答案

《实验动物学》复习题及答案 1、小鼠的给药途径有那些?请演示一下 答:灌胃(ig):左手将动物固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角进针,沿上腭向鼠口腔的后下方插入食管。 皮下注射(sc):常在背部皮下注射。一手固定动物,另一只手注射给药。 腹腔注射(ip):左手固定动物,右手持注射器,从下腹部外侧,呈45 度角刺入腹腔,进针约3~5mm。 肌内注射(im):多注射后肢股部肌肉,如一人单独操作,以左手拇指和食指抓住小鼠头部皮肤,小指、无名指和掌部夹住鼠尾及一侧后肢,右手持注射器刺入后肢肌肉给药 尾静脉注射(iv):将动物固定,鼠尾巴露在外面,用70%~75%的酒精棉球擦尾部,或将鼠尾浸入45~50℃温水中。待尾部左右静脉扩张后,左手拉着尾,右手进针 2、请演示一下大鼠、小鼠的捉持、固定及灌胃给药 答:(1)小鼠的捉持:捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾,置于实验台或鼠笼上,并稍向后拉;用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的皮肤,将鼠置于左手心中,拉直后肢,以无名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。 (2)大鼠的捉持:大鼠的捉拿时,可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾,放在实验台或鼠笼上,并稍向后拉;左手掌面向鼠背,食指和中指压住鼠的头顶,拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入,将鼠的两前肢卡住;或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。 (3)灌胃(ig):左手将动物固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角进针,沿上腭向鼠口腔的后下方插入食管。 3、大鼠的给药方法有那些?请演示一下常用的给药方法 答:灌胃(ig):左手将动物固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角进针,沿上腭向鼠口腔的后下方插入食管。 皮下注射(sc):常在背部皮下注射。一手固定动物,另一只手注射给药。 腹腔注射(ip):左手固定动物,右手持注射器,从下腹部外侧,呈45 度角刺入腹腔,进针约3~5mm。

水产动物疾病学试题库完整

水产养殖生物病害学疾病学 试卷一 一、填空题(每空0.5分,共30分) 1.病原是致病微生物和寄生虫的统称,其中,致病微生物包括__________、__________ 、____________和______________;寄生虫包括___________、______________、_____________、_____________、____________、___________和____________。 2.疾病的发生是____________、____________和____________三者相互作用的结果;疾病的经过包括____________、___________和___________三个时期;疾病的结局有_________、__________和__________三种方式。 3.决定病原体能否致病的因素包括____________、____________和______________;病原对宿主的危害作用包括_____________ 、____________、____________ 、____________和____________。 4.NH3-N中毒往往发生在水体的pH值偏_______时,H2S中毒容易发生在水体的pH值偏________时;浮头发生在水体的DO值偏________时,气泡病发生在水中的DO值偏_______时;如果浮头在夜晚12时就开始出现,说明______________,如果浮头仅发生在凌晨6时以后,则说明_______________。 5.细菌疫苗的类型主要有______________和______________;细菌疫苗的接种方法主要有______________、________________、______________和_____________。 6.抗原是能刺激机体产生__________和____________,并能与之结合而引起特异性

实验动物学重点题库

复习题 1、简述动物实验中3R原则内容及其意义。 Replacement 替代1.尽量使动物一体多用2、用低等动物代替高等动物3、尽量使用高质量动物4、使用恰当的试验设计和统计学方法 Reduction 减少1、用有生命的物体代替动物进行研究2、用数理化方法模拟动物进行研究Refinement 优化1、改善实验设施条件,提高动物实验质量2、改善控制技术,减少对机体的干扰 3R研究的意义 1、作为提升突破技术壁垒能力的载体和具体体现“标尺”,在经济发展和国际贸易中发挥不可替代的重要作用。 2、为科学发展提供了新思路和新方法。 3、体现时代发展、社会进步 2、简述免疫缺陷动物的概念以及生物学特性(主要是裸鼠和联合免疫缺陷鼠)。 指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。 一、T淋巴细胞功能缺陷动物:1、裸小鼠(nude mice):1)被毛生长异常,呈裸体外表。2)无胸腺,仅有胸腺残迹或异常胸腺上皮,不能使T-cell正常分化,导致细胞免疫力低下。幼龄鼠有残存的未分化的上皮细胞。3)B细胞功能正常,NK细胞活力增强。4)繁育能力差,乳腺发育缺损,以雄性纯合子与雌性杂合子繁育。5)T细胞缺陷可通过移植成熟T细胞、胸腺细胞或正常胸腺上皮得到校正。2、裸大鼠(nude rat):基因符号为rnu,一般特征似裸小鼠。1)发育迟缓,体重为正常大鼠的70%。2)裸大鼠较裸小鼠对多种传染病更敏感。3)比裸小鼠更强壮、寿命更长。4)体型较大,对大范围的外科手术方法较有利。二、联合免疫缺陷动物1、严重联合免疫缺陷小鼠(SCID mice):突变基因scid位于16号染色体。1)该突变基因造成编码Ig重链和TCR的基因重排异常,抑制B-cell和T-cell前体的正常分化。2)C.B-17Icr为携带来自C57BL/ka小鼠的免疫球蛋白重链Igh-1b等位基因的 BALB/cAnIcr的同源近交系。3)纯合子血清中无免疫球蛋白,淋巴结、胸腺变小,缺乏体液、细胞免疫功能。饲养于SPF环境中。4)通过移植人免疫组织或免疫细胞,可使SCID 小鼠具有人类部分免疫系统,称为SCID-hu小鼠。

