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生化分离技术试题及答案

生化分离技术试题及答案
生化分离技术试题及答案

浙江理工成教院期终考试

《生化分离技术》试卷A试卷

教学站年级班级学号姓名

一、填空题(每空1分,共21分)。

1、生化分离是从生物材料、微生物的发酵液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关生化产品的过程,一般采用如下工艺流程:发酵液→()→细胞分离→(细胞破碎→细胞碎片分离)→()→()→成品加工。

2、提取的产物在细胞内,选用细胞破碎法;在细胞膜附近则可用细胞破碎法;提取的产物与细胞壁或膜相结合时,可选用机械法和化学法相结合的细胞破碎法。

3、发酵液的预处理目的主要包括改变和。

4、典型的工业过滤设备有和。

5、反萃取是将目标产物从转入的过程。

6、超临界流体萃取的溶剂可分为非极性和极性溶剂两种,常用的极性溶剂有和

、非极性有。

7、按膜的孔径的大小分类,可将膜分为、、

和等。

8、冻干操作过程包括:、和。

二、判断题(每题1分,共15分)

1、盐析是指向蛋白质溶液中加入某些浓的中性盐后,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,以达到分离、提纯生物大分子的目的。()

2、常用的盐析剂有葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺、明胶等。()

3、萃取是利用化合物在两种互不相容的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另一种溶剂中,经过反复多次的萃取,将绝大部分化合物提取出来的方法。

()

4、双水相萃取的体系的两相是不含有水分的。()

5、膜分离操作中,所有溶质均被透过液传送到膜表面上,不能完全透过膜的溶质受到膜的截留作用,在膜表面附近浓度升高,这种现象叫做浓差极化。()

6、凝胶色谱是利用不同生物分子的电离能力不同而达到物质分离目的的。()

7、离子交换色谱是利用不同分子的大小不同而达到物质分离目的的。()

8、亲和色谱是利用生物分子之间的亲和力的不同而达到物质分离目的的。()

9、要增加目的物的溶解度,往往要在目的物的等电点附近进行提取。()

10、蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。

()11、蛋白质为两性电解质,改变pH可以改变其电荷性质,pH大于pI,蛋白质带正电荷。

12、丙酮沉析作用小于丙酮。()

13、真空冷冻干燥的操作条件是高温低压,所以适合于干燥热敏性物质。()

14、生产氨基酸类药物主要的生产方法有蛋白质水解法、微生物发酵法、酶工程法和化学合成法。()15、DNA、RNA是核苷酸类物质,胱氨酸和谷氨酸属于蛋白质类物质。()

三、选择题(1—8为单选,每题2分,9—13为多选,每题3分,共31分)。

1、发酵液的预处理方法不包括()

A、加热

B、絮凝

C、离心

D、调节pH

2、下列细胞破碎的方法中,属于非机械破碎法的是()

A、化学法

B、高压匀浆法

C、超声波破碎法

D、高速球磨法

3、在萃取操作中,下列哪项不是选择溶剂的原则()

A、较高的选择性

B、较高的沸点

C、较强的溶解能力

D、易于回收

4、使蛋白质盐析,可加入试剂()

A、盐酸

B、硫酸

C、硝酸汞

D、硫酸铵

5、在一个完整的萃取过程中,常常在萃取和反萃取的过程中增加洗涤操作,目的是()。

A、除去与目标产物同时萃取到有机相的杂质C、增大目标产物在水相中的分配系数

B、增大目标产物在有机相中的溶解度D、增大选择性系数。

6、萃取中利用相似相溶的原理进行萃取的过程称为()

A、反萃取

B、物理萃取

C、化学萃取

D、有机溶剂萃取

7、盐析法沉淀蛋白质的原理是()

A、降低蛋白质的介电常数C、与蛋白质结合形成不溶性蛋白

B、中和电荷,破坏水膜D、调节蛋白质溶液pH至等电点

8、膜分离是利用具有一定的()性的过滤介质进行物质的分离过程。

A、选择透过性

B、吸附

C、溶解

D、扩散

9、利用盐析法进行初步纯化后都需要进行脱盐处理,常用的脱盐方法有()

A、透析

B、超滤

C、凝胶过滤

D、离子交换

10、常用于生物大分子沉淀的有机溶剂有()

A、乙醇

B、丙酮

C、异丙酮

D、甲醇

11、晶体质量主要是指()

A、纯度

B、粒度

C、晶体形状

D、晶体大小

12、在结晶操作中,工业上常用的起晶方法有()

A、重结晶

B、自然起晶法

C、刺激起晶法

D、晶种起晶法

13、根据固定相基质的形式分类,可分为()

A、纸色谱

B、薄层色谱

C、柱色谱

D、吸附色谱

四、简答题(每题5分,共20分)。

1、在生化分离与纯化的过程中,要综合运用多种现代分离与纯化的技术,才能保证产品的有效性、稳定性、均一性和纯净度。生化分离操作存在哪五个方面的特点?

2、结晶的前提是什么?过饱和溶液的形成方法有哪些?

3、萃取时根据目标产物以及与其共存杂质的性质选择合适的有机溶剂,可使目标产物有较大的分配系数和较高的选择性,萃取溶剂选择的原则主要有哪些?

4、根据固定相基质的形式分类,色谱可分为哪几类?根据流动相的形式分类,色谱可分为哪几类?根据分离原理的不同,色谱主要分为哪几类?

五、综合应用题(共13分,)

1、临床上治疗尿毒症采用的膜分离方法是什么?简述该种分离方法的原理。(4分)

2、下面是关于胸腺肽提取分离的操作流程图,回答下列问题。(共9分)

胸腺肽由两种肽组成,其分子量分别为9600和7000,含15种氨基酸,其中人体必需氨基酸的含量比较高。胸腺肽对热稳定,能耐80℃高温不变性;对蛋白酶敏感,易降解失活。

[原料处理] [制匀浆、提取]

绞碎 10000r/min 1min,-20℃48h

[分装、冻干] [超滤、提纯]

3%甘露醇 超滤膜 [部分热变性、离心、过滤] 分子量<10000 80℃ 5min,5000r/min 40min

(1)为什么以小牛胸腺作为原材料?(3分)

(2)采用部分热变形、离心、过滤操作的目的是什么?(3分)

(3)为什么选用截留分子量小于10000的超滤膜?(3分)

胸腺匀浆 注射用胸腺肽 精致液 滤液

小牛胸腺

绞碎胸腺

浙江理工成教院期终考试

《生化分离技术》试卷A答案

一、填空题(每空1分,共21分)。

1、预处理、初步纯化、高度纯化

2、机械、非机械

3、发酵液过滤特性、杂质的去除

4、板框压滤机、转筒真空过滤机

5、有机相、水相

6、甲醇、乙醇、二氧化碳(注:甲醇、乙醇的位置可互换)

7、超滤、微滤、纳滤、反渗透

8、预冻、升华干燥、解析干燥

二、判断题(每题1分,共15分)

1、√

2、×

3、√

4、×

5、√

6、×

7、×

8、√

9、×10、×11、×12、×13、×14、√15、×

三、选择题(1—8为单选,每题2分,9—13为多选,每题3分,共31分)。

1、C

2、A

3、B

4、D

5、A

6、D

7、 B

8、A

9、AC 10、ABCD 11、ACD 12、BCD 13、ABC

四、简答题(每题5分,共20分)。

1、特点:①目的产物在初始物料(发酵液)中的含量低;②培养液是多组分的混合物,除少量产物外,还有大量的细胞及碎片、其他代谢物(几百上千种)、培养基成分、无机盐等,給过程设计造成困难;③生化产物的稳定性低,易变质、易失活、易变性,对温度、pH值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面张力等非常敏感;④发酵和培养很多是分批操作,生物变异性大,各批发酵液不尽相同,要求所用加工设备有一定操作弹性;⑤对最终产品的质量要求高。

2、结晶的前提是过饱和溶液的形成。

过饱和溶液的形成方法有:①蒸发法;②温度诱导法;③盐析结晶法;④透析结晶法;⑤有机溶剂结晶法;⑥等电点法;⑦化学反应结晶法。

3、①价廉易得;②与水相不互溶;③与水相有较大的密度差,并且黏度小,表面张力适中,相分散和相分离较容易;④容易回收和再利用;⑤毒性低、腐蚀性小、闪点低、使用安全;

