(完整版)Agilent1260液相色谱系统操作规程

1目的

规范Agile nt 1260系列高效液相色谱的日常使用和维护保养，保证仪器的正常运转，确保检测工作的顺利进行。

2适用范围

适用于Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。

3职责

实验室分析人员负责Agile nt 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4系统组成

4.1 Agile nt 1260 系列四元泵（G1311C）和脱气机；

4.2可变波长紫外检测器（VWD G1314F ；

4.3 Chemstation A.01.04 色谱工作站

4.4国产柱温箱（AT-550）色谱柱；

4.5电脑、打印机等辅助设备。

5定义

无

6操作程序

6.1开机前的准备

6.1.1检查仪器校验标识，确认仪器处于校验周期内。

6.1.2检查上次《实验室仪器设备使用记录表》和仪器状态，确认仪器处于正常状态；

6.1.3流动相的制备：

6.1.3.1按《高效液相色谱法流动相配制标准操作规程》配制需要的流动相。

6.1.3.2用前超声脱气（一般10?20min）。

6.1.4更换流动相：

6.1.4.1将泵的吸滤器从旧流动相中取出，用新流动相冲洗后放入新流动相的储液瓶中，并盖好瓶盖；

6.1.4.2将排液管的出口端放入废液瓶中，并盖好瓶盖。

6.1.5供试溶液的配制：

6.1.5.1供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。

6.1.5.2定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制 2份。

6.1.5.2如有必要，样品需预处理，如过滤等，以免对色谱系统产生污染和色谱干扰。

6.1.6选择色谱柱： 6.1.6.1根据待检供试品的检测方法确定所需的色谱柱；

6.1.6.2检查仪器上安装的色谱柱是否与其相同，若不同则需进行更换。

6.1.7更换色谱柱

6.1.

7.1拆卸原色谱柱：

先握住色谱柱，再松动色谱柱出口端螺帽，取下出口端的管线；

松动色谱柱入口端螺帽，取下入口端的管线；

用止动塞将色谱柱的进出口塞住拧紧后，将色谱柱放回原专用包装盒内

6.1.

7.2安装新色谱柱：

从专用包装盒内取出色谱柱，松动并取下色谱柱出入口的止动塞；

将与进样器相连的管线一端插入色谱柱入口端，拧紧螺帽；

（注意：安装时色谱柱上的流向标志应与管路的流动相流向一致。 ）

将与检测器相连的管线一端插入色谱柱出口端，拧紧螺帽。

6.2开机

6.2.1通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

6.2.2接通电源，打开计算机和打印机开关

6.2.3等待计算机自检完毕后，进入 Windows 桌面，依次打开泵、进样器、检测器各模块电源。 打开柱温箱开关。

6.2.4待各模块自检完成后，点击 6.2.5确定仪器与工作站已连接，若未连接，需关闭工作站，重新连接。注意必须先打开检测器, 再连接

工作站。

6.2.6从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面 ，也可单击工作站画面左侧的“方法和运行 控制”项，进入方法和运行控制窗口。

6.3 操作

6.3.1泵的开启和设置

6.3.1.1打开Purge 阀（逆时针），右键点击四元泵下面的空白处，选择“方法”选项，进入泵 编辑画面。

Win dows 桌面 lc ”图标进入化学工作站画面

631.2 设流速：0ml/min，点击“确定”。右键点击四元泵下面的空白处，选择“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，泵开始启动。

631.3待泵启动完毕，泵的图标变绿色后，右键点击四元泵下面的空白处，选择“方法”选项，进入泵编辑画面。设“流量”逐步增大流速至5ml/min ， A通道设到100%单击“确定”。则系

统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止（一般需要5min左右）。

6.3.1.3 注意：为保护泵，不宜直接设置过高流速或直接将高流速降为低流速，宜缓慢梯度提高

或降低流速；

6.3.1.4看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。

6.3.1.5右键点击四元泵下面的空白处，选择“方法”选项，进入泵编辑画面，将流速设为0ml/min，

点击“确定”，关闭Purge阀（顺时针）。

6.3.1.6 右键点击四元泵下面的空白处，选择“方法”选项，进入泵编辑画面，设置使用的流动相比例和流速或选择已有方法开始系统平衡。

6.3.1.7 点击四元泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积，点击“确定”。

6.3.2方法编辑

若已创建方法，可在“方法”菜单选择“调用方法”，选择相应的方法。若无，需按下面步骤建立：

6.3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”，钩选“方法信息”、“仪器/采集”、“运行

时选项表”三项，点击确定；

6.3.2.2出现“方法信息”对话框，如有需要可将方法的描述信息输入，也可选择不输入任何信

息，点击确定；

6.3.2.3 泵参数设定

在“流量”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂B ”处输入80.0,（A=100-B-C-D）,也可“插入”一行“时间表”，编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，如300bar，以保护柱子。点击“确定”进入下一参数设定。