医学实验动物学考试重点总结

名词解释:实验动物(laboratory animal):指经人工培育,对其携带的微生物、寄生虫进行严格控制,遗传背景明确,可用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学研究的动物。 实验用动物:是指一切用于实验的动物,除了符合严格要求的实验动物外,还包括家畜和野生动物等。 实验动物与实验用动物:遗传控制不同,微生物控制等级不同,培育的形质和目标不同。 人类疾病的动物模型:是指医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。 实验动物标准化:遗传质量标准化微生物质量标准化环境标准化营养标准化 按遗传控制标准,实验动物分为:近交系(CH3),突变系(裸鼠),杂交系(F1),封闭群(远交系)(KM小鼠,wister大鼠) 按基因型分:1、同基因型动物(如近交系、F1代) 2、不同基因型动物(如封闭群) 按微生物控制程度分级:普通级,清洁级,SPF级,无菌级(2001年版的国家标准中,大小鼠取消普通级动物,犬、猴只分普通级和SPF级,豚鼠、地鼠和兔仍然分4级) SPF动物定义:除清洁动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。(屏障环境中饲养,种子群来源于无菌动物或剖腹产动物。饲养管理同清洁动物) 无菌动物的特点:形态学及生理学特点: ①形态学:盲肠肥大(增大5~6倍),肠壁薄,易发肠扭转。心脏、肝脏、脾脏相对较小。 ②生理学: 血中无抗体,巨噬细胞吞噬能力弱。体内不能合成维生素B和K。无菌鸡生长较快、无菌豚鼠和无菌兔生长较慢。无菌大小鼠与普通大小鼠生长速度相同。

(3)饲养要求:隔离环境中饲养,种子群来源于剖腹产动物或无菌卵的孵化。由于肠道无菌,饲养困难,应注意添加各种维生素。每2~4周检查一次动物的生活环境和粪便标本。 悉生动物:概念:悉生动物是指在无菌动物体内植入已知微生物的动物。又称已知菌动物。植入一种细菌的动物叫单菌动物;植入两种细菌的动物叫双菌动物;植入三种细菌的动物叫三菌动物;植入多种细菌的动物叫多菌动物。(由于肠道接种有利于消化吸收的细菌,故饲养较无菌动物容易,形态学和生理学方面与普通动物无异。) 近交系:经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成,品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。 特点: 1、其基因纯合度达到98.6%,个体差异小,似同卵双生反应一致重复性好,用少量动物即可获得精确度很高的实验结果,个体相互之间可以接受皮肤、器官移植。 2、隐性基因纯合使许多病态性状得以暴露,可获得大量先天性畸形及先天性疾病的动物模型.如高血压、白内障、糖尿病.动物模型。 缺点:出现近交衰退。近交衰退是近交过程中动物群体由于基因分离与纯合发生一系列不利于个体或群体发育的变化和现象。 F1代动物:两个无关近交系杂交形成的第一代动物。 特点:虽然基因杂合,但个体之间基因杂合的一致,个体差异小。除具有近交系的优点,还具有生命力强耐受性强,可长期进行观察,具有杂交优势,个体相互之间可以接受皮肤、器官移植。 封闭群动物(远交系):以非近亲交配方式繁殖生产的一个实验动物种群,5年以上不从外部引新血缘或至少繁殖四代以上,在封闭条件下交配繁殖,保持了一定杂合性和群体遗传特征。每代近交系数增加量<1%。在人类遗传研究、药物筛选、毒物实验等方面起着不可代替的作用等。 突变系动物:指正常染色体的基因发生了变异,动物具有一种或多种遗传缺陷。例如:无胸腺裸鼠、严重联合免疫缺陷动物SCID小鼠。为肿瘤、免疫疾病的研究提供了理想的材料。

常用疾病动物模型

常用疾病动物模型 上海丰核可以为广大客户提供各种疾病动物模型定制服务,同时提供相关疾病模型的药物敏感性实验分析服务。 客户只需要提供疾病模型的用途及建模方法的选择,我们会根据客户的具体要求量身定做各种动物模型服务。

小鼠或裸 鼠 加贴近实际(八)心血管疾病模型 1. 动脉粥样硬化(高脂高胆固醇+维生素D喂养)兔高脂、高胆固醇饲喂兔造模,成 膜后血脂变化显著,为伴高血脂 症的动脉粥样硬化 4月血管组织病 理切片染色 2. 主动脉粥样硬化(高脂高胆固醇+主动脉球囊损伤)兔此模型用大球囊损伤加高脂饲 养方法成功建立兔主动脉粥样 硬化狭窄的动物模型,为相关基 础研究提供可靠模型。 2月动物实验模型病理切片展示 一、CCl4诱导的肝脏纤维化 简介:肝纤维化是肝细胞坏死或损伤后常见的反应,是诸多慢性肝脏疾病发展至肝硬化过程中的一个中间环节。肝纤维化的形成与坏死或炎症细胞释放的多种细胞因子或脂质过氧化产物密切相关。CCl4为一种选择性肝毒性药物,其进入机体后在肝内活化成自由基,如三氯甲基自由基,后者可直接损伤质膜,启动脂质过氧化作用,破坏肝细胞的模型结构等,造成肝细胞变性坏死和肝纤维化的形成。通过CCl4复制肝纤维化动物模型通常以小鼠或大鼠为对象,染毒途径主要为灌胃、腹腔注射或皮下注射。 动物模型图. 经过3个月的CCl4注射造模,小鼠的肝脏在中央静脉区形成了比较明显的肝纤维化,中央静脉之间形成了纤维桥接。(Masson染色) 二、CXCL14诱导的急性肝损伤动物模型

