竹叶黄酮的抗氧化活性研究
食 品 科 技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2011年 第36卷 第7期
提取物与应用
· 201 ·
罗宇倩1，郭 辉1，胡林福2，施林巍2，钱俊青1*
(1.浙江工业大学药学院，杭州 310014；
2.浙江竹类资源生物技术研究开发中心，安吉 313300)
摘要：为了有效利用竹叶中黄酮类物质，研究采用不同的方法(DPPH法、邻苯三酚自氧化法(325 nm)和 Fenton法)评价了竹叶黄酮的抗氧化活性，以Vc和茶多酚为阳性对照品。结果表明：竹叶黄酮清除超氧负离子自由基和DPPH自由基的能力比茶多酚强，其EC 50相应为11.7 μg/mL和18.3 μg/mL，分别是Vc的约1.2倍和3.4倍；竹叶黄酮在清除羟自由基效果与茶多酚相当，EC 50 为0.58 mg/mL，比Vc效果好。因此竹叶黄酮具有很强的抗氧化能力，值得深入研究其生理功能及开发利用价值。
关键词：竹叶；黄酮；抗氧化性
中图分类号：TS 202.3 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2011)07-0201-03
Antioxidant activity of ? avonoids from bamboo leaves
LUO Yu-qian 1, GUO Hui 1, HU Lin-fu 2, SHI Lin-wei 2, QIAN Jun-qin 1*
(1.College of Pharmacognosy of Zhejiang University of Technology Hangzhou 310014; 2.Biological Technology R&D Center of Bamboo Resources, Anji 313300)
Abstract: The antioxidant activity of total flavonoids from bamboo leaves was determined by various assays, including DPPH radical-scavenging, self-oxidation of 1, 2, 3-phentriolassay method(325 nm) and Fenton reactions. The results showed that ? avonoids from bamboo leaves have very strong scavenging capabilities for superoxide anion and DPPH free radical, their EC 50 values are 11.7 μg/mL and 18.3 μg/mL respectively, and are approximately 1.2 times and 3.4 times as much as that of vitamin C respectively. The scavenging capability of bamboo leaves ? avonoids for hydroxyl radical is stronger than that of vitamin C, weaker than tea polyphenol, and its EC 50 is 0.58 mg/mL.Key words: bamboo leaves; ?
avonoids; antioxidation 收稿日期：2010-11-07 ﹡通讯作者基金项目：浙江省制药工程重中之重开发基金项目。
作者简介：罗宇倩(1986—)，女，湖南株洲人，硕士研究生，研究方向为天然药物的提取与纯化以及药理研究。
淡竹叶和淡竹沥是中医一味传统的清热解毒药，早已为我国人们所认识。竹叶中黄酮类物质是主要活性物质，含量平均在2%，主要为黄酮糖苷[1]，分别是荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷，以及木犀草素苷、洋芹苷和黄酮苷类。竹叶黄酮具有明显的抗脂质过氧化[2-3]、清除羟自
由基和调节血脂功能及抗过敏、抗炎、抗菌、抗突变、抗肿瘤、抗溃疡、抗病毒、保护心血管疾病[4-5]及保肝等生理活性，是一类极具开发前景的天然有机抗氧化剂[1,6-8]。
我国竹叶资源丰富，因此充分开发利用竹叶中的黄酮类成分具有十分重要的现实经济意义。
竹叶黄酮的抗氧化活性研究
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FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY2011年 第36卷 第7期提取物与应用
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为了利用竹叶中黄酮类物质，本研究考察竹叶黄
酮的抗氧化性能，并将其与茶多酚、Vc的抗氧化
性能对比，为竹叶的开发提供理论基础，以期获
得新的食品天然抗氧化剂提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
竹叶黄酮：安吉圣氏生物有限公司，黄酮
含量31.2%；茶多酚：上海康九化工有限公司，
98.1%；邻二氮菲、1,1 - 二苯基-2- 苦基苯肼
(DPPH)、邻苯三酚、无水乙醇、双氧水、抗坏血
酸(Vc)、水杨酸、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、盐酸
等：国产分析纯。
1.2 仪器与设备
9140A 型电热恒温鼓风干燥箱：上海精宏实
验设备有限公司；HH-4数显恒温水浴锅：金坛市
江南仪器厂；DHG-9143BS-Ⅲ电热恒温鼓风干燥
箱：上海新苗医疗器械制造有限公司；725型紫外
可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司；JJ500
型精密电子天平：常熟双杰测试仪器厂。
1.3 竹叶黄酮抗氧化活性实验
检测竹叶黄酮的抗氧化活性，并与Vc和茶多
酚做比较。
1.3.1 清除DPPH自由基能力的测定 将竹叶黄
酮和对照茶多酚、Vc稀释成不同的浓度梯度，
各取2 mL 不同浓度的溶液于试管中，再加入
2 mL 浓度为0.04 mg/mL的DPPH 溶液，混合均
匀，于室温下避光放置30 min，4000 r/min 离
心分离10 min，取上清液在波长517 nm 处测其
吸光度为A i；另各取2 mL 上述浓度的溶液于试
管中，分别加入无水乙醇2 mL，于室温下避光
放置30 min，4000 r/min 离心分离10 min，取上
清液在波长517 nm 处测其吸光度为Aj；以2 mL
0.04 mg/mL DPPH 和2 mL 无水乙醇反应做为参
比，其吸光度记为A0[9]。
清除率R计算公式：
1.3.2 对超氧负离子(O2-)的清除作用 在试管中
依次加入 5 mL pH8.2的Tris-HCl缓冲液,0.1 mL浓
度不同的样品(样品用30%的乙醇溶液配制)，25
℃恒温水浴20 min，加入25 ℃预热20 min的4.5
