微生物传感器在环境检测中的应用

环境污染物对人类健康带来了很大风险，有一些微生物传感器被用来检测有有机和无机毒性，并被广泛应用于工业中。重金属是废水中主要的有毒物质，非生物降解性金属离子在活着的生物体中积累，会导致许多疾病的出现。有机毒性是另一种对人体有害的主要环境污染物。关于一种低成本、简单快捷、监控重金属的工具的构想，微生物传感器可以列入考虑之中。此外还有许多传感器的环保应用途径，如对食物的判断。微生物传感器由于其承包地、稳定和反应快速等优点已被广泛应用于许多行业领域。

微生物传感器是一种结合了生物识别元件与信号传感器的检测分析装置，这种装置将微生物固定在换能器上，然后对目标物进行检测。信号传感器是用来将分析物的反应转换成可测量的与分析物的浓度成比例的信号。随着纳米技术的发展，纳米材料已被用于开发更可靠和有选择性的生物传感器，而且在产生更高灵敏度的换能器方面也有了巨大进展。微生物传感器已成为环境监控最有效的一种方法。

微生物传感器主要分为两种：光学微生物传感器和微生物燃料电池传感器。前者的使用可以产生变化多样的光学性能如吸附、荧光、柔光或折射率。这些都与分析物浓度一致;后者通过微生物分解代谢将有机机基质转化为电能，让微生物燃料电池在微生物传感器中作为传感器工作成为可能。光学微生物传感器又分为荧光微生物传感器、发光微生物传感器和比色微生物传感器。微生物传感器还有一个比较有前途的应用，就是应用于法医鉴定。可以对一件物品的物理特性进行判断，这是为了将其从同类物品中区分开来。

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微生物实验室环境监测制度

1 目的 规范微生物实验室环境检测制度，以满足检验要求。 2 范围 微生物实验室。 3 职责： 3.1品管部负责微生物实验室的风速、照度、尘埃粒子数、沉降菌、换气次数等的检测，并及时将结果通知相关部门。 4内容 4.1尘埃粒子数监测 公司品管部应按附件图中监测点对微生物实验室洁净区进行尘埃粒子数检测，当测量数据超过表1标准要求最大值时，应及时通知设备部进行整改。 表1尘埃粒子数标准要求 4.1.2 测试状态：测试人员不得多于2人. 4.1.3 采样高度：采样点一般与操作面水平（离地面0.8m～1.5m高度）。 4.1.4 采样时，应避开回风口，测试人员应在采样口的下风侧。 4.2照度监测 室内照度可用便携式照度计测定，室内照度必须在室温已趋稳定、光源光输出趋

于稳定，测点平面离地面0.8ｍ，按附件图中监测点进行测量，结果取平均值（照度≥300Lux），每季度监测一次。 4.3换气次数的检测 在空调系统正常运转不少于30分钟后，检测人员按定点测量法要求，使用风速仪贴近风口处测量，然后根据公式计算出换气次数。 表3换气次数标准要求 4.4沉降菌的检测 按照GB16294-1996标准进行检测。 表3沉降菌标准要求 4.6 微生物实验室的温度和湿度监测由实验室人员每天监测并留有记录。要求实验室的温度条件为15℃-25℃，湿度条件为35%-65%。 4.7 环境指标超标状况的处理 按照规定要求定期对洁净室的环境进行检测，根据检测数据，及时发现问题，并通知设备部以及相关负责人采取相应的措施。在采取了相应的措施之后，品管

部需要对环境进行二次监测，直至符合要求。 5.相关记录 《照度检测记录》 《风速检测记录》 《温湿度记录》 《洁净区沉降菌检测记录》 《微生物室环境检测报告》

食品微生物检验的内容及检测技术

食品微生物检验的内容及检测技术 食品安全检验过程的主要内容 食品微生物的检验。食物在生产过程中以及放置过程中会受到环境中微生物的损坏或影响，在部分研究中，将食品中细菌数量对食品的损坏程度作为食品安全检测的首 要内容。在食品微生物的检验过程中，我们主要对人体有害微生物进行检验，其中在食品安全检验过程中，因为食品中有多种微生物共存现象，所以在检验前，微生物检验员要把不同的菌体进行分离，这样才能更加清楚的了解各种微生物的数量及菌体的分布情况，包括生产型食品微生物，如醋酸杆菌，酵母菌等和使食物变质的微生物，如霉菌、细菌等和食源性病原微生物如溶血性大肠杆菌，肉毒杆菌等。对食品原辅料微生物的控制和产成品微生物的检验是保证食品安 全的重要途径。 针对食品致病菌的相关检验。不同的致病菌会对人们的身体健康有不同程度的危害，像我们在生活中经常吃到的大米，有些不法商家将发霉的大米加工后再次放入市场进行二次销售，虽然经加工后，在外表上和普通大米没啥两样，但这种大米中含有黄曲霉这一致病菌，据可靠信息表明，黄曲霉的危害性十分巨大，如果人们长时间吃这样的大米，出

现癌症的风险要比常人高出很多倍，由此可见，食品中致病菌的检验是保证我们能吃到放心食品十分关键的微生物检 测技术，所以我们在致病菌的检验上对不同种类的致病菌进行定量严格检验。如乳制品和肉制品的致病菌主要是黄曲霉菌和大肠杆菌，而蛋制品中则容易出现染沙门菌、大肠菌群、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，罐头食品容易出现肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌。 食品微生物检验中的主要特点 对食品检测要求相对较高。在食品微生物的一系列检验中，由于食品中涉及的微生物种类较多，因此加大了食品微生物检验的难度。国家标准或行业标准对不同食品中微生物的含量特别是致病菌的含量有明确的要求。在食品的运输过程中，食品致病菌以及其他微生物对相应的食品有一定的污染，随着微生物种类的增多，检测人员需要对食品受致病菌影响的程度、食品保质期以及其他相关的标准进行测量，难度会随着微生物种类的增多而复杂。所以在微生物检验上我们对每一阶段的食品安全检测都要重视，在各个微生物的测量上，相关的检测技术要求就有所提高。 食品微生物检验效率。随着食品市场的商品流通提高，人们对食品需求不断增加，而食品安全问题却在日益严重，为了保障人们在能够及时满足食品种类和数量要求的同时，进一步促进食品安全的保障措施落实，必须加强食品安