⑥不与目标产物发生反应。

4、根据固定相基质的形式分类,色谱可分为纸色谱、柱色谱、薄层色谱。根据流动相的形式分类,色谱可分为液相色谱、气象色谱。根据分离原理的不同,色谱主要分为吸附色谱、分配色谱、凝胶过滤色谱、离子交换色谱、亲和色谱等

五、综合应用题

1、临床上治疗尿毒症采用的膜分离方法透析。其原理是:透析时,小于截留分子量(MWCO)的分子在透析膜两边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜,高分子溶液中的小分子溶质(如无机盐)透向水侧,水则向高分子一侧透过。

2、(1)胚胎后期及初生时胸腺重量相对最大,随年龄增长,胸腺逐渐退化,所以选用小牛的胸腺作为原料。

(2)胸腺肽对热稳定,在80℃高温不变性,但其他的杂蛋白会受热变性,生成沉淀析出,而胸腺肽在清液中,所以需要离心过滤,将胸腺肽与杂蛋白分离开。

(3)胸腺肽由两种肽组成,其分子量分别为9600和7000,截留分子量小于10000的超滤膜刚好可以让胸腺肽透过,而分子量大于10000的杂蛋白被截留下来。

浙江理工成教院期终考试

《生化分离技术》试卷B试卷

教学站年级班级学号姓名

一、填空题(每空1分,共21分)。

1、发酵产物的初步纯化方法有很多,常用的有法、吸附法、法、法、法、溶剂萃取法、双水相萃取和超临界流体萃取等。

2、降低发酵液粘度的主要方法是和。

3、极性化合物易溶于的溶剂中,而非极性化合物易溶于的溶剂中,这一规律称为“”。

4、在超速离心中,离心方法可分为、

和。

5、固相析出技术是通过加入某种试剂或改变溶液的条件,使生化物质以固体形式从溶液中沉淀析出,若析出的是无定型物,则称为,若析出的是晶体,则称为。

6、冻干操作过程中,预冻的处理方法主要主要有和。

7、亲和色谱的洗脱方法可分为洗脱和洗脱。

8、凝胶粒度的大小对分离效果有直接影响。一般说来,细粒凝胶柱流速低,洗脱峰窄,分辨率,多用于分离等。粗粒凝胶柱流速快,洗脱峰宽,分辨率,多用于分离等。

二、判断题(每题1分,共15分)

1、萃取是利用化合物在两种互不相容的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另一种溶剂中,经过反复多次的萃取,将绝大部分化合物提取出来的方法。

( )

2、在沉淀的过程中,溶液的pH值、温度、离子浓度等因素对沉淀没有影响。 ( )

3、盐析是指向蛋白质溶液中加入某些浓的中性盐后,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,以达到分离、提纯生物大分子的目的。 ( )

4、提取细胞外的物质,常常采用机械法破碎细胞。 ( )

5、丙酮的介电常数要低一些,相对而言沉析操作大于乙醇,所以在沉析时,应优先选用丙酮,在考虑乙醇。 ( )

6、蛋白质类物质应该在远离等电点的条件下进行沉析操作。 ( )

7、硫酸铵在碱性条件中也以应用。 ( )

8、在处理对温度敏感的蛋白质或者酶时,应该在较低温度下进行操作,以保证物质不会受人而变性。 ( )

9、氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可以用等电点沉析。 ( )

10、膜分离操作中,所有溶质均被透过液传送到膜表面上,不能完全透过膜的溶质受到膜的截留作用,在膜表面附近浓度升高,这种现象叫做浓差极化,浓差极化无法通过任何手段来减轻。 ( ) 11、平衡离子带正电荷的离子交换剂可以与带正电荷的离子发生离子交换作用,叫做阴离子交换剂;平衡离子带负电荷的离子交换剂可以与带负电荷的离子发生离子交换作用,叫做阳离子交换剂。 ( ) 12、亲和色谱可以应用于生物素和亲和素、抗原与抗体、凝聚唐与糖蛋白的分离,还能运用于各种氨基酸的分离。 ( ) 13、干燥技术按热量供给方式可分为传导干燥、对流干燥、辐射干燥、介电加热干燥。

( )

14、丙酮沉析作用小于乙醇。 ( )

15、真空冷冻干燥的操作条件是高温低压,所以适合于干燥热敏性物质。 ( )

三、选择题(1—8为单选,每题2分,9—13为多选,每题3分,共31分)。

1、常用于生物大分子沉淀的有机溶剂,最为常用的是()

A、乙醇

B、丙酮

C、异丙酮

D、甲醇

2、蛋白质具有两性性质的主要原因是()

A、蛋白质分子有一个羧基和一个氨基 C、蛋白质分子有苯环和羟基

B、蛋白质分子有多个羧基和多个氨基 D、以上都对电点

3、大多数蛋白质的等电点都在()范围内

A、酸性

B、碱性

C、中性

D、缓冲液

4、聚丙烯酰胺凝胶可以通过化学聚合形成凝胶,化学聚合一般以()作为催化剂。

A、硫酸铵(AP) C、N,N,N,N-四甲基乙二胺(TEMED)

B、丙烯酰胺(Acr) D、双丙烯酰胺(Bis)

5、聚丙烯酰胺凝胶可以通过化学聚合形成凝胶,化学聚合一般以()作为增速剂。

A、硫酸铵(AP) C、N,N,N,N-四甲基乙二胺(TEMED)

B、丙烯酰胺(Acr) D、双丙烯酰胺(Bis)

6、以游离态存在的氨基酸是()

A、蛋白氨基酸

B、非蛋白氨基酸

C、脂肪族氨基酸

D、芳香族氨基酸

7、可用于鉴别胱氨酸和半胱氨酸的试剂是()

A、对二甲氨基苯甲醛

B、醋酸铅

C、对氨基苯磺酸

D、米伦试剂

8、萃取操作是利用原料液中()的差异实现分离的操作。

A、沸点

B、在溶剂中的溶解度

C、挥发度

D、密度

9、市售的离子交换剂通常阳离子交换剂为(),阳离子交换剂为()

A、Na型

B、H型

C、Cl型

D、OH型

10、柱色谱洗脱时的洗脱方式主要分为:()

A、简单洗脱

B、分步洗脱

C、反洗脱

D、梯度洗脱

11、在亲和色谱中,根据配体对待分离物质的亲和性的不同,将其分为两类,分别是()

A、特异性配体 C、通用性配体

B、抗原、抗体 D、激素受体

12、盐析常用的中性盐有()

A、硫酸铵

B、硫酸镁

C、氯化钠

D、硫酸钠

13、影响絮凝的因素很多,主要有()

A、絮凝剂的加入量 C、溶液的pH

B、操作温度 D、搅拌转速和时间

四、简答题(每题5分,共20分)。

1、什么叫做等电点沉淀?等电点沉淀的操作条件是什么?适用于什么蛋白质?

2、根据固定相基质的形式分类,色谱可分为哪几类?根据流动相的形式分类,色谱可分为哪几类?根据分离原理的不同,色谱主要分为哪几类?

3、简述在教材中给出的对物料中的水分的分类及关系。

4、色谱技术管饭应用于生物及化学物质的使用中,其中柱色谱的应用最为广泛,请简述柱色谱的基本操作步骤和注意事项。

五、综合应用题(共13分)

1、离子交换色谱是一种简单而有效的去除水中杂质及各种离子的方法,聚苯乙烯树脂已广泛用于高纯水的制备、硬水软化及污水处理等方面。写出离子交换树脂制备去离子水的过程。(3分)

2、以下是DNA 的提取分离,回答下面问题。(10分)

DNA 在氯化钠中溶解度随氯化钠浓度的变化而变化,当氯化钠物质的量浓度为2mol/L 时,DNA 的溶解度最大,当氯化钠物质的量浓度为0.14mol/L 时,DNA 的溶解度最小。且DNA 不溶于95%的乙醇。

[原料制备] [提取核物质] [溶解、析出、滤出DNA] 柠檬酸钠溶液 蒸馏水 氯化钠溶液、蒸馏

[提取] [再溶解、过滤] 95%酒精溶液 氯化钠溶液

(1)为什么选用鸡血作为原料?(2分)

(2)加入柠檬酸钠的目的是什么?会出现什么现象?(2分)

