不锈钢制品施工方案

不锈钢制品施工方案标准化工作室编码[XX968T-XX89628-XJ668-XT689N]

（九）不锈钢玻璃制品施工方案：1．不锈钢制品标准及规范

2．不锈钢制品的技术要求

2.1 基本要求

业主提供的招标图纸是指导性质的图纸，显示外观上的要求，及不锈钢制品的工作范围。必须根据以下设计要求，充分考

虑到在设计时所有的技术性问题，对招标图纸进行深化，以确保

不锈钢制品系统工程按标书要求顺利实施。

（1）制作结构详图设计；

（2）结构详图力求结构新颖合理，牢固、便于维修。

2.2 不锈钢制品的安全要求

不锈钢制品的防火设计应符合《建筑设计防火规范》GBJ16及《建筑内部装修设计防火规范》GB50222-95。

2.3 不锈钢制品详细要求

详见招标施工图

3．不锈钢制品的材料要求

所有饰面材料及辅助材料必须为全新及没有缺陷的，必须负责选购及确定材料符合此标书和有关图纸的设计要求。另外必须

提供制造商的书面保证或有关物料试验报告以确认材料的质量及

其它材料的配合性。

4．材料要求

本工程作于制作本栏杆系统的所有原材料等元件均为全新的（未曾作任何用途）并为生产商最新近之出厂制品。

栏杆系统应表面平整，边缘整齐，无起皮、缺角、污垢等，几何形状以设计模数为基础。满足中华人民共和国家家标准，防

火性能满足《建筑内部装修设计防火规范》GB50222-95并且应满

足但不局限于下列指标。

4.1 不锈钢材料

（1）φ76发纹不锈钢管（总体要满足GB/T14975-94的要求）

（2）化学成分要满足GB222《钢的化学分析用试样取样法及成品化学成分允许偏差》有关规定。

（3）物理性能要满足GB/T14975-94对1Cr18Ni9Ti的规定。

（4）表面处理：发纹拉丝

（5）直线度偏差：≤L/100并≤0.5mm

（6）壁厚：≥2.5mm（建议≥2.0）

（7）发纹不锈钢（总体上要满足GB3280-92要求）

a、板厚：≥1.2mm（实际采用1.5mm）（厚度详细以室内

装饰招标施工图为准）

b、表面处理：发纹拉丝

c、化学成分要满足GB222《钢的化学分析用试样取样法

及成品化学成分允许偏差》有关规定。

d、物理性能要满足GB3280-92对1Cr18Ni9Ti的规定。

e、φ20发纹不锈钢管（总体要满足GB/T14975-94的要

求）

f、化学成分要满足GB222《钢的化学分析用试样取样法

及成品化学成分允许偏差》有关规定。

g、物理性能满足GB/T14975-94对1Cr18Ni9Ti的规定。

h、表面处理：发纹拉丝

i、直线度偏差：≤L/1000并≤0.5mm

j、壁厚：≥1.2mm（厚度详细以室内装饰招标施工图为

准）

4.2 玻璃

玻璃栏杆所选用的玻璃应符合中国国家标准GB9963-88《钢化玻璃》的规定并满足下列要求。

（1）一般要求

a、根据机场工程要求，所提供的玻璃应具有上佳的装饰

效果作用，并能根据使用环境的要求，具有良好的减

少热传递、防震抗冲击等适应和改善建筑环境的功

能。

b、玻璃形式采用无色的双层夹胶钢化玻璃，玻璃厚度

（6+6+0.76）mm。玻璃应采用新鲜、优质的玻璃为基

片。

c、提供的所有玻璃产品必须是同一生产厂的产品，该生

产厂必须具有生产、加工一体化的能力。

d、玻璃的运输、贮存和包装应严格按玻璃制造商的标准

进行。

（2）玻璃的外观质量及尺寸偏差要求

a、玻璃在外观上不允许存在气泡、裂痕、爆边、叠差、

磨伤、脱胶等缺陷。

b、玻璃长度、宽度和对角线尺寸允许偏差为±2mm。

c、玻璃弯曲度不得超过0.3%.