6.3.2.4 柱温箱参数设定

在柱温箱上手动输入规定的温度即可。

6.3.2.5紫外检测器（VWD G1314）参数设定

在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm,在“峰宽（响应时间）”下方点击

下拉式箭头,选择合适的响应时间,如＞0.1min （2s ）。在“时间表” 中可以“插入”一行，输 入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm 点击“确定”，进入下一参数设定。

6.326 在“运行时选项表”中选中“数据采集”，点击“确定”。

6.327完整方法编辑完毕。点击“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名称，点 击“确定”。

6.3.3运行样品

6.3.3.1从菜单“视图”中选中“在线信号”，选中“信号窗口 T ,然后点击“改变…”

钮，将

所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定”。

6.3.3.2 从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，输入操作者名称；在“数据文件”中选 择“手动”或“前缀/计数器”。（区别：手动--每次做样之前必须给出新名字，否则仪器会将上次 的数据覆盖掉。Pr —在前缀/计数器----“前缀”框中输入前缀，在“计数器”框中输入计数器的 起始位，仪器会自动命名，如 vwd 数据0001, vwd 数据0002……。）

6.3.3.3点击“确定”，从“仪器”菜单选择“系统开启”。

6.3.3.4 手动进样

6.3.4数据处理

双击电脑桌面的 或点击屏幕左下方的“数据分析”，进行数据

处理。

6.3.4.1调用需要处理的数据：从“文件”菜单中选择“调用信号”，或者点击屏幕左上方的图 标“H ”，跳出一个对话框，选择相应文件夹里的数据文件名称，单击“确定”即可。

6.3.4.2调用方法：从“方法”菜单里选择“调用方法”，或者点击屏幕左上方的图标“

■ 跳出一

个对话框，选择相应的方法名称，单击“确定”即可

6.3.4.3 积分:

6.3.4.3.1从“积分”菜单中选择“积分”，当前数据被积分。若积分不是很理想，则从“积分”

菜单中选择“积分事件”，选择合适的“斜率灵敏度”、“最小峰面积”、“最小峰高”

等。

从“积分”菜单中选择“积分”，则当前数据被重新积分。 图标，进入脱机工作站，从“视图”菜单中选择“数据分析”， 6.3.4.3.2 6.3.4.3.3

如积分不理想，则重复 6.3.4.3.1和6.3.4.3.2 ，直到满意为止，此时点击图标

|fcl ”

进行积分参数的保存并退出积分参数设定界面。

6.343.4 如果部分谱峰 基线并积分；点击图标“一 ”，切线撇去 积分不是很理想，也可选择手动积分。点击图标“

手动分裂已积分的峰（适合未基线分离的峰的处理）；点击“

个峰并积分（适合拖 ”，删除已积分的峰；点击图 笔的处理）；点击图

峰

，将当前手动积分事件保存到数据文件中。其他数据处理方式详见工作站说明书。

6.3.5打印报告

635.1打开打印机电源开关，从“报告”菜单中选择“设定报告”，或点击屏幕中间的图标

跳出一对话框，选择相应的定量方法和报告格式，单击确定后退出。

6.3.5.2 从“报告”菜单中选择“打印报告”，或点击屏幕中间的图标“ 占爲”，则可预览到报告。若报告中显示的时间范围及响应范围不合适，贝冋点击“关闭”退出预览。进入“报告版面设计”界面，选择相应的报告格式，双击图谱，点“自定义量程”，输入合适的时间范围和响应范围，并选择“全部使用相同量程”，点击“确定”并保存当前模版后退出，再重新进入“数据分析”界面，重新预览报告，若时间范围和响应范围均合适，单击“打印报告”，即可。

6.4宏命令的使用6.4.1在“视图”下拉单中调出“化学工作站工作日程表”；

6.4.2输入日期时间、命令并选好执行命令的模式，点击保存图标；

6.4.3各宏命令代表意思及输入方法：

开泵：pumpall on

关泵：pumpall off

开灯：lampall on

关灯：lampall off

载入一个方法：loadmethod xxx.M

开始一个方法：startmethod xxx.M

停止一个方法：stopmethod xxx.M

关闭整个系统：standby。

6.5.4注意事项：日程表编辑完毕后，一定要保存，并且不能关闭；宏命令不区分大小写

6.6关机6.6.1样品测试完毕后，关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。

5聽腈/甲醇-水冲洗大约20min;（若使用了无机盐流动体系，则冲洗约30-60min.）

50聽腈/甲醇-水冲洗大约20min;

80聽腈/甲醇-水冲洗大约20min。

6.6.2退出化学工作站，依次提示关泵及其它窗口，关闭计算机。关闭Agile nt 1260 各模块电源

开关。

6.6.3做好仪器使用登记，并填写《实验室仪器设备使用记录表》。

6.7系统日常维护和保养