(3)前后两次加入了蒸馏水,其目的是什么?(3分)

(4)前后两次析出DNA 沉淀,原理是什么?(3分)

DNA 鸡血细胞液 滤液 鸡血 滤液 DNA 粘稠物

浙江理工成教院期终考试

《生化分离技术》试卷B答案

一、填空题(每空1分,共21分)。

1、沉淀、离子交换、超滤

2、加水稀释法、加热法

3、极性、非极性、相似相溶

4、差速离心法、密度梯度离心法、等密度梯度离心法

5、沉淀、结晶

6、低温快冻、低温慢冻

7、特异性、非特异性

8、高、小分子量蛋白、低、中高分子量蛋白

二、判断题(每题1分,共15分)

1、√

2、×

3、√

4、×

5、×

6、×

7、×

8、√

9、√ 10、√ 11、× 12、√ 13、√ 14、× 15、×

三、选择题(1—8为单选,每题2分,9—13为多选,每题3分,共31分)。

1、A

2、B

3、A

4、A

5、C

6、B

7、B

8、B

9、A、C 10、ABD 11、AC 12、ABCD 13、ABCD

四、简答题(每题5分,共20分)。

1、利用蛋白质分子在等电点时,其溶解度最小的特性,向含有目的药物成分的混合液中加入酸或碱,调节其pH,使蛋白质沉淀析出的方法叫做等电点沉淀。等电点沉淀的操作条件是:低离子浓度,pH=pI。等电点沉淀法一般适用于疏水性较大的蛋白质。

2、根据固定相基质的形式分类,色谱可分为纸色谱、柱色谱、薄层色谱。根据流动相的形式分类,色谱可分为液相色谱、气象色谱。根据分离原理的不同,色谱主要分为吸附色谱、分配色谱、凝胶过滤色谱、离子交换色谱、亲和色谱等

3、平衡水分:在一定的干燥条件下,当干燥过程达到平衡时,不能除去的水分称为该条件下的平衡水分。

自由水分:湿物料中的水分含量与平衡水分之差称为自由水分

结合水分:存在于物料的毛细管中的水分,由于毛细现象,在物料中难以除去,称为结合水。非结合水分:吸附在湿物料表面的水分和大孔隙中的水分,在干燥过程中容易除去,这部分水称为非结合水分。

关系:自由水分包含干燥过程中能够除去的非结合水分和能除去的结合水分,平衡水分包含干燥过程不能除去的结合水。

4、预处理→装柱→平衡→上样,洗脱→样品收集。

装柱要均匀,不能分层、有气泡,不能干柱;上样量不宜过多;根据色谱柱和待分离物质的性质选择合适的洗脱速度和洗脱方式。

五、综合应用题

1、原水强酸型阳离子交换树脂强碱型阴离子交换树脂混合柱去离子水

2、(1)因为鸡血的血细胞里面富含DNA,且鸡血容易吸水账破,所以选用鸡血作为原料?(2)加入柠檬酸钠的目的是为了防止凝血,加入抗凝剂后,溶液会分层。

(3)第一次加入蒸馏水是为了使鸡血细胞吸水账破,第二次加入蒸馏水是为了使氯化钠溶液的浓度降低,是DNA沉淀出来。

(4)第一次沉淀析出的原理是DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最小;第二次沉淀析出的原理是DNA不溶于95%的乙醇,会沉淀析出。

生化分离技术试题及答案word版本

生化分离技术试题及 答案

浙江理工成教院期终考试 《生化分离技术》试卷A试卷 教学站年级班级学号姓名 一、填空题(每空1分,共21分)。 1、生化分离是从生物材料、微生物的发酵液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关生化产品的过程,一般采用如下工艺流程:发酵液→()→细胞分离→(细胞破碎→细胞碎片分离)→()→()→成品加工。 2、提取的产物在细胞内,选用细胞破碎法;在细胞膜附近则可用细胞破碎法;提取的产物与细胞壁或膜相结合时,可选用机械法和化学法相结合的细胞破碎法。 3、发酵液的预处理目的主要包括改变和。 4、典型的工业过滤设备有和。 5、反萃取是将目标产物从转入的过程。 6、超临界流体萃取的溶剂可分为非极性和极性溶剂两种,常用的极性溶剂有和 、非极性有。 7、按膜的孔径的大小分类,可将膜分为、、 和等。 8、冻干操作过程包括:、和。 二、判断题(每题1分,共15分)

1、盐析是指向蛋白质溶液中加入某些浓的中性盐后,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,以达到分离、提纯生物大分子的目的。() 2、常用的盐析剂有葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺、明胶等。() 3、萃取是利用化合物在两种互不相容的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另一种溶剂中,经过反复多次的萃取,将绝大部分化合物提取出来的方法。 () 4、双水相萃取的体系的两相是不含有水分的。( ) 5、膜分离操作中,所有溶质均被透过液传送到膜表面上,不能完全透过膜的溶质受到膜的截留作用,在膜表面附近浓度升高,这种现象叫做浓差极化。 () 6、凝胶色谱是利用不同生物分子的电离能力不同而达到物质分离目的的。() 7、离子交换色谱是利用不同分子的大小不同而达到物质分离目的的。 () 8、亲和色谱是利用生物分子之间的亲和力的不同而达到物质分离目的的。() 9、要增加目的物的溶解度,往往要在目的物的等电点附近进行提取。 () 10、蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。 ()

《生化分离工程》思考题与答案

第一章绪论 1、何为生化分离技术?其主要研究那些容?生化分离技术是指从动植物组织培养液和微生物发酵液中分离、纯化生物产品的过程中所采用的方法和手段的总称。 2、生化分离的一般步骤包括哪些环节及技术?一般说来,生化分离过程主要包括4 个方面:①原料液的预处理和固液分离,常用加热、调PH、凝聚和絮凝等方法;②初步纯化(提取),常用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作;③高度纯化(精制),常选用色谱分离技术;④成品加工,有浓缩、结晶和干燥等技术。 3、生化分离工程有那些特点,及其重要性? 特点:1、目的产物在初始物料(发酵液)中的含量低;2、培养液是多组分的混合物,除少量产物外,还有大量的细胞及碎片、其他代物(几百上千种)、培养基成分、无机盐等;3、生化产物的稳定性低,易变质、易失活、易变性,对温度、pH 值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面力等非常敏感;4、对最终产品的质量要求高重要性:生物技术产品一般存在于一个复杂的多相体系中。唯有经过分离和纯化等下游加工过程,才能制得符合使用要求的产品。因此产品的分离纯化是生物技术工业化的必需手段。在生物产品的开发研究中,分离过程的费用占全部研究费用的50 %以上;在产品的成本构成中,分离与纯化部分占总成本的40~ 80 %;精细、药用产品的比例更高达70 ~90 %。显然开发新的分离和纯化工艺是提高经济效益或减少投资的重要途径。

4、生物技术下游工程与上游工程之间是否有联系? 它们之间有联系。①生物工程作为一个整体,上游工程和下游工程要相互配合, 为了利于目的产物的分离与纯化,上游的工艺设计应尽量为下游的分离纯化创造条件,例如,对于发酵工程产品,在加工过程中如果采用液体培养基,不用酵母膏、玉米浆等有色物质为原料,会使下游加工工程更方便、经济;②通常生物技术上游工程与下游工程相耦合。发酵- 分离耦合过程的优点是可以解除终产物的反馈抑制效应,同时简化产物提取过程,缩短生产周期,收到一举数得的效果。 5、为何生物技术领域中往往出现“丰产不丰收”的现象? 第二章预处理、过滤和细胞破碎 1、发酵液预处理的目的是什么?主要有那几种方法? 目的:改变发酵液的物理性质,加快悬浮液中固形物沉降的速率;出去大部分可溶性杂质,并尽可能使产物转入便于以后处理的相中(多数是液相),以便于固液分离及后提取工序的顺利进行。 方法:①加热法。升高温度可有效降低液体粘度,从而提高过滤速率,常用于粘度随温度变化较大的流体。控制适当温度和受热时间,能使蛋白质凝聚形成较大颗粒,进一步改善发酵液的过滤特性。使用加热法时必须注意加热温度必须控制在不影响目的产物活性的围,对于发酵液,温度过高或时间过长可能造成细胞溶解,胞物质外溢,而增加发酵液的复杂性,影响其后的产物分离与纯化;②调节悬浮液的pH 值,pH 直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷性质,适当调节pH 可以改善其过滤特性;③凝聚和絮凝;④使用惰性助滤剂。

