MMFSCNG饲料中维生素D的测定
MM_FS_CNG_0229 饲料维生素D
3
高效液相色谱法
MM_FS_CNG_0229
饲料中维生素D
3
的测定
1.适用范围
本方法适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料和维生素预混料中维生素
D 3的测定。测量范围为每千克样品中含维生素D
3
(胆钙化醇)的量在500IU以上。
2.原理概要
用碱溶液皂化试验样品，乙醚提取未皂化的化合物，蒸发乙醚，残渣溶解于甲醇并将部分溶液注入高效液相色谱净化柱中除去干扰物，收集含维生素D
3
淋洗液馏分，蒸发至干，溶解于正已烷中，注入高效液相色谱分析柱，用紫外检测
器在264nm处测定，通过外标法计算维生素D
3
的含量。
当样品中维生素D
3
标示量超过每千克10000IU时，可省去高效液相色谱净化柱，试验溶液直接注入色谱分析柱分析。
3.主要试剂和仪器
主要试剂
无水乙醚：无过氧化物
过氧化物检查方法：用5mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色。若加%淀粉指示液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。
去除过氧化物的方法：乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用蒸馏水振摇洗涤两次，重蒸，弃去首尾5%部分，收集馏出的乙醚，再检查过氧化物，应符合规定。
乙醇；正己烷：重蒸馏(或光谱纯)；1,4-二氧六环；甲醇：优级纯；2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)；无水硫酸钠；氢氧化钾溶液（500g/L）；
抗坏血酸乙醇溶液（5g/L）：取抗坏血酸结晶纯品溶解于4mL温热的蒸馏水中，用乙醇稀释至100mL，临用前配制。
氯化钠溶液（100g/L）。
维生素D
3
标准溶液：
维生素D
3标准贮备液：准确称取维生素D
3
(胆钙化醇)USP结晶纯品，于50mL
棕色容量瓶中，用正已烷溶解并稀释至刻度，4℃保存。该贮备液的浓度为每毫升含1 mg维生素D
3
；
维生素D
3标准工作液：准确吸取维生素D
3
标准贮备液，用正已烷按1∶100
比例稀释，该标准溶液浓度为每毫升含10μg(400IU)维生素D3；
酚酞指示剂乙醇溶液（10g/L）；
氮气（%）。
仪器
实验室常用设备；圆底烧瓶，带回流冷凝器；恒温水浴或电热套；旋转蒸发器；
超纯水器(或全磨口玻璃蒸馏器)。
高效液相色谱仪(两套)，带紫外检测器。
4.试样的制备
选取有代表性的饲料样品至少500g，四分法缩减至100g，磨碎，全部通过
孔筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保存备用。
5.过程简述
.试验溶液的制备
皂化：
称取试样，配合饲料10～20g，浓缩饲料10g，精确至。维生素预混料或复合预混料1～5g，精确至。置入250mL圆底烧瓶中，加50～60mL抗坏血酸乙醇溶液，使试样完全分散、浸湿，加10mL氢氧化钾溶液，混合均匀。置于沸水浴上回流30min，不时振荡防止试样粘附在瓶壁上，皂化结束，分别用5mL乙醇、5mL水自冷凝管顶端冲洗其内部，取出烧瓶冷却至约40℃。
提取：
定量转移全部皂化液于盛有100mL乙醚的500mL分液漏斗中，用30～50mL 蒸馏水分2～3次冲洗圆底烧瓶并入分液漏斗，加盖，放气，随后混合，激烈振荡2 min，静置分层。转移水相于第二个分液漏斗中，分次用100，60mL乙醚重复提取两次，弃去水相，合并三次乙醚相。用氯化钠溶液100mL洗涤一次，再用蒸馏水每次100mL洗涤乙醚提取液至中性，初次水洗时轻轻旋摇，防止乳化。乙醚提取液通过无水硫酸钠脱水，转移到250mL棕色容量瓶中，加100mgBHT使之溶解，用乙醚定容(V ex)。以上操作均在避光通风柜内进行。
浓缩：
从乙醚提取液(V ex)中分取一定体积(V ri)(依据样品标示量、称样量和提取液量确定分取量)，置于旋转蒸发器烧瓶中，在部分真空，水浴温度50℃的条件下蒸发至干，或用氮气吹干。残渣用正已烷溶解(需净化时用甲醇溶解，)，并稀释至10 mL(V en)使其获得的溶液中每毫升含维生素D32～10μg(80～400IU)，离心或通过μm过滤膜过滤，收集清液移入2mL小试管，用于高效液相色谱分析柱分析。
使用高效液相色谱净化柱提取：
用5 mL甲醇溶解圆底烧瓶中的残渣，向高效液相色谱净化柱中注射甲醇溶
液(按.所述色谱条件，以维生素D
3标准甲醇溶液流出时间)收集含维生素D
3
的馏
分于50mL小容量瓶中，蒸发至干(或用氮气吹干)，溶解于正已烷中。
所测样品的维生素D
3
标示量在每千克超过10000IU范围时，可以不使用高效液相色谱净化柱，直接用分析柱分析。
.测定
高效液相色谱净化条件：
柱和固定相：Lichrosorb RP-8，粒度10μm，25cm×10mm(内径)。
移动相：甲醇＋水(90＋10)。
流速：min。
温度：室温。
检测器：紫外检测器，使用波长264nm。
高效液相色谱分析条件：
正相色谱：
柱长：25cm、内径4mm不锈钢柱。
固定相：硅胶 Lichrosorb si60，粒度5μm。
移动相：正已烷＋1,4-二氧六环(93＋7)，恒量流动。
流速：1mL/min。
温度：室温。
进样体积：20μL。
检测器：紫外检测器，使用波长264nm。
保留时间：。
反相色谱：
柱长：，内径4mm不锈钢柱。
固定相：ODS(或C
18
)，粒度5μm。
移动相：甲醇＋水(95＋5)，恒量流动。
流速：1mL/min。
温度：室温。
进样体积：20μL。
检测器：紫外检测器，使用波长264nm。
保留时间：。
定量测定
按高效液相色谱仪说明书调整仪器操作参数和灵敏度(AUFS)，为准确测量按
要求对分析柱进行系统适应性试验，使维生素D
3与维生素D
3
原或其他峰之间有
较好分离度，其R≥。向色谱柱注入相应的维生素D
3
标准工作液(V st)和试验溶液(V i)，得到色谱峰面积的响应值(P st、P i)，用外标法定量测定。
6.结果计算
计算公式：结果按式(1)计算：
ωD＝P i×V ex×V en×ρi×V st×
(1)
P st×m×V ri×V i×f i
式中：ωD——每克或每千克样品中含维生素D3的量，IU；
m——样品质量，g；
V
ex
——提取液的总体积，mL；
V
ri
——从乙醚提取液(V ex)中分取的溶液体积，mL；
V
en
——试验溶液最终体积，mL；
ρ
i
——标准溶液浓度，μg/mL；
V st ——维生素D
3
标准溶液进样体积，μL；
