KCl溶液提取—分光光度法1607

土壤氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定

氯化钾溶液提取-分光光度法

Soil-Determination of ammonium,nitrite and nitrate by extraction

withpotassium chloride solution -spectrophotometric methods

（2012-02-29发布）

1 适用范围

本标准规定了测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的氯化钾溶液提取－分光光度法。

本标准适用于土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定。

当样品量为 40.0 g 时，本方法测定土壤中氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的检出上限分别为0.10 mg/kg、0.15 mg/kg、0.25 mg/kg，测定下限分别 0.40 mg/kg、0.60 mg/kg、1.00 mg/kg。

2 规范性引用文件

3 方法原理

3.1 氨氮

氯化钾溶液提取土壤中的氨氮，在碱性条件下，提取液中的氨离子在有次氯酸根离子存在时与苯酚反应生成蓝色靛酚染料，在630nm 波长具有最大吸收。在一定浓度范围内，氨氮浓度与吸光度值符合朗伯-比尔定律。

3.2 亚硝酸盐氮

氯化钾溶液提取土壤中的亚硝酸盐氮，在酸性条件下，提取液中的亚硝酸盐氮与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料，在波长543nm 波长具有最大吸收。在一定浓度范围内，亚硝酸盐氮浓度与吸光度值符合朗伯-比尔定律。

3.3 硝酸盐氮

氯化钾溶液提取土壤中的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮，提取液通过还原柱，将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，在酸性条件下，亚硝酸盐氮与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料，在波长 543 nm 处具有最大吸收，测定硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量。硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总量与亚硝酸盐氮含量之差即为硝酸盐氮含量。

4 试剂和材料

除非另有注明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为电导率小于 0.2 mS/m（25℃时测定）的去离子水。

4.1 氨氮

4.1.1 浓硫酸：ρ（H2SO4）=1.84 g/ml。

4.1.2 二水柠檬酸钠（C6H5Na3O7·2H2O）。

4.1.3 氢氧化钠（NaOH）。

4.1.4 二氯异氰尿酸钠（C3Cl2N3NaO3·H2O）。

4.1.5 氯化钾（KCl）：优级纯。

4.1.6 氯化铵（NH4Cl）：优级纯

于 105 ℃下烘干 2 h。

4.1.7 氯化钾溶液：c（KCl）=1 mol/L

◎称取 74.55 g 氯化钾（4.1.5），用适量水溶解，移入 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。

4.1.8 氯化铵标准贮备液：ρ（NH4Cl）=200 mg/L

◎称取 0.764 g 氯化铵（4.1.6），用适量水溶解，加入 0.30 ml 浓硫酸（4.1.1），冷却后，移入 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。该溶液在避光、4 ℃下可保存一个月。或直接购买市售有证标准溶液。

4.1.9 氯化铵标准使用液：ρ（NH4Cl）=10.0 mg/L

◎量取 5.0 ml 氯化铵标准贮备液（4.1.8）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。

4.1.10 苯酚溶液

◎称取 70 g 苯酚（C6H5OH）溶于 1000 ml 水中。该溶液贮存于棕色玻璃瓶中，在室温条件下可保存一年。

注：配制苯酚溶液时应避免接触皮肤和衣物。

4.1.11 二水硝普酸钠溶液

◎称取 0.8 g 二水硝普酸钠{Na2[Fe（CN）5NO]·2H2O}溶于1000 ml 水中。该溶液贮存于棕色玻璃瓶中，在室温条件下可保存三个月。

4.1.12 缓冲溶液

◎称取 280 g 二水柠檬酸钠（4.1.2）及 22.0 g 氢氧化钠（4.1.3），溶于 500 ml 水中，移入1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。

4.1.13 硝普酸钠-苯酚显色剂

◎量取 15 ml 二水硝普酸钠溶液（4.1.11）及 15 ml 苯酚溶液（4.1.10）和 750 ml 水，混匀。该溶液用时现配。

4.1.14 二氯异氰尿酸钠显色剂

◎称取 5.0 g 二氯异氰尿酸钠（4.1.4）溶于 1000 ml 缓冲溶液（4.1.12）中，4℃下可保存一个月。

4.2 亚硝酸盐氮

4.2.1 浓磷酸：ρ（H3PO4）=1.71 g/ml。

4.2.2 氯化钾（KCl）：优级纯。

4.2.3 亚硝酸钠（NaNO2）：优级纯

干燥器中干燥 24 h。

4.2.4 氯化钾溶液：c（KCl）=1 mol/L

◎同4.1.7。

4.2.5 亚硝酸盐氮标准贮备液：ρ（NO2-N）=1000 mg/L

◎称取 4.926 g 亚硝酸钠（4.2.3），用适量水溶解，移入 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。该溶液贮存于聚乙烯塑料瓶中，4 ℃下可保存六个月。或直接购买市售有证标准溶液。

4.2.6 亚硝酸盐氮标准使用液Ⅰ：ρ（NO2-N）=100 mg/L

◎量取 10.0 ml 亚硝酸盐氮标准贮备液（4.2.5）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。

4.2.7 亚硝酸盐氮标准使用液Ⅱ：ρ（NO2-N）=10.0 mg/L

◎量取 10.0 ml 亚硝酸盐氮标准使用液Ⅰ（4.2.6）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。

4.2.8 磺胺溶液（C6H8N2O2S）

◎向 1000 ml 容量瓶中加入 600 ml 水，再加入 200 ml 浓磷酸（4.2.1），然后加入80g磺胺。用水定容，混匀。该溶液于 4℃下可保存一年。

4.2.9 盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺溶液

◎称取 0.40 g 盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺（C12H14N2·2HCl）溶于 100 ml 水中。4℃下保存，当溶液颜色变深时应停止使用。

4.2.10 显色剂

◎分别量取 20 ml 磺胺溶液（4.2.8）、20 ml 盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺溶液（4.2.9）、20 ml浓磷酸（4.2.1）于100 ml 棕色试剂瓶中，混合。4℃下保存，当溶液变黑时应停止使用。

4.3 硝酸盐氮

4.3.1 浓磷酸：ρ（H3PO4）=1.71 g/ml。

4.3.2 浓盐酸：ρ（HCl）=1.12 g/ml。

4.3.3 镉粉：粒径 0.3 mm--0.8 mm。

4.3.4 氯化钾（KCl）：优级纯。

4.3.5 硝酸钠（NaNO3）：优级纯

干燥器中干燥 24 h。

4.3.6 亚硝酸钠（NaNO2）：优级纯

同 4.2.3。

4.3.7 氯化铵（NH4Cl）。

4.3.8 硫酸铜（CuSO4.5H2O）。

4.3.9 氨水（NH4OH）：优级纯。

4.3.10 氯化钾溶液：c（KCl）=1 mol/L

同 4.1.7。

4.3.11 硝酸盐氮标准贮备液：ρ（NO3-N）=1000 mg/L

◎称取 6.068 g 硝酸钠（4.3.5），用适量水溶解，移入 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。

该溶液贮存于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六个月。或直接购买市售有证标准溶液。

4.3.12 硝酸盐氮标准使用液Ⅰ：ρ（NO3-N）=100 mg/L

◎量取 10.0 ml 硝酸盐氮标准贮备液（4.3.11）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。

4.3.13 硝酸盐氮标准使用液Ⅱ：ρ（NO3-N）=10.0 mg/L

◎量取 10.0 ml 硝酸盐氮标准使用液Ⅰ（4.3.12）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。

4.3.14 硝酸盐氮标准使用液Ⅲ：ρ（NO3-N）=6.0 mg/L

◎量取 6.0 ml 标准使用液Ⅰ（4.3.12）于 100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时

现配。

4.3.15 亚硝酸盐氮标准贮备液：ρ（NO2-N）=1000 mg/L

同 4.2.5。

4.3.16 亚硝酸盐氮标准中间液：ρ（NO2-N）=100 mg/L

同 4.2.6。

4.3.17 亚硝酸盐氮标准使用液Ⅲ：ρ（NO2-N）=6.0 mg/L

◎量取 6.0 ml 亚硝酸盐氮标准中间液（4.3.16）于100 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。用时现配。