生化分离技术 考试复习题库(含详细答案)

《生化分离》考试复习题库 一、选择题 1.下列不是超临界萃取工艺的方法是()。 A 等温法 B 等压法 C 吸附法 D 交换法 2.影响絮凝效果的因素有很多,但不包括()。 A 絮凝剂的浓度 B 溶液pH值 C 溶液含氧量 D 搅拌速度和时间 3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱,在化合物分离中,先被洗脱下来的为()。 A 杂质 B 小分子化合物 C 大分子化合物 D 两者同时下来 4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度()。 A 增大 B 减小 C 先增大,后减小

D 先减小,后增大 5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是()。 A 增大滤过面积 B 降低料液温度 C 加压或减压 D 加入助滤剂 6.下列方法中,哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法 A 调节等电点 B 降低温度 C 添加表面活性物质 D 添加助滤剂 7.助滤剂应具有以下性质() A 颗粒均匀、柔软、可压缩 B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩 C 粒度分布广、坚硬、不可压缩 D 颗粒均匀、可压缩、易变形 8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法,不包括() A 沉淀法 B 变性法 C 吸附法 D 萃取法 9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是()

A 样品可被分离成一系列的样品组分区带 B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质 C 离心时间越长越好 D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况 10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒,它能使滤饼疏松,滤速增大。以下不属于助滤剂的是() A 氯化钙 B 纤维素 C 炭粒 D 硅藻土 11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类,下列不属于机械法的是() A 加入金属螯合剂 B 高压匀浆法 C 超声破碎法 D 珠磨法 12.萃取操作是利用原料液中各组分()的差异实现分离的操作。 A 溶剂中的溶解度 B 沸点 C 挥发度 D 密度 13.两相溶剂萃取法的原理为:

生化分离技术复习部分题答案

一、名词解释: 1、梯度洗脱:在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。 或者答流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k',并使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。(可在离子交换层析中查)。 2、分辨率:是相邻两个峰的分开程度,用相邻两峰对应的洗脱体积之差比上两个半峰宽之和的平均值表示。 3、亲和层析:利用生物分子与其配体间特异性的、可逆性的亲和结合作用而对样品进行分离,配体被固定在载体上,特异性结合经过的与其亲和性的生物分子的一种层析技术。 4、等电聚焦:使电泳的介质中形成一个连续的、稳定并有一定范围的线性pH梯度,电泳时蛋白质等待分离的两性分子可以在这种pH梯度中迁移,直到迁移聚集于与其等电点(pI)相同的区域,从而形成一种分辨率极高的电泳聚焦效应。 5、盐析:增加中性盐浓度使蛋白质、气体、未带电分子溶解度降低,以致使电解质类物质从溶液里沉淀出来的一种作用现象。 附资料:它是蛋白质分离纯化中经常使用的方法,最常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠和氯化钠等。 6、保留时间tR:从开始进样至柱出口处被测组分出现浓度最大值时所需的时间,称为保留时间。层析分离技术的一个参数。 7、双向电泳:等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合的电泳方法,即先进行第一向水平电泳——等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行第二向垂直电泳——SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。 8、密度梯度离心:在呈密度梯度的惰性介质中以一定的离心力进行离心,让各组分会依其密度分布在梯度中与其自身密度相同的液层中的依密度而分离的离心法。 附资料:密度梯度可以离心前预先制备(如叠加不同浓度蔗糖、甘油)或在离心中自然形成(如使用氯化铯时)。可用于分析型或制备型的离心分离。通常分为差速区带离心和等密度离心两种方式。 二、填空题(要点): 2、最常用的几种蛋白质的沉淀方法:盐析法(中性盐沉淀)、有机溶剂沉淀、选择性沉淀(热变性沉淀和酸碱变性沉淀)、等电点沉淀、有机聚合物沉淀、聚电解质沉淀法、金属离子沉淀法。 4、细胞破碎的方法:1)物理:高压匀浆法、珠磨法、超声波破碎法、渗透压冲击法;2)化学:外加酶法、酶自溶法、化学试剂法。 5、聚丙烯酰胺凝胶单体:(一些资料)聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE(Polyacrylamide gel electrophoresis) 聚丙烯酰氨凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有两种:化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。在聚合过程中,TEMED催化过硫酸铵产生自由基,后者

生化分离考点

生化分离考点 Company number:【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】

1.生化分离过程的特点:(1)生物物质的生活活性大多是在生物体内的温和 条件下维持并发挥作用的;(2)用作医药、食品和化妆品的生物产物与人类生命息息相关;(3)原料液中常存在与目标分子在结构、构成成分等理化性质上极其相似的分子及异构体,形成用常法难于分离的混合物;(4)原料液中目标产物的浓度一般很低,有时甚至是微量的。 2.分离效率的评价(三个指标):浓缩程度、分离纯化程度、回收率 3.Stokes 为液体密度式中,d p kg/m3),ρ L 为重力沉降速度(kg/m3),μ(kg/m3),g 为重力加速度(kg/m3),v g 为液体黏度。 L 4.区带分离法:是生化研究中的重要分离手段,根据立新操作条件不同,分为 差速区带离心和平衡区带离心,两种区带离心法均事先在离心管中用某种低分子溶质调配好密度梯度,在密度梯度之上加待处理的料液后进行离心操作。 5.离心分离设备:常用的有管式和碟片式两大类。 6.革兰氏阴性和阳性的区别:革兰阳性菌的细胞主要由肽聚糖层组成,而革兰 阴性菌的细胞壁在肽聚糖层的外侧还有分别由脂蛋白和脂多糖及磷脂构成的两层外壁层。革兰阳性菌的细胞壁比较厚,约15-50nm,肽聚糖含量占 40%-90%;革兰阴性菌的肽聚糖层约,外壁层约8-10nm。因此,革兰阳性菌的细胞壁比革兰阴性菌坚固,较难破碎。 7.习题:管式离心机的转筒内径为12cm,筒长70cm,转数为15000r/min。设 离心机的校正系数为一,利用其浓缩酵母细胞悬浮液,处理能力为min。 (1)计算酵母细胞的重力沉降速度;(2)破碎该酵母细胞后,细胞碎片直

生化分离技术(主要内容)

生化分离技术(主要内容) -标准化文件发布号:(9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

生化分离技术:描述回收生物产品分离过程原理和方法的术语,是指从动植物组织培养液或微生物发酵液中分离、纯化生物产品过程中所采用的方法和手段的总称。 生化分离过程是生物技术转化为生产力不可缺少的重要环节,其技术进步程度对生物技术的发展有着举足轻重作用,为突出其在生物技术领域中的地位和作用,常称它为生物技术 的下游工程。 分离纯化过程的难点:目的产物在细胞或反应液中含量不高,杂质种类多,数量大;杂质性质与产物相似;产物稳定性不高。 生化分离技术的主要种类:沉淀分离(盐析、有机溶剂沉淀、选择性变性沉淀、非离子聚合物沉淀);膜分离(透析、微滤、超滤、纳滤、反渗透);层析分离(吸附、凝胶、离子交换、疏水、反相、亲和层析);电泳分离(SDS-PAGE、等电聚焦、双向电泳、毛细管电泳);离心分离(低速、高速、超速离心分离技术), 生化分离的特点:成分复杂;含量甚微;易变性/易被破坏;具经验性;均一性的相对性。 预处理需注意的条件:⑴温度尽可能低⑵提取液的量要保证“充分浸入”⑶加入足量酚类吸附剂⑷加入足量氧化酶抑制剂⑸搅拌转速要恰当⑹ pH控制在合适范围,一般5.5~7