生物传感器的研究现状及应用

生物传感器的研究现状及应用 生物传感器？这个熟悉但又概念模糊的名词最近不断出现在媒体报道上，生物传感器相关的研究项目陆续获得巨额的研究资助，显示出越来越受重视的前景。要掌握生命科学研究的前研信息，争取好的研究课题和资金，你怎能不了解生物传感器？ 让我们来看看生物通最近的一些报道： 英国纽卡斯尔大学科学家研发了可用于检测肿瘤蛋白以及耐药性MASA细菌的微型生物传感器。该系统利用一个回旋装置来检测，类似导航系统和气袋的原理。振荡晶片的大小类似于一颗尘埃尺寸，有望可使医生诊断和监测常见类型的肿瘤，获得最佳治疗方案。该装置可以鉴定肿瘤标志物－蛋白以及其它肿瘤细胞产生的丰度不同的生物分子。该小组下一步目标是把检测系统做成一个手持式系统，更加快速方便地检测组织样品。欧共体已经拨款1200万欧元资金给该小组，以使该技术进一步完善。 苏格兰IntermediaryTechnologyInstitutes计划投资1亿2千万英镑发展“生物传感器平台（BiosensorPlatform）”——一种治疗诊断技术。作为将诊断和治疗疾病结合在一起的新兴疗法，能够在诊断的同时，提出适合不同病人的治疗方案，可以降低疾病诊断和医学临床的费用与复杂性，同时具备提供疾病发展和药品疗效成果的能力。目前该技术已被使用在某些乳癌的治疗上，只需在事前做些特殊的测试，即可根据结果决定适合的疗程。这个技术更被医学界视为未来疾病疗程的主流。 来自加州大学洛杉矶分校的研究者使用GeneFluidics开发的新型生物传感器来鉴定引起感染的特定革兰氏阴性菌，该结果表明利用微型电化学传感器芯片已经可以用于人临床样本的细菌检查。GeneFluidics'16-sensor上的芯片包被了UCLA设计的特异的遗传探针。临床样本直接加到芯片上，然后其电化学信号被多通道阅读器获取。根据传感器上信号的变化来判断尿路感染的细菌种类。从样品收集到结果仅需45分钟。比传统方法（需要2天时间）

微生物传感器20111134010025

微生物传感器的研发与应用 摘要：本文介绍了微生物传感器的结构组成，工作原理及分类，总结了该传感器在发酵工业、生物工程、医学等领域的应用，并对其今后的发展进行了展望。 关键词：微生物传感器；结构；原理；应用； 1.前言 生物传感器是一门集微电子学、生物技术等学科为一体的高新技术。由分 子识别元件和与之结合的信号转换器件两部分组成的分析工具。前者可以是生 物体成分（酶、抗原等）或生物体本身（细胞、细胞器、组织），它们能特异 地识别各种被测物质并与之反应；后者主要有电化学电极、离子敏场效应晶体 管（ISFET ）、热敏电阻器等，其功能为将敏感元件感知的生物化学信号转变 为可测量的电信号。 2.微生物传感器： 微生物传感器是生物传感器的一个重要分支。1975年Divies制成了第一 支微生物传感器，由此开辟了生物传感器发展的又一新领域。 在不损坏微生物机能情况下，将微生物固定在载体上制作出微生物传感器，达到对被分析物进行检测的目的。 3.微生物传感器的组成和原理： 3.1固定化微生物：微生物利用被检测物质进行呼吸或代谢，在此过程中， 消耗溶液中的溶解氧或产生一些电活性物质。 3.2换能器：燃料电池、光敏二极管、离子敏场效应管、气体敏感膜电极等 物质检测溶解氧和电活性物质的变化。 3.3信号输出装置：信号输出。 4.微生物传感器的分类：

根据微生物作用的生理特点分为： 1.呼吸活性测定性微生物传感器：由固定化需氧性细菌膜和氧电极组合而成。 它是以细菌呼吸活性物质为基础测定被测物的。试液中的有机物受到细菌细胞的同化作用，细菌细胞呼吸加强，扩散到电极表面上氧的量减少，电流减小。当有机物由试液向细菌膜扩散速度达到恒定时，产生一个恒定电流，此电流与试液中的有机物浓度存在定量关系，据此可测定有关有机物。 2.代谢活性型微生物传感器：固定化的厌氧菌膜和相应的电化学传感元件组合 而成。它是以细菌代谢活性物质为基础测定被测物的。此类细菌摄取有机物产生各种代谢产物，若代谢产物是氢、甲酸或各种还原型辅酶等，则可用电流法测定；若代谢产物是二氧化碳、有机酸（氢离子）等，则可用电位法测定。根据测定的电流或电位便可得到有机物浓度的信息。 5.微生物传感器的优势： 微生物传感器的稳定性较好，使用寿命也较长且价廉。微生物细胞中的酶因为仍处于它的自然环境中，这就增加了稳定性和活性，还免除了花费昂贵的酶纯化和辅助因素再生的步骤。另外，传感器的生物学成分可通过浸入生长基使之再生。因而有可能长时间地保持其生物催化活性，延长传感器的有效使用期限。微生物传感器的应用范围十分广泛。现已应用于发酵工业、环境监测、临床医学、食品检验等领域。 6.微生物传感器在发展中面临的问题： 一是多酶体系的存在，有可能对复杂样品产生非特异性响应。二是维持细胞活性是一个精细的过程。然而常常由于缺乏足够的经验而导致细胞过旱的死亡。微生物传感器的工作寿命因而受到影响。三是以全细胞为敏感元件的微生物电极，测定受到多种因素的影响，如细胞的通透性、酶的诱导活性、细胞内相关酶的活性状态等，因而微生物电极测定的精度和重复性一般比酶电极的要差。四是微生物固定化方法也需要进一步完善。首先，要尽可能保证细胞的活性；其次，细胞与基础膜结合要牢固，以避免细胞的流失；另外，微生物膜的长期保存问题也有待进一步的改进，否则难以实现大规模的商品化。五是生物