4.3.18 氨水溶液：（1+3）。

4.3.19 氯化铵缓冲溶液贮备液：ρ（NH4Cl）=100 g/L

◎将 100 g 氯化铵（4.3.7）溶于1000 ml 容量瓶中，加入约 800 ml 水，用氨水溶液（4.3.18）调节 pH 值为8.7~8.8，用水定容，混匀。

4.3.20 氯化铵缓冲溶液使用液：ρ（NH4Cl）=10 g/L

◎量取 100 ml 氯化铵缓冲溶液贮备液（4.3.19）于 1000 ml 容量瓶中，用水定容，混匀。

4.3.21 磺胺溶液

同 4.2.8。

4.3.22 盐酸 N-（1-萘基）-乙二胺溶液

同 4.2.9。

4.3.23 显色剂

同 4.2.10。

5 仪器和设备

5.1 分光光度计：具10 mm 比色皿。【721G可见光光度计】

5.2 pH 计：配有玻璃电极和参比电极。【FiveEasyPlus TM FE28 pH计】

5.3 恒温水浴震荡器：振荡频率可达40次/分钟。

【AHYQ?SHA-C 水浴恒温振荡器】

5.4 还原柱：用于将硝酸盐氮还原为亚硝酸盐氮，具体制备方法见附录 C。

5.5 离心机? ：转速可达 3000 r/min，具 100 ml聚乙烯离心管。

【cence?湘仪H1850】

5.6 天平：精度为 0.001 g。

5.7 聚乙烯瓶：500ml，具螺旋盖。或采用既不吸收也不向溶液中释放所测组分的其他容器。

5.8 具塞比色管：20 ml、50 ml、100 ml。

5.9 样品筛：5 mm。

5.10 一般实验室常用仪器和设备。

6 样品

6.1 样品的采集

按照 HJ/T 166 的相关规定采集样品。

6.2 样品的保存

样品采集后应于4 ℃下运输和保存，并在 3 日内分析完毕。否则，应于-20 ℃（深度冷冻）下保存，样品中硝酸盐氮和氨氮可以保存数周。

当测定深度冷冻的硝酸盐氮和氨氮含量时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h 内完成样品解冻、匀质化和提取；如果在 4 ℃下解冻，解冻时间不应超过 48 h。

注 1：为了缩短样品的解冻时间，应在样品被冷冻前，将其敲碎成小颗粒状。

6.3 试样的制备

将采集后的土壤样品去除杂物，手工或仪器混匀，过样品筛。在进行手工混合时应戴橡胶手套。过筛后样品分成两份，一份用于测定干物质含量，测定方法参见HJ 613；另一份用于测定待测组分含量。

6.4 试料的制备

称取 40.0 g 试样（6.3），放入500 ml 聚乙烯瓶中，加入 200 ml 氯化钾溶液（4.1.7），在20±2℃的恒温水浴震荡器中震荡提取 1 h。转移约 60 ml 提取液于 100ml 聚乙烯离心管中，在 3000 r/min 的条件下离心分离10 min。然后将约 50 ml 上清液转移至 100 ml 比色管中，制得试料，待测。

注 2：提取液也可以在 4 ℃下，以静置 4 h 的方式代替离心分离，制得试料。

6.5 空白试料的制备

加入 200 ml 氯化钾溶液于 500 ml 聚乙烯瓶中，按照与试料的制备（6.4）相同步骤制备空白试料。

注 3：试料需要在一天之内分析完毕，否则应在 4 ℃下保存，保存时间不超过一周。

7 分析步骤

7.1 氨氮

7.1.1 校准

分别量取 0、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、3.50 ml 氯化铵标准使用液（4.1.9）于一组100 ml具塞比色管中，加水至 10.0 ml，制备标准系列。氨氮含量分别为0、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、35.0μg。

向标准系列中加入 40 ml 硝普酸钠-苯酚显色剂（4.1.13），充分混合，静置 15 min。然后分别加入 1.00 ml 二氯异氰尿酸钠显色剂（4.1.14），充分混合，在15℃～35℃条件下至少静置 5 h。于630 nm 波长处，以水为参比，测量吸光度。以扣除零浓度的校正吸光度为纵坐标，氨氮含量（μg）为横坐标，绘制校准曲线。

7.1.2 测定

量取 10.0 ml 试料（6.4）至 100 ml 具塞比色管中，按照校准曲线（7.1.1）比色步骤测量吸光度。

注 4：当试料中氨氮浓度超过校准曲线的最高点时，应用氯化钾溶液（4.1.7）稀释试料，重新测定。

7.1.3 空白试验

量取 10.0 ml 空白试料（6.5）至 100 ml 具塞比色管中，按照校准曲线（7.1.1）比

色步骤测量吸光度。

7.2 亚硝酸盐氮

7.2.1 校准

分别量取 0、1.00、5.00 ml 亚硝酸盐氮标准使用液Ⅱ（4.2.7）和 1.00、3.00、6.00 ml亚硝酸盐氮标准使用液Ⅰ（4.2.6）于一组100 ml 容量瓶，加水稀释至标线，混匀，制备标准系列，亚硝酸盐氮含量分别为 0、10.0、50.0、100、300、600 μg。

分别量取 1.00 ml 上述标准系列于一组25ml 具塞比色管中，加入 20 ml 水，摇匀。向每个比色管中加入0.20 ml 显色剂（4.2.10），充分混合，静置 60 min 至 90 min，在室温下显色。于543nm 波长处，以水为参比，测量吸光度。以扣除零浓度的校正吸光度为纵坐标，亚硝酸盐氮含量（μg）为横坐标，绘制校准曲线。

7.2.2 测定

量取 1.00ml 试料（6.4）至 25 ml 比色管中，按照校准曲线（7.2.1）比色步骤测量吸光度。

注5：当试料中的亚硝酸盐氮含量超过校准曲线的最高点时，应用氯化钾溶液（4.1.7）稀释试料，重新测定。

7.2.3 空白试验

量取 1.00ml 空白试料（6.5）至 25 ml 比色管中，按照校准曲线（7.2.1）比色步骤测量吸光度。

7.3 硝酸盐氮

7.3.1 还原柱使用前的准备

打开活塞，让氯化铵缓冲溶液全部流出还原柱。必要时，用水清洗掉表面所形成的盐。再分别用 20ml 氯化铵缓冲溶液使用液（4.3.20）、20ml 氯化铵缓冲溶液贮备液（4.3.19）和20ml 氯化铵缓冲溶液使用液（4.3.20）滤过还原柱，待用。

7.3.2 校准

分别量取 0、1.00、5.00 ml 硝酸盐氮标准使用液Ⅱ（4.3.13）和 1.00、3.00、6.00 ml 硝酸盐氮标准使用液Ⅰ（4.3.12）于一组 100ml 容量瓶中，用水稀释至标线，混匀，制备标准系列，硝酸盐氮含量分别为 0、10.0、50.0、100、300、600μg。

关闭活塞，分别量取 1.00 ml 校准系列于还原柱中。向还原柱中加入 10ml 氯化铵缓冲溶液使用液（4.3.20），然后打开活塞，以1ml/min的流速通过还原柱，用 50ml 具塞比色管收集洗脱液。当液面达到顶部棉花时再加入 20ml 氯化铵缓冲溶液使用液（4.3.20），收集所有流出液，移开比色管。最后用 10ml 氯化铵缓冲溶液使用液（4.3.20）清洗还原柱。