mmol/L的邻苯三酚50 μL。在波长325 nm下每隔
30 s测一次吸光度值；另取1份不加邻苯三酚的作
为空白对照[10-11]。
1.3.3 对羟自由基(·OH)的清除作用 在试管中
依次加入0.5 mL 7.5 mmol/L的邻二氮菲溶液，5
mL 0.2 mol/L pH7.4的磷酸缓冲液，0.5 mL 30%
乙醇溶液，充分混匀，加入0.5 mL新配制的7.5
mmol/L的FeSO4溶液，混匀后，加入0.5 mL新配
制的0.1%双氧水，于37 ℃水浴加热60 min后，在
536 nm测吸光度值，所得数据为损伤管的吸光度
值A损。
未损伤管以0.5 mL去离子水代替损伤管中0.5
mL 0.1%双氧水，操作方法同损伤管，可测得536
nm下未损伤管的吸光度值A未损。
样品管以0.5 mL样品代替损伤管中0.5 mL
30%乙醇溶液，操作方法同损伤管，可测得536
nm下样品管的吸光度值A样[12-13]。
2 竹叶黄酮抗氧化性结果与分析
2.1 竹叶黄酮对DPPH自由基清除效果
DPPH 自由基是一种很稳定的以氮为中心的
自由基，对其清除的效果表明受试药物具有降
低羟自由基、烷自由基或过氧自由基的有效浓
度和打断脂质过氧化链反应的作用，竹叶黄酮对
DPPH 自由基清除效果见图1。
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图1 Vc、茶多酚和竹叶黄酮对DPPH自由基清除作用
从图1可以看出，竹叶黄酮的EC50为18.3 μg/
mL，而茶多酚的EC50为27.5μg/mL，Vc的EC50 为
5.3 μg/mL，竹叶黄酮的EC50约是Vc的3.4倍。因
此竹叶黄酮表现出很强的清除DPPH自由基的能
力，清除DPPH 自由基效果比茶多酚强、弱于Vc。
2.2 竹叶黄酮对超氧负离子自由基(O2-)清除效果
超氧阴离子自由基是第1个生成的氧自由基，
又是所有氧自由基的前身，可以转化为其他氧自
由基。因此对超氧阴离子自由基的清除可以有效
地减少氧自由基的生成，具有非常重要的意义。
从图2可以看出，竹叶黄酮的EC50为11.7 μg/
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mL，而Vc的EC 50为9.4 μg/mL，茶多酚的EC 50是
13.5 μg/mL，三者都表现出较强的清楚超氧负离子的能力，其中Vc的效果最好，其次是竹叶黄酮和茶多酚。
2.3 竹叶黄酮对羟自由基(·OH)清除效果
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图3 Vc、茶多酚和竹叶黄酮对羟自由基清除作用
由图3可以看出，随着竹叶黄酮浓度的增加，其清除羟自由基的能力进一步增强，根据线性回归方程可以得到竹叶黄酮清除羟自由基的EC 50 为0.58 mg/mL，茶多酚EC 50为0.49 mg/mL，Vc清除羟自由基的EC 50为0.82 mg/mL。因此，茶多酚和竹叶黄酮清除羟自由基效果比Vc好。3 结论
我国素有“竹子王国”之称，竹类资源相当丰富，若能将竹制品加工副产物废竹叶加以利用，进行竹叶黄酮的提取开发，制成竹叶抗氧化剂或自由基清除剂，既丰富市场又提高竹子的综合利用，具有理想的社会意义和经济效益。
本实验对竹叶黄酮清除DPPH自由基、超氧负离子自由基和对羟自由基效果进行研究，结果表明：竹叶黄酮清除超氧负离子自由基和DPPH 自由基的能力比茶多酚强，其EC 50 相应为11.7 μg/mL和18.3 μg/mL，分别是Vc的约1.2倍和3.4倍；竹叶黄酮在清除羟自由基效果与茶多酚相当，EC 50 为0.58 mg/mL，比Vc效果好。
竹叶黄酮对DPPH自由基、超氧负离子自由基和对羟自由基的有效清除作用表明其具有较好
的抗氧化功能，可作为一种新的食品天然抗氧化剂。我国竹叶资源十分丰富，在开发利用竹子资源的同时，具有较好抗氧化活性的竹叶黄酮组分也值得大力开发利用。
参考文献：
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?H N-
图2 Vc、茶多酚和竹叶黄酮对超氧负离子清除作用
竹叶黄酮的抗氧化活性研究
食 品 科 技 FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 2011年 第36卷 第7期 提取物与应用 · 201 · 罗宇倩1，郭 辉1，胡林福2，施林巍2，钱俊青1* (1.浙江工业大学药学院，杭州 310014； 2.浙江竹类资源生物技术研究开发中心，安吉 313300) 摘要：为了有效利用竹叶中黄酮类物质，研究采用不同的方法(DPPH法、邻苯三酚自氧化法(325 nm)和 Fenton法)评价了竹叶黄酮的抗氧化活性，以Vc和茶多酚为阳性对照品。结果表明：竹叶黄酮清除超氧负离子自由基和DPPH自由基的能力比茶多酚强，其EC 50相应为11.7 μg/mL和18.3 μg/mL，分别是Vc的约1.2倍和3.4倍；竹叶黄酮在清除羟自由基效果与茶多酚相当，EC 50 为0.58 mg/mL，比Vc效果好。因此竹叶黄酮具有很强的抗氧化能力，值得深入研究其生理功能及开发利用价值。 关键词：竹叶；黄酮；抗氧化性 中图分类号：TS 202.3 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2011)07-0201-03 Antioxidant activity of ? avonoids from bamboo leaves LUO Yu-qian 1, GUO Hui 1, HU Lin-fu 2, SHI Lin-wei 2, QIAN Jun-qin 1* (1.College of Pharmacognosy of Zhejiang University of Technology Hangzhou 310014; 2.Biological Technology R&D Center of Bamboo Resources, Anji 313300) Abstract: The antioxidant activity of total flavonoids from bamboo leaves was determined by various assays, including DPPH radical-scavenging, self-oxidation of 1, 2, 3-phentriolassay method(325 nm) and Fenton reactions. The results showed that ? avonoids from bamboo leaves have very strong scavenging capabilities for superoxide anion and DPPH free radical, their EC 50 values are 11.7 μg/mL and 18.3 μg/mL respectively, and are approximately 1.2 times and 3.4 times as much as that of vitamin C respectively. The scavenging capability of bamboo leaves ? avonoids for hydroxyl radical is stronger than that of vitamin C, weaker than tea polyphenol, and its EC 50 is 0.58 mg/mL.Key words: bamboo leaves; ? avonoids; antioxidation 收稿日期：2010-11-07 ﹡通讯作者基金项目：浙江省制药工程重中之重开发基金项目。 