环境监测微生物知识培训试题(有答案)

环境监测微生物知识培训试题 一、填空题（共20空，每空3分） 1.环境监测微生物测试主要包括的项目有沉降菌、浮游菌、表面微生物、人员微生物。其中 沉降菌测试的时间一般为4h。 2.对于洁净区表面微生物取样,对于规则表面通常使用RODAC双碟进行测试,对于不规则表面 一般使用擦拭取样法。 3.静态状态下进行的环境监测，除监测操作人员（不得超过2人），无其他操作人员活动。 4.酵母菌和霉菌的监测为1年4次，一般在1、4、7、10月采用沙堡氏培养基加测。 5.所用的每一批号的培养基，应选取3只进行阴性对照，以检验此批号培养基无菌是否良好。 6.应在A级关键操作的同时，对A级背景区域进行微生物项目的监测。 7.807车间的N1070/06房间及809车间的T128、T149、T207、T239房间，如某一品种在该 区域生产时需要进行A级操作，则该房间按相连B级频率测试；如该房间没有A级操作过程，则按不相连B级频率测试。 8.无菌双碟在洁净区使用时，应在双碟表面标明测试区域、测试位点、测试日期、产品批号 （限有产品的A级区域），避免混淆。用于写标识的笔应为不易擦除的无尘记号笔。 9.沉降菌测试时，在准备好的双碟底部写好编号后放置在各取样点，将培养皿大盖全部打开， 并扣在不产尘的灭菌纸或PE膜上。 10.沉降菌测试过程中，如双碟被不慎触碰，A级双碟继续监测；其他级别的双碟结束测试 并重新放置双碟继续监测，结束后结果按累加计数。 11.浮游菌测试测试位置一般距地面0.8-1.5m左右，A级区域仪器放在工作台面上。 二、问答题（共2题，每题20分） 1.简述培养基双碟递入递出流程。 1.培养基由车间物流通道进入。 2.在D级递物柜间黄线外去掉纸箱或转运筐。 3.打开物流递物柜房间递物柜紫外灯，空照30分钟后，递入培养基双碟。 4.用紫外灯照射60分钟后方可递入C级区。5操作人员在C级区对双碟进行表面清洁，去掉最外层塑料袋包装，递入B级区递物柜内，用紫外灯照射60分钟后递入B级区存放。 6.A级隔离器内使用的双碟，在隔离器前灭菌去掉第二层包装，带单层塑料袋包装递入灭菌。 7.监测完毕，将培养基用双层聚乙烯包装袋热封好，递出无菌室。 2.简述使用R ODAC双碟进行表面微生物测试的步骤。 取R ODAC双碟倒置，打开培养皿盖，用适当压力(保证双碟表面与被测表面完全接触)使R ODAC双碟培养基表面接触被测部位，接触面积为25cm2，盖上培养皿盖，倒置。取样完毕，用蘸有75%乙醇的丝光毛巾擦取样部位三遍，以杜绝培养基或其他擦拭液的残留。

微生物传感器及其应用

微生物传感器及其应用 作者：赵蔚 上海交通大学生命学院研究生 学号：1080809077 摘要 本文介绍了微生物传感器的结构组成，工作原理及分类，总结了该传感器在发酵工业、生物工程、医学等领域的应用，并对其今后的发展进行了展望。 关键词 微生物传感器；结构；原理；应用 生物传感器是一门集微电子学、材料科学、生物技术等学科为一体的高新技术。它由分子识别元件(感受器)和与之结合的信号转换器件(换能器)两部分组成的分析工具或系统。前者可以是生物体成分(酶、抗原、抗体、激素、DNA)或生物体本身(细胞、细胞器、组织)，它们能特异地识别各种被测物质并与之反应；后者主要有电化学电极、离子敏场效应晶体管(ISFET )、热敏电阻器、光电管、光纤、压电晶体等，其功能为将敏感元件感知的生物化学信号转变为可测量的电信号。 微生物传感器是生物传感器的一个重要分支。1975年Divies制成了第一支微生物传感器。由此开辟了生物传感器发展的又一新领域。与最早问世的酶电极相比较，微生物传感器的稳定性较好，使用寿命也较长且价廉。微生物细胞中的酶因为仍处于它的自然环境中，这就增加了稳定性和活性，还免除了花费昂贵的酶纯化和辅助因素再生的步骤。另外，传感器的生物学成分可通过浸入生长基使之再生。因而有可能长时间地保持其生物催化活性，延长传感器的有效使用期限。微生物传感器的应用范围十分广泛。现已应用于发酵工业、环境监测、临床医学、食品检验等领域。微生物传感器具有广泛的发展前景。 结构和组成 微生物传感器由固定化微生物、换能器和信号输出装置组成，利用固定化微生物代谢消耗溶液中的溶解氧或产生一些电活性物质并放出光或热的原理实现待测物质的定量测定。其中最主要的部分是固定化微生物和换能器，这两部分对

《微生物检测技术》教学大纲

《微生物检测技术》教学大纲 一、基本信息 二、教学目标及任务 教学目标：通过36个学时的教学，努力使学生了解微生物检验检测中的基本技术体系，了解微生物检测技术在研究工作中的用途和新技术的发展动态，使学生在微生物检验检测方面能够提高认识，并对技术体系有一定的了解，以适应就业后在动植物检验检疫、食品品质检测等方面的微生物检验检测业务的需要，也能适应学生今后在进一步的研究和开发过程中所需要用到的研究性检测业务。 三、学时分配 四、教学内容及教学要求 绪论我国粮食生产、我国农业的发展趋势及其和微生物的关系。 重点介绍我国粮食生产的趋势和供需关系，使学生理解微生物检验检测的重要性 无难点 了解微生物检验技术的重要性