V
i
——从试验溶液中分取的进样体积，μL；
P
st
——与标准溶液进样体积(V st)相应的峰面积响应值；
P
i
——与从试验溶液中分取的进样体积(V i)相应的峰面积响应值；
f i ——转换系数，1国际单位(IU)维生素D
3
相当于μg胆钙化醇；
——为回流皂化时生成维生素D3原的校正因子。
注：标准维生素D
3
结晶纯品与试样同样皂化处理后，所得标准溶液注入高
效液相色谱分析柱以维生素D
3
峰面积计算时可不乘。
平行测定结果用算术平均值表示，保留有效数3位。
7.允许差
同一分析者对同一试样同时两次测定(或重复测定)所得结果相对偏差：
每千克试样中含维生素D
3
的量,IU 允许相对偏差，%
×103～×105±20
＞×105～×106±15
＞×106±10
8.来源
中国国家标准 GB/T 17818—1999
饲料中维生素A的测定
应用报告 LC010 饲料中维生素A的测定 1实验部分 1.1仪器与试剂 LC1620A高效液相色谱仪（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）； FA2004电子分析天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）； 甲醇(色谱纯，美国Tedia)，维生素A标准品（纯度＞95%，阿拉丁试剂）。 1.2标准溶液的配制 参考GB/T 17817-2010 饲料中维生素A的测定高效液相色谱法，配制浓度为3.44μg/ml的标准工作液。 1.3色谱条件 色谱柱：Shodex C18-100-4D（4.6×150mm） 流动相：甲醇：水（95：5） 流速：1.0ml/min 柱温：室温 进样量：20μl 检测波长：326nm 2实验结果 2.1精密度 将1.2中所配制的3.44μg/ml标准溶液，在1.3描述的高效液相色谱条件下进样，重复进样五次，结果如表1所示RSD均在1.0%以内。 表1 精密度实验结果 No 保留时间峰高峰面积 1 5.49366.302725.623 2 5.46866.832712.594 3 5.46366.948713.915 4 5.47266.631714.214 5 5.48966.102716.800
平均值 5.47766.563716.629 RSD 0.242%0.534%0.733% 图 1 标准品谱图 2.2标准曲线 将1.2中所配制的标准待测溶液逐级稀释为1.29μg/ml、0.86μg/ml、0.43μg/ml、0.07μg/ml不同浓度，在1.3描述的高效液相色谱条件下由低浓度开始进样，所得标准曲线结果如下： 2.3实际样品测定 参考GB/T 17817-2010第一法皂化提取法对饲料样品进行处理，具体步骤如下： 1、皂化：称取试样5g，置于250ml圆底烧瓶中，加入50ml的L-抗坏血酸乙醇溶液（5g/L），使试样完全分散、浸湿，加10ml氢氧化钾溶液（500g/L），摇匀。置
维生素与饲料安全性的关系
维生素与饲料安全性的关系 摘要：维生素是动物机体生化反应和新陈代谢的催化剂，是维持动物正常生理机能和保持动物正常生长发育不可缺少的一种微量营养物质。维生素是饲料添加剂中最早使用和目前最常用的品种。维生素饲料添加剂是现代饲料生产不可或缺的重要原料。本文将以饲料中维生素的特性，作用，存在的问题以及解决措施予以综述。 关键词：维生素，饲料添加剂，饲料安全 引言：维生素（vitamin）又名维他命，通俗讲即维持生命的元素，是20世纪的伟大发现之一[1]它是维持动物体生命活动必须的一类有机物质，也是保持动物体健康的重要活性物质。维生素在体内的含量很少，但不可或缺。作为一类重要的饲料添加剂，在人体和动物生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。维生素也有其自身特性，存在的安全隐患，我们需要正确审视。 维生素概述 维生素是人体代谢中必不可少的有机化合物，是动物营养、生长所必需的某些少量有机化合物，对机体的新陈代谢、生长、发育、健康有极重要作用。 人体犹如一座极为复杂的化工厂，不断地进行着各种生化反应。其反应与酶的催化作用有密切关系。酶要产生活性，必须有辅酶参加。已知许多维生素是酶的辅酶或者是辅酶的组成分子。因此，维生素是维持和调节机体正常代谢的重要物质。 对家畜家禽的饲养需要维生素才能维持它们的正常生长发育。在各种饲料中，含有而各种不同的维生素，它是维持一切生命活动的要素。假如在饲料中缺乏其中任何一种维生素，都能引起家畜的新陈代谢发生紊乱。在日常的配合饲料当中，应该格外注意因缺乏维生素而引起的疾病。[2] 维生素的理化特性 维生素依据其溶解性能可分为脂溶性及水溶性维生素两类。脂溶性维生素易溶于脂肪和大多数有机溶剂，不溶于水。常用的脂溶性维生素有V A、VD、VE和VK等。水溶性维生素易溶于水。常用的水溶性维生素有VB 、VB 、烟酸，烟酰胺、VB、VC、叶酸、泛酸和VB等。[1]
饲料中维生素E的快速测定方法
饲料中维生素E的快速测定方法 摘要：用简便快捷的方法测定饲料中的维生素E，试剂消耗少，稳定性强，回收率也较为理想。 关键词维生素E 快速测定 维生素E又称生育酚，能维持生殖器官的正常机能，提高母畜生殖能力，促进机体代谢，提高免疫力和抗应激水平，维生素E还有抗氧化作用，可防止脂肪化合物、维生素A、硒(Se)、两种硫氨基酸和维生素C 的氧化作用，提高维生素A的作用。GB／T17812—1999是测定饲料中维生素E含量的传统方法，其原理是用碱液皂化样品，使试样中天然生育酚释放出来，再用乙醚提取未皂化的物质。前处理需经过皂化、提取、浓缩几个步骤，耗时长、过程繁琐、消耗试剂多等局限性。生育酚在碱性环境下极不稳定，在皂化过程中易分解。在提取过程中要用到大量的乙醚，对操作人员的健康伤害大。我们经多次试验，用热的甲醇超声样品，使维生素E溶解到甲醇中，将溶液过膜，上机测定，这种方法操作简便，试剂消耗少，回收率稳定。 1 材料和方法 1.1 方法原理 样品中加入甲醇并于一定温度水浴超声萃取，使维生素E溶解于甲醇中，经高效液相测定，用外标法计算其含量。 1.2仪器设备 高效液相色谱仪（安捷伦1100型），配DAD或VWD检测器；超声波振荡器；电子天平：（精确度分别为0.0001g和 0.00001g）。 1.3 试剂 1.3.1 甲醇（分析纯） 1.3.2 维生素E（dl-α-生育酚）标准溶液 1.3. 2.1 dl-α-生育酚标准储备液：准确称取dl-α-生育酚纯品油剂（USP）100.0mg于100.0mL棕色容量瓶中，用正己烷溶解并稀释至刻度，混匀，4℃ 保存。该储备液浓度每毫升含维生素E1.0mg。 1.3. 