简述:CCl4是最经典的药物性肝损伤造模毒素之一,其在肝内主要被微粒体细胞色素P450氧化酶代谢,产生三氯甲烷自由基和三氯甲基过氧自由基,从而破坏细胞膜结构和功能的完整性,引起肝细胞膜的通透性增加,可溶性酶的大量渗出,最终导致肝细胞死亡,并引发肝脏衰竭。根据CCl4代谢和肝毒性机制可复制不同的肝损伤模型,其中给药剂量和给药方法是其技术关键。对于复制急性肝衰竭动物模型,往往采用大剂量一次性灌胃或腹腔注射给药。 图. (A) CCl4注射后0.5 d的HE染色表明CXCL14过表达增加了肝脏组织的嗜酸性变性面积(在照片中用虚线标记)(p < 0.05)。 (B) 1.5天组织样本的HE染色表明CXCL14过表达造成了比对照组更大面积的细胞坏死(p < 0.05)。 (C)同时还造成了中央静脉周围肝细胞中明显的脂肪滴积累。图中P和C分别表示动物模型的门静脉和中央静脉。KU指凯氏活性单位。 细胞凋亡检测结果 TUNEL标记没有显示CXCL14免疫中和小鼠和对照小鼠在凋亡细胞数量上的差异。C0, C1和C2分别是对照组0 d,1 d,和2 d样本,T1

实验动物学理论考试题

第一章复习题 1、何谓实验动物?实验动物学的研究内容? 2、3R的含义及拼写? 3、何谓动物福利,动物的五大自由? 4、实验动物在医学生物学中的地位和作用? 5、实验动物科学发展史上的里程碑是什么? 6、我国实验动物法规建设如何? 第二章复习题 实验动物遗传学控制分类 近交系的定义、特点及命名法 亚系、重组近交系、同源突变近交系、同源导入近交系的定义和命名 封闭群动物实验动物的定义、特点及命名法 杂交群动物实验动物的定义、特点及命名法 第三章思考题 1、普通级动物、清洁动物、SPF动物、无菌动物的概念。 2、不同等级的实验动物对实验结果的影响。 2、人兽共患病、动物烈性传染病主要病原体的名称。 3、淋巴细胞脉络丛脑膜炎、鼠痘、狂犬病、流行性出血热等疾病的传染源、传播途径、易感者和症状表现。 第四章复习题 1、实验动物营养学的概念。 2、实验动物饲料含的六大营养成分。 3、体内不能合成维生素C的实验动物有哪些。 4、啮齿类、兔、犬和猴的营养需要。 5、常用的实验动物饲料消毒灭菌方法 第五章复习题 1、实验动物的环境、外环境和内环境的概念? 2、以R=(A+B+C)×D+E说明环境控制的重要性。 3、影响实验动物的环境因素有哪些? 4、国标中对实验动物小鼠动物实验屏障设施的温度、湿度、噪声有哪些要求? 第六章复习题 1、屏障设施的概念? 2、屏障设施运行的四要素有哪些?各有何特点? 3、常用的小型独立实验动物设备有哪些? 4、在无人协助的情况下你如何应用清洁级小鼠在实验动物屏障设施内进行动物试验? 第七章复习题 各种动物的主要生物学特性及在医学生物学中的应用 第八章复习题 1、免疫缺陷动物 2、转基因动物(Transgenic animals) 3、克隆动物(cloning animal) 1、何谓实验动物和实验用动物? 实验动物(Laboratory animals)是指经人工饲育,对其携带的微生物实行控制,遗传背景明确或者来源清楚的,用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。