第一章微生物在自然界的分布、作用和特征 第一节微生物在自然界的分布 第二节微生物在自然界的作用 第三节微生物在自然界的特征 本章重点介绍微生物的多样性、微生物分布的普遍性和检测特定的微生物的难点 无难点 了解技术对微生物检验的重要性 第二章微生物检验技术和社会 第一节微生物检验技术和植物检疫 第二节微生物检验技术和食品安全 第三节微生物检验技术和研究 本章重点介绍微生物检验检测技术在植物检疫、食品安全、资源开发以及研究活动中的作用和意义 无难点 理解微生物检验技术对国民经济和国民生活安全的重要性，了解微生物检验技术作用范围 第三章微生物检测技术概述 第一节可培养微生物的检测 第二节VBNC的检测技术 第三节其它的微生物检测技术 针对本课程以各项技术为中心展开，缺乏系统性的特点，本章首先给各种微生物检测技术进行概述，尽量给学生提供一个整体观和一些关键技术的信息。 难点在于理解VBNC的检测 理解各种常用的微生物检验技术和方法 第四章样品的采集和处理 第一节气体的采样和处理 第二节液体的采样和处理 第三节固体的采样和处理 从实际出发，本课程设置了采样技术，对用于微生物检验检测的样品的采集进行细致的介绍。 难点在于理解各种采样设备和工具（缺乏实物） 使学生注意到采样行为对微生物的检测结果带来的误差，并培养学生在自己今后的工作中尽量减少采样造成的误差的意识。 第五章微生物检测技术 第一节可培养微生物的检测 以国标为蓝本，介绍可培养微生物的检测方法 学生实验中有一定的基础，应无难点 使学生了解微生物检测的国家标准在实际工作中的应用，使学生学会如何利用国标。 第二节VBNC的检测技术 以最新的研究或最经典的研究例子为蓝本，介绍VBNC检测的各种方法 难点在于理解检测的理论原理和实际操作之间的差距 使学生了解VBNC的检测的方法及其特征，在必要的时候能选择使用。 第六章微生物分离和培养技术 第一节微生物的分离 介绍可培养以及难培养的微生物的分离方法，着重介绍菌根菌的分离 难点在于对于微生物的分离效果的理解 希望学生能掌握基本的微生物分离方法 第二节可培养微生物的培养 1 病原物的培养 2 非病原物的培养 介绍可培养微生物的培养方法，着重介绍病原菌培养时的注意事项 难点在于对于如何传达培养病原微生物时的临场感

生物传感器 检测限

生物传感器检测限 我做了一个生物传感器没有良好的线性范围怎么确定最低检测限呢？大侠们指导下吧 找出一段线性最好的范围，求出他的斜率，此为敏感度！用三倍的背景电流除以敏感度，即为检测极限～～～关键是你所说的没有良好的线性范围我没怎么明白～～ 就是浓度和信号没有线性关系啊以3倍的空白的标准偏差作为检测限可以吗？我是这么理解的，如果没有线性关系的话，很难保证信号是你的目标物引起的～～～ 这样子啊但是随浓度增高信号是变强的就是没有线性关系郁闷死我了 如果你多次重复实验都是这样的一个结果，而且你也确定你的实验没有问题的话，考虑一下能斯特关系，即信号与浓度的-logC之间可有线性关系，一般情况下，电流与浓度之间应该是线性关系，能斯特关系比较多的出现在开路电位与浓度的关系上。 背景电流应该怎样来求？不是太理解，谢谢！ 我认为这是个好问题，当初自己在看文献的时候也产生过这样的疑问。希望论坛上能讨论更多这些研究细节的问题。线性范围和检测极限都是生物传感器重要的性能参数，对它们进行考察和分析在研究中是不可避免。其实也比较容易理解，如果有例子分析说明就好了。下面的图希望对你有帮助。 线性范围：

检测极限：

回归方程形式：y=a+b*x 请教一下：对于生物传感器，线性范围是否最好能有？是不是有的没有良好的线性范围？这样的话，检测下限就不能算出来了？ 我看到有的用3σ计算检测限，用的是空白值的标准偏差。 谢谢！ 不是所有的生物传感器都能得到线性的回归方程。但酶传感器一般是这样的，是由酶催化反应和电化学测试方法决定的。对于DNA传感器，待测物浓度和电流值通常不成线性关系，也就不能简单地线性拟合。但检测局限都是能确定的。也是根据公式Y-Yb=Sb。 3σ中的σ也即上贴公式中的Sb，就是空白值的标准偏差，通过测n次空白值后得到。只是在具体求值的时候，可以用标准偏差S代替，也有书上讲用回归标准偏差代替。

