海洋微生物学作业

海洋微生物抗肿瘤活性物质

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摘要：海洋多变复杂的环境导致了海洋微生物的多样性。海洋微生物因其具有产生新型生物活性产物的巨大潜力，已受到全世界海洋研究人员的重视。近年来，从海洋微生物中已分离到许多结构新颖的抗肿瘤活性物质。其中有的已进入临床试验，显示了良好的研究开发前景。

Abstract: The changeable and complex environment of the ocean leads to diversity of marine microorganism. Marine microorganisms have been proved to be potential in producing novel bioactive substances. Marine-derived microorganisms are rich sources of bioactive compounds and thus they receive extensive attention from marine researchers. In recent years many new structurally-unique anti-tumor compounds have been isolated from marine-derived microorganisms, and some of them have been in clinical trials and showed better development prospects.

关键词：海洋微生物抗肿瘤活性物质筛选方法研究模型

Key words: marine-derived microorganisms; antitumor; bioactive substance; Method of screener; research model;

一、海洋微生物

1.海洋微生物研究意义

海洋环境的特殊性(高压、高盐、低温、低光照、寡营养等)使海洋微生物具有丰富的生物多样性、独特的代谢方式和很强的再生、防御和识别能力。海洋微生物能产生一些结构新颖、活性特异的次级代谢产物以适应周围极端的生存环境。近几年，已有近万种新的海洋天然产物被发现，这些海洋天然产物具有抗癌、消炎、抗氧化、免疫调节等活性，已成为当今世界药物研发的热点，有的药物已进入临床实验阶段或已进入临床，并取得了丰硕的成果。

2.抗肿瘤活性物质

肿瘤是现代社会威胁人类健康的重要疾病。多年来，各国学者致力于寻取新型、高效、低毒的抗肿瘤化合物。对海洋微生物次级代谢产物中具有抗肿瘤活性的有关研究表明，醚类、大环内酷类、菇类、含氮杂环类、肤类、酞胺类及醌类化合物均具有良好的抗肿瘤活性。

二、海洋抗肿瘤活性物质的分类（450）

1.海洋放线菌的抗肿瘤活性物质（150）

海洋放线菌的生活环境十分特殊，如高盐、高压、低营养、低温等。在这些生命的极限环境，海洋放线菌已发展出独特的代谢方式，同时提供了产生独特的生物活性物质的潜力。例如，中国海洋大学药物与食品研究所、军事医学科学院毒物药物研究所的科研人员对海洋放线菌S1001发酵产物进行了分离和研究，并用理化手段综合分析了其中的抗肿瘤活性成分，取得了较为满意的结果。近年来，研究者从海洋放线菌中分离出的主要抗肿瘤活性物质，见表1。

2.海洋真菌的抗肿瘤活性物质（150）

海洋真菌是海洋微生物的一个主要分支。目前，从海洋真菌中分离出近300种具有抗菌、抗肿瘤及抗病毒等生物活性的新化合物，其具有结构新颖、作用独特等特点。研究者从海洋真菌中分离出的主要抗肿瘤活性物质，见表2。

3.海洋细菌的抗肿瘤活性物质（150）

海洋细菌大都是从海洋沉积物、海水、海藻、海洋动物体表等分离获得，其代谢产物多具有抗肿瘤活性，是海洋微生物抗肿瘤活性物质的一个重要来源。例如，日本冈见分离到一株黄杆菌属的海洋细菌代谢产生杂多糖Marlnactan，能够增强免疫功能和抑制动物移植肿瘤，并成为化疗药物治疗肿瘤的佐剂。Custafso等从海洋细菌中分离到大环内酯类化合物Macro—lacfins24元内酯环、吡喃型葡萄糖和一个开链的酸构成，其中rmcrolactinA组分是一种配糖体母体，具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌等功能。主要抗肿瘤活性物质，见表3。

三、海洋抗肿瘤活性物质作用机理（200）

1. 海洋生物活性物质的抗肿瘤作用机制

海洋生物活性物质的抗肿瘤作用机制呈多样性，包括:干扰肿瘤细胞有丝分裂和微管聚合，直接杀伤肿瘤细胞;抑制蛋白质合成;调节蛋白激酶C的合成;抑制肿瘤新生血管形成增强机体自身防御体系;诱导白细胞介素一2、肿瘤坏死因子、干扰素分泌。科学家多在以上机制的基础上研发各种抗肿瘤药物。

2.海洋微生物多糖抗肿瘤的作用机制

（1）调控细胞周期及相关蛋白质合成，进而抑制肿瘤细胞增殖，诱导癌细胞分化，促使癌细胞死亡

（2）通过增强机体抗氧化、清除自由基作用抑制肿瘤细胞增殖。

肿瘤细胞恶性增殖将导致细胞内活性氧的不断增多或者细胞清除活性氧的能力直线下降，通常表现为患者体内的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性急剧下降，而刺激细胞发生癌变的重要诱因是活性氧所引起的细胞氧化性损伤，因此海洋微生物多糖可清除自由基并且增强机体抗氧化作用，达到抗肿瘤的目的。

（3）其抗突变、抗遗传损伤的作用可有效抑制肿瘤细胞增殖。

目前多数细胞恶性肿瘤是由辐射引起的，在辐射强烈或持久的环境下细胞内的DNA易发生变异，细胞的调控机制不能正常识别和发挥。而海洋微生物多糖大都具有抗辐射、抗突变的作用，进而产生一定的抗肿瘤作用。

（4）海洋微生物多糖还具有促进肿瘤细胞凋亡的作用，对肿瘤细胞有直接杀伤力。

四、海洋抗肿瘤活性物质的筛选、分离和提取（1100）

1.海洋抗肿瘤活性物质的筛选

海洋微生物次级代谢产物种类繁多，如果要从中寻找到对癌症治疗有效的化合物，就需要建立对癌症病症模拟真实的高效药物筛选模型。抗肿瘤药物初筛主要应用的是体外筛选模型。

（1）高通量筛选模型

大规模、自动化筛选或称高通量筛选(high-Lhrough pul screening,HTS)模型是一套有效的快速培养筛选方法，是选取包括生命中发挥重要作用的受体、酶、离子通道和核酸等生物分子，以及与细胞增殖和分化有关的信号传递系统和癌基因表达系统作为靶点，是用机器人在培养板上进行样品的取样、分装、测试等操作，是一种规模化、自动化、精确、有

效的现代化筛选方法。该方法每天可以处理几百到几千个样品.样品越多越能体现其优点。

例如美国Cyanamid公司的研究人员运用独特分子筛选技术，对从世界各地采集的海洋微生物进行测试，以找到有抗菌、抗病毒或抗癌征兆或作为治疗心血管、神经系统疾病苗头的药物。

（2）微生物模型

此方法多用于海洋微生物中抗肿瘤物质的筛选。BIA筛选法是利用遗传学方法构建的一株具有γ—lacZ片段的溶源性E. coli为指示菌株，该菌株在正常条件下不产生β—半乳糖苷酶，但当培养介质中含有能作用于DNA的化合物时，菌株就会被诱导产生β—半乳糖苷酶。因此，通过检测是否有β—半乳糖苷酶产生就可初步确定样品中是否含有能够作用于肿瘤细胞DNA的物质。不少天然抗肿瘤活性药物能使肿瘤细胞DNA受损伤起作用，因此，利用BIA法来检测天然产物中是否具有这种作用机制的抗肿瘤活性物质较为简便、快速而且特异性也较高。