2.2 dl-α-生育酚标准工作液： 准确吸取dl-α-生育酚标准储备液（1.3.1.1）1.00mL置于10mL棕色容量瓶中，用氮气吹干，用甲醇稀释至刻度，混匀，再按比例稀释。配制工作液浓度每毫升含维生素E50μg。 1.4 色谱条件 色谱柱为 Zorbax SB-C18 5μm 4.6×150mm（或相当型号色谱柱）,流动相为95％甲醇(色谱纯)，流速1.0mL/min，柱温为室温，检测波长280nm，进样体积20μL。 1.5 试样的提取 称取适量样品与100mL棕色容量瓶中（维生素预混料0.5g,复合预混料 5－10g），加甲醇80mL，置于50℃水 浴中，超声提取15分钟，其中每5min 取出用手振摇一次。超声结束后，取出冷却至室温，用甲醇定容至刻度，混匀。取上层清夜过滤或离心，再经0.45μm膜过滤，供高效液相色谱分析用。 1.6 回收率的测定取适量维生素E标准储备液于100mL棕色容量瓶中,用氮气吹至快干,再称取5g空白样品,使维生素E的含量分别为50μg/g、100μg/g和500μg/g，每个浓度点配制5份样品，求其平均回收率。按1.5项下的方法处理后进行色谱分析，以外标法计算含量，以测得量与添加量之比来计算回收率。同时按GB/T17817
猪饲料中合理添加维生素
猪饲料中合理添加维生素 在生产实践中，如何使用好维生素是较为令人头疼的事。一般营养性添加剂是根据饲养标准来确定的。饲养标准所列的维生素需要量应是**需要量，是养殖动物处于中立温度区，健康良好条件下从饲料中获得的量。但在生产中，出于环境条件、饲料加工工艺、饲料储存时间、饲料组成、生产水平及饲养对象健康情况变化较大，所以根据生产经验，其饲料中的添加量要比饲养标准中建议的需要量高。 日粮中维生素的推荐量一般均大于饲养标准中的需要量。生产维生素产品的公司所提出的推荐量均大于科学工作者或品种公司的推荐量，一般应科学工作者或品种公司的推荐量。饲料中按维生素生产厂家推荐的添加维生素量可能对饲养动物健康与体内储存有一定好处，但在经济效益上不一定达到理想结果，维生素的合理添加会大大促进饲养动物的健康生长发育，生产者得到较好的经济效益。根据大量的试验结果和生产饲喂效果，每千克饲料中**维生素含量建议考虑以下因素： 1.一般植物性饲料中不含维生素A和维生素D，即使经包囊技术的维生素A和维生素D也容易失活，所以维生素A和维生素D的推荐量比需要量应大几倍到十几倍。维生素K、维生素E推荐量比饲养标准应高3倍～5倍。 2.维生素B2与维生素B5添加量应高于饲养标准的需要量，提高1.5倍～2倍。 3.常用饲料中维生素B1、维生素B6含量丰富，为了降低成本，用量可比饲养标准需要量低一些。动物性饲料和豆饼饲料中含有较多胆
碱，所以添加量应比饲养标准需要量低为宜；同时氯化胆碱呈碱性，与其他维生素添加剂一起配合时，影响其他维生素的效价，一般不予混合在内，应单独添加。 4.生物素在饲料中含量丰富，可以比需要量降低一些；生物素价钱高，添加一定量时未见有较好的经济效益，所以许多商用维生素中均不加生物素。 5.其他维生素叶酸、维生素B12、泛酸可按需要量添加，饲料中含量作为一个安全量看待。 维生素添加剂添加量一般每吨饲料中添加200克～300克。
猪饲料中维生素要合理添加
猪饲料中维生素要合理添加 在生产实践中，如何使用好维生素是较为令人头疼的事。一般营养性添加剂是根据饲养标准来确定的。饲养标准所列的维生素需要量应是最低需要量，是养殖动物处于中立温度区，健康良好条件下从饲料中获得的量。但在生产中，出于环境条件、饲料加工工艺、饲料储存时间、饲料组成、生产水平及饲养对象健康情况变化较大，所以根据生产经验，其饲料中的添加量要比饲养标准中建议的需要量高。 日粮中维生素的推荐量一般均大于饲养标准中的需要量。生产维生素产品的公司所提出的推荐量均大于科学工作者或品种公司的推荐量，一般应科学工作者或品种公司的推荐量。饲料中按维生素生产厂家推荐的添加维生素量可能对饲养动物健康与体内储存有一定好处，但在经济效益上不一定达到理想结果，维生素的合理添加会大大促进饲养动物的健康生长发育，生产者得到较好的经济效益。根据大量的试验结果和生产饲喂效果，每千克饲料中最低维生素含量建议考虑以下因素：1.一般植物性饲料中不含维生素A和维生素D，即使经包囊技术的维生素A 和维生素D也容易失活，所以维生素A和维生素D的推荐量比需要量应大几倍到十几倍。维生素K、维生素E推荐量比饲养标准应高3倍～5倍。 2.维生素B2与维生素B5添加量应高于饲养标准的需要量，提高1.5倍～2倍。 3.常用饲料中维生素B1、维生素B6含量丰富，为了降低成本，用量可比饲养标准需要量低一些。动物性饲料和豆饼饲料中含有较多胆碱，所以添加量应比饲养标准需要量低为宜；同时氯化胆碱呈碱性，与其他维生素添加剂一起配合时，影响其他维生素的效价，一般不予混合在内，应单独添加。 4.生物素在饲料中含量丰富，可以比需要量降低一些；生物素价钱高，添加一定量时未见有较好的经济效益，所以许多商用维生素中均不加生物素。 5.其他维生素叶酸、维生素B12、泛酸可按需要量添加，饲料中含量作为一个安全量看待。 维生素添加剂添加量一般每吨饲料中添加200克～300克。
HPLC法测定饲料中维生素A_维生素D_3和维生素E(精)
HP LC 法测定饲料中维生素A 、维生素D 3和维生素E 摘要:建立了以w (C 2H 5OH =95%乙醇直接提取,高效液相色谱仪在波长280n m 和254n m 处连续测定饲料中维生素A 、维生素D 3和维生素E 的方法。色谱柱为大连依利特Hypersil ODS C 18(25c m ×416mm ×5μm ,流动相为甲醇水,流速为112mL /m in 。维生素A 、维生素D 3、维生素E 的质量浓度分别在110mg/L ~2010mg/L 、015mg/L ~15.0mg/L 、 215mg/L ~5010mg/L 范围内与峰面积呈良好的线性关系,检测限分别为013×10 -6 μg 、0104×10-6 μg 、 510×10-6μg,相对标准偏差分别为116%、217%、214%,平均回收率分别为99%、102%、98%。 关键词:高效液相色谱法;维生素A;维生素D 3;维生素E;饲料 中图分类号:O65717+2文献标识码:B 文章编 号:10062009(200502003302 To D etect V itam i n A,V it am i n D 3and V it am i n E i n Feed w ith HPLC (Changsha Environm ental P rotection Technology Institute,Changsha,Hunan 410004,China Abstract:To detect V ita m in A,V ita m in D 3and V ita m in E in feed,which t o directly extract with w (C 2H 5OH =95%glycollic,with HP LC in 280n m and 254n m.Chr o mat ographic colu mn was Hy persil ODS