作者简介：罗宇倩(1986—)，女，湖南株洲人，硕士研究生，研究方向为天然药物的提取与纯化以及药理研究。 淡竹叶和淡竹沥是中医一味传统的清热解毒药，早已为我国人们所认识。竹叶中黄酮类物质是主要活性物质，含量平均在2%，主要为黄酮糖苷[1]，分别是荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷，以及木犀草素苷、洋芹苷和黄酮苷类。竹叶黄酮具有明显的抗脂质过氧化[2-3]、清除羟自 由基和调节血脂功能及抗过敏、抗炎、抗菌、抗突变、抗肿瘤、抗溃疡、抗病毒、保护心血管疾病[4-5]及保肝等生理活性，是一类极具开发前景的天然有机抗氧化剂[1,6-8]。 我国竹叶资源丰富，因此充分开发利用竹叶中的黄酮类成分具有十分重要的现实经济意义。 竹叶黄酮的抗氧化活性研究
大学生创业计划书---赣南脐橙的种植和推广
大学生创业计划书——赣南脐橙种植及推广 一、项目名称：赣南脐橙种植和推广 二、产品特点以及功能 1.地理分布 无自然生长，全国有赣南大地上有分布。 2.生态环境 生于山坡和农田及村庄和实验基地，海拔最高达 800米。也常栽培。湖南也有分布。在北美洲也有脐橙分布。在我国，，南到广东、海南，湖南均有分布，故农谚讲：“寻乌蜜桔甲 天下，赣南脐橙传四方”。 3.脐橙特性 生脐橙的一生，从种子生根发芽或嫁接苗接穗初次发芽开始，生长发育，开花结果，盛果丰产，最后衰老死亡的整个生命活动中，由于树龄的变化及生长发育特点各异,通常可将脐橙果树的一生分为四个生物学年龄时期，即营养生长期、生长结果期、盛果期、衰老更新期。充分了解各期的特点及其差异，有利于采取正确的栽培管理措施，达到提早结果，延长盛果期，推迟衰老，从而获得更高的经济效益。 一、营养生长期 从种子萌发或接穗初次发芽开始，树冠骨架初步形成，到首次开花结果，为营养生长期。这个时期的主要特征:树体离心生长旺盛，根系和树冠迅速扩大，逐步形成骨架；枝条向上生长，分枝角度较小，树体的纵向生长较横向生长快；萌芽早，停止生长迟，生长势强；新梢生长量大，枝长节稀，一般年抽梢3～4次。营养生长期的长短，即幵始结果的早迟，与品系、砧木类型有关，特别是与栽培管理技术关系极大。 这一时期的主要栽培措施：要在选用良种和适宜砧木的基础上，十分注意精选接穗，培育壮苗；高标准建园；加强土壤深耕熟化和肥水管理，加速营养生长；采用绑、拉、扶、撑
等手段，开张分枝角度，培养健壮的树冠骨架;合理修剪，多留枝叶，为早结丰产和持续高产打下基础。 二、生长结果期 脐橙从幵始结果到大量结果以前的这段时期，称为生长结果期。这是从营养生长占优势发展为营养生长与生殖生长逐渐趋于平衡的过渡时期。其主要特点：骨干枝逐渐形成，树体离心生长由强逐渐减弱，后期骨千枝生长缓慢；结果枝逐渐增多，结果部位由最初的中下部开始，逐步进入全面结果；树冠和根系都迅速扩大，枝条开张角度增大，抽枝数量增多，长度变短，充实而粗壮;初结果时果实较大，果皮较厚，果味较酸，汁多味淡，耐贮性较差，随着结果量的增加，果实品质逐步提高，表现出固有的特征。 这一时期栽培上的主要任务是：在保证树体健壮生长的基础上，大量增加侧枝，扩大绿叶层。同时迅速提高产量、品质，夺取早期丰收。这一时期，营养生长和生殖生长之间的矛盾较为尖锐，若栽培管理不善，易造成平衡失调。或营养生长过旺，导致严重落花落果，影响花芽形成；或生殖生长过度，大量开花结果，削弱了营养生长，造成树势早衰、低产。因此需要充实养分和水分，保持健壮的生长势，同时采取必要的促花、保果措拖，通过疏果调节着果量，维持平衡。 生长结果期的长短，受生态环境和栽培措施的影响而异。采用密植栽培管理的，3 ~ 5年生长结果期后即进入盛果期；稀植园可长达5～10年。 三、盛果期 盛果期是脐橙大量结果时期。这一时期以结果为主，树冠和根系的离心生长趋向停止。树冠扩大到最大，骨干枝生氏缓慢，小侧枝大量抽生，大量开花结果，产量达到最高峰。小侧枝不断交替发生，早先抽生的出现枯死，树冠叶幕逐渐向外推移，树冠内部的大骨干枝则逐渐光禿裸露。树冠上下内外各部之间或各枝序之间，常产生交替结果现象。 盛果期是营养生长和生殖生长相对平衡的时期。这一相对平衡维持时期越长，盛果期就越长，这是栽培者所希望的。但由于大量结果，树体营养的积累和消耗的矛盾很大，容易造成“大小年”结果现象，倘形成恶性循环，对脐橙生产损失极大。所以，加强管理，注意调节营养生长与开花结果的矛盾，防止“大小年” 结果，防止早衰，延长盛果期年限，夺取高产稳产，是这一时期的主要任务。 栽培措施方面，宜适时施重肥，保证足够的营养供应，促使连年结果；注意病虫害和自然灾害的防治，保护叶片，提高同化器官功能；适当疏剪和更新侧枝，防止树冠郁蔽和早衰。密植园宜适时疏移和间伐，保持足够的光照，继续丰产稳产。 四、衰老更新期 盛果期后，当产量明显下降，骨干枝先端开始干枯，即已进入衰老更新期，经过几次更新直至死亡。这个时期的主要特征: 产量下降，果实变小;生长势越来越弱，骨干枝先端的小侧枝大量干枯死亡，树冠绿叶层逐渐缩小;枝梢发生次数少，极易大量落花落果，出现隔年结果；树冠内瞠发生-定数量的徒长枝，向心生长明显。
八种天然黄酮类化合物的抗氧化构效关系
文章编号:1000-5641(2002)01-0090-06 八种天然黄酮类化合物的抗氧化构效关系 陈季武, 朱振勤, 杭 凯, 杨晓宁 (华东师范大学生命科学学院,上海 200062) 摘要:采用H 2O 2-CTMAB -Luminol 化学发光体系和Fe 2+诱发脂蛋白PU FA 过氧化比色体系,研究了八种高纯度的天然黄酮类化合物清除H 2O 2、LO ?和LOO ?的构效关系。结果表明,这八种天然黄酮类化合物都能有效地清除H 2O 2、LO ?和LOO ?。根据其清除作用和化学结构分析,得出如下结论:B 环上羟基是清除H 2O 2、LO ?和LOO ?的主要活性基团,A 环上羟基是清除H 2O 2、LO ?和LOO ?的重要基团,并且B 环上羟基相邻清除作用就大大增强;糖甙对清除 H 2O 2、LO ?和LOO ?也有贡献。 关键词:黄酮类化合物; 抗氧化; 构效关系中图分类号:Q505 文献标识码:A 黄酮类化合物是泛指两个芳环(A 与B )通过三碳链相互连接构成的一系列化合物。大多数以植物为原料的中药都含有黄酮类化合物。现已发现黄酮类化合物具有众多生理功能 和药用价值,如保护心脑血管、抗菌消炎、抗辐射和抗肿瘤等[[1-4],其中引人注目的是其抗氧化作用,使该研究成为热门课题之一。由于极高纯度的黄酮类化合物来源及技术等限制,对黄酮类化合物抗氧化的研究主要集中于效用上,对其构效关系进行研究甚少。