4.3 密封胶

（1）一般要求

a、根据设计决定使用何种密封胶。

b、栏杆工程使用的耐候硅酮密封胶必须为中性固化胶，

不得使用已过期的产品。

c、在使用密封胶时，一定要严格遵守材料制造商关于产

品使用及接缝尺寸限制的书面说明。

d、所有混合的密封胶不得现场配制。

e、密封胶必须经过指定的测验，证实符合设计要求才能

使用。

f、密封胶的颜色需事先经室内建筑师同意方可采用。

（2）玻璃栏杆计算书

（3）玻璃隔断计算书

5. 不锈钢施工措施：

（1）依据设计图进行深化，出好加工图，选择加工工艺先进的厂家进行定加工。

（2）不锈钢的表面必须保持光洁、平整。拆边、切割加工必须准确、光滑平整、美观，焊接必须在隐蔽的一面进行，尽可减少

焊接晕轮或其它在表整饰后出现的缺点。

（3）饰面基层必须平整、定位，以保证不锈钢饰面的平整度。

（4）一切接头应为齐平的细缝隙接头，各部件与各部分的接头，强度应足以防止变形及内偏移，尽可能的以隐蔽式的固定装置配

嵌及安装。

（5）镶贴不锈钢时需用专用工具及专用的金属粘合剂，不得用其它金属器具撬、击。

（6）在运输和安装过程中注意成品保护。

6. 不锈钢管栏板扶手施工方案：

（1）不锈钢扶手在制做前根据施工图定出各立杆的准确位置，采用６MM膨胀螺丝与立杆焊接。施工基层要清理干净。

（2）根据施工图和现场放样图下料，扶手高1100MM，楼梯挡板采用12MM厚钢化玻璃，玻璃栏杆宽1500（根据实际尺寸调

整）。

（3）不锈钢管在安装时对焊接表面用不锈钢丝刷进行刷洗，避免焊接时对碳的吸收或混入杂质，影响焊接效果。不锈钢

的焊接选用手工电弧焊，焊接时注意调整焊缝间隙，间隙

的大小应符合焊接要求(0-1.0MM)并保持均匀一致，焊缝要

饱满。

（4）楼梯栏杆采用卡槽式安装，卡槽与立杆的连接有焊接和铆固两种，且两卡槽中距不宜大于450MM，卡槽下端头为封闭

式，卡槽与玻璃连接处嵌入橡胶条。

（5）楼梯扶手的质量检验标准为栏杆垂直偏差不大于2MM、栏杆间距偏差不大于3MM、扶手纵向弯曲偏差不大于4MM。

标准曲线制作考马斯亮蓝法测蛋白质含量

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量 一、标准曲线 一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。 二、蛋白质含量测定方法 1、凯氏定氮法 2、双缩脲法 3、Folin-酚试剂法 4、紫外吸收法 5、考马斯亮蓝法 三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 （一）、试剂： 1、考马斯亮蓝试剂： 考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H 3PO 4 ， 加蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝 G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H 3PO 4 。 2、标准蛋白质溶液： 纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。 （二）、器材： 1、722S型分光光度计使用及原理 2、移液管使用 （三）、标准曲线制作： 1、 2、以A 595nm 为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、

40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上绘制标准曲线。 1）、利用标准曲线查出回归方程。 2）、用公式计算回归方程。 3）、或用origin作图，测出回归线性方程。即A 595nm =a×X( )+6 一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。 4）、绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。 （四）、蛋白质含量的测定： 样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测围），依照操作步骤1操作， 测出样品的A 595nm ，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。 一般被测样品的A 595nm 值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A 595nm 值太大， 可以稀释后再测A 595nm 值，然后再计算。（五）、注意事项： 1、玻璃仪器要洗涤干净。 2、取量要准确。 3、玻璃仪器要干燥，避免温度变化。 4、对照：用被测物质以外的物质作空白对照。