3饲料维生素的使用方法与注意事项
维生素饲料使用的注意事项 一、维生素添加剂饲料的注意事项 1、控制维生素饲料的存贮环境 维生素的不稳定性，使存贮环境成为维生素损耗一个重要因素。如前文所述，在维生素添加剂饲料存贮过程中，必须考虑的因素温度、空气湿度、光照等因素。 实践证明，任何一种维生素添加剂随着保存时间的延长，效价会逐渐降低。保管不当时，如阳光直射、温度过高、湿度过大，与其它物质制成合剂等因素，均会导致维生素效价受到一定影响。一般维生素添加剂饲料的贮存，要求容器密封（包装袋衬内膜），避免阳光直射，减少光照环境，控制环境（仓储）温度，等措施。其中温度要控制在20℃以下，并在短期内用完。购买维生素添加剂饲料应尽量购买出厂日期短，包装符合要求的产品。一次性购买不要太多，遵循现购现用原则，以防因存储不当，而造成不应有的损失。 2、区分维生素的需求量与供给量 养殖场在使用饲料的过程中，一定要注意区分维生素的需求量与供给量。实践证明，在维生素添加饲料使用过程中，供给量通常是需求量的二倍。导致的原因看似复杂，实际上主要在于饲料中维生素的损耗与维生素的效价。 3、预混料中维生素的添加方式 全价饲料中维生素已经按照科学比例进行添加，而预混饲料一般都需要自行添加维生素。在这里需要注意维生素添加剂的添加方式。 维生素在预混饲料中占的比例很小，并且在使用前添加效果较好，使用维生素添加剂要事先用少量玉米粉、麦麸等载体预混，之后添加到粮食饲料中。要求在混合过程中一定要均匀搅拌，以防止搅拌不匀造成某些个体采食过多，或某些个体采食不足。 维生素添加剂如不进行预混或预混不均匀，均会造成某些个体维生素缺乏症。充分预混能显著减少维生素缺乏症的发病机会，因此《饲料质量安全管理规范》中明确规定饲料中的维生素预混料、微量元素预混料、和其他微量组分的少量成分必须事先制成预混合饲料再生产。 4、维生素饲料不能替代药物 很多养殖场在畜禽养殖过程中，发现各种病变现象，并通过自己对于维生素方面的储备知识，补充各种维生素来达到治病的目的。 以上行为是非常不可取的，首先养殖场的专业技术人员对于养殖经验过度依赖往往会造成误判；其次，兽医对于畜禽发病原因及症状有一个系统科学的检查体系，能够更加准确的把握病情。 二、维生素添加剂饲料的使用方法 1、在制粒（膨化）后添加维生素 经过饲料企业检测证明，在饲料制粒（膨化）前使用维生素饲料添加剂，饲料中的维生素会膨化过程中的产生氧化还原反应，造成维生素的大量损失。 而在饲料制粒（膨化）后添加维生素，能够降低在制粒过程中造成的维生素的损耗。 2、尽量使用最新的饲料维生素 不仅维生素饲料在储运过程中造成损耗，维生素添加剂本身由于保管不善也会造成有效成分的损耗，为了保证饲料制作过程中有效成分充足，建议尽量选择生产日期较短，渠道来源正规的维生素添加剂。 3、注意维生素的效价 对鸡来说，与人工合成维生素A比较，人工合成的维生素A效价为100%。则鱼肝油中维生素A的生物效价仅为30～75%。目前市面上出售的维生素添加剂有多种，有单项的，有复合的。更多的是复合的，使用时也要注意其有效成分含量。
MMFSCNG饲料中维生素D的测定
MM_FS_CNG_0229 饲料维生素D 3 高效液相色谱法 MM_FS_CNG_0229 饲料中维生素D 3 的测定 1.适用范围 本方法适用于配合饲料、浓缩饲料、复合预混料和维生素预混料中维生素 D 3的测定。测量范围为每千克样品中含维生素D 3 (胆钙化醇)的量在500IU以上。 2.原理概要 用碱溶液皂化试验样品，乙醚提取未皂化的化合物，蒸发乙醚，残渣溶解于甲醇并将部分溶液注入高效液相色谱净化柱中除去干扰物，收集含维生素D 3 淋洗液馏分，蒸发至干，溶解于正已烷中，注入高效液相色谱分析柱，用紫外检测 器在264nm处测定，通过外标法计算维生素D 3 的含量。 当样品中维生素D 3 标示量超过每千克10000IU时，可省去高效液相色谱净化柱，试验溶液直接注入色谱分析柱分析。 3.主要试剂和仪器 主要试剂 无水乙醚：无过氧化物 过氧化物检查方法：用5mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色。若加%淀粉指示液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。 去除过氧化物的方法：乙醚用5%硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用蒸馏水振摇洗涤两次，重蒸，弃去首尾5%部分，收集馏出的乙醚，再检查过氧化物，应符合规定。 乙醇；正己烷：重蒸馏(或光谱纯)；1,4-二氧六环；甲醇：优级纯；2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)；无水硫酸钠；氢氧化钾溶液（500g/L）； 抗坏血酸乙醇溶液（5g/L）：取抗坏血酸结晶纯品溶解于4mL温热的蒸馏水中，用乙醇稀释至100mL，临用前配制。 氯化钠溶液（100g/L）。 维生素D 3 标准溶液： 维生素D 3标准贮备液：准确称取维生素D 3 (胆钙化醇)USP结晶纯品，于50mL 棕色容量瓶中，用正已烷溶解并稀释至刻度，4℃保存。该贮备液的浓度为每毫升含1 mg维生素D 3 ； 维生素D 3标准工作液：准确吸取维生素D 3 标准贮备液，用正已烷按1∶100 比例稀释，该标准溶液浓度为每毫升含10μg(400IU)维生素D3； 酚酞指示剂乙醇溶液（10g/L）； 氮气（%）。 仪器 实验室常用设备；圆底烧瓶，带回流冷凝器；恒温水浴或电热套；旋转蒸发器； 超纯水器(或全磨口玻璃蒸馏器)。 高效液相色谱仪(两套)，带紫外检测器。 4.试样的制备 选取有代表性的饲料样品至少500g，四分法缩减至100g，磨碎，全部通过
食品中维生素C含量的测定实验