鉴于黄酮类化合物在药学、保健品、食品和化妆品等方面已有的和潜在的应用前景,有必要对其构效关系进行研究。为此,采用H 2O 2-CTMAB -Luminol 发光体系和Fe 2+诱发的脂蛋白PU 2FA 过氧化的比色体系,研究了八种纯度高达97%以上的天然黄酮类化合物清除H 2O 2、LO ? 和LOO ?的构效关系。 1 材料与方法 1.1材料1.1.1 试剂 鲁米诺系Sigma 产品,十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB )系B IB 进口分装,其余试剂均系国产分析纯。1.1.2 药物 槲皮素系Fluka 产品,纯度为99%;金丝桃甙、泽漆新甙、芸香甙、山奈素和橙皮甙均由中科院上海药物研究所朱大元教授惠赠,纯度达98%以上;茶多酚购自浙江农业大学茶叶系;黄芩甙由上海中药一厂提供,纯度高达97%以上。 收稿日期:2001-02 作者简介:(1956-),男,副教授. 第1期2002年3月 华东师范大学学报(自然科学版) Journal of East China Normal University (Natural Science ) No.1 Mar.2002
黄酮类化合物生物活性的研究进展_王慧
黄酮类化合物生物活性的研究进展 王 慧 （山东博士伦福瑞达制药有限公司，山东 济南 250101） 摘 要：黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一类多酚化合物，有许多潜在的药用价值。现就黄酮类化合物抗肿瘤、抗心血管疾病、抗氧化抗衰老、抗菌抗病毒、免疫调节等作用的研究进展作一综述，以期为开发利用该类药物提供参考。关键词：黄酮类化合物；生物活性；综述文献 中图分类号：R282.71 文献标识码：A 文章编号：1672-979X （2010）09-0347-04 收稿日期：2010-05-31 作者简介: 王慧（1974-），女，山东临沭人，主管药师，从事质量控制工作 E-mail : wanghui0602@https://www.docsj.com/doc/053692215.html, Progress in Bioactivity of Flavonoids WANG Hui (Shandong Bausch & Lomb Freda Phar. Co., Ltd., Jinan 250101, China ) Abstract: Flavonoids are polyphenols widely found in nature and they have many potential medicinal values. This paper reviews the progress in anti-tumor, anti-cardiovascular disease, anti-oxidation and anti-aging, antibacterial and antivirus, immunological regulation of flavonoids, which can provide the references for the development and utilization of flavonoids. Key Words: flavonoids; bioactivity; review 黄酮类化合物是一类低分子植物成分，具有C6-C3-C6 基本构型，为植物体多酚类代谢物。主要分为黄酮及黄酮醇类、二氢黄酮及二氢黄酮醇类、黄烷醇类、异黄酮及二氢异黄酮类、双黄酮类，以及查尔酮、花色苷等[1]。黄酮类化合物独特的化学结构使其对哺乳动物和其它类型的细胞有重要的生物活性。黄酮类化合物有高度的化学反应性，例如清除生物体内的自由基；又有抑制酶活性、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗炎症、抗过敏、抗衰老、抗心血管疾病糖尿病并发症等药理作用，且无毒无害。黄酮类化合物还是茶及黄芩、银杏、沙棘等众多中草药的活性成分。因此受到广泛关注，研究进展很快。1 黄酮类化合物的理化性质 黄酮类化合物多为晶体且有颜色，少数如黄酮苷类为无定形粉末，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性外，余者则无。黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷或苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有差异，一般游离态苷元难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂。其中，黄酮、黄酮醇、查儿酮等平面型分子因堆砌较紧密，分子间引力较大，故更难溶于水；而二氢黄酮及二氢黄酮醇等系非平面型分子，排列不紧密，分子间引力较小，有利于水分子进入，水溶解度稍大[2]。 2 黄酮类化合物的生物活性2.1 抗肿瘤活性 黄酮类对多种肿瘤细胞有明显的抑制作用，主要表现在抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、干预信号转导、影响细胞 [11] Denyer S P, Baird R M. Guide to microbiological control in pharmaceuticals and medical devices[M].2nd ed. Boca Raton: CRC Press, 2006: 325-326. [12] Mao k, Masafumi U, Takeshi K, et al Evaluation of acute corneal barrier change induced by topically applied preservatives using corneal transepithelial electric resistance in vivo [J].Cornea , 2010, 29(1): 80-85. [13] Noecker R. Effects of common ophthalmic preservatives on ocular health[J]. Adv Ther , 2001, 18: 205-215. [14] Kostenbauder H B. Physical factors influencing the activity of antimicrobial agents// Block S S. Disinfection, Sterilization and Preservation[M]. 3rd ed. PhiladelpHia: Lea and Febiger, 1983: 811-828. [15] Berry H, Michaels I. The evaluation of the bactericidal activity of ethylene glycol and some of its monoalkyl ethers against Bacterium coli [J]. J Pharm Pharmacol , 1950, 2: 243-249.