水产动物疾病学复习题

复习题 1、水产动物细胞和组织变性的类型有哪些? (1)颗粒变性:一种最早和最轻微的细胞变性,很容易恢复,其特点是变性细胞体积肿大,胞浆内水分增多,出现许多微细红染的蛋白性颗粒,故称颗粒变性。 (2).水泡变性水泡变性是指在细胞的胞浆内或胞核内出现多量水分形成大小不等的水泡的现象. (3).脂肪变性是指在实质细胞的胞浆内出现脂滴或脂滴增多的现象,简称脂变。 2、阐明寄生虫、宿主与外界环境三者之间的相互关系? 3、阐明水产动物疾病发生的因素? 1. 环境因素 A. 自然条件 1).养殖水体的空间因素: 养殖密度。2).养殖水体的水质因素:水质的好坏(溶氧、PH 值等)。3).养殖水体的底质因素: 淤泥的影响。 B. 人为因素 1)放养密度过大或搭配比例不当(青鱼与鲤鱼的搭配)。2)饲养管理不当(用药方法、用药量不当,饲料投喂不当等)3)机械损伤(操作不当造成鱼体受伤,而继法感染,引起发病,水霉病)。 c 生物因素 主要包括病毒、细菌、真菌、藻类、原生动物、蠕虫、蛭类、甲壳动物、钩介幼虫、螨类等生物性因素。 D 机体自身因素主要是指鱼体自身的抗病能力,这与鱼的种类、年龄、生活习性和健康状况等方面有关。 疾病的发生,不是孤立的单一因素的结果,而是外界条件和内在的机体自身的抵抗力相互作用的结果,要综合加以分析,才能正确找到疾病发生的原因,采取相应的治疗措施。 4、药物治疗过程中有哪些不良反应? (1)副作用:是指在常用治疗剂量时产生的与治疗无关的作用或危害不大的不良反应。 (2)毒性反应:是药物对机体的损害作用。一般是剂量过大,用药时间过长或个体敏感性较高时引起。(3)过敏反应: (4)继发反应:是药物治疗作用引起的不良反应。 (5)后遗效应:指停药后血药浓度已降至阈值以下时的残存药理效应。 5、阐明水产动物抗菌药物的作用机制? 抗菌药物的作用机制 (1)抑制细胞壁的合成:细菌胞体外有一层坚韧的细胞壁,具有维持细菌形态和保护功能。抗菌药物(如青霉素类)可药物通过各种环节抑制细胞壁粘肽的合成,最终使细胞壁缺损,导致菌体破裂溶解死亡。(2)增高细菌胞浆膜的通透性:位于细胞壁内侧的胞膜是脂质和蛋白质分子构成的渗透屏障,具有物质交换,合成粘肽,保护菌体等功能。一些抗菌药物(多粘菌素、制霉菌素等)可与细胞膜结合导致胞浆膜通透性增加,使细菌体内氨基酸、嘌呤、蛋白质、盐类外逸,导致细菌死亡。 (3)抑制蛋白质合成如四环素类、大环内酯类等。 (4)抑制叶酸代谢:磺胺类抑制细菌二氢叶酸合成酶,抑制四氢叶酸合成,阻碍核酸前体物质嘌呤、嘧啶的形成,从而抑制细菌的生长繁殖。 (5)抑制核酸合成:喹诺酮类可抑制DNA螺旋酶,进而抑制DNA的合成。 6、水产动物疾病的预防有哪些措施? 预防水产动物疾病的措施 1.改善生存环境 (1)建设符合防病要求的养殖场 A 选择良好的水源条件水源充沛,无污染 B科学地建设进排水系统 (2)清整养殖场 A 清除池底过多的淤泥 B 药物清塘 a. 生石灰清塘(图1) 干池清塘仅留5~10厘米深的水,每667平方米(相当于1亩)用生石灰50~70公斤。 带水清塘每亩水深1米用125~150公斤 b. 漂白粉清塘 按照鱼池中水的容量进行计算,每立方米用药量为20克。 (3)保持良好的水质 A 定期泼洒生石灰调节水的PH值 B 定期加注新水,保持适宜水质 C 适时开动增氧机,改善水体的溶氧状况 D 采用光合细菌、硝化细菌等改善水质 2. 增强养殖动物机体抗病能力 (1)加强饲养管理 A 合理放养合理的放养密度与放养比例 B 科学投饵与施肥 a.投饵:品质良好,营养全面,做好“四定” b.施肥:应根据池底质的肥瘦以及肥料种类等灵活掌握,有机肥应进行发酵处理。

水产动物疾病学复习题

水产动物疾病学复习题 ?一、名词解释(共8分,每小题2分) ?继发性感染:已遭受病原感染的个体再次遭到不同病原的侵袭。 ?原发性感染:指病原体直接浸入健康鱼体而引起的鱼病。 ?再感染:第一次患某种疾病痊愈后,第二次又患同样的疾病。 ?重复感染:第一次患某种疾病后,一般症状已消失,但仍遗留有病原体,机体和病原体间保持着暂时的平衡,当新的同种病原体入侵后,平衡被破坏,就会重新发病。 ?拮抗作用:当两种或两种以上药物共同使用时,其作用因相互抵消或减弱,称拮抗作用。 ?充血:机体的某一区域(组织或器官)的含血量超过正常的现象。 ?栓塞:在正常状况下并不存在于血液中的某些物质或小块,随血流而被带到较小的血管中,引起管腔阻塞的过程。 ?炎症:机体遭受有害刺激(如微生物、寄生虫、理化因子等)后所产生的防卫性反应,其作用为清除入侵体内的有害刺激物。 ?水肿:组织间隙大量液体的积储。 ?萎缩:物质代谢发生改变,使组织或器官的体积较正常缩小的过程。 ?湖靛:池中微囊藻(主要是铜绿微囊藻及水花微囊藻大量繁殖)在水面形成一层翠绿色的水花。 ?泛池是因为池塘水体中溶解氧降低到不能满足鱼类生理上最低需要时,造成鱼类呼吸困难,窒息死亡。?二、填空题(共17分,每空0.5分) ?1、根据症状区分,草鱼出血病有(肠炎型、红肌肉型、红鳍红鳃盖型)三种类型。 ?2、贝类的血液一般无色,如扇贝、牡蛎、文蛤等,是因为其血液含(血蓝蛋白)。 ?3、有些种类血液是红色的,如泥蚶,魁蚶等,是因为其血液中含(血红蛋白)。 ?4、锥体虫寄生在鱼的(血液)里,通过(水蛭)传播。 ?5、病原对宿主的危害主要有(夺取营养、机械损伤、分泌有害物质)三个方面。 ?6、药物的剂量必须达到(最小有效剂量)才能产生效应,但是超过(最大剂量)又会引起中毒。 ?7、敌百虫在碱性条件下迅速降解为(敌敌畏),其毒性增强近10倍,它是一种胆碱脂酶抑制剂。 ?8、草鱼细菌性烂鳃病的典型症状是(烂鳃和开天窗)。 ?9、白头白嘴病主要危害鱼的(苗种)阶段。 ?10、漂白粉是一种混合物,它的有效成分是(次氯酸钙)。 ?11、病毒进入机体的途径大致可分为两大类,即(水平感染)与(垂直感染)。 ?12、发现鱼浮头的急救办法有(加注新水、开机增氧机、泼洒增氧药物)等。 ?13、鱼苗转塘时,两水体的温差不超过±(2)℃,鱼种转塘时,两水体的温差不超过±(5)℃。 ?14、在复口吸虫的生活史中,(螺类)为第一中间宿主,(鱼类)为第二中间宿主,鸥鸟为终末宿主。?15、病鱼“跑马”的主要原因是(缺乏适口饵料)(池塘漏水)(车轮虫寄生)。 ?16、竖鳞病的主要症状为(全身鳞片竖立),主要危害(鲤鱼、金鱼)。 ?17、疾病发生与(环境)、病原体与鱼类的体质有关。 ?18、大黄使用前用(氨水)浸泡12小时,目的是使蒽琨衍生物游离出来。 ?19、鲢碘泡虫主要寄生在白鲢的(神经系统)和(感觉器官)。 ?20、烂鳃病的主要症状表现为病鱼鳃丝(溃烂),常粘有污泥。患严重烂鳃病的病鱼,鳃盖内表皮中间部分常被腐蚀成一个圆形或不规则的病灶区,这个病灶区俗称(开天窗)。 ?21、水产动物传染性疾病的病原体可大致分为(病毒)、细菌、真菌和(单细胞藻类)。 ?22、九江头槽绦虫生活史需经(卵)、(钩球蚴)、(原尾蚴)、(裂头蚴)才能发育为成虫。 ?23、九江头槽绦虫的中间寄主是(剑水蚤)。九江头槽绦虫寄生在鱼体的(肠道)部位。 ?24、清塘时经常使用的两种药物有(生石灰)和(漂白粉),其中(生石灰)还具有增加肥效和调节pH的作用。?25、疾病的发展过程可分为(潜伏期)、(前驱期)、(发展期)三个时期。

