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现代分子生物学复习题

现代分子生物学

一.填空题

1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。

2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。

3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。

4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。

5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。

6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。

7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染

小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。

8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、

mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′

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末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。

9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一

种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。

10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc

构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。

11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、

CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。

12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转

录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。

13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。

14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、

TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。

其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。

15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G

为_17.2%_和C为_17.2%__。

16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。

17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA

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‘TAQ 、引物、缓冲液、dNTP。

18.在琼脂糖电泳中，DNA会向正极移动。

19.染色体包括蛋白质、染色体两大部分。

20.环状DNA双链的复制主要可分为θ形、滚环形、D-

环形三种类型。

21.转录的基本过程包括转录的起始、延伸、终止。

22.半乳糖对细菌有双重作用；一方面可以作为碳源供细

胞生长；另一方面它又是细胞壁的成分。所以需要

一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的

永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子

S1对高水平合成进行调节。有G时转录从 S2 开始，

无G时转录从 S1 开始。

23.DNA重组技术也称为基因克隆或分子克隆。最终目的是

把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤：

①提取供体生物的目的基因或称外源基因，酶接连接到

另一DNA分子上克隆载体，形成一个新的重组DNA分子。

②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复

制保存，这个过程称为转化。

③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。

④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因

是否表达。

24.质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严

格控制的称为严紧型质粒，不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为松弛型质粒。

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25.PCR的基本反应过程包括：变性、退火、延伸三个阶段。

PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物约20个碱基左右。

b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。

c、dNTP，

d、

作为模板的目的DNA序列

26.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT

所对应的反式作用蛋白因子分别是 TFIID 、 SP-1和CTF/NF1。

27.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、

TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是：D、A、B、E。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。

二.名词解释

质粒:是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真

核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖

核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和

放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。在基因工程

中质粒常被用做基因的载体。

启动子:是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，

也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中，转

录的起始是个关键。常常某个基因是否应当表达决定

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于在特定的启动子起始过程。

信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。

核受体:细胞内受体分布于胞浆或核内，本质上都是配体调控的转录因子，均在核内启动信号转导并影响基因转录，统称核受体。

hnRNA:核不均一RNA，即mRNA的前体，经过5’加帽和 3’酶切加多聚A，再经过RNA的剪接，将外显子连接成开放阅读框，通过核孔进入细胞质就可以作为蛋白质合成的模板了。

分子杂交:互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。

基因组文库:将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞，进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库，它包含了该生物的所有基因。

密码的简并性:由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为密码的简并性

衰减子：在色氨酸操纵子中，当mRNA合成起始以后，除

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非培养基中完全没有色氨酸，否则，转录总是在长162bp的前导区终止，产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子，终止trp基因转录，因为转录终止发生在这一区域，并且这种终止是被调节的，这个区域被称为衰减子。

DNA拓扑异构酶：DNA在细胞内往往以超螺旋状态存在，DNA 拓扑酶催化同一DNA分子不同超螺旋状态之间的转变。DNA拓扑异构酶有两类，大肠杆菌的ε蛋白(MW-110000)就是一种典型的拓扑异构酶Ⅰ.它的作用是暂时切断一条DNA链，形成酶-DNA共价中间物而使超螺旋DNA 松弛化，然后再将切断的单链DNA连接起来，而不需要任何辅助因子。而大肠杆菌中的DNA旋转酶(DNAgyrase)则的典型的拓扑异构酶Ⅱ，能将负超螺旋引入DNA分子，该酶能暂时性地切断和重新连接双链DNA，同时需要ATP水解为ADP以供能。

基因表达：遗传信息从DNA到RNA再到蛋白质的过程。

前导肽：分析色氨酸操纵子前导肽的序列发现，它包括起始密码子AUG和终止密码子UGA；如果翻译起始于AUG，应该产生一个14个氨基酸的多肽，这个假设的多肽被称为前导肽（实际上还没有观察到）。

启动子：启动子是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的

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部位，也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中，转录的起始是个关键。常常某个基因是否应当表达决定于在特定的启动子起始过程。

DNA分子克隆技术：（也称基因克隆技术）在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA分子克隆(或基因克隆)。其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。载体（vecors）在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA 分子片段。主要目的是获得某一基因或NDA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA 片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库（genomic library）,另一种是cDNA库。

G蛋白：受体与配体结合后即与膜上的偶联蛋白结合，使其释放活性因子，再与效应器发生反应。位于受体与效应器之间的则是偶联蛋白。目前所知的偶联蛋白种类较多，都属于结构和功能极为类似的一个家族，由于它们都能结合并水解GTP，所以通常称G蛋白，即鸟苷酸调节蛋白（guanine nucleotide regulatory

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protein）。

受体型酪氨酸激酶：蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase，PTK)是一组催化酪氨酸残基磷酸化的酶，他们通过从三磷酸腺苷上转移一个磷原子到酪氨酸残基上，而使底物蛋白活化. 目前，已发现PTK有100多个家族成员，他们通过活化底物蛋白，参与细胞的信号转导，最终，这些信号转导入细胞核内，引起某些基因表达水平的改变，使诸如细胞生长之类的复杂的细胞功能得以调节. 因此在调节细胞的分化、生长和激活中起到重要作用.根据PTK的结构，可分为受体型和非受体型PTK两大类，前者又称跨膜PTK，后者又称细胞内PTK. 生长因子受体PTK(受体型酪氨酸激酶或RTK): 这一类蛋白酪氨酸激酶为跨膜蛋白，其胞外部分为配体结合区，中间有跨膜区，胞内部分含有蛋白酪氨酸激酶的催化结构域. 根据他们的结构不同可分为，表皮生长因子受体(EGFR)家族、胰岛素受体家族、血小板衍生生长因子(PDGF)受体家族和成纤维细胞生长因子受体(FGFR)家族.

cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。

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CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）

回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。

micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。

核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。

信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。

弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。

上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子，弱化子等。

DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。

SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。

单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。

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顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。

Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’ 3’外切酶活性

RNA编辑（RNA editing）:是某些RNA，特别是mRMA的一种加工方式，它导致了DNA 所编码的遗传信息的改变，是因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。

反密码子:tRNA上能与密码子以碱基互补方式配对的对应碱基，一般具有“摆动性”。

转座子（transposon）:是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。

基因（gene）:产生一条多肽链或功能RNA所必须的全部核苷酸序列。

基因族( gene cluster)：真核生物中许多相关的基因常按功能成套组合，被称为基因家族，同一家族的成员有时紧密的排列在一起，成为基因簇。

C-值（C-value）：通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。

内含子(intron)：指基因组中的非编码序列。

锌指（zinc finger）：属于反式作用因子，其特有的半胱氨酸和组氨酸之间氨基酸残基数基本恒定，有锌参与才具备转录调控活性。

转座子(transposon) ：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。

基因家族(gene family)：真核生物中许多相关的基因常按功能成套组合，被称为基因家族。

模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域。

魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只

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是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们

是超级调控子或称为魔斑。

蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能

分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)

产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ

基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。

称之为蓝-白斑筛选。

锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序

列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC

和已知的序列作为引物进行PCR扩增。

三、选择题

1.DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确（C ）

A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数

B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似

C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧

D.二股多核苷酸链通过A-T,C-T之间的氢键连接

E.维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。

2.有关DNA的变性哪条正确（B ）

A.变性是分子中磷酸二酯键的断裂

B.变性后紫外吸

收增加 C.变性后粘度增加

D.热变性DNA速冷后可复性

E.DNA分子开始变性的温

度叫Tm

3.DNA聚合酶III的描述中哪条不对（B ）

A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物

B.具有5′→3′外切酶活性

C.具有3′→5′外切酶活性

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D.具有5′→3′聚合活性

E.聚合反应需要引物

4.有关反转录的正确叙述（B ）

A.反转录反应不需要引物

B.反转录后的产物是cDNA

C.反转录的板可以是RNA,也可以是DNA

D.合成链的方向是3′→5′

E.反转录反应的底物是4种NTP。

5.有关蛋白质合成，下列哪条是错误的（C ）

A.基本原料是20种氨基酸

B.直接模板是mRNA

C.合成的方向是从羧基端到氨基础

D.是一个多因子参加的耗能过程

E.是多聚核蛋白体循环

6.在乳糖操纵子中，阻遏蛋白结合的是（A ）

A.操纵基因

B.调节基因

C.启动基因

D.结构基因

E.终止基因

7.氨基酸活化酶：（C ）

A.能识别一组同功tRNA

B.催化磷酸二酯键的形成

C.催化氨基酸结合到tRNA

D.催化氨基酸的氨基与tRNA结合

E.催化氨基酸的羧基与GTP反应

8.稀有核苷酸含量最高的核酸是（A ）

A.tRNA

B.mRNA

C.rRNA

D.DNA

E.hnRNA

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9.真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是（ E ）