第一篇 微生物检验基本技术

第一章细菌检验基本技术 一、形态学检查 意义：1.为后续的进一步检验提供参考依据 2.迅速了解标本中有无细菌及菌量的大致情况 3.对少数具有典型形态特征的细菌可以做出初步诊断，为临床选用抗菌 药物治疗起重要的提示作用。 分为：染色标本和不染色标本的检查 1、不染色标本的检查：用于观察细菌的动力及运动情况。常用方法有压滴法和悬滴法。 2、染色标本检查：检查的内容：对标本合格与否进行评价；了解标本有无细菌及大致菌量；根据细菌形态、染色性质等对病原菌初步识别分类，决定进一步的生化反应鉴定血清学鉴定、并为临床选择用药提供帮助。 常用染色方法有：革兰染色（常用）、抗酸染色（结核病、麻风病）、荧光染色（结核、麻风、白喉、痢疾）、负染色（墨汁负染色法用于新型隐球菌检查）、特殊染色（鞭毛染色、荚膜染色、异染颗粒（白喉））。 二、培养与分离技术（关键） 目的：鉴定细菌的种类和保存菌种，为进一步确定细菌的致病性、药物敏感性提供依据。 牛肉膏无糖，可作为肠道细菌鉴别培养基的基础成分。 流感嗜血杆菌需要X因子和V因子。 理想的凝固物质具有的特性：本身不被细菌利用；在微生物生长温度范围内保持固体状态，凝固点的温度对微生物无害；不因消毒灭菌而破坏，透明度好，黏着力强。（琼脂最合适） 半固体培养基琼脂含量 0.3%~0.5%；固体培养基1.5%~2.0%。 培养基质量检验：1、无菌试验：将灭菌后的培养基置35℃温箱培养过夜，判定是否灭菌合格。2、效果检验：按不同的培养要求，接种相应菌种（符合要求的标准菌种），观察细菌的生长、菌落形态、色素、溶血及生化反应等特征，判断培养基是否符合要求。 制备好的培养基存放于冷暗处或4℃冰箱，一般不超过七天，如果用塑料袋密封。保存期可延长，但至多两周。 专性需氧：结核分枝杆菌、霍乱弧菌 微需氧菌（5%氧气、10%二氧化碳、85%氮气）：空肠弯曲菌，幽门螺杆菌兼性厌氧菌：大多数病原菌 专性厌氧菌：破伤风梭菌、脆弱拟杆菌 二氧化碳培养（5%~10%二氧化碳）：淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、布鲁菌 菌落是单个细菌在培养基上分裂繁殖而成的肉眼可见的细菌集落。 菌苔是由众多菌落连接而成的细菌群落。 三、生物化学鉴定技术 1、碳水化合物代谢试验 2、蛋白质和氨基酸代谢试验 3、碳源利用试验 4、呼吸酶类试验 5、其他

实验3环境微生物的检测

实验三环境微生物的检测 一、实验目的 1.了解周围环境中微生物的分布情况。 2.懂得无菌操作在微生物实验中的重要性。 3.了解四大类微生物的菌落特征。 二、实验原理 在我们周围的环境中存在着种类繁多的、数量庞大的微生物。土壤、江河湖海、尘埃、空气、各种物体的表面以及人和动物体的口腔、呼吸道、消化道等都存在着各种微生物。由于它们体积微小，人们用肉眼无法观察到它们个体的存在。但是只要稍加留意，我们就可以在发霉的面包、朽木上看到某些微生物群体。这些现象表明，自然界只要有微生物可以利用的物质和环境条件，微生物就可以在其上生长繁殖。据此，我们在实验室里就可以用培养基来培养微生物。 培养基是用人工配制的、适合微生物生长繁殖和产生代谢产物用的混合养料。其中含有微生物所需要的六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、生长因子、气体和水分。此外，根据不同的微生物的要求，在配制培养基时还需用酸液或碱液调节至适宜的pH。配制好的培养基必须进行灭菌。所谓灭菌是指采用各类的物理或化学因素，使物体内外的所有微生物丧失其生长繁殖能力的措施。经过灭菌后的物体是无菌的。消毒是与灭菌完全不同的概念，它是指用较温和的物理因素杀死物体表面和内部病原微生物的一种常用的卫生措施。 灭菌的方法较多，广泛使用的是高温灭菌，其中最常用的是高压蒸汽灭菌法。此法是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的。在1.05kg/cm2的蒸汽压力下，温度可达121℃。一般只要维持15~20min，就可杀死一切微生物的营养体和它们的各种孢子。 微生物的接种技术是生物科学研究中的一项最基本操作技术。为了确保纯种不被杂菌污染，在整个接种过程中，必须进行严格的无菌操作。在实验过程中必须牢固树立无菌概念，经常保持实验台及周围环境的清洁，严格无菌操作，避免杂菌的污染，这是保证实验成功的必要条件。

环境微生物监测标准操作规程

环境微生物监测标准操作规程 一、监测指征 1．感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。 2．监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被成功清除。 3．当某项感染控制措施改变时，评估其效果；或者根据规范要求，仪器设备或系统启用时监测。 4．目标性监测的需要。 5．循证医学证据支持。 二、空气监测(沉降法) (一)采样时间：消毒处理后与进行医疗活动之前。 (二)采样高度：距地面垂直高度80～150 cm。 (三)采样点设置 1．非洁净房间：室内面积≤30 ㎡，在对角线上设里、中、外3点。里、外两点位置各距墙1 m；室内面积>30 ㎡，设东、西、南、北、中5点。其中东、西、南、北4点均距墙1 m。9 cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5 min后送检培养。 2．洁净房间：清洁房间在空态或静态条件下，根据房间的不同清洁级别进行布点，操作按照GB 50333—2002。9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露30 min后送检培养。 (四)采样注意事项 1．采样人员做好手部卫生，佩戴口罩、帽子等个人防护装备。进入清洁房间采样须穿洁服。 2．皿盖打开顺序应先内后外；手臂及头不可越过培养皿上方；行走及放置动作要轻，尽量减少对空气流动状态的影响；皿盖应扣放，以防污染。 3．采样结束后，由外向内合上皿盖。 4．采样完毕的培养皿应在6 h内培养。 (五)实验室检验 1．培养皿在37℃培养48 h后，进行菌落计数和致病菌检验。普通营养琼脂培养基的配制按照GB／T 4789．28—2003；菌落计数方法按照GB\T 7918．2—1987；致病菌检验：溶血性链球菌检验按照GB／T 4789．11—2003，沙门菌检验按照CB\T 4789．4—2003，铜绿假单胞菌检验按照GB／T7918．4—1987，金黄色葡萄球菌检验按照CB\T 7918．5—1987,， 2．计算结果：非洁净房间以100 c㎡的平皿在空气中暴露5 min即相当于10 L 空气中的细菌数，计算公式为： 细菌数(cfu／m3)=1 000÷(A／100×t×10／5)×N=50 000N／At 式中：t——平皿暴露于空气中的时间(min)；N—一培养后平皿上的菌落数(cfu／平皿)；A——所用平皿的面积(c㎡)。 洁净房间直接以“个／(30 min·Φ90)”平皿为单位计算结果。 (六)结果判断： 参照GB 15982—1995《医院消毒卫生标准》。 三、物体表面监测 (一)采样时间： 消毒处理后4 h内。 (二)采样方法 被采样本面积<100 c㎡取全部表面；如采样面积≥100 c㎡，连续采样4个位置(不可有重叠)，每个位置采5 cm×5 cm的大小，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10 ml无菌生理盐水试管内。不规则的物体表面，用棉拭子直接涂擦，采样面积≥30 c㎡ (三)采样注意事项