（3）体外细胞毒试验模型

体外细胞毒试验是通过检测离体培养细胞加样后的存活率，来确定样品活性程度的一种活性筛选方法。主要有四唑盐比色法、磺酞罗丹明B比色法和染料排斥法等。

四唑盐比色法原理是基于四唑盐(商品名噻唑蓝，简称MTT)可被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原为难溶的蓝紫色结晶物(formazan , FMZ )，而死细胞没有这种能力。沉积在活细胞中的FMZ用二甲亚矾(DMSO)溶解后，溶液呈现的颜色深浅与FMZ含量成正比，再用酶标仪测定OD492，可间接反映活细胞数量。通过进一步分析就可以知道细胞存活率(或死亡率)为50%时的半抑制浓度，从而作为细胞毒检测的指标。

一般情况下所说的细胞毒试验也就是指MTT比色法。该方法灵敏度高、重复性好、操作简便，口前已广泛应用于大规模的抗肿瘤药物筛选。

（4）抗稻瘟霉孢子法

稻瘟霉是一种植物病原菌，属于多细胞丝状真菌。以孢子出芽方式繁殖，在环境适合条件下，由孢子长出芽管，逐渐延长成菌丝。稻瘟霉属真核微生物，它具有细胞壁及细胞核等真核细胞的特征。

大量的抗肿瘤化合物有明显的致稻瘟霉菌丝体弯曲作用或抑制稻瘟霉分生孢子生长的作用，说明化合物使稻瘟霉生长抑制和产生形态上的变化与抗肿瘤活性之间存在一定的相关性，为利用稻瘟霉这一模型筛选抗肿瘤活性菌株提供了一定的试验依据。这种模型虽不能替代肿瘤细胞毒试验，但较为迅速，不需贵重设备，在化合物初筛，提取物的活胜追踪分离或不具备条件而要筛选大量样品时非常适用。

（5）针对作用机制设计的模型

随着基因工程学科的发展，人们对细胞增殖、分化和恶性转化的分子机理，尤其是对癌基因和抗癌基因的蛋白产物参与肿瘤细胞中的信号传导途径及诱导肿瘤细胞凋亡的认识不断深入，许多大型制药公司建立了以作用机制为基础的筛选模型(mechanism-based assay)。

这些模型是以人类疾病发生生化过程中的相关酶或受体为分子靶标来设计的，被认为是与人类疾病相关性较好的模型。将针对机理的筛选方法与针对疾病的体外人类肿瘤细胞株系的筛选方法相结合起来，不仅可以寻找抗癌的细胞毒药物，而且可以寻找到癌细胞分化及细胞凋亡诱导剂、生物反应调节剂和癌化学预防药物等，大大地拓展了抗癌药物的研究开发领域。

（6）其他筛选模型

还有一些快速简便的筛选生物活性的鉴定系统，包括海胆卵、海虾毒性生物鉴定。其中，海胆卵鉴定方法是在海胆卵受精后5 min内加入样品，对照组出现第1个卵孵化的时间为2h后，如果样品浓度为16 g/mL或更低能抑制80％—100%的受精卵孵化，则表示有一定活胜。该方法鉴定结果可能为细胞毒性，需进一步用其他筛选模型验证。

2.海洋抗肿瘤活性物质的分离和提取

海洋微生物产生的天然代谢产物具有结构复杂、多样性、高生物活性等突出特点。因此海洋生物活性物质的筛选、提取、纯化是一项十分困难的工作，用传统的化学方法难以实现，近年来，新的分离技术已经发展起来

（1）萃取技术

传统的萃取技术已经不适用于抗肿瘤活性物质的分离，近年来，一些新的萃取技术显示了良好的应用前景。比如超临界流体萃取技术和反胶束萃取技术。

超临界流体萃取技术：超临界流体萃取技术是以超临界状态下的流体为溶剂，利用该状态下的流体所具有的高渗透能力和高溶解能力分离混合物的过程。最常用的超临界流体二氧化碳，己经被广泛使用。

（2）膜分离技术

膜分离是用天然或人工合成的高分子薄膜以外界能量或化学位差为推动力，对双组分或多组分的溶质进行分离、分级、提纯和浓缩的过程。膜分离过程是一项有效、节能、无污染、保持原料性能不变的物质分离技术。近年来，微滤、超滤、反渗透、纳滤和亲和—膜过滤等各种膜分离技术发展迅速，在天然活性物质的提取和海洋药物的研制中更显现出其技术优势。

（3）色谱方法

海洋微生物活性成分多而结构复杂，有效成分的分离、纯化很困难，而色谱分离技术则是这类物质精细分离的有效手段。主要包括也液相色谱、高速逆流色谱和超临界流体色谱。

液相色谱：液相色谱法作为一种分离手段，是根据混合物种不同组分在流动相和固定相间具有不同的分配系数，当两相做相对运动时，这些组分在两项间进行反复多次的分配，从而得到分离。主要包括、吸附色谱、分配色谱、离子色谱、体积排阻色谱、亲和色谱等。

超临界流体色谱：超临界流体色谱以超临界流体为流动相，超临界流体色谱具有气相色谱和高效液相色谱的优点，在室温下即可分离热不稳定性、沸点较高或分子量较大的物质，同时还具有柱效高、分离速度快的特点，可用通用的灵敏检测器。

五、海洋抗肿瘤活性物质产业化

1.存在的问题

对于筛选到的含有活性物质的微生物，还存在有效成分含量低、难分泌到胞外、培养生物量低、培养难度大等问题，这都限制了海洋微生物天然活性物质生产的工业化和临床应用。采用现代生物技术是最好的解决途径。利用基因工程、细胞工程、蛋白质工程和发酵工程等，从多方面解决海洋抗肿瘤药物研制中遇到的难题。

2.解决方法

例如，利用基因工程对原微生物菌株的改良或将天然活性物质的基因克隆到其他易于培养、生长繁殖迅速或代谢物易分泌到胞外的微生物，以提高天然活性物质的含量和产量，大大降低生产成本。

利用海洋微生物的培养与发酵技术的研究。利用微生物发酵技术的成熟工艺、后处理工艺、分离纯化技术及高度自动化生物反应器等实现海洋微生物天然活性物质生产的工业化并不断降低生产成本，加速从研究开发到产品化的过程。

六、结语

海洋微生物的抗肿瘤活性产物研究是一个被广为关注和方兴未艾的研究领域，新化合物或其他新发现的数量越来越多，论文报道渠道也越来越扩展，新信息量与日俱增，新知识日趋丰富。近年来，海洋微生物中抗肿瘤活性物质和海洋药物方面的研究取得了较大进展，发现了许多具有显著生物活性的新型化合物，其中一些还具有较好的药用前景。随着生物技术的发展和海洋微生物资源开发利用的进一步深入，预计未来定会实现海洋微生物活性次级代谢产物的规模化生产，使海洋微生物成为开发新药的重要来源。我们应该充分利用我国海洋微生物的资源优势，研究开发具有我国自主知识产权的海洋微生物天然产物，不仅具有必要性，而且具有美好的产业化前景。