A.翻译与转录偶联进行

B.模板都是多顺反子

C.转录后的产物都需要进行加工修饰

D.甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸

E.都需要GTP

10.与pCAGCT互补的DNA序列是（ A ）

A.pAGCTG

B.pGTCGA

C.pGUCGA

D.pAGCUG

E.pTCGAC

11.色氨酸操纵子的调控需要（ C ）

A.增强子

B.转录子

C.衰减子

D.顺反子

E.调

节子

12.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码（ A ）

A.甲硫氨酸

B.S-腺苷蛋氨酸

C.苯丙氨酸

D.丙氨酸

E.以上都不是，而是TAG

13.真核细胞中mRNA的加工修饰不包括（ B ）

A.在mRNA3′末端另polyA尾

B.mRNA的前体是核内hnRNA

C.在mRNA5′端形成7甲基尿苷酸帽子结构

D.除去非结构信息部分

E.不同RNA片断之间的拼接

14.真核生物基因组中没有（C ）

A.内含子

B.外显子

C.转录因子

D.插入序列

E.高度重复序列

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15.DNA的半保留复制需要（A ）

A.核心酶和单链DNA结合蛋白

B.模板DNA和四种NTP

C.引物和RNA聚合酶

D.DNA引物和连接酶

E.冈崎片段和终止因子

16.PCR实验的特异性主要取决于（C ）

A.DNA聚合酶的种类

B.反应体系中模板DNA的量

C.引物序列的结构和长度

D.四种dNTP的浓度

E.循环周期的次数

17.RNA电泳转移后与探针杂交叫作（B ）

A.Southernblot

B.Northernblot

C.Westernblot

D.斑点杂交

E.原位杂交

18.对限制性核酸内切酶的作用，下列哪个不正确（E ）

A.识别序列长度一般为4-6bp

B.识别序列具有回文结构

C.切割原核生物D分子

D.只能识别和切割双链DNA分子

E.只能识别和切割原核生物DNA分子

19.在基因工程实验中，DNA重组体是指（C ）

A.不同来源的的两段DNA单链的复性

B.目的基因与载体的连接物

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C.不同来原的DNA分子的连接物

D.原核DNA与真核DNA的连接物

E.两个不同的结构基因形成的连接物

20.对基因工程载体的描述，下列哪个不正确（D ）

A.都可以转入宿主细胞

B.都有限制性核酸内切酶的识别位点

C.都可以连接进目的基因

D.都是环状双链DNA分子

E.都有筛选标志

21.有关DNA链的描述哪条不对（ B ）

A.DNA是由很多脱氧单核苷酸形成的多核苷酸

B.DNA5’端是-OH基，3’端是磷酸

C.DNA一级结构的书写为P：pACTGAC

D.单核苷酸之间通过磷酸二酯键相连

E.DNA的一级结构是指dAMP,dGMP,dCMP,dTMP的排列

22.有关DNA变性的描述哪条对？（ C ）

A.DNA变性时粘度增加

B.变性时磷酸二酯键断裂

C.DNA变性温度的中点叫Tm

D.DNA变性时紫外吸收增加

E.DNA变性时280nm波长吸收增加

23.DNA聚合酶催化的反应（ D ）

A.催化四种单核苷酸的聚合

B.需要DNA做引物

C.DNA聚合酶有种属特异性

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D.产物DNA的性质取决于模板，与DNA聚合酶来源无关

沿着3’-5’方向合成

24.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式（ C ）

A.环式

B.D-环式

C.半保留

D.全保留

E.散布式

25.真核细胞mRNA的加互修饰不包括（ A ）

A.除去非结构信息部分

B.在mRNA的3’末端加polyA尾巴

C.经过较多的甲基化过程

D.在mRNA的5’末端形成帽子结构

E.mRNA由核内不均一RNA转变而来

26.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码子（ C ）

A.苯丙氨酸；

B.酪氨酸；

C.甲硫氨酸；

D.S-腺苷蛋氨酸

E.以上均不是，而是TAG

27.翻译的起始不需要（ E ）

A.Met-tRNA

B.mRNA模板

C.核蛋白体

D.起始因子

E.dGTP

28.下面哪些因素可防止DNA上的一个点突变表现在蛋白质的一级结构（ E ）

A.DNA的修复作用

B.密码的简并性

C.校正tRNA 的作用

D.核糖体对mRNA的校正

E.以上都正确

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29.关于氨基酰tRNA合成酶，哪项不正确（ E ）

A.有20种，对应于20种氨基酸

B.可使酶识别tRNA

和氨基酸

C.有α及/或β亚基

D.疏基酶

E.借次级键与相

应的氨基酸结合

30.真核基因调控中最重要的环节是（ B ）

A.基因重排；

B.基因转录；

C.DNA的甲基化与去甲基化；

D.mRNA的半衰期；

E.翻译速度；

四、判断题

1.增强子的作用具有细胞或组织的特异性。（╳）

没有细胞或组织的特异性。

2.原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物，开放

性启动子复合物为三元复合物。（√）

3.半保留复制是指有50%的基因是新合成的，另50%的基

因是上一代的。（╳）

半保留复制指的是复制时只能以一条链为模板，复制出

新链，后代与前代有相同的遗传信息。

4.基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA，后随链的引

物是RNA 。( ╳ )都是RNA。

5.对正调控和负调控操纵子而言，诱导物都能促进基因的

转录。（√）

6.由于密码子存在摇摆性，使得一种tRNA分子常常能够

识别一种以上同一种氨基酸的密码子。（╳）由于反

密码子具有摇摆性而不是密码子，是由于密码子具有简并性。

7.半保留复制是指有50%的基因是新合成的，另50%的基

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因是上一代的。（╳）

半保留复制指的是复制时只能以一条链为模板，复制出

新链，后代与前代有相同的遗传信息。

8.凝胶的分辨能力同凝胶的类型和浓度有关，浓度越低，分辨力越强。( ╳ )

浓度越低，分辨力越弱。

9.色氨酸操纵子中含有弱化子序列。（√）

色氨酸操纵子的转录调控除了阻遏系统外，还有弱化子

系统。

10.蛋白质由二十种氨基酸组成，包括胱氨酸。 ( ╳ )

不包括胱氨酸，蛋白质中的胱氨酸是蛋白质合成后通过

个半胱氨酸的氧化作用形成的。

五.简答题

1.简述乳糖操纵子的正负调控机制

答：包括正负调控两种（—）阻遏蛋白的负调控①当细胞内有诱导物时，诱导物结合阻遏蛋白，此刻聚合酶与启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操纵子结构基因。

②当无诱导物时，阻遏蛋白结合与启动子与蛋白质部分重

叠不转录。（=）CAP正调控①当细胞内缺少葡萄糖时ATP →CAMP结合，CRP生成CAP与CAP位点结合，增前RNA 聚合酶转录活性。②当有葡萄糖存在时CAMP分解多合成少，CAP不与启动子上的CAP位点结合RNA聚合酶不与操纵区结合无法起始转录结构基因表达下降。

2.简述转录的基本过程?

答：转录的基本过程包括：模板的识别；转录起始；通过启动子；转录的延伸和终止。

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要求叙述各过程设计到的因子。

3.简述原核和真核细胞在蛋白质翻译过程中的差异.

答：1、起始因子不同；2、翻译过程（肽链延伸）因子不同；3、终止因子不同。(要求详述其差异)。

4.试比较原核和真核细胞的mRNA的异同.