向上述比色管中加入 0.20ml 显色剂（4.3.23），充分混合，在室温下静置 60min 至90min。

于543nm 波长处，以水为参比，测量吸光度。以扣除零浓度的校正吸光度为纵坐标，硝酸盐氮含量（μg）为横坐标，绘制校准曲线。

7.3.3 测定

量取 1.00ml 试料（6.4）至还原柱中，按照校准曲线（7.3.2）步骤测量吸光度。

注：当试料中硝酸盐氮和亚硝酸盐氮的总量超过校准曲线的最高点时，应用氯化钾溶液（4.1.7）稀释试料，重新测定。

7.3.4 空白试验

量取 1.00ml 空白试料（6.5）至还原柱中，按照校准曲线（7.3.2）步骤测量吸光度。

8 结果计算与表示

8.1 结果计算

8.1.1 氨氮

样品中的氨氮含量ω（mg/kg），按照公式（1）进行计算。

ω——样品中氨氮的含量，mg/kg；

m1——从校准曲线上查得的试料中氨氮的含量，μg；

m0——从校准曲线上查得的空白试料中氨氮的含量，μg；

V——测定时的试料体积，10.0 ml；

f ——试料的稀释倍数；

R ——试样体积（包括提取液体积与土壤中水分的体积）与干土的比例系数，ml/g；

按照公式（2）进行计算。

V ES——提取液的体积，200ml；

m s——试样量，40.0g；

d H2O——水的密度，1.0g/ml；

w dm——土壤中的干物质含量，%。

8.1.2 亚硝酸盐氮

样品中亚硝酸盐氮含量ω（mg/kg），按照公式（3）进行计算。

ω——样品中亚硝酸盐氮的含量，mg/kg；

m1——从校准曲线上查得的试料中亚硝酸盐氮的含量，μg；

m0——从校准曲线上查得的空白试料中亚硝酸盐氮的含量，μg；

V——测定时的试料体积，1.00 ml；

f ——试料的稀释倍数；

R ——试样体积（包括提取液体积与土壤中水分的体积）与干土的比例系数，ml/g；

按照公式（2）进行计算。

8.1.3 硝酸盐氮与亚硝酸盐氮总量

样品中硝酸盐氮与亚硝酸盐氮总量的含量ω（mg/kg），按照公式（4）进行计算。

ω——样品中硝酸盐氮与亚硝酸盐氮总量的含量，mg/kg；

m1——从校准曲线上查得的试料中硝酸盐氮与亚硝酸盐氮总量的含量，μg；

m0——从校准曲线上查得的空白试料中硝酸盐氮与亚硝酸盐氮总量的含量，μg；V——测定时的试料体积，1.00 ml；

f ——试料的稀释倍数；

R ——试样体积（包括提取液体积与土壤中水分的体积）与干土的比例系数，ml/g；

按照公式（2）进行计算。

8.1.4 硝酸盐氮

样品中硝酸盐氮含量ω硝酸盐氮（mg/kg），按照公式（5）进行计算：

8.2 结果表示

当测定结果小于 1mg/kg 时，保留两位小数；当测定结果大于等于 1mg/kg 时，保留三位有效数字。

9 精密度和准确度

9.1 氨氮

实验室内对氨氮含量分别为 0.73 mg/kg、1.59 mg/kg、5.69 mg/kg 的土壤样品进行了测定，相对标准偏差分别为 8.41%、4.77%、4.63%。

实验室内对氨氮含量为 1.62 mg/kg 的土壤样品进行了加标分析测定，加标量分别为 40μg和100μg；对氨氮含量为 5.76 mg/kg 的土壤样品进行了加标分析测定，加标量为200μg，实际样品加标回收率为 80.9%~105%。

9.2 亚硝酸盐氮

实验室内对亚硝酸盐氮含量分别为 2.46 mg/kg 、4.09 mg/kg、8.64 mg/kg 的土壤样品进行了测定，相对标准偏差分别为 5.72%、1.66%、1.25%。

实验室内对亚硝酸盐含量为 2.46 mg/kg 的实际土壤样品进行了加标分析测定，加标量为400μg；对亚硝酸盐氮含量为 4.07mg/kg 的实际土壤样品进行了加标分析测定，加标量分别为 100μg 和 360μg；对亚硝酸盐氮含量为 9.04 mg/kg 的实际土壤样品进行了加标分析测定，加标量分别为 200μg 和 600μg，实际样品加标回收率为70.8%~91.7%。

9.3 硝酸盐氮

实验室内对硝酸盐氮含量分别为 1.84 mg/kg、16.2 mg/kg、21.9 mg/kg 的土壤样品进

行了测定，相对标准偏差分别为 6.07%、3.26%、4.18%。

实验室内对硝酸盐氮含量为 1.85 mg/kg 的土壤样品进行了加标分析测定，加标量分别为40μg、80μg；对硝酸盐氮含量为 16.9mg/kg 的土壤样品进行了加标分析测定，加标量分别为300μg、500μg，对硝酸盐氮含量为 21.5mg/kg 的土壤样品进行了加标分析测定，加标量分别为 400μg、600μg，实际样品加标回收率为 81%~114%。

10 质量保证和质量控制

10.1 每批样品至少做一个空白试验，测试结果应低于方法检出限。

10.2 每批样品应测定 10%的平行样品。平行双样测定结果>10.0mg/kg 时，相对偏差应在10%以内，平行双样测定结果≤10.0mg/kg 时，相对偏差应在 20%以内。

10.3 每批样品应测定 10%的加标样品。氨氮加标回收率应在 80%~120%之间；亚硝酸盐氮加标回收率应在 70%~120%之间；硝酸盐氮加标回收率应在 80%~120%之间。

10.4 校准曲线相关系数应≥0.999。

10.5每批样品应分析一个校准曲线的中间点浓度标准溶液，其测定结果与校准曲线该点浓度的相对偏差应≤10%。否则，需重新绘制校准曲线。

10.6 硝酸盐氮还原效率

量取1.00ml 硝酸盐氮标准使用液Ⅲ（4.3.14）和亚硝酸盐氮标准使用液Ⅲ（4.3.17），分别按照7.3.2 步骤进行转化并测定吸光度。测定结果的相对偏差应在 5%以内，否则，应对还原柱中的镉粉进行重新处理。

1-还原柱盖子

2-填充的棉花

3-处理后的镉粉（颗粒直径为0.3mm-0.8mm）4-填充的棉花

尺寸单位：mm。

附图C.1 还原柱示意图

工业循环水中浊度的测定

工业循环水中浊度的测 定 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998

工业循环水中浊度的测定浊度 方法一分光光度法 1）适用范围 本方法适用于天然水、经澄清池预处理的水及循环冷却水的浊度测定，浊度范围为0～40mg/L。 2）测定原理 在水溶液里，六次甲基四胺(CH2)6N4与硫酸肼(NH2)2H2SO4能定量缔结合为不溶于水的大分子盐类混悬液，由于该混悬液条件易于控制，故以此作为浊度标准溶液，便可用分光光度法测得水样的浊度。 3）试剂和仪器 ）试剂 3.1.1）标准浊度储备液（400mg/L） a. 溶液A—称取1.0000g硫酸肼，用水溶解，移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度。 b. 溶液B—称取10.000g六次甲基四胺，用水溶解，移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度。 c. 标准浊度储备液 分别移取溶液A和溶液B各5mL，注入100mL容量瓶中，充分摇匀，在25±3℃下保温静置24小时，用水稀释至刻度，摇匀。该储备液在30℃以下放置，可使用1周。 3.1.2）标准浊度工作液（100mg/L） 准确吸取25mL标准储备液（400mg/L）注入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 ）分光光度计，具3cm比色皿。 ）滤膜过滤器：滤膜孔径μm。 试样准备 样品应收集到具塞玻璃瓶中，取样后尽快测定。如需保存，可保存在暗处不超过24h。测试前需激烈振摇并恢复到室温。 所有与样品接触的玻璃器皿必须清洁，可用盐酸或表面活性剂清洗。 4）分析步骤 ）标准曲线的绘制 ）分别吸取标准浊度工作液（100mg/L），，，，，，，比色管中，用水稀释至刻度，摇匀。 以上各液的浊度分别为：5 mg/L，10 mg/L，15 mg/L，20 mg/L，25 mg/L，30 mg/L，35 mg/L，40 mg/L，45mg/L。 4.1.2）在分光光度计上的420mm处，以水作参比用3cm比色皿，测定上述各液的吸光度。 4.1.3）以吸光度为纵坐标，浊度为横坐标，绘制标准曲线。