喷施竹叶黄酮对小白菜产量-品质及矿质元素含量的影响
喷施竹叶黄酮对小白菜产量\品质及矿质元素含量的影响 摘要:采用土培法,研究喷施25~200 mg/L竹叶黄酮对小白菜产量?品质及矿质元素含量的影响?结果表明,竹叶黄酮喷施浓度为50 mg/L时,对小白菜促生长效果最佳,并显著改善其品质,其中产量?株高?最大叶面积和SPAD值分别较未喷施处理增加33.3%?12.3%?41.4%?5.1%;叶片中可溶性糖?可溶性蛋白质?全N?全P?全K 含量也分别增加54.8%?22.8%?14.7%?17.9%?21.5%?此外,当喷施浓度为25 mg/L 时,小白菜的VC含量和全P?全K含量均较其他浓度处理高,分别比未喷施处理增加31.0%?19.2%?22.8%?竹叶黄酮喷施浓度高于100 mg/L时,对小白菜产量?品质和矿质元素含量的促进效果不明显?综合来看,当竹叶黄酮的喷施浓度为50 mg/L 时,对小白菜产量与品质的改善效果最佳? 关键词:竹叶黄酮;小白菜;产量;品质;全氮;全磷;全钾 Effect of Spraying Bamboo Leaves Flavone on the Yield, Quality and Mineral Element Contents of Chinese cabbage Abstract: Soil culture was used to study the effects of spraying 25~200 mg/L bamboo leaves flavone on the yield, the quality and the mineral element contents of Chinese cabbage. The results showed that 50 mg/L bamboo leaves flavone had the best growth-promoting effect on Chinese cabbage, and could improve the quality significantly. There were increases in yield, plant height, maximum leaf area and SPAD value of Chinese cabbage by 33.3%, 12.3%, 41.4% and 5.1% respectively, and the contents of soluble sugar, protein, total N, total P and total K were also increased by 58.8%,22.8%,14.7%,17.9% and 21.5% respectively. In addition, the contents of vitamin C, total P and total K of Chinese cabbage were the highest in 25 mg/L of bamboo leaves flavone treatment, the rate of increase was 31.0%, 19.2% and 22.8% respectively. However, 100 mg/L or more of bamboo leaves flavone had no obvious promotion effects on the yield, the quality and the mineral element contents of Chinese cabbage. In summary, 50 mg/L of bamboo leaves flavone had the best promoting effects on the yield and the quality of Chinese cabbage. Key words: bamboo leaves flavone; Chinese cabbage; yield; quality; total N; total P; total K 竹叶黄酮是20世纪90年代新开发的以高山野生淡竹叶为原料的一种植物类黄酮制剂,其功能因子为黄酮甙,并以黄酮碳甙为主[1],具有优良的抗自由基?抗氧化?抗衰老?抗菌?抗病毒及保护心脑血管?防治老年退行性疾病等生物学功效?近年来在天然功能性食品添加剂和医药保健品领域崭露头角[2]?目前,对黄酮类化合物的研究逐步延伸到植物科学方面?据报道类黄酮化合物能显著提高植物的抗
竹叶中黄酮提取分离及抗氧化活性研究
竹叶中黄酮提取分离及抗氧化活性研究 摘要：采用体积分数95%的乙醇浸提与超声波相结合的方法提取竹叶黄酮，并通过邻苯三酚自氧化法和Fenton反应测定其抗氧化性能。结果表明，竹叶黄酮的提取率为5.30%，粗提物中黄酮的含量为13.90%。0.2 mL 1 mg/mL竹叶黄酮对超氧阴离子自由基（O2-·）的清除率为17.39%；0.7 mL 1 mg/mL竹叶黄酮对羟基自由基（·OH）的清除率为58.20%，表明竹叶黄酮有优良的抗氧化活性。 关键词：竹叶；总黄酮；提取；抗氧化 Extraction of Flavonoids from Bamboo Leaves and Their Antioxidant Activity Abstract：Total flavonoids were extracted from bamboo leaves by 95% ethanol as solvent and ultrasonic. The oxidation activity of flavonoids in bamboo leaf was determined by the methods of pyrogallol autoxidation and Fenton reaction. The results showed that the extraction yield of flavonoids from bamboo leaf was 5.30%，and the content of flavonoids in the crude extract was 13.90%. The clearance rate of O2-· by 0.2 mL 1 mg/mL bamboo leaf flavonoids was 17.39%；while the clearance rate of ·OH by 0.7 mL 1 mg/mL bamboo beaf flavonoids was 58.20%，it showed that flavonoids in bamboo leaf had good antioxidant activity. Key words：bamboo leaf；total flavonoids；extraction；antioxidant activity 竹叶在中国有着悠久的食用和药用历史，其性淡、寒、味甘、微涩，具有清热利尿、明目解毒、止血、免疫调节、抗氧化、抗艾滋病和抑制肿瘤等功效，且无毒无害，可作为绿色食品进行开发。