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微生物在海洋中的作用

论微生物在海洋中的作用 作者：周浩王璐 中文摘要： 21世纪人类社会面临“人口剧增、资源匮乏、环境恶化”三大问题的严峻挑战，随着陆地资源的日趋减少，开发海洋，向海洋索取资源，尤其是海洋微生物资源越来越受到人们关注。本文将从海洋微生物多样性、海洋药物及保健功能的生物活性物质、海洋极端酶、海洋微生物在消除海洋污染物等方面给予介绍。 中文关键词： 海洋微生物资源生物药物资源 前言 洋中生活许许多多各种各样的微生物，它们是以单细胞或以群体形式存在，能独立生活的生物，包括病毒、细菌、真菌、单细胞藻类及原生动物等等。但按狭意所指仅为病毒、细菌和真菌等。目前研究较多的是细菌。微生物体积大多非常微，需在显微镜下才能看见。如海洋微生物，它的直经大多仅为几个微米到零点几个微米。海洋微生物种类繁多，数量颇大。如胶州湾每毫升海水中生活着几百个，多至几千万个细菌。它们对我们生活及工农业生产有着极为密切的关系。 浩瀚的海洋是地球上生命的摇篮，它覆盖着地球表面积海水总体积占地球总水量的70%，海洋中生物资源极为丰富，生物活性物质种类繁多，已引起世界各国的重视，仅在过去10年中有近5000种新的海洋天然产物被发现。大多数都分离自海洋微生物,且许多是陆地生物所没有的，显示出巨大开发潜力，因此，海洋微生物资源研究已成为海洋资源研究的重要内容之一。 正文 1海洋微生物的生物多样性 海洋是一个十分独特的生态环境，包罗了高盐、高压、低温、尤其是深海低光照、寡营养等特点，还有无光照以及局部高温的极端环境，来自海洋的微生物大部分都是适应了极端环境的极端微生物，据估计海洋微生物可达0.1~2亿种，已发现的类群主要包括病毒、古菌细菌、粘细菌、微藻、真菌，海洋微生物的物种多样性决定了其代谢产物多样性，海洋环境是新型生物活性物质的源泉 2海洋微生物药物资源

农业微生物学复习试题答案及解析

一、填空题 1. 细菌个体的基本形态有（球状）、（杆状）和（螺旋状）三大类型。 2. 鞭毛的类型主要有三种，即（单生鞭毛）、（丛生鞭毛）和（周生鞭毛）。 3. 从应用角度，把真菌分为（霉菌）、（酵母菌）、（蕈菌）三类。 4. 微生物种群之间的相互关系有（共生关系）、（拮抗关系）、（互生关系）、（竞争关系）、（寄生关系）、（猎食关系）。 5. 微生物吸收营养物质的过程主要有（单纯扩散）、（促进扩散）、（主动运输）、（基团转位）等4种方式。 6. 真菌菌丝体形成各种特化结构，主要有（假根）、（吸器）、（菌核）、（菌环）等。 7. 病毒感染宿主细胞进行增殖的过程分为（吸附）、（侵入）、（复制）、（聚集）、（装配）等步骤。 8. 纤维素酶分为（C1酶）、（Cx酶）、（β—葡萄糖苷酶）等3类。 9. 无隔膜菌丝产生（孢囊孢子），有隔膜菌丝产生（分生孢子）。 10. 土壤中微生物数量多少一般规律是：（细菌）＞（放线菌）＞（真菌）＞（藻类、原生动物）。 11. 真菌的有性孢子分为4种，即：（卵孢子）、（接合孢子）、（子囊孢子）、（担孢子）。 12. 培养基的类型按成分不同划分成（天然培养基）、（合成培养基）、（半合成培养基）三大类。 13. 霉菌菌丝从功能上划分有：（营养菌丝）、（气生菌丝）和（繁殖

菌丝）。 14. 病毒的结构主要有（衣壳粒）、（衣壳）、（核髓）、（核衣壳）。16. 土壤中微生物的数量及分布受（土壤类型）、（深度）和（季节）的影响。 17. 细菌的生长曲线可以划分为（延迟期）、（对树生长期）、（稳定期）、（衰亡期）等4个时期。 18. 微生物的营养物质根据生理作用划分为：（碳源）、（氮源）、（能源）、（无机盐）、（生长因子）、（水）等六大类。 19. 原核生物的三菌是指（细菌）、（放线菌）和（蓝细菌）。 20. 放线菌的繁殖方式有：（无性孢子）和（菌丝断裂）。 21. 通常根据宿主范围将病毒分为（动物病毒）、（植物病毒）与（微生物病毒）。 22. 微生物的特点有：（形态微小、结构简单）、（分布广、种类多）、（生长繁殖快）、（代谢能力强）、（易发生变异）。 21. 放线菌为分枝状细菌，宽度和（细菌）类似，但（长度）和（分支）则是无限制的。 22. 杀虫真菌侵入寄主的过程有：（附着）、（萌发）、（侵入）、（增殖）等4个过程。 23. 根据产物的不同，乳酸发酵有三种类型：（同型乳酸发酵）、（异性乳酸发酵）和（双歧杆菌乳酸发酵）。 24. 微生物细胞化学组成中（C）、（H）、（O）、（N）、（P）、（S）等6种元素占菌体细胞干重的97%。

微生物学作业

微生物学作业（华师生科院06函授07号李文勇） 第一章绪论 1、什么是微生物？微生物有哪些特点？ 人们把那些形体微小（<0.1mm），结构简单，在适宜环境下能生长繁殖及发生遗传变异，用肉眼难以看到，必须借助光学显微镜或电子显微镜才能看清的低等微小生物统称为微生物。微生物有6大特点：微生物的比表面积大、转化能力强、繁殖速度快、易变异、适应性强、分布广。 第二章原核微生物 1、名词解释 原核微生物：指核质和细胞质之间不存在明显核膜，其染色体由单一核酸组成的一类微生物。肽聚糖：由两种糖衍生物，N-乙酰葡糖胺（G）和N-乙酰胞壁酸（M），以及短胎所组成。溶菌酶：又称N-乙酰胞壁酸酶。它专攻击聚糖链中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡糖胺之间的β-1,4糖苷键而使细胞壁解体 核区：细菌菌体中央大量遗传物质（DNA）所在的区域。无核膜核仁，由一环状DNA分子高度缠绕而成。 质粒：质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。 荚膜：某些细菌在细胞壁外包围的一层粘液性物质。 粘液层：荚膜的类型，量大，而且与细胞表面的结合比较松散，没有明显边界，常扩散到培养基中。 菌落：单个微生物在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度；形成肉眼可见有一定形态结构的子细胞的群落。 2、根据革兰氏阳性与革兰氏阴性细菌细胞壁通透性来说明革兰氏染色的机制。 革兰氏染色法，主要过程为：结晶紫初染，碘液媒染，95%乙醇脱色，再以沙黄等红色燃料复染。染色结果为：革兰氏阳性菌被染成紫色，革兰氏阴性菌被染成浅红色。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前二步结果是一样的，但在G＋细胞中，乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水，导致孔隙变小，由于结晶紫和碘的复合物分子太大，不能通过细胞壁，保持着紫色。在G—细胞中，乙醇处理不但破坏了胞壁外膜，还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜，于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来，当再用衬托的染色液复染时，显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞，但被紫色盖没，红色显示不出来。 3、什么是芽胞？它在什么时候形成？试从其特殊的结构与成分说明芽孢的抗逆性。 芽胞杆菌生长到后期，在其菌体内形成厚壁、折光性强、具抗逆性的孢子称为芽孢。芽胞是代谢活性很低，对干燥、热、化学药物和辐射等具有高度抗性的休眠体。究表明芽孢对不良环境因子的抗性主要由于其含水量低（40％）。且含有耐热的小分子酶类，富含大量特殊的吡啶二羧酸钙和带有二硫键的蛋白质，以及具有多层次厚而致密的芽孢壁等原因。 第三章真核微生物 1、名词解释 真核微生物：具有真正细胞核，具有核膜与核仁分化的较高等的微生物。 真菌：真核微生物，有细胞壁没光合色素，寄生或腐生生活，靠渗透作用吸取营养。 酵母菌：真核单细胞生物。体呈圆形、卵形或椭圆形，内有细胞核、液泡和颗粒体物质。通常以出芽繁殖；有的能进行二等分分裂；有的种类能产生子囊孢子。 霉菌：霉菌是丝状真菌的俗称