答：①真核生物5‘端有帽子结构大部分成熟没mRNA 还同时具有3’多聚A尾巴，原核一般没有；②原核的没mRNA 可以编码几个多肽真核只能编码一个。③原核生物以AUG 作为起始密码有时以GUG，UUG作为起始密码，真核几乎永远以AUG作为起始密码。④原核生物mRNA半衰期短，真核长。⑤原核生物以多顺反子的形式存在，真核以单顺反子形式存在。

5.原核生物与真核生物启动子的主要差别？

答：原核生物

真核生物

TTGACA --- TATAAT------起始位点增强子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位点

35 -10 -110 -70 -25

6.利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构

的原理与方法。

答：原理是：采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂

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现代分子生物学复习提纲第一章绪论第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。

现代分子生物学试题

现代分子生物学试题邯郸学院12生技 Chapter 3 生物信息的传递——从DNA到RNA 一、名词解释： 1、Transcription 2、Coding strand (Sense strand) 3、Intron 4、RNA editing 5、Messenger RNA (mRNA) 二、判断正误： 1、基因表达包括转录和翻译两个阶段 2、mRNA是以有义链为模板进行转录的 3、转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生 4、σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始 5、聚合酶可以横跨40个碱基对，所以解旋的DNA区域也是40个碱基对 6、流产式起始是合成并释放2~9个核苷酸的短RNA转录物 7、启动子是有义链上结构基因5’端上游区的DNA序列 8、大肠杆菌基因中存在-10bp处的TTCACA区 9、-35区是指5’到3’方向-35区最后一个碱基离+1碱基为35个bp 10、真核基因几乎都是单顺反子三、单选： 1、_______号帽子存在于所有帽子结构中 A、0号 B、1号 C、2号 D、以上全不是 2、在对启动子识别中起关键作用的是_______ A、α亚基 B、β亚基 C、σ因子 D、β’亚基 3、RNA聚合酶中提供催化部位的是_______ A、α+α B、α+β C、α+β’ D、β+β’ 4、_______是细胞内更新率极高不稳定的RNA A、mRNA B、rRNA C、tRNA D、snRNA 5、mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式是_______ A、5’端帽子 B、多聚腺苷酸尾 C、ρ因子 D、以上都不是 6、真核生物RNA聚合酶II所形成的转录起始复合物不包括_______ A、TBP B、TFIIA C、TFIIC D、TFIID 7、真核生物转录的所在空间是_______ A、细胞质 B、细胞核 C、核孔 D、线粒体 8、ρ因子本质上是一种_______ A、核苷酸 B、蛋白质 C、多糖类 D、碱基

分子生物学试题及答案

分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。

除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、

现代分子生物学复习题

现代分子生物学一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚！

末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚！

考研普通生物学考研朱玉贤《现代分子生物学》考研真题

考研普通生物学考研朱玉贤《现代分子生物学》考研真题第一部分考研真题精选一、选择题 1DNA模板链为5′-ATTCAG-3′，其转录产物是（）。[浙江海洋大学2019研] A．5′-GACTTA-3′ B．5′-CUGAAU-3′ C．5′-UAAGUC-3′ D．5′-CTGAAT-3′ 【答案】B查看答案【解析】在RNA转录过程中，RNA是按5′→3′方向合成的，以DNA双链中的反义链为模板，在RNA聚合酶催化下，以4种核苷三磷酸（NTPs）为原料，根据碱基配对原则（A-U、T-A、G-C）。因此答案选B。 2DNA的变性（）。[扬州大学2019研] A．可以由低温产生 B．是磷酸二酯键的断裂 C．包括氢键的断裂 D．使DNA的吸光度降低【答案】C查看答案【解析】DNA的变性是指当DNA溶液温度接近沸点或者pH较高时，DNA 双链的氢键断裂，最后完全变成单链的过程。DNA的复性是指热变性的DNA经缓慢冷却，从单链恢复成双链的过程。A项，DNA的变性是由于高温引起的，故A

项错误；B项，DNA的变性是核酸双螺旋碱基对的氢键断裂，但不涉及其一级结构的改变，故B项错误；D项，当DNA溶液温度升高到接近水的沸点时（DNA变性），260nm的吸光度明显增加，这种现象称为增色效应，故D项错误。 3密码GGC的对应反密码子是（）。[浙江海洋大学2019研] A．GCC B．CCG C．CCC D．CGC 【答案】B查看答案【解析】根据碱基互补配对原则，G与C相互配对。因此答案选B。 4原核生物启动序列－10区的共有序列称为（）。[扬州大学2019研] A．TATA盒 B．CAAT盒 C．Pribnow盒 D．GC盒【答案】A查看答案【解析】绝大部分启动子都存在两段共同序列：位于－10bp处的TATA区和－35bp处的TTGACA区。因此答案选A。 5．色氨酸生物合成操纵子为下列（）方面的例子。[浙江海洋大学2019研] A．正调控可抑制操纵子 B．负调控可诱导操纵子 C．正调控可诱导操纵子