竹叶中含有丰富的黄酮类物质，总黄酮含量平均在10 mg/g左右。竹叶黄酮具有优良的抗溃疡、解痉、抗菌、消炎、降血脂、镇痛、利尿、降血清胆固醇和雌性激素、抗氧化等功效[1-7]。郑德勇等[8]报道从竹叶中提取的总黄酮对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）具有显著的清除能力；张英等[9]和章荣华等[10]研究发现竹叶黄酮能显著提高衰老小鼠体内SOD和GSH-Px的活力，说明竹叶黄酮有优良和稳定的抗氧化活性。闽北是中国竹子之乡，但目前对竹叶的利用十分有限，大部分被废弃，未能得到充分的利用。本研究采用乙醇浸提和超声波提取相结合的方法从竹叶中提取总黄酮，并采用邻苯三酚自氧化法测定其清除超氧阴离子自由基（O2-·）的作用，用Fenton反应产生羟基自由基（·OH）使溴甲酚紫退色的方法测定竹叶黄酮清除羟基自由基的作用，为竹叶黄酮的开发利用提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 实验用竹叶采自福建省武夷山市，用蒸馏水洗净后80 ℃烘干，粉碎、过40目筛，烘干备用。
黄酮类抗氧化
Iridoid and ?avone glycosides from Asystasia gangetica subsp.micrantha and Asystasia salicifolia and their antioxidant activities Prateep Worawittayanon a ,Juriratana Ruadreo a ,Wannaporn Disadee a , Poolsak Sahakitpichan a ,Somkid Sitthimonchai a ,Nopporn Thasana a ,b ,Somsak Ruchirawat a ,b ,Tripetch Kanchanapoom a ,c ,* a Chulabhorn Research Institute and Chulabhorn Graduate Institute,Vipavadee-Rangsit Highway,Bangkok 10210,Thailand b The Center of Excellence on Environmental Health,Toxicology and Management of Chemicals,Vipavadee-Rangsit Highway,Bangkok 10210,Thailand c Faculty of Pharmaceutical Sciences,Khon Kaen University,Khon Kaen 40002,Thailand a r t i c l e i n f o Article history: Received 31March 2011Accepted 28August 2011 Available online 26October 2011Keywords: Asystasia gangetica Asystasia salicifolia Acanthaceae Iridoid glycoside Flavone glycoside Antioxidant activities 1.Subject and sources Asystasia ,member of Acanthaceae family,is a genus comprising of about 70species distributed in tropical and subtropical old world regions (Mabberley,1987).In Thailand,three species-two subspecies have been found,one of which,Asystasia salicifolia Craib,is a native species.The introduced species are Asystasia nemorum Nees.(syn.Asystasia intrusa Blume),Asystasia gangetica (L.)T.Anderson subsp.gangetica (L.).T.Anderson and subsp.micrantha (Nees)Ensermu,which are occasionally widespread and cultivated as ornamental plants. Asystasia ganetica (L.)T.Anderson subsp.micrantha (Nees)Ensermu was collected in March 2010from Khon Kaen University,Khon Kaen Province,Thailand.The latter species,A.salicifolia Craib was collected in November 2006from Nam-Nao National Park,Phetchabun Province,Thailand.The plants were identi ?ed by Mr.Nopporn Nontapa,Department of Pharmaceutical Botany and Pharmacognosy,Faculty of Pharmaceutical Sciences,Khon Kaen University.Two voucher speci-mens (TK-PSKKU-0066and TK-PSKKU-0056)were deposited at the Herbarium of the Faculty of Pharmaceutical Sciences,Khon Kaen University. *Corresponding author.Faculty of Pharmaceutical Sciences,Khon Kaen University,Khon Kaen 40002,Thailand.Tel.:t6643202378;fax:t6643202379.E-mail address:trikan@kku.ac.th (T. Kanchanapoom).Contents lists available at SciVerse ScienceDirect Biochemical Systematics and Ecology journal homepage: https://www.docsj.com/doc/053692215.html,/locate/biochemsyseco 0305-1978/$–see front matter ó2011Elsevier Ltd.All rights reserved.doi:10.1016/j.bse.2011.08.016 Biochemical Systematics and Ecology 40(2012)38–42