2014年广东海洋大学814食品微生物学考研真题(A卷)圣才出品

2014年广东海洋大学806食品微生物学考研真题 （请将答案写在答题纸上，写在试卷上不给分。本科目满分150分） 一、填空题（16×1＝16分） 1．病毒是主要是由______及______组成的非细胞类生物。（2分） 2．微生物的营养物质运输方式有______、______、______和______四种。（4分）3．微生物与生物环境间的相互关系有______、______、______、______和捕食。（4分）4．次级代谢常见的产物有______、______和______等。（3分） 5．免疫系统是由有______、______和______三部分组成。（3分） 二、单项选择题（18×1＝18分） 1．第一个发明微生物纯培养技术的科学家是（）。 A．列文虎克 B．巴斯德 C．柯赫 D．华特逊

2．酵母菌主要生长在（）。 A．极端环境 B．中性环境 C．含糖高环境 D．碱性环境 3．下列（）不是真菌菌丝的特化结构。 A．吸器 B．菌网 C．附着枝 D．羧酶体 4．灭菌是指杀死物品上的（）。 A．病原微生物 B．腐败菌 C．全部营养体 D．所有微生物 5．砂土管法保藏菌种主要利用了（）因素来进行菌种保藏。A．干燥 B．低温

C．缺氧 D．营养 6．下列（）方法适用于活菌数的计数。 A．平板计数法 B．血球计数法 C．比浊法 D．DNA含量测定法 7．绝大数微生物是（）的微生物。 A．光能自养型 B．光能异养型 C．化能自养型 D．化能异养型 8．下列（）不是化能自养菌的生物氧化和产能方式。A．氢的氧化 B．葡萄糖氧化 C．硫的氧化 D．氨的氧化 9．下列水体中微生物数量最多的是（）。

农业微生物学作业题参考答案

农业微生物学作业题参考答案 作业题一参考答案 一、名词解释（20分） 生长曲线：在分批培养中，以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，就可以画出一条有规律的曲线，这就是微生物的典型生长曲线。 氨化作用：就是微生物将有机氮化物转化成氨的过程。 培养基：培养基是一种人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质 拮抗作用：由某种微生物的生长而引起的其他条件改变抑制或杀死他种生物的现象。 菌落：微生物在固体培养基上局限一处大量繁殖，形成肉眼可见的群体，即称为菌落。 朊病毒：朊病毒在电子显微镜下呈杆状颗粒、直径26nm，长100～200nm(一般为125～150nm)。 生物固氮：生物固氮是指分子氮通过固氮微生物固氮酶系的催化而形成氨的过程。 衣原体：衣原体是一类在真核细胞内营专性能量寄生的小型革兰氏阴性原核生物。 根瘤：是根瘤细菌与豆科植物的共生在植物根部共生发育形成的特殊结构。 互生作用：一种微生物的生命活动可以创造或改善另一种微生物生活条件，彼此促进生长。 二、填空（20分） 1. 细菌的基本形态有球状、杆状、螺旋状 2. 放线菌的菌丝有营养菌丝、气生菌丝、孢子丝 3. 霉菌的无性孢子有节孢子、胞囊孢子、分生孢子、厚垣孢子 4. 微生物的呼吸类型有有氧呼吸、无氧呼吸、兼性呼吸 5. 地衣是蓝细菌和真菌的共生体。 6. 常用的微生物杀虫剂包括细菌、真菌、病毒 7. 根据固氮微生物与高等植物间关系，可以把固氮作用分为自生、共生、联合 三、简答题（30分） 1、举例说明微生物多样性和环境适应性及其用于农业生产中的实例 五个共性对人类来说是既有利又有弊的。我们学习微生物学的目的在于能兴利除弊、趋利避害。人类利用微生物(还可包括单细胞化的动、植物)的潜力是无穷的。通过本课程的学习，要使自己努力达到能在细胞、分子和群体水平上认识微生物的生命活动规律，并设法联系生产实际，为进一步开发、利用或改善有益微生物，控制、消灭或改造有害微生物打好坚实的基础。 2.简述温度对微生物的影响 ⑴低温对微生物的影响 大多数微生物对低温具有很强的抵抗力，当微生物所处环境的温度降低到生长最低温度以下时，微生物的新陈代谢活动逐渐降低，最后处以停滞状态，但微生物仍能维持较长的生命，当温度恢复到该微生物最适生长温度时，又开始正常的生长繁殖。所以可以采用低温保藏菌种，用冷藏方法保藏食品，以期限制其中的微生物活力，防止腐败。 ⑵高温对微生物的影响 高温可以死微生物，主要是由于它使微生物的蛋白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破坏。所以可以采用高温进行灭菌和消毒。 3.简述革兰氏染色方法及其机理 革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密，在用乙醇洗脱时，肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，再加上它基本上不含类脂，故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙，因此，结晶紫与碘复合物仍能牢牢阻留在其细胞壁内，使其呈现紫色。反之，革兰氏阴性细菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联松散，故遇乙醇后，肽聚糖网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇把类脂溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝隙，这样，结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁，因此，通过乙醇脱色后，细胞又呈无色。这时，再经番红等红色染料进行复染，就使革兰氏阴性细菌出现红色，而革兰氏阳性菌则仍呈紫色。 四、论述题（30分） 1.论述氮素循环途径及微生物在氮素循环中的作用

微生物学课后习题及答案

第一章 一.微生物有哪些主要类群？有哪些特点？ 答：类群：1.真核细胞型；2.原核细胞型：细菌，放线菌，衣原体，支原体，立克次式体； 3.非细胞型：病毒。 特点：1.体小，面积大 2.吸收多，转化快3.生长旺，繁殖快4.分布广，种类多 5.适应强，易变异二.你认为现代微生物学的发展有哪些趋势？ 答：研究领域有制药、治理环境污染等，微生物的基因科学，微生物病毒学，现代微生物学已发展出很多的分支学科，如病毒学，微生物基因组学，应用微生物（生物农药，浸矿微生物等），病源微生物（主要指细菌），海洋微生物，古细菌等，现代微生物学的研究主要集中在菌种的遗传背景，市场化应用等，食品微生物快速检测技术、食用菌的生产、功能性成分的提取等。 三.简述微生物与制药工程的关系。 答：1.人类除机械损伤外的疾病都是由微生物造成的 2.微生物又是人用来防治疾病的常用方法 3.微生物在自然环境中分布广泛来源很多 4.微生物的代谢产物相当多样，可用于生物制药 5.微生物和人之间的关系，涉及人、微生物、植物的协同进化 6.遗传学与生态学 名词对照： 古菌域：Archaea 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，古菌域为其中一大类别。（不确定）细菌域：bacteria 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，细菌域为其中一大类别。（不确定）真核生物域：Eukarya 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，真核生物域为其中一大类别。（不确定） 微生物：microorganism 是所有形态体积微小的单细胞或者个体结构简单的多细胞以及没有细胞结构的低等生物的通称。 第二章 一.比较下列各队名词 ①.原核微生物与真核微生物：原核微生物没有明显的细胞核，无核膜，核仁，无染色体，其细胞核为拟核，细胞内么有恒定的内膜系统，核糖体为70S型，大多为单细胞微生物。真核微生物有明显细胞核，有各种细胞器，核糖体为80S型。 ②.真细菌与古菌：相同点：以甲硫氨酸起始蛋白质的合成，核糖体对氯霉素不敏感，RNA聚合酶和真核细胞的相似，DNA具有内含子并结合组蛋白。 不同点：细胞膜中的脂质是不可皂化的，细胞壁不含肽聚糖等。 ③.原生质体与球形体：原生质体是脱去细胞壁的细胞，是由原生质分化而来，具体包括细胞膜和细胞质以及细胞器；球形体：指在螯合剂等存在的条件下用溶菌酶部分除去革兰氏阴性菌的细胞壁而形成的缺损型细胞。 ④.鞭毛、菌毛和性菌毛：鞭毛是一端连于细胞膜，一端游离的、细长的波形纤丝状物。菌毛为一些菌体表面的非鞭毛的细毛状物，菌毛是许多革兰氏阴性菌菌体表面遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属器。其化学组成是菌毛蛋白，菌毛与运动无关；性菌毛在少数革兰阴性菌，比普通菌毛略微稍粗，一个菌体只有1～4根，通常由质粒编码。带有性菌毛的细菌具有致育能力。 ⑤.芽孢与孢子：芽孢是有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。孢子是细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 二.比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构，并说明革兰氏染色的原理。