标准曲线的作法

标准曲线的作法

标准曲线的作法 (1)标准液浓度的选择：在制备标准曲线时，标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值，一般可选择5种浓度。浓度差距最好是成 倍增加或等级增加，并应与被测液同样条件下显色测定。 (2)标准液的测定：在比色时，读取光密度至少读2-3次，求其平均值，以 减少仪器不稳定而产生的误差。 (3)标准曲线图的绘制：一般常用的是光密度一浓度标准曲线。 ①用普通方格纸作图。图纸最好是正方形(长：宽=l：1)或长方形(长：宽=3 ： 2)，以横轴为浓度，纵轴为光密度，一般浓度的全距占用了多少格，光密度的全距也应占用相同的格数。 在适当范围内配制各种不同浓度的标准液，求其光密度，绘制标准曲线， 以浓度位置向上延长，光密度位置向右延长、交点即为此座标标点。然后，将 各座标点和原点联成一条线，若符合Lambert-Beer氏定律，则系通过原点的 直线。 ②若各点不在一直线，则可通过原点，尽可能使直线通过更多点，使不在 直线上的点尽量均匀地分布在直线的两边。 ③标准曲线绘制完毕以后，应在座标纸上注明实验项目的名称，所使用比 色计的型号和仪器编号、滤光片号码或单色光波长以及绘制的日期、室温。 ④绘制标准曲线：一般应作二次或三次以上的平行测定，重复性良好曲线 方可应用。 ⑤绘制好的标准曲线只能供以后在相同条件下操作测定相同物质时使用。 当更换仪器、移动仪器位置、调换试剂及室温有明显改变时，标准曲线需重新 绘制。 ⑥标准曲线横坐标的标度：从标准液的含量换算成待测液的浓度。 1.5 原子吸收光谱分析的定量方法 原子吸收光谱分析是一种动态分析方法，用校准曲线进行定量。常用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和浓度直读法。如为多通道仪器，可用内标法定量。在这些方法中，标准曲线法是最基本的定量方法。 1.5.1 标准曲线法 前面已经指出，原子吸收光谱和原子荧光光

运用Excel做标准曲线

Excel绘制标准曲线全图片教程 随着计算机的日益普及，越来越多的检验工作者希望能从一些烦琐的工作中解脱出来，如：绘制标准曲线、绘制质控图、计算检测值等等。当然借助检验科办公系统理论上是最方便的，但很多单位是没有检验科办公系统的。其实借助Microsoft的Excel电子表格工具对检验工作也会带来很大的便利。 Excel是Microsoft offices系统的重要组成，它是界于WORD字处理软件与ACCESS数据库软件之间的电子表格工具，功能十分强大，特别适合于日常工作使用。使用得好，完全比目前所有的检验科办公系统优秀。 现就先介绍一下如何使用Excel绘制标准曲线。 首先，将数据整理好输入Excel，并选取完成的数据区，并点击图表向导，如下图所示。 点击图表向导后会运行图表向导如下图，先在图表类型中选“XY散点图”，并选了图表类型的“散点图”（第一个没有连线的）。

点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”。

如果发现图不理想，就要仔细察看是否数据区选择有问题，如果有误，可以点击“系列”来更改，如下图。

如果是X值错了就点击它文本框右边的小图标，结果如下图： 出现上图后，如图在表上选取正确的数据区域。然后点击“下一步”出现图表选项界面，如下图，上应调整选项，以满足自己想要的效果。