实验3 食品中维生素C含量的测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法） 一、实验原理 维生素C又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。 2，6-二氯酚靛酚的钠盐水溶液呈蓝色，在酸性溶液中呈玫瑰红色，当其被还原时就变为无色，因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸完全被氧化后，稍多加一点染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。 二、试剂和器材 偏磷酸醋酸溶液：取15g（用时研细）溶于40mL醋酸及20mL水的混合液中，然后用水稀释至500mL，过滤后储入试剂瓶中。 标准2，6-二氯酚靛酚溶液：取0.25g2，6-二氯酚靛酚溶于700mL蒸馏水中（用力 搅动），加入300mL磷酸缓冲液（预先配制9.078g/L KH 2PO 4 -11.867g/L Na 2HPO 4 ·2H 2 O水溶液，用时以KH 2 PO 4 ：Na 2 HPO 4 ·2H 2 O=4：6的比率将其混合，pH 值为6.9-7.0），翌日过滤，滤液储于棕色瓶中，临用时，以抗坏血酸溶液标定。 标准维生素C溶液：以少量偏磷酸醋酸溶液溶解0.1g维生素C于100mL容量瓶中，再以该液稀释至刻度。 2，6-二氯酚靛酚液的标定：在3个100mL锥形瓶中，各置5mL偏磷酸醋酸液，再各加2mL标准维生素C溶液，摇匀。用上面所制的标准2，6-二氯酚靛酚液滴定，呈玫瑰红色保持30s不褪色为止。记下所用2，6-二氯酚靛酚溶液体积平均值，再以同样方法做一空白实验，取7mL偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相当于以上所用的2，6-二氯酚靛酚溶液的低定量），仍用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定。将第一次滴定的量减去空白实验的量，即为标准维生素的反应量，求出1mL 2，6-二氯酚靛酚对应于维生素C的质量（mg）。 研钵、容量瓶、剪刀、锥形瓶、微量滴定管 三、实验步骤 1、用自来水冲洗果蔬样品，再以蒸馏水清洗，用纱布或吸水纸吸干表面水分，然后
5第五节-维生素饲料
第五节维生素饲料 维生素是畜禽养殖中不可缺少的营养素。随着养殖规模的不断扩大，品种的改良，生产能力的提高，机械化、规模化的饲养，对维生素的要求越来越多，同时，化学医药工业的发展，维生素生产工艺日趋成熟，成本不断降低。使维生素在配合饲料中的大量应用成为可能。同时，研究表明，维生素在促进动物的生长、提高机体免疫能力、降低发病、节约饲料、改善畜禽产品品质等方面都有一定的促进作用。据统计，在全世界的维生素总量中，饲用维生素占总量的一半以上。 一、维生素饲料质量控制 在配合饲料中常需添加的维生素主要有脂溶性维生素A、D3、E、K3；水溶性维生素B1、B2、B6、B12、烟酸、泛酸、叶酸、生物素、胆碱、维生素C和肌醇等，维生素易受氧、潮湿、热、光照、金属离子等因素的影响而降低其活性，为满足其在配合饲料及预混料中的生产工艺的要求，几乎所有的维生素添加剂或预混剂都需经过特殊的加工处理，以保持维生素的稳定性与活性。 （一）维生素的稳定性及其影响因素 很多维生素都不很稳定，很易氧化、变质或失效，研究饲料中各种影响维生素稳定性的因素，并通过贮藏与加工中的技术措施来保持其稳定性，或者把这种稳定性差的问题所造成的损失降低到最小有程度，是使用维生素添加剂的一个极重要的问题。 对维生素稳定性的影响因素很多，有属于维生素本身的不同制剂与剂型的；有属于外界条件的，如空气与氧、自然光照与紫外线、贮藏的温度与饲料加工中的热处理、载体与饲料中的含水量、酸碱度（PH）以及饲料或预混料中是否加有矿物盐类或氯化胆碱、有无氧化剂与还原剂等；最后，维生素的稳定性和贮藏的长短等也有密切的关系，表1-48列出了各种维生素的稳定性及其主要影响因素。
饲料中维生素A和维生素E含量的测定
饲料中维生素A和维生素E含量的测定 1-原理 将具有代表性的样品皂化井用己烷抽提后，用HPLC分析。维生素E在292nm测定，维生素A在325nm测定 2-安全措施 全部过程中必须戴护目镜 特别应注意: -溶剂的挥发性气体，应在通风橱内工作 -具腐蚀性的试剂，例如强酸和强碱 3-试剂 全部使用分析纯试剂;水必须是蒸馏水或相当品质 3.1-氮气 3.2-粒状氢氧化钾 3.2.1-50%(质量/质量)氢氧化钾水溶液 3.3-乙醇 3.4-己烷 3.5-硫酸，密度=1.83 3.5.1-80%(质量/质量)硫酸溶液 3.6-无水硫酸钠 3.7-碳酸氢钠 3.7.1-5%碳酸氢钠水溶液 3.8-HPLC级己烷 3.9-HPLC级2-丙醇 3.10-全反式维生素A标准物 3.1l-维生素E醇类(a-生育酚)标准物，例如，FLUKA公司标准 物Ref.No.95 240 4-仪器 -可在325nm处测定的紫外分光光度汁 -常规实验室玻璃器皿和用具 -专用特制玻璃器皿(附图 -HPLC，装备有泵，自动取样器，进样器和能在325nm处进行检测的 检测系统 -旋转蒸发仪 -水浴锅 5-步骤 注意:不能在自然光，荧光或氖灯下操作，而且要隔绝与空气的接触 (抽提是在充氮条件下进行，玻璃器皿为可吸收紫外线的棕色器皿，照明 为白炽灯，或在窗户上装备了紫外滤光屏卜 5.1-制备溶液 5.1.1-维生素A醇标准液 -精确地(土0.01毫克)称取约含有25，侧灿的维生素A乙酸酷(3.10)。 -将维生素A乙酸酷转移至1叨毫升的沸腾管(见附图1)中;
-加入25毫升乙醇(3.3)和3毫升氢氧化钾溶液(3.2.1); -在沸腾管「加上冷凝管，在水浴锅上沸腾叨分钟; -冷却，用己烷(3.4)抽提数次. 用己烷(3.4)稀释，使最终浓度达10-15 IU/毫升; -准确测定该溶液所含有的视黄醇浓度，测定方法是用光径为1厘米的 石英比色怀测定此溶液在325皿处的光吸收值(A)，用已烷(3.·4)作空白对照: 用公式计算: 含量C(m/毫升卜Axl8·3 5.1.2-维生索E醇标准物溶液 -精确地称取25毫克=0，01毫克的维生素E醇(3.11 放入50毫开容量瓶; -用已烷(3.4)定容至刻度; -用取液器取该溶液5毫升，放入另一个50毫升容量瓶中 -用已烷(3.4)定容至刻度; 5.1.3-待测样品液-溶液A和溶液E -称取研磨的极细的样品200克+-0.1克，放人2升的容量瓶中; -加入1升乙醇(3.3)和100毫升氢氧化钾溶液(3.2.1); -把容量瓶称重; -记录质量M1; -摇动; -在容量瓶「加上水流冷凝管.将其放在容量瓶加热器上加热，煮沸25 分钟; -用水流冷却至溶液平静为止; -加入乙醇(3.3)使其质量重新达到MI -取上清液50毫升放人沸腾管(附图1)中; -加入40毫升水月4x30毫升已烷(3.4)抽提; -将抽提物放人分液漏-斗，用2x100毫升冰洗涤至中性; -在无水硫酸钠(3.6)上过滤 -蒸发毛干燥，迅速溶解于25毫开己烷; -取5毫升该溶液用于维生素A的测定:该溶液为溶液A. -在剩下的20毫升溶液中加入20毫升已烷，转移至100毫升沸腾管中; -加入10毫升80%硫酸溶液(3.5.1); -振荡完全; -待溶液完全静止后，将巳烷层转移至分液漏斗; -用4x30毫升巳烷(3.4)抽提硫酸层 -把所有己烷抽提液放人分液漏斗中·用5毫升无水碳酸氧钠溶液(3.7.1) 冲洗，然后用2x200毫升水冲洗直至中性; -在无水硫酸钠上过滤; -蒸发至干燥，然后迅速用准确容量的己烷(Ve)溶解(记录Ve)使最终维