分光光度法

第二节分光光度法 (一)基础知识 分类号：P2-O 一、填空题 1．分光光度法测定样品的基本原理是利用朗伯—比尔定律，根据不同浓度样品溶液对光信号具有不同的，对待测组分进行定量测定。 答案：吸光度(或吸光性，或吸收) 2．应用分光光度法测定样品时，校正波长是为了检验波长刻度与实际波长的，并通过适当方法进行修正，以消除因波长刻度的误差引起的光度测定误差。 答案：符合程度 3．分光光度法测定样品时，比色皿表面不清洁是造成测量误差的常见原因之一，每当测定有色溶液后，一定要充分洗涤。可用涮洗，或用浸泡。注意浸泡时间不宜过长，以防比色皿脱胶损坏。 答案：相应的溶剂(1+3)HNO3 二、判断题 1．分光光度计可根据使用的波长范围、光路的构造、单色器的结构、扫描的机构分为不同类型的光度计。( ) 答案：正确 2．应用分光光度法进行试样测定时，由于不同浓度下的测定误差不同，因此选择最适宜的测定浓度可减少测定误差。一般来说，透光度在20％～65％或吸光值在0.2～0.7之间时，测定误差相对较小。( ) 答案：正确 3．分光光度法主要应用于测定样品中的常量组分含量。( ) 答案：错误 正确答案为：分光光度法主要应用于测定样品中的微量组分。 4．应用分光光度法进行样品测定时，同一组比色皿之间的差值应小于测定误差。( ) 答案：错误 正确答案为：测定同一溶液时，同组比色皿之间吸光度相差应小于0.005，否则需进行校正。 5．应用分光光度法进行样品测定时，摩尔吸光系数随比色皿厚度的变化而变化。( ) 答案：错误 正确答案为：摩尔吸光系数与比色皿厚度无关。 三、选择题 1．利用分光光度法测定样品时，下列因素中不是产生偏离朗伯—比

吸收分光光度法

第十章 原子吸收分光光度法 ξ10-1 基本原理 一、概述：1955年发展起来的一种新方法，30多年来发展较快，已成为分析化学中重要的方法。和分光光度法比较，能做微量（ppm ，ppb ，10 -6，10 –9g ）测定70多种金属元素，（3号~84号，镧系元素），还可做常量，所以从常量到ppb 级。 优点：灵敏度高，干扰少，分析不同元素时选用不同元素的灯，提高了分析的选择性，基体和待测元素间影响较少，鉴于这种情况，试样只需简单处理，可直接进行分析，避免复杂的分离和富集手续，低含量的分析中，能达到1~3%的准确度。这是比色及光度法所不能完成的。 缺点：1.换灯，不方便 2.各元素分析条件不同，不利于同时测多种元素。 3.不能分析固体及共振线在真空紫外区的 4.分析复杂样品时，干扰还是比较严重。 为解释清楚分析不同元素时选用不同元素的灯，下面谈一下基本原理。 基本原理：给一束特定的入射光I 0(υ)，投射至被测元素的基态原子蒸气，原子蒸气对它有吸收，未被吸收的部分透过。N 越大，对光的吸收量越大，其I (υ)越小，于是根据样品中被测元素的浓度N ，I 0(υ)，I (υ)三者间存在着一定的关系，并把它与被测元素已知浓度的标准溶液对光的吸收作比较，就求得试样中被测元素的含量。 分析流程：既然原子吸收分析是建立在基态原子对光的吸收的基础上，所以分析流程由光源、原子化系统、分光系统、检测系统等组成。 特径的入射光I 0(υ)：特径谱线——共振线各元素的不同而显其特径性。 产生：①原子核外电子基态E 0， 从基态→激发态的能量 激发态E j λυc h h E E E j ==-=?0 ②电子从基态→第一个激发态（最低能量的），所产生的吸收谱线称共振吸收线。 从第一激发态→基态所产生辐射谱线称共振发射线。 以上统称共振线。 ③共振线：对应于共振能级和基态间跃迁的谱线，所需能量最低，称为最灵敏线。（这是分析所需要的）也是该元素的特径谱线。 因为：各元素的原子结构和外层电子排布不同，不同元素的原子从基态→第一激发态（或返回时）时，吸收（或发射）的能量不同。因此各元素的共振线不同而各有其特径。 例：镁 2852 o A ，铜 3247 o A 二、定量分析公式 1.朗伯定律：b K I I A ?==υυν)() (0lg K υ：原子蒸气对频率为υ的光线的吸收系数，与吸收介质性质和入射光频率有关 b K e I I ??=υυυ)(0)( 说明：①透过光的强度I （υ）随入射光的频率而改变，其变化规律 电磁辐射，原子对其吸收也不同，故I υ ，K υ 与入射光υ变化有关 υ0处有最大吸收，有最小透过。 ②当燃烧器的缝长一定时，b 一定，K (υ)是随入射光的频率而变化。其变化规律： a. a. 原子吸收线有一定的宽度——吸收线轮廓 b. b. 吸收系数有一极大值——υ0称中心 频率：υ0→K 0峰值吸收系数 c. c. 峰值吸收系数一半处，曲线宽度——吸收线半宽度，Δυ0。0.01~0.1o A

原子吸收分光光度法与紫外-可见分光光度法

1．试比较有哪些异同点？ 答： 相同点： 二者都为吸收光谱，吸收有选择性，主要测量溶液，定量公式： A=kc，仪器结构具有相似性． 不同点： 原子吸收光谱法紫外――可见分光光度法 (1)原子吸收分子吸收 (2)线性光源连续光源 (3)吸收线窄，光栅作色散元件吸收带宽，光栅或棱镜作色散元件 (4)需要原子化装置(吸收xx不同)无 (5)背景常有影响，光源应调制 (6)定量分析定性分析、定量分析 (7)干扰较多，检出限较低干扰较少，检出限较低 2．试比较原子发射光谱法、原子吸收光谱法、原子荧光光谱法有哪些异同点？ 答： 相同点： 属于原子光谱，对应于原子的外层电子的跃迁；是线光谱，用共振线灵敏度高，均可用于定量分析． 不同点：

原子发射光谱法原子吸收光谱法原子荧光光谱法 (1)原理发射原子线和离子线基态原子的吸收自由原子(光致发光)发射光谱吸收光谱发射光谱 (2)测量信号发射谱线强度吸光度荧光强度 (3)定量公式lgR=lgA + blgc A=kc If=kc (4)光源作用不同使样品蒸发和激发线光源产生锐线连续光源或线光源 (5)入射光路和检测光路直线直角 (6)谱线数目可用原子线和原子线(少)原子线(少) 离子线(谱线多) (7)分析对象多元素同时测定单元素、多元素 (8)应用可用作定性分析定量分析 (9)激发方式光源有原子化装置 (10)色散系统棱镜或光栅可不需要色散装置 (但有滤光装置) (11)干扰受温度影响严重温度影响较小受散射影响严重 (12)灵敏度高中高 (13)精密度稍差适中 按照电磁辐射的本质，光谱又可分为分子光谱和原子光谱。分子光谱是由于分子中电子能级变化而产生的。原子光谱可分为发射光谱、原子吸收光谱、原子荧光光谱和X-射线以及X-射线荧光光谱。前三种涉及原子外层电子跃迁，后两种涉及内层电子的跃迁。目前一般认为原子光谱仅包括前三种。原子发射光谱分析是基于光谱的发射现象；原子吸收光谱分析是基于对发射光谱的吸收现象；原子荧光光谱分析是基于被光致激发的原子的再发射现象。

实验分光光度法测定铁

实验分光光度法测定铁 The following text is amended on 12 November 2020.

实验十四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量 一、实验目的 1．学习吸光光度法测量波长的选择方法; 2．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法; 3. 掌握分光光度计的使用方法。 二、实验原理 分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法，分光光度法用于定量分析的理论基础是朗伯比尔定律，其数学表达式为：A=εb C 邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。摩尔吸光系数ε＝11000 L·mol-1·cm-1。在显色前，用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+。 2Fe3+＋2NH 2OHHCl→2Fe2+＋N 2 ＋4H＋＋2H 2 O＋2Cl- Fe2+ + Phen = Fe2+ - Phen (橘红色) 用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。 三、仪器与试剂 1．醋酸钠：l mol·L-1； 2．盐酸：6 mol·L-1； 3．盐酸羟胺：10％（用时配制）； 4．邻二氮菲（%）：邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中； 5．铁标准溶液。 (1)100μg·mL-1铁标准溶液：准确称取（NH 4） 2 Fe（SO 4 ） 2 ·12H 2 0于烧杯中， 加入20 mL 6 mol·L-1盐酸及少量水，移至1L容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀. 6．仪器:7200型分光光度计及l cm比色皿。 四、实验步骤 1.系列标准溶液配制 (1)用移液管吸取10mL100μg·mL-1铁标准溶液于100mL容量瓶中，加入2mL 6 mol·L-1盐酸溶液, 以水稀释至刻度，摇匀. 此溶液Fe3+浓度为10μg·mL-1. (2) 标准曲线的绘制: 取50 mL比色管6个，用吸量管分别加入0 mL，2 mL，4 mL, 6 mL, 8 mL和10 mL10μg·mL-l铁标准溶液，各加l mL盐酸羟胺，摇匀; 经再加2mL邻二氮菲溶液, 5 mL醋酸钠溶液，摇匀, 以水稀释至刻度，摇匀后放置 10min。 2.吸收曲线的绘制 取上述标准溶液中的一个, 在分光光度计上，用l cm比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长，从440～560 nm，每隔10 nm测定一次吸光度，在最大吸收波长