点击“下一步”，现在一张带标准值的完整散点图就已经完成，如下图。

完成了散点图，现在需要根据数据进行回归分析，计算回归方程，绘制出标准曲线。其实这很简单，先点击图上的标准值点，然后按右键，点击“添加趋势线”。如下图。

标准曲线的制作方法

标准样品的准备 由于你做的是基因表达分析，样品的准备就比较简单了，因为你要知道都是相对的数值（你的对照样品和实验样品中基因表达的比值），这样就不需要知道精确的拷贝数，所以标准品也就无须知道精确的拷贝数，只需知道稀释的倍数就可以了。 你实验中的标准品可以是来源比较丰富的细胞或组织的RNA转录得到的cDNA。将这种cDNA进行梯度的稀释，可以是稀释10倍，100，1000，10000等倍（具体到你的实验要根据具体的情况来调整稀释倍数。最好能作一个预实验来看看什么样的稀释倍数比较适合你的这种基因的扩增）。而对于各个稀释倍数我们要对它的拷贝数进行赋值，这个值当然不是标准品中真实含有的基因数量（在基因表达分析中也不需要），而是我们根据稀释倍数给每一个稀释度人为赋予的拷贝数，这只是为了方便实验最终结果的计算而已。比如我们把前面稀释十倍的样品赋值为10000个拷贝，100倍的赋值为1000个拷贝依次类推把10000倍的赋为10等。要注意，赋值的数目的倍数差异和你稀释的倍数是一样的，比如前面是10稀释，后面赋值也是10倍变化。 如何做标准曲线 在定量实验中标准品是要和你的未知样品一起进行定量实验的，这样在实验结束，无论是标准品还是未知样品都将跑出曲线，获得Ct值。那么我们先可以把未知样品放到一边，对于标准品来说，我们既获得了Ct值，还知道他们的拷贝数（虽然这个拷贝数是我们自己赋予的）。这样我们可以通过标准品的Ct值和拷贝数做一条标准曲线（以拷贝数为横坐标，而Ct值为纵坐标）。一旦作出了标准曲线，而未知样品的Ct值我们知道（通过实验求得的），这时候就在标准曲线上进行定位，就可以得到未知样品的拷贝数了。 事实上，操作起来没有那么复杂，你只需要告诉软件你的哪个孔是标准品，哪个是未知样品，以及标准品的拷贝数等必要信息，软件会自动帮你把标准曲线和未知样品的拷贝数计算出来。 举例来说如何进行设置 先进入软件，在板设置中选择所放样品的位置，并标上unknow或standard等信息。 选择要使用的荧光染料。

HPLC标准曲线的制作

HPLC标准曲线的制作 你可以随便弄一个浓度进一针样品看一看你这个样品的吸收度如何，再根据你样品的吸收度配置适当的底浓度样品逐个稀释这样可以连检测线定量限一起做了，一举3得(最后将你得到的峰面积根据你的进样浓度做一个线性回归就行啦，线性好的话R的平方一般接近于1 。 请问下各位在上样的时候是进同浓度的不同体积的样液绘制标准曲线好还 是先配好不同浓度的样液再以相同体积进样好呢, 这2个有什么区别吗, 请你看看分析化学书，有关精密度和线性的关系就知道了，实在不行，可以查看2005版药典一部附录新药质量标准的技术要求项下。自己看看就知道了。 我觉得进不同浓度相同体积好.因为你进样体积不同.在同样的方法下,系统的 各项参数可能会发生变化.而且你要通过进样体积的变化来控制浓度范围,这样也不大可行.一般我们进样的体积是5到20微升.而这个狭小的范围我们能调控的浓度线性范围非常窄.而通过事先调配不同浓度的话,就简单可行,而且浓度范围可以任意去控制.在实际操作中,老师也一直是教我们通过控制不同浓度来制作标准曲线的.以上只是个人的粗浅看法,欢迎高手们前来批评指正!!!!!!!!!! 前面几个站友说得都很好。我简单再补充一点自己的看法。 一般而言，还是不同浓度进相同体积做标曲是最规范的做法，而且可以有效避免人为误差。比如说，你的一个浓度配错了，如果以这个浓度为基准进不同的体积，会导致你最后的结果会整体偏大或偏小。所以要特别注意。 但实际工作中，如果你们的产品做得比较成熟了，而且做实验的经验比较丰富，大家为了省事还是多采用配一个浓度进不同的体积。 以进样量做标准曲线和以不同浓度进样相同体积做标准曲线差别不大。