保健食品中9种脂溶性维生素的测定BJS201717
附件5 保健食品中9种脂溶性维生素的测定 BJS 201717 1范围 本方法规定了营养素补充剂类保健食品中维生素A、维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素D3、维生素E、维生素E醋酸酯、维生素K1、维生素K2、β-胡萝卜素含量的液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于营养素补充剂类保健食品中维生素A、维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素D3、维生素E、维生素E醋酸酯、维生素K1、维生素K2、β-胡萝卜素含量的测定。 2原理 试样经混合溶液（异丙醇：二氯甲烷：甲醇=10:10:80，v:v:v）提取后，采用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。 3试剂和材料 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1甲醇：质谱级。 3.1.2乙腈：质谱级。 3.1.3异丙醇：色谱纯。 3.1.4丙酮。 3.1.5二氯甲烷。 3.1.6提取溶液（异丙醇：二氯甲烷：甲醇=10:10:80，v:v:v）：取异丙醇50mL、二氯甲烷50mL，用甲醇稀释至500 mL，混匀。 3.1.7 0.1%甲酸水溶液：取甲酸1 mL用水稀释至1 000 mL，用滤膜（3.4）过滤后备用。 3.1.8 0.1%甲酸甲醇溶液：取甲酸1 mL用甲醇稀释至1000mL，用滤膜（3.4）过滤后备用。 3.2标准品 维生素A、维生素A醋酸酯、维生素D2、维生素D3、维生素E、维生素E醋酸酯、维生素K1、维生素K2、β-胡萝卜素标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。 3.3标准溶液配制 3.3.1标准储备液（100μg/mL） —41 —
介绍几种维生素类猪饲料添加剂
介绍几种维生素类猪饲料添加剂 当前,养猪生产处于微利或亏损时期,应千方百计降低养殖成本。多年的养猪生产实践证明,巧用一些廉价绿色天然维生素添加剂,可起到促生长、防治猪病的作用,并可降低饲养成本,增加经济效益。现介绍几种廉价绿色天然猪饲料添加剂,供养猪场(户)选用。 1. 松针粉松针含有19种氨基酸及丰富的胡萝卜素、维生素、微量元素及抗微生物的松针抗生素等。在饲料中添加5%的松针粉,猪日增重可提高10%～18%,育肥期可缩短30～40天。 2. 大蒜大蒜中的大蒜素能有效抑制致病菌,增加猪的食欲,提高产品质量。大蒜还具有行气滞、暖脾胃、解毒、杀虫等作用,可有效防治仔猪肠道疾病、水肿病、创伤和化脓性感染等。在猪饲料中以3%～5%的比例加入切碎的生大蒜,不但可增强猪的食欲,改善猪肉品质,而且可显著提高日增重。在小猪饲料中添加0.2%的大蒜干粉,能增强免疫力,减少疾病的发生,可使成活率提高5%～8%。 3. 橘皮粉橘皮粉有多种营养成分,有增进食欲、促生长及增强抗病力的作用。在猪饲料中添加5%的橘皮粉,日增重可提高12%,每增重1千克可少耗料0.28千克,饲料报酬提高
10.5%,胴体重和净肉重也有所提高。 4.草又称拉拉秧、拉拉藤等,含有粗蛋白质、粗脂肪、无氮浸出物、粗灰分、葡萄糖、挥发油等营养物质。草不但营养丰富,而且还是治疗疾病的良药。在猪饲料中添加5%～10%的干粉或鲜草,有清热利尿、清瘀解毒的功能。 5. 马齿苋马齿苋味酸性寒,具有清热解毒、凉血、止血、止痢的功能,可鲜喂也可干喂。在猪饲料中可按2%～8%的比例添加马齿苋干粉(鲜马齿苋常用量为60～120克,一般不宜多用),对痢疾杆菌、大肠杆菌、副伤寒杆菌等有明显的抑制作用。 6. 蒲公英蒲公英柔嫩多汁,饲用价值很高,是一种多用 途的优质保健猪饲料,可鲜喂也可干喂。在猪饲料中添加2%～3%的蒲公英干粉,能增进食欲,促进生长,可预防消化道及呼吸道的各种疾病,特别是对猪链球菌病治疗效果尤佳。 7. 车前草车前草含有大量黏液质、琥珀酸、胆碱及维生素B1等,可利尿、凉血、解毒。在猪饲料中按3%～5%的比例添加车前草干粉,可预防和治疗各种炎症、尿血、皮肤疮毒及呼吸道疾病。 8. 龙胆草龙胆草中含有龙胆苦甙,此种物质能促进猪 胃酸分泌,使游离酸增加,有健胃和促进消化作用,常喂可提高猪的食欲。 9. 海带粉海带含有丰富的碘化物、维生素、矿物质及
DB43T 893-2014 维生素预混合饲料产品通则.pdf
DB43/T 893—2014湖 南省地方标准 DB43 维生素预混合饲料产品通则The general rules for feed vitamins premixes ICS 65.120 46B 2014-08-10 实施 2014-06-10 发布
目次 前言 (Ⅱ) 1 范围 (1) 2 规范性引用文件 (1) 3 要求 (1) 4 检验方法 (2) 5 检验规则 (3) 6 标签、包装、运输、贮存 (4)
前言 本标准按GB/T1.1-2009的规则编制。 本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。 本标准起草单位：湖南农业大学动物科技学院、湖南省饲料工业标准化技术委员会、湖南伟业动物营养集团公司。 本标准主要起草人：方热军、杨建武、曹满湖、佘伟明、方成堃、李四元、张凯、杨润泉、陈彩辉。