细胞的破碎:用一定方法(机械/物理/化学/酶法)打开细胞壁或膜,使细胞内含物有效释放出来。 挤压:微生物细胞在高压下通过一个狭窄的孔道高速冲出,因突然减压而引起一种空穴效应,使细胞破碎。 沉淀:溶液中溶质由液相变成固相析出的过程。本质:通过改变条件使胶粒发生聚结,降低其在液相中的溶解度,增加固相中的分配率。作用:分离、澄清、浓缩、保存 盐溶:低浓度中性盐离子对蛋白质分子表面极性基团及水活度的影响,增加蛋白质与溶剂相互作用力,使其溶解度增大。 盐析:中性盐浓度增至一定时,水分子定向排列,活度大大减少,蛋白质表面电荷被中和,水膜被破坏,从而聚集沉淀。 有机溶剂沉淀法:使溶液的介电常数大大降低,从而增加带电粒子自身之间的作用力,易聚集沉淀;争夺酶、蛋白质等物质表面的水分子,破坏水化层,使分子易碰聚产生沉淀。 沉淀条件讨论:1. 温度;2. pH ;3. 浓度;4. 离子强度;5. 有机溶剂的选择;6. 多价阳离子的影响;7. 溶剂用量 膜分离或膜过滤定义:用天然或人工合成高分子薄膜,以外界能量或化学位差为推动力,对两个或两个以上组分的溶质和溶剂进行分离、提纯和富集的方法。 膜:两相之间的一个不连续区间,是隔开两种流体的一个薄的阻挡层。 膜分离的特点:过程为常温过程;不发生相变;密闭系统中进行;产品不受污染;选择性好;适应性强;实现自动化操作。 项目膜类型操作压力分离机理适用范围技术特点不足之处 微滤(MF) 对称微孔膜 0.02~10μm 0.01 MPa~ 0.2 MPa 颗粒大小、 形状 含微粒或菌体溶 液的分离 操作简便,通水量大,工 作压力低,制水率高。 有机污染物的分 离效果较差。 超滤(UF) 不对称微孔膜 0.001~0.1μm 0.1 MPa~ 0.5 MPa 颗粒大小、 形状 有机物或微生物 溶液的分离 与微滤技术相似。与微滤技术相似。 纳滤(NF) 带皮层不对称复 合膜1~50 nm 0.5 MPa~ 2.5 MPa 优先吸附、 表面电位 硬水或有机物溶 液的脱盐 可对原水进行部分脱盐和 软化,生产优质饮用水。 常需预处理,工作 压力较高。 反渗透(RO) 带皮层不对称复 合膜<1 nm 1.0 MPa~ 10 MPa 优先吸附、 溶解扩散 海水或苦咸水的 淡化 几乎可去除水中一切杂 质,包括悬浮物、胶体、 有机物、盐、微生物等。 工作压力高;制水 率低;能耗大。 按膜断面的物理形态:表面活性层( 0.1~1μm,分离作用,其孔径和性质决定膜的分离特性,厚度决定传质速度);多孔支撑层(100~200μm,机械支撑作用,对分离特性和传质速度影响很小) 表征膜性能的参数:孔的性质;水通量;耐压能力;pH适用范围;对热和溶剂的稳定性;截留分子量分布 膜的劣化:膜本身不可逆转的质量变化(化学性:水解、氧化;物理性:固结、干燥;生物性:微生物代谢产物)。 污染膜是否清洗的判据:进出口压力降;透水量或透水质量;定时清洗。 污染膜的常用清洗方法:机械方法;加起溶解作用的物质;加起氧化作用的物质;加起渗透作用的物质;切断离子结合作用。浓差极化:指外源压力迫使分子量较小的溶质通过薄膜,而大分子被截留于膜表面,并逐渐形成浓度梯度的现象。

生化分离工程复习题2及答案教学提纲

生化分离工程复习题 2及答案

生化分离工程复习题 一、填空题 1. 生化分离过程主要包括四个方面:预处理、细胞分离、纯化、产品加工。 2. 发酵液常用的固液分离方法有沉淀法和结晶法等。 3. 膜分离过程中所使用的膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为微滤膜、超滤膜、纳滤膜和反渗透膜; 4. 离子交换分离操作中,常用的洗脱方法简单洗脱和梯度洗脱。 5. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其各种蛋白质等电点 的不同。 6. 典型的工业过滤设备有板框压滤机和转筒真空过滤机。 9. 超临界流体的特点是与气体有相似的扩散性能,与液体有相似的密度。 二、单选题 1.供生产生物药物的生物资源不包括( D ) A. 动物 B. 植物 C. 微生物 D. 矿物质 2.下列哪个不属于初步纯化:( C ) A. 沉淀法 B. 吸附法 C. 亲和层析 D. 萃取法 3.HPLC是哪种色谱的简称( C )。 A. 离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱 4.其他条件均相同时,优先选用那种固液分离手段( B ) A. 离心分离 B. 过滤 C. 沉降 D. 超滤 5.适合小量细胞破碎的方法是( C ) A. 高压匀浆法 B. 超声破碎法 C. 高速珠磨法 D. 高压挤压法 6.有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为( D ) A. 乙酸乙酯 B. 正丁醇 C. 苯 D. 丙酮 7.液-液萃取时常发生乳化作用,如何避免( D ) A. 剧烈搅拌 B. 低温 C. 静止 D. 加热 8.盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点是( B ) A.分辨率高 B.变性作用小 C.杂质易除 D.沉淀易分离 9.工业上常用的过滤介质不包括( D ) A. 织物介质 B. 堆积介质 C. 多孔固体介质 D. 真空介质 10.哪一种膜孔径最小( C ) A. 微滤 B. 超滤 C. 反渗透 D. 纳米过滤 11.用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是( C ) A. 离子交换色谱 B. 亲和色谱 C. 凝胶过滤色谱 D. 反相色谱 12.“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质 ( B ) A.极性溶剂 B.非极性溶剂 C.水 D.溶剂 13.下列细胞破碎的方法中,哪个方法属于非机械破碎法( A ) A. 化学法 B. 高压匀浆 C. 超声波破碎 D. 高速珠磨 14.离子交换树脂适用( A )进行溶胀 A. 水 B. 乙醇 C. 氢氧化钠 D. 盐酸

生化分离技术(主要内容)

生化分离技术:描述回收生物产品分离过程原理和方法的术语,是指从动植物组织培养液或微生物发酵液中分离、纯化生物产品过程中所采用的方法和手段的总称。 生化分离过程是生物技术转化为生产力不可缺少的重要环节,其技术进步程度对生物技术的发展有着举足轻重作用,为突出其在生物技术领域中的地位和作用,常称它为生物技术 的下游工程。 分离纯化过程的难点:目的产物在细胞或反应液中含量不高,杂质种类多,数量大;杂质性质与产物相似;产物稳定性不高。 生化分离技术的主要种类:沉淀分离(盐析、有机溶剂沉淀、选择性变性沉淀、非离子聚合物沉淀);膜分离(透析、微滤、超滤、纳滤、反渗透);层析分离(吸附、凝胶、离子交换、疏水、反相、亲和层析);电泳分离(SDS-PAGE、等电聚焦、双向电泳、毛细管电泳);离心分离(低速、高速、超速离心分离技术), 生化分离的特点:成分复杂;含量甚微;易变性/易被破坏;具经验性;均一性的相对性。 预处理需注意的条件:⑴温度尽可能低⑵提取液的量要保证“充分浸入”⑶加入足量酚类吸附剂⑷加入足量氧化酶抑制剂⑸搅拌转速要恰当⑹pH控制在合适范围,一般5.5~7

细胞的破碎:用一定方法(机械/物理/化学/酶法)打开细胞壁或膜,使细胞内含物有效释放出来。 挤压:微生物细胞在高压下通过一个狭窄的孔道高速冲出,因突然减压而引起一种空穴效应,使细胞破碎。 沉淀:溶液中溶质由液相变成固相析出的过程。本质:通过改变条件使胶粒发生聚结,降低其在液相中的溶解度,增加固相中的分配率。作用:分离、澄清、浓缩、保存 盐溶:低浓度中性盐离子对蛋白质分子表面极性基团及水活度的影响,增加蛋白质与溶剂相互作用力,使其溶解度增大。 盐析:中性盐浓度增至一定时,水分子定向排列,活度大大减少,蛋白质表面电荷被中和,水膜被破坏,从而聚集沉淀。 有机溶剂沉淀法:使溶液的介电常数大大降低,从而增加带电粒子自身之间的作用力,易聚集沉淀;争夺酶、蛋白质等物质表面的水分子,破坏水化层,使分子易碰聚产生沉淀。 沉淀条件讨论:1. 温度;2. pH ;3. 浓度;4. 离子强度;5. 有机溶剂的选择;6. 多价阳离子的影响;7. 溶剂用量 膜分离或膜过滤定义:用天然或人工合成高分子薄膜,以外界能量或化学位差为推动力,对两个或两个以上组分的溶质和溶剂进行分离、提纯和富集的方法。 膜:两相之间的一个不连续区间,是隔开两种流体的一个薄的阻挡层。 膜分离的特点:过程为常温过程;不发生相变;密闭系统中进行;产品不受污染;选择性好;适应性强;实现自动化操作。