黄酮混合物体外抗氧化活性的相互作用
食 品 科 技FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 提取物与应用· 198 ·2013年 第38卷 第2期 黄酮类化合物广泛存在于水果、蔬菜、谷物、植物来源的饮料(如红酒、绿茶等)等植物性食品中，具有保护心血管、降血压、降胆固醇、抗收稿日期：2012-08-25 基金项目：宁波职业技术学院2011年院级课题(NZ11022)；宁波工程学院“北仑科技创新基金”项目。 作者简介：汤晓(1981—)，女，浙江宁波人，硕士研究生，讲师，研究方向为植物有效成分提取与应用。 癌、杀菌、消炎等多种生理活性[1]。黄酮类化合物的基本结构为2个苯环通过中央三碳链连接而成，目前已确认结构的黄酮有5000多种，可划分为10汤 晓1，焦泽武1，龚淑珍1，梁 春1，方振飞1，关亚璠1，仇 丹2 (1.宁波职业技术学院应用化工系，宁波 315800 ； 2.宁波工程学院化学工程学院， 宁波 315016)摘要：测定槲皮素、异槲皮素、杨梅素、山萘酚、儿茶素、表儿茶素、芹菜素、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷等9种黄酮类化合物及其两两混合物的体外抗氧化活性，以研究黄酮混合物的协同、拮抗与加合作用。以DPPH 清除能力、羟基自由基清除能力、总抗氧化性、还原能力为评价指标。结果表明，含有较多B 环羟基的黄酮类化合物更易发生拮抗作用，可通过调节黄酮单品的比例减小混合物的拮抗作用或是增强其协同作用，不同反应机理的评价指标所得结果不同。 关键词：黄酮；抗氧化活性；协同；拮抗；加合 中图分类号：R 285 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2013)02-0198-09 Interaction of flavonoids mixtures on antioxidant activities in vitro TANG Xiao 1, JIAO Ze-wu 1, GONG Shu-zhen 1, LIANG Chun 1, FANG Zhen-fei 1, GUAN Ya-fan 1, QIU Dan 2 (1.Department of Chemical Engineering, Ningbo Polytechnic College, Ningbo 315800;2.College of Chemical Engineering, Ningbo University of Technology, Ningbo 315016)Abstract: This study investigated in vitro antioxidant activities of quercetin, isoquercetrin, myricetin, kaempferol, catechin, epicatechin, apigenin, delphinidin-3-O-glucoside, cyanidin-3-O-glucoside and their pairwise mixtures to evaluate synergistic, antagonistic, and additive effects of flavonoids mixtures. DPPH radical scavenging activity, hydroxyl radical scavenging activity, total antioxidant activity and reducing power were used as evaluation indicators. The results indicate that flavonoids with more B ring hydroxyls are more influenced by antagonistic effect. Antagonistic effect could be reduced and synergistic effect could be enhanced by changing the ratio of single flavonoid in the mixture. Different reaction mechanisms could induce different experimental results.Key words: flavonoids; antioxidant activity; synergistic; antagonistic; additive 黄酮混合物体外抗氧化活性的相互作用
竹叶黄酮开题报告
1、本课题国内外研究动态，选题的依据和意义。 1.1 竹叶黄酮的提取工艺 黄酮类化合物的糖苷是多酚化合物，具有酚性化合物的特征，呈弱酸性，可溶于碱性溶液，但很多黄酮类化合物在溶于碱性溶液的同时有氧存在，其黄酮苷会发生降解反应。根据相似相溶原理，按黄酮类化合物的极性来选择所用溶剂，竹叶所含的有效活性物质主要为黄酮苷类，具有较大的极性和亲水性，故可选择热水、甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇等溶剂进行提取。竹叶黄酮的提取方法传统上多用浸提和蒸馏，目前已采用一些高新技术提取和精制竹叶提取物，如CO，超临界提取、超声波提取等。提取原料选新鲜竹叶，最好是现用现取。 1.1.1溶剂提取法 水提法此法适用于黄酮苷类物质提取。具有成本低，对环境及人类无毒害，设备简单，适合工业化大生产，但提取率低，提取中杂质较多(如无机盐，蛋白质，糖类等)，后续分离麻烦，现在很少单一使用此法。 有机溶剂提取法根据黄酮类化合物与杂质极性不同来选择适合的有机溶剂，常用有乙酸乙酯，丙酮，乙醇，甲醇，水或某些极性较大的混合溶剂。如甲醇一水(1：1)进行提取。竹叶中黄酮苷类易溶于水，甲醇，乙醇等强极性的溶剂中，故一般用浓度为60％左右的乙醇提取黄酮苷类。 陈彦等以水和乙醇水溶液为提取剂，对影响提取率的因素进行了优化，得出乙醇最佳提取浓度为75％。 1.1.2微波提取法 微波法原理是利用磁控管所产生的每秒亿次超高频率的快速震动，使材料内分子互碰撞、挤压，使得位于细胞内的有效成分从细胞壁周围自由流出，传递转移至萃取介质周围，在较低的温度下背萃取介质获取并溶解其中。此法具有提取率高，准确，快速，操作成本低，减少原料预处理费并于环境无害。微波射线穿透性好，在接近环境温度下抽提竹叶中所需的有效成分，对于热敏性成分的萃取非常有效。微波萃取作为一种新的顺应潮流的高新技术必将得到迅
黄酮体外抗氧化活性研究