实验动物学重点整理

实验动物学重点整理 1大小鼠年龄、体重、寿命的比较数据? 成年动物的年龄、体重和寿命比较 小鼠大鼠 成年日龄(天)65-90 85-110 成年体重(克)20-28 200-280 平均寿命(年)1-2 2-3 2动物实验的对照类型? (一)空白对照: 不给任何措施的情况下观察动物自发变化的规律。家兔白细胞数每天上下午有周期性的生物钟变化。 (二)实验对照: 采用与实验组相同操作条件下对照,如给药实验中的溶媒(Nacl),手术,注射以及观察时的抚摩等都可以对动物发生影响。有人报告,针刺犬的人中穴对休克、心脏血液动力学有改变,但采用空白对照(不针刺)不够,应该设有针刺其它部位或穴部的实验对照。 (三)有效(标准)对照: 常用于药物研究。对一新药疗效可用一已知有效药或能引起标准反应药物做对照,可考核实验方法可靠性,又可通过比较,了解新药疗效和特点(普鲁卡因---对皮肤黏膜穿透力弱,用纳塞卡因---穿透力强,作用快、持久)。(四)配对对照: 同一个体不同眼睛比较对照期和实验期差异(左眼试验,右眼对照);同一种动物后代分成左右两部分进行对照和实验以比较差异,此法可大大减少抽样误差。实验中可用同卵双胎或同窝动物。 (五)组间对照: 将实验对象分成两组或几组比较其差异。这种对照个体差异和抽样误差比较大,可用交叉对照方法以减少误差。观察某药物疗效可用两组犬先分别做一次实验和对照,再相互交换,以原实验组做对照组,原对照组做实验组重复第一次实验,观察疗效或影响,切记检查指标和条件要等同。 (六)历史对照与正常值对照: 此种对照要慎重,similar background ---条件、背景、指标和技术方法相同才进行对比,否则得出不恰当的甚至错误结论。 3转基因动物的概念、制备过程? 转基因动物: 用物理、化学、生物手段将确定外源基因通过生殖细胞或早期胚胎导入动物染色体,其基因组内稳定整合导入外源基因,能遗传给后代的一类动物,使其获得人类需要新功能。 技术程序:

水产动物疾病学综合实验2015(精)

水产动物疾病学综合实验安排 水产动物疾病学综合实验指导 一、实验目的与要求: 1. 水产动物疾病学综合实验是为了满足现代水产养殖行业对生产、培养科研技术操作人员的需要,使学生掌握水产动物疾病学的基本知识及基本技能,同时培养学生的创新、创业及社会服务能力,成为水产养殖行业防病治病的技术人才。 2. 通过实验了解水产动物疾病种类及其特点;能较准确地诊断水产动物疾病。 3. 能正确地使用渔药,能有效地防治水产动物疾病。 二、实验内容: 1. 现场调查;

2. 渔药使用:泼洒法;挂袋挂篓法;口服法; 3. 显微镜诊断疾病; 4. 寄生虫标本的收集与染色; 三、实验操作及其步骤: 1. 现场调查: 池塘是水生动物生存的基础,疾病的发生除了由病原生物直接感染和侵袭外,首先应了解池塘周围的环境和水体物理、化学因素的变化对养殖生物发病的影响。发病现场的调查可为全面查明发病原因,及时发现和正确判断病鱼提供依据。 ①调查发病养殖水体环境和发病史 发病养殖水体环境是指养殖水体周围有哪些工厂,工厂是否排放污(废)水,这些污(废)水是否含有对鱼类有毒的物质,是否经过处理后排放等。同时,还要着重强调调查养殖水体情况,了解放养前清塘的方法、清塘药物的剂量、清塘 后放养鱼种的时间、鱼种消毒的药量等。这些与养殖生物疾病的发生关系较大,同时还应了解养殖水体近几年发生疾病的危害程度,以及所采用的防治方法和效果等。 ②了解池塘水质状况 水温水温是养殖生物疾病发生的重要因素,水温高低与疾病的发生和流行有着密切的关系。一般病毒性鱼病和细菌性鱼病,在水温为25~30℃时传染性最强,32℃以上和18℃以下时感染减弱。因此江苏、浙江和湖南、湖北一带,每年5~6月和8~9月份是细菌病、病毒病流行高峰。暴发性鱼病需要需要的水温范围较大,流行的时间也更长些。有些寄生虫病,如车轮虫病和指环虫病是夏季危害鱼苗、鱼种的流行病,而有些疾病如水霉病、小瓜虫病、斜管虫病和鱼波豆虫病,通常在20℃以下发病,属于低温季节的流行病。