维生素预混合饲料产品通则 1 范围 本标准规定了维生素预混合饲料产品要求、检验方法、检验规则、标签、包装、运输和贮存。 本标准适用于我省维生素预混合饲料产品的生产、销售和使用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 5917.1 饲料粉碎粒度测定两层筛筛分法 GB/T 5918 饲料产品混合均匀度的测定 GB/T 6435 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定 GB 10648 饲料标签 GB 13078 饲料卫生标准 GB/T 14699.1 饲料采样 GB/T 14700 饲料中维生素B1的测定 GB/T 14701 饲料中维生素B2的测定 GB/T 14702 饲料中维生素B6的测定高效液相色谱法 GB/T16764 配合饲料企业卫生规范 GB/T 17778 预混料中d-生物素的测定 GB/T 17812 饲料中维生素E的测定高效液相色谱法 GB/T 17813 复合预混料中烟酸、叶酸的测定高效液相色谱法 GB/T 17816 饲料中总抗坏血酸的测定邻苯二胺荧光法 GB/T 17817 饲料中维生素A 的测定高效液相色谱法 GB/T 17818 饲料中维生素D3的测定高效液相色谱法 GB/T 17819 维生素预混料中维生素B12的测定高效液相色谱法 GB/T 18397 复合预混合饲料中泛酸的测定高效液相色谱法 GB/T 18823 饲料检测结果判定的允许误差 GB/T 18872 饲料中维生素 K3的测定高效液相色谱法 农业部公告第1224号《饲料添加剂安全使用规范》 农业部公告第2045号《饲料添加剂品种目录》 3 要求 3.1 感官 色泽均匀一致，无发霉变质、结块及异味、异臭。
饲料添加剂维生素的正确使用
饲料添加剂维生素的正 确使用 集团公司文件内部编码：（TTT-UUTT-MMYB-URTTY-ITTLTY-
维生素是人和动物必不可缺少的一种微量营养物质。除少量几种维生素在体内可以少量合成外，绝大多数维生素必须从饲料中摄取，同时也根据不同种动物和同种动物的生长、生产阶段的不同的维生素需要量也不同，因此应根据以上条件设计维生素的添加量，以满足不同动物的生产、生长、繁殖、维持的维生素需要量。 那么饲料添加剂维生素该怎么正确使用呢？下面就带大家了解一下。 一、确定维生素的正确添加量 1、查饲养标准 应该根据畜禽健康状况、生产水平、饲料组成、环境温度、饲养方式及加工工艺等具体情况，参考科技工作者及畜禽育种公司等的推荐量，灵活调整，从而制定出适宜的维生素添加水平。 2、保证维生素有一个安全的富裕量 根据我国当前畜牧业生产水平和配方饲料中的能量浓度及蛋白水平，应该在我国畜禽饲养标准及美国NRC饲养标准水平基础上超量添加(超量约25～50%)，可带来较好的经济效益。要注意维生素的理化特性，防止配伍禁忌。如各种维生素对光、热、空气、水分、pH等因素的反应不一，配料时必须予以综合考虑。氯化胆碱因有极强的碱性和吸湿性，对维生素生理效价有一定的影响，尤其是液态氯化胆碱对维生素A、维生素K3、维生素B6等有较强的破坏作用，必须单独添加。VC有强还原性，水溶液呈酸性，维生素B1、维生素B2、维生素B12及叶酸等极易与之相互作用而分解失效。另外，泛酸钙与烟酸，泛酸钙与维生素C，有
机酸防霉剂及抗球虫药物与维生素B2等之间也都存在一定的相互拮抗作用。因此，为增加多种维生素稳定性，即使某些原料中已经添加抗氧化剂，在维生素预混料中可再加入抗氧化剂(如乙氧喹、丁羟基甲苯等)。须注意：最终日粮中各种来源的氧化剂总量不得超过限量，如乙氧喹含量每千克饲料中应小于150毫克。 二、使用维生素应注意的事项 1、掌握需要量和实际供给量之间关系 遵循饲养标准规定使用维生素添加剂，应注意区分开需要量和供给量之间的差别。实际表明，维生素的供给量一般是需求量的一倍。实际饲养中要想弄清楚确切的维生素需要量是个比较复杂的问题，特别是许多种维生素的缺乏症多混淆在一起不易判明，有时次要症状掩盖了特征性的症状。有时类似的症状也会同时出现。因此畜、禽维生素需要量的建议标准应该视为一种参考数值，应根据实际情况增加在推荐量的基础上增加25～50%的维生素。 2、控制维生素添加剂的保存环境和生产日期 维生素有自己的稳定性，实践证明，任何一种维生素添加剂随着保存时间的延长，效价会逐渐降低。保管不当时，如阳光直射、温度过高、湿度过大，与其它物质制成合剂等因素，均会导致维生素效价受到一定影响。一般维生素添加剂的贮存，要求容器密封，避光，防湿，温度20℃以下，短期内用完。因此维生素添加剂应尽量购买出厂日期短，包装符合要求的产品。一次购买不要太多，现购现用，以防积压浪费，造成不应有的损失。
饲料中主要营养成分的检测方法
饲料中主要营养成分的检测方法 以下所说方法无特殊说明的，均为仲裁法。 (一)饲料水分和其他挥发性物质含量的测定(GB/T6435-2006/ISO6496:1999) 1.适用范围 本标准适用于动物饲料，但乃制品、动物和植物油脂、矿物质、谷物除外。 2.原理 根据样品性质的不同，在特定条件下对试样进行干燥所损失的质量在试样中所占的比例。 3.注意事项 3.1对于高水分含量(水分含量高于17%)需进行预干燥，可采用空气风干法或参照饲料水分的测定方法(GB6435-1986) 4.3中的处理方法。高脂肪含量(脂肪高于120/kg)的样品测定前要进行脱脂处理。对于高水分高脂肪含量样品，要先进行预干燥，再进行脱脂处理。 3.2在干燥过程中因化学反应[如美拉德(Mailard)反应]而造成不可接收的质量变化(一般饲料样品经第二次干燥后质量变化大于试样质量的0.2%，以油脂为主要成分的饲料经第二次干燥后质量变化大于试样质量的0.1%)时，需使用80℃的真空干燥箱按照GB/T6435-2006/ISO6496:1999中8.4进行处理。 (二)饲料中粗蛋白测定方法(GB/T6432-1994) 1.适用范围 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。 2.原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。 3.注意事项 3.1混合催化剂在使用前要进行充分的磨碎混匀。 3.2根据蛋白含量称取试样，一般为0.5~1.0g，对于高蛋白含量试样如鱼粉、血粉等，称样量可适当降低到0.3g。 3.3试样消铸要保证完全，可适当延长消煮时间，消煮完全后，试样消煮液呈透明的蓝绿色。 3.4在蒸馏过程中，要注意密封，防止氨气泄露。蒸馏时要保证氢氧化钠溶液过量，将消煮液中过量的硫酸全部中和，以保证消煮液中NH能够全部逸出。当消煮液中加入过量氢氧化钠溶液后，会出现黑色沉淀，如消煮液还保持澄清，需适当补充氢氧化钠溶液。 (三)饲料粗脂肪的测定(GB/T6433-2006/ISO492:1999) 1.适用范围 本标准适合用于油籽和油籽残渣以外的动物饲料。 2.原理 索氏(Soxhlet)脂肪提取器中用石油醚提取试样，通过蒸馏和干燥，残渣称重。残渣中除脂肪外还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪。 3.注意事项 3.1对于本方法总提到的B类产品包括:纯动物性饲料包括乳制品;脂肪不经预先水解不能提取的纯植物性饲料(如谷蛋白、酵母、大豆及马铃薯蛋白以及加热处理的饲料);含有一定数量加工产品的配合饲料，其脂肪含量至少有20%来自这些加工产品。以上产品在测定前需要水解，水解方法参照本标准9.4。 3.2使用自动脂肪提取仪提取脂肪时，要适当延长浸提时间，保证脂肪被充分浸提出来。 (四)饲料中粗纤维含量测定过滤法(GB/T6434-2006/ISO6865:2000) 1.适用范围