现代分子生物学课后答案(朱玉贤_第三版)上

第一章绪论 2.写出DNA和RNA的英文全称。答：脱氧核糖核酸（DNA, Deoxyribonucleic acid），核糖核酸（RNA, Ribonucleic acid）4.早期主要有哪些实验证实DNA是遗传物质？写出这些实验的主要步骤。答：一，肺炎双球菌感染实验，1，R型菌落粗糙，菌体无多糖荚膜，无毒，注入小鼠体内后，小鼠不死亡。2，S型菌落光滑，菌体有多糖荚膜，有毒，注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。3，用加热的方法杀死S型细菌后注入到小鼠体内，小鼠不死亡；二，噬菌体侵染细菌的实验：1，噬菌体侵染细菌的实验过程：吸附→侵入→复制→组装→释放。2，DNA中P的含量多，蛋白质中P的含量少；蛋白质中有S而DNA中没有S，所以用放射性同位素35S标记一部分噬菌体的蛋白质，用放射性同位素32P标记另一部分噬菌体的DNA。用35P标记蛋白质的噬菌体侵染后，细菌体内无放射性，即表明噬菌体的蛋白质没有进入细菌内部；而用32P标记DNA的噬菌体侵染细菌后，细菌体内有放射性，即表明噬菌体的DNA进入了细菌体内。三，烟草TMV的重建实验：1957年，Fraenkel-Conrat等人，将两个不同的TMV株系（S株系和HR株系）的蛋白质和RNA分别提取出来，然后相互对换，将S株系的蛋白质和HR株系的RNA，或反过来将HR株系的蛋白质和S株系的RNA放在一起，重建形成两种杂种病毒，去感染烟草叶片。 6.说出分子生物学的主要研究内容。答：1，DNA重组技术；2，基因表达调控研究；3，生物大分子的结构功能研究----结构分子生物学；4，基因组、功能基因组与生物信息学研究。第二章染色体与DNA 3.简述真核生物染色体的组成及组装过程真核生物染色体除了性细胞外全是二倍体，DNA以及大量蛋白质及核膜构成的核小体是染色体结构的最基本单位。核小体的核心是由4种组蛋白（H2A、H2B、H3和H4）构成的扁球状8聚体。蛋白质包括组蛋白与非组蛋白。组蛋白是染色体的结构蛋白，它与DNA组成核小体，含有大量赖氨酸核精氨酸。非组蛋白包括酶类与细胞分裂有关的蛋白等，他们也有可能是染色体的结构成分由DNA和组蛋白组成的染色体纤维细丝是许多核小体连成的念珠状结构。 1.由DNA与组蛋白包装成核小体，在组蛋白H1的介导下核小体彼此连接形成直径约10nm的核小体串珠结构，这是染色质包装的一级结构。 2.在有组蛋白H1存在的情况下，由直径10nm的核小体串珠结构螺旋盘绕，每圈6个核小体，形成外径为30nm，内径10nm，螺距11nm的螺线管，这是染色质包装的二级结构。 3.由螺线管进一步螺旋化形成直径为0.4μm的圆筒状结构，称为超螺线管，这是染色

现代分子生物学总结题库

第一章、基因的结构和功能实体及基因组 1、基因定义基因（遗传因子）是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，携带有遗传信息的DNA序列，是具有遗传效应的DNA分子片段，是控制性状的基本遗传单位，通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息，从而控制生物个体的性状表现。 2、DNA修复 DNA修复（DNA repairing）是细胞对DNA受损伤后的一种反应，这种反应可能使DNA结构恢复原样，重新能执行它原来的功能；但有时并非能完全消除DNA的损伤，只是使细胞能够耐受这DNA的损伤而能继续生存。也许这未能完全修复而存留下来的损伤会在适合的条件下显示出来（如细胞的癌变等），但如果细胞不具备这修复功能，就无法对付经常在发生的DNA损伤事件，就不能生存。对不同的DNA损伤，细胞可以有不同的修复反应。3、DNA损伤 DNA损伤是复制过程中发生的DNA核苷酸序列永久性改变，并导致遗传特征改变的现象。情况分为：substitutation （替换）deletion （删除）insertion （插入）exon skipping （外显子跳跃）。 DNA损伤的改变类型：a、点突变：指DNA上单一碱基的变异。嘌呤替代嘌呤（A与G之间的相互替代）、嘧啶替代嘧啶（C与T之间的替代）称为转换（transition）；嘌呤变嘧啶或嘧啶变嘌呤则称为颠换（transvertion）。b、缺失：指DNA链上一个或一段核苷酸的消失。c、插入：指一个或一段核苷酸插入到DNA链中。在为蛋白质编码的序列中如缺失及插入的核苷酸数不是3的整倍数，则发生读框移动（reading frame shift），使其后所译读的氨基酸序列全部混乱，称为移码突变（frame-shift mutaion）。d、倒位或转位：（transposition）指DNA链重组使其中一段核苷酸链方向倒置、或从一处迁移到另一处。 e、双链断裂：对单倍体细胞一个双链断裂就是致死性事件。 4、同源重组同源重组，（Homologus Recombination)是指发生在姐妹染色单体（sister chromatin) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化，如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等；以及真核生物细胞内的Rad51、Mre11-Rad50等等。同源重组反应通常根据交叉分子或holiday 结构（Holiday Juncture Structure) 的形成和拆分分为三个阶段，即前联会体阶段、联会体形成和Holiday 结构的拆分。 a、基因敲除基因敲除（geneknockout），是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平上设计实验，将该基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 b、因转移法同源重组(homologousrecombination)是将外源基因定位导人受体细胞染色体上的方法，因为在该座位有与导人基因同源的序列，通过单一或双交换，新基因片段可替换有缺陷的基因片段，达到修正缺陷基因的目的。位点特异性重组是发生在两条DNA链特异位点上的重组，重组的发生需一段同源序列即特异性位点(又称附着点；attachmentsite，att)和位点特异性的蛋白因子即重组酶参与催化。重组酶仅能催化特异性位点间的重组，因而重组具有特异性和高度保守性。