实验动物学重点

实验动物学重点

1.实验动物学绪论 2.实验动物质量控制 3.常用实验动物 4.实验动物营养与饲料 5.实验动物环境和设施 6.基因工程动物 7.“3Rs”理论及其研究进展 8.怎样才能作好动物实验 实验动物学绪论 实验动物学:以生物学、动物科学、动物医学、医学,药理学、毒理学等学科为基础,综合发展而形成的一门覆盖 面极广的边缘学科。 实验动物学包括:实验动物,实验动物医学,比较医学,动物实验 实验动物:是指经人工培育的、遗传背景清楚、对其携带微生物和寄生虫实行控制、用于科学实验、教学、检定及 药品、生物制品生产的动物。 实验用动物:实验动物、家畜、野生动物、伴侣动物 概况:实验动物科学内容:实验动物、实验动物医学、比较医学、动物实验 1988年,国家科委发布《实验动物管理条例》 1996年10月,《北京市实验动物管理条例》出台,于2005年1月1日实施 实验动物伦理:是人与实验动物关系的伦理信念、道德态度和行为规范。主要体现在尊重实验动物的价值和权利。 实验动物福利:实验动物的一种康乐状态。在此状态下,其基本需求得到满足,而痛苦被减至最小。 五项基本福利:一,提供适当的清洁饮水和保持健康和精力所需要的食物,使动物不受饥渴之苦 二,提供适当的栖息场所,能够舒适地休息

和睡眠,使动物不受困顿不适之苦 三,做好防疫,预防疾病和给患病动物及时诊治,使动物不受疼痛、伤病之苦 四,保证拥有良好的条件和处置(包括安乐死),使动物不受恐惧和精神上的痛苦 五,提供足够的空间、适当的设施以及与同类动物伙伴在一起,使动物能够自由表达正常的习性 动物实验需要考虑实验动物伦理的几个环节:实验目的确定和必要性评估、实验设计遵循3Rs原则、实验操作过程避免或减轻动物疼痛及恐惧、日常饲养及护理、安乐死 CRO:Contract Research Organization Include: Clinical trial、Preclinical research AAALAC认证(国际实验动物管理评估和认证协会)实验动物学发展趋势:基因修饰技术运用; 实验动物福利与“3Rs”原则; 实验动物商品化及SPF动物广泛应用; 人源化小鼠模型的建立。 实验动物科学发展简史:1909年,Prof. Little 采用近交方法 培育出首个近交系小鼠DBA 1943年,美国Dr. Reynier研制出第一台金属隔离器,饲养无菌 大鼠 1948年,美国成立实验动物管理小组,后又成立实验动物科 学学会(AALAS) 1966年,美国国会批准《实验动物福利法案》 1982年,第一例转基因小鼠问世 实验动物学、比较医学等专业的设立及建立相应培训制度 我国实验动物科学发展概况:1918年,原北平中央防疫处开 3

渔药与人药、兽药的差异

渔药与人药、兽药的差异 实验课程:水产动物疾病学 姓名:刘保 学院:水产学院 学号:2009308200422 专业班级:水族科学与技术0901班 指导老师:顾泽茂 完成时间:二○一二年二月二十五日

渔药与人药、兽药的差异 刘保 (华中农业大学水产学院,武汉430070) 摘要 随着我国医药学和畜牧业的快速发展,人药、兽药及渔药的需求量越来越大,人药、兽药及渔药的生产厂家和药物品种也越来越多。同时,由于药物生产和经营管理体制不顺、机制不全,致使大量的伪劣假冒和低质药品充斥市场,一些地方不规范用药、滥用药和凭经验用药现象时有发生,更有甚者,人药、兽药和渔药不分,用兽药替代渔药,用人药代替兽药或渔药,滥用现象十分严重,也十分普遍。虽然这类药物疗效显著,但引发的副作用较多,后果也较严重,如引发环境污染、引起药害、增加用药成本、耽误治疗良机、导致品种质量安全问题等。 为尽快扭转这种局面,大力普及规范用药知识,笔者在下面将对人药、兽药、渔药进行详细区分,对这些年来用药过程中存在的主要问题加以梳理、分析和归纳,就药物的合理使用加以说明,供广大从事医药事业特别是医生和兽医以及用药指导技术人员了解和掌握。 关键字:人药;兽药;渔药;药物;水产养殖

目录 1.药物 (4) 1.1.兽药 (4) 1.1.1.定义及分类 (4) 1.1.2.生产现状 (4) 1.1.3.成分 (5) 1.2.渔药 (6) 1.2.1.定义及分类 (6) 1.2.2.生产现状 (6) 1.2.3.疗效 (6) 1.3.人药 (7) 1.3.1.定义及分类 (7) 1.3.2.自身特性 (7) 2.药物滥用 (7) 2.1.现状 (8) 2.2.原因 (9) 2.3.危害 (10) 3.兽药、渔药和人药的区别 (10) 3.1.兽药与渔药 (10) 3.2.兽药与人药 (11) 4.科学用药方法 (12) 4.1.怎样安全使用兽药 (12) 4.2.怎样安全使用渔药 (13) 4.3.怎样有效遏制药物滥用现象 (14) 参考文献 (16)