标准曲线制作

1 葡萄糖测定 （1）1mg/mL 葡萄糖标准液 小烧杯取分析纯葡萄糖置于烘干箱中烘干至，于分析天平中准确称取80℃烘至恒重的分析纯 葡萄糖10mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到10mL 容量瓶中，用蒸馏水定 容至10mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。 （2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂 将6.3g DNS （分析天平中称取于小烧杯）和262mL 2M NaOH 溶液（大量筒称取250ml+ 小量筒称取12ml），加到500mL（量杯量取）含有185g 酒石酸钾钠的热水溶液中（在微波 炉中加热1min溶解），再加5g 结晶酚和5g 亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。 1．制作葡萄糖标准曲线 取7 支10mL 具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1mg/mL 的葡萄糖标准液、蒸馏水 和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，配成不同葡萄糖含量的反应液。 1mg/ml葡萄糖标准溶液蒸馏水 DNS 葡萄糖含量光密度值 管号（ml）（ml）（ml）（mg/ml）（OD540） 0 0 1 0.75 0 1 0.1 0.9 0.75 0.01 2 0.2 0.8 0.75 0.02 3 0.3 0.7 0.75 0.03 4 0.4 0.6 0.7 5 0.04 5 0.5 0.5 0.75 0.05 6 0.6 0.4 0.75 0.06 将各管摇匀，取试管架置于水浴锅中，在沸水浴中准确加热5min，取出，冷却至室温，用蒸馏水定容至10mL，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色（分光光度计预热20分钟）。调波长540nm，用0 号管调零点，测出1~6号管的光密度值。以光密度值为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。 发酵取样：1ml 样品+0.75mlDNS 沸水浴5min,冷却后，定容到10ml. 540nm测定 2 酒精度测定 称取优级纯无水乙醇0.1000g （取小烧杯置于分析天平中，去皮，以微量移液枪小心添 加至0.1000g）于100ml 容量瓶中（蒸馏水洗涤小烧杯导入容量瓶）, 加水至刻度。此溶液 每毫升相当于1.0mg 乙醇。 5 %重铬酸钾溶液: 称取5g 重铬酸钾(AR) 溶于50ml 水中, 加10ml 浓硫酸（用20ml量 筒量取，边加边用玻璃棒搅拌）, 放冷, 取100ml容量瓶，加水至100ml。 试剂均为分析纯, 水为蒸馏水。 分别取乙醇标准溶液（1mg/mL）0, 0.2，0.4，0.6, 0.8, 1.0mL于带刻度的10mL试管中，分别加入重铬酸钾1.0ml，用蒸馏水补足至5.0ml，在100 ℃水浴中加热10min (加塞防止乙 醇挥发), 取出用流水冷却5min ,充分反应，测吸光度。

标准曲线制作操作步骤共12页word资料

标准曲线制作操作步骤 一、单点法 1、打开要制作标准曲线的色谱图 点击左侧工具栏的图标， 出现下图 点击“下一步”，出现下图，在下图左侧选中要做标准曲线的色谱峰， 然后点击“下一步”，出现下图，在“定量方法”栏选择“外标法”；“校准级别”选择“1”；“零点”选择“强制通过” 然后点击“下一步”，出现下图， 然后点击“下一步”，出现下图，在浓度栏中输入样品浓度 然后点击“完成” 点击左侧工具栏的图标，出现如下图

点击“是”，出现如下图 在“文件名”中输入名称，本次以“咖啡因”命名，点击“保存”，出现如下图 点击“确定”，然后点击左侧工具栏的图标，出现如下图 双击数据栏里，刚刚保存的文件“咖啡因” 出现如下图 把该图中，“数据文件”下面的数据“00.1cd”“02.1cd”，点击鼠标右键 删除，然后点击图中左下角的 图标，出现如下图 在左侧数据栏中，鼠标左键点住起初要制作标准曲线的色谱图，把该数据