海洋微生物学作业

海洋微生物抗肿瘤活性物质 姓名： 班级：学号： 摘要：海洋多变复杂的环境导致了海洋微生物的多样性。海洋微生物因其具有产生新型生物活性产物的巨大潜力，已受到全世界海洋研究人员的重视。近年来，从海洋微生物中已分离到许多结构新颖的抗肿瘤活性物质。其中有的已进入临床试验，显示了良好的研究开发前景。 Abstract: The changeable and complex environment of the ocean leads to diversity of marine microorganism. Marine microorganisms have been proved to be potential in producing novel bioactive substances. Marine-derived microorganisms are rich sources of bioactive compounds and thus they receive extensive attention from marine researchers. In recent years many new structurally-unique anti-tumor compounds have been isolated from marine-derived microorganisms, and some of them have been in clinical trials and showed better development prospects. 关键词：海洋微生物抗肿瘤活性物质筛选方法研究模型 Key words: marine-derived microorganisms; antitumor; bioactive substance; Method of screener; research model; 一、海洋微生物 1.海洋微生物研究意义 海洋环境的特殊性(高压、高盐、低温、低光照、寡营养等)使海洋微生物具有丰富的生物多样性、独特的代谢方式和很强的再生、防御和识别能力。海洋微生物能产生一些结构新颖、活性特异的次级代谢产物以适应周围极端的生存环境。近几年，已有近万种新的海洋天然产物被发现，这些海洋天然产物具有抗癌、消炎、抗氧化、免疫调节等活性，已成为当今世界药物研发的热点，有的药物已进入临床实验阶段或已进入临床，并取得了丰硕的成果。 2.抗肿瘤活性物质 肿瘤是现代社会威胁人类健康的重要疾病。多年来，各国学者致力于寻取新型、高效、低毒的抗肿瘤化合物。对海洋微生物次级代谢产物中具有抗肿瘤活性的有关研究表明，醚类、大环内酷类、菇类、含氮杂环类、肤类、酞胺类及醌类化合物均具有良好的抗肿瘤活性。 二、海洋抗肿瘤活性物质的分类（450） 1.海洋放线菌的抗肿瘤活性物质（150） 海洋放线菌的生活环境十分特殊，如高盐、高压、低营养、低温等。在这些生命的极限环境，海洋放线菌已发展出独特的代谢方式，同时提供了产生独特的生物活性物质的潜力。例如，中国海洋大学药物与食品研究所、军事医学科学院毒物药物研究所的科研人员对海洋放线菌S1001发酵产物进行了分离和研究，并用理化手段综合分析了其中的抗肿瘤活性成分，取得了较为满意的结果。近年来，研究者从海洋放线菌中分离出的主要抗肿瘤活性物质，见表1。

农业微生物学本科19年12月作业考核-答案

《农业微生物学（本科）》19年12月作业考核 一、单选题(共20 道试题,共40 分) 1.酵母菌和运动发酵单胞菌乙醇发酵的区别是(??? )。 A.糖酵解途径不同 B.发酵底物不同 C.丙酮酸生成乙醛的机制不同 D.乙醛生成乙醇的机制不同 正确答案:A 2.将土壤接种在含放射性14C的葡萄糖培养基中,5天后检查,下列哪种情况证明土壤中有生命存在(???? )。 A.放射性土壤 B.放射性葡萄糖 C.放射性CO2 D.无放射性 正确答案:A 3.引起食物、工农业产品霉变或植物真菌病害的微生物是(????? )。 A.酵母菌 B.芽孢杆菌 C.霉菌 D.蓝细菌 正确答案:C 4.放线菌是抗生素的主要产生菌,许多著名常用的抗生素都是(??? )属的次生代谢产物。 A.链霉菌 B.小单孢菌 C.诺卡菌 D.放线菌 正确答案:A 5.(?? )能通过抑制叶酸合成而抑制细菌生长。 A.青霉素 B.磺胺类药物 C.四环素 D.以上所有 正确答案:B

6.属于病毒界的微生物是( ) A.放线菌 B.立克次氏体 C.噬菌体 D.藻类 正确答案:C 7.下列微生物中比较适合于干燥环境存在的是(???? )。 A.细菌 B.食用菌 C.放线菌 D.酵母菌 正确答案:C 8.在有机质过多的水稻田中,水稻会发生黑根烂根现象,这是由于( )引起的 A.反硝化作用 B.甲烷发酵 C.反硫化作用 D.硫化作用 正确答案:C 9.筛选高产蛋白酶的枯草芽孢杆菌突变株是利用下列什么方法(???? )。 A.随机筛选 B.根据菌落特征筛选 C.冷敏感菌筛选 D.梯度平板法 正确答案:B 10.生物在生态系统物质循环中扮演着重要作用,但不包括(???? )。 A.生产者 B.消费者 C.分解者 D.固定者 正确答案:D 11.高温杀菌法适用于淘汰下列哪一种营养缺陷型菌株(???? )。 A.放线菌 B.产芽孢细菌

农业微生物学试卷A及答案

东北农业大学成人教育学院考试题签 农业微生物学（A） 一、名词解释（每题5分，共20分） 1.L型细菌 2.质粒 3.荚膜 4.鞭毛 二、填空题（每空1分，共15分） 1. 细菌细胞的特殊结构包括、、、芽孢和纤毛。 2. 真菌的无性孢子有、、厚垣孢子和分身孢子。 3. 真菌的有性孢子有、、和担孢子。 4. 病毒的一般增殖过程包括、、和装配和释放。 5. 微生物对营养物质的吸收包括、、主动运输和基团转移。 三、判断题（每题2分，共20分） 1. 所有的细菌都具有荚膜。（） 2. 支原体是一类有细胞壁、能独立营养、已知最小的原核微生物。（） 3. 细菌的鞭毛和菌毛都是细菌的运动器官。（） 4. 酵母菌和霉菌是真菌分类学的名称。（） 5. 病毒具有独立的代谢能力。（） 6. 凡在同一菌丝体（同一菌系）上产生的不同性细胞能结合产生有性孢子的为异宗配合。（） 7. 有些病毒含有两种核酸即DNA和RNA。（）