生化分离技术原理及应用复习提纲

《生物分离工程》 复习题 1、什么是等电点沉淀? 调节溶液的 pH至溶质的等电点,溶质所带净电荷为零时,其分子间的吸引力增加,分子相互吸引,把该溶质从溶液中沉淀出来,即等电点沉淀 2、什么是微滤? 微滤(micfiltation,MF)是以多孔细小薄膜为过滤介质,靠膜两侧的压力差来对物质进行选择性透过,达到膜分离的目的。微滤膜的孔径分布范围在0.05? 10um之间;采用的压力一般在0.05?0.5MPa范围内。 3、什么是超滤? 超滤(ultafiltationUF)是利用膜两侧的压力差为动力将分子有选择地透过膜的过程,透过膜的分子除溶剂水外,还可以将溶质中的小分子(如无机盐等)通过膜,因此它属于一种“膜分离”过程。超滤的分离介质与微滤膜类似,但孔径更小,为0 001?0.05um,采用的压力常为0.1?1.0MPa。 4、什么是反萃取? 反萃取(backextraction):将萃取液和反萃取剂(含无机酸或碱的水溶液、水等)相接触,使某种被萃取到有机相的溶质转人水相,可看作是萃取的逆过程。 5、什么是溶剂萃取 溶剂萃取:利用物质在互不相溶的两相溶剂中溶解度的不同,将物质从一相溶剂转移到另一相溶剂中,从而进行分离、浓缩和提纯目的产物的方法. 6、什么是色谱技术? 色谱技术是一组相关分离方法的总称,色谱柱的一般结构含有固定相和流动相,根据物质在两相间的分配行为不同,经过多次分配(吸附-解吸-吸附-解吸…),达到分离的目的。 7、什么是膜分离技术? 膜分离技术利用膜的选择性(孔径大小),以膜的两侧存在的能量差作为推动力,由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。

生化分离技术思考题答案解析(1-6章)

生化分离技术思考题答案解析 生化分离第一章 1. 简述生化分离技术在生物技术中的地位和主要作用。 2.生化分离技术的主要种类及特点。 种类:细胞破碎(cell disruption) 、沉淀分离(precipitation) 膜过滤(membrane filtration) 层析分离(chromatography)、电泳分离(electrophoresis)、离心分离(centrifugation) 特点:成分复杂、含量甚微、易变性,破坏、具经验性、均一性的相对性 3.何谓生化分离技术的集成化概念?请举例加以说明。1) 利用已有的和新近开发的生化分离技术,将下游过程中的有关单元进行有效组合(集成) 2) 或把两种以上的分离技术合成为一种更有效的分离技术,达到提高产品收率、降低过程能耗和增加生产效益的目标。如膜过滤与亲和配基、离子交换基团相结合,形成了亲和膜过滤技术、亲和膜色谱、离交膜色谱;亲和配基和聚合物沉淀作用相结合,形成亲和沉淀技术等等。(P5) 4.说明生化分离的主要步骤并指出胞内产物和胞外产物的分离纯化流程不同之处。 1选材,来源丰富,含量相对较高,杂质尽可能少 2.提取:将目的物从材料中以溶解状态释放出来,方法与存在部位及状态有关。 3.分离纯化:核心操作,须据目的物的理化性质,生物学性质及具体条件定。 4.浓缩、结晶、干燥。5、保存。整个过程应有快速灵敏准确的分析方法来衡量效果(收率、纯度)。胞内产物需要破壁的过程:需要将目的物从胞内转移到外界溶液中,需要细胞提取物破碎、匀浆、离心,如果是液体的话,获得提取液,如果是想获得固体目的物,就对沉淀进行洗涤再获得提取物。 生化分离第二章 1、简要说明常用细胞破碎的主要方法、原理、特点、适用范围及细胞破碎今后的发展方向。答:常用的细胞破碎方法有:组织捣碎、珠磨法、高速匀浆法、挤压法、超声破碎法、酶溶法、化学渗透法、干燥法等。 1 组织捣碎,其原理是利用机械运动产生剪切力的作用破细胞,利用高速旋转的叶片所产生的剪切力将组织细胞破碎。(10000~20000r/min);适用范围:动植物组织。 2 珠磨法,工作原理是:进入珠磨机的细胞悬浮液与极细的玻璃小珠、石英砂、氧化铝等研磨剂(直径小于1mm)一起快速搅拌或研磨,研磨剂、珠子与细胞之间相互剪切、碰撞,使细胞破碎,释放出内含物;特点:一般可以达到较高的破碎率,但同时为控制温度,冷耗能耗较高,成本亦随之增加;适用范围:微生物(细菌)与植物细胞。 3 高速匀浆法,工作原理:利用高压使细胞悬浮液通过针性阀,由于突然减压和高速冲击撞击环使细胞破裂;特点:破碎程度较高,而其机械剪切力对生物大分子的破坏较少,处理量大;适用范围:较柔软、易分散的组织细胞。 4 挤压法,工作原理:微生物细胞在高压下通过一个狭窄的孔道高速冲出,因突然减压而引起一种空穴效应,使细胞破碎;适用范围:细菌(革兰氏阴性菌) 5 超声破碎法,工作原理:声频高于15-20kHz的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎,破碎机理不详,可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有关,空化现象是在强声波作用下,气泡形成、胀大和破碎的现象;特点:多采用短时多次处理样品,且由于过程产热较多,常在冰浴中进行超声;处理少量样品,操作简便,液量损失少;适用范围:微生物细胞。 6 酶溶法,又分为外加酶和自溶两种,外加酶原理:用生物酶将细胞壁核细胞膜消化溶解;

生物化学期末考试试题及答案_

《生物化学》期末考试题 A 一、判断题(15个小题,每题1分,共15分) 同电荷 2、糖类化合物都具有还原性 ( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体,是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。 ( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。 ( ) 6、非竞争性抑制作用时,抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。 ( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收,预防佝偻病。 ( ) 8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。 ( ) 9、血糖基本来源靠食物提供。 ( ) 10、脂肪酸氧化称β-氧化。 ( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。 ( ) 12、构成RNA的碱基有A、U、G、T。 ( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。 ( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。 ( ) 15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将激素信号传递发挥其生物() ( )

A、麦芽糖 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、香菇多糖 2、下列何物是体内贮能的主要形式 ( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、脂酰甘油 3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个: ( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基酸 E、以上都不是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是 ( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改 E、对正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物是: ( ) A、tRNA B、mRNA C、rRNA D、多肽链E、DNA 6、物质脱下的氢经NADH呼吸链氧化为水时,每消耗1/2分子氧可生产ATP分子数量( ) A、1B、2 C、3 D、4. E、5 7、糖原分子中由一个葡萄糖经糖酵解氧化分解可净生成多少分子ATP? ( ) A、1 B、2 C、3 D、4 E、5 8、下列哪个过程主要在线粒体进行 ( ) A、脂肪酸合成 B、胆固醇合成 C、磷脂合成 D、甘油分解 E、脂肪酸β-氧化 9、酮体生成的限速酶是 ( ) A、HMG-CoA还原酶 B、HMG-CoA裂解酶 C、HMG-CoA合成酶 D、磷解酶 E、β-羟丁酸脱氢酶 10、有关G-蛋白的概念错误的是 ( ) A、能结合GDP和GTP B、由α、β、γ三亚基组成 C、亚基聚合时具有活性 D、可被激素受体复合物激活 E、有潜在的GTP活性 11、鸟氨酸循环中,合成尿素的第二个氮原子来自 ( ) A、氨基甲酰磷酸 B、NH3 C、天冬氨酸 D、天冬酰胺 E、谷氨酰胺 12、下列哪步反应障碍可致苯丙酮酸尿症 ( ) A、多巴→黑色素 B、苯丙氨酸→酪氨酸 C、苯丙氨酸→苯丙酮酸 D、色氨酸→5羟色胺 E、酪氨酸→尿黑酸 13、胆固醇合成限速酶是: ( ) A、HMG-CoA合成酶 B、HMG-CoA还原酶 C、HMG-CoA裂解酶