拖到上图中“数据文件级别：”下面，然后松开鼠标左键，出现如下图点击确定，出现如下图 该标准曲线的方法就建立好了。 打开要分析的色谱图，鼠标左键点住左侧的刚刚建立的标准曲线方法“咖啡因”，把它拖到右侧的色谱图中， 出现如下图 点击“确定”，结果出现在下图右下角的“结果”栏中 未知样的定量完成。 二、外标法 1、打开要制作标准曲线的色谱图 2、 点击左侧工具栏的图标， 出现下图

点击“下一步”，出现下图，在下图左侧选中要做标准曲线的色谱峰， 然后点击“下一步”，出现下图，在“定量方法”栏选择“外标法”；“校准级别”选择“5”；“零点”选择“未强制” 然后点击“下一步”，出现下图， 然后点击“下一步”，出现下图，在浓度栏中依次输入样品浓度 然后点击“完成” 点击左侧工具栏的图标，出现如下图 点击“是”，出现如下图 在“文件名”中输入名称，本次以“咖啡因”命名，点击“保存”，出现如下图 点击“确定”，然后点击左侧工具栏的图标，出现如下图 双击数据栏里，刚刚保存的文件“咖啡因” 出现如下图 删除上图中“数据文件级别下的数据” 然后点击

标准曲线的作法

标准曲线的作法 (1)标准液浓度的选择：在制备标准曲线时，标准液浓度选择一般应能包括待测样品的可能变异最低与最高值，一般可选择5种浓度。浓度差距最好是成倍增加或等级增加，并应与被测液同样条件下显色测定。 (2)标准液的测定：在比色时，读取光密度至少读2-3次，求其平均值，以减少仪器不稳定而产生的误差。 (3)标准曲线图的绘制：一般常用的是光密度一浓度标准曲线。 ①用普通方格纸作图。图纸最好是正方形(长：宽=l：1)或长方形(长：宽=3 ： 2)，以横轴为浓度，纵轴为光密度，一般浓度的全距占用了多少格，光密度的全距也应占用相同的格数。 在适当范围内配制各种不同浓度的标准液，求其光密度，绘制标准曲线，以浓度位置向上延长，光密度位置向右延长、交点即为此座标标点。然后，将各座标点和原点联成一条线，若符合Lambert-Beer氏定律，则系通过原点的直线。 ②若各点不在一直线，则可通过原点，尽可能使直线通过更多点，使不在直线上的点尽量均匀地分布在直线的两边。 ③标准曲线绘制完毕以后，应在座标纸上注明实验项目的名称，所使用比色计的型号和仪器编号、滤光片号码或单色光波长以及绘制的日期、室温。 ④绘制标准曲线：一般应作二次或三次以上的平行测定，重复性良好曲线方可应用。 ⑤绘制好的标准曲线只能供以后在相同条件下操作测定相同物质时使用。当更换仪器、移动仪器位置、调换试剂及室温有明显改变时，标准曲线需重新绘制。 ⑥标准曲线横坐标的标度：从标准液的含量换算成待测液的浓度。 1.5 原子吸收光谱分析的定量方法 原子吸收光谱分析是一种动态分析方法，用校准曲线进行定量。常用的定量方法有标准曲线法、标准加入法和浓度直读法。如为多通道仪器，可用内标法定量。在这些方法中，标准曲线法是最基本的定量方法。 1.5.1 标准曲线法 前面已经指出，原子吸收光谱和原子荧光光谱分析是一种相对测定方法，不能由分析信号的大小直接获得被测元素的含量，需通过一个关系式将分析信号与被测元素的含量关联起来。校正曲线就是用来分析信号（即吸光度）转换为被测元素的含量（或浓度）的“转换器”，此转换过程成为校正。之所以要进行校正，是因为同一元素含量在不同的试验条件下所得到的分析信号是不同的。校准曲线的制作方法是，用标准物质配制标准系列溶液，在标准条件下，测定各标准样品的吸光度值Ai，以吸光度值Ai（i＝1，2，3，4，5）对被测元素含量ci（i＝1，2，3，4，5）绘制校准曲线A＝f（c）。在同样条件下，测定样品的吸光度值Ax，根据被测元素的吸光度值Ax从校准曲线求得其含量Ci。校准曲线如图1－4所示。 校准曲线的质量直接影响校准效果和样品测定结果的准确度。正确地制作一条高质量校准曲线是非常重要的，为此需要：（1）合理的设计校准曲线；（2）分析信号的准确测定；（3）正确绘制校准曲线。 首先，从数理统计的观点出发合理设计校准曲线。根据一组实验点绘制校准曲线所遵循的原则是最小二乘原理，即要让实验点随机地分布在校正曲线的周围，并有尽可能多的实验点落在标准曲线上，使得由这些实验点绘制的标准曲线的标准偏差最小。从校准曲线的置信范围考虑，当实验点数目，<4时，置信系数较大且变化速率较快，置信范围较宽，由校正