8. 凡是微生物本身不能自行合成，但生命活动又不可缺少的、微量的特殊有机营养物，常称为生长因子。( ) 9. 寄生于原核微生物体内的病毒叫噬菌体。（） 10. 生长因素是指微生物生长不可缺少、本身又不能合成的微量有机物。 ( ) 四简答题（每题 9分，共 45 分） 1. 微生物的一般特点是什么？简要说明。 2. 巴斯德（Louis Pasteur）对微生物学的贡献主要有哪些？。 3. 柯赫（Robert Koch）法则包括的主要内容有哪些？它的意义何在。 4. 简单比较细菌、放线菌和霉菌的菌落形态特征。

5. 除膜泡运输外，比较另外四种营养物质进入细胞的运输方式的特点？

农业微生物学试卷B及答案

注：装订线内禁止答题，装订线外禁止有姓名和其他标记。 东北农业大学成人教育学院考试题签 农业微生物学（B） 一、名词解释（每题5分，共20分） 1.菌毛 2.芽胞 3.消毒： 4.灭菌： 二、填空题（每空1分，共15分） 1. 我国规定饮用水每毫升的菌数不超过个，每升饮用水中大肠菌群数不超过个。 2. 采用50~60℃温度处理产品一定时间，则可以达到防腐的目的，这是法国微生物学家发明的______________灭菌法。 3. 细菌的运动器官是，其具有抗逆性的休眠体是。 4. 真菌菌丝的变态主要包括四种类型：、、、和附着枝。 5. 细菌细胞的特殊结构包括、、芽孢、鞭毛、纤毛和糖被。 6. 病毒的对称包括、、复合对称和复杂对称。 7. 微生物的营养类型包、、和化能异养型。 三、判断题（每题2分，共30分） 1. 氨基酸的分解主要是通过脱羧作用和脱氨作用。（） 2. 细菌DNA分子有2个复制点，而真核生物染色体有多个复制点，彼此会完成DNA复制。（） 3. 一定时间内（一般10min）杀死微生物所需要的最高温度称为致死温度。（） 4. 准性生殖和有性生殖的区别在于前者是发生在重组体细胞，而后者性细胞的结合。（） 5. 大多数革兰氏阳性菌能产生外毒素，大多数革兰氏阴性菌产生内毒素。（） 6. 非特异性免疫是机体先天具有的正常生理防御机能，没有选择性。（）

注：装订线内禁止答题，装订线外禁止有姓名和其他标记。 7. 专性厌样养微生物也可以进行呼吸作用。（） 8. 朊病毒是一种只含RNA，不含蛋白质的病毒。( ) 9. 在微生物中，冷冻温度多指-18℃以下的温度。( ) 10. 有极少数消毒剂可以用作防腐剂。（） 11. 原核微生物一般有1个以上的复制起点。（） 12. 植物病原微生物对人类而言都是有害的。 ( ) 13. 立克次氏体是一类能独立营养、已知最小的原核微生物。（） 14. 细菌的荚膜具有保护菌体、贮藏养料、堆积某些代谢废物、作为主要表面抗原及是某些病原菌必须的粘附因子。 ( ) 15. 有性生殖和无性繁殖都有质配和核配阶段。( ) 四、简答题（每题7分,共35分） 1.革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁成分有何差异？ 2.病毒核酸可分哪几种类型？其复制以什么链为摸板。

农业微生物学复习题 答案

一、填空题 １. 细菌个体的基本形态有(球状）、（杆状）和(螺旋状）三大类型。2．鞭毛的类型主要有三种,即（单生鞭毛）、（丛生鞭毛）和(周生鞭毛）。 3. 从应用角度,把真菌分为(霉菌)、（酵母菌)、（蕈菌）三类。 4. 微生物种群之间的相互关系有(共生关系）、（拮抗关系)、（互生关系)、(竞争关系）、(寄生关系)、(猎食关系)。 5．微生物吸收营养物质的过程主要有(单纯扩散)、（促进扩散)、（主动运输)、(基团转位）等4种方式。 6. 真菌菌丝体形成各种特化结构,主要有(假根)、(吸器）、（菌核)、(菌环)等。 7．病毒感染宿主细胞进行增殖的过程分为（吸附）、(侵入）、（复制）、（聚集）、(装配)等步骤。 8．纤维素酶分为（Ｃ1酶）、(Ｃｘ酶)、(β—葡萄糖苷酶)等３类。９. 无隔膜菌丝产生(孢囊孢子),有隔膜菌丝产生（分生孢子)。10. 土壤中微生物数量多少一般规律是:（细菌)>（放线菌)>(真菌)＞（藻类、原生动物)。 11. 真菌的有性孢子分为４种,即:(卵孢子)、（接合孢子)、(子囊孢子）、(担孢子）。 12. 培养基的类型按成分不同划分成（天然培养基）、(合成培养基)、(半合成培养基）三大类。 13．霉菌菌丝从功能上划分有:（营养菌丝）、(气生菌丝)和(繁殖

菌丝）。 14. 病毒的结构主要有（衣壳粒）、(衣壳）、（核髓）、(核衣壳)。16. 土壤中微生物的数量及分布受(土壤类型）、(深度）和（季节）的影响。 17. 细菌的生长曲线可以划分为（延迟期)、（对树生长期)、(稳定期)、（衰亡期）等4个时期。 18. 微生物的营养物质根据生理作用划分为:（碳源)、(氮源）、(能源）、（无机盐)、(生长因子）、（水）等六大类。 １9. 原核生物的三菌是指（细菌)、（放线菌)和(蓝细菌）。 ２０. 放线菌的繁殖方式有：(无性孢子）和（菌丝断裂）。 21. 通常根据宿主范围将病毒分为(动物病毒）、（植物病毒)与（微生物病毒)。 22．微生物的特点有:(形态微小、结构简单)、(分布广、种类多）、(生长繁殖快）、（代谢能力强）、(易发生变异）。 ２1. 放线菌为分枝状细菌,宽度和（细菌）类似，但（长度)和(分支)则是无限制的。 22. 杀虫真菌侵入寄主的过程有：(附着)、(萌发）、（侵入）、（增殖）等４个过程。 ２３. 根据产物的不同,乳酸发酵有三种类型：(同型乳酸发酵)、(异性乳酸发酵）和(双歧杆菌乳酸发酵)。 2４. 微生物细胞化学组成中(C)、(H)、（Ｏ）、(N)、（P)、(S）等6种元素占菌体细胞干重的97%。