浊度的测定

实验二浊度的测定 一、实验目的 1. 学会浊度标准溶液的配制方法； 2. 掌握分光光度法和目视比浊法测定水的浊度的方法。 二、浊度概述 浊度是表现水中悬浮物对光线透过时所发生的阻碍程度。浊度是由于水中含有泥沙、粘土、有机物、无机物、浮游生物和微生物等悬浮物质所造成的，可使光散射或吸收。天然水经过混凝、沉淀和过滤等处理，使水变得清澈。 三、水样的采集与保存 样品收集于具塞玻璃瓶内，应在取样后尽快测定。如需保存，可在4℃冷藏、暗处保存24h，测试前要激烈振摇水样并恢复到室温。 四、测定方法 测定水样浊度可用分光光度法、目视比浊法或浊度计法。 （一）分光光度法 1. 方法原理 在适当温度下，硫酸肼与六次甲基四胺聚合，形成

白色高分子聚合物。以此作为浊度标准液，在一定条件下与水样浊度相比较。 2. 干扰及消除 水样应无碎屑及易沉降的颗粒。器皿不清洁及水中溶解的空气泡会影响测定结果。如在680nm波长下测定，天然水中存在的淡黄色、淡绿色无干扰。 3. 方法的适用范围 本法适用于测定天然水、饮用水的浊度，最低检测浊度为3度。 4. 仪器 50ml比色管，分光光度计。 5. 试剂 （1）无浊度水：将蒸馏水通过0.2m滤膜过滤，收集于用滤过水荡洗两次的烧瓶中。 （2）浊度贮备液 ①硫酸肼溶液：称取 1.000g硫酸肼((NH2)2SO4·H2SO4)溶于水中，定容至100ml。 ②六次甲基四胺溶液：称取10.00g六次甲基四胺((CH2)6N4)溶于水中，定容至100ml。 ③浊度标准溶液：吸取 5.00ml硫酸肼溶液与 5.00ml六次甲基四胺溶液于100ml容量瓶中，混匀。于25℃±3℃下静置反应24h。冷却后用水稀释至标

原子吸收分光光度法

原子吸收分光光度法（附答案） 一、填空题 1. 原子吸收光谱仪由光源、_____、_____和检测系统四部分组成。答案：原子化器分光系统 2. 原子吸收光谱仪的火焰原子化装置包括_____和_____。答案：雾化器燃烧器 3. 火焰原子吸收光谱仪的原子化器的作用是___，用以吸收来自锐线源的___。 答案：产生基态原子共振辐射 4. 火焰原子吸收光度法常用的锐线光源有___、__和蒸气放电灯3种。答案：空心阴极灯无极放电灯 5. 火焰原子吸收光度法分析过程中主要干扰有：物理干扰、化学干扰、_____和_____等。 答案：电离干扰光谱干扰 6. 火焰原子吸收光度法分析样品时，灯电流太高会导致_____和_____，使灵敏度下降。 答案：谱线变宽谱线自吸收 7. 火焰原子吸收光度法中扣除背景干扰的主要方法有：双波长法、_____、 _____和自吸收法。 答案：氘灯法塞曼效应法 8. 火焰原子吸收光度法分析样品时，确定空心阴极灯达到预热效果的标志是观察_____是否稳定、_____是否稳定和灵敏度是否稳定。答案：发射能量仪器的基线 9. 原子吸收光度法分析样品时，物理干扰是指试样在转移、_____和 _____过程中，由于试样的任何物理特性的变化而引起的吸收强度下降的效应。答案：蒸发原子化 10. 火焰原子吸收光度法中光谱干扰是指待测元素_____的光谱与干扰物的_____不能完全分离所引起的干扰。答案：发射或吸收辐射光谱 11. 石墨炉原子吸收光度法分析程序通常有__、__、_和__4个阶段。答案：干燥灰化原子化除残12．石墨炉原子吸收分析阶段，灰化的含义在于___和__的灰化清除，保留分析元素。答案：基体干扰物 13. 石墨炉原子吸收光度法测定样品时，载气流量的大小对_和__有影响。答案：分析灵敏度石墨管寿命 二、判断1. 火焰原子吸收光谱仪中，大多数空心阴极灯一般都是工作电流越小，分析灵敏度越低。( )答案：错误正确答案为：大多数空心阴极灯一般都是工作电流越小，分析灵敏度越高。 2. 火焰原子吸收光谱仪中，分光系统单色器所起的作用是将待分析元素的共振线与光源中的其他发射线分开。( 答案：正确 3. 火焰原子吸收光度法分析中，用10HNO3-HF-HClO4消解试样，在驱赶HClO4时，如将试样蒸干会使测定结果偏高。( 答案：错误正确答案为：在驱赶HClO4时，如将试样蒸干会使测定结果偏低。 4. 火焰原子吸收光度法中，空气-乙炔火焰适于低温金属的测定。（ )答案：正确 5. 火焰原子吸收光度法分析样品时，为避免稀释误差，在测定含量较高的水样时，可选用次灵敏线测量。( )答案：正确 6. 石墨炉原子吸收光度法测定样品时，干燥阶段石墨炉升温过快会使结果偏低。( )答案：正确 7．石墨炉原子吸收光度法适用于元素的痕量分析。( )答案：正确

分光光度法(附答案)

分光光度法（附答案） 一、填空题1. 分光光度法测定样品的基本原理是利用朗伯-比尔定律，根据不同浓度样品溶液对光信号具有不同的_____，对待测组分进行定量测定。答案：吸光度(或吸光性，或吸收) 2. 分光光度法测定样品时，比色皿表面不清洁是造成测量误差的常见原因之一，每当测定有色溶液后，一定要充分洗涤。可用_____涮洗，或用_____浸泡。注意浸泡时间不宜过长，以防比色皿脱胶损坏。 答案：相应的溶剂(1+3)HNO 3 3. 分光光度法测定土壤中总砷时，制备土壤样品过程中，需取过2mm筛的土样，用玛瑙研钵将其研细至全部通过_____mm筛后，备用。答案：0.149 4. 光度法测定森林土壤全磷的样品，在碱熔完成后，应加入_____℃的水溶解熔块，并用硫酸和热水多次洗涤坩埚。答案：80 二、判断题 1. 应用分光光度法进行试样测定时，由于不同浓度下的测定误差不同，因此选择最适宜的测定浓度可减少测定误差。一般来说，透光度在20％~65％或吸光值在0.2~0.7之间时，测定误差相对较小。( ) 答案：正确 2. 分光光度法主要应用于测定样品中的常量组分含量。( ) 答案：错误正确答案为：分光光度法主要应用于测定样品中的微量组分。 3. 应用分光光度法进行样品测定时，同一组比色皿之间的差值应小于测定误差。( ) 答案：错误正确答案为：测定同一溶液时，同组比色皿之间吸光度相差应小于0.005，否则需进行校正。4. 应用分光光度法进行样品测定时，摩尔吸光系数随比色皿厚度的变化而变化。( ) 答案：错误正确答案为：摩尔吸光系数与比色皿厚度无关。 5. 分光光度法测定土壤中总砷时，在样品中加入酸，并在电热板上加热，目的是分解有机物和氧化样品中各种形态存在的砷，使之成为可溶态的砷。（）答案：正确 6. 分光光度法测定土壤中总砷时，应直接称取新鲜的土样进行测定。（）答案：错误正确答案为：应称取风干或冷冻干燥的样品测定。 7. 分光光度法测定土壤样品中总砷时，有机物会干扰测定，应加酸并加热分解，以消除其于扰。（） 答案：正确 8. 硼氢化钾-硝酸银分光光度法测定土壤中总砷时，样品消解过程中所加的酸分别是盐酸、硝酸和磷酸。（）答案：错误正确答案为：样品消解所加的酸分别是盐酸、硝酸和高氯酸。 9. 分光光度法测定生活垃圾或土壤中砷时，若所用试剂中含有少量氰化物，可用乙酸铅脱脂棉吸收去除。（）答案：错误正确答案为：乙酸铅脱脂棉吸收去除的是试剂中的硫化物。 10. 光度法测定土壤中全氮时，如需提供烘干基含量，则应测定土壤水分，并进行折算。（答案：正确 11. 光度法测定土壤中包括硝态和亚硝态氮的全氮时，若铁粉中含有大量的碳会干扰测定，所以在选择时应注意。（）答案：错误正确答案为：若铁粉含有大量的氮会干扰测定，所以在选择时应注意。