医学分子生物学试题答案

名词解释：基因是核酸中贮存遗传信息的遗传单位，是贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。基因组（gencme）：细胞或生物中，一套完整单倍体遗传物质的总和（包括一种生物所需的全套基因及间隔序列）称为基因组。基因组的功能是贮存和表达遗传信息。 SD序列(Shine-Dalgarno sequence,SD sequence) 是mRNA能在细菌核糖体上产生有效结合和转译所需要的序列。SD序列与16S rRNA的3’末端碱基(AUUCCUCCAC-UAG-5’)互补，以控制转译的起始分子克隆：克隆（clone）：是指单细胞纯系无性繁殖，现代概念是将实验得到的人们所需的微量基因结构，引入适当的宿主细胞中去，在合适的生理环境中进行无性繁殖，从而利用宿主的生理机制繁衍人们所需要的基因结构，并进行表达。由于整个操作在分子水平上进行，所以称为分子克隆（molecular cloning）。动物克隆(Animal cloning)就是不经过受精过程而获得动物新个体的方法. 基因诊断：就是利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法，直接检测基因结构（DNA水平）及其表达水平（RNA水平）是否正常，从而对疾病做出诊断的方法。基因治疗就是将有功能的基因转移到病人的细胞中以纠正或置换致病基因的一种治疗方法，是指有功能的目的基因导入靶细胞后有的可与宿主细胞内的基因发生整合，成为宿主细胞遗传物质的一部分，目的基因的表达产物起到对疾病的治疗作用。转基因动物就是把外源性目的基因导入动物的受精卵或其囊胚细胞中，并在细胞基因组中稳定整合，再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出来，采用借腹怀孕法寄养在雌性动物（foster mother）的子宫内，使之发育成具有表达目的基因的胚胎动物，并能传给下一代。这样，生育的动物为转基因动物。探针：在核酸杂交分析过程中，常将已知顺序的核酸片段用放射性同位素或生物素进行标记。这种带有一定标记的已知顺序的核酸片段称为探针。限制性核酸内切酶：限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）是一类专门切割DNA 的酶，它们能特异结合一段被称为限制酶识别顺序的特殊DNA序列并切割dsDNA。载体：要把一个有用的基因（目的基因-研究或应用基因）通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫做载体（vector）。限制性片段长度多肽性分析(RFLP):DNA片段长度多态性分析（restriction fragment length polymer-phism,RFLP）基因突变导致的基因碱基组成或(和)顺序发生改变,会在基因结构中产生新的限制性内切酶位点或使原有的位点消失. 用限制酶对不同个体基因组进行消化时，其电泳条带的数目和大小就会产生改变，根据这些改变可以判断出突变是否存在。简答题： 1.蛋白质的生物合成过程中的成分参与，参与因子，作用？ mRNA是合成蛋白质的“蓝图（或模板）” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体作为合成多肽链的装配机（操作台） tRNA mRNA是合成蛋白质的蓝图，核糖体是合成蛋白质的工厂，但是，合成蛋白质的原料——20种氨基酸与mRNA的碱基之间缺乏特殊的亲和力。因此，需要转运RNA把氨基酸搬运到核糖体中的mRNA上 rRNA 核糖体RNA（rRNA）和蛋白质共同组成的复合体就是核糖体，核糖体是蛋白质合成的场所。

关于分子生物学试题及答案

分子生物学试题（一）一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；

分子生物学试题库

第2章染色体与DNA 名词解释原癌基因：细胞与细胞增殖相关的正常基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。半保留复制：以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA 中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。填空题 3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。 4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。 6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸切酶。 7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。 8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。简述DNA复制的过程 DNA的复制过程可被分为3个阶段，即复制的起始、延伸和终止。每个DNA复制的独立单元主要包括复制起始位点和终止位点。 DNA复制的起始包括预引发和引发两个阶段。在预引发阶段，DNA解旋解链，形成复制叉，引发体组装；在引发阶段，在引发酶的催化下以DNA链为模板合成一段短的RNA引物。复制时DNA链的延伸由DNA聚合酶催化，以亲代DNA链为模板，引发体移动，从5′→3′方向聚合子代DNA链。当子链延伸到达终止位点是，DNA复制就终止了，切除RNA引物，填补缺口，在DNA连接酶的催化下将相邻的冈崎片段连接起来形成完整的DNA长链。试述真原核生物的DNA复制的特点的不同之处 ①真核生物染色体有多个复制起点，多复制眼，呈双向复制，多复制子。原核生物的染色体只有一个复制起点，单复制子也呈双向复制。 ②真核生物冈崎片段长约200bp比原核生物略短。真核生物DNA复制速度比原核慢，速度为1000～3000bp/min(仅为原核生物的1/20～1/50）。 ③真核生物复制的终止在端粒处，原核生物的复制叉相遇时即终止。 ④真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制；而在快速生长的原核生物染色体DNA复制中，起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时，往往采用更多的复制起点。 ⑤真核生物有多种DNA聚合酶，DNA聚合酶δ是真正的复制酶，在PCNA存在下有持续的合成能力。PCNA称为增殖细胞核抗原，相当于大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的β-夹子，RFC蛋白相当于夹子装配器。原核生物的DNA聚合酶有三种DNA聚合酶ⅢDNA的真正复制酶：多亚基酶，含十种亚基，该酶DNA合成的持续能力强。 ⑥真核生物线性染色体两端有端粒结构，它是由许多成串的重短复序列组成，端粒功能是稳定染色体末段结构，防止染色体间的末端连接，并可补偿滞后链5’-末段在消除RNA 引物后造成的空缺，使染色体保持一定长度。端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 ⑦RPA：真核生物的单链结合蛋白；RNaseH1和MF-1切除RNA引物，DNA聚合酶ε填补缺口。简述半保留复制的生物学意义