微生物传感器在环境检测中的应用

环境污染物对人类健康带来了很大风险，有一些微生物传感器被用来检测有有机和无机毒性，并被广泛应用于工业中。重金属是废水中主要的有毒物质，非生物降解性金属离子在活着的生物体中积累，会导致许多疾病的出现。有机毒性是另一种对人体有害的主要环境污染物。关于一种低成本、简单快捷、监控重金属的工具的构想，微生物传感器可以列入考虑之中。此外还有许多传感器的环保应用途径，如对食物的判断。微生物传感器由于其承包地、稳定和反应快速等优点已被广泛应用于许多行业领域。 微生物传感器是一种结合了生物识别元件与信号传感器的检测分析装置，这种装置将微生物固定在换能器上，然后对目标物进行检测。信号传感器是用来将分析物的反应转换成可测量的与分析物的浓度成比例的信号。随着纳米技术的发展，纳米材料已被用于开发更可靠和有选择性的生物传感器，而且在产生更高灵敏度的换能器方面也有了巨大进展。微生物传感器已成为环境监控最有效的一种方法。 微生物传感器主要分为两种：光学微生物传感器和微生物燃料电池传感器。前者的使用可以产生变化多样的光学性能如吸附、荧光、柔光或折射率。这些都与分析物浓度一致;后者通过微生物分解代谢将有机机基质转化为电能，让微生物燃料电池在微生物传感器中作为传感器工作成为可能。光学微生物传感器又分为荧光微生物传感器、发光微生物传感器和比色微生物传感器。微生物传感器还有一个比较有前途的应用，就是应用于法医鉴定。可以对一件物品的物理特性进行判断，这是为了将其从同类物品中区分开来。 艾驰商城是国内最专业的MRO工业品网购平台，正品现货、优势价格、迅捷配送，是一站式采购的工业品商城！具有10年工业用品电子商务领域研究，以强大的信息通道建设的优势，以及依托线下贸易交易市场在工业用品行业上游供应链的整合能力，为广大的用户提供了传感器、图尔克传感器、变频器、断路器、继电器、PLC、工控机、仪器仪表、气缸、五金工具、伺服电机、劳保用品等一系列自动化的工控产品。 如需进一步了解图尔克、奥托尼克斯、科瑞、山武、倍加福、邦纳、亚德客、施克等各类传感器的选型，报价，采购，参数，图片，批发信息，请关注艾驰商城https://www.docsj.com/doc/2f12826385.html,/

第十二章 环境监测中的微生物学方法

第十二章环境监测中的微生物学方法 第一节水质的细菌学检测 ?细菌总数 细菌总数是指将l mL水样（原水样或经稀释的水样）放在营养琼脂培养基上，于37℃培养24小时后，所生长的细菌菌落总数。 细菌总数的测定结果常用“cfu（菌落形成单位）/mL”或“个/mL”表示。 根据水样中的细菌总数，可将天然水体划分为几类：细菌总数101~102 cfu/mL，极清洁水；102~103 cfu/mL，清洁水；103~104 cfu/mL，不太清洁水；细菌总数104~105 cfu/mL，不清洁水；大于105 cfu/mL，极不清洁水。我国生活饮用水的国家标准（GB5749-1985）规定，生活饮用水中的细菌总数不得超过102 cfu/mL。 ?腐生细菌数 自然水体中的腐生细菌数与有机物浓度成正比。因此，测得腐生细菌数或腐生细菌数与细菌总数的比值，即可推断水体的有机污染状况。 污水带的划分及其特征 污水带、特征多污带甲型中污带乙型中污带寡污带 腐生细菌数(个 /mL) 数十万至数百万数十万数万数十至数万 有机物含大量有机物，主要 是蛋白质和碳水化 合物 主要是氨和氨基 酸有物含量少 有机物含量极微 溶解氧极低或几乎没有厌 氧性 少量，半厌氧性较多，需氧性很多，需氧性BOD5非常高较高较低很低 细菌数与腐生带的划分 样点号细菌总数（百万个/mL）腐生细菌数（千个/mL）腐生菌数／ 总菌数（％） 腐生水波动范围平均波动范围平均 1 1.7～3.3 2.5 0.2～1.9 1.1 0.04 β-腐生带 2 1.6～3.4 2.4 0.9～3.0 2.0 0.08 β-腐生带 3 1.9～3.0 2.5 0.2～6.0 2.9 0.11 β-腐生带 4 4.3～5.0 4.6 9.7～16. 5 13.3 0.30 α-腐生带 5 1.8～3. 6 2.6 1.4～6.2 3.0 0.11 β-腐生带 6 3.5～6.8 4.8 59.2～175.2 116.0 2.42 多-腐生带 7 3.1～4.4 3.7 19.2～20.5 20.0 0.54 α-腐生带 8 2.0～2.7 2.3 10.3～36.2 20.2 0.84 α-腐生带 9 2.3～6.9 4.0 10.8～147.6 64.9 1.62 多-腐生带?粪便污染指示菌