植物磷含量的测定(钼锑抗比色法)

植物磷含量的测定（钼锑抗比色法） 一、实验目的 1．掌握钼锑抗比色法测定磷的方法。 2．练习实际测量以及定容的操作。 3．练习分光光度计的使用。 二、实验原理 植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸光光度法测定。 三、实验试剂 （1）2mol/L NaOH溶液 （2）0.2%二硝基酚指示剂 （3）0.5mol/L H2SO4硫酸溶液:28mL浓H2SO4加水稀释至1L。 （4）钼锑贮存溶液：量取153ml浓硫酸(分析纯，密度1.84g/ml)，缓缓加入到400ml蒸馏水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·H2O，分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入0.5％酒石酸锑钾[KSbOC4H4O6·1/2H2O，分析纯]溶液100ml，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1％，硫酸2.75mol/L。 （5）钼锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随配随用。 （6）5mg/L磷标准溶液：0.4394g在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。分析纯)，100ml水，加5ml浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。 四、实验步骤 1、吸取定容过滤或澄清后的消煮液2.00～5.00ml(V2,含P5～30ug)于50ml 容量瓶中, 用水稀释至约20ml,加1～2滴二硝基酚指示剂,滴加2mol/L NaOH溶液中和至刚呈黄色,再加入1滴0.5mol/L H2SO4溶液,使溶液的黄色刚刚褪去呈

分光光度法(附答案)

分光光度法（附答案） 一、填空题 1. 分光光度法测定样品的基本原理是利用朗伯-比尔定律，根据不同浓度样品溶液对光信号具有不同的_____，对待测组分进行定量测定。答案：吸光度(或吸光性，或吸收) 2. 分光光度法测定样品时，比色皿表面不清洁是造成测量误差的常见原因之一，每当测定有色溶液后，一定要充分洗涤。可用_____涮洗，或用_____浸泡。注意浸泡时间不宜过长，以防比色皿脱胶损坏。 答案：相应的溶剂(1+3)HNO3 3. 分光光度法测定土壤中总砷时，制备土壤样品过程中，需取过2mm筛的土样，用玛瑙研钵将其研细至全部通过_____mm筛后，备用。答案： 4. 光度法测定森林土壤全磷的样品，在碱熔完成后，应加入_____℃的水溶解熔块，并用硫酸和热水多次洗涤坩埚。答案：80 二、判断题 1. 应用分光光度法进行试样测定时，由于不同浓度下的测定误差不同，因此选择最适宜的测定浓度可减少测定误差。一般来说，透光度在20％ 65％或吸光值在之间时，测定误差相对较小。( ) 答案：正确 2. 分光光度法主要应用于测定样品中的常量组分含量。( ) # 答案：错误正确答案为：分光光度法主要应用于测定样品中的微量组分。 3. 应用分光光度法进行样品测定时，同一组比色皿之间的差值应小于测定误差。( ) 答案：错误正确答案为：测定同一溶液时，同组比色皿之间吸光度相差应小于，否则需进行校正。 4. 应用分光光度法进行样品测定时，摩尔吸光系数随比色皿厚度的变化而变化。( ) 答案：错误正确答案为：摩尔吸光系数与比色皿厚度无关。 5. 分光光度法测定土壤中总砷时，在样品中加入酸，并在电热板上加热，目的是分解有机物和氧化样品中各种形态存在的砷，使之成为可溶态的砷。（）答案：正确 6. 分光光度法测定土壤中总砷时，应直接称取新鲜的土样进行测定。（）答案：错误正确答案为：应称取风干或冷冻干燥的样品测定。 7. 分光光度法测定土壤样品中总砷时，有机物会干扰测定，应加酸并加热分解，以消除其于扰。（） 答案：正确 8. 硼氢化钾-硝酸银分光光度法测定土壤中总砷时，样品消解过程中所加的酸分别是盐酸、硝酸和磷酸。（） > 答案：错误正确答案为：样品消解所加的酸分别是盐酸、硝酸和高氯酸。 9. 分光光度法测定生活垃圾或土壤中砷时，若所用试剂中含有少量氰化物，可用乙酸铅脱脂棉吸收去除。（）答案：错误正确答案为：乙酸铅脱脂棉吸收去除的是试剂中的硫化物。

总磷的测定(钼锑抗分光光度法

一、工作原理 在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵、酒石酸锑氧钾反应，生成酸木杂多酸，被还原剂抗坏酸还原，则变成蓝色配合物，通常称钼蓝。 二、水样预处理 取25.0ml混匀水样于50ml具塞刻度管中，加过硫酸钾溶液4ml，加塞后管口包一小块纱布并用线扎紧，以免加热时玻璃塞冲出。将具塞刻度管放在大烧杯中，置于高压蒸汽消毒2 器中加热，待锅内压力达1.1kgf/cm时，调节电炉温度使保持此压力30min 后，停止加热，待压力表指针降至零后，取出放冷。 试剂空白和标准溶液系列也经同样的消解操作。 三、方法适用范围 本方法最低检出浓度为0.01mg/L（吸光度A=0.01时所对应的浓度）；测定上限为 0.06mg/L。 可适用于测定地表水、生活污水及化工、磷肥、机加工金属表面磷化处理、农药、钢铁、焦化等行业的工业废水中的正磷酸盐。 四、仪器 1、分光光度计 2、50ml（磨口）具塞刻度管。 五、试剂 1、1+1硫酸。 2、10％抗坏血酸溶液溶解10g抗坏血酸于水中，并稀释至100ml。该溶液贮存在棕色玻璃瓶中，在约4℃可稳定几周。如颜色变黄，则弃去重配。

3、钼酸盐溶液溶解13g钼酸铵[(NH?)6Mo7O24·4H?O]于100ml水中。溶解0.35g酒石酸锑氧钾[K(SbO)C?H?O6·?H?O]于100ml水中。 在不断搅拌下，将钼酸铵溶液徐徐加到300ml1+1硫酸中，加酒石酸锑氧钾溶液平且混合均匀，贮存在棕色的玻璃瓶中约4℃保存，至少稳定两个月。 4、浊度-色度补偿液混合两份体积的1+1硫酸和一份体积的10％抗坏血酸溶液。此溶液当天配制。 5、磷酸盐贮备溶液将优级纯磷酸二氢钾（KH?PO?）于110℃干燥2h，在干燥器中放冷，称取0.2197g溶于水中，移入1000mlml容量瓶中。加1+1硫酸 5ml，用水稀释至标线。 此溶液每毫升含50.00μg磷（以P计）。 6、磷酸盐标准溶液吸取10.00ml磷酸贮备液于250ml容量瓶，用水稀释至标线，此溶液每毫升含2.00μg磷，临用时现配。 六、测定步骤 ⑴校准曲线的绘制取数支50ml具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用溶液 0、0.50ml、 1.00ml、3.00ml、5.00ml、10.0ml、15.0ml，加水至50ml。①显色向比色管中加入1ml10％抗坏血酸溶液，混匀。30s后加2ml钼酸盐溶液充分混匀，放置15min。 ②测量用10mm或30mm比色管，于700nm波长，以零浓度溶液为参比，测量吸光度。 ⑵样品测定分取适量经滤膜过滤或消解的水样（使含磷量不超过30μg）加入50ml比色管中，用水稀释至标线。以下按绘制校准曲线的步骤进行显色和测量。减去空白试验的吸光度，并从校准曲线上查出含磷量。 七、结果计算 磷酸盐（P，mg/L）=m/V