标准曲线的制作

标准曲线的制作(附甲醛标液工作曲线图)： 精确吸取上述甲醛标液（S2）：0.00，0.20，0.50，1.00，1.50，2.00 ml，分别置于50ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，再分别吸取上述浓度溶液5.0ml于25ml比色管中，然后加入5.0ml乙酰丙酮溶液，摇匀，置40℃水浴中显色30min，以零管液为参比，于412nm处测吸光度，以吸取甲醛标液（S2）的体积为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制工作曲线。[2] 本法的优点： ①仅用1.00，5.00的环标刻度移液管吸取甲醛标液（S2）、50ml容量瓶定容，相当于国标中吸取甲醛标液（S2）的体积、定容的体积同时缩小10倍，但浓度相当；减少了由于不同刻度单标移液管之间的系统误差。 ②用吸取甲醛标液（S2）的体积ml数为横坐标，便于作图计算（计算方法见四、结果计算），提高了准确度和精确度。 甲醛标液工作曲线图 仪器名称：722N 可见分光光度计比色皿厚度：1.0cm 吸收波长：λ＝412nm HCHO标液浓度：C＝82.5600μg/mL 序号 1 2 3 4 5 6 吸取标液V，ml 0.00 0.20 0.50 1.00 1.50 2.00 吸光度，A 0.000 0.014 0.031 0.056 0.091 0.123 三、样品的测定： 各吸取处理好的三个平行样品液5.0ml，加5.0ml乙酰丙酮溶液，摇匀，按标准曲线同样操作进行比色测定，测得吸光度A。[2] 如果样品褪色，则用水作参比液，吸取样品液5.0ml，加5.0ml水，摇匀，进行比色测定，测得吸光度Ad，则样品的吸光度为A－Ad。 四、结果计算： 由样品的吸光值A从甲醛标准曲线上查得相当于样品的体积V（ml），再换算成样品的浓度C（μg/mL）＝V×C（S2）/50 ，则甲醛的含量F计算公式如下： F＝C(S2) ×V ×100 50 m F–从织物样品中萃取的甲醛含量，mg/kg； C(S2)–甲醛标准溶液S2的浓度，μg/mL，即：mg/kg； V–读自工作曲线上相当于样品萃取的液中甲醛的体积，ml（因为吸取标液 的体积与浓度反映在工作曲线上，是一一对应的，样品也同理）； 100–萃取样品用水的体积，ml； 50–制作标准曲线时，吸取甲醛标准溶液S2定容的体积，ml； m–试样的质量，g 。 五、其它注意事项： ①定期校正标准工作曲线，因为过一段时间，吸光度会偏低，从而影响结果的准确性。 ②每次检测时，应保持条件的一致性，连贯性。