微生物学第10-11章作业

第十章传染与免疫 1简述宿主对病原菌的防御机制。 答：机体对侵入体内的病原微生物有固有免疫和适应性免疫两种应答方式。病原微生物感染与宿主的免疫状态密切相关，免疫力完全正常的宿主，固有性免疫应答足以将抵达病原微生物清除；而当感染趋向于慢性，或者宿主曾经被致敏，则适应性免疫应答迅速启动。 1.固有性免疫应答模式识别受体固有性免疫应答起始于免疫细胞表面模式识别受体对病原微生物的识别，通过分泌或膜结合受体对微生物进行识别是固有免疫系统的一个重要功能。识别微生物后，固有免疫系统释放杀微生物分子、细胞因子、趋化因子等。吞噬细胞通过膜表面多种受体与病原微生物结合来实现吞噬作用。宿主对真菌的免疫反应依赖于几类激发信号级联反应的跨膜受体。识别这些菌体可促进机体的保护性应答反应，包括对真菌的摄取及杀伤(通过呼吸爆发介导)，以及产生大量的细胞因子和趋化因子包括肿瘤坏死因子、白细胞介素1、白细胞介素6以及粒细胞一单核细胞集落刺激因子等。巨噬细胞许多研究表明，吞噬细胞的数量和功能的下降，是导致宿主对烟曲霉易感的主要因素。吞噬细胞在保护宿主免受烟曲霉感染方面起着重要作用。巨噬细胞作为吞噬细胞系统的一部分，构成了机体抵抗病原微生物侵袭的第一道防线。 2.在固有性免疫机能完好的情况下，T细胞抵抗病原微生物感染的作用是可以忽略的，只有在固有性免疫受损的宿主，适应性免疫应答的重要性才得以体现。目前，对两种类型细胞因子的调节研究较深入，Thl型细胞因子的产生伴随着细胞免疫为主的反应，Th2型细胞因子的产生则有助于以抗体为主的体液免疫。总的来说，抗真菌反应以细胞免疫为主，Thl型有利于对真菌感染的免疫防护。研究中发现，Th2型细胞因子，机体对病原微生物越不易感。对于Thl类细胞引起的保护性免疫反应的机制，目前有一个共识，即在识别病原微生物抗原之后，T细胞活化引起大量细胞因子的释放，增强巨噬细胞和中性粒细胞的杀伤功能。当病原微生物与T细胞、抗原呈递细胞、中性粒细胞共孵育时，对菌丝的杀伤要明显强于T细胞缺席时的效果。 2决定传染结局的三因素是什么简述三者的相互关系。 答：1 传染源，传播途径，易感人群； 2 传染源是作为传播的起点，没有传染源，就不会有传染病发生； 3 传播途径是病原体传播的媒介，没有这个媒介病原体就不会在传染源和健康人群中传播，比如通过血液传播，消化道传播、呼吸道传播等等。 关系：病原体和宿主免疫力是决定传染结局的关键因素。当病原体致病性弱、宿主的免疫力强时往往导致隐性传染；当病原体致病性强、宿主的免疫力弱时，往往导致显性传染。环境因素在传染中起着间接作用，良好的环境因素有助于增强宿主的免疫力，也有利于限制或切断病原体的传播，因而可以防止传染病的发生；不利的环境因素则导致与其相反的结果。

微生物学课后习题答案

微生物习题集 第一章绪论 一、术语或名词 1．微生物(microorganism)因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。这些微小生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)；具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、单细胞藻类、原生动物等。但其中也有少数成员是肉眼可见的。 2．微生物学(microbiology)研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学，分离和培养这些微小生物需要特殊技术。 3．分子微生物学(molecularmicrobiology)在分子水平上研究微生物生命活动规律的科学。4．细胞微生物学(cellularmicrobiology)重点研究微生物与寄主细胞相互关系的科学。 5．微生物基因组学(microbic genomics)研究微生物基因组的分子结构、信息含量及其编码的基因产物的科学。 6．自生说(spontaneousgeneration)一个古老的学说，认为一切生命有机体能够从无生命的物质自然发生的。 7．安东·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723)荷兰商人，他是真正看见并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍数为50～300倍的显微镜发现了微生物世界(当时被称之为微小动物)，首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物界。 8．路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895)法国人，原为化学家，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献，成为微生物学的奠基人。主要贡献：用曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展；研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病；其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，证实其

海洋微生物学

1、在人类的肠道中存在一个丰富的生态系统，这是一个数量惊人和种类繁多的微生物，大约有10个微生物，包括400多种重要的细菌，有100多个物种组成。 2、定居在肠道里的微生物为人类提供了许多好处，它们帮助人类消化食物、防御病原体、获得营养，调节脂肪含量，甚至还促进肠上皮细胞的更新。第一篇关于微生物功能的文章起因于来自两个不相关的，健康人的排泄物的基因组分析。参与新陈代谢的许多基因在人类肠微生物组中是富足的，例如那些参与异质、多糖和氨基酸等物质的新陈代谢的基因。下面我将从3个方面讲解肠道微生物的功能（对异质物质和毒素的代谢、人类外在体型的调节、作为疾病的病因） 3、肠道微生物对外来物质的代谢是至关重要的，大多数的药物被看做是外来的物质。与生物除污是类似的，这些微生物可以使有害的物质降解解毒。 4、通过上千年的选择，使得人类和微生物之间拥有一个有益的酶系统，一个例子就是共同的新陈代谢。其能产生两种影响。Good 和bad。 5、早期研究，人类可以通过肠中的微生物进行划分，因为这些微生物受到不同生活习惯、生理等条件的影响。而在这些不同的影响因素中，饮食是主要的影响因素。我们摄取食物的不同改变了肠道中的微生物，然后改变了人类的外在体型。

6、进行动物研究来看待肥胖。在胖老鼠体内的微生物从食物中获取能量的能力更强，因此导致了肥胖积累。微生物代谢难以消化的多糖，将其变为短链脂肪酸，这些短链脂肪酸很容易被吸收并作为脂质储存在寄主脂肪组织中。 与瘦人相比较，在胖人的体内，拟杆菌所占的比列小。当给肥胖的人提供低卡路里的食物时，这个比率将要改变，并且他们的体重将减轻2-6%。这些发现显示，肠道微生物在肥胖中起着重要的作用。 7、ppt上 8、Hooper等将微生物与寄主的关系分为互利共生、同食共生及致病3种。互利共生就是微生物寄宿在寄主内，双方都不会危害对方，且双方受益。同食共生就是在共生中不损及对方，但是也没有明显的有益作用。共生微生物的生态失衡会使寄主致病，即使在没有外来传染性微生物侵入的条件下，共生微生物的生态失衡也会引发寄主发生炎性肠病。 寄主与肠道微生物之间的共生关系经过几十亿年的协同进化，使得平衡向互利共生移动，在正常的情况下寄主与肠道微生物之间处于一种互利共生的状态。 9、肠道微生物影响寄主的健康情况。肠道微生物在免疫系统的发育和发展中起着重要的作用，其可能产生不利的影响引起免疫失调。肠易激综合症也许是最好的例子。肠易激综合征是。。。。。 10、研究表明，在患者的体内，微生物的组成发生了变化。微生物多样性的改变会产生如下几个结果。。。。。。

医学免疫学与微生物学作业答案 在线..

1.免疫防御功能下降易发生（） A 超敏反应 B 肿瘤 C 反复感染 D 自身免疫（病） 正确答案:C 单选题 2.下列对抗毒素的叙述中，正确的是（） A 经外毒素脱毒制成 B 只能中和外毒素 C 既可中和外毒素，又可能引起超敏反应 D 用于人工自动免疫 正确答案:C 单选题 3.关于TI-Ag的描述，错误的是（） A 产生抗体不需T细胞辅助 B 只有B细胞表位 C 不引起细胞免疫 D 可引起再次应答 正确答案:D 单选题 4.下列大分子物质中，免疫原性最强的是（） A 蛋白质 B 多糖 C 核酸 D 类脂 正确答案:A 单选题

5.关于TD-Ag的描述，正确的是（） A 产生抗体不需T细胞的辅助 B 只能引起体液免疫 C 不能引起再次应答 D 具有T细胞表位和B细胞表位 正确答案:D 单选题 6.抗原的特异性取决于（） A 分子量大小 B 表位性质 C 结构复杂性 D 化学组成 正确答案:B 单选题 7.对SIgA的错误描述是（） A 是黏膜局部抗体 B 其SP能保护SIgA不被蛋白酶水解 C 初乳中含量最丰富 D 能激活补体经典途径 正确答案:D 单选题 8.适应性免疫的特征是（） A 出生时即具有 B 反应迅速 C 特异性 D 无记忆性 正确答案:C 单选题