原子吸收分光光度法

新疆医科大学卫生化学教学大纲供预防医学类专业用） 编写者：哈及尼沙 药学院分析/ 药分教研室 2012年12月

I 前言 课程名称：卫生化学英文名称：Sanitary Chemistry 课程类别：专业基础课（必修） 面向专业：预防医学专业（本科）选用教材：《卫生化学》（第六版），郭爱民主编出版单位：人民卫生出版社 学时：54 学时（理论课36 学时，实验课18 学时） 卫生化学（Sanitary chemistry）是高等医学教育预防医学专业学生必修的专业基础课。是探讨和研究预防医学中所需要的检验方法、理论和新分析技术的一门学科。其主要任务是为学生讲授专业课和生产实习所必需的分析课学基础理论、基本知识及基本技能。在医学教育中，卫生化学与分析化学、仪器分析和统计学等前期基础课程有着密切联系，并为环境卫生学、营养与食品卫生学、劳动卫生学及流行病学等后期专业课程提供基础理论和相关知识。 本大纲适用于预防医学类专业五年制汉、民族本科学生使用。现将大纲使用中有关问题说明如下： 1、为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容与教学要求级别对应，并统一标示（重点掌握内容下画实线，熟悉内容下画虚线，一般内容不作标示）便于学生重点学习。 2、教师在保证大纲核心内容的前提下，可根据本专业的要求与教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。 3、总教学参考学时为54 学时，分12 周，理论与实验比值2:1，即讲课36 学时，实验18 学时。 II正文 第一章绪论 一、教学目的：通过本章学习，了解卫生化学的性质及发展，掌握卫生化学中分析方法的分类与作用，熟悉卫生化学的基本内容、相关参考书和文献。 二、教学要求 1、了解卫生化学的学科性质。

分光光度法测定氯

分光光度法测定氯 文章介绍了盐碱土壤氯的分光光度分析方法，在酸性介质中，氯离子能取代硫氰酸汞中的硫氰酸根，加入铁盐，使与游离的硫氰酸根作用，生成橙红色配合物，借以间接测定氯含量。方法的检出限为35μg/g，精密度RSD在2.1%-5.1%之间，加标回收率99.1-101.3，通过实际样品分析，结果令人满意。 标签：分光光度法；氯；盐碱土壤 引言 吉林省农业地质调查项目涉及西部地区大面积盐碱化土壤，盐碱土分布面积4403km2，集中分布于大安市、通榆县、长岭县、扶余、镇赉、农安等地。有的盐碱土氯含量较高，最高达1%。而农业地质调查中氯多用X射线荧光光谱法分析，最高测至1000μg/g氯，因而根据工作需要，我们对盐碱性土壤进行氯的分析实验，采用分光光度法测定高含量氯。岩石、土壤中氯的分光光度法有报道，但盐碱土中氯分光光度分析报道很少。通过实验确定了分析方法的分析条件及操作方法。 1 实验部分 1.1 主要试剂和仪器 所用的水（不管是蒸馏水或去离子水）都需经检查确定无氯离子后方可使用。 氢氧化钠高氯酸（70%）硫氰酸汞乙醇饱和溶液：取 1.5g硫氰酸汞溶于500mL无水乙醇中，剧烈振荡后（最好放置过夜）即可使用，保存于棕色瓶中。 高氯酸铁溶液：称取硝酸铁25.0g，加入70%高氯酸50mL，缓缓加热，蒸发大量的高氯酸，直到有大量的黄色结晶析出，停止加热，冷却后即得高氯酸铁。再用500mL5mol/L高氯酸溶解，此溶液1mL含铁6.9mg。 氯标准溶液：准确称取于500℃～600℃灼烧过1h的基准氯化钠0.1649g溶于水中，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液为0.1mg/mL Cl-。再从中分取适量逐级稀释为10ug/mL Cl-备用。 仪器：722G分光光度计。 1.2 样品采集 根据盐碱土形成的地貌、地质环境特点，采样点布置在盐碱土分布广具有代表性的地段。样品采自20cm深度盐碱土，在采样点周围50米范围内采集3个子样组合成一个样品，以提高样品代表性。样品自然风干后，清理杂物，砸碎土

植物磷含量的测定钼锑抗比色法定稿版

植物磷含量的测定钼锑抗比色法精编W O R D 版 IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】

植物磷含量的测定（钼锑抗比色法） 一、实验目的 1．掌握钼锑抗比色法测定磷的方法。 2．练习实际测量以及定容的操作。 3．练习分光光度计的使用。 二、实验原理 植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸光光度法测定。 三、实验试剂 （1）2mol/LNaOH溶液 （2）0.2%二硝基酚指示剂 （3）0.5mol/LH2SO4硫酸溶液:28mL浓H2SO4加水稀释至1L。

（4）钼锑贮存溶液：量取153ml浓硫酸(分析纯，密度1.84g/ml)，缓缓加入到400ml蒸馏水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·H2O，分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入0.5％酒石酸锑钾[KSbOC4H4O6·1/2H2O，分析纯]溶液100ml，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1％，硫酸2.75mol/L。 （5）钼锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随配随用。 （6）5mg/L磷标准溶液：0.4394g在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。分析纯)，100ml 水，加5ml浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。 四、实验步骤 1、吸取定容过滤或澄清后的消煮液2.00～5.00ml(V2,含P5～30ug)于50ml容量瓶中,用水稀释至约20ml,加1～2滴二硝基酚指示剂,滴加2mol/LNaOH溶液中和至刚呈黄色,再加入1滴0.5mol/LH2SO4溶液,使溶液的黄色刚刚褪去呈淡黄色,然后加入钼锑抗显色剂5.00ml,摇匀,用水定容(V3)。在室温高于15℃的条件下放置30min后,用1cm光径比色槽在波长700nm处测定吸光度,以空白溶液为参比调节仪器零点。 2、校准曲线或直线回归方程:准确吸取ρ(P)=5mg/L标准工作溶液0,1,2,4,6,8ml,分别放入50mL容量瓶中,加水至20ml,同上步骤显色并定容,即得0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8mg/LP标准系列溶液,与待测液同时测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。

原子吸收分光光度法与紫外-可见分光光度法

1．试比较原子吸收分光光度法与紫外-可见分光光度法有哪些异同点？ 答：相同点：二者都为吸收光谱，吸收有选择性，主要测量溶液，定量公式：A=kc，仪器结构具有相似性． 不同点：原子吸收光谱法紫外――可见分光光度法 (1) 原子吸收分子吸收 (2) 线性光源连续光源 (3) 吸收线窄，光栅作色散元件吸收带宽，光栅或棱镜作色散元件 (4) 需要原子化装置(吸收池不同)无 (5) 背景常有影响，光源应调制 (6) 定量分析定性分析、定量分析 (7) 干扰较多，检出限较低干扰较少，检出限较低 2．试比较原子发射光谱法、原子吸收光谱法、原子荧光光谱法有哪些异同点？ 答：相同点：属于原子光谱，对应于原子的外层电子的跃迁；是线光谱，用共振线灵敏度高，均可用于定量分析． 不同点：原子发射光谱法原子吸收光谱法原子荧光光谱法 (1)原理发射原子线和离子线基态原子的吸收自由原子(光致发光) 发射光谱吸收光谱发射光谱 (2)测量信号发射谱线强度吸光度荧光强度 (3)定量公式lgR=lgA + blgc A=kc If=kc (4)光源作用不同使样品蒸发和激发线光源产生锐线连续光源或线光源 (5)入射光路和检测光路直线直线直角 (6)谱线数目可用原子线和原子线(少)原子线(少) 离子线(谱线多) (7)分析对象多元素同时测定单元素单元素、多元素 (8)应用可用作定性分析定量分析定量分析 (9)激发方式光源有原子化装置有原子化装置 (10)色散系统棱镜或光栅光栅可不需要色散装置 (但有滤光装置)

(11)干扰受温度影响严重温度影响较小受散射影响严重 (12)灵敏度高中高 (13)精密度稍差适中适中 按照电磁辐射的本质，光谱又可分为分子光谱和原子光谱。分子光谱是由于分子中电子能级变化而产生的。原子光谱可分为发射光谱、原子吸收光谱、原子荧光光谱和X- 射线以及X- 射线荧光光谱。前三种涉及原子外层电子跃迁，后两种涉及内层电子的跃迁。目前一般认为原子光谱仅包括前三种。原子发射光谱分析是基于光谱的发射现象；原子吸收光谱分析是基于对发射光谱的吸收现象；原子荧光光谱分析是基于被光致激发的原子的再发射现象。