生化分离技术复习题

生化分离技术复习题 一、填空题 1. 生化分离过程主要包括四个方面:、、、产品加工。 2. 发酵液常用的固液分离方法有和等。 3. 膜分离过程中所使用的膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为、超滤膜、纳滤膜和; 4. 离子交换分离操作中,常用的洗脱方法有和。 5. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其的不同。 6. 典型的工业过滤设备有和。 7. 常用的蛋白质沉析方法有、和有机溶剂沉淀。 8. 离子交换树脂由、和可交换离子组成。 9. 超临界流体的特点是与气体有相似的,与液体有相似 的。 二、单选题 1.供生产生物药物的生物资源不包括() A. 动物 B. 植物 C. 微生物 D. 矿物质 2.下列哪个不属于初步纯化:( ) A. 沉淀法 B. 吸附法 C. 亲和层析 D. 萃取法 3.HPLC是哪种色谱的简称()。 A. 离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱 4.其他条件均相同时,优先选用那种固液分离手段() A. 离心分离 B. 过滤 C. 沉降 D. 超滤 5.适合小量细胞破碎的方法是() A. 高压匀浆法 B. 超声破碎法 C. 高速珠磨法 D. 高压挤压法 6.有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为() A. 乙酸乙酯 B. 正丁醇 C. 苯 D. 丙酮 7.液-液萃取时常发生乳化作用,如何避免() A. 剧烈搅拌 B. 低温 C. 静止 D. 加热

8.盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点是() A.分辨率高B.变性作用小C.杂质易除D.沉淀易分离 9.工业上常用的过滤介质不包括() A. 织物介质 B. 堆积介质 C. 多孔固体介质 D. 真空介质 10.哪一种膜孔径最小() A. 微滤 B. 超滤 C. 反渗透 D. 纳米过滤 11.用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是() A. 离子交换色谱 B. 亲和色谱 C. 凝胶过滤色谱 D. 反相色谱 12.“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质() A.极性溶剂B.非极性溶剂C.水D.溶剂 13.下列细胞破碎的方法中,哪个方法属于非机械破碎法( ) A. 化学法 B. 高压匀浆 C. 超声波破碎 D. 高速珠磨 14.离子交换树脂适用()进行溶胀 A. 水 B. 乙醇 C. 氢氧化钠 D. 盐酸 15.使蛋白质盐析可加入试剂() A. 氯化钠 B. 硫酸 C. 硝酸汞 D. 硫酸铵 16.超临界流体萃取法适用于提取() A. 极性大的成分 B. 极性小的成分 C. 离子型化合物 D. 能气化的成分 17.最常用的干燥方法有() A. 常压干燥 B. 减压干燥 C. 喷雾干燥 D. 以上都是 18.分子筛层析指的是() A. 吸附层析 B. 分配层析 C. 凝胶过滤 D. 亲和层析 19.为加快过滤效果通常使用() A. 电解质 B. 高分子聚合物 C. 惰性助滤剂 D. 活性助滤剂 20.影响电泳分离的主要因素() A. 光照 B. 待分离生物大分子的性质 C. 湿度 D. 电泳时间 21.发酵液的预处理方法不包括() A. 加热 B. 絮凝 C. 离心 D. 调pH

生物化学期末考试试题及答案

《生物化学》期末考试题 A 1、蛋白质溶液稳定的主要因素是蛋白质分子表面形成水化膜,并在偏离等电点时带有相同电荷 2、糖类化合物都具有还原性 ( ) 3、动物脂肪的熔点高在室温时为固体,是因为它含有的不饱和脂肪酸比植物油多。( ) 4、维持蛋白质二级结构的主要副键是二硫键。 ( ) 5、ATP含有3个高能磷酸键。 ( ) 6、非竞争性抑制作用时,抑制剂与酶结合则影响底物与酶的结合。 ( ) 7、儿童经常晒太阳可促进维生素D的吸收,预防佝偻病。 ( ) 8、氰化物对人体的毒害作用是由于它具有解偶联作用。 ( ) 9、血糖基本来源靠食物提供。 ( ) 10、脂肪酸氧化称β-氧化。 ( ) 11、肝细胞中合成尿素的部位是线粒体。 ( ) 12、构成RNA的碱基有A、U、G、T。 ( ) 13、胆红素经肝脏与葡萄糖醛酸结合后水溶性增强。 ( ) 14、胆汁酸过多可反馈抑制7α-羟化酶。 ( ) 15、脂溶性较强的一类激素是通过与胞液或胞核中受体的结合将激素信号传递发挥其生物() 1、下列哪个化合物是糖单位间以α-1,4糖苷键相连: ( ) A、麦芽糖 B、蔗糖 C、乳糖 D、纤维素 E、香菇多糖 2、下列何物是体内贮能的主要形式 ( ) A、硬酯酸 B、胆固醇 C、胆酸 D、醛固酮 E、脂酰甘油

3、蛋白质的基本结构单位是下列哪个: ( ) A、多肽 B、二肽 C、L-α氨基酸 D、L-β-氨基酸 E、以上都不是 4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是 ( ) A、能加速化学反应速度 B、能缩短反应达到平衡所需的时间 C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改 E、对正、逆反应都有催化作用 5、通过翻译过程生成的产物是: ( ) A、tRNA B、mRNA C、rRNA D、多肽链E、DNA 6、物质脱下的氢经NADH呼吸链氧化为水时,每消耗1/2分子氧可生产ATP分子数量( ) A、1B、2 C、3 D、4. E、5 7、糖原分子中由一个葡萄糖经糖酵解氧化分解可净生成多少分子ATP? ( ) A、1 B、2 C、3 D、4 E、5 8、下列哪个过程主要在线粒体进行 ( ) A、脂肪酸合成 B、胆固醇合成 C、磷脂合成 D、甘油分解 E、脂肪酸β-氧化 9、酮体生成的限速酶是 ( ) A、HMG-CoA还原酶 B、HMG-CoA裂解酶 C、HMG-CoA合成酶 D、磷解酶 E、β-羟丁酸脱氢酶 10、有关G-蛋白的概念错误的是 ( ) A、能结合GDP和GTP B、由α、β、γ三亚基组成 C、亚基聚合时具有活性 D、可被激素受体复合物激活 E、有潜在的GTP活性 11、鸟氨酸循环中,合成尿素的第二个氮原子来自 ( ) A、氨基甲酰磷酸 B、NH3 C、天冬氨酸 D、天冬酰胺 E、谷氨酰胺 12、下列哪步反应障碍可致苯丙酮酸尿症 ( )

生化分离技术精彩试题及问题详解

理工成教院期终考试 《生化分离技术》试卷A试卷 教学站年级班级学号 一、填空题(每空1分,共21分)。 1、生化分离是从生物材料、微生物的发酵液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关生化产品的过程,一般采用如下工艺流程:发酵液→()→细胞分离→(细胞破碎→细胞碎片分离)→()→()→成品加工。 2、提取的产物在细胞,选用细胞破碎法;在细胞膜附近则可用细胞破碎法;提取的产物与细胞壁或膜相结合时,可选用机械法和化学法相结合的细胞破碎法。 3、发酵液的预处理目的主要包括改变和。 4、典型的工业过滤设备有和。 5、反萃取是将目标产物从转入的过程。 6、超临界流体萃取的溶剂可分为非极性和极性溶剂两种,常用的极性溶剂有和 、非极性有。 7、按膜的孔径的大小分类,可将膜分为、、 和等。 8、冻干操作过程包括:、和。 二、判断题(每题1分,共15分) 1、盐析是指向蛋白质溶液中加入某些浓的中性盐后,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,以达到分离、提纯生物大分子的目的。() 2、常用的盐析剂有葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺、明胶等。() 3、萃取是利用化合物在两种互不相容的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂转移到另一种溶剂中,经过反复多次的萃取,将绝大部分化合物提取出来的方法。 () 4、双水相萃取的体系的两相是不含有水分的。() 5、膜分离操作中,所有溶质均被透过液传送到膜表面上,不能完全透过膜的溶质受到膜的截留作用,在膜表面附近浓度升高,这种现象叫做浓差极化。()