标准曲线绘制方法

ELISA的标准曲线一般使用专门的曲线拟合工具，如：Curve Exert1.3 下面以Curve Exert1.3为例说明怎么样制作： 1 启动“Curve Expert1.3” 2 X轴输入标准品的OD值，Y轴输入所对应的浓度值，如图： 2 X轴输入标准品的OD值，Y轴输入所对应的浓度值，如图： 3．单击[运行] 按钮，出现如下对话框 4．单击[ok]按钮，出现如下两个对话框，关闭下面一个对话框

关闭下面一个对话框 5. 在对话框的右上角出现一些曲线的名称，从“1”开始依次点击曲线名称，在右下角会出现相应拟合的曲线，。

根据拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击，出现如下对话框：注意：选择系数（即“r”值）最好的曲线方程来进行运算。在下面的对话框右上角有“r”值，当“r”值越接近1拟合度越好 7．按[Ctrl]键[L]键，出现如下对话框：

8．输入标准的OD值，单击[Calculate]按忸，即可得到待测蛋白的实际含量。（标本稀释了N倍，运算出的数值应在成以N）。 9. 如想得到ELISA拟合曲线的方程，可在步骤6的对话框空白处右击，选择”Information” 10. 得到如下对话框：点击“Copy” 在你需要的位置粘贴即可得到如下数据： Rational Function: y=(a bx)/(1 cx dx^2) Coefficient Data: a = b = c = d =

当抗原或抗体浓度过高时，对应的ELISA读数不会再显著升高，这时会达到一个平台期，同样在低浓度时也有一个平台期。只有在适当的浓度时才会出现类似直线的曲线，所以一般数据都要进行多参数拟和，才能得到能更准确反映实验结果的曲线，常用的有sigmoid、logistic曲线等，一半的软件如sigmaplot 或origin 都有这个功能

荧光定量PCR之绝对定量分析——标准曲线的绘制

荧光定量PCR之绝对定量分析——标准曲线的绘制 1. 绝对定量定义 绝对定量是用已知浓度的标准品绘制标准曲线来推算未知样品的量。 将标准品稀释至不同浓度，作为模板进行PCR反应。以标准品拷贝数的对数值为横坐标，以测得的CT值为纵坐标，绘制标准曲线，对未知样品进行定量时，根据未知样品的CT值，即可在标准曲线中得到样品的拷贝数。 * Log(起始浓度)与循环数呈线性关系，通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，即得到该扩增反应存在的线性关系 * 由样品CT值，就可以计算出样品中所含的模板量 2. 绝对定量标准品 标准品的一些标准 * 必须用与扩增目的基因相同的引物进行扩增，并且扩增效率相同 * 标准品必须是经过准确定量的（我们通常用的是ASP-3700紫外光/可见光微量分光光度计） * 标准品必须是标准化的（例如，同一化的细胞数） * 在每组实验时，必须用相同的阈值设定来确定CT值 标准品可以是含有目的基因的线性化的质粒DNA，也可以是比扩增片段长的纯化后的PCR产物，当然也可以是基因组DNA，甚至cDNA，但前提是所有的作为标准品的核酸都必须保证稳定。 3. 标准品的制备

一般一条标准曲线取四到五个点，浓度范围要能覆盖样品的浓度区间，以保证定量的准确性。一般一个点重复三至五次，对于常期稳定使用的标准品可以适当减少重复的次数。 倍比梯度稀释方法： 1v原液（标准品i）+9v稀释缓冲液，得标准品ii 1v标准品ii+9v稀释缓冲液，得标准品iii 1v标准品iii+9v稀释缓冲液，得标准品iv 1v标准品iv+9v稀释缓冲液，得标准品v 依次倍比稀释 拷贝数的计算：详见核酸拷贝数的计算 4. 实例 标准品的制作：将标准品依次进行10倍稀释，ASP-3700 测得其拷贝数1.55×108copy /ul 标准曲线的绘制（1cycle=1min） 设置对照：浓度为1.55×107、1.55×106、1.55×105、1.55×104、1.55×103、1.55×102、1.55×101的标准样品各一个，设空白对照 PCR反应：以不同浓度标准品作为模板 标准品的扩增曲线