微生物在环境监测中的应用

微生物在环境监测中的应用 作者：高敏华丁昕 来源：《青年生活》2019年第28期 摘要：微生物在我们的生活环境中无处不在。随着科学技术的进步和技术的发展，人们对环境污染的监测手段越来越丰富，各种监测方法的监测精度和速度也在不断提高。其中，生物监测方法用于弥补物理和化学污染监测的不足。它可以预测污染对环境和生物的综合影响。它是监测环境污染的一种有效方法。 关键词：微生物;污染检测。 自二十世纪以来，人类社会进入了一个快速发展的时期。改革开放以来，中国的工农业成就引起了全世界的关注。但是与此同时，经济社会等的飞速发展，已经给我们的生活环境和整个地球生态造成了巨大的负担，无论是环境污染、资源浪费还是能源问题，都已经严重影响到人类社会的生存发展，环境问题已经成为了人类社会继续发展的一个关键。面对日益严峻的环境问题，世界各国都加强了关于污染监测方面的工作，而微生物对于环境的各种变化极其敏感，利用微生物监测的方法，可以有效、及时、精确的掌握环境状况，能有效弥补理化监测方法的不足。 1、环境污染的指示微生物 环境中的污染物包括：①化学性污染：如糖类、含氮有机物、脂肪、有机酸等天然有机物及磷、钾、硫等无机化合物;生物污染：细菌、真菌、病毒等微生物。众所周知的是，微生物在我们身边的环境中无处不在，但是目前不可能对种类繁多的化学物质和微生物逐一进行检测，必须开发有一定代表意义的微生物我反应环境中常见有机物及微生物的污染状况。这一种微生物即被称为指示微生物，也称作指示菌。指示微生物一般分为三类，包括：一般污染指示微生物、粪便污染指示菌和其他指示微生物。[1] 2、常用的微生物检测技术 目前常用的微生物检测技术有显微检测技术、染色检测技术、分离纯化技术和其他一些微生物检测技术。[2] 2.1显微检测技术 顯微检测技术是目前常用的微生物检测技术之一，包括光学显微镜、暗场显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、电子显微镜等设备。在不同的检测需求中使用的检测设备是不同的。显微

微生物检验的基本操作技术

微生物检验的基本操作技术 一、无菌操作技术 1、定义 是指在执行实验过程中，防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法； 无菌操作技术是微生物实验的基本技术，是保证微生物实验准确和顺利完成的重要环节。 2、内容 无菌操作技术主要包括两方面： 1）创造无菌的培养环境。包括提供密闭的培养容器、培养容器的灭菌、培养基的灭菌等； 2）在操作和培养过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台的消毒与检测、操作工具、器皿灭菌、操作方法等。 3、无菌操作原则 1）在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区，接种时必须穿工作服、戴工作帽，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球将手擦干净； 2）在操作前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯，进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼3次后使用。严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的钳、镊子等； 3）从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不能触及试管或平皿边； 4）接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒； 5）接种环或接种针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必须时还要烧到环和针与杆的连接处； 6）吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。倾倒平板应在超净台内操作，并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。 二、无菌操作的环境要求 1、无菌室 （1）无菌室的结构：更衣间、缓冲间、操作间；

微生物在环境保护中的应用

微生物在环境保护中的应用 摘要：本文论述了现阶段微生物在环境保护领域的应用与发展前景，指出微生物将会在未来的环境保护领域中发挥重要作用。 关键词：微生物环境保护应用 中图分类号：X172 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）02-0084-02 1 前言 近年来，随着人口的快速增长、工业进程的加快，全球性环境问题正在日益加剧，环境保护刻不容缓。本文主要介绍了微生物在环境污染的水治理、大气治理等方面的应用，以及微生物除臭、生物修复等新技术的应用。 2 微生物在环境保护中的具体应用 2.1 水污染治理 微生物正常代谢会对废水中含有的各种污染物进行搬移和转化，污水处理正是利用这一点，使废水净化。微生物来源广、易培养、增殖快、适应性强，处理水质的范围广。其处理废水的反应在常规条件下经过酶催化即可完成，且处理费用低，在水污染治理中

前景较广。 2.1.1 生物膜 以天然或合成材料为载体，在其表面形成一种特殊的膜，为微生物提供附着表面，能够加强对污染物的降解作用，这也被称为生物膜技术。张凤君等[2]以中空纤维膜作为无泡供氧的生物膜载体，进行生物膜在污水处理中的应用研究。实验结果表明，采用PV A 作为包埋剂，且包泥量为1∶1的情况下，COD的去除率稳定在90%左右，氨氮的去除率稳定在80%左右。 2.1.2 固定化微生物 通过物理或化学方法将游离的微生物细胞定位在限定空间区域内，使其不悬浮于水、保持活性并可反复使用，说的就是固定化微生物技术。唐凤舞等[1]在城市污水处理的研究中应用了固定化微生物技术，研究结果表明，在pH=8.0、固定化颗粒与污水的质量比例为16%，温度为25℃时，硝基苯去除率高达97.9%，COD去除率达到89.2%，出水的水质稳定。 2.1.3 复合微生物 是指利用现代遗传育种技术选育优势菌株，构建出理想的基因工程菌用以提高微生物对难降解有机物的去除能力的一种技术。高云超等[3]在复合微生物制剂（CMP）用于猪场污水处理的研究结果表明，光合

微生物学检验常用的技术方法

微生物学检验常用的技术方法 随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查及研究等提供科学依据。 微生物形态学检查 细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，它是细菌分类和鉴定的基础，可根据其形态、结构和染色反应性等，为进一步鉴定提供参考依据。 一、显微镜检查 由于细菌个体微小，肉眼不能看到，必须借助显微镜的放大才能看到。一般形态和结构可用光学显微镜观察，其内部的超微结构则需用电子显微镜才能看清楚。常用显微镜有如下几种。 1.普通光学显微镜 采用自然光或灯光为光源，其波长约为0.4μm。显微镜的分辨率为波长的二分之一，即0.2μm，而肉眼可见的最小形象为0.2mm。故用油(浸)镜放大1 000倍，能将0.2μm的微粒放大成肉眼可见的0.2mm。普通光学显微镜可用于细菌、放线菌和真菌等的观察。 2.暗视野显微镜 常用于观察不染色微生物形态和运动。在普通显微镜安装暗视野聚光器后，光线不能从中间直接透入，视野呈暗色，当标本接受从聚光器边缘斜射光后可发生散射，因此可在暗视野背景下观察到光亮的微生物如细菌或螺旋体等。 3.相差显微镜 相差显微镜利用相差板的光珊作用，改变直射光的光位相和振幅，将光相的差异转换为光强度差。在相差显微镜下，当光线透过不染色标本时，由于标本不同部位的密度不一致而引起光相的差异，可观察到微生物形态、内部结构和运动方式等。 4.荧光显微镜 荧光显微镜与普通光学显微镜基本相同，主要区别在于光源、滤光片和聚光器。目前实验仪器中大多数使用的是落射光装置，常用高压汞灯作为光源，可发出紫外光或蓝紫光。滤光片有激发滤光片和吸收滤光片二种。用蓝光的荧光显微镜除可用一般明视野聚光器外，也