6、凝胶色谱是利用不同生物分子的电离能力不同而达到物质分离目的的。() 7、离子交换色谱是利用不同分子的大小不同而达到物质分离目的的。() 8、亲和色谱是利用生物分子之间的亲和力的不同而达到物质分离目的的。() 9、要增加目的物的溶解度,往往要在目的物的等电点附近进行提取。() 10、蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。 ()11、蛋白质为两性电解质,改变pH可以改变其电荷性质,pH大于pI,蛋白质带正电荷。 12、丙酮沉析作用小于丙酮。() 13、真空冷冻干燥的操作条件是高温低压,所以适合于干燥热敏性物质。() 14、生产氨基酸类药物主要的生产方法有蛋白质水解法、微生物发酵法、酶工程法和化学合成法。()15、DNA、RNA是核苷酸类物质,胱氨酸和谷氨酸属于蛋白质类物质。() 三、选择题(1—8为单选,每题2分,9—13为多选,每题3分,共31分)。 1、发酵液的预处理方法不包括() A、加热 B、絮凝 C、离心 D、调节pH 2、下列细胞破碎的方法中,属于非机械破碎法的是() A、化学法 B、高压匀浆法 C、超声波破碎法 D、高速球磨法 3、在萃取操作中,下列哪项不是选择溶剂的原则() A、较高的选择性 B、较高的沸点 C、较强的溶解能力 D、易于回收 4、使蛋白质盐析,可加入试剂() A、盐酸 B、硫酸 C、硝酸汞 D、硫酸铵 5、在一个完整的萃取过程中,常常在萃取和反萃取的过程中增加洗涤操作,目的是()。 A、除去与目标产物同时萃取到有机相的杂质C、增大目标产物在水相中的分配系数 B、增大目标产物在有机相中的溶解度D、增大选择性系数。 6、萃取中利用相似相溶的原理进行萃取的过程称为() A、反萃取 B、物理萃取 C、化学萃取 D、有机溶剂萃取 7、盐析法沉淀蛋白质的原理是() A、降低蛋白质的介电常数C、与蛋白质结合形成不溶性蛋白

生化分离工程复习题2及答案

生化分离工程复习题 一、填空题 1. 生化分离过程主要包括四个方面:预处理、细胞分离、纯化、产品加工。 2. 发酵液常用的固液分离方法有沉淀法和结晶法等。 3. 膜分离过程中所使用的膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为微滤膜、超滤膜、纳滤膜和反渗透膜; 4. 离子交换分离操作中,常用的洗脱方法简单洗脱和梯度洗脱。 5. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其各种蛋白质等电点 的不同。 6. 典型的工业过滤设备有板框压滤机和转筒真空过滤机。 7. 常用的蛋白质沉析方法有盐析法、等电点沉淀和有机溶剂沉淀。 8. 离子交换树脂由载体、活性基团和可交换离子组成。 9. 超临界流体的特点是与气体有相似的扩散性能,与液体有相似的密度。 二、单选题 1.供生产生物药物的生物资源不包括( D ) A. 动物 B. 植物 C. 微生物 D. 矿物质 2.下列哪个不属于初步纯化:( C ) A. 沉淀法 B. 吸附法 C. 亲和层析 D. 萃取法 3.HPLC是哪种色谱的简称( C )。 A. 离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱 4.其他条件均相同时,优先选用那种固液分离手段( B ) A. 离心分离 B. 过滤 C. 沉降 D. 超滤 5.适合小量细胞破碎的方法是( C ) A. 高压匀浆法 B. 超声破碎法 C. 高速珠磨法 D. 高压挤压法 6.有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为( D ) A. 乙酸乙酯 B. 正丁醇 C. 苯 D. 丙酮 7.液-液萃取时常发生乳化作用,如何避免( D ) A. 剧烈搅拌 B. 低温 C. 静止 D. 加热 8.盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点是( B ) A.分辨率高 B.变性作用小 C.杂质易除 D.沉淀易分离 9.工业上常用的过滤介质不包括( D ) A. 织物介质 B. 堆积介质 C. 多孔固体介质 D. 真空介质 10.哪一种膜孔径最小( C ) A. 微滤 B. 超滤 C. 反渗透 D. 纳米过滤 11.用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是( C ) A. 离子交换色谱 B. 亲和色谱 C. 凝胶过滤色谱 D. 反相色谱 12.“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质( B )A.极性溶剂 B.非极性溶剂 C.水 D.溶剂 13.下列细胞破碎的方法中,哪个方法属于非机械破碎法( A ) A. 化学法 B. 高压匀浆 C. 超声波破碎 D. 高速珠磨 14.离子交换树脂适用( A )进行溶胀 A. 水 B. 乙醇 C. 氢氧化钠 D. 盐酸 15.使蛋白质盐析可加入试剂( D )

生化分离技术试题及答案

浙江理工成教院期终考试 《生化分离技术》试卷A试卷 教学站年级班级学号姓名 一、填空题(每空1分,共21分)。 1、生化分离是从生物材料、微生物的发酵液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关生化产品的过程,一般采用如下工艺流程:发酵液→()→细胞分离→(细胞破碎→细胞碎片分离)→()→()→成品加工。 2、提取的产物在细胞内,选用细胞破碎法;在细胞膜附近则可用细胞破碎法;提取的产物与细胞壁或膜相结合时,可选用机械法和化学法相结合的细胞破碎法。 3、发酵液的预处理目的主要包括改变和。 4、典型的工业过滤设备有和。 5、反萃取是将目标产物从转入的过程。 6、超临界流体萃取的溶剂可分为非极性和极性溶剂两种,常用的极性溶剂有和 、非极性有。 7、按膜的孔径的大小分类,可将膜分为、、 和等。 8、冻干操作过程包括:、和。 二、判断题(每题1分,共15分) 1、盐析是指向蛋白质溶液中加入某些浓的中性盐后,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,以达到分离、提纯生物大分子的目的。() 2、常用的盐析剂有葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺、明胶等。() 3、萃取是利用化合物在两种互不相容的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另一种溶剂中,经过反复多次的萃取,将绝大部分化合物提取出来的方法。 () 4、双水相萃取的体系的两相是不含有水分的。( ) 5、膜分离操作中,所有溶质均被透过液传送到膜表面上,不能完全透过膜的溶质受到膜的截留作用,在膜表面附近浓度升高,这种现象叫做浓差极化。()

6、凝胶色谱是利用不同生物分子的电离能力不同而达到物质分离目的的。() 7、离子交换色谱是利用不同分子的大小不同而达到物质分离目的的。() 8、亲和色谱是利用生物分子之间的亲和力的不同而达到物质分离目的的。() 9、要增加目的物的溶解度,往往要在目的物的等电点附近进行提取。() 10、蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。 ()11、蛋白质为两性电解质,改变pH可以改变其电荷性质,pH大于pI,蛋白质带正电荷。 12、丙酮沉析作用小于丙酮。() 13、真空冷冻干燥的操作条件是高温低压,所以适合于干燥热敏性物质。() 14、生产氨基酸类药物主要的生产方法有蛋白质水解法、微生物发酵法、酶工程法和化学合成法。()15、DNA、RNA是核苷酸类物质,胱氨酸和谷氨酸属于蛋白质类物质。() 三、选择题(1—8为单选,每题2分,9—13为多选,每题3分,共31分)。 1、发酵液的预处理方法不包括() A、加热 B、絮凝 C、离心 D、调节pH 2、下列细胞破碎的方法中,属于非机械破碎法的是() A、化学法 B、高压匀浆法 C、超声波破碎法 D、高速球磨法 3、在萃取操作中,下列哪项不是选择溶剂的原则() A、较高的选择性 B、较高的沸点 C、较强的溶解能力 D、易于回收 4、使蛋白质盐析,可加入试剂() A、盐酸 B、硫酸 C、硝酸汞 D、硫酸铵 5、在一个完整的萃取过程中,常常在萃取和反萃取的过程中增加洗涤操作,目的是()。 A、除去与目标产物同时萃取到有机相的杂质 C、增大目标产物在水相中的分配系数 B、增大目标产物在有机相中的溶解度 D、增大选择性系数。 6、萃取中利用相似相溶的原理进行萃取的过程称为() A、反萃取 B、物理萃取 C、化学萃取 D、有机溶剂萃取 7、盐析法沉淀蛋白质的原理是() A、降低蛋白质的介电常数 C、与蛋白质结合形成不溶性蛋白

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