实验动物学试题及答案

实验动物学试题及答案 一、填空题 1、实验动物学研究的对象实验动物、动物实验。 2、根据我国实际,实验动物被分为四级,分别是一级为普通动物、二级为清洁动物、三级为SPF动物、四级为无菌动物(包括悉生动物)。国际上公认的标准实验动物是SPF 动物,我国公认的标准实验动物是清洁动物。 3、通常称近交系动物为品系,称封闭群动物为品种。 4、实验动物的年龄通常根据体重来判断。 5、裸鼠除全身无毛外,还有裸体和无胸腺,并随年龄增加皮肤变薄,头颈部皮肤皱褶,发育迟缓等特征。 6、药物筛选实验首选动物为小鼠;过敏实验首选动物为豚鼠;发热研究首选动物为家兔;实验外科学首选动物为犬;人类脊髓灰质炎等病的研究最理想的实验动物是非人灵长类动物;做反射弧分析实验常用实验动物是青蛙。 7、实验动物常用给药途径有经口给药、注射给药等。 二、名词解释 1.实验动物:是指经人工饲养、对其携带的微生物、寄生虫实行控制,遗传背景明确或来源清楚的,用于科学研究、教学、生产、鉴定、及其他科学研究的动物。 2.近交系动物:是指至少经过20以上连续全同胞或亲子交配,品系内所有个体都可追溯到其源于第20代或以后代鼠的一对共同祖先的动物群。 3.杂交优势:杂种一代具有较强的生命力,对疾病的抵抗力强,寿命较长,容易饲养,在很大程度上克服了近交衰退现象的优越性。 4.封闭群动物:不以近交形式进行交配,也不引入任何外来血缘,在封闭条件下交配繁殖,从而保持群体的一般遗传特性,又具有杂合性的一个实验动物种群。我国制定的标准作如下定义:以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群,在不从其外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上,称为一个封闭群,或叫远交群。 5.诱发性动物模型:是指使用物理、化学、生物等致病因素作用于动物,造成动物组织、器官或全身一定的损害,出现某些类似人类疾病的功能、代谢或形态性结构方面的病变,即人为地诱发动物产生类似人类疾病的动物模型。

水产动物疾病学复习资料

疾病学复习资料 病原对宿主的危害 1夺取营养 2机械损伤 3分泌有害物质 有些病原有严格的专一性,如鰤本尼登虫,就专门寄生在鱼的皮肤;也有对宿主非专一性,如刺激隐核虫可以寄生在数十种海水鱼,小瓜虫可寄生多种淡水鱼。 疾病的控制包括三部分;诊断、预防、治疗 疾病诊断基本原则: 1诊断方法:先外后内、先腔后实、先肉眼后镜检。 2诊断材料:具典型症状的活的或刚死不久的材料。 诊断流程 宏观观察诊断 1观察症状和寻找病原:体液、体表、肌肉、内脏等部位有无颜色变化、有无炎症、充血、出血溃疡等症状,肉眼检查有无异 物。 2调查饲养管理情况:养殖品种和放养密度,放养量,摄食情况和活动情况。 疾病的综合预防 水产疾病的防治原则:无病早防、有病早治、防重于治 为什么水产病害学要实施综合预防? 发现难生活于水中,不易发现 诊断难原因复杂,常为综合或并发感染 治疗难 a 水体施药用量大,治疗难以彻底 b 患病后食欲减退,口服用药难以理想 c 许多药物具有抗药性,反复使用无效 疾病的综合预防措施 1彻底清池清淤、药物消毒 2 保持适宜的水深和水色 A水深的调节:以淡黄色、淡褐色、黄绿色为好 黄褐色、绿色、蓝绿色、红色 b水色的调节方法:换水、适当改变水体的营养成分等 c科学用水和管水:PH、溶氧度、盐度、亚硝酸盐等指标。 3放养健壮的种苗和适宜的密度 4饵料应质优量适

5改善养殖水体生态环境条件 6操作要细心 7经常进行检查—寻唐 8在日常管理中要防治病原传播 9定期药物预防 10完善并严格执行检验检疫制度,建立预警预报。 11人工免疫 12选育抗病力强的新品种:SRP品种选育、杂交育种。 疾病的治疗 目的:通过药物控制或消灭病原或改善环境及营养条件 治疗的时机:早发现早治疗 一改善和优化养殖环境 a合理放养放养密度要合理;混养的种类搭配要适合。 b保证充足的溶解氧 c不滥用药物 d适时适量使用环境保护剂石灰类、光合细菌等 二增强养殖群体抗病力 1、培养和放养健壮苗种 1)SPF亲本 2)PVP-1洗卵 3) 使用清洁水 4)忌高温育苗、忌滥用抗生素 5)饵料优 2、免疫接种 3、选用抗病力强的养殖种类 4、降低应激反应 应激源:凡是偏离养殖动物正常生活范围的异常因素,如高 温等 应激反应:养殖动物对偏离养殖动物正常生活范围的异常因 素的躲避现象 三控制和消灭病原体 1使用无病原污染的水源 2池塘彻底清淤消毒 3强化疾病检疫 4建立隔离制度 5实施消毒措施 四加强饲养管理 思考题:1、水产动物疾病学 2、水产动物疾病发生的原因 3、水产动物疾病的诊断流程(诊断原则) 4、水产动物疾病的综合预防措施?