9.新生儿可从母体初乳中获得的Ig是（） A IgG B IgM C SIgA D IgD 正确答案:C 单选题 10.对抗原特异性的描述是正确的，除了（） A 只能激活具有相应受体的淋巴细胞系 B 与相应抗体结合 C 与相应效应淋巴细胞结合 D 与MHC结合 正确答案:D 单选题 11.免疫稳定功能失调易发生（） A 超敏反应 B 肿瘤 C 反复感染 D 自身免疫（病） 正确答案:D 单选题 12.固有性免疫的特征是（） A 通过遗传获得 B 特异性 C 反应缓慢 D 有记忆性 正确答案:A 单选题

海洋微生物活性产物及研究方法_倪志华

海洋微生物活性产物及研究方法 倪志华 1,2 ,张玉明1,刘龙1 ,马 玻3 　 (1.河北大学生命科学学院,河北保定071002;2.河北省生物工程技术中心,河北保定071002;3.河北大学医学部基础医学教研室,河北保定071000) 摘要　海洋多变复杂的环境导致了海洋微生物的多样性。近年来,在对海洋微生物的研究中发现了许多独特的生物活性物质。通过对这些生物活性物质的提取、药理研究,为新药的开发和各种疑难疾病的治愈提供了新的希望。就海洋微生物活性物质的几种重要生物活性,如抗肿瘤、抗菌、酶及酶抑制剂活性分别进行概述,同时概括了海洋微生物活性物质的研究方法以及存在的问题。关键词　海洋微生物;活性物质;代谢产物;筛选方法中图分类号　Q93 文献标识码　A 文章编号　0517-6611(2009)07-02839-03Bioactiv e P ro ducts and R esearch Methods o f Marine Microorg anis m N I Zhi -hua et al (College of Life Sciences ,Hebei University ,B aodin g ,Hebei 071002) A bstract The en viron ment of sea is chan geable and complex ,which causes the diversity of marine microorgan is m .In recent years ,many un iq ue bioactive m aterials were found in the researches of marine m icroorganis m .The extraction an d ph armacology of these bioactive m aterials were studied ,whic h provid e ne w hop e for the d evelop ment of new medicines and the cure of d ifferent diseas es .S everal kin ds of im portant b ioactivity of active materials from marine mi -croorganism were introduced ,such as an ti -tu mor ,antibacterial ,enzyme an d enz ym e inhibitor activit y .And the research methods an d existing problems of ac -tive materials from m arine microorganism were su mm arized .Key w ords Marine microorganism ; B ioactive m aterials ;Metab olite ;Method of screening 作者简介　倪志华(1979-),女,河北唐山人,讲师,从事生物化学与 分子生物学研究。 收稿日期　2008-12-10 海洋是生命的起源地,不仅占地球表面积的71%,而且包含着地球80%的生物资源。海洋环境的多样性和特殊性共同造就了海洋生物种类的多样性和特殊性,其中,海洋微生物种类就多达100万种以上,而目前所研究和鉴定过的海洋微生物还占不到总量的5% [1] ,已发现的活性物质只占总 数的1%[2] 。经过大量研究得出,从海洋微生物中发现的生 物活性物质包括胺及酰胺类、吲哚生物碱类、乙酰配基类、环肽类及聚丙酸酯类,其生物活性包括抗菌、抗肿瘤、抗微生物、抗病毒、酶及酶的抑制活性等[3] 。海洋微生物作为活性物质的新来源,正日益被海洋研究工作者、化学研究工作者以及生物医药工作者所重视。1　海洋微生物代谢产生的重要生物活性 1.1　抗肿瘤活性　海洋微生物的代谢产物有多种活性,其中以抗肿瘤活性最为重要。近年来,科研人员对来自海洋细菌、海洋真菌、海洋放线菌的抗肿瘤活性物质作了较多研究。从海洋微生物中筛选的抗肿瘤活性物质的种类包括含氮类、内酯类、酮类、醌类、多糖类[4];按其来源又可分为海洋细菌的抗肿瘤活性物质、海洋放线菌的抗肿瘤活性物质及海洋真菌的抗肿瘤活性物质。 1.1.1　海洋细菌的抗肿瘤活性物质。海洋中常见的细菌主要属于以下几个系统类群:变形细菌(Prote obacte ria )类群、革兰氏阳性细菌类群、噬纤维菌属-黄杆菌(C ytophaga -Flav obacte rium )类群、浮霉状菌(Plancto my ce tale s )/衣原体类群、疣微菌(Ve r ruc o mic ro biales )类群等。海洋细菌是海洋微生物抗肿瘤活性物质的一个重要来源,主要集中在假单胞菌属、弧菌属(Vibrio )、微球菌属、芽孢杆菌属、肠杆菌属(En -te rubac re rium )、交替单孢菌属(Alte romonas )、链霉菌属、钦氏菌属、黄杆菌属和小单孢菌属(M ic r omonos pora )。 1966年,Burkholder 第1次从海洋细菌———假单胞菌中分离得到具抗癌作用的硝吡咯菌素(Pyrolintrin )。此后对海 洋细菌的研究一直较少,直到20世纪末,人们才对海洋细菌的筛选、培养及代谢产物的研究重视起来,以期从中得到新的特效抗癌药物。日本冈见分离到一株黄杆菌属的海洋细菌代谢产生杂多糖Mar inac ta n ,能够增强免疫功能和抑制动物移植肿瘤,并成为化疗药物治疗肿瘤的佐剂[5] 。Custa fson 等从海洋细菌中分离到大环内酯类化合物Macr o -la ctins ,它由24元内酯环、吡喃型葡萄糖和一个开链的酸构成,其中macr ola ctin A 组分是一种配糖体母体,具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌等功能[3]。与海洋生物共生或寄生的很多海洋细菌也是抗肿瘤药物的重要来源。海绵体内的微生物最多可占其体重的70%,海绵能产生多种抗菌、抗肿瘤活性成分,从而引起国内外对于海绵生物活性成分研究的热潮。海绵中存在着复杂的微生物群落,海绵中的抗癌物质是由海绵中共生共栖的细菌所产生的,从这些细菌中可以分离出抗白血病、抗鼻咽癌的活性成分。Canedo 等从加勒比海海鞘(Ecte inasc idia turbinata )及土耳其海岸Polyc itonide 属海鞘中分离到2株土壤杆菌,并从脂溶性代谢产物中分离得到2个有显著抗肿瘤活性的生物碱类化合物Sesba nimide A 和C ,对肿瘤细胞L1210的I C 50达0.8μg /L 。 1.1.2　海洋放线菌的抗肿瘤活性物质。海洋放线菌主要包括链霉菌属(Stre pto myc ete s )、小单孢菌属(Mic ro monosp ora )、红球菌(Rhodoc oc c us )、诺卡氏菌(N oc ardia )以及游动放线菌(Ac tinoplanete s )等稀有属种。海洋放线菌主要分布在海底沉积物、海洋生物表面以及游离于海水中。海洋放线菌的生活环境十分特殊,如高盐度、高压、低营养、低温等。在这些所谓生命的极限环境中,海洋放线菌已发展出独特的代谢方式,同时也提供了产生独特的生物活性物质的潜力。 中国海洋大学药物与食品研究所、军事医学科学院毒物药物研究所的科研人员对海洋放线菌S1001发酵产物进行了分离和研究,并用理化手段综合分析了其中的抗肿瘤活性成分,取得了较为满意的结果[6]。有报道称,从我国台湾海峡采集的海洋植物、动物的表面、表皮和内部分离得到多株放线菌,其中有20.60%的放线菌对肿瘤细胞P388有细胞毒 安徽农业科学,J ou rn al of An hui Agri .Sci .2009,37(7):2839-2841,2850 责任编辑　金琼琼　责任校对　卢瑶