维生素在畜禽饲料中的应用
维生素A 1、维护上皮组织细胞的健康和促进免疫球蛋白的合成。 2、维持骨骼正常生长发育。 维生素A促进蛋白质的生物合成和骨细胞的分化。当其缺乏时，成骨细胞与破骨细胞间平衡被破坏，或由于成骨活动增强而使骨质过度增殖，或使已形成的骨质不吸收。孕妇如果缺乏维生素A时会直接影响胎儿发育，甚至发生死。 3、促进生长与生殖。 维生素A有助于细胞增殖与生长。动物缺乏维生素A时，明显出现生长停滞，可能与动物食欲降低及蛋白利用率下降有关。维生素A缺乏时，影响雄性动物精索上皮产生精母细胞，雌性阴道上皮周期变化，也影响胎盘上皮，使胚胎形成受阻。维生素A缺乏还引起诸如催化黄体酮前体形成所需要的酶的活性降低，使肾上腺、生殖腺及胎盘中类固醇的产生减少，可能是影响生殖功能的原因。 维生素A与维生素B、维生素D、E、钙、磷和锌配合使用时，能充分发挥其功效。维生素D3 维生素D是一种脂溶性维生素，也被看作是一种作用于钙、磷代谢的激素前体。它与阳光有密切关系，所以又叫"阳光维生素"。 维生素D3有以下生理功能: 维生素D3在体内骨胳组织的矿质化过程中着十分重要的作用。 1、提高肌体对钙、磷的吸收，使血浆钙和血浆磷的水平达到饱和程度。 2、促进生长和骨骼钙化，促进牙齿健全; 3、通过肠壁增加磷的吸收，并通过肾小管增加磷的再吸收; 4、维持血液中柠檬酸盐的正常水平; 5、防止氨基酸通过肾脏损失。 适应症用于佝偻病、骨软化症及搐搦症，佝偻病兼有龋齿者也可用该品防治。大剂量也用于皮肤结核、皮肤及粘膜各型红斑狼疮等。 但维生素D3并不能直接发挥作用，而必须先经谢转化成为具有活性的形式 --1，25-二羟维生素D3才能发挥生理作用。另外活性维生素D3能够促进小肠内钙的吸收，降低已增多的甲状旁腺素浓度和促进骨作用和减轻疼痛。 维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚
食物中维生素B6的测定方法
食物中维生素B6的测定方法 微生物法 1.原理 维生素B6在酸性介质中对热比较稳定，但在碱性介质中对热不稳定。测量维生素B6比较经典的方法是"微生物法"它的优点是：1.特异性高、精密度好、操作简单（不需要特殊设备，易于推广，样品不需要进行一系列的提纯步骤）、准确度高。它的缺点是：耗时长、必须经常保存菌种、试剂较贵。 2.适用范围 GB/T 17407-1998，适用于药物、食物及饲料的检测 3.仪器 电热恒温培养箱 电热手提式压力蒸汽消毒器 液体快速混合器 离心机 722光栅分光光度计 硬质玻璃试管 4.试剂 （1） 0.22mol/L硫酸：于2000ml烧杯中加入700ml水，加入12.32ml H2SO4，用水稀释至1000ml。 （2） 0.5mol/L硫酸：于2000ml烧杯中加入700ml水，加入28ml H2SO4，用水稀释至1000ml。（3） 10mol/L氢氧化钠：溶200g NaOH于水中，稀释至500ml。 （4） 0.1mol/L氢氧化钠：取10ml 10mol/L NaOH，用水稀释至1000ml。 （5）溴甲酚绿：0.04%溶液，称取0.1g溴甲酚绿于研钵中，加1.4ml 0.1mol/L NaOH研磨，加少许水继续研磨，直至完全溶解，用水稀释到250ml。 （6）培养基：称取吡哆醇Y培养基5.3g，溶解于100ml蒸馏水中。 （7） 100ug/ml吡哆醇标准储备液：称取122mg盐酸吡哆醇标准溶于1L25%乙醇中，保存于4℃冰箱中，稳定1个月。 （8） 1ug/ml吡哆醇标准中间液：，取1ml吡哆醇标准储备液，稀释至100ml。 （9）琼脂培养基：吡哆醇Y培养基5.3g，琼脂1.2g，稀释至100ml。 （10） 1.5MOL/l生理盐水：取9gNaCl溶于1000ml水中。 5.菌种的制备与保存
饲料添加剂维生素的正确使用
维生素是人和动物必不可缺少的一种微量营养物质。除少量几种维生素在体内可以少量合成外，绝大多数维生素必须从饲料中摄取，同时也根据不同种动物和同种动物的生长、生产阶段的不同的维生素需要量也不同，因此应根据以上条件设计维生素的添加量，以满足不同动物的生产、生长、繁殖、维持的维生素需要量。 那么饲料添加剂维生素该怎么正确使用呢？下面就带大家了解一下。 一、确定维生素的正确添加量 1、查饲养标准 应该根据畜禽健康状况、生产水平、饲料组成、环境温度、饲养方式及加工工艺等具体情况，参考科技工作者及畜禽育种公司等的推荐量，灵活调整，从而制定出适宜的维生素添加水平。 2、保证维生素有一个安全的富裕量 根据我国当前畜牧业生产水平和配方饲料中的能量浓度及蛋白水平，应该在我国畜禽饲养标准及美国NRC饲养标准水平基础上超量添加(超量约25～50%)，可带来较好的经济效益。要注意维生素的理化特性，防止配伍禁忌。如各种维生素对光、热、空气、水分、pH等因素的反应不一，配料时必须予以综合考虑。氯化胆碱因有极强的碱性和吸湿性，对维生素生理效价有一定的影响，尤其是液态氯化胆碱对维生素A、维生素K3、维生素B6等有较强的破坏作用，必须单独添加。VC有强还原性，水溶液呈酸性，维生素B1、维生素B2、维生素B12及叶酸等极易与之相互作用而分解失效。另外，泛酸钙与烟
酸，泛酸钙与维生素C，有机酸防霉剂及抗球虫药物与维生素B2等之间也都存在一定的相互拮抗作用。因此，为增加多种维生素稳定性，即使某些原料中已经添加抗氧化剂，在维生素预混料中可再加入抗氧化剂(如乙氧喹、丁羟基甲苯等)。须注意：最终日粮中各种来源的氧化剂总量不得超过限量，如乙氧喹含量每千克饲料中应小于150毫克。 二、使用维生素应注意的事项 1、掌握需要量和实际供给量之间关系 遵循饲养标准规定使用维生素添加剂，应注意区分开需要量和供给量之间的差别。实际表明，维生素的供给量一般是需求量的一倍。实际饲养中要想弄清楚确切的维生素需要量是个比较复杂的问题，特别是许多种维生素的缺乏症多混淆在一起不易判明，有时次要症状掩盖了特征性的症状。有时类似的症状也会同时出现。因此畜、禽维生素需要量的建议标准应该视为一种参考数值，应根据实际情况增加在推荐量的基础上增加25～50%的维生素。 2、控制维生素添加剂的保存环境和生产日期 维生素有自己的稳定性，实践证明，任何一种维生素添加剂随着保存时间的延长，效价会逐渐降低。保管不当时，如阳光直射、温度过高、湿度过大，与其它物质制成合剂等因素，均会导致维生素效价受到一定影响。一般维生素添加剂的贮存，要求容器密封，避光，防湿，温度20℃以下，短期内用完。因此维生素添加剂应尽量购买出厂日期短，包装符合要求的产品。一次购买不要太多，现购现用，以防积压浪费，造成不应有的损失。