我国水产动物疾病学研究进展及发展趋势

本科选修课论文 题目我国水产动物疾病学研究进展及发 展趋势 学院工程技术学院 专业电子科学与技术 年级2007 级 学号222007322072003 姓名冯启业 指导教师唐毅 成绩

2009年11月27日 我国水产动物疾病学研究进展及发展趋势 一、近年来我国水产动物疾病学研究进展 1、水生动物免疫学的研究 (1)免疫组织、器官 免疫组织、器官的研究发展迅速,卢全章等(1991)报道了胸腺是鱼类淋巴细胞增殖和分化的主要场所,其组织结构分为皮质和髓质,内有大、中、小三类淋巴细胞,有人认为鱼类的胸腺参与了T淋巴细胞的成熟。脾脏是鱼类红细胞、粒细胞产生、储存及成熟的主要场所,由红白髓组成,同样存在着大量淋巴细胞(秉志,1983)。 (2)免疫相关细胞的研究 对参与免疫应答的主要细胞――T淋巴细胞和B淋巴细胞也进行了研究,证明了真骨鱼类确有T、B细胞之分(夏春,1994)。研究的发展趋势为进一步对这些细胞进行分析,以确认它们与哺乳动物异同及在体液免疫及细胞免疫中的作用。 (3)鱼类疫苗的研究工作逐渐深入 草鱼出血病细胞灭活疫苗在进一步实验的基础上完成了大规模生产工艺流程及生产性免疫试验,草鱼出血病的防治基本上得到了解决。对于淡水鱼细菌性败血症和对虾常见细菌病的防治,已建立了疫苗防治技术综合预防措施,使细菌性疾病基本上得到了控制。对于鳗鲡、甲鱼等的细菌性疾病的疫苗也进行了深入的研究,并取得了较好的防治效果。目前疫苗的研究工作已从组织疫苗、细胞疫苗向基因疫苗方向发展。 (4)免疫相关因子的研究 近年来对免疫相关因子的研究发展迅速,主要表现在以下几个方面。补体的作用已查明,它是一组蛋白成份组成的复合酶,主要是导致细胞溶解,协助抗体杀死病原体,可介导炎症反应并吸引及增强吞噬细胞的活性;干扰素是鱼体重要的抗病毒感染的防御因子,由白细胞产生;溶菌酶多存在于鱼粘液、血清及吞噬细胞中,能抵抗病原微生物而使鱼类获得保护(陈昌福,1990);白细胞介素和巨噬细胞活化因子能刺激肾和外周血白细胞,增加巨噬细胞数量并提高巨噬细胞的杀菌能力。 (5)免疫诊断技术 核酸探针技术核酸探针技术是把DNA片段用放射性同位素和光敏生物素标记后制成探针,与病原微生物的DNA进行杂交,以此来确定病原携带者和传播者的一种分子生物学技术。该技术以其灵敏度高,特异性强,使用方便等优点,在对虾病毒病的检测中倍受青睐。我国通过从纯化的虾暴发性皮下及造血组织坏死状病毒中提取的DNA,用限制性内切酶切成DNA片段,用质粒做载体。建立HHNBVDNA文库,从中筛选出三个重组质粒,分别用光敏生物素标记做成核酸探针,用于检测受HHNBV感染的对虾,取得了满意的结果(刘萍等,1995年)。目前已生产出核酸探针诊断试剂盒。 PCR技术即聚合酶链式反应,又称为DNA体外扩增技术。它具有灵敏度高、特异性强、反应快、操作简便、省时等优点,在医学上应用于检测人类遗传性疾病、传染性疾病、肿瘤基因等许多方面。黄海所已成功的将此技术应用于对虾病毒病和细菌性病原的检测(孔杰等,1994)。中国农业大学建立了套式PCR法检测β-溶血素嗜水气单胞菌(夏春等,1999)。 单位克隆抗体技术利用杂交瘤技术生产单克隆抗体,其原理是正常脾脏细胞与癌细胞

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《实验动物学》复习题及答案 1、小鼠的给药途径有那些?请演示一下 答:灌胃(ig):左手将动物固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角进针,沿上腭向鼠口腔的后下方插入食管。 皮下注射(sc):常在背部皮下注射。一手固定动物,另一只手注射给药。 腹腔注射(ip):左手固定动物,右手持注射器,从下腹部外侧,呈45度角刺入腹腔,进针约3~5mm。 肌内注射(im):多注射后肢股部肌肉,如一人单独操作,以左手拇指和食指抓住小鼠头部皮肤,小指、无名指和掌部夹住鼠尾及一侧后肢,右手持注射器刺入后肢肌肉给药 尾静脉注射(iv):将动物固定,鼠尾巴露在外面,用70%~75%的酒精棉球擦尾部,或将鼠尾浸入45~50℃温水中。待尾部左右静脉扩张后,左手拉着尾,右手进针 2、请演示一下大鼠、小鼠的捉持、固定及灌胃给药 答:(1)小鼠的捉持:捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾,置于实验台或鼠笼上,并稍向后拉;用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的皮肤,将鼠置于左手心中,拉直后肢,以无名指及小指按住鼠尾或小鼠的左后肢即可。 (2)大鼠的捉持:大鼠的捉拿时,可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾,放在实验台或鼠笼上,并稍向后拉;左手掌面向鼠背,食指和中指压住鼠的头顶,拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入,将鼠的两前肢卡住;或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。 (3)灌胃(ig):左手将动物固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角进针,沿上腭向鼠口腔的后下方插入食管。 3、大鼠的给药方法有那些?请演示一下常用的给药方法 答:灌胃(ig):左手将动物固定后,右手持装有灌胃针头的注射器,自口角进针,沿上腭向鼠口腔的后下方插入食管。 皮下注射(sc):常在背部皮下注射。一手固定动物,另一只手注射给药。 腹腔注射(ip):左手固定动物,右手持注射器,从下腹部外侧,呈45度角刺入腹腔,进针约3~5mm。

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