分光光度法测定铁

实验1邻二氮菲 一、实验原理 邻二氮菲(phen)和Fe2+ 在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+ ，其lgK=21.3，κ 508=1.1×104 L·mol-1 ·cm-1 ，铁含量在0.1～6μg·mL-1 范围内遵守比尔定律。其吸收曲线如图1-1所示。显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+ 全部还原为Fe2+ ，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。有关反应如下： 2Fe3+ +2NH 2OH·HC1＝2Fe2+ +N 2↑+2H 2O+4H+ +2C1－

图1-1邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线 用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。 二、仪器和试剂 1．仪器721或722型分光光度计。 2．试剂 (1)0.1 mg·L-1 铁标准储备液准确称取0.702 0 g NH 4Fe(S0 4) 2·6H 20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H 2S0 4溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 (2)10-3 moL-1 铁标准溶液可用铁储备液稀释配制。 (3)100 g·L-1 盐酸羟胺水溶液用时现配。

(4)1.5 g·L-1 邻二氮菲水溶液避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。 (5)1.0 mol·L-1 叫乙酸钠溶液。 (6)0.1 mol·L-1 氢氧化钠溶液。 三、实验步骤 1．显色标准溶液的配制在序号为1～6的6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别加入0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.0 mL铁标准溶液(含铁0.1 g·L-1 )，分别加入1 mL 100 g·L-1 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1 乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。 2．吸收曲线的绘制在分光光度计上，用1 cm吸收池，以试剂空白溶液(1号)为参比，在440～560 nm之间，每隔10 nm测定一次待测溶液(5号)的吸光度A，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。 3．显色剂用量的确定在7只50 mL容量瓶中，各加2.0 mL 10-3 mol·L-1铁标准溶液和1.0 mL 100 g·L-1 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。分别加入0.2， 0.4，0.6，0.8，1.0，2.0，4.0 mL 1.5 g·L-1 邻二氮菲溶液，再各加5.0 mL 1.0 mol·L-1

植物磷含量的测定钼锑抗比色法

植物磷含量的测定钼锑 抗比色法 Document number【SA80SAB-SAA9SYT-SAATC-SA6UT-SA18】

植物磷含量的测定（钼锑抗比色法） 一、实验目的 1．掌握钼锑抗比色法测定磷的方法。 2．练习实际测量以及定容的操作。 3．练习分光光度计的使用。 二、实验原理 植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸光光度法测定。 三、实验试剂 （1）2mol/LNaOH溶液 （2）%二硝基酚指示剂 （3）LH2SO4硫酸溶液:28mL浓H2SO4加水稀释至1L。 （4）钼锑贮存溶液：量取153ml浓硫酸(分析纯，密度ml)，缓缓加入到 400ml蒸馏水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵 [(NH4)6Mo7O24·H2O，分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入％酒石酸锑钾 [KSbOC4H4O6·1/2H2O，分析纯]溶液100ml，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1％，硫酸L。 （5）钼锑抗显色剂：称取抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随配随用。 （6）5mg/L磷标准溶液：在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。分析纯)，100ml 水，加5ml浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为 5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。 四、实验步骤 1、吸取定容过滤或澄清后的消煮液～(V2,含P5～30ug)于50ml容量瓶中,用水稀释至约20ml,加1～2滴二硝基酚指示剂,滴加2mol/LNaOH溶液中和至刚呈黄色,再加入1滴LH2SO4溶液,使溶液的黄色刚刚褪去呈淡黄色,然后加入钼

原子吸收分光光度法原理

原子吸收分光光度法测定矿石中的铜 原子吸收光谱法基于从光源发出的被测元素的特征辐射通过样品蒸气时，被待测元素基态原子所吸收，由辐射的减弱程度求得样品中被测元素的含量。 在锐线光源条件下，光源的发射线通过一定厚度的原子蒸气，并被基态原子所吸收，吸光度与原子蒸气中待测元素的基态原子数间的关系遵循朗伯－比耳定律： A＝log I0/I ＝KLN 式中A为吸光度；I0为入射光强度；I为经过原子蒸气吸收后的透射光强度；K 为吸光系数，L为光波所经过的原子蒸气的光程长度，N为基态原子密度。 在火焰温度低于3000K的条件下，可以认为原子蒸气中基态原子的数目实际上接近于原子总数。特定的实验条件下，原子总数与试样浓度c B的比例是恒定的，所以，上式又可以写成： 这就是原子吸收分光光度法的定量基础。常用的定量方法为标准曲线法和标准加入法等。 原子吸收分光光度计主要组成部分包括光源、原子化器、分光系统和检测系统。

其光路如图32－1所示。 图32－1 原子吸收分光光度计光路图 1．空心阴极灯；2．火焰；3．入射狭缝；4．凹面反射镜；5．光栅；6．出射 狭缝；7．检测器 原子吸收分光光度计的光源用空心阴极灯，它是一种锐线光源。灯管由硬质玻璃制成，一端由石英或玻璃制成光学窗口，两根钨棒封入管内，一根连有由钛、锆、钽等有吸气性能金属制成的阳极，另一根上镶有一个圆筒形的空心阴极。筒内衬上或熔入被测元素，管内充有几百Pa低压载气，常用氖或氩气。当在阴阳两极间加上电压时，气体发生电离，带正电荷的气体离子在电场作用下轰击阴极，使阴极表面的金属离子溅射出来，金属原子与电子、惰性气体的原子及离子碰撞激发而发出辐射。最后，金属原子又扩散回阴极表面而重新沉积下来。通常，改变空心阴极灯的电流可以改变灯的发射强度。在忽略自吸收的前提下，其经验公式为I＝ai n，其中a、n均为常数，i为电流强度。n与阴极材料、灯内所充气体及谱线的性质有关。对于Ne、Ar等气体，n值在2～3之间，由此可见，灯的发光强度受灯电流的影响较大，影响吸光度值。

土壤总磷的测定碱熔-钼锑抗分光光度法(可编辑)

土壤总磷的测定碱熔-钼锑抗分光光度法（可编辑）土壤总磷的测定碱熔-钼锑抗分光光度法 中华人民共和国国家环境保护标准 HJ 632-2011土壤总磷的测定碱熔-钼锑抗分光光度法 Soil-Determination of Total Phosphorus by alkali fusion? Mo-Sb Anti spectrophotometric method 标准正在出版过程中,本电子文本为发布稿,内容供参考,标准内容以正式出 版 文本为准。2011-12-06发布 2012-03-01实施发布 环境保护部目次 前言. II 1 适用范围..1 2 规范性引用文件..1 3 方法原理..1 4 试剂和材料.1 5 仪器和设备.2 6 样品.2 7 分析步骤..3 8 结果计算与表示..3 9 精密度和准确度..4 10 质量保证和质量控制4 I 前言 为贯彻《中华人民共和国环境保护法》,保护环境,保障人体健康,规范土壤

中总磷的测 定方法,制定本标准。 本标准规定了测定土壤中总磷的碱熔-钼锑抗分光光度法。本标准为首次发布。 本标准由环境保护部科技标准司组织制订。 本标准主要起草单位:甘肃省环境监测中心站。本标准验证单位:河南省环境监测中心站、青海省环境监测中心站、兰州市 环境监测站、 金昌市环境监测站和兰州石化公司监测站。 本标准环境保护部 2011年 12 月 6 日批准。本标准自 2012 年 3 月 1 日起实施。 本标准由环境保护部解释。II 土壤总磷的测定碱熔-钼锑抗分光光度法 1 适用范围 本标准规定了测定土壤中总磷的碱熔-钼锑抗分光光度法。本标准适用于土壤中总磷的测定。 当试样量为 0.2500g,采用 30mm比色皿时,本方法的检出限为 10.0mg/kg, 测定下限为 40.0mg/kg。 2 规范性引用文件 本标准内容引用了下列文件或其中的条款。凡是不注明日期的引用文件,其有效版本适 用于本标准。 HJ 613土壤干物质和水分的测定重量法