微生物检测技术

乳品中微生物检测技术和发展方向 摘要：乳品微生物检测技术对乳制品的质量安全、营养健康及疾病预防具有重要作用，其方法已由培养水平向分子水平迈进。本文系统地介绍了几种乳品微生物检测的技术及方法，并展望了其检测技术的发展方向。 关键词：乳品微生物检测发展 Dairy products of microorganism inspection technology and the development direction Abstract: Detection technology and methods in milk microorganism is important for security，nutritional health and disease prevention. It has developed from culture level to molecule level. Several detection technology and methods are introduced，the prospect of detection technology is looked forward. Keywords: dairy microbial；detection；development 1引言 乳品行业是关系到人类健康的敏感行业，乳品在人类的膳食结构中占有十分重要的地位。除了营养知识和营养意识等因素外，乳品质量安全是人们关注的焦点。而频频爆发的乳品安全事件已经把乳品质量安全提到了一个空前的高度，在众多乳制品质量安全的相关检测项目中，微生物含量检测也备受关注。因此建立和完善乳品微生物检测技术和检测体系迫在眉睫。本文对目前具有良好发展空间的乳品微生物检测技术进行了综述，旨在为我国乳品微生物的快速鉴定及检测提供一些参考。 2 国内外乳品微生物检测项目 根据自身发展及安全需求，国内外对乳品中的微生物检测项目进行了规定。作为世界最大的乳品生产国之一的新西兰，乳品微生物的检测项目主要有：30℃需氧微生物、霉菌和酵母菌、大肠菌群、大肠埃希氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、凝固酶阳性葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、弯曲杆菌、产气夹膜梭菌和乳酸菌。我国乳品微生物检测项目主要有：计算平皿细菌总数、乳制品要求检测菌落总数、大肠菌群、致病菌、酵母和霉菌[1]。 3微生物学检测方法 改进微生物培养法 改进微生物培养法就是对传统微生物检测方法的改进。绝大多数企业和质检部门常用的微生物学检测方法有：标准平板计数法（SPC）和显微镜直接观

环境微生物监测频次

环境微生物监测频次 环境卫生学监测是检验消毒效果及工作质量的一种手段。已经废止的《医院感染管理 规范》曾要求环境卫生的监测要每月进行，而近几年颁布实施的新规范却大大降低了监测频次的要求。 环境卫生学监测包括对空气、物体表面、医护人员手的监测。常规监测是在充分准备的情况下，即消毒后或医疗操作前采样，只要监测过程没有被污染，监测结果一般都能达到标准要求。也即是说，常规监测不能真实反映医院环境的污染程度，监测结果并非日常环境消毒工作的真实反映，因此，常规监测与医院感染之间没有相关性。美国CDC“医疗机构环境感染控制指南”提出医疗环境很少会直接引起疾病的传播，除非病人有免疫缺陷或无意中暴露于环境中的病原体（如曲霉菌、军团菌）。因此美国CDC 建议医院不必对环境进行常规取样、监测，除非样本直接用于流行病调查或监测结果可直接用于感染控制。 近年来的医院感染中，因病毒所致的医院感染暴发很常见，但环境卫生学监测却不包含病毒，因此，监测结果是有局限性的。同样，医院感染的聚集性发生，并没有通过常规 环境卫生学监测被及时发现，常规监测结果与医院感染聚集性发生无相关性。近几年国家陆续更新的规范中对环境微生物的监测要求搜集整理如下： 一、WS/T368 —2012 《医院空气净化管理规范》 空气净化效果的监测要求 医院应对感染高风险部门如手术部（室）、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心（室）、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行监测。监测频度为每季度。洁净手术部（室）及其

他洁净场所、新建与改建验收时以及更换高效过滤器后应进行监测；根据洁净房间总数，合理安排每次监测的房间数量，保证每个洁净房间能每年至少监测一次。遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时进行监测，并进行相应致病微生物的检测。 二、WS/T313 —2009 《医务人员手卫生规范》 手卫生效果的监测要求 医疗机构应每季度对手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴室、血液透析病房、烧伤病房、感染疾病科、口腔科等部门工作的医务人员手进行消毒效果的监测；当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生有关时，应及时进行监测，并进行相应致病性微生物的检测。 三、WS/T510 —2016 《病区医院感染管理规范》怀疑医院感染暴发与空气、物体表面、医务人员手、消毒剂等污染有关时，应对空气、物体表面、医务人员手、消毒剂等进行监测，并针对目标微生物进行检测。 四、WS 509-2016 《重症监护病房医院感染预防与控制规范》 应每季度对物体表面、医务人员手和空气进行消毒效果监测，当怀疑医院感染暴发、ICU 新建或改建以及病室环境的消毒方法改变时，应随时进行监测，采样方法及判断标准应依照GB15982 。 重症监护病房是指医院集中监护和救治重症患者的专业病房，为因各种原因导致一个或多个器官与系统功能障碍危及生命或具有潜在高危因素的患者，及时提供系统的、高质量的医学监护和救治技术。 五、WS 507 —2016 《软式内镜清洗消毒技术规范》 （一）消毒剂浓度监测：