分子生物学习题与答案

第0章绪论一、名词解释 1.分子生物学 2.单克隆抗体二、填空 1．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。三、是非题 1、20世纪60年代，Nirenberg建立了大肠杆菌无细胞蛋白合成体系。研究结果发现poly(U)指导了多聚苯丙氨酸的合成，poly(G)指导甘氨酸的合成。（×）四、简答题 1. 分子生物学的概念是什么？ 2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？ 3. 分子生物学研究内容有哪些方面？ 4. 分子生物学发展前景如何？ 5. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 6．简述分子生物学发展史中的三大理论发现和三大技术发明。 7. 简述分子生物学的发展历程。 8. 二十一世纪生物学的新热点及领域是什么？ 9. 21世纪是生命科学的世纪。20世纪后叶分子生物学的突破性成就，使生命科学在自然科学中的位置起了革命性的变化。试阐述分子生物学研究领域的三大基本原则，三大支撑学科和研究的三大主要领域？答案：一、名词解释 1.分子生物学：分子生物学就是研究生物大分子之间相互关系和作用的一门学科，而生物大分子主要是指基因和蛋白质两大类；分子生物学以遗传学、生物化学、细胞生物学等学科为基础，从分子水平上对生物体的多种生命现象进行研究。

2.单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。二、填空 1.结构分子生物学，基因表达与调控，DNA重组技术三、是非题四、简答题 1. 分子生物学的概念是什么？答案：有人把它定义得很广：从分子的形式来研究生物现象的学科。但是这个定义使分子生物学难以和生物化学区分开来。另一个定义要严格一些，因此更加有用：从分子水平来研究基因结构和功能。从分子角度来解释基因的结构和活性是本书的主要内容。 2. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科，它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。狭义：偏重于核酸的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程，其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会，也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明，从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。这些生物大分子均具有较大的分子量，由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息，并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统，由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。 3. 分子生物学主要包含以下三部分研究内容：A.核酸的分子生物学，核酸的分子生物学研究核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递遗传信息，因此分子遗传学（moleculargenetics）是其主要组成部分。由于50年代以来

现代分子生物学试题及答案汇总-共32页

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现代分子生物学习题及答案一、填空题 1．基因工程是70年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是： (1)分子水平上的操作，(2)细胞水平上的表达 3．基因克隆中三个基本要点是：克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的限制性酶切图谱。5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自属名的第一个字母，第二、三两个字母取自_种名的前两个字母，第四个字母则用株名表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)减少酶量；(2)缩短反应时间；(3)增大反应体积等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_ EcoRl。 8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是GGCC，它们属于异源同工酶。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性： (1) 5'-3'合成酶的活性； (2) 3'-5'外切核酸酶的活性。 10．为了防止DNA的自身环化，可用碱性磷酸酶去双链DNA_5’端的磷酸基团。 11．EGTA是_Ca2+_离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_ 5'-3'合成酶的活性，而没有3'-5'外切酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用DNA聚合酶I的__5'一3'外切核酸酶和5'一3'合成酶的作用。

(完整版)现代分子生物学试题答案

1．SD序列：起始密码子AUG上游5-10个核苷酸处，有一段可与核糖体16S rRNA配对结合的、富含嘌呤的3-9个核苷酸的共同序列，一般为AGGA(也有说是AGGAGG)，此序列称 SD序列(Shine-Dalgarno sequence) 2．顺式作用元件：cis-acting element是指对基因表达有调控活性的DNA序列，其活性只影响与其自身同处于一个DNA 分子上的基因 3．核小体nucleosome构成真核染色质的一种重复珠状结构，是由大约200 bp的DNA区段和多个组蛋白组成的大分子复合体。其中大约146 bp的DNA区段与八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两分子)的组蛋白组成核小体的核心颗粒，核心颗粒间通过一个组蛋白H1的连接区DNA彼此相连。基因产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。冈崎片段Okazaki fragment 在DNA不连续复制过程中，沿着后随链的模板链合成的新DNA片段，模板链DNA双链中其序列与编码链或信使核糖核酸互补的那条链。在DNA复制或转录过程中，作为模板指导新核苷酸链合成的亲代核苷酸链。基因家族真核生物的基因组中有很多来源相同、结构相似、功能相关的基因，将这些基因称为基因家族蛋白质内含子其DNA序列与外显子一起转录和翻译，产生一条多肽链，然后从肽链中切除与内含子对应的aa序列，再把与外显子对应的氨基酸序列连接起来，成为有功能的蛋白质。翻译内含子mRNA中存在与内含子对应的核苷酸序列，在翻译过程中这一序列被“跳跃”过去，因此产生的多肽链不含有内含子对应的氨基酸序列 Northern blot过电泳的方法将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分，然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段 Sorthern blot 蛋白激酶C protein kinase丝氨酸/苏氨酸激酶的家族成员。在多种免疫受体介导的信号转导中可被二酰甘油和钙离子所激活。原癌基因proto-oncogene调控细胞生长和增殖的正常细胞基因。突变后转化成为致癌的癌基因。多顺反子mRNA两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA)。多顺反子mRNA一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。 Alternative splicing在高等真核生物中，内含子通常是有序或组成型地从mRNA前体分子中被剪接，然而，在个体发育或细胞分化时，可以有选择地越过某些外显子或某个剪接点进行变位剪接，产生出组织或发育阶段特异性mRNA，成为内含子的可变剪接。端粒酶端粒酶是一种含RNA链的逆转录酶，通过识别并结合于富含G的端粒末端，以所含的RNA为模板，逆转录合成端粒。 X染色体失活人和鼠的Xist（ Xi-specific transcript）基因只在失活的X染色体上表达，编码一功能性RNA分子，此分子能与Xic位点相互作用，引起后者构象变化，更容易与各种蛋白因子相结合，最终导致X染色体失活锌指结构指的是在很多蛋白中存在的一类具有指状结构的结构域，这些具有锌指结构的蛋白大多都是与基因表达的调控有关的功能蛋白由一个含有大约30个氨基酸的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys和2个His配位的Zn构成，反式作用因子trans-acting factor是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。染色质chromatin chromosome 指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构, 是间期细胞遗传物质存在的形式。所谓C值，通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。一般高等生物的C值均大于低等生物,但某些植物或两栖动物的C值比人高出几十倍,这种C值与进化复杂性不一致的现象称为C值反常现象或称为C值矛盾（C-value paradox）断裂基因或不连续基因（interrupted/discontinuous genes）所谓断裂基因就是基因的编码序列在DNA分子上是不连续的，为不编码的序列所隔开。编码的序列称为外显子（exon），不编码的序列称为内含子（intron）。寡核苷酸（oligonucleotide）：一般是指二至十个核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段。回文序列是指沿同一方向(如5’→3’)序列相同的结构，即碱基序列的反向重复(inverted repeats) 核酸的变性：是指核酸双螺旋区的氢键断裂，DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象变性的DNA在适当的条件下，两条彼此互补的DNA单链可以重新缔合形成双螺旋结构，这个过程称之为复性 DNA复制时每个子代DNA分子的一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式称半保留复制