1. 供试液的制备：将纯化后的黄酮用蒸馏水（可加SDS 促溶）稀释后，分别配 制10、20、30、40、50、60、70 μg/mL 溶液，4℃保存备用。（根据实际情况调整浓度） 2. 总黄酮的测定： 标准曲线的绘制：称取芦丁10.00 mg 至50 mL 容量瓶，加60%乙醇使之溶解定容至刻度，摇匀，即得芦丁标准溶液（0.2 mg/mL ）。准确吸取芦丁标准溶液0、0.5、1.0、1.25、1.5、2.0 mL （相当于芦丁0、0.1、0.2、0.25、0.3、0.4 mg ），并用相应60%乙醇溶液相应补足2.0 mL ，移入10 mL 刻度比色管中，加5%亚硝酸钠溶液0.2 mL ，振摇后放置6 min ，加入10%硝酸铝溶液0.2 mL 摇匀后放置6 min ，加1.0 mol/L 氢氧化钠溶液2.0 mL 。摇匀，放置15 min ，于510 nm 波长处测定吸光度，以芦丁含量（mg ）为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 样品测定：吸取适当稀释的待测液2.0 mL ，按标准曲线制备操作步骤于 510nm 处进行吸光度的测定（样液如有沉淀，应过滤后测定）。 结果计算：根据标准工作曲线，求出相当于样品吸光度的芦丁含量，按下式求出总黄酮含量： 10010 3121????=V m V m X 式中：X ——样品中总黄酮含量，g/100g ； m 1——根据标准曲线计算出待测液中黄酮的量，mg ； m ——样品质量，g ； V 1——样品提取液测定用体积，mL ； V 2——样品提取液总体积，mL 。 3. 还原能力的测定： 于试管中加入1.0 mL 样液(不同质量浓度的待测物溶液)或蒸馏水，再分别加入1.0 mL 磷酸缓冲溶液（0.2 mol/L, pH6.6）及1.0 mL 铁氰化钾水溶液(1%)，50℃水浴20 min 后取出快速冷却，加入1.0 mL 三氯乙酸水溶液(10%)，摇匀，5000 rpm/min 离心5 min 。取1.0 mL 上清液，依次加入1.0 mL 蒸馏水，0.5 mL 三氯化铁水溶液(0.1%)，充分混匀，10 min 后，在700 nm 波长处测定吸光度，吸光度越大，则说明还原能力越强。以V C 为阳性对照做参照实验。 4. DPPH 自由基清除活性： D PPH 溶液：称取8.00 mg DPPH 用100 mL 无水乙醇溶解，定容于100 mL 容量瓶中，摇匀，倒入棕色磨口瓶，作为储备液保存于4℃冰箱中，浓度为2×10-4 mol/L 。 取100 μl 待测液及100 μl 的2×10-4 mol/L DPPH 溶液加入96孔板中，摇匀。20 min 后用相应溶剂作参比在517 nm 下测定其吸光度A i ，同时测定2×10-4 mol/L
黄酮类抗氧化剂结构
黄酮类抗氧化剂结构-活性关系的理论解释* 张红雨 单位：山东师范大学生物系动物抗性生物学省重点实验室, 济南250014 山东师范大学博士科研启动基金资助项目1998-03-04收稿，1998-06-01收修改稿致谢在计算过程中与中国科学院研究生院颜达予教授进行了有益的讨论，在此致以诚挚谢意. 摘要用AM1方法对若干黄酮类抗氧化剂做了计算. 发现: (1) 黄酮化合物邻二酚 羟基清除自由基的活性强于间二酚羟基. 原因一是前者半醌式自由基与邻位酚羟 基形成分子内氢键, 从而更稳定; 二是前者半醌式自由基通过共振形成邻苯醌, 这使其未成对电子密度在邻位氧上有较多分布, 内能更低. (2) 色原酮类黄酮化 合物C环的吸电子性质使它对A环酚羟基有钝化作用, 使其更不活泼. 由于B环受 C环影响较小, 而且大多数黄酮类抗氧化剂B环为邻二酚羟基取代, 因此实验总结 出的B环酚羟基活性高的规律得以解释. 关键词黄酮类抗氧化剂AM1方法结构-活性关系理论解释 鉴于氧自由基与疾病的关系十分密切而且又是食品氧化的主要原因［1,2］, 寻找抗氧化剂的工作已在不同领域广泛展开［3,4］. 由于人工合成的抗氧化剂存在副作用 大及价格昂贵等多方面的缺陷, 因此近来人们逐渐将注意力转向植物中蕴藏的丰 富的天然抗氧化剂, 其中黄酮类化合物(flavonoids)是研究较多的一类［5,6］. 以前黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮(2-phenylchromone)的化合物, 现在则是泛指2个苯环(A与B环)通过中央三碳链相互联结而成的一系列 化合物(图1)［7］. 它们的种类很多, 大多在各环都有酚羟基取代. 近来大量的体 内和体外研究表明黄酮类化合物有较强的抗氧化活性［8］, 由于它们同时也具有各 种药理作用且毒副作用很小, 因而特别引人注目,并且作为抗氧化药物很有发展潜 力. 图1 黄酮母核结构式 2-苯基色原酮结构式 C6-C3-C6联结形式 在黄酮类抗氧化剂的作用机制中, 通过酚羟基与氧自由基反应生成较稳定的半醌式自由基, 从而中止链式反应无疑是最主要的. 对这种机制的结构- 活性关系(structure-activity relationships)的研究发现黄酮各个环上的酚羟 基活性相差较大, B环酚羟基活性最高, 当C环为色原酮时, 其上的酚羟基也有一 定作用, A环酚羟基活性最弱［9］. 但这一经验规律尚无理论解释, 这无疑限制了
竹叶黄酮的应用及市场概况
竹叶黄酮的应用及市场概况 一、竹子概述 竹子是禾本科( Gram ineae ) 竹亚科(Bambusoideae)多年生常绿植物，有着复杂的次生代谢。世界竹类植物约有70－80 属1 300多种，其中我国约有39属500余种。我国江南竹资源丰富，竹林面积约为720万公顷，主要分布在广东、广西、福建、浙江、湖南、江西、四川、江苏、贵州和云南等省份。 竹叶在我国有悠久的利用历史，是一味传统的清热解毒药。近年来对竹子的研究发现，竹叶中含有大量对人体有益的活性物质，包括黄酮酚酸类、生物活性多糖、氨基酸肽类、蒽醌类、萜类内酯等，其中酚酸类化合物、蒽醌类化合物、萜类内酯和生物碱等都有着较强的抑菌杀菌作用。竹叶中主要有效成份的含量为：总黄酮含量1. 18% ～ 2. 02%，总酚含量2. 21%～2. 86%，总糖含量14. 35%～24. 61%，水溶性糖含量7. 86%～11. 45%， 多糖6. 49%～14. 55%，蛋白质含量10. 24%～16. 68%，含氮量2. 13%～2. 65%。 淡竹叶2002年被卫生部列入“既是食品又是药品的物品名单”。 二、竹叶黄酮概述 又名竹叶抗氧化剂，英文名称antioxidant of bamboo leaves， 简称AOB，是从竹叶中提取出来的具有生理活性的生物黄酮，它是一种高效的生物抗氧化剂。AOB为黄色粉末或晶体，总黄酮糖苷含量在≥24％，总香豆素类内酯≥12％，包括黄酮类、内酯类和酚酸类化合物，是一组复杂的、而又具有相互协同增效作用的混合物。其中，黄酮类化合物主要是碳苷黄酮，四种代表化合物为：荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷，内酯类化合物主要是羟基香豆素及其糖苷，酚酸类化合物主要是肉桂酸的衍生物，包括绿原酸、咖啡酸和阿魏酸等。 竹叶抗氧化物是一种具有本土资源特色和自主知识产权的、安全高效经济的天然食品抗氧化剂，于2003年底通过国家评审，2004年4月被批准列入《中华人民共和国食品添加剂使用卫生标准》(GB2760—1996)，允许的使用范围是：食用油脂、肉制品、水产品和膨化食品，最大使用量0.5g／kg。 竹叶黄酮于2014年12月20号公告被国家卫计委列入新食品原料。