浙大医学分子生物学真题2005-2011

2011年一、名词解释（每题3分）： 1、Okazaki fragments 2、Trans-acting factor 3、Multiple-cloning site 4、Micro RNA 5、Chaperone 二、简答题（每题5分） 1、简述蛋白质的四级结构； 2、真核细胞基因转录的主要调控点有哪些？ 3、表观遗传学机制如何调控染色体 4、简述真核细胞中RNA聚合酶的类型及功能； 5、真核生物RNA的类型； 6、什么是基因突变？真核细胞基因突变的主要类型？ 7、什么是"组学"？常有的组学技术有哪些？ 8、简述兔源多克隆抗体的制备过程； 9、研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法有哪些？三、问答题（每题10分）： 1、什么是蛋白质修饰？细胞内蛋白质修饰主要类型有哪些？其主要功能是什么？ 2、大规模临床证据显示非受体酪氨酸磷酸酶在乳腺肿瘤转移灶组织中高表达。请设计一个实验研究方案在细胞水平探讨该蛋白在肿瘤发生、转移过程中的可能作用。 3、什么是模式生物？为什么医学研究中需要模式生物？ 4、结合你的实际经历和知识背景，谈谈分子生物学在医学中的作用。 2010年一、名词解释（每题3分）： 1、基因与基因组： 2、基因诊断： 3、半保留复制： 4、疾病模型与模式： 5、ncRNA：二、简答题： 1、为什么个体基因型可以用于健康风险预测？ 2、蛋白质哪些理化性质可以用于检测和鉴定？ 3、蛋白质非共价键作用包括？蛋白质相互作用机制？ 4、细胞死亡的方式？ 5、肝细胞对医学的作用？ 6、基因转录、翻译和基因表达的区别？ 7、DNA损伤类型、检测方式？ 8、蛋白质为什么能够细胞定位？怎样检测蛋白质定位？ 9、为什么同一个体的细胞基因组相同，蛋白质组不同？怎样检测蛋白质组差异？三、问答题： 1、谈谈转化医学的定义? 你对转化医学研究有何建议？

现代分子生物学思考题答案(朱玉贤_第三版)

第一章绪论 1.简述孟德尔、摩尔根和沃森等人对分子生物学发展的主要贡献。答：孟德尔的对分子生物学的发展的主要贡献在于他通过豌豆实验，发现了遗传规律、分离规律及自由组合规律；摩尔根的主要贡献在于发现染色体的遗传机制，创立染色体遗传理论，成为现代实验生物学奠基人；沃森和克里克在1953年提出DAN反向双平行双螺旋模型。2.写出DNA和RNA的英文全称。答：脱氧核糖核酸（DNA, Deoxyribonucleic acid），核糖核酸（RNA, Ribonucleic acid）3.试述“有其父必有其子”的生物学本质。答：其生物学本质是基因遗传。子代的性质由遗传所得的基因决定，而基因由于遗传的作用，其基因的一半来自于父方，一般来自于母方。 4.早期主要有哪些实验证实DNA是遗传物质？写出这些实验的主要步骤。答：一，肺炎双球菌感染实验，1，R型菌落粗糙，菌体无多糖荚膜，无毒，注入小鼠体内后，小鼠不死亡。2，S型菌落光滑，菌体有多糖荚膜，有毒，注入到小鼠体内可以使小鼠患病死亡。3，用加热的方法杀死S型细菌后注入到小鼠体内，小鼠不死亡；二，噬菌体侵染细菌的实验：1，噬菌体侵染细菌的实验过程：吸附→侵入→复制→组装→释放。2，DNA中P的含量多，蛋白质中P的含量少；蛋白质中有S而DNA中没有S，所以用放射性同位素35S标记一部分噬菌体的蛋白质，用放射性同位素32P标记另一部分噬菌体的DNA。用35P标记蛋白质的噬菌体侵染后，细菌体内无放射性，即表明噬菌体的蛋白质没有进入细菌内部；而用32P标记DNA的噬菌体侵染细菌后，细菌体内有放射性，即表明噬菌体的DNA进入了细菌体内。三，烟草TMV的重建实验：1957年，Fraenkel-Conrat等人，将两个不同的TMV株系（S 株系和HR株系）的蛋白质和RNA分别提取出来，然后相互对换，将S株系的蛋白质和HR 株系的RNA，或反过来将HR株系的蛋白质和S株系的RNA放在一起，重建形成两种杂种病毒，去感染烟草叶片。 5.请定义DNA重组技术和基因工程技术。答：DNA重组技术：目的是将不同的DNA片段（如某个基因或基因的一部分）按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。基因工程技术：是除了包含DNA重组技术外还包括其他可能是生物细胞基因结构得到改造的体系，